Βιοπαρακολούθηση μυκοτοξινών στο πλάσμα ασθενών με Αλτσχάιμερ και νόσο του ΠάρκινσονⅢ
Apr 12, 2023
3. Συμπεράσματα
Παρουσιάζουμε τα αποτελέσματα που ελήφθησαν σε μια πρώτη μελέτη HBM σχετικά με την ανάλυση 19 μυκοτοξινών και μεταβολιτών σε δείγματα πλάσματος από υγιείς και ασθενείς (AD και PD) εθελοντές στη La Rioja (Ισπανία). Τα αποτελέσματα της μελέτης υποδεικνύουν ορισμένες διαφορές μεταξύ των ασθενών και των ασθενών στα επίπεδα OTA και STER. Ο λόγος πίσω από αυτή τη διαφορά είναι άγνωστος. Διάφοροι παράγοντες μπορεί να επηρεάζουν το αποτέλεσμα που παρατηρήθηκε, όπως οι διαφορές στις δίαιτες, ο μεταβολισμός του μεταβολισμού λόγω της νόσου ή το γεγονός ότι το φύλο και η ηλικία μπορεί να έχουν σημαντικό ρόλο στα επίπεδα των μυκοτοξινών που ανιχνεύονται στο πλάσμα.
Κάντε κλικ στο βάμμα cistanche για τη νόσο του Αλτσχάιμερ και τη νόσο του Πάρκινσον
Όλοι αυτοί οι συγχυτικοί παράγοντες θα πρέπει να αξιολογούνται προσεκτικά με μελέτες που περιλαμβάνουν μεγαλύτερο αριθμό ατόμων. Στην παρούσα μελέτη, έχουν παρατηρηθεί διαφορές στην ΟΤΑ μεταξύ υγιών συντρόφων και ασθενών, αλλά οι διαφορές φαίνεται να σχετίζονται περισσότερο με το φύλο παρά με την ίδια τη νόσο. Επιπλέον, η ΟΤΑ έτεινε να μειώνεται με την ηλικία, ειδικά στην ομάδα με PD. Ένα από τα κύρια ευρήματα είναι ότι το STER εμφανίστηκε μόνο μετά από θεραπεία με -γλυκουρονιδάση/αρυλσουλφατάση, υποστηρίζοντας την υπόθεση ότι τα STER-γλυκουρονίδια σχηματίζονται κατά τον ανθρώπινο μεταβολισμό. Επιπλέον, τα επίπεδα STER στο πλάσμα βρέθηκαν να είναι υψηλότερα στους ασθενείς, χωρίς διαφορές μεταξύ των παθολογιών. Επιπλέον, τα επίπεδα STER συσχετίστηκαν θετικά με την ηλικία στις γυναίκες.
Κατά την ερμηνεία των δεδομένων, είναι σημαντικό να επισημανθεί ότι η παρούσα μελέτη δεν σχεδιάστηκε για να εξηγήσει την παθοβιολογία της PD ή της AD, αλλά μάλλον για να διερευνήσει εάν η παρουσία ενός πιθανού περιβαλλοντικού παράγοντα κινδύνου μπορεί να δράσει ως διαταρακτικοί παράγοντες που εμπλέκονται στο γονίδιο- περιβαλλοντική αλληλεπίδραση. Τα δείγματα από την ομάδα ελέγχου ταιριάζουν με προηγούμενα δεδομένα που ελήφθησαν σε παρόμοιο πληθυσμό σε μια γειτονική περιοχή της Ισπανίας και χρησιμοποιούν την ίδια ανάλυση LC/MS-MS [35].
Ωστόσο, κατά τη σύγκριση υγιών ατόμων μεταξύ των δύο μελετών, θα πρέπει να σημειωθεί ότι: (i) το εύρος ηλικιών είναι διαφορετικό, καθώς η πλειοψηφία των δειγμάτων στην παρούσα μελέτη ελήφθη από άτομα ηλικίας άνω των 60 ετών, ειδικά στις ομάδες AD και PD , όπως αναμένεται για ασθένειες που σχετίζονται με την ηλικία· και (ii) ο αριθμός των δειγμάτων ελέγχου που είναι χαμηλός στην παρούσα μελέτη. Επιπλέον, άλλοι περιορισμοί θα πρέπει επίσης να λαμβάνονται υπόψη κατά την ερμηνεία δεδομένων από την παρούσα μελέτη. Πολλά από τα δεδομένα ήταν πολύ κοντά στο LOD και ο αριθμός των δειγμάτων ήταν περιορισμένος (ειδικά στους άνδρες AD). Συνολικά, τα αποτελέσματά μας δείχνουν κάποιες στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ της ομάδας ελέγχου και των ασθενών με νευροεκφυλιστικές ασθένειες, αλλά επισημαίνουν επίσης κάποιες αποκρίσεις που σχετίζονται με την ηλικία και το φύλο που θα μπορούσαν με τη σειρά τους να επηρεάσουν τον μεταβολισμό.
4. Υλικά και Μέθοδοι
4.1. Αντιδραστήρια
LC-MS grade methanol (Honeywell Riedel-de-Haën, Seelze, Germany), LC grade acetonitrile (ACN) (Merck, Darmstadt, Germany), MS grade formic acid (purity > 98%), ammonium formate (both from Fluka Sigma-Aldrich, Mannheim, Germany), and deionized water (>Ειδικότητα 18 MΩ cm−1) που καθαρίστηκαν σε σύστημα Ultramatic Type I (Wasserlab, Navarra, Ισπανία) χρησιμοποιήθηκαν για την προετοιμασία του δείγματος και την ανάλυση LC-MS/MS. Τα φυσίγγια Captiva EMR-λιπιδίου (3 mL) ελήφθησαν από την Agilent Technologies (Santa Clara, CA, USA).
Όλες οι μυκοτοξίνες (υλικό αναφοράς, καθαρότητα μεγαλύτερη ή ίση με 98 τοις εκατό ) αγοράστηκαν από τη Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, ΗΠΑ) ως διαλύματα ACN στις ακόλουθες συγκεντρώσεις AFM1, AFG2 και AFB2: 0. 5 μg/mL; AFG1 και AFB1: 2 μg/mL. OTA-d5 και OTB: 10 μg/mL. STER και DOM-1: 50 μg/mL. Τοξίνες NIV, DON, 3-ADON, 15-ADON, NEO, DAS, FUS-X, ZEA and T-2 και HT-2: 100 µg/mL. Τα υλικά αναφοράς αποθηκεύτηκαν στους -20 ◦C. Τα τυπικά μητρικά διαλύματα παρασκευάστηκαν σε ACN και αποθηκεύτηκαν στους -20 ◦C. Το διάλυμα εργασίας, το οποίο περιλαμβάνει όλες τις μυκοτοξίνες, παρασκευάστηκε με αραίωση των αντίστοιχων μεμονωμένων μητρικών διαλυμάτων σε ACN. Η σταθερότητα των τυποποιημένων και λειτουργικών μητρικών διαλυμάτων σε αυτές τις συνθήκες αποθήκευσης αξιολογήθηκε προηγουμένως [36].
4.2. Υποκects
Ελήφθη ενημερωμένη γραπτή συγκατάθεση από όλους τους συμμετέχοντες πριν από την ένταξη στη μελέτη. Συνολικά 94 άτομα, συμπεριλαμβανομένων 44 ασθενών με ήπια PD, 25 ασθενών με άνοια που δεν σχετίζεται με PD και 25 υγιείς μάρτυρες, προσλήφθηκαν από τη νευρολογική υπηρεσία στο νοσοκομείο San Pedro στη Λα Ριόχα (Ισπανία) με ηθική έγκριση ("Μελέτη των λιπιδικών προφίλ σε δείγματα ορού/πλάσματος από ασθενείς με νόσο του Πάρκινσον για την απόκτηση διαφορικού κλινικού προτύπου για σκοπούς διάγνωσης" Αναφ.: CEICLAR PI- 212, εγκεκριμένο στις 4 Απριλίου 2016) από την τοπική επιτροπή δεοντολογίας για πειραματισμούς στον άνθρωπο (CEImLar , Comité Ética de Investigación con medicamentos de La Rioja). Οι ασθενείς διαγνώστηκαν από έμπειρους νευρολόγους. Οι ασθενείς με PD αξιολογήθηκαν με την τροποποιημένη κλίμακα HY (Πίνακας S3) ενώ οι ασθενείς με άνοια που δεν σχετίζεται με PD αξιολογήθηκαν από το GDS (Πίνακας S4) για να προσδιοριστεί το στάδιο της νόσου. Οι υγιείς έλεγχοι περιλάμβαναν συζύγους ή άσχετους συντρόφους ασθενών χωρίς εμφανή ή γνωστή νευρολογική νόσο ή συννοσηρότητα.
4.3. Plasμαμά
Συλλογή Δείγματα αίματος ελήφθησαν σε ιατρική επίσκεψη. Το αίμα συλλέχθηκε σε σωλήνες επικαλυμμένους με EDTA των 4 mL (Vacutainer, αναφορά # 368171) και το πλάσμα διαχωρίστηκε εντός 2 ωρών με φυγοκέντρηση στα 2200x g για 15 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Το πλάσμα αφαιρέθηκε αμέσως και μεταφέρθηκε σε κωδικοποιημένα φιαλίδια σε κλάσματα των 0,2 mL για να αποφευχθούν επαναλαμβανόμενοι κύκλοι κατάψυξης/απόψυξης και στη συνέχεια αποθηκεύτηκε στους -80 ◦C. Λήφθηκε η κατάλληλη μέριμνα ώστε να αποφευχθεί η μόλυνση των δειγμάτων πλάσματος με κύτταρα ή συστατικά του σφαιριδίου που ελήφθη από τη φυγοκέντρηση.
4.4. Προετοιμασία δείγματοςtion
Η επεξεργασία πλάσματος πριν και μετά την ενζυματική υδρόλυση ήταν όπως περιγράφεται στους ArceLópez et al. (2020) [35,36]. Συνοπτικά, τα δείγματα πλάσματος (400 μL) προστέθηκαν σε φυσίγγιο λιπιδίου Captiva EMR, το οποίο περιείχε 1200 μL οξινισμένου ACN (1 τοις εκατό μυρμηκικό οξύ). Το κενό εφαρμόστηκε και μετά από 5 λεπτά, δύο κλάσματα των 400 μL (ένα για καθεμία από τις ομάδες μυκοτοξινών που θα διερευνηθούν) από το απόβλητο διαχωρίστηκαν και στη συνέχεια εξατμίστηκαν μέχρι ξηρού (60 ◦C).
Αυτή η μεθοδολογία χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση 19 ενώσεων (μυκοτοξίνες και μεταβολίτες), ταξινομημένες σε δύο ομάδες (σύμφωνα με τα διαφορετικά προγράμματα έκλουσης που απαιτούνται για τον χρωματογραφικό διαχωρισμό): DOM-1, AFG2, AFM1, AFG1, AFB2, AFB1 , OTB, ZEA, STER, OTA, T-2, HT-2 (ομάδα I) και NIV, DON, FUS-X, NEO, 3-ADON, 15-ADON και DAS (ομάδα II). Το υπόλειμμα ανασυστάθηκε με 200 μL κινητής φάσης στην αναλογία που αντιστοιχεί στην επιδιωκόμενη ομάδα μυκοτοξινών που θα αναλυθεί (40 τοις εκατό Β για την ομάδα Ι και 5 τοις εκατό Β για την ομάδα II).
Πριν από τη χρωματογραφική ανάλυση, το διάλυμα στροβιλίστηκε (5 λεπτά) και διηθήθηκε (PVDF, 0.45 μm, Merck Millipore, Ιρλανδία). Η διαδικασία για την ενζυματική υδρόλυση ήταν: 400 μL πλάσματος υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με 50 μL ενός μίγματος ενζύμων γλυκουρονιδάσης/σουλφατάσης (250 U/mL, 0,2 U/mL σε PBS· από Helix Pomatia (Sigma Aldrich, Mannheim, Γερμανία) Μετά την ανάδευση, τα δείγματα επωάστηκαν όλη τη νύχτα (37◦C) σε λουτρό νερού.Στη συνέχεια, ο καθαρισμός του δείγματος πλάσματος, χρησιμοποιώντας φυσίγγια Captiva-EMR, διεξήχθη παρόμοια με αυτόν που περιγράφηκε παραπάνω.
4.5. Ανάλυση LC/MS-MS
Η ανάλυση LC-MS/MS πραγματοποιήθηκε σε ένα σύστημα LC 1200 σειράς συνδεδεμένο με ένα 6410 Triple Quadrupole (QqQ) σε λειτουργία ESI( plus ), και τα δύο από την Agilent Technologies (Mannheim, Γερμανία). Ο διαχωρισμός πραγματοποιήθηκε στους 45 ◦C σε στήλη Ascentis Express C18, μεγέθους σωματιδίων 2,7 μm 150 × 2,1 mm (Supelco Analytical, St. Louis, MO, USA) με κινητή φάση που αποτελείται από 5 mM μυρμηκικό αμμώνιο και 0,1 τοις εκατό μυρμηκικό οξύ σε νερό (Α) και 5 mM μυρμηκικό αμμώνιο και 0,1 τοις εκατό μυρμηκικό οξύ σε 95:5 μεθανόλη/νερό (Β) σε συνθήκες βαθμίδωσης.
Ο όγκος έγχυσης ήταν 20 μL και η βαθμιδωτή έκλουση πραγματοποιήθηκε με ρυθμό ροής 0,4 mL/min. Οι παράμετροι απόκτησης δεδομένων περιγράφονται στους Arce-López et al. (2020) [36]. Τα δείγματα αναλύθηκαν και ομαδοποιήθηκαν σε αναλυτικές αλληλουχίες. Κάθε αλληλουχία περιλάμβανε, μαζί με τα δείγματα, οκτώ βαθμονομητές ταιριασμένους με μήτρα.
Αυτοί οι βαθμονομητές χρησιμοποιήθηκαν για την προετοιμασία καμπυλών βαθμονόμησης, οι οποίες χρησίμευσαν για τον ποσοτικό προσδιορισμό των μυκοτοξινών στα δείγματα που αναλύθηκαν με την ίδια σειρά. Τα κριτήρια αποδοχής για τις καμπύλες βαθμονόμησης ήταν: τουλάχιστον έξι σημεία, ένας συντελεστής προσδιορισμού (R2 ) > 0.99, και η εκ των υστέρων υπολογισμένη συγκέντρωση για κάθε βαθμονομητή που δεν διαφέρει (εκφράζεται ως RE) από την ονομαστική τιμή κατά περισσότερο από 15 τοις εκατό (20 τοις εκατό για το επίπεδο LOQ) [32]. Επιπλέον, οι χρόνοι συγκράτησης δεν πρέπει να διαφέρουν περισσότερο από 2,5 τοις εκατό μεταξύ δειγμάτων και βαθμονομητών [33]. Ανάλογα με τον όγκο του διαθέσιμου πλάσματος, δεν μπορούσαν να αναλυθούν όλα τα δείγματα μετά από ενζυματική επεξεργασία.
4.6. Επικύρωση αναλυτικής μεθόδου
Επικύρωση και των δύο διαδικασιών (πριν και μετά την ενζυματική υδρόλυση) σύμφωνα με τις κατευθυντήριες γραμμές του FDA και της ΕΕ όπως περιγράφεται στο Arce-Lopez et al. (202{{1{0}}) [35,36]. Οι τιμές LOD ήταν: 1,35 ng/mL για DOM-1. 0.35 ng/mL για AFG2, 0.18 ng/mL για AFM1. 0.07 ng/mL για AFG1 και AFB2. 0.04 ng/mL για AFB1. 2,70 ng/mL για HT-2; 0,40 ng/mL για OTA και OTB. 0,20 ng/mL για T-2 και STER. 1,80 ng/mL για ZEA; 9,10 ng/mL για NIV; 1,94 ng/mL για DON; 1,95 ng/mL για FUS-X; 0,18 ng/mL για NEO; 0,70 ng/mL για 3-ADON; 1,20 ng/mL για το 15-ADON και 0,15 ng/mL για το DAS.
Οι τιμές ανάκτησης (σε συνθήκες ενδιάμεσης ακρίβειας) πριν από την ενζυματική επεξεργασία ήταν από 68,8 τοις εκατό για το STER έως 97,6 τοις εκατό για το DAS (RDS Λιγότερο ή ίσο με 15 τοις εκατό για όλες τις μυκοτοξίνες) και δεν βρέθηκαν διαφορές μετά την ενζυματική επεξεργασία. Τα αποτελέσματα της μήτρας αξιολογήθηκαν επίσης πριν και μετά την ενζυματική αγωγή και δεν υπήρχαν διαφορές στις περισσότερες από τις μυκοτοξίνες, λαμβάνοντας τιμές RDS Λιγότερες ή ίσες με 15 τοις εκατό για όλες. Η σταθερότητα μετά από δύο κύκλους κατάψυξης-απόψυξης αξιολογήθηκε σε δύο επίπεδα συγκέντρωσης (6 και 30xLOQ) (τρεις επαναλήψεις ανά επίπεδο). Όλες οι μυκοτοξίνες ήταν σταθερές (RSD < 15 τοις εκατό) (Πίνακας S7).
4.7. Στατιστική Ανάλυση και Χειρισμός Δεδομένων
Κατά την επεξεργασία των αναλυτικών δεδομένων με στατιστικά στοιχεία, είναι σημαντικό να αποσαφηνιστεί το είδος της κατανομής που χαρακτήριζε το σύνολο δεδομένων. Οι περιγραφικοί δείκτες και οι δοκιμές πακέτων που θα χρησιμοποιηθούν είναι διαφορετικοί εάν έχουμε δεδομένα κανονικής διανομής ή μη κανονικής κατανομής. Η δοκιμή Shapiro–Wilk χρησιμοποιήθηκε για την επαλήθευση της κανονικής κατανομής των επιπέδων συγκέντρωσης μυκοτοξίνης που ερευνήθηκαν.
Καθώς η υπόθεση της κανονικότητας απορρίφθηκε, χρησιμοποιήθηκε ένα μη παραμετρικό (που δεν συνεπάγεται καμία υπόθεση κατανομής) σύνολο δοκιμών για τη στατιστική επεξεργασία. Για την αξιολόγηση των πιθανών διαφορών μεταξύ των επιπέδων συγκέντρωσης του OTA και του STER σε ομάδες και υποομάδες, χρησιμοποιήθηκε η δοκιμή αθροίσματος κατάταξης Wilcoxon (στατιστική δύο δειγμάτων Mann-Whitney) [49]. Στα στατιστικά, η δοκιμή αθροίσματος κατάταξης Wilcoxon είναι μια μη παραμετρική δοκιμή που χρησιμοποιείται για να ελεγχθεί εάν δύο δείγματα είναι πιθανό να προέρχονται από τον ίδιο πληθυσμό και επαληθεύει ότι για δύο τυχαία επιλεγμένες τιμές X και Y από τους δύο πληθυσμούς, η πιθανότητα X είναι μεγαλύτερη από το Υ ισούται με την πιθανότητα το Υ να είναι μεγαλύτερο από το Χ.
Για τον ίδιο σκοπό, χρησιμοποιήθηκε ένα τεστ Kruskal–Wallis όπου η ταξινόμηση μεταβλητών υποδηλώνει περισσότερες από μία κατανομές [50]. Για την αξιολόγηση της συσχέτισης μεταξύ των επιπέδων μυκοτοξίνης και της ηλικίας (ποσοτική μεταβλητή) χρησιμοποιήθηκε ο συντελεστής συσχέτισης κατάταξης Spearman (ή Spearman's rho). Όλες οι δοκιμές διεξήχθησαν με επίπεδο σημαντικότητας 5 τοις εκατό. Τα αποτελέσματα αναφέρονται μαζί με το επίπεδο στατιστικής σημαντικότητας και p-value. Όλες οι αναλύσεις διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό STATA14 (Stata/IC 14.0, Copyright 1985–2015 StataCorp LP). Όσον αφορά τον χειρισμό δεδομένων για τη ρύθμιση του συνόλου δεδομένων, οι ποσοτικές και ποιοτικές μεταβλητές αντιμετωπίστηκαν ως εξής: επίπεδο OTA και STER. Ποσοτική μεταβλητή, μη αρνητική μεταβλητή που εκφράζεται ως τιμές σε ng/mL.
Οι τιμές εκχωρήθηκαν ως εξής: Τιμή=0 ng/mL; όταν βρέθηκε το αναλυτικό αποτέλεσμα που προέκυψε από την ανάλυση
Χρησιμοποιήθηκε μια ποσοτική μεταβλητή για την κλίμακα της διάγνωσης των ασθενών με PD (Πίνακας S3). Επιπλέον, ορίστηκε μια δυαδική μεταβλητή (HY_d=0 και HY_d=1): HY_d=0 για PD ασθενείς που βαθμολόγησαν την κλίμακα HY στο εύρος 1-2 (όχι διαταραγμένα ορθοστατικά αντανακλαστικά). HY_d=1 για ασθενείς με PD που βαθμολόγησαν την κλίμακα HY στο εύρος 2,5–3 (μειωμένα ορθοστατικά αντανακλαστικά). Κλίμακα GDS. Χρησιμοποιήθηκε μια ποσοτική μεταβλητή για την κλίμακα της διάγνωσης των ασθενών με AD (Πίνακας S4).
Ο μηχανισμός του Cistanche αντιμετωπίζει τη νόσο του Αλτσχάιμερ και τη νόσο του Πάρκινσον
Το Cistanche είναι ένα παραδοσιακό κινέζικο βότανο που χρησιμοποιείται εδώ και πολλά χρόνια για τα πιθανά οφέλη του στην υγεία. Σε πρόσφατες μελέτες, βρέθηκε ότι το Cistanche μπορεί να έχει νευροπροστατευτικά αποτελέσματα και μπορεί να είναι αποτελεσματικό στη θεραπεία της νόσου του Alzheimer (AD) και της νόσου του Parkinson (PD).
Ο μηχανισμός του Cistanche στην αποτελεσματική θεραπεία της AD και της PD αποδίδεται στα ενεργά συστατικά του, όπως η εχινακοσίδη, η ακτεοσίδη και οι κιστανοσίδες. Αυτές οι ενώσεις πιστεύεται ότι έχουν αντιοξειδωτικές και αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες που μπορούν να μειώσουν το οξειδωτικό στρες και τη φλεγμονή στον εγκέφαλο, που σχετίζονται με την ανάπτυξη και την εξέλιξη νευροεκφυλιστικών ασθενειών.
Το Cistanche μπορεί επίσης να προωθήσει την ανάπτυξη των νευρικών κυττάρων και να βελτιώσει τη γνωστική λειτουργία αυξάνοντας τα επίπεδα του νευροτροφικού παράγοντα που προέρχεται από τον εγκέφαλο (BDNF), μιας πρωτεΐνης που παίζει καθοριστικό ρόλο στην ανάπτυξη και τη συντήρηση των νευρώνων. Επιπλέον, το Cistanche έχει αποδειχθεί ότι μειώνει τις αμυλοειδείς πλάκες, που είναι χαρακτηριστικά γνωρίσματα της νόσου του Αλτσχάιμερ, και μειώνει τη συσσώρευση της συνουκλεΐνης στον εγκέφαλο, η οποία σχετίζεται με τη νόσο του Πάρκινσον.
Συνολικά, τα πιθανά θεραπευτικά οφέλη του Cistanche στη θεραπεία της AD και της PD είναι πολλά υποσχόμενα, αλλά απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για να διαλευκανθούν οι ακριβείς μηχανισμοί δράσης του και να επιβεβαιωθεί η αποτελεσματικότητα και η ασφάλειά του σε κλινικές συνθήκες.
βιβλιογραφικές αναφορές
1Serrano-Pozo, A.; Frosch, MP; Masliah, Ε.; Hyman, BT Νευροπαθολογικές αλλοιώσεις στη νόσο του Alzheimer. Cold Spring Harb. Προοπτική. Med. 2011, 1, a006189. [CrossRef]
2. Fearnley, JM; Lees, AJ Γήρανση και νόσος του Πάρκινσον: Περιφερειακή επιλεκτικότητα μέλαινα ουσία. Brain 1991, 114, 2283–2301. [CrossRef]
3. Barber, RC Η γενετική της νόσου του Alzheimer. Scientifica (Κάιρο) 2012, 2012, 1–14. [CrossRef]
4. Izco, Μ.; Carlos, Ε.; Alvarez-Erviti, L. The two faces of Exosomes in Parkinson's disease: From Pathology to Therapy. Neuroscientist 2021, 107385842199000. [CrossRef] [PubMed]
5. Hou, Υ.; Dan, Χ.; Babbar, Μ.; Wei, Υ.; Hasselbalch, SG; Croteau, DL; Bohr, VA Η γήρανση ως παράγοντας κινδύνου για νευροεκφυλιστική νόσο. Nat. Rev. Neurol. 2019, 15, 565–581. [CrossRef] [PubMed]
6. Johnson, ME; Stecher, Β.; Labrie, V.; Brundin, L.; Brundin, P. Triggers, Facilitators, and Aggravators: Redefining the Parkinson's Disease Pathogenesis. Trends Neurosci. 2019, 42, 4–13. [CrossRef]
7. Wainaina, MN; Chen, Ζ.; Zhong, C. Περιβαλλοντικοί παράγοντες στην ανάπτυξη και εξέλιξη της όψιμης έναρξης της νόσου του Alzheimer. Neurosci. Ταύρος. 2014, 30, 253–270. [CrossRef]
8. Rahman, ΜΑ; Rahman, MS; Uddin, MJ; Mamum-Or-Rashid, ANM; Pang, M.-G.; Rhim, H. Εμφανιζόμενος κίνδυνος περιβαλλοντικών παραγόντων: Insight μηχανισμοί των νόσων του Alzheimer. Περιβάλλω. Sci. Ρύπανση. Res. 2020, 27, 44659–44672. [CrossRef] [PubMed]
9. Bush, AI The Metal Theory of Alzheimer's Disease. J. Alzheimer's Dis. 2012, 33, S277–S281. [CrossRef] 10. Moulton, PV; Yang, W. Ατμοσφαιρική ρύπανση, οξειδωτικό στρες και νόσος Alzheimer. J. Environ. Δημόσια Υγεία 2012, 2012, 472751. [CrossRef]
11. Li, Υ.; Fang, R.; Liu, Ζ.; Jiang, L.; Zhang, J.; Li, Η.; Liu, C.; Li, F. Η συσχέτιση μεταξύ της περιβαλλοντικής έκθεσης σε τοξικά φυτοφάρμακα και της νόσου του Alzheimer: Μια επιστημονικομετρική ανάλυση και ανάλυση οπτικοποίησης. Chemosphere 2021, 263, 128238. [CrossRef]
12. Fulop, Τ.; Witkowski, JM; Bourgade, Κ.; Khalil, Α.; Zerif, Ε.; Larbi, Α.; Hirokawa, Κ.; Pawelec, G.; Bocti, C.; Lacombe, G.; et al. Μπορεί μια υπόθεση μόλυνσης να εξηγήσει την υπόθεση βήτα-αμυλοειδούς της νόσου του Αλτσχάιμερ; Εμπρός. Γεραστικοί Νευροσκίοι. 2018, 10, 224. [CrossRef]
13. Βασέφη, Μ.; Ghaboolian-Zare, Ε.; Abedelwahab, Η.; Osu, A. Περιβαλλοντικές τοξίνες και εξέλιξη της νόσου του Alzheimer. Neurochem. Int. 2020, 141, 104852. [CrossRef]
14. Goldman, SM Περιβαλλοντικές τοξίνες και νόσος του Πάρκινσον. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2014, 54, 141–164. [CrossRef] [PubMed]
15. Marras, C.; Κονσερβοποίηση, CG; Goldman, SM Περιβάλλον, τρόπος ζωής και νόσος του Πάρκινσον: Επιπτώσεις για την πρόληψη την επόμενη δεκαετία. Mov. Διαταραχή. 2019, 34, 801–811. [CrossRef] [PubMed]
16. Van der Mark, Μ.; Brouwer, Μ.; Kromhout, Η.; Nijssen, Ρ.; Huss, Α.; Vermeulen, R. Σχετίζεται η χρήση φυτοφαρμάκων με τη νόσο του Πάρκινσον; Μερικές ενδείξεις για την ετερογένεια στα αποτελέσματα της μελέτης. Περιβάλλω. Προοπτική Υγείας. 2012, 120, 340–347. [CrossRef] [PubMed]
17. Gorell, JM; Johnson, CC; Rybicki, BA; Peterson, EL; Richardson, RJ Ο κίνδυνος της νόσου του Πάρκινσον με την έκθεση σε φυτοφάρμακα, τη γεωργία, το νερό των πηγαδιών και την αγροτική ζωή. Neurology 1998, 50, 1346-1350. [CrossRef]
18. Priyadarshi, Α.; Khuder, SA; Schaub, EA; Priyadarshi, SS Περιβαλλοντικοί παράγοντες κινδύνου και νόσος του Πάρκινσον: Μια μετα-ανάλυση. Περιβάλλω. Res. 2001, 86, 122–127. [CrossRef]
19. Mitchell, NJ; Bowers, Ε.; Hurburgh, C.; Wu, F. Πιθανές οικονομικές απώλειες στη βιομηχανία καλαμποκιού των ΗΠΑ από μόλυνση με αφλατοξίνες. Προσθήκη τροφίμων. Contam. Μέρος Α 2016, 33, 540–550. [CrossRef] [PubMed]
20. Marin, S.; Ramos, AJ; Cano-Sancho, G.; Sanchis, V. Μυκοτοξίνες: Εμφάνιση, τοξικολογία και αξιολόγηση έκθεσης. Food Chem. Toxicol. 2013, 60, 218–237. [CrossRef]
21. Janik, Ε.; Niemcewicz, Μ.; Ceremuga, Μ.; Stela, Μ.; Saluk-Bijak, J.; Siadkowski, Α.; Bijak, M. Μοριακές πτυχές των μυκοτοξινών—Ένα σοβαρό πρόβλημα για την ανθρώπινη υγεία. Int. J. ΜοΙ. Sci. 2020, 21, 8187. [CrossRef]
22. Logrieco, Α.; Miller, J.; Eskola, Μ.; Krska, R.; Ayalew, Α.; Bandyopadhyay, R.; Battilani, Ρ.; Bhatnagar, D.; Chulze, S.; De Saeger, S.; et al. Ο χάρτης μυκοτοξινών: Αύξηση της ευαισθητοποίησης και συντονισμένη δράση για την ελαχιστοποίηση της έκθεσης σε μυκοτοξίνες παγκοσμίως. Toxins (Basel) 2018, 10, 149. [CrossRef] 23. Ευρωπαϊκή Επιτροπή. Κανονισμός (ΕΚ) αριθ. 1881/2006 της Επιτροπής, της 19ης Δεκεμβρίου 2006, για τον καθορισμό ανώτατων επιπέδων για ορισμένες προσμείξεις στα τρόφιμα. Μακριά από. J. Eur. Ένωση 2006, 364, 5–24.
24. Ευρωπαϊκό Κοινοβούλιο. Ευρωπαϊκό Κοινοβούλιο και το Συμβούλιο της Οδηγίας ΕΕ του Ευρωπαϊκού Κοινοβουλίου και του Συμβουλίου της 7ης Μαΐου 2002 σχετικά με τις ανεπιθύμητες ουσίες στις ζωοτροφές 2002/32. Μακριά από. J. Eur. Communities 2002, L140, 10–22.
25. Ευρωπαϊκή Επιτροπή. Σύσταση της Επιτροπής της 17ης Αυγούστου 2006 σχετικά με την παρουσία δεοξυνιβαλενόλης, ζεαραλενόνης, ωχρατοξίνης Α, Τ-2 και HT-2 και φουμονισινών σε προϊόντα που προορίζονται για τη διατροφή των ζώων. Μακριά από. J. Eur. Ένωση 2006, L299, 7–9.
26. Eskola, Μ.; Κως, G.; Elliott, CT; Hajšlová, J.; Mayar, S.; Krska, R. Παγκόσμια μόλυνση των καλλιεργειών τροφίμων με μυκοτοξίνες: Εγκυρότητα της ευρέως αναφερόμενης «εκτίμησης του FAO» 25 τοις εκατό . Κριτ. Rev. Food Sci. Nutr. 2020, 60, 2773–2789. [CrossRef] [PubMed]
27. Escrivá, L.; Font, G.; Manyes, L.; Berrada, H. Μελέτες σχετικά με την παρουσία μυκοτοξινών σε βιολογικά δείγματα: Μια επισκόπηση. Toxins (Βασιλεία) 2017, 9, 251. [CrossRef]
28. Gurusankar, R.; Yenugadhati, Ν.; Krishnan, Κ.; Hays, S.; Haines, D.; Zidek, Α.; Kuchta, S.; Kinniburgh, D.; Gabos, S.; Mattison, D.; et al. Ο ρόλος της ανθρώπινης βιολογικής παρακολούθησης στην εκτίμηση κινδύνου για την υγεία. Int. J. Αξιολόγηση κινδύνου. Manag. 2017, 20, 136–197. [CrossRef]
29. Bredesen, DE Εισπνεόμενη νόσος Alzheimer: Μια μη αναγνωρισμένη—και θεραπεύσιμη—επιδημία. Aging (Albany NY) 2016, 8, 304–313. [CrossRef]
30. Martins, I. Ο υπερσιτισμός καθορίζει τη ρύθμιση του LPS της νευροτοξικότητας που προκαλείται από μυκοτοξίνες σε νευροεκφυλιστικές ασθένειες. Int. J. ΜοΙ. Sci. 2015, 16, 29554–29573. [CrossRef] [PubMed]
31. Izco, Μ.; Vettorazzi, Α.; Forcen, R.; Blesa, J.; de Toro, Μ.; Alvarez-Herrera, Ν.; Cooper, JM; Gonzalez-Peñas, Ε.; Lopez de Cerain, Α.; Alvarez-Erviti, L. Η από του στόματος υποχρόνια έκθεση στη μυκοτοξίνη ωχρατοξίνη Α επάγει βασικά παθολογικά χαρακτηριστικά της νόσου του Πάρκινσον σε ποντίκια έξι μήνες μετά το τέλος της θεραπείας. Food Chem. Toxicol. 2021, 152, 112164. [CrossRef]
32. Κέντρο Αξιολόγησης και Έρευνας Φαρμάκων (FDA). Οδηγίες επικύρωσης βιοαναλυτικής μεθόδου για τη βιομηχανία. 2018. Διαθέσιμο στο διαδίκτυο: https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf (πρόσβαση στις 20 Νοεμβρίου 2019).
33. Ευρωπαϊκή Επιτροπή. Απόφαση της Επιτροπής, της 12ης Αυγούστου 2002, για την εφαρμογή της οδηγίας 96/23/ΕΚ του Συμβουλίου σχετικά με την απόδοση των αναλυτικών μεθόδων και την ερμηνεία των αποτελεσμάτων (2002/657/ΕΚ). Μακριά από. J. Eur. Communities 2002, 221, 8–36.
34. EFSA. Διαχείριση δεδομένων με αριστερή λογοκρισία στην αξιολόγηση της διατροφικής έκθεσης σε χημικές ουσίες. EFSA J. 2010, 8, 1–96.
35. Arce-López, B.; Lizarraga, Ε.; Irigoyen, Á.; González-Peñas, E. Παρουσία 19 μυκοτοξινών στο ανθρώπινο πλάσμα σε μια περιοχή της Βόρειας Ισπανίας. Toxins (Βασιλεία) 2020, 12, 750. [CrossRef]
36. Arce-López, B.; Lizarraga, Ε.; Flores-Flores, Μ.; Irigoyen, Á.; González-Peñas, E. Ανάπτυξη και επικύρωση μεθοδολογίας βασισμένης στον καθαρισμό λιπιδίων Captiva EMR και στην ανάλυση LC-MS/MS για τον ταυτόχρονο προσδιορισμό των μυκοτοξινών στο ανθρώπινο πλάσμα. Talanta 2020, 206, 120193. [CrossRef]
37. Remiro, R.; González-Peñas, Ε.; Lizarraga, Ε.; López de Cerain, A. Ποσοτικοποίηση της ωχρατοξίνης Α και πέντε αναλόγων σε ερυθρούς οίνους Navarra. Food Control 2012, 27, 139–145. [CrossRef]
38. Yang, S.; Zhang, Η.; De Saeger, S.; De Boevre, Μ.; Sun, F.; Zhang, S.; Cao, Χ.; Wang, Z. In vitro και in vivo μεταβολισμός της ωχρατοξίνης Α: Μια συγκριτική μελέτη χρησιμοποιώντας υβριδική φασματομετρία μάζας υγρής χρωματογραφίας υπερ-απόδοσης-τετραπόλου/χρόνου πτήσης. Πρωκτικός. Bioanal. Chem. 2015, 407, 3579–3589. [CrossRef] [PubMed]
39. Muñoz, Κ.; Cramer, Β.; Dopstadt, J.; Humpf, HU; Degen, GH Στοιχεία συζυγών ωχρατοξίνης Α σε δείγματα ούρων από βρέφη και ενήλικες. Mycotoxin Res. 2017, 33, 39–47. [CrossRef] [PubMed]
40. Vidal, Α.; Mengelers, Μ.; Yang, S.; De Saeger, S.; De Boevre, M. Mycotoxin Biomarkers of Exposure: A Comprehensive Review. Σύνθ. Rev. Food Sci. Food Saf. 2018, 17, 1127–1155. [CrossRef]
41. Πίνακας EFSA CONTAM (Πάνελ της EFSA για τους ρύπους στην τροφική αλυσίδα). Schrenk, D.; Bodin, L.; Chipman, JK; del Mazo, J.; Grasl-Kraupp, Β.; Hogstrand, C.; Hoogenboom, L.; Leblanc, J.; Nebbia, CS; et al. Εκτίμηση κινδύνου της ωχρατοξίνης Α στα τρόφιμα. EFSA J. 2020, 18, 06113.
42. Arce-López, B.; Lizarraga, Ε.; Vettorazzi, Α.; González-Peñas, E. Ανθρώπινη βιοπαρακολούθηση μυκοτοξινών στο αίμα, στο πλάσμα και στον ορό τα τελευταία χρόνια: Μια ανασκόπηση. Toxins (Βασιλεία) 2020, 12, 147. [CrossRef]
Beatriz Arce-López 1, Lydia Alvarez-Erviti 2, Barbara De Santis 3, María Izco 2, Silvia López-Calvo 4, Maria Eugenia Marzo-Sola 4, Francesca Debegnach 3, Elena Lizarraga, 6,5 López Elena González-Peñas 1,† και Ariane Vettorazzi 5,6,* ,†
1 Department of Pharmaceutical Technology and Chemistry, Research Group MITOX, School of Pharmacy and Nutrition, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona, Spain; barce@alumni.unav.es (BA-L.); elizarraga@unav.es (EL); mgpenas@unav.es (EG-P.)
2 Laboratory of Molecular Neurobiology, Center for Biomedical Research of La Rioja (CIBIR), Piqueras 98, 3rd Floor, 26006 Logroño, Spain; laerviti@riojasalud.es (LA-E.); mizco@riojasalud.es (MI)
3 National Reference Laboratory for Mycotoxins and Plant Toxins, Istituto Superiore di Sanità, 00161 Roma, Italy; barbara.desantis@iss.it (BDS); francesca.debegnach@iss.it (FD)
4 Servicio de Neurología, Hospital San Pedro, Piqueras 98, 26006 Logroño, Ισπανία; slcalvo@riojasalud.es (SL-C.); memarzo@riojasalud.es (MEM-S.)
5 Department of Pharmacology and Toxicology, Research Group MITOX, School of Pharmacy and Nutrition, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona, Spain; acerain@unav.es 6 IdiSNA, Navarra Institute for Health Research, 31008 Pamplona, Spain
