Επανενεργοποίηση αναμνήσεων που προκαλούνται από τον ιππόκαμπο κατά τη διάρκεια της ενοποίησης για να διαταραχθεί ο φόβος Μέρος 2

Στη συνέχεια, αξιολογήσαμε τις μακροπρόθεσμες επιπτώσεις της χειραγώγησής μας. Τα παραπάνω ευρήματα αναπαράχθηκαν με παρόμοιο πειραματικό σχεδιασμό.

Αναμφισβήτητα, υπάρχει μια ισχυρή σύνδεση μεταξύ των μακροπρόθεσμων επιπτώσεων και της μνήμης. Από τη μία πλευρά, οι μακροπρόθεσμες επιπτώσεις μπορεί να έχουν βαθιές επιπτώσεις στη μνήμη και από την άλλη, η μνήμη μπορεί να επηρεάσει τις μακροπρόθεσμες επιπτώσεις μας.

Πρώτα απ 'όλα, ο μακροπρόθεσμος αντίκτυπος στη μνήμη αντανακλάται κυρίως σε δύο πτυχές: η μία είναι η επίδραση στις φυσιολογικές λειτουργίες των ανθρώπων και η άλλη είναι η επίδραση στην ψυχολογική κατάσταση των ανθρώπων.

Οι μακροπρόθεσμες επιπτώσεις μπορεί να επηρεάσουν τη φυσιολογία μας, όπως σε τομείς όπως η διατροφή, ο ύπνος και η άσκηση. Εάν ζούμε σε ένα ανθυγιεινό περιβάλλον για μεγάλο χρονικό διάστημα, όπως μη ισορροπημένη διατροφή, κακή ποιότητα ύπνου, μακροχρόνια έλλειψη άσκησης κ.λπ., αυτές οι μακροπρόθεσμες δυσμενείς επιπτώσεις θα αφήσουν μια συγκεκριμένη μνήμη στο σώμα μας, επηρεάζοντας έτσι τον εγκέφαλό μας δραστηριότητα και μνήμη.

Ταυτόχρονα, μακροπρόθεσμες επιπτώσεις θα επηρεάσουν και την ψυχική μας κατάσταση, όπως η υπερβολική ένταση, το άγχος και το στρες, που θα βλάψουν τη μνήμη μας.

Η μακροπρόθεσμη επίδραση της μνήμης είναι επίσης πολύ σημαντική. Μια καλή μνήμη μπορεί να μας δώσει μεγαλύτερη διαύγεια, ανεξαρτησία και αυτοπεποίθηση, δίνοντάς μας μεγαλύτερο έλεγχο στη ζωή μας και μακροπρόθεσμες συνέπειες. Μπορεί να μας βοηθήσει να προσαρμόσουμε καλύτερα την κατάστασή μας, μειώνοντας έτσι το άγχος, το άγχος και άλλους δυσμενείς παράγοντες, βελτιώνοντας την ικανότητά μας να αντιστεκόμαστε στην απογοήτευση και ενισχύοντας την ικανότητά μας να προσαρμοστούμε.

Ως εκ τούτου, θα πρέπει να δίνουμε προσοχή στον αντίκτυπο των μακροπρόθεσμων επιπτώσεων σε εμάς στην καθημερινή μας ζωή, να προσέχουμε την υγεία και την καλή ψυχική κατάσταση και να καλλιεργούμε υγιεινές συνήθειες διαβίωσης και καλή προσαρμοστικότητα, να παίζουμε πλήρως στη μνήμη μας και να αντιμετωπίζουμε καλύτερα μακροπρόθεσμες επιπτώσεις, να επιτύχει από μόνη της σημαντική ανάπτυξη. Μπορεί να φανεί ότι πρέπει να βελτιώσουμε τη μνήμη και το Cistanche deserticola μπορεί να βελτιώσει σημαντικά τη μνήμη, επειδή το Cistanche deserticola μπορεί επίσης να ρυθμίσει την ισορροπία των νευροδιαβιβαστών, όπως η αύξηση των επιπέδων ακετυλοχολίνης και αυξητικών παραγόντων. Αυτές οι ουσίες είναι πολύ σημαντικές για τη μνήμη και τη μάθηση. Επιπλέον, το Cistanche deserticola μπορεί επίσης να βελτιώσει τη ροή του αίματος και να προωθήσει την παροχή οξυγόνου, η οποία μπορεί να εξασφαλίσει ότι ο εγκέφαλος λαμβάνει επαρκή θρεπτικά συστατικά και ενέργεια, βελτιώνοντας έτσι τη ζωτικότητα και την αντοχή του εγκεφάλου.

Κάντε κλικ στο Μάθετε τρόπους για να βελτιώσετε τη λειτουργία του εγκεφάλου

Ωστόσο, αντί να δώσουμε σε ποντίκια ένα τεστ αποκατάστασης μετά από άμεσο σοκ, αφήσαμε τα ποντίκια ανενόχλητα στο κλουβί του σπιτιού τους για 2 εβδομάδες μετά την εξαφάνιση και στη συνέχεια τους κάναμε ένα τεστ για τον φόβο αυθόρμητης ανάρρωσης (Εικ. 1n).

Είκοσι τέσσερις ώρες μετά την προετοιμασία του φόβου (Εικ.1o), κατά την ανάκληση, τόσο οι θετικές όσο και οι ουδέτερες ομάδες ChR2 πάγωσαν λιγότερο στο τελευταίο μισό της συνεδρίας σε σύγκριση με τους ελέγχους eYFP (Εικ. 1p). Δεν είδαμε ομαδικές διαφορές κατά την εξαφάνιση (Εικ. 1q και Συμπληρωματικό Σχ. 1γ).

Σε συμφωνία με τα αποτελέσματα που παρατηρήθηκαν κατά την ανάκληση, το τεστ αυθόρμητης ανάκτησης αποκάλυψε ότι τόσο τα θετικά όσο και τα ποντίκια με ουδέτερο ChR2 πάγωσαν λιγότερο σε σύγκριση με τους μάρτυρες eYFP και σε σύγκριση με την ομάδα αρνητικού Chr2, δείχνοντας ότι ο χειρισμός μας παρήγαγε διαρκή αποτελέσματα στις διαδικασίες ανάκτησης μνήμης φόβου, εμφανείς δύο εβδομάδες μετά την εξαφάνιση (Εικ. 1r, s).

Είναι σημαντικό ότι δείξαμε ότι οι μειώσεις στο πάγωμα που παρατηρήθηκαν μετά την προσθήκη ετικετών και η διέγερση μιας θετικής μνήμης, δεν μπορούν να αποδοθούν αποκλειστικά στην ιική ένεση ή στην ελαφριά διέγερση μόνο. Συγκεκριμένα, διαπιστώσαμε ότι η επανενεργοποίηση μιας επισημασμένης θετικής μνήμης (γυναικεία έκθεση) (Συμπληρωματικό Σχήμα 3α), αφού τα ποντίκια ήταν FC για να παρουσιάσουν αυξημένη κατάψυξη μετά το σοκ (Συμπληρωματικό Σχήμα 3b, c), είχε ως αποτέλεσμα λιγότερο πάγωμα μόνο σε ποντίκια ChR2 που έλαβαν διέγερση λέιζερ .

Αυτό ήταν σε σύγκριση με τα ποντίκια ChR2 που δεν έλαβαν διέγερση, τα ποντίκια eYFP που έλαβαν διέγερση και την ομάδα χωρίς ιό/χωρίς λέιζερ. Αυτό ίσχυε κατά την ανάκληση (Συμπληρωματικό Σχ. 3δ), την πρώτη ημέρα της εξαφάνισης και κατά τα πρώτα 3 λεπτά της εξαφάνισης (Συμπληρωματικό Σχ. 3ε, στ). Όπως ήταν αναμενόμενο, δεν είδαμε διαφορές στην ομάδα κατά τη διάρκεια του άμεσου σοκ (Συμπληρωματικό Σχ. 3g) αλλά είδαμε σημαντική μείωση στην κατάψυξη στην ομάδα ChR2-Laser On σε σύγκριση με όλες τις άλλες ομάδες κατά την επαναφορά (Συμπληρωματικό Σχήμα 3h, I).

Επιπλέον, αυτό το αποτέλεσμα ήταν παρόν μόνο όταν τα ποντίκια έλαβαν τεχνητή επανενεργοποίηση μιας μνήμης με ετικέτα στο πλαίσιο του FC (Συμπληρωματικό Σχ. 4α). Στη συνέχεια, επισημάναμε μια θετική μνήμη (γυναικεία έκθεση) και στη συνέχεια ποντίκια FC που παρουσίασαν κατάψυξη μετά τον σοκ (Συμπληρωματικό Σχήμα 4β).

Όταν αυτή η μνήμη επανενεργοποιήθηκε σε ένα νέο πλαίσιο και τα ποντίκια επέστρεψαν στο περιβάλλον προετοιμασίας 24 ώρες αργότερα, η κατάψυξη δεν μειώθηκε στην ομάδα ChR2 κατά την ανάκληση (Συμπληρωματικό Σχήμα 4γ).

Η κατάψυξη παρέμεινε παρόμοια με τους ελέγχους eYFP καθ' όλη τη διάρκεια της εξαφάνισης και της αποκατάστασης (Συμπληρωματικό Σχήμα 4δ, ε). Αυτά τα ευρήματα παρέχουν ενδείξεις ότι η χειραγώγησή μας λαμβάνει χώρα μέσω της επανένωσης, καθώς είναι ειδικά όταν τα ποντίκια βιώνουν φυσική ανάκληση της μνήμης του φόβου, η οποία σε αυτή την περίπτωση, υποκινείται από την έκθεση στο περιβάλλον της προετοιμασίας.

Σημασία έχει το σθένος: Η τεχνητή επανενεργοποίηση μιας ουδέτερης εμπειρίας στο σπίτι κατά τη διάρκεια της επανασύνδεσης δεν είναι αρκετή για να διαταραχθεί η μνήμη φόβου

Τα παραπάνω αποτελέσματα δείχνουν ότι η παρεμβολή του ιππόκαμπου που προκύπτει από την επανενεργοποίηση θετικών ή ουδέτερων εγγραμμάτων είναι πιο αποτελεσματική στη μείωση του εξαρτημένου φόβου από τα εγγράμματα που σχετίζονται με μια αρνητική εμπειρία.

Για να μετρήσουμε περαιτέρω τη σημασία του σθένους, πρώτα, δοκιμάσαμε εάν η νέα εμπειρία καθαρού κλουβιού ήταν πράγματι «ουδέτερη», αντί θετική ή αρνητική, δεδομένου ότι τα νέα ερεθίσματα μπορούν να εμπλέκουν μια σύνθετη προσέγγιση και αποφυγή ντοπαμινεργικών οδών που σχετίζονται με την υπεροχή, την ανταμοιβή και τη νεοφοβία48 –52. Ως εκ τούτου, για το ουδέτερο στοιχείο του επόμενου πειράματος, χρησιμοποιήσαμε αντί αυτού ένα οικιακό κλουβί38, όπου τα ποντίκια έμειναν ανενόχλητα.

Δεύτερον, ρωτήσαμε εάν μια ξεχωριστή θετική εμπειρία που δεν περιελάμβανε γυναικεία έκθεση ήταν αρκετή για να μειώσει τον φόβο. Ως εκ τούτου, χρησιμοποιήσαμε την οξεία έκθεση σε κοκαΐνη53 ως την επόμενη θετική μας εμπειρία. Τέλος, αποδυναμώθηκε εάν η αδυναμία μείωσης του παγώματος μέσω διέγερσης ενός αρνητικού γραμμαρίου κατά την ανάκληση μνήμης φόβου ήταν το αποτέλεσμα αυτών των αναμνήσεων που επικαλύπτονται.

Για να το ελέγξουμε αυτό, επισημάναμε τα κύτταρα dDG ενεργά όταν τα ποντίκια ήταν FC στο πλαίσιο C ως την επόμενη αρνητική μας εμπειρία καθώς αυτό το παρεμβολικό διάγραμμα θα αποτελείται θεωρητικά από μερικά από τα ίδια κύτταρα όπως η μνήμη φόβου που αποκτήθηκε στο πλαίσιο Α λόγω γενίκευσης. Για να απαντήσουμε σε αυτές τις ερωτήσεις, άνοιξε ξανά ένα παράθυρο επισήμανσης DOX και επισήμανε μια θετική, ουδέτερη ή αρνητική μνήμη στο thedDG (Εικ. 2α).

Τα ποντίκια που είχαν εκχωρηθεί σε αρνητικές ομάδες ήταν αρχικά FC incontext C που έδειξε σημαντική κατάψυξη μετά το σοκ (Εικ. 2b). Την επόμενη ημέρα ήταν FC όπως πριν στο πλαίσιο Α. Ποντίκια FC την προηγούμενη ημέρα παρουσίασαν υψηλότερο πάγωμα από τις άλλες ομάδες πριν και μετά τον σοκ (Εικ. 2γ). Κατά τη διάρκεια της ανάκλησης, τα αρνητικά ποντίκια ChR2 συνέχισαν να παρουσιάζουν μεγαλύτερη κατάψυξη σε σύγκριση με άλλες ομάδες ChR2 (Εικ. 2δ), η οποία παρατηρήθηκε σε όλη τη διάρκεια της συνεδρίας.

Ωστόσο, δεν υπήρξαν μειώσεις σε πραγματικό χρόνο στο πάγωμα σε καμία από τις ομάδες ChR2-, σε σύγκριση με τους αντίστοιχους eYFP σε οποιοδήποτε μέρος της περιόδου λειτουργίας ανάκλησης (Εικ. 2δ). Δεν παρατηρήθηκαν διαφορές στην ομάδα κατά τη διάρκεια της εξαφάνισης (Εικ. 2e και Συμπληρωματικό Σχήμα 1δ) ούτε άμεσο σοκ (Εικ. 2στ).

Η οπτική διέγερση της μνήμης του οικιακού κλωβού δεν ήταν επαρκής για να ανταγωνιστεί τη μνήμη φόβου, δεδομένου ότι κατά την επαναφορά, παρατηρήσαμε ότι μόνο τα θετικά ποντίκια ChR2 παρουσίασαν μικρότερη κατάψυξη σε σύγκριση με τους ελέγχους eYFP και τις αρνητικές ομάδες (Εικ. 2g). Τα αρνητικά-ChR2 ποντίκια επέδειξαν ίσους ελέγχους κατάψυξης (Εικ. 2g, h).

Αυτά τα αποτελέσματα επιβεβαιώνουν τα προηγούμενα ευρήματά μας που δείχνουν ότι η οπτική διέγερση μιας ανταγωνιστικής θετικής μνήμης, αλλά όχι μιας ουδέτερης ή αρνητικής μνήμης, είναι αρκετή για να διαταράξει την επανέδραση του φόβου.

Η μείωση της κατάψυξης που παρατηρήθηκε δεν οφείλεται σε αύξηση της κίνησης

Σε μια ξεχωριστή κοόρτη ποντικών, τα κύτταρα dDG που εμπλέκονται στην κωδικοποίηση μιας οξείας έκθεσης σε κοκαΐνη επισημάνθηκαν με το DOX (Εικ. 2i). Την επόμενη μέρα, για να αξιολογήσουμε εάν η ενεργοποίηση ενός εγγράμματος κοκαΐνης θα προκαλούσε υπερκινητική δραστηριότητα, δοκιμάσαμε ποντίκια στο ανοιχτό πεδίο όπου ενεργοποιήσαμε ξανά το έγγραμμα κοκαΐνης στα τελευταία 5 λεπτά της δοκιμής των 10 λεπτών.

Δεν βρήκαμε ομαδικές διαφορές στον συνολικό αριθμό διασταυρώσεων γραμμής (Εικ. 2j), στην απόσταση που διανύθηκε (Εικ. 2k) ή στην ταχύτητα (Εικ. 2l) που υποδηλώνουν ότι οι μειώσεις στο πάγωμα που παρατηρήθηκαν στο προηγούμενο πείραμα δεν οφείλονταν σε αυξημένη κίνηση.

Επιπλέον, ο χρόνος που δαπανήθηκε στην κεντρική περιοχή αποκάλυψε διαφορές σε καμία ομάδα (Εικ. 2m) υποδηλώνοντας ότι η τεχνητή ενεργοποίηση της μνήμης που σχετίζεται με την ακοκαϊνη δεν είναι ούτε αγχογονική ούτε αγχολυτική.

Τα ποντίκια θα εκτελέσουν μια λειτουργική απόκριση για την τεχνητή επανενεργοποίηση μιας θετικής μνήμης

Ενώ ο ιππόκαμπος εμπλέκεται στην επεξεργασία θετικών εμπειριών, πιστεύεται ότι το κάνει σε συνεννόηση με διάφορες περιοχές που εμπλέκονται στη νευροτροποποίηση, συμπεριλαμβανομένης της κοιλιακής τετηγματικής περιοχής (VTA).

Το VTA είναι ένα κρίσιμο συστατικό του συστήματος ανταμοιβής του εγκεφάλου και οι αρνητικές συναισθηματικές καταστάσεις (π.χ. άγχος) διαμεσολαβούνται από τη δυσρύθμιση του VTA. Είναι καλά τεκμηριωμένο ότι η ενδοκρανιακή αυτοδιέγερση (ICSS) του VTA ανταμείβει δυναμικά τη χειρουργική συμπεριφορά, όπου τα τρωκτικά διατηρούν την παροχή ηλεκτρικών ερεθισμάτων με αποτέλεσμα την απελευθέρωση ντοπαμίνης54,55.

Αυτή η διαδικασία έχει προηγουμένως προσαρμοστεί56-61 για να ενσωματώνει στη νινοοπτογενετική διέγερση ντοπαμινεργικών νευρώνων στο VTA. Για να επαναδραστηριοποιηθούν τα κύτταρα dDG που είναι ενεργά κατά τη διάρκεια αυτής της θετικής εμπειρίας, εκφράσαμε επιλεκτικά το ChR2 σε ντοπαμινεργικά κύτταρα VTA χρησιμοποιώντας διαγονιδιακά ποντίκια που εκφράζουν το Cre υπό τον έλεγχο του μεταφορέα ντοπαμίνης (DAT).

Ενέσαμε τους ιικούς μας φορείς AAV5-Ef1a-DIO-(hChR2-E123A)-eYFP και εμφυτεύσαμε μια οπτική ίνα μονομερώς στο VTA. Κάναμε επίσης ένεση c-Fos-tTA-TRE-(ChR2)-eYFP και εμφυτεύσαμε οπτικές ίνες αμφίπλευρα με στόχο το dDG (Εικ. 3a). Τα ποντίκια εξοικειώθηκαν αρχικά στον θάλαμο χειριστή και είχαν πρόσβαση σε έναν τροχό χωρίς συνέπειες, ο οποίος χρησίμευσε ως βασικό μέτρο.

Την επόμενη μέρα, τα ποντίκια τοποθετήθηκαν ξανά στο κουτί του χειριστή και εισήχθησαν δύο θύρες μύτης, μία ενεργή και μία ανενεργή. Η μύτη εισχωρεί στην ενεργή θύρα παρήγαγε οπτογενετική διέγερση VTA, ενώ η μύτη στην ανενεργή θύρα δεν παρήγαγε καμία διέγερση και χρησίμευε ως διακριτικός έλεγχος. Τα ποντίκια έλαβαν τρεις εκπαιδευτικές συνεδρίες ICSS και στη συνέχεια απομάκρυναν το DOX.

Επιστράφηκαν για μια τέταρτη προπόνηση, στην οποία επισημάνθηκαν τα κύτταρα dDG που ανταποκρίνονται στην αυτοδιέγερση VTA. Την επόμενη ημέρα, η πρόσβαση στις θύρες μύτης περιορίστηκε και οι περιστροφές των τροχών παρήγαγαν οπτική διέγερση dDG για την επανενεργοποίηση του εγγράμματος αυτοδιέγερσης VTA. Αυτό έγινε για να εκτιμηθεί εάν τα ποντίκια θα εκτελούσαν μια λειτουργική απόκριση για ένα θετικό (VTA-ChR2, dDG-ChR2) ή ουδέτερη (VTA-eYFP,dDG-ChR2) εμπειρία σε σύγκριση με μάρτυρες dDG-eYFP (Εικ. 3α).

Τα ποντίκια που εγχύθηκαν με ChR2 στο VTA, τα χτυπήματα της μύτης στην ενεργή θύρα ήταν σημαντικά υψηλότερα από την ανενεργή θύρα και αύξησαν σε όλες τις συνεδρίες, αποδεικνύοντας την ικανότητα των ποντικιών να κάνουν διάκριση μεταξύ των θυρών και να παρέχουν οπτική διέγερση για ανταμοιβή (Εικ. 3β–ε). Συγκρίνοντας τα βασικά μέτρα του τροχού με την εκπαίδευση και τη δοκιμή, τα ποντίκια στα οποία έγινε ένεση ChR2 στο VTA και στο dDG, ολοκλήρωσαν περισσότερες περιστροφές τροχών, οι οποίες διατηρήθηκαν σε κίνηση για μεγαλύτερες διάρκειες και αποστάσεις (Εικ. 3f–h) και παρήγαγαν περισσότερα ερεθίσματα (Εικ. 3i) σε σύγκριση με όλες τις άλλες ομάδες.

Αυτό το εύρημα δείχνει ότι τα ποντίκια θα εκτελέσουν μια λειτουργική απόκριση για να διατηρήσουν την τεχνητή επανενεργοποίηση μιας θετικής μνήμης, συγκεκριμένα τη μνήμη της αυτοδιέγερσης VTA. Τα ποντίκια σημείωσαν αυτή τη συμπεριφορά για μια ανάμνηση της έκθεσης στο πλαίσιο χειριστή απουσία διέγερσης VTA. Μετά από αυτό το τεστ, τα ποντίκια υποβλήθηκαν στο ίδιο πειραματικό πρωτόκολλο όπως και πριν, όπου ήταν FC στο πλαίσιο όπου έδειξαν κατάψυξη μετά το σοκ (Εικ. 3j και Συμπληρωματικό Σχήμα 1e) και στη συνέχεια υποβλήθηκαν σε δοκιμή ανάκλησης μνήμης φόβου.

Η επανενεργοποίηση του εγγράμματος αυτοδιέγερσης VTA (VCDC) κατά τη διάρκεια της ανάκλησης μείωσε το πάγωμα καθ' όλη τη διάρκεια της συνεδρίας (Εικ. 3κ). Τα επίπεδα παρέμειναν χαμηλά καθ' όλη τη διάρκεια της εξάλειψης (Εικ. 3l και Συμπληρωματικό Σχ. 1e), το άμεσο σοκ (Εικ. 3m) και την επαναφορά (Εικ. 3n).

Είναι ενδιαφέρον ότι μεταξύ των δύο ομάδων dDG-eYFP, η ομάδα που είχε λάβει διέγερση VTA νωρίτερα (VCDE) έδειξε μια ευεργετική επίδραση αυτής της εμπειρίας, παρουσιάζοντας ενδιάμεσα επίπεδα κατάψυξης σε σύγκριση με την ομάδα VCDC και τις άλλες ομάδες ελέγχου στο EXT1 (Εικ. 31) και από άμεσο σοκ στην κατάσταση (Εικ. 3o). Μαζί, αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η παρέμβαση από μια ανταποδοτική εμπειρία μπορεί να εξουδετερώσει τις αρνητικές συναισθηματικές καταστάσεις.

Η ενεργοποίηση τυχαία επισημασμένων νευρώνων dDG είναι επίσης επαρκής για να προωθήσει την επανέδραση του φόβου

Στη συνέχεια, ρωτήσαμε εάν η τεχνητή επανενεργοποίηση μιας θετικής μνήμης, η οποία περιλαμβάνει διέγερση ενός μικρού συνόλου νευρώνων (<10%)38, can update a fear memory during reconsolidation, could we circumvent the positive-valence prerequisite to achieve a similar effect if we activate a larger population of neurons not necessarily tied to memory? 

Σε αντίθεση με προηγούμενα πειράματα, όπου χρησιμοποιήσαμε μια επαγώμενη από cFos στρατηγική επισήμανσης για να επισημάνουμε κύτταρα που εμπλέκονται σε διαφορετικές εμπειρίες, εδώ, χρησιμοποιήσαμε ιό με συστατικό προαγωγέα (CaMKIIa) για να επισημάνουμε τυχαία τους dDGneurons με ChR2 (Εικ. 4a).

Τα ποντίκια ενέθηκαν είτε με αδιάλυτο αραιωμένο ιό για να επισημανθεί ένα μεγάλο ποσοστό ή ένα κλάσμα κυττάρων dDG, αντίστοιχα. Τα ποντίκια παρουσίασαν κατάψυξη μετά το σοκ αφού ήταν FC (Εικ. 4β και Συμπληρωματικό Σχήμα 1στ).

Κατά την ανάκληση την επόμενη μέρα, οι επισημασμένοι νευρώνες διεγέρθηκαν οπτικά. Κατά τη διάρκεια του πρώτου μισού της διατριβής, είδαμε μειώσεις σε πραγματικό χρόνο στην κατάψυξη και στις δύο ομάδες μη αραιωμένων και αραιωμένων-ChR2, αλλά στο δεύτερο μισό, μόνο οι μη αραιωμένες ομάδες παρουσίασαν λιγότερη κατάψυξη (Εικ. 4γ).

Η ομάδα μη αραιωμένης-ChR2 συνέχισε να παρουσιάζει λιγότερη κατάψυξη καθ' όλη τη διάρκεια της εξάλειψης (EXT1 & EXT2) (Εικ. 4δ) και τόσο οι μη αραιωμένες όσο και οι αραιωμένες ομάδες ChR2 πάγωσαν λιγότερο από τις ομάδες eYFP κατά τη διάρκεια των πρώτων 3 λεπτών του EXT1 (Συμπληρωματικό Σχήμα 1f).

Όπως ήταν αναμενόμενο, δεν υπήρχαν διαφορές στην ομάδα κατά τη διάρκεια του άμεσου σοκ (Εικ. 4e). Κατά την επαναφορά, παρατηρήσαμε μειωμένη κατάψυξη και στις δύο ομάδες μη αραιωμένων και αραιωμένων-ChR2 σε σύγκριση με τους μάρτυρες eYFP (Εικ. 4στ) και σε σύγκριση με το άμεσο σοκ (Εικ. 4g).

Τα αποτελέσματά μας ήταν μεγαλύτερα στην αδιάλυτη ομάδα, υποδηλώνοντας ότι οι διαδικασίες που βασίζονται στην επανασύνδεση μπορούν δυνητικά να εμπλακούν με την ενεργοποίηση συνόλων που δεν συνδέονται με ένα έγγραμμα συγκεκριμένου σθένους εάν ενεργοποιηθούν αρκετά κύτταρα. Αυτή η στρατηγική διαμόρφωσης μνήμης μπορεί να είναι παρόμοια με πρωτόκολλα διέγερσης που είναι επί του παρόντος εγκεκριμένα για χρήση σε ανθρώπους62,63.

For more information:1950477648nn@gmail.com