Θα επηρεάσει το νικέλιο τα νεφρά;

Για περισσότερες πληροφορίες:ali.ma@wecistanche.com

Μέρος Ⅱ: Το νικέλιο προκαλεί αυτοφαγία μέσω των οδών PI3K/AKT/mTOR και AMPK σε νεφρό ποντικού

Heng Yin, Zhicai Zuo & et al.

ΑΦΗΡΗΜΕΝΗ

ΝικέλιοΤο (Ni), ένα ευρέως διαδεδομένο μέταλλο, είναι ένας σημαντικός ρύπος στο περιβάλλον. παρόλο που τονεφρόείναι ένας κρίσιμος στόχος του Ni (Νικέλιο) η τοξικότητα, οι πληροφορίες για την αυτοφαγία και οι δυνητικοί μηχανισμοί της νεφρικής τοξικότητας που προκαλείται από Ni δεν περιγράφονται ακόμη ελάχιστα. Όπως ανακαλύψαμε, το NiCl2 θα μπορούσε να προκαλέσει νεφρική βλάβη, συμπεριλαμβανομένης μείωσης του νεφρικού βάρους, νεφρικών ιστολογικών αλλοιώσεων και βλάβης της νεφρικής λειτουργίας. Σύμφωνα με τα ληφθέντα αποτελέσματα, το NiCl2 θα μπορούσε προφανώς να αυξήσει την αυτοφαγία, η οποία χαρακτηρίστηκε από την αύξηση της έκφρασης LC3 και τη μείωση της έκφρασης του p62. Εν τω μεταξύ, το αποτέλεσμα της παρατήρησης υπερδομής έδειξε αυξημένο αριθμό αυτολυσοσωμάτων στονεφρόNiCl2 (νικέλιο χλωριούχο 2)-θεραπευμένα ποντίκια. Επιπλέον, το NiCl2 αύξησε τα επίπεδα mRNA και πρωτεΐνης των πρωτεϊνών ροής αυτοφαγίας συμπεριλαμβανομένων των Beclin1, Atg5, Atg12, Atg16L1, Atg7 και Atg3. Επιπλέον, το NiCl2 προκάλεσε αυτοφαγία μέσω των οδών AMPK και PI3K/AKT/mTOR που παρουσίαζαν μειωμένα επίπεδα έκφρασης των p-PI3K, p-AKT και p-mTOR και ρυθμίστηκαν προς τα πάνω επίπεδα έκφρασης των p-AMPK και p-ULK1. Συνοπτικά, τα παραπάνω αποτελέσματα υποδεικνύουν συμμετοχή της αυτοφαγίας σε νεφρική βλάβη που προκαλείται από NiCl2 και της επαγόμενης από NiCl2 αυτοφαγίας μέσω των οδών PI3K/AKT/mTOR και AMPK σε ποντίκιανεφρά.

Κάντε κλικ στο Cistanhe για νεφρό

ΚΑΝΤΕ ΚΛΙΚ ΕΔΩ ΓΙΑ ΜΕΡΟΣ Ⅰ

Συζήτηση

Όπως η εκτεταμένη περιβαλλοντική ρύπανση, η τοξικολογία του Ni (Νικέλιο)έχει επιβεβαιωθεί, ωστόσο, οι υποκείμενοι μηχανισμοί είναι ακόμη σε μεγάλο βαθμό ασαφείς. Όπως όλοι γνωρίζουμε, τονεφρόείναι ένα κύριο όργανο-στόχος όπου το Ni (Νικέλιο)συσσωρεύεται και εμφανίζεται μέθη. Σε προηγούμενες μελέτες μας, το οξειδωτικό στρες, η διακοπή του κυτταρικού κύκλου, η φλεγμονή και η απόπτωση εμπλέκονταν στο NiCl2 (νικέλιοχλωριούχο 2)τοξικολογία στα κοτόπουλα κρεοπαραγωγήςνεφρό(Guo et al., 2014, 2015, 2016a, 2016b, 2019). Η αυτοφαγία παίζει κρίσιμο ρόλο στην κυτταρική ομοιόσταση και η μη φυσιολογική αυτοφαγία μπορεί να προκαλέσει απόπτωση (Denton and Kumar, 2019). Ωστόσο, δεν είναι σαφές εάν προκλήθηκε αυτοφαγία στονεφρόαπό τον Ni (Νικέλιο). Στην τρέχουσα έρευνα, τα ερευνητικά αποτελέσματα έδειξαν ενίσχυση της νεφρικής αυτοφαγίας από περίσσεια NiCl2. Σε αυτή τη μελέτη, η αύξηση του LC3-II/LC3-I ενώ η μείωση του p62 δείχνει ότι NiCl2 (νικέλιοχλωριούχο 2)θεραπεία θα μπορούσε να προκαλέσει αυτοφαγία. Εν τω μεταξύ, τα αποτελέσματα παρατήρησης υπερδομής έδειξαν ότι τα αυτολυσοσώματα αυξήθηκαν σε εκτεθειμένα σε Niνεφρότων ποντικών. Ομοίως, έχει αποδειχθεί ότι τα βαρέα μέταλλα (Cd, Cu, As, Pb) μπορούν να προκαλέσουν αυτοφαγία στηννεφρό(Gu et al., 2018; Shi et al., 2019; Q. Guo et al., 2020; H. Guo et al., 2020; Wan et al., 2020). Η διαδικασία της αυτοφαγίας ρυθμίζεται από διάφορα εξελικτικά διατηρημένα γονίδια που ονομάζονται γονίδια που σχετίζονται με την αυτοφαγία (ATG). Για περαιτέρω διερεύνηση εάν NiCl2 (νικέλιοχλωριούχο 2)επηρεάζει τις πρωτεΐνες που εμπλέκονται στη ροή της αυτοφαγίας, ελέγξαμε τα επίπεδα πρωτεϊνών που σχετίζονται με την αυτοφαγία, όπως Beclin1, Atg5, Atg12, Atg16L1, Atg7 και Atg3. Το Beclin1, ένα σημαντικό γονίδιο που διευκολύνει την έναρξη της αυτοφαγίας, εμπλέκεται κατά την έναρξη της αυτοφαγίας (Wargasetia et al., 2015). Το σύμπλεγμα Atg12-Atg5-Το σύμπλεγμα Atg16L1 ως βασικό συστατικό για το σχηματισμό αυτοφαγοσωμάτων είναι υπέρ της επέκτασης των φαγοφόρων (Lystad et al., 2019). Το LC3-I ενεργοποιείται από το ATG7 και συζευγνύεται με τη φωσφατιδυλαιθανολαμίνη από το ATG3 για το σχηματισμό του LC3-II, το οποίο αναφέρεται ως λιπίδωση LC3 (Tan et al., 2020). Επιπλέον, το σύμπλεγμα ATG12-ATG3 βρέθηκε ότι παίζει σημαντικό ρόλο στις βασικές ροές αυτοφαγίας, στην ενδολυσοσωμική μεταφορά και στις λειτουργίες των ενδοσωμάτων στην ύστερη πυρηνική περίοδο (Murrow et al., 2015). Σε αυτή την έρευνα, τα αποτελέσματα έδειξαν αυξημένα επίπεδα mRNA και πρωτεΐνης των Beclin1, Atg5, Atg12, Atg7, Atg16L1 και Atg3 μετά από θεραπεία με NiCl2.

Αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι NiCl2 (νικέλιοχλωριούχο 2)θα μπορούσε να προκαλέσει νεφρική αυτοφαγία μέσω της ανοδικής ρύθμισης των πρωτεϊνών που σχετίζονται με την αυτοφαγία. Παρόμοια αποτελέσματα παρατηρήθηκαν επίσης σε πρόσφατες μελέτες άλλων βαρέων μετάλλων. Οι Zou et al. (2020) ανέφεραν ότι το Pb και το Cd θα μπορούσαν να αυξήσουν τις εκφράσεις των πρωτεϊνών που σχετίζονται με την αυτοφαγία (Beclin-1, Atg5 και Atg7) στο ήπαρ αρουραίων. Wan et al. (2020) έχουν δείξει ότι η μακροπρόθεσμη έκθεση σε Cu θα μπορούσε να προκαλέσει αυτοφαγία και να ρυθμίσει προς τα πάνω την έκφραση των Beclin1 και Atg5 στηννεφρότων αρουραίων. Το mTOR, ένας σημαντικός αρνητικός ρυθμιστής για την αυτοφαγία, είναι υπεύθυνος για την εξάντληση των θρεπτικών ουσιών, τη χαμηλή ενέργεια ή το οξειδωτικό στρες (Parzych και Klionsky, 2014). Αναστέλλοντας το σύμπλεγμα ULK1-ATG13-FIP200, ιδιαίτερα μέσω της ανασταλτικής φωσφορυλίωσης του ULK1, το ενεργό mTOR van καταστέλλει την αυτοφαγία (Park et al., 2016). Επιπλέον, το ULK1 θα μπορούσε επίσης να φωσφορυλιώσει το Beclin 1, με αποτέλεσμα μια κανονική επαγωγή οδού αυτοφαγίας (Russell et al., 2013). Στην τρέχουσα έρευνα, η μείωση του p-mTOR και η αύξηση του p-ULK1 συνεπάγεται την ικανότητα του NiCl2 (νικέλιοχλωριούχο 2)στην αναστολή των δραστηριοτήτων mTOR. Αυτό με τη σειρά του ενεργοποιεί το ULK1 για την έναρξη της αυτοφαγίας. Σύμφωνα με τα αποτελέσματα που λαμβάνονται εδώ, οι Huang et al. (2016) έχουν επίσης προτείνει έκθεση σε Ni που προκαλεί αυτοφαγία σε Beas-2Β κύτταρα αναστέλλοντας το mTOR. Έχει θεωρηθεί ότι η κλασική οδός PI3K/AKT-mTOR χρησιμεύει ως σημαντικός αρνητικός ρυθμιστής στο σχηματισμό αυτοφαγοσωμάτων. Το PI3K ελέγχει διάφορες κυτταρικές διεργασίες όπως η ανάπτυξη, η επιβίωση, ο μεταβολισμός, η απόπτωση, η αυτοφαγία και ούτω καθεξής (Xu et al., 2020). Το AKT είναι ένας κύριος τελεστής PI3K. Η φωσφορυλίωση του συμπλέγματος κονδυλώδους σκλήρυνσης 2 (TSC2) με ενεργοποιημένο AKT εμποδίζει τον σχηματισμό ανασταλτικών ετεροδιμερών TSC1/TSC2, ενεργοποιώντας στη συνέχεια το σύμπλοκο TOR 1 (TORC1), ένα σύμπλεγμα mTOR με διακριτές λειτουργίες (Wang et al., 2017). Σε αυτή τη μελέτη, η προς τα κάτω ρύθμιση των p-PI3K και p-AKT υποδεικνύει ότι η οδός PI3K/AKT-mTOR έχει συμμετοχή στην αυτοφαγία που προκαλείται από NiCl2. Επιπλέον, πρόσφατη έρευνα υποδηλώνει ότι η αρνητική ρύθμιση του mTOR και η ενεργοποίηση του AMPK πιθανώς προκαλούν αυτοφαγία (Yang et al., 2018). Επιπλέον, η AMPK μπορεί να φωσφορυλιώσει απευθείας το ULK1 για να προκαλέσει αυτοφαγία (Gwinn et al., 2008). Τα ευρήματα της έρευνας έδειξαν ότι τα επίπεδα πρωτεΐνης του p-AMPK αυξάνονται από το NiCl2, γεγονός που αποκαλύπτει ότι το NiCl2 ενεργοποιεί την οδό AMPK/mTOR στονεφρό.

Συνοπτικά, τα ευρήματα της έρευνας έδειξαν τη συμμετοχή της αυτοφαγίας στο NiCl2 (νικέλιοχλωριούχο 2)-προκαλούμενη νεφρική βλάβη και NiCl2 (νικέλιοχλωριούχο 2)επαγόμενη αυτοφαγία μέσω οδών AMPK και PI3K/AKT/mTOR σε ποντίκινεφρά. Ωστόσο, ο ρόλος της αυτοφαγίας στην Ni-επαγόμενηνεφρόη τοξικότητα θα πρέπει να διερευνηθεί περαιτέρω.

Το Cistanche θεραπεύει το νικέλιο προκαλούσε νεφρικές παθήσεις

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Cao, W., Li, J., Yang, K., Cao, D., 2021. Μια επισκόπηση της αυτοφαγίας: μηχανισμός, ρύθμιση και πρόοδος έρευνας.

2. Ταύρος. Καρκίνος. Chen, CY, Lin, TK, Chang, YC, Wang, YF, Shyu, HW, Lin, KH, Chou, MC, 2010.Νικέλιο(II)-επαγόμενο οξειδωτικό στρες, απόπτωση, διακοπή G2/M και γονοτοξικότητα σε φυσιολογικούς αρουραίουςνεφρόκύτταρα. J. Toxicol. Περιβάλλω. Health A 73, 529–539.

3. Das, KK, Reddy, RC, Bagoji, IB, Das, S., Bagali, S., Mullur, L., Khodnapur, JP, Biradar, MS, 2018. Η κύρια έννοια τουνικέλιοτοξικότητα - μια επισκόπηση. J. Basic. Clin. Physiol. Pharmacol. 30, 141–152.

4. Deng, J., Guo, H., Cui, H., Fang, J., Zuo, Z., Deng, J., Wang, X., Zhao, L., 2016. Οξειδωτικό στρες και φλεγμονώδεις αποκρίσεις που εμπλέκονται στη διατροφήνικέλιο χλωριούχοΠνευμονική τοξικότητα που προκαλείται από (NiCl2) σε κοτόπουλα κρεατοπαραγωγής. Toxicol. Res. 5, 1421–1433. Denton, D., Kumar, S., 2019. Κυτταρικός θάνατος που εξαρτάται από την αυτοφαγία. Διαφέρει ο κυτταρικός θάνατος. 26, 605–616.

5. Dodson, M., Darley-Usmar, V., Zhang, J., 2013. Cellular metabolic and autophagic pathways: traffic control by redox signaling. Free Radic. Biol. Med. 63, 207–221.

6. Elangovan, P., Ramakrishnan, R., Amudha, K., Jalaludeen, AM, Sagaran, GK, Babu, FR, Pari, L., 2018. Ευεργετική προστατευτική δράση της τροξερουτίνης στηννικέλιο-προκληθείσα νεφρική δυσλειτουργία σε αρουραίους Wistar. J. Environ. Pathol. Toxicol. Oncol. 37, 1–14.

7. Fang, J., Yin, H., Zheng, Z., Zhu, P., Peng, X., Zuo, Z., Cui, H., Zhou, Y., Ouyang, P., Geng, Y., Deng, J., 2018. Οι μοριακοί μηχανισμοί του προστατευτικού ρόλου του Se στη διακοπή φάσης G2/M της νήστιδας που προκαλείται από το AFB1. Biol. Ιχνοστοιχείο. Res. 181, 142–153.

8. Gathman, KH, Al-Karkhi, IHT, Jaffar AL-Mulla, EA, 2013. Ηπατική τοξικότητανικέλιοχλωριούχο σε ποντίκια. Res. Chem. Ενδιάμεσος. 39, 2537–2542. Genchi, G., Carocci, A., Lauria, G., Sinicropi, MS, Catalano, A., 2020.Νικέλιο: ανθρώπινη υγεία και περιβαλλοντική τοξικολογία. Int. J. Environ. Res. Δημόσιο. Υγεία 17, 679.

9. Gomez-Sanchez, R., Yakhine-Diop, SM, Rodriguez-Arribas, M., Bravo-San, PJ, Martinez-Chacon, G., Uribe-Carretero, E., Pinheiro, DCD, Pizarro-Estrella, E. , Fuentes, JM, Gonzalez-Polo, RA, 2016. mRNA και πρωτεϊνικό σύνολο δεικτών αυτοφαγίας (LC3 και p62) σε αρκετές κυτταρικές σειρές. Data Brief 7, 641–647.

10. Gong, L., Pan, Q., Yang, N., 2020. Αυτοφαγία και ρύθμιση φλεγμονής σεοξεία νεφρική βλάβη. Εμπρός. Physiol. 11, 576463.

11. Gu, X., Qi, Y., Feng, Z., Ma, L., Gao, K., Zhang, Y., 2018. Ο μόλυβδος (Pb) προκάλεσε μιτοφαγία εξαρτώμενη από ATM μέσω οδού PINK1/Parkin. Toxicol. Κάτοικος της Λατβίας. 291, 92–100.

12. Guo, H., Chen, L., Cui, H., Peng, X., Fang, J., Zuo, Z., Deng, J., Wang, X., Wu, B., 2016a. Η πρόοδος της έρευνας σε μονοπάτια τουνικέλιο-προκαλούμενη απόπτωση. Int. J. ΜοΙ. Sci. 17, 10.

13. Guo, H., Cui, H., Fang, J., Zuo, Z., Deng, J., Wang, X., Zhao, L., Chen, K., Deng, J., 2016β.Νικέλιοχλωρίδιο (NiCl2) στην ηπατική τοξικότητα: απόπτωση, διακοπή του κυτταρικού κύκλου G2/M και φλεγμονώδης απόκριση. Γήρανση 8, 3009–3027.

14. Guo, H., Cui, H., Peng, X., Fang, J., Zuo, Z., Deng, J., Wang, X., Wu, B., Chen, K., Deng, J., 2015. Διαμόρφωση της οδού PI3K/Akt και πρωτεϊνών της οικογένειας Bcl-2 που εμπλέκονται στη σωληναριακή απόπτωση του κοτόπουλου που προκαλείται απόνικέλιοχλωρίδιο (NiCl2). Int. J. ΜοΙ. Sci. 16, 22989–23011.

15. Guo, H., Liu, H., Jian, Z., Cui, H., Fang, J., Zuo, Z., Deng, J., Li, Y., Wang, X., Zhao, L., He, R., Tang, H., 2020a. Ανοσοτοξικότητα τουνικέλιο: παθολογικές και τοξικολογικές επιδράσεις. Ecotoxicol. Περιβάλλω. Saf. 203, 111006.

16. Guo, H., Liu, H., Wu, H., Cui, H., Fang, J., Zuo, Z., Deng, J., Li, Y., Wang, X., Zhao, L., 2019.Νικέλιομηχανισμός καρκινογένεσης: βλάβη του DNA. Int. J. ΜοΙ. Sci. 20, 4690.

17. Guo, H., Wu, B., Cui, H., Peng, X., Fang, J., Zuo, Z., Deng, J., Wang, X., Deng, J., Yin, S., 2014. NaCl 2-υπορυθμισμένη έκφραση mRNA του αντιοξειδωτικού ενζύμου προκαλεί οξειδωτική βλάβη στα κοτόπουλα κρεατοπαραγωγήςνεφρό. Biol. Ιχνοστοιχείο. Res. 162, 288–295.

18. Guo, Q., Sun, Z., Niu, R., Manthari, RK, Yuan, M., Yang, K., Cheng, M., Gong, Z., Wang, J., 2020. Επίδραση αρσενικού και /ή έκθεση κύησης σε φθόριο σε νεφρική αυτοφαγία σε απογόνους ποντικούς. Chemosphere 241, 124861.

19. Gwinn, DM, Shackelford, DB, Egan, DF, Mihaylova, MM, Mery, A., Vasquez, DS, Turk, BE, Shaw, RJ, 2008. Η φωσφορυλίωση αρπακτικών με AMPK μεσολαβεί σε ένα μεταβολικό σημείο ελέγχου. ΜοΙ. Cell 30, 214-226.

20. Hasanein, P., Felegari, Z., 2017. Χηλικές επιδράσεις της καρνοσίνης στη βελτίωσηνικέλιο-επαγόμενη νεφροτοξικότητα σε αρουραίους.Μπορεί. J. Physiol. Pharmacol. 95, 1426–1432.

21. Huang, H., Zhu, J., Li, Y., Zhang, L., Gu, J., Xie, Q., Jin, H., Che, X., Li, J., Huang, C., 2016. Η ανοδική ρύθμιση του SQSTM1/p62 συμβάλλει στηννικέλιο-προκαλούμενος κακοήθης μετασχηματισμός ανθρώπινων βρογχικών επιθηλιακών κυττάρων. Autophagy 12, 1687–1703.

22. Lee, SH, Choi, JG, Cho, MH, 2001. Απόπτωση, έκφραση bcl2 και αναλύσεις κυτταρικού κύκλου σενικέλιοΚανονικός αρουραίος που υποβλήθηκε σε αγωγή με (II).νεφρόκύτταρα. J. Korean Med. Sci. 16, 165–168.

23. Li, W., Zhang, L., 2019. Ρύθμιση ATG και έναρξη αυτοφαγίας. Adv. Exp. Med. Biol. 1206, 41–65.

24. Livak, KJ, Schmittgen, TD, 2001. Ανάλυση δεδομένων σχετικής γονιδιακής έκφρασης χρησιμοποιώντας ποσοτική PCR σε πραγματικό χρόνο και τις μεθόδους 2∃ ΔΔCT. Μέθοδοι 25, 402-408.

25. Lystad, AH, Carlsson, SR, Simonsen, A., 2019. Προς τη λειτουργία του συμπλέγματος ATG12-ATG5-ATG16L1 θηλαστικών στην αυτοφαγία και τις σχετικές διεργασίες. Autophagy 15, 1485–1486.

26. Martin, LM, Jeyabalan, N., Tripathi, R., Panigrahi, T., Johnson, PJ, Ghosh, A., Mohan, RR, 2019. Αυτοφαγία στην υγεία και τη νόσο του κερατοειδούς: μια συνοπτική ανασκόπηση. Ocul. Σπάζοντα κύματα παραλίας. 17, 186–197.

27. Murrow, L., Malhotra, R., Debnath, J., 2015. Το ATG12-ATG3 αλληλεπιδρά με το Alix για την προώθηση της βασικής αυτοφαγικής ροής και της όψιμης ενδοσωμικής λειτουργίας. Nat. Cell ΒίοΙ. 17, 300–310.

28. Nishimura, T., Tooze, SA, 2020. Αναδυόμενοι ρόλοι πρωτεϊνών ATG και λιπιδίων μεμβράνης στον σχηματισμό αυτοφαγοσωμάτων. Cell Discov. 6, 32.

29. Park, D., Jeong, H., Lee, MN, Koh, A., Kwon, O., Yang, YR, Noh, J., Suh, PG, Park, H., Ryu, SH, 2016. Η ρεσβερατρόλη προκαλεί αυτοφαγία με άμεση αναστολή του mTOR μέσω του ανταγωνισμού ATP. Sci. Rep. 6, 21772.

30. Parzych, KR, Klionsky, DJ, 2014. Μια επισκόπηση της αυτοφαγίας: μορφολογία, μηχανισμός και ρύθμιση. Αντιοξειδωτικό. Σήμα οξειδοαναγωγής. 20, 460–473.

31. Russell, RC, Tian, ​​Y., Yuan, H., Park, HW, Chang, YY, Kim, J., Kim, H., Neufeld, TP, Dillin, A., Guan, KL, 2013. Το ULK1 προκαλεί αυτοφαγία με φωσφορυλίωση του Beclin-1 και ενεργοποίηση της λιπιδικής κινάσης VPS34. Nat. Cell ΒίοΙ. 15, 741–750.

32. Schrenk, D., Bignami, M., Bodin, L., Chipman, JK, Del, MJ, Grasl-Kraupp, B., Hogstrand, C., Hoogenboom, LR, Leblanc, JC, Nebbia, CS, Ntzani, E ., Petersen, A., Sand, S., Schwerdtle, T., Vleminckx, C., Wallace, H., Guerin, T., Massanyi, P., Van Loveren, H., Baert, K., Gergelova, P., Nielsen, E., 2020. Ενημέρωση της εκτίμησης κινδύνου τουνικέλιοσε τρόφιμα και πόσιμο νερό. EFSA J. 18, e6268.

33. Shi, Q., Jin, X., Fan, R., Xing, M., Guo, J., Zhang, Z., Zhang, J., Xu, S., 2019. miR με μεσολάβηση καδμίου{{2} }a-GRP78 οδηγεί σε εξαρτώμενη από JNK αυτοφαγία στο κοτόπουλονεφρά. Chemosphere 215, 710-715.

34. Son, Y., Pratheeshkumar, P., Divya, SP, Zhang, Z., Shi, X., 2017. Ο παράγοντας 2 που σχετίζεται με τον ερυθροειδές 2-πυρηνικό παράγοντα ενισχύει την καρκινογένεση καταστέλλοντας την απόπτωση και προάγοντας την αυτοφαγία στηννικέλιο-μετασχηματισμένα κύτταρα. J. Biol. Chem. 292, 8315–8330.

35. Su, P., Aschner, M., Chen, J., Luo, W., 2017. Metals and Autophagy in Neurotoxicity, Biometals in Neurodegenerative Diseases. Elsevier, σ. 377–398.