Νευροπροστασία του Ν-βενζυλοεικοσαπενταεναμιδίου σε νεογνά ποντίκια μετά από υποξικό-ισχαιμικό τραυματισμό του εγκεφάλου

Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Αφηρημένη:

Μάκα(Lepidium meyenii) έχει αναδειχθεί ως δημοφιλής λειτουργική φυτική τροφή λόγω των φαρμακευτικών ιδιοτήτων και της θρεπτικής του αξίας.Μακάμηδες, όπως τα αποκλειστικά ενεργά συστατικά που βρίσκονται σεμακα, είναι μια μοναδική σειρά μη πολικών, μακράς αλυσίδας λιπαρών οξέων Ν-βενζυλ αμιδίων με πολλαπλές βιοδραστηριότητες όπως χαρακτηριστικά κατά της κόπωσης και βελτίωση της αναπαραγωγικής υγείας. Σε αυτή τη μελέτη, ένα νέο είδος μεγιστοποίησης, το Ν-βενζυλ εικοσαπενταεναμίδιο (NB-EPA), αναγνωρίστηκε απόμακα. Διερευνούμε περαιτέρω τον πιθανό νευροπροστατευτικό του ρόλο στην υποξική-ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη. Τα ευρήματά μας έδειξαν ότι η θεραπεία με βιοσυνθετικό NB-EPA μειώνει σημαντικά το μέγεθος του εγκεφαλικού εμφράγματος και βελτιώνει τις νευροσυμπεριφορικές διαταραχές μετά από υποξική-ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη σε νεογνά ποντίκια. Το NB-EPA ανέστειλε την απόπτωση των νευρωνικών κυττάρων μετά από ισχαιμική πρόκληση. Το NB-EPA βελτίωσε την επιβίωση και τον πολλαπλασιασμό των νευρωνικών κυττάρων μέσω της ενεργοποίησης της φωσφορυλιωμένης σηματοδότησης AKT. Αξίζει να σημειωθεί ότι η προστατευτική ιδιότητα του NB-EPA έναντι της ισχαιμικής νευρωνικής βλάβης εξαρτιόταν από την καταστολή της οδού p53-PUMA. Συνολικά, αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν ότι το NB-EPA μπορεί να αντιπροσωπεύει ένα νέο νευροπροστατευτικό για νεογνά με υποξική-ισχαιμική εγκεφαλοπάθεια.

Λέξεις-κλειδιά:μακα; Ν-βενζυλ εικοσαπενταεναμίδιο; νεογνική υποξική-ισχαιμική εγκεφαλοπάθεια; νευροπροστασία? ΠΟΥΜΑ

1. Εισαγωγή

Η νεογνική υποξική-ισχαιμική εγκεφαλοπάθεια (HIE) είναι μια κοινή αιτία εγκεφαλικής βλάβης λόγω στέρησης οξυγόνου και μείωσης της ροής του αίματος [1,2]. Το HIE είναι εξαιρετικά απεχθής στην ανάπτυξη του εγκεφάλου, ο οποίος είναι ο κύριος παράγοντας που προκαλεί νευρολογική δυσλειτουργία στα παιδιά [3]. Οι πιο κοινές συνέπειες του HIE περιλαμβάνουν την εγκεφαλική παράλυση, τη σοβαρή γνωστική έκπτωση και τα κινητικά και συμπεριφορικά ελλείμματα, με αποτέλεσμα εκατομμύρια νεογνικούς θανάτους ή μακροχρόνιες αναπηρίες κάθε χρόνο [4]. Η θεραπευτική υποθερμία είναι η κλινικά κοινή θεραπεία για νεογνικούς ασθενείς με HIE και έχει αποδειχθεί ότι βελτιώνει τα νευρολογικά αποτελέσματα σε επιζώντες [5]. Ωστόσο, μόνο η χρήση της θεραπείας της υποθερμίας δεν αρκεί για τη μείωση της θνησιμότητας ή την αποφυγή σοβαρών νευροαναπτυξιακών διαταραχών σε σοβαρή HIE [6]. Παρά τις σημαντικές προόδους στη σύγχρονη ιατρική τεχνολογία, δεν υπάρχει αποτελεσματική ιατρική θεραπεία για νευρική βλάβη που προκαλείται από HIE [7]. Η νευροπροστατευτική θεραπεία έχει μεγάλη σημασία για τη μακροπρόθεσμη αποκατάσταση της εγκεφαλικής λειτουργίας [8]. Ως εκ τούτου, είναι απαραίτητο να αναπτυχθούν ασφαλή και αποτελεσματικά νευροπροστατευτικά θεραπευτικά μέσα.

πού μπορώ να αγοράσω φλοιό κιστάνι

Μάκα(Lepidium meyenii) είναι ένα ετήσιο ή διετές βότανο της οικογένειας των σταυρανθών της Νότιας Αμερικής, το οποίο ταξινομήθηκε ως νέα τροφή το 2011 [9,10]. Μια ποικιλία συστατικών με φαρμακολογικές και θρεπτικές επιδράσεις έχει εντοπιστεί στη μάκα, η οποία περιλαμβάνει πολυσακχαρίτες, φυτοστερόλες, αλκαλοειδή, γλυκοσινολικά, μακαίνια καιμακαμίδες[11,12]. Μεταξύ αυτών των βιοδραστικών συστατικών, τα μακαμίδια, μια ομάδα μη πολικών ενώσεων Ν-βενζυλοαμιδίου λιπαρών οξέων μακράς αλυσίδας, αναγνωρίστηκαν ως τα χαρακτηριστικά συστατικά ενώ συνεισέφεραν στις κύριες αποτελεσματικότητες στη μάκα, όπως η καταπολέμηση της κόπωσης, η αντιοστεοπόρωση και η βελτίωση της γονιμότητας [13. –15]. Τα μακαμίδια και τα συνθετικά τους ανάλογα έχουν πρόσφατα αναφερθεί ότι εμφανίζουν διακριτή ανασταλτική δράση της αμιδικής υδρολάσης λιπαρών οξέων (FAAH), γεγονός που υποδηλώνει ότι αυτές οι ενώσεις διαθέτουν πιθανές νευροπροστατευτικές και αντιφλεγμονώδεις δράσεις [16,17].

cistanche tubulosa

Στην παρούσα μελέτη, ένα νέο είδος μεγιστοποιημένου Ν-βενζυλοεικοσαπενταεναμιδίου (NB EPA) έχει αναγνωριστεί απόμακα. Διερευνούμε περαιτέρω τις βιολογικές του δραστηριότητες στην υποξική-ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη. Τα ευρήματά μας έδειξαν ότι το NB-EPA βελτιώνει σημαντικά την προκαλούμενη από HI νεογνική εγκεφαλική βλάβη μέσω της βελτίωσης του εγκεφαλικού εμφράγματος και των διαταραχών συμπεριφοράς. Συγκεκριμένα, η νευροπροστατευτική επίδραση του NB-EPA στην επιβίωση του ισχαιμικού νευρώνα εξαρτιόταν από την καταστολή της οδού σηματοδότησης p53-PUMA.

2. Αποτελέσματα

2.1. Ταυτοποίηση και Σύνθεση Ν-βενζυλοεικοσαπενταεναμιδίου

Μακάμηδεςείναι μια κατηγορία αμιδικών αλκαλοειδών που σχηματίζονται από βενζυλαμίνη και ένα τμήμα λιπαρών οξέων, τα οποία θεωρούνται οι χαρακτηριστικές ενώσεις-δείκτες τουμακα. Εδώ, εντοπίσαμε μια νέα μεγιστοποίηση, NB-EPA (μοριακός τύπος C27H37NO), από τη maca. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 1Α, υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης με φασματομετρία μάζας ιονισμού ηλεκτροψεκασμού (HPLC-ESI-MS/MS) εμφάνισε δύο κορυφές που καταγράφηκαν στο συνολικό χρωματογράφημα ιόντων m/z 392,3 με χρόνους κατακράτησης 7.{{1 0}} λεπτά και 9.0 λεπτά, αντίστοιχα. Το φάσμα MS/MS έδειξε ότι οι πληροφορίες θραυσμάτων της κορυφής με χρόνο κατακράτησης 7,0 λεπτών ήταν σύμφωνες με θεωρητικά θραύσματα του NB-EPA (Σχήμα 1Β). Η κύρια κορυφή ιόντων θραύσματος που ανιχνεύθηκε από αυτό το νέο μακαμίδιο ήταν m/z 91,1, που αντιστοιχεί στο βενζύλιο [C7H7] συν. Οι κορυφές ιόντων θραύσματος MS/MS στην πλευρά του λιπαρού οξέος ήταν σύμφωνες με τα αναφερόμενα δεδομένα MS/MS του εικοσαπεντανοϊκού οξέος στο Εθνικό Ινστιτούτο Προτύπων και Τεχνολογίας (NIST) Chemistry WebBook (SRD 69).

Λόγω της χαμηλής περιεκτικότητας σε NB-EPA σεμακα, στη συνέχεια συνθέσαμε NB-EPA χρησιμοποιώντας τη μέθοδο συμπύκνωσης καρβοδιιμιδίου. Το παρασκευαζόμενο μίγμα καθαρίστηκε με ένα ημι-παρασκευαστικό σύστημα HPLC. Το κλάσμα με χρόνο κατακράτησης από 23,5 έως 25,5 λεπτά συλλέχθηκε και η καθαρότητα του συλλεγόμενου κλάσματος έφτασε το 98,2 τοις εκατό (Εικόνα 1C, D). Η ανάλυση HPLC-MS/MS έδειξε ότι το βιοσυνθετικό NB-EPA και το φυσικό NB-EPA είχαν πανομοιότυπα χαρακτηριστικά χρωματογραφικού διαχωρισμού και πληροφορίες δευτερεύοντος θραύσματος φασματομετρίας μάζας (Εικόνα 1E–G). Μαζί, αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν ότι ένα νέομακαμίδιοNB-EPA ταυτοποιήθηκε απόμακακαι συντέθηκαν με επιτυχία.

2.2. Το NB-EPA μειώνει τους όγκους εμφράγματος και τα νευροσυμπεριφορικά ελλείμματα σε νεογνική εγκεφαλική βλάβη

Στη συνέχεια, ερευνήσαμε τη βιοδραστικότητα του NB-EPA σε νεογνά ποντίκια μετά από υποξική-ισχαιμική (HI) εγκεφαλική βλάβη. Οι εικόνες της εμφάνισης του εγκεφάλου έδειξαν ότι ο ισχαιμικός εγκεφαλικός ιστός έγινε λευκός και διογκώθηκε στην ομάδα φορέα τις ημέρες 1, 3, 7 και 14 μετά το HI (Εικόνα 2Α). Αντίθετα, η χορήγηση ΝΒ-ΕΡΑ σε δόση 250 μg/ημέρα για 3 ημέρες ανακούφισε σημαντικά το οίδημα του εγκεφάλου και την περιεκτικότητα σε νερό του εγκεφάλου (Εικόνα 2Α, Β). Η χρώση με χλωριούχο 2,3,5-τριφαινυλτετραζόλιο (TTC) έδειξε ότι η θεραπεία με NB-EPA (11,13 ± 2,58 τοις εκατό ) μείωσε σαφώς το μέγεθος του εγκεφαλικού εμφράγματος 3 ημέρες μετά το HI σε σύγκριση με το όχημα (37,01 ± 4,68 τοις εκατό ) (Εικόνα 2Γ). Νευροσυμπεριφορικές δοκιμές έδειξαν ότι τα ποντίκια στην ομάδα φορέα εμφάνισαν σημαντικές νευροσυμπεριφορικές διαταραχές την 1η, 3η και 7η ημέρα μετά το HI (Εικόνα 2D–F). Αντίθετα, η θεραπεία NB-EPA βελτίωσε σαφώς αυτά τα νευρολογικά ελαττώματα (Εικόνα 2D–F). Έτσι, αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι το NB-EPA προστατεύει από ισχαιμική βλάβη και νευροσυμπεριφορικά ελλείμματα σε νεογνά ποντίκια μετά από εγκεφαλική βλάβη HI.

Σχήμα 1. Χρωματογραφήματα και φάσματα MS/MS φυσικού NB-EPA και συνθετικού NB-EPA.(A) Αντιπροσωπευτικό χρωματογράφημα ολικού ρεύματος ιόντων (TIC) που ελήφθη σε θετικά επιλεγμένη λειτουργία παρακολούθησης ιόντων (SIM) για δείγμα εκχυλίσματος μάκα. (Β) MS/MS φάσματα m/z3923 ([NB-EPA συν Η]*) για το δείγμα εκχυλίσματος maca. (C) Ημιπαρασκευαστική HPLC χρωματογράφημα συνθετικών υλικών NB-EPA. (D)HPLC χρωματογράφημα κλασμάτων NB-EPA (23.5-25.5 λεπτά) που συλλέχθηκε από ένα ημιπαρασκευασμένο σύστημα HPLC. (Ε) Αντιπροσωπευτικό χρωματογράφημα TIC που ελήφθη σε λειτουργία θετικής SIM για ένα συνθετικό δείγμα NB-EPA. (F) MS/MS φάσματα m/z 392,3 για το βιοσυνθετικό δείγμα NB-EPA (G) Χημική δομή του NB-EPA.

2.3. Το NB-EPA μειώνει την εγκεφαλική βλάβη που προκαλείται από HI μέσω καταστολής της νευρωνικής απόπτωσης

Στη συνέχεια, διερευνήσαμε εάν η προστασία του NB-EPA σε εγκεφαλική βλάβη HI εμπλέκεται στη διαμόρφωση του νευρωνικού θανάτου. Η χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης (HE) έδειξε ότι οι διευθετήσεις των νευρώνων στον φλοιό, την οδοντωτή έλικα του ιππόκαμπου (DG), την αμμωνία Cornu (CA) 1 και τις περιοχές CA3 ήταν διαταραγμένες. και οι νευρικές ίνες χαλαρώθηκαν και σχηματίστηκαν κενώδες σε ισχαιμικούς εγκεφάλους μετά από τραυματισμό ΗΙ. Ωστόσο, η θεραπεία με NB-EPA ακύρωσε σαφώς τη βλάβη των νευρωνικών κυττάρων (Εικόνα 3Α). Το στύπωμα Western επιβεβαίωσε ότι το NB-EPA μείωσε σημαντικά την έκφραση προ-αποπτωτικών πρωτεϊνών όπως ρ53, PUMA και Bax σε ισχαιμικό εγκεφαλικό ιστό (Εικόνα 3Β, Γ). Επιπλέον, το αντιγόνο νευρωνικών πυρήνων (NeuN) και η διπλή χρώση TUNEL κατέδειξαν σημαντική μείωση στον αριθμό των κυττάρων TUNEL συν NeuN συν 7 ημέρες μετά το HI σε ποντικούς που έλαβαν NB-EPA (5,80 ± 1,35 τοις εκατό) σε σύγκριση με φορείς (14,39 ± 2,55 τοις εκατό). (Εικόνα 3D). Μαζί, αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν ότι η ευεργετική επίδραση του NB-EPA σε προσβολές εγκεφάλου HI εμπλέκεται στην αναστολή της απόπτωσης των νευρωνικών κυττάρων.

Εικόνα 2. Η χορήγηση NB-EPA μειώνει το εγκεφαλικό έμφραγμα και τα ελαττώματα συμπεριφοράς σε νεογνά ποντίκια μετά από εγκεφαλική βλάβη ΗΙ. (Α) Αντιπροσωπευτικές εικόνες της εμφάνισης του εγκεφάλου στις 1,3,7 και 14 ημέρες μετά το HI. (Β) Στατιστική ανάλυση της περιεκτικότητας σε νερό του εγκεφάλου από κάθε ομάδα ποντικών 3 ημέρες μετά την Hl. (Γ) Αντιπροσωπευτικές φωτογραφίες χρωματισμένων με TTC στεφανιαίων τομών εγκεφάλου από κάθε ομάδα ποντικών 3 ημέρες μετά το HI και ποσοτική ανάλυση του όγκου του εμφράγματος. (DF) Τα νευροσυμπεριφορικά αποτελέσματα του αντανακλαστικού γεωτάξου (D), της αντίδρασης αποφυγής γκρεμού (Ε) και της δοκιμής πρόσφυσης (F) στις 1,3 και 7 ημέρες μετά το HI. Τα δεδομένα είναι μέσο ± τυπικό σφάλμα του μέσου όρου (SEM) ( n=8 ανά ομάδα).*σελ<0.05 compared="" to="">

2.4. Το NB-EPA μειώνει την εγκεφαλική βλάβη που προκαλείται από το HI μέσω της καταστολής της νευρωνικής απόπτωσης

Η χρώση Nissl έδειξε ότι ένας μεγάλος αριθμός νευρώνων εμφάνισε ατροφία, οίδημα και πυρηνική πύκνωση και πέθαναν ακόμη και με την εξαφάνιση των σωμάτων Nissl στον ισχαιμικό εγκέφαλο. Αντίθετα, το NB-EPA προφανώς βελτίωσε τη νευρωνική επιβίωση και την αναδιάταξη των νευρώνων μετά από τραυματισμό HI (Εικόνα 4Α, Β). Το στύπωμα Western έδειξε ότι το ΝΒ-ΕΡΑ αύξησε τα επίπεδα φωσφορυλιωμένης ΑΚΤ (ρ-ΑΚΤ), ενεργώντας ως σηματοδότηση υπέρ της επιβίωσης, σε ισχαιμικό εγκεφαλικό ιστό 7 ημέρες μετά την πρόκληση ΗΙ (Εικόνα 4C, D). Η Doublecortin (DCX) είναι δείκτης για νευρωνικούς πρόδρομους και νεαρούς μεταναστευτικούς νευρώνες [18] και το Ki-67 είναι δείκτης κυτταρικού πολλαπλασιασμού [19]. Η θεραπεία με NB-EPA (19,83 ± 1,25 κύτταρα/mm3) αύξησε αξιοσημείωτα τον αριθμό των Ki-67 συν DCX συν κύτταρα 7 ημέρες μετά το ΗΙ σε σύγκριση με το όχημα (11,83 ± 1,08 κύτταρα/mm3) (Εικόνα 4Ε). Επομένως, αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν ότι το NB-EPA διευκολύνει την επιβίωση και τον πολλαπλασιασμό των νευρώνων σε νεογνά ποντίκια μετά από εγκεφαλική βλάβη HI.

Σχήμα 3. Το NB-EPA αναστέλλει τον νευρωνικό θάνατο σε νεογνά ποντίκια μετά από εγκεφαλική βλάβη HI. (Α) Αντιπροσωπευτικές φωτογραφίες χρώσης HE στον φλοιό, τις περιοχές DG, CA1 και CA3 του ιππόκαμπου από κάθε ομάδα ποντικών 7 ημέρες μετά το HI (Γραμμή κλίμακας, 75 μm）. (Β) Αντιπροσωπευτικές εικόνες Western blot του p53, PUMA, και Bax από κάθε ομάδα ποντικών στις 7 ημέρες μετά το HI. (C) Η πυκνομετρική ανάλυση των δεδομένων παρουσιάζεται στο (Β). (Δ) Αντιπροσωπευτικές εικόνες του NeuN(κόκκινο) και του TUNEL (πράσινο) από κάθε ομάδα ποντικών στις 7 ημέρες μετά την HI(αριστερά, Γραμμή κλίμακας, 25 um) στον εγκεφαλικό φλοιό. Ποσοτικοποίηση των κυττάρων με διπλή σήμανση NeuN και TUNEL 7 ημέρες μετά το HI(Δεξιά). Τα δεδομένα είναι κατά μέσο όρο ± SEM (n =8 ανά ομάδα). *Π<005 compared="" to="">

cistanche pdf

2.5. Το NB-EPA μειώνει την εγκεφαλική βλάβη που προκαλείται από το HI μέσω της καταστολής της νευρωνικής απόπτωσης

Με βάση την παραπάνω προστατευτική επίδραση του NB-EPA στη νεογνική εγκεφαλική βλάβη HI, αξιολογήσαμε περαιτέρω την άμεση επίδραση του NB-EPA στη νευρωνική επιβίωση in vitro. Οι πρωτογενείς νευρώνες του φλοιού που καλλιεργήθηκαν για 7 ημέρες in vitro ήταν στρογγυλοί και μικροί, με πλούσιες συνάψεις και διασυνδεδεμένα δίκτυα (Εικόνα 5Α). Η καθαρότητα των νευρώνων προσδιορίστηκε με κυτταρομετρία ροής και το θετικό ποσοστό ήταν πάνω από 95 τοις εκατό (Εικόνα 5Β). Οι νευρώνες NeuN* ταυτοποιήθηκαν επίσης με ανοσοφθορισμό (Εικόνα 5C). Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι οι πρωτογενείς νευρώνες του φλοιού καλλιεργήθηκαν με επιτυχία.

Εικόνα 4. Το NB-EPA βελτιώνει την επιβίωση και τον πολλαπλασιασμό των νευρώνων σε νεογνά ποντίκια μετά από εγκεφαλική βλάβη HI. (Α) Αντιπροσωπευτικές φωτογραφίες της χρώσης Nissl στον φλοιό, τις περιοχές DG, CAl και CA3 του ιππόκαμπου από κάθε ομάδα ποντικών 7 ημέρες μετά το HI (Μπάρα κλίμακας, 75 μm). (Β) Η στατιστική ανάλυση του αριθμού των νευρώνων φαίνεται στο (Α). (C) Αντιπροσωπευτικές εικόνες στυπώματος Western του ρ-ΑΚΤ και ΑΚΤ από κάθε ομάδα ποντικών σε 7 ημέρες μετά το Η. (D) Η πυκνομετρική ανάλυση των δεδομένων παρουσιάζεται στο (C). (Ε)Αντιπροσωπευτικές εικόνες του DCX(πράσινο) και του Ki-67 (κόκκινο) από κάθε ομάδα ποντικών 7 ημέρες μετά το HI (αριστερά, Γραμμή κλίμακας, 25 um) στις περιοχές ΓΔ ιππόκαμπου. ποσοτικοποίηση κυττάρου με διπλή σήμανση DCX και Ki{11}} σε 7 ημέρες μετά το HI (δεξιά). Τα δεδομένα είναι μέσες ± SEM (n=8 ανά ομάδα).*p<0.05 compared="" to="">

Στη συνέχεια, οι νευρώνες υποβλήθηκαν σε 3 ώρες στέρηση οξυγόνου-γλυκόζης (OGD) και υποβλήθηκαν σε αγωγή με διαφορετικές συγκεντρώσεις NB-EPA. Εμφανίστηκαν υποξικοί νευρώνες με ατροφία και πυρηνική πύκνωση σε καλλιέργειες που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με PBS. Αντίθετα, η θεραπεία με NB-EPA βελτίωσε σημαντικά τη νευρωνική επιβίωση μετά την OGD (Εικόνα 5Δ). Η επιβίωση νευρώνων μετρήθηκε 24 ώρες αργότερα χρησιμοποιώντας μια δοκιμασία κιτ μέτρησης κυττάρων-8(CCK-8). Όπως φαίνεται στο Σχήμα 5Ε, η θεραπεία NB-EPA προφανώς διέσωσε το ποσοστό επιβίωσης των νευρώνων μετά την έναρξη της OGD. Η μέγιστη αποτελεσματικότητα του NB-EPA επιτεύχθηκε στο 1 μΜ, το οποίο χρησιμοποιήθηκε για όλα τα επόμενα in vitro πειράματα. Η ανάλυση κυτταρομετρίας ροής επιβεβαίωσε ότι ο αριθμός των θετικών σε αννεξίνη νευρώνων σε καλλιέργειες που υποβλήθηκαν σε αγωγή με NB-EPA μειώθηκε σημαντικά σε σύγκριση με καλλιέργειες που υποβλήθηκαν σε αγωγή με PBS φορέα (Εικόνα 5F). Εν τω μεταξύ, η θεραπεία με NB-EPA αναστέλλει επίσης σημαντικά την έκφραση πρωτεϊνών που σχετίζονται με την απόπτωση, συμπεριλαμβανομένων των p53, PUMA και Bax σε νευρώνες που έχουν ρυθμιστεί με OGD (Εικόνα 5G, Η). Επομένως, αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν ότι το NB-EPA μειώνει τη νευρωνική βλάβη μέσω της ανοδικής ρύθμισης της επιβίωσης των νευρώνων ενώ αναστέλλει την απόπτωση των νευρώνων.

Εικόνα 5. Το NB-EPA μειώνει την ισχαιμική νευρωνική βλάβη μετά την πρόκληση OGD. (Α) Αντιπροσωπευτικές εικόνες πρωτογενών νευρώνων του φλοιού που καλλιεργήθηκαν στις 1,3 και 7 ημέρες (Μπάρα κλίμακας, 25 μm). （B） Το ποσοστό των κυττάρων NeuN plus από πρωτογενείς νευρώνες του φλοιού που καλλιεργήθηκαν για 7 ημέρες in vitro. μπλε) από πρωτογενείς νευρώνες του φλοιού που καλλιεργήθηκαν για 7 ημέρες in vitro (Γραμμή κλίμακας, 10 μm). (Δ) Αντιπροσωπευτικές εικόνες πρωτογενών νευρώνων του φλοιού από κάθε ομάδα σε καλλιέργεια 24 hof μετά από 3 ώρες OGD (Μπάρα κλίμακας, 25 μm). Δοκιμασία (E)CCK-8 σε καλλιέργειες εμπλουτισμένες με νετρόνια που υποβλήθηκαν σε συνθήκες ελέγχου OGDor 3 ωρών ακολουθούμενη από επεξεργασία με ένα εύρος συγκεντρώσεων NB-EPA για άλλες 24 ώρες.(F) Το ποσοστό των νευρώνων που προσαρτώνται στις 24 ώρες του πολιτισμού μετά από 3 ώρες OGD. (G) Αντιπροσωπευτικές εικόνες στυπώματος Western των p53, PUMA και Bax από κάθε ομάδα σε 24 ώρες καλλιέργειας μετά από 3 ώρες OGD. (Η) Η πυκνομετρική ανάλυση δεδομένων παρουσιάζεται στο (G). Τα δεδομένα είναι μέσοι όροι ±SEM (n =3 σε κάθε ομάδα).* σελ<0.05 compared="" to="">

2.6. Το NB-EPA προστατεύει τους νευρώνες από την απόπτωση μέσω της καταστολής του p53-PUMA

Σηματοδότηση Η οδός p53-PUMA είναι γνωστό ότι συμμετέχει στην απόπτωση των εγκεφαλικών νευρωνικών κυττάρων που προκαλείται από ισχαιμία/επαναιμάτωση [20]. Εξερευνήσαμε εδώ εάν η προστασία του NB-EPA έναντι του νευρωνικού θανάτου σχετίζεται με την αναστολή της οδού p53-PUMA. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 6Α, το NB-EPA ακύρωσε την ρυθμισμένη με OGD κυτταρική απόπτωση αλλά δεν είχε καμία επίδραση σε δείγματα που είχαν υποβληθεί σε προεπεξεργασία με Pififithrin- (PFT), έναν αναστολέα ρ53. Εν τω μεταξύ, η αγωγή με NB-EPA ανέστειλε αξιοσημείωτα την έκφραση της προ-αποπτωτικής πρωτεΐνης Bax σε νευρώνες που έχουν ρυθμιστεί με OGD αλλά δεν είχε καμία επίδραση σε αυτούς που υποβλήθηκαν σε προηγούμενη αγωγή με PFT (Εικόνα 6Β). Η έκφραση PUMA ενισχύθηκε αισθητά στους νευρώνες μετά την πρόκληση OGD, ενώ η έκφραση PUMA mRNA και πρωτεΐνης δεν άλλαξαν στους νευρώνες που είχαν υποστεί προεπεξεργασία PFT, υποδεικνύοντας ότι η επαγωγή PUMA στους νευρώνες εξαρτάται από p{15}}(Εικόνα 6C). Η θεραπεία με NB-EPA ανέστειλε την επαγόμενη από OGD έκφραση PUMA σε νευρώνες αλλά δεν είχε καμία επίδραση στους νευρώνες που είχαν υποστεί προεπεξεργασία PFT (Εικόνα 6C). Οι εγκεφαλικοί νευρώνες με ειδική σίγαση PUMA έδειξαν χαμηλότερο ποσοστό αποπτωτικών κυττάρων (Εικόνα 6D) και μειωμένη έκφραση της πρωτεΐνης Bax (Εικόνα 6Ε) στις 24 ώρες μετά την πρόκληση OGD σε σύγκριση με τους νευρώνες που εκφράζουν PUMA. Επομένως, αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι η μεσολαβούμενη από NB-EPA αναστολή της απόπτωσης νευρώνων που προκαλείται από OGD εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από την καταστολή της οδού p53-PUMA.

Εικόνα 6. Το NB-EPA μειώνει την απόπτωση των νευρώνων μέσω της αναστολής της οδού p53-PUMA. (Α) Το ποσοστό αννεξίνης συν νευρώνων με ή χωρίς αναστολή p53 σε 24 ώρες καλλιέργειας με ή χωρίς NB-EPA και μετά από 3 ώρες OGD. (Β) Αντιπροσωπευτικές εικόνες Western blot του Bax με ή χωρίς αναστολή p53 σε 24 ώρες καλλιέργειας με ή χωρίς NB-EPA και μετά από 3 ώρες OGD (αριστερά). πυκνομετρική ανάλυση έκφρασης πρωτεΐνης Bax (δεξιά). (C) Έκφραση PUMA mRNA σε νευρώνες σε 12 ώρες καλλιέργειας με ή χωρίς NB-EPA και μετά από 3 ώρες OGD (αριστερά). μέσα ποσοστά έκφρασης πρωτεΐνης PUMA σε νευρώνες σε 24 ώρες καλλιέργειας με ή χωρίς NB-EPA και μετά από 3 ώρες OGD (δεξιά). (Δ) Το ποσοστό των νευρώνων αννεξίνης με ή χωρίς PUMA knockdown σε 24 ώρες καλλιέργειας με ή χωρίς NB-EPA και μετά από 3 ώρες OD.(E) Αντιπροσωπευτικές εικόνες Western blot του Bax με ή χωρίς knockdown PUMA στις 24 ώρες καλλιέργειας με ή χωρίς NB-EPA και μετά από 3 ώρες OGD (αριστερά). πυκνομετρική ανάλυση έκφρασης πρωτεΐνης Bax (δεξιά). Τα δεδομένα είναι μέσοι όροι ± SEM (n=3 ανά ομάδα).*p< 0.05="" compared="" to="" vehicle.="" n.s.="" not="">

3. Συζήτηση

Η νεογνική υποξική-ισχαιμική βλάβη που προκαλείται από περιγεννητική ασφυξία είναι μια από τις πιο συχνές ασθένειες στη νεογνική περίοδο. Υπάρχει έλλειψη αποτελεσματικών φαρμακευτικών θεραπευτικών παρεμβάσεων που μειώνουν την εγκεφαλική βλάβη ή βελτιώνουν τη νευρολογική λειτουργία στα βρέφη [21]. Στην παρούσα μελέτη, διαπιστώσαμε ότι η θεραπεία με ένα νέο μακαμίδιο NB-EPA ανακούφισε σημαντικά την υποξική-ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη σε νεογνά ποντίκια. Η νευροπροστασία του NB-EPA σχετιζόταν με την ανοδική ρύθμιση της νευρωνικής επιβίωσης ενώ αναστέλλει τον νευρωνικό θάνατο. Συγκεκριμένα, ο αντιαποπτωτικός μηχανισμός με τη μεσολάβηση NB-EPA εξαρτιόταν από την καταστολή της σηματοδότησης p53-PUMA. Τα μακαμίδια, γνωστά ως οι χαρακτηριστικές ενώσεις-δείκτες της μάκας, αποτελούνται από βενζυλαμίνη και ένα τμήμα λιπαρού οξέος μακράς αλυσίδας με μεταβλητό βαθμό ακόρεστου [22].

Είκοσι τρία είδη μακαμιδίων έχουν αναφερθεί στο εκχύλισμα μάκα, μεταξύ των οποίων το Ν-βενζυλοδεκαδεκαναμίδιο είναι η πιο άφθονη ένωση στη μάκα από το Περού, ενώ το Ν-βενζυλο-9Z,12Z-οκταδεκαδιεναμίδιο είναι η πλουσιότερη ένωση στη μάκα Γιουνάν [23]. Σε αυτή τη μελέτη, εντοπίσαμε ένα νέο μακαμίδιο NB-EPA σε maca από το Yunnan. Το μακαμίδιο NB-EPA αποτελείται από βενζυλαμίνη και εικοσαπεντανοϊκό οξύ (EPA; 20:5, n-3), ένα από τα κύρια συστατικά του ωμέγα-3 πολυακόρεστου λιπαρού οξέος (n-3 PUFA ). n-3 Οι PUFA και οι μεταβολίτες τους έχουν αναφερθεί ότι υπάρχουν στο κεντρικό νευρικό σύστημα και παίζουν κρίσιμους ρόλους στη λειτουργία του εγκεφάλου και στις ασθένειες, όπως η νευροδιαβίβαση, η νευρογένεση και η νευροφλεγμονή [24]. Αξίζει να σημειωθεί ότι ορισμένες μελέτες έχουν προτείνει ότι το EPA, αντί n-3 PUFAs και εικοσιδυαεξανοϊκό οξύ (DHA; 22:6, n-3), σχετίζεται με χαμηλότερους κινδύνους για τους περισσότερους τύπους ισχαιμικού εγκεφαλικού επεισοδίου [25 ]. Σε συμφωνία με αυτά τα ευρήματα, δείξαμε ότι αυτή η νέα μακαμίδη NB-EPA όχι μόνο ανακουφίζει τον εγκεφαλικό τραυματισμό αλλά βελτιώνει επίσης τα νευροσυμπεριφορικά ελλείμματα μετά από τραυματισμό του HI. Οι νευρώνες είναι οι πιο βασικές δομικές και λειτουργικές μονάδες του νευρικού συστήματος, οι οποίες έχουν τη λειτουργία να συνδέουν και να ενσωματώνουν πληροφορίες εισόδου και να στέλνουν πληροφορίες. Όταν ο εγκέφαλος τραυματίζεται, που προκαλείται από υποξία και ισχαιμία, ένας μεγάλος αριθμός νευρώνων καταστρέφεται, γεγονός που με τη σειρά του προκαλεί νευρολογική δυσλειτουργία. Το p53, ένας βασικός ρυθμιστής της απόκρισης του κυτταρικού στρες, μπορεί να ενεργοποιηθεί στις ισχαιμικές περιοχές μετά από εγκεφαλική βλάβη [26]. Μπορεί να προάγει την απόπτωση των νευρώνων και η ανεπάρκεια p53 ή η εφαρμογή αναστολέων p53 μπορεί να μειώσει σημαντικά την εγκεφαλική βλάβη σε διάφορα μοντέλα εγκεφαλικού επεισοδίου [27]. Η μεσολαβούμενη από p{27}}απόπτωση λαμβάνει χώρα μέσω μιας ποικιλίας μοριακών μηχανισμών, μεταξύ των οποίων το PUMA, ap{53- και ο αυξημένος ρυθμιστής της απόπτωσης, είναι ένα ισχυρό προαποπτωτικό γονίδιο κατάντη του p53 [28]. Μελέτες έχουν δείξει ότι η οδός p53-PUMA εμπλέκεται στην απόπτωση των νευρώνων του ραβδωτού σώματος που προκαλείται από μιτοχονδριακούς αναστολείς σε αρουραίους [29].

νεφρική βλάβη και ασθένειαcistanche propiedades

Η αναστολή της ενεργοποίησης του βρόχου ανάδρασης p53–PUMA από τους αναστολείς p53 και το PUMA siRNA μπορεί να μειώσει την απόπτωση των νευρώνων και τη φλεγμονή που προκαλείται από την ισχαιμία-επαναδιάχυση [30]. Εδώ, τα ευρήματά μας είναι συνεπή με αυτές τις μελέτες που δείχνουν ότι το PUMA είναι ένας ισχυρός εκτελεστής της απόπτωσης που προκαλείται από p{4}}σε νευρώνες μετά από εγκεφαλική βλάβη HI. Η θεραπεία με NB-EPA αναστέλλει την επαγόμενη από ΗΙ αύξηση του PUMA στους νευρώνες. Επιπλέον, οι προστατευτικές επιδράσεις του NB-EPA στην επιβίωση των νευρώνων εξαρτώνται σε μεγάλο βαθμό από την καταστολή της σηματοδότησης PUMA. Αυξητικά στοιχεία δείχνουν ότι n-3 PUFAs συμβάλλουν στην επιβίωση και τη νευρογένεση των νευρώνων μετά από ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη [31,32]. Μπορούν να βελτιώσουν την πρόγνωση του εγκεφαλικού και να περιορίσουν την περαιτέρω βλάβη των νευρώνων [33]. Αν και το ισχαιμικό εγκεφαλικό επάγει τον πολλαπλασιασμό και τη διαφοροποίηση των νευρικών προγονικών κυττάρων στην υποκοιλιακή ζώνη (SVZ), οι περισσότεροι από τους νεοδημιουργηθέντες νευρώνες πέθαναν λίγο μετά το εγκεφαλικό [34]. n-3 Οι PUFAs έχουν αναφερθεί όχι μόνο ότι ενισχύουν την επιβίωση των ανώριμων νευρώνων αλλά και ότι διευκολύνουν την ωρίμανση τους στο φλοιώδες παρέγχυμα μετά από βλάβη από εγκεφαλικό [35]. Πρόσφατα, αρκετές μελέτες πρότειναν επίσης την ευεργετική επίδραση των μακαμιδίων στη βελτίωση της νευρωνικής βλάβης, η οποία σχετίζεται με τη βελτίωση της μιτοχονδριακής αναπνευστικής λειτουργίας [36,37].

Η οδός μεταγωγής σήματος AKT παίζει σημαντικό ρόλο στον μηχανισμό κατά της απόπτωσης. Όταν ο εγκέφαλος τραυματίζεται, η οδός AKT ενεργοποιείται και το σώμα ξεκινά την αυτοπροστασία και την αποκατάσταση τραυματισμών, οδηγώντας σε αυξημένες εκφράσεις του p-AKT [38-41]. Σύμφωνα με αυτά τα ευρήματα, παρατηρούμε ότι η θεραπεία με NB-EPA προστατεύει τη νευρωνική επιβίωση έναντι εγκεφαλικής βλάβης που προκαλείται από ΗΙ μέσω της ενεργοποίησης της σηματοδότησης AKT υπέρ της επιβίωσης ενώ αναστέλλει την προ-αποπτωτική οδό.

Για πολύ καιρό, οι νευροβιολόγοι πίστευαν ότι τα νευρικά βλαστοκύτταρα (NSCs) εξαφανίστηκαν λίγο πριν ή μετά τη γέννηση και η νευρογένεση σταμάτησε εκείνη τη στιγμή. Η αντίληψη ότι δεν υπάρχουν νέοι νευρώνες στον ώριμο εγκέφαλο άρχισε να αλλάζει το 1960. Με την ανάπτυξη της έρευνας, διαπιστώθηκε ότι τα ενήλικα NSCs υπάρχουν κυρίως στο SVZ και στην υποκοκκώδη ζώνη (SGZ) της οδοντωτής έλικας του ιππόκαμπου [42-44]. Επιπλέον, αργότερα επιβεβαιώθηκε ότι τα NSC υπάρχουν και σε άλλες εκτεταμένες περιοχές του κεντρικού νευρικού συστήματος (ΚΝΣ) [45]. Πρόσφατες μελέτες έχουν δείξει ότι τα ενδογενή NSCs στον φλοιό μπορούν να ενεργοποιηθούν μετά από εγκεφαλική βλάβη για να συμβάλουν στην αποκατάσταση της υποξικής-ισχαιμικής εγκεφαλικής βλάβης μέσω της αυτοανανέωσης, του πολλαπλασιασμού και της δημιουργίας νέων νευρώνων, αστροκυττάρων και ολιγοδενδροκυττάρων [46,47] . Το DCX συμβάλλει στην επιδιόρθωση των νευρώνων σταθεροποιώντας τους μικροσωληνίσκους στα νευρωνικά κύτταρα και αντιπροσωπεύει έναν δείκτη για την παρακολούθηση της μετανάστευσης νέων νευρώνων στις τραυματισμένες θέσεις του εγκεφάλου [48]. Η υποξική-ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη και η σοβαρή τραυματική εγκεφαλική βλάβη αυξάνουν την παραγωγή νέων νευρώνων του ραβδωτού σώματος που εκφράζουν το DCX [49]. Το Ki{11}} είναι ένα πυρηνικό αντιγόνο που σχετίζεται με πολλαπλασιαζόμενα κύτταρα, που καλύπτει κάθε κύκλο πολλαπλασιασμού εκτός από τη φάση G0. Σε αυτή τη μελέτη, η χορήγηση NB-EPA προφανώς προάγει τη νευρογένεση, η οποία σχετίζεται με την ανοδική ρύθμιση των κυττάρων Ki{-67 συν DCX plus μετά από εγκεφαλική βλάβη HI. Ωστόσο, εάν η αύξηση του αριθμού των κυττάρων Ki-67 συν DCX plus σχετίζεται με τον πολλαπλασιασμό και τη διαφοροποίηση των νευρικών βλαστοκυττάρων που προκαλούνται από το NB-EPA πρέπει να μελετηθεί περαιτέρω.

βιβλιογραφικές αναφορές

1 Thornton, C.; Rousset, C.; Kichev, Α.; Miyakuni, Υ.; Vontell, R.; Baburamani, AA; Fleiss, Β.; Gressens, Ρ.; Hagberg, H. Μοριακοί μηχανισμοί νεογνικής εγκεφαλικής βλάβης. Neurol. Res. Int. 2012, 2012, 506320. [CrossRef]

2. Ma, Q.; Zhang, L. Επιγενετικός προγραμματισμός της υποξικής-ισχαιμικής εγκεφαλοπάθειας ως απάντηση στην εμβρυϊκή υποξία. Επαιτώ. Neurobiol. 2015, 124, 28–48. [CrossRef] [PubMed]

3. Conforti M, HD; Deniz, BF; de Almeida, W.; Miguel, PM; Bronaugh, L.; Vieira, MC; de Oliveira, π.Χ. Pereira, LO Η νεογνική υποξία-ισχαιμία προκάλεσε ήπια κινητική δυσλειτουργία, η οποία ανακτήθηκε με ακροβατική προπόνηση, χωρίς να επηρεάσει τις μορφολογικές δομές που εμπλέκονται στον κινητικό έλεγχο σε αρουραίους. Brain Res. 2019, 1707, 27–44. [CrossRef]

4. Yıldız, ΕΡ; Ekici, Β.; Tatlı, B. Νεογνική υποξική-ισχαιμική εγκεφαλοπάθεια: Μια ενημέρωση σχετικά με την παθογένεια και τη θεραπεία της νόσου. Ειδικός. Σεβ. Neurother. 2017, 17, 449–459. [CrossRef]

5. Azzopardi, DV; Strohm, Β.; Edwards, AD; Dyet, L.; Halliday, HL; Juszczak, Ε.; Καπέλλου, Ο.; Levene, Μ.; Marlow, Ν.; Porter, Ε.; et al. Μέτρια υποθερμία για τη θεραπεία της περιγεννητικής ασφυξίας εγκεφαλοπάθειας. N. Engl. J. Med. 2009, 361, 1349–1358. [CrossRef] [PubMed]

6. Tagin, MA; Woolcott, CG; Vincer, MJ; Whyte, RK; Stinson, DA Υποθερμία για νεογνική υποξική-ισχαιμική εγκεφαλοπάθεια: Μια ενημερωμένη συστηματική ανασκόπηση και μετα-ανάλυση. Αψίδα. Παιδιατρ. Adolesc. Med. 2012, 166, 558–566. [CrossRef] [PubMed]

7. Thoresen, Μ.; Sabir, H. Epilepsy: Οι νεογνικές κρίσεις εξακολουθούν να στερούνται ασφαλούς και αποτελεσματικής θεραπείας. Nat Rev Neurol. 2015, 11, 311–312. [CrossRef] [PubMed]

8. Nair, J.; Kumar, VHS Τρέχουσες και αναδυόμενες θεραπείες στη διαχείριση της υποξικής ισχαιμικής εγκεφαλοπάθειας σε νεογνά. Παιδιά 2018, 5, 99. [CrossRef] [PubMed]

9. Gonzales, GF; Gonzales, C.; Gonzales-Castañeda, C. Lepidium meyenii (Maca): Ένα φυτό από τα υψίπεδα του Περού – από την παράδοση στην επιστήμη. Forsch. Συμπληρωμένο. 2009, 16, 373-380. [CrossRef]

10. Chen, L.; Li, J.; Fan, L. Η θρεπτική σύνθεση του maca σε υποκοτύλια (Lepidium meyenii Walp.) που καλλιεργούνται σε διάφορες περιοχές της Κίνας. J. Food Quality 2017, 2017, 3749627. [CrossRef]

11. Balick, MJ; Lee, R. Maca: Από την παραδοσιακή καλλιέργεια τροφίμων στην ενέργεια και τονωτικό της λίμπιντο. Εναλλακτική. Εκεί. Health Med. 2002, 8, 96.

12. Chen, SX; Li, ΚΚ; Pub, D.; Jiang, SP; Chen, Β.; Chen, LR; Yang, Ζ.; Μακ.; Gong, XJ Optimization of Ultrasound-Assisted Extraction, HPLC και UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS Analysis of Main Macamides and Macaenes from Maca (Cultivars of Lepidium meyenii Walp). Molecules 2017, 22, 2196. [CrossRef]

13. Yang, Q.; Jin, W.; Lv, Χ.; Dai, Ρ.; Αο, Υ.; Wu, Μ.; Deng, W.; Yu, L. Επιδράσεις των μακαμιδίων στην ικανότητα αντοχής και στην ιδιότητα κατά της κόπωσης σε ποντίκια που κολυμπούν παρατεταμένα. Pharm. Biol. 2016, 54, 827–834. [CrossRef] [PubMed]

14. Wang, Τ.; Sun, CH; Zhong, HB; Gong, Υ.; Cui, ZK; Xie, J.; Wang, YP; Liang, C.; Cao, HH; Chen, XR; et al. Το Ν-(3- μεθοξυβενζυλ)-(9Ζ, 12Ζ, 15Ζ)-οκταδεκατριεναμίδιο προάγει τον σχηματισμό οστού μέσω της κανονικής οδού σηματοδότησης Wnt/-κατενίνης. Phytother. Res. 2019, 33, 1074–1083. [CrossRef]

15. Uchiyama, F.; Jikyo, Τ.; Takeda, R.; Το Ogata, M. Lepidium meyenii (Maca) ενισχύει τα επίπεδα της ωχρινοτρόπου ορμόνης στον ορό σε θηλυκούς αρουραίους. J. Ethnopharmacol. 2014, 151, 897–902. [CrossRef] [PubMed]

16. Alasmari, Μ.; Böhlke, Μ.; Kelley, C.; Maher, Τ.; Pino-Figueroa, Α. Inhibition of Fatty Acid Amide Hydrolase (FAAH) από Macamides. ΜοΙ. Neurobiol. 2019, 56, 1770–1781. [CrossRef]

17. Huang, YJ; Peng, XR; Qiu, MH Πρόοδος σχετικά με τα χημικά συστατικά που προέρχονται από γλυκοζινολικά σε Maca (Lepidium meyenii). Nat. Κέντρο. Bioprospect. 2018, 8, 405–412. [CrossRef] [PubMed]

18. Piens, Μ.; Muller, Μ.; Bodson, Μ.; Baudouin, G.; Plumier, JC Μια σύντομη ανοδική περιοχή προαγωγέα μεσολαβεί στη μεταγραφική ρύθμιση του γονιδίου doublecortin ποντικού σε διαφοροποιητικούς νευρώνες. BMC. Neurosci. 2010, 11, 64. [CrossRef]

19. Rahmanzadeh, R.; Hüttmann, G.; Gerdes, J.; Scholzen, T. Η αδρανοποίηση του PKI-67 με τη βοήθεια χρωμοφόρων οδηγεί σε αναστολή της σύνθεσης ριβοσωμικού RNA. Cell Prolif. 2007, 40, 422-430. [CrossRef]

20. Hong, LZ; Zhao, XY; Ο Zhang, HL p53-διαμεσολάβησε τον θάνατο νευρωνικών κυττάρων σε ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη. Neurosci Bull. 2010, 26, 232-240. [CrossRef]

21. Wachtel, EV; Verma, S.; Mally, PV Ενημέρωση για την τρέχουσα διαχείριση νεογνών με νεογνική εγκεφαλοπάθεια. Curr Probl Pediatr. Adolesc. Health Care 2019, 49, 100636. [CrossRef] [PubMed]

22. Wang, S.; Zhu, F. Χημική σύνθεση και επιπτώσεις στην υγεία της μάκας (Lepidium meyenii). Food Chem. 2019, 288, 422–443. [CrossRef]

23. Carvalho, FV; Ribeiro, PR Δομική ποικιλομορφία, βιοσυνθετικές πτυχές και συλλογή δεδομένων LC-HRMS για την ταυτοποίηση βιοδραστικών ενώσεων του Lepidium meyenii. Food Res. Int. 2019, 125, 108615. [CrossRef]

24. Bazinet, RP; Layé, S. Πολυακόρεστα λιπαρά οξέα και οι μεταβολίτες τους στη λειτουργία και τις ασθένειες του εγκεφάλου. Nat. Σεβ. Neurosci. 2014, 15, 771–785. [CrossRef] [PubMed]

25. Venø, SK; Bork, CS; Jakobsen, MU; Lundbye-Christensen, S.; McLennan, PL; Bach, FW; Overvad, K.; Schmidt, EB Marine n-3 Πολυακόρεστα λιπαρά οξέα και ο κίνδυνος ισχαιμικού εγκεφαλικού επεισοδίου. Εγκεφαλικό επεισόδιο 2019, 50, 274–282. [CrossRef]

26. Yonekura, Ι.; Takai, Κ.; Asai, Α.; Kawahara, Ν.; Το Kirino, T. p53 ενισχύει τον νευρωνικό θάνατο του ιππόκαμπου που προκαλείται από σφαιρική ισχαιμία. J. Cereb. Ροή του αίματος. Metab. 2006, 26, 1332–1340. [CrossRef] [PubMed]

27. Xie, YL; Zhang, Β.; Το Jing, L. MiR-125b αποκλείει την αποπτωτική οδό σηματοδότησης Bax/Cytochrome C/Caspase-3 σε μοντέλα αρουραίου εγκεφαλικής ισχαιμίας-επαναιμάτωσης με στόχευση. Neurol. Res. 2018, 40, 828–837. [CrossRef] [PubMed] 28. Chen, Η.; Tian, ​​Μ.; Jin, L.; Jia, Η.; Jin, Y. PUMA εμπλέκεται στην απόπτωση των εγκεφαλικών αστροκυττάρων ποντικού που προκαλείται από ισχαιμία/επαναιμάτωση. Neuroscience 2015, 284, 824–832. [CrossRef] [PubMed]

29. Zhang, XD; Wang, Υ.; Wang, Υ.; Zhang, Χ.; Han, R.; Wu, JC; Liang, ZQ; Gu, ZL; Han, F.; Fukunaga, Κ.; et al. Η ρ53 μεσολαβεί στην ενεργοποίηση της αυτοφαγίας που προκαλείται από δυσλειτουργία των μιτοχονδρίων και στον κυτταρικό θάνατο σε ραβδωτό σώμα αρουραίου. Autophagy 2009, 5, 339-350. [CrossRef] [PubMed]

30. Li, XQ; Yu, Q.; Chen, FS; Tan, WF; Zhang, ZL; Ma, H. Η αναστολή της ανώμαλης ενεργοποίησης του βρόχου ανάδρασης p53-PUMA εξασθενεί την επαγόμενη από ισχαιμία επαναιμάτωση νευροαπόπτωση και νευροφλεγμονή σε επίμυες μειώνοντας τη ρύθμιση της κασπάσης 3 και της οδού κυτοκίνης NF-κB. J. Neuroinflflamm. 2018, 15, 250. [CrossRef] [PubMed]

31. Shi, Ζ.; Ren, Η.; Luo, C.; Yao, Χ.; Li, Ρ.; He, C.; Kang, JX; Wan, JB; Yuan, TF; Su, H. Εμπλουτισμένα ενδογενή ωμέγα-3 πολυακόρεστα λιπαρά οξέα Προστατεύουν τους νευρώνες του φλοιού από πειραματικό ισχαιμικό τραυματισμό. ΜοΙ. Neurobiol. 2016, 53, 6482–6488. [CrossRef] [PubMed]

32. Belayev, L.; Hong, SH; Menghani, Η.; Marcell, SJ; Obenaus, Α.; Freitas, RS; Khoutorova, L.; Balaszczuk, V.; Jun, Β.; Oriá, RB; et al. Τα δοκοσανοειδή προάγουν τη νευρογένεση και την αγγειογένεση, την ακεραιότητα του αιματοεγκεφαλικού φραγμού, την προστασία του χεριού και τη νευροσυμπεριφορική αποκατάσταση μετά από πειραματικό ισχαιμικό εγκεφαλικό επεισόδιο. ΜοΙ. Neurobiol. 2018, 55, 7090–7106. [CrossRef]

33. Zendedel, Α.; Habib, Ρ.; Dang, J.; Lammerding, L.; Hoffmann, S.; Beyer, C.; Τα πολυακόρεστα λιπαρά οξέα Slowik, A. Ωμέγα-3 βελτιώνουν τη νευροφλεγμονή και μετριάζουν τη βλάβη από το ισχαιμικό εγκεφαλικό μέσω αλληλεπιδράσεων με αστροκύτταρα και μικρογλοία. J. Neuroimmunol. 2015, 278, 200–211. [CrossRef]

34. Ohab, JJ; Fleming, S.; Blesch, Α.; Carmichael, ST Μια νευροαγγειακή θέση για νευρογένεση μετά από εγκεφαλικό. J. Neurosci. 2006, 26, 13007–13016. [CrossRef] [PubMed]

35. Zhang, W.; Wang, Η.; Zhang, Η.; Διαρροή, RK; Shi, Υ.; Hu, Χ.; Gao, Υ.; Chen, J. Τα συμπληρώματα διατροφής με ωμέγα-3 πολυακόρεστα λιπαρά οξέα προάγουν δυναμικά τη νευροαγγειακή αποκατάσταση και βελτιώνουν τις νευρολογικές λειτουργίες μετά από εγκεφαλικό. Exp. Neurol. 2015, 272, 170–180. [CrossRef]

36. Gugnani, KS; Vu, Ν.; Rondón-Ortiz, AN; Böhlke, Μ.; Maher, TJ; Pino-Figueroa, AJ Νευροπροστατευτική δραστηριότητα των μακαμιδίων σε μιτοχονδριακή διαταραχή που προκαλείται από μαγγάνιο σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος U-87 MG. Toxicol. Appl. Pharmacol. 2018, 340, 67–76. [CrossRef]

37. Zhou, Υ.; Wang, Η.; Guo, F.; Αμαρτία.; Brantner, Α.; Yang, J.; Han, L.; Wei, Χ.; Zhao, Η.; Bian, B. Ολοκληρωμένη Πρωτεομική και Λιπιδομική Διερεύνηση του Μηχανισμού Υποκείμενου της Νευροπροστατευτικής Επίδρασης του Ν-βενζυλοδεκαναμιδίου. Molecules 2018, 23, 2929. [CrossRef] [PubMed]

38. Liu, Υ.; Liu, Υ.; Jin, Η.; Cong, Ρ.; Zhang, Υ.; Tong, C.; Shi, Χ.; Liu, Χ.; Tong, Ζ.; Shi, L.; et al. Ο εγκεφαλικός τραυματισμός που προκαλείται από το ψυχρό στρες ρυθμίζει τα κανάλια TRPV1 και την οδό σηματοδότησης PI3K/AKT. Brain Res. 2017, 1670, 201–207. [CrossRef]

39. Xu, W.; Li, Τ.; Gao, L.; Lenahan, C.; Zheng, J.; Yan, J.; Shao, Α.; Zhang, J. Το βενζοϊκό νάτριο εξασθενεί τη δευτερογενή εγκεφαλική βλάβη αναστέλλοντας τη νευρωνική απόπτωση και μειώνοντας το οξειδωτικό στρες που προκαλείται από μιτοχόνδρια σε μοντέλο ενδοεγκεφαλικής αιμορραγίας αρουραίου: Πιθανή συμμετοχή του DJ-1/Akt/IKK/NFκB Path. Εμπρός. ΜοΙ. Neurosci. 2019, 12, 105. [CrossRef]

40. Li, J.; Οποιος.; Wang, JN; Γιν, XP; Zhou, Η.; Η Wang, YS κουρκουμίνη στοχεύει τους αγγειακούς ενδοθηλιακούς αυξητικούς παράγοντες μέσω της ενεργοποίησης της οδού σηματοδότησης PI3K/Akt και βελτιώνει την υποξική-ισχαιμική βλάβη του εγκεφάλου σε νεογνούς αρουραίους. Κορεάτης. J. Physiol. Pharmacol. 2020, 24, 423–431. [CrossRef]

41. Li, Τ.; Xu, W.; Gao, L.; Guan, G.; Zhang, Ζ.; He, Ρ.; Xu, Η.; Fan, L.; Yan, F.; Chen, G. Ο νευροτροφικός παράγοντας που προέρχεται από αστροκύτταρα μεσεεγκεφαλικού παρέχει νευροπροστασία σε πρώιμη εγκεφαλική βλάβη που προκαλείται από υπαραχνοειδή αιμορραγία μέσω της ενεργοποίησης της εξαρτώμενης από Akt οδού προεπιβίωσης και της υπεράσπισης της ακεραιότητας του αιματοεγκεφαλικού φραγμού. FASEB J. 2019, 33, 1727–1741. [CrossRef]

42. Morshead, CM; Reynolds, BA; Craig, CG; McBurney, MW; Staines, WA; Morassutti, D.; Weiss, S.; van der Kooy, D. Νευρικά βλαστοκύτταρα στον πρόσθιο εγκέφαλο των ενηλίκων θηλαστικών: Ένας σχετικά ήρεμος υποπληθυσμός υποπληθυσμού υποεπενδυματικών κυττάρων. Neuron 1994, 13, 1071-1082. [CrossRef]

43. Chiasson, BJ; Tropepe, V.; Morshead, CM; van der Kooy, D. Τα επενδυματικά και υποεπενδυματικά κύτταρα πρόσθιου εγκεφάλου ενηλίκων θηλαστικών επιδεικνύουν πολλαπλασιαστικό δυναμικό, αλλά μόνο τα υποεπενδυματικά κύτταρα έχουν χαρακτηριστικά νευρικών βλαστοκυττάρων. J. Neurosci. 1999, 19, 4462–4471. [CrossRef] 44. Alvarez-Buylla, Α.; Lim, DA Μακροπρόθεσμα: Διατήρηση βλαστικών κόγχων στον εγκέφαλο ενηλίκων. Neuron 2004, 41, 683-686. [CrossRef]

45. Vescovi, AL; Snyder, EY Establishment και ιδιότητες κλώνων νευρικών βλαστοκυττάρων: Πλαστικότητα in vitro και in vivo. Brain Pathol. 1999, 9, 569-598. [CrossRef] [PubMed] 46. Buffo, Α.; Rite, I.; Τριπάθη, Π.; Leiper, Α.; Colak, D.; Horn, AP; Mori, Τ.; Götz, M. Προέλευση και απόγονοι αντιδραστικής γλοίωσης: Μια πηγή πολυδύναμων κυττάρων στον τραυματισμένο εγκέφαλο. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 2008, 105, 3581–3586. [CrossRef]

47. Ahmed, AI; Shtaya, ΑΒ; Zaben, MJ; Owens, EV; Kiecker, C.; Γκρι, WP Ενδογενή νευρικά βλαστικά/προγονικά κύτταρα θετικά σε GFAP στον μεταγεννητικό φλοιό ποντικού ενεργοποιούνται μετά από τραυματική εγκεφαλική βλάβη. J. Neurotrauma 2012, 29, 828-842. [CrossRef] [PubMed] 48. Horesh, D.; Sapir, Τ.; Francis, F.; Wolf, SG; Caspi, Μ.; Elbaum, Μ.; Chelly, J.; Reiner, O. Doublecortin, σταθεροποιητής μικροσωληνίσκων. Βουητό. ΜοΙ. Genet. 1999, 8, 1599–1610. [CrossRef] [PubMed]

49. Ong, J.; Plane, JM; Parent, JM; Silverstein, FS Η υποξική-ισχαιμική βλάβη διεγείρει τον πολλαπλασιασμό της υποκοιλιακής ζώνης και τη νευρογένεση στον νεογνό αρουραίο. Παιδιατρ. Res. 2005, 58, 600–606. [CrossRef] [PubMed]

50. Shao, Υ.; Li, Υ.; Liu, T. Μελέτη για τη βελτιστοποίηση της διαδικασίας εκχύλισης των κύριων μακαμιδίων από Maca (Lepidium meyenii Walp.). Φαγητό. Res. Dev. 2017, 38, 35–39.

51. Skorupskaite, V.; Makareviciene, V.; Gumbyte, M. Ευκαιρίες για ταυτόχρονη εξαγωγή και διεστεροποίηση λαδιού κατά την παραγωγή καυσίμου βιοντίζελ από μικροφύκη: Ανασκόπηση. Καύσιμα. Επεξεργάζομαι, διαδικασία. Τεχνολ. 2016, 150, 78–87. [CrossRef]

52. Rice, JE, 3rd; Vannucci, RC; Brierley, JB Η επίδραση της ανωριμότητας στην υποξική-ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη στον αρουραίο. Αννα. Neurol. 1981, 9, 131-141. [CrossRef] [PubMed]

53. Xiao, AJ; Chen, W.; Xu, Β.; Liu, R.; Turlova, Ε.; Barszczyk, Α.; Sun, CL; Liu, L.; Deurloo, Μ.; Wang, GL; et al. Η θαλάσσια ένωση ξυλοκετάλη Β μειώνει την νεογνική υποξική-ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη. Mar. Drugs 2014, 13, 29–47. [CrossRef] [PubMed]

54. Jiao, Μ.; Li, Χ.; Chen, L.; Wang, X.; Yuan, Β.; Liu, Τ.; Dong, Q.; Mei, Η.; Yin, H. Νευροπροστατευτική επίδραση της προερχόμενης από αστροκύτταρα IL-33 σε νεογνική υποξική-ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη. J. Neuroinflflamm. 2020, 17, 251. [CrossRef] [PubMed]