Μέρος 2: Η καλπαστατίνη αποτρέπει τον τραυματισμό των ποδοκυττάρων που προκαλείται από την αγγειοτενσίνη μέσω της διατήρησης της αυτοφαγίας

Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Κάντε κλικ εδώ για το Μέρος 1

Κάντε κλικ εδώ για το Μέρος 3

Το Angel plus HSD ενεργοποιεί τη δραστηριότητα της καλπαΐνης στα ποδοκύτταρα που συμβάλλει στον αποκλεισμό της αυτοφαγίας

Καθώς η δραστηριότητα της καλπαΐνης βρέθηκε (i) να ενεργοποιείται από τον Angel σε διάφορους κυτταρικούς τύπους και (ii) να διασπά αρκετές πρωτεΐνες που σχετίζονται με την αυτοφαγία, αναρωτηθήκαμε αν ο αποκλεισμός αυτοφαγίας που προκαλείται από το AngII συν HSD μπορεί να αποδοθεί σε αυξημένη δραστηριότητα καλπαΐνης που προκαλείται από Angl. Βρήκαμε αρχικά ότι τα πρωτογενή ποδοκύτταρα εξέφραζαν τις 3 πανταχού παρούσες μορφές καλπαϊνών (Εικόνα 3α). Στη συνέχεια δείξαμε ότι το AngII διεγείρει τη δραστηριότητα της καλπαΐνης στα πρωτογενή ποδοκύτταρα. Αυτή η αύξηση στη δραστηριότητα της καλπαΐνης μπλοκαρίστηκε από έναν εκλεκτικό αναστολέα καλπαΐνης (Εικόνα 3β). Χρησιμοποιήσαμε ένα knock-in ποντίκι με πρόσθετη έκφραση διαγονιδίου καλπαστατίνης (που οδηγεί σε μειωμένη δραστηριότητα καλπαΐνης) για να αξιολογήσουμε τον ρόλο των καλπαινών στο AngII συν HSD με τη μεσολάβησηνεφρόβλάβηκαι αποκλεισμός αυτοφαγίας. Τα πρωτογενή ποδοκύτταρα από ποντικούς CST'g εμφάνισαν μειωμένη δραστηριότητα καλπαΐνης σε απόκριση στο AngII σε σύγκριση με τα ποδοκύτταρα από ποντικούς ελέγχου (Εικόνα 3γ). Έτσι, η υπερέκφραση της καλπαστατίνης στα ποδοκύτταρα μείωσε την ενεργοποίηση της καλπαΐνης με τη μεσολάβηση AngII.

Cistancheσωληνοειδήςέχει πολλάυπάρχοντα, κάντε κλικ εδώ για να μάθετε περισσότερα

Στη συνέχεια αξιολογήσαμε τα επίπεδα αυτοφαγίας σε ποδοκύτταρα από ποντικούς CSTTg. Δημιουργήσαμε ποντίκια CST με το διαγονίδιο GFP-LC3. LC3-Ο ανταποκριτής GFP επέτρεψε την καταμέτρηση των αυτοφαγοσωμάτων ως κουκκίδες GFP συν /P62 συν. Το P62 θα συσσωρευτεί σε συσσωματώματα στα κύτταρα όταν αποκλειστεί η αυτοφαγική ροή. Στη βασική κατάσταση, μετρήσαμε λιγότερα GFP συν P62 συν κουκκίδες (Εικόνα 4a, b, και e) και λιγότερη συσσώρευση P62 (Εικόνα 4c,d και f) στα ποδοκύτταρα των ποντικών CST1g GFP-LC3 από ό,τι στα ποδοκύτταρα των φυσιολογικών

Εικόνα 4|Αξιολόγηση της αυτοφαγικής ροής σε ποδοκύτταρα διαγονιδιακών ποντικών καλπαστατίνης (CST9). (α, β) Αντιπροσωπευτικές εικόνες ανοσοφθορισμού της έκφρασης της πράσινης φθορίζουσας πρωτεΐνης (GFP) (πράσινη) και της P62 (κόκκινη) σε σπειράματα από 12-ποντικούς GFP-LC3 και CST'GFP-LC3 εβδομάδων εβδομάδων. Οι αιχμές βέλους υποδεικνύουν GFP συν P62 συν αυτοφαγοσώματα. (γ, δ) Αντιπροσωπευτικές εικόνες ανοσοφθορισμού της έκφρασης της P62 (πράσινης) και της Podocalyxin (PODXL, κόκκινο) σε σπειράματα από 12-εβδομαδιαίες ποντίκια GFP-LC3 και CST'9 GFP-LC3. Τα υποτμήματα του σχήματος με πρώτο υποδεικνύουν μεγαλύτερη μεγέθυνση. Οι πυρήνες χρωματίστηκαν με Hoechst (μπλε). Μπάρες=50 μm. (ε) Ποσοτικοποίηση του αριθμού LC3 συν P62 συν κουκκίδες ανά ποδοκύτταρο. Δοκιμή Mann-Whitney:**P=0.0065. (στ)Ποσοτικοποίηση του P62 συν εμβαδού ανά σπειραματική τομή. Δοκιμή Mann-Whitney:*P= 0.0420.In(e,f), n =5 ποντίκια GFP-LC3 και n =8 ποντίκια CST'9 GFP-LC3. Οι τιμές παρουσιάζονται ως μεμονωμένα διαγράμματα και μέσος όρος± SEM. Για να βελτιστοποιήσετε την προβολή αυτής της εικόνας, δείτε την ηλεκτρονική έκδοση αυτού του άρθρου σε ποντίκια GFP-LC3, υποδηλώνοντας αυξημένη αυτοφαγική ροή στα ποδοκύτταρα ποντικών με υψηλή αφθονία καλπαστατίνης.

Η αυτοφαγική ροή μπορεί να παρακολουθηθεί με τη μέτρηση της μετατροπής της κυτταροπλασματικής μορφής του LC3, LC3-I, στην αυτοφαγοσωματική διάσπαση και συζευγμένη με φωσφατιδυλαιθανολαμίνη μορφή του LC3, LC3-II, στο στύπωμα Western . Ποδοκύτταρα από ποντικούς CST εμφάνισαν αυξημένη μετατροπή LC3-I σε LC3-II και μειωμένη έκφραση P62, τόσο παρουσία όσο και απουσία βαφιλομυκίνης Α, (Εικόνα 5α και β), υποδεικνύοντας αυξημένη αυτοφαγική ροή σε ποδοκύτταρα με υπερέκφραση καλπαστατίνης. Τέλος, η συσσώρευση GFP συν P62 συν κουκκίδες στα ποδοκύτταρα μετά τη χορήγηση χλωροκίνης ήταν πιο σημαντική στα ποντίκια CST'g GFP-LC3 από ότι στα ποντίκια GFP-LC3, επιβεβαιώνοντας έτσι ότι η υπερέκφραση της καλπαστατίνης επάγει την αυτοφαγική ροή στα ποδοκύτταρα in vivo (Εικόνα 5c -μι). Συνολικά, τα δεδομένα μας υποδηλώνουν ότι το AngII διεγείρει τη δραστηριότητα της καλπαΐνης στα ποδοκύτταρα, ότι η αυτοφαγία αναστέλλεται από την καλπαΐνη στα ποδοκύτταρα και ότι η αναστολή της ενδογενούς δραστηριότητας της καλπαΐνης από την υπερέκφραση της καλπαστατίνης είναι αρκετή για να διεγείρει την αυτοφαγική ροή στα ποδοκύτταρα.

Τα ποντίκια CSTT9 προστατεύονται από τραυματισμό των ποδοκυττάρων που προκαλείται από Angel plus HSD

CSTT: ποντίκια δεν παρουσίασαν καθόλουνεφρόαλλαγή μέχρι την ηλικία τουλάχιστον 12 μηνών (Συμπληρωματικό Σχήμα S5). Αναλύσαμε τον τραυματισμό των ποδοκυττάρων σε ποντίκια CST'号 κατά τη διάρκεια της θεραπείας με AngII συν HSD. Αν και τα ποντίκια WT ανέπτυξαν ήπια σπειραματοσκλήρωση και τραυματισμό των ποδοκυττάρων μετά από 4 εβδομάδες υπέρτασης, όπως φαίνεται από την ανώμαλη έκφραση της ποδοκαλυκίνης και της νεφρίνης, τα ποντίκια CSTTg παρουσίασαν λιγότερες σκληρωτικές σπειραματικές αλλοιώσεις (Εικόνα 6α

Εικόνα 5| Ο αποκλεισμός της αυτοφαγοσωμικής αποικοδόμησης επιβεβαίωσε αυξημένη αυτοφαγική ροή των ποδοκυττάρων σε διαγονιδιακά (CSTT) ποντίκια καλπαστατίνης. (α) Ανάλυση στυπώματος Western της έκφρασης LC3. Sequestosome 1 (SOSTM1)/P62, και ATG5 σε πρωτογενή ποδοκύτταρα από άγριου τύπου (W ή CST'9 ποντίκια. Η έκφραση τουμπουλίνης χρησιμεύει ως κανονικοποίηση. Τα ποδοκύτταρα υποβλήθηκαν σε αγωγή ή όχι με βαφιλομυκίνη Α1 (BafA1, 100 nM) για 4 ώρες πριν από την καλλιέργεια διακοπή. (β) Ποσοτικοποίηση των αναλογιών LC3-ll/'τουμπουλίνη και P62/τουμπουλίνη.n=10 ποντίκια WT και n =8 ποντίκια CST'9. Οι τιμές παρουσιάζονται ως μεμονωμένα διαγράμματα και μέσος όρος ± SEM. Αμφίδρομη ανάλυση διακύμανσης σε σύζευξη για θεραπεία: για LC3-ll/τουμπουλίνη: γονότυπος, P= 0.0008; θεραπεία, P<0.0001; for="" p62/tubulin:="" genotype,="" p="0.0884;" treatment,="">< 0.0001.sidak's="" multiple="" comparison="" test:="" for=""><0.0001 for="" wt-bafa1="" versus="" wt+=""><0.0001 for="" cst'9-bafa1="" versus="" cst'9+bafa1,"*p="0.0028" for="" wt+bafa1="" versus="" cstt9="" +bafa1:for=""><0.0001 for="" wt-bafa1="" versus=""><0.0001 for="" cst'9-bafa1="" versus="" cst'9+="" bafa1.(c,d)representative="" immunofluorescence="" images="" of="" the="" expression="" of="" green="" fluorescent="" protein="" (gfp;="" green)="" and="" p62="" (red)="" in="" glomeruli="" from="" 12-week-old="" gfp-lc3="" and="" cst'9="" gfp-lc3="" mice.="" figure="" subparts="" with="" prime="" indicate="" higher="" magnification.="" nuclei="" were="" stained="" with="" hoechst="" （blue）.="" bars="50" μm.="" mice="" were="" treated="" with="" chloroquine（cq;="" 80="" mg/kg）="" 4="" hours="" before="" killing.="" the="" arrowheads="" indicate="" gfp+="" p62+autophagosomes.="" (e)="" quantification="" of="" the="" number="" of="" lc3+="" p62+="" dots="" per="" podocyte.="" n="5" mice="" per="" genotype.="" values="" are="" presented="" as="" individual="" plots="" and="" mean="" ±="" sem.="" unpaired="" t-test="" with="" equal="" sd:*p="0.0302." to="" optimize="" viewing="" of="" this="" image,="" please="" see="" the="" online="" version="" of="" this="" article="" at="">νεφρό-international.org.

Εικόνα 6| Η υπερέκφραση της καλπαστατίνης αποτρέπει τον τραυματισμό των ποδοκυττάρων με τη μεσολάβηση της αγγειοτενσίνης Il (Angel) και της δίαιτας υψηλής περιεκτικότητας σε αλάτι (HSD). (α, β)

Cistancheμπορεί να ανακουφίσειΝεφρική Νόσος

Αντιπροσωπευτικές εικόνες τμημάτων σπειραμάτων που έχουν χρωματιστεί με τρίχρωμο Masson από ποντίκια άγριου τύπου (WT και διαγονιδιακά καλπαστατίνη(CST'9) μετά από 6 εβδομάδες Angll συν HSD.Bars=50 um.(c,d,f,g) Αντιπροσωπευτικές εικόνες ανοσοφθορισμού της έκφρασης της (c,d) Podocalyxin (PODXL) και (f,g)nephrin (NPHS1) σε WT και CST'9 ποντίκια μετά από 6 εβδομάδες σχετιζόμενων ποσοτικών προσδιορισμών Angel συν HSD και (e,h). {8}} um. (ii)

κιστανάκιμπορεί να θεραπεύσειοξεία νεφρική ανεπάρκεια

Αντιπροσωπευτικές εικόνες ανοσοφθορισμού της έκφρασης του όγκου Wilm 1 (WT1, πράσινο) και του PODXL (κόκκινο) σε σπειράματα από ποντίκια WT και CST' μετά από 6 εβδομάδες Angel συν HSD και (k) σχετιζόμενος ποσοτικός προσδιορισμός του αριθμού των κυττάρων WT1 συν ανά σπειραματικό Ενότητα. Οι πυρήνες χρωματίστηκαν με Hoechst(μπλε). Μπάρες =50 um. Στο (e,h,k), οι τιμές παρουσιάζονται ως μεμονωμένες γραφικές παραστάσεις και μέσος όρος ± SEM,n =9 ποντικοί WT και n=7 ποντικοί CSTTg. Μη ζευγαρωμένο t-test με ίσο SD:**P =0.0095 σε (e),*P=0.0249 σε (h), P=0.7891 σε (k).

και β) και διατηρήθηκε η έκφραση της ποδοκαλυξίνης και της νεφρίνης (Εικόνα 6c-h). Τέτοιες διαφορές στον φαινότυπο των ποδοκυττάρων παρατηρήθηκαν σε ένα στάδιο όπου η πυκνότητα των πυρήνων των ποδοκυττάρων δεν ήταν διαφορετική μεταξύ των ποντικών WT και υπερτασικών CST'g (Εικόνα 6i-k).

Ομοίως, μετά από 6 εβδομάδες υπέρτασης, τα ποντίκια GFP-LC3 και CST'1 GFP-LC3 παρουσίασαν τραυματισμό των ποδοκυττάρων αλλά οι βλάβες ήταν πιο εμφανείς σε ποντικούς GFP-LC3 (Εικόνα 7). Η αναλογία λευκωματίνης ούρων προς κρεατινίνη ήταν υψηλότερη σε ποντικούς GFP-LC3 μετά από 4 εβδομάδες AnglI συν HSD (Εικόνα 7α). Ο αριθμός των ποδοκυττάρων δεν ήταν διαφορετικός μεταξύ των 2 γονότυπων, αλλά η έκφραση της νεφρίνης ήταν σημαντικά πιο μειωμένη σε ποντικούς GFP-LC3 (μάρτυρας) (Εικόνα 7b-e). Σε συσχέτιση με την προστασία που προκαλείται από καλπαστατίνη, η υπερδομική ανάλυση έδειξε ήπια και εστιακή εξάλειψη της διαδικασίας του ποδιού του ποδιού σε ποντίκια GFP-LC3 που έλαβαν θεραπεία με Angl συν HSD με καλύτερη διατήρηση της εξάλειψης της διαδικασίας του ποδιού σε ποντικούς CST'g, αν και η συνολική ποσοτικοποίηση του αριθμού οι διεργασίες του ποδιού ανά μήκος σπειραματικής βασικής μεμβράνης (GBM) δεν ήταν στατιστικά διαφορετικές, πιθανότατα επειδή ο τραυματισμός των ποδοκυττάρων είναι εστιακός και τμηματικός στο μοντέλο μας (Εικόνα 7f-h). Αξίζει να σημειωθεί ότι τα μακροφάγα και η διήθηση Τ-λεμφοκυττάρων σενεφράδεν ήταν διαφορετικές μεταξύ των ομάδων (Συμπληρωματικό Σχήμα S6). Συνολικά, αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η καλπαστατίνη απέτρεψε τον τραυματισμό των ποδοκυττάρων που προκαλείται από το AngII συν HSD.

Η υπερέκφραση καλπαστατίνης αποκαθιστά την αυτοφαγική ροή στα ποδοκύτταρα από ποντίκια μετά από θεραπεία με Angel plus HSD

Τέλος, αναρωτηθήκαμε εάν η σπειραματική προστασία με τη μεσολάβηση της καλπαστατίνης στο μοντέλο AngII plus HSD εμπλέκει τη διατήρηση της αυτοφαγίας στα ποδοκύτταρα. Είναι ενδιαφέρον ότι η επαγόμενη από AnglI συν HSD συσσώρευση P62 στα ποδοκύτταρα αποτράπηκε σε ποντίκια CSTTg και GFP-LC3 CST'g (Εικόνα 8a-d), υποδεικνύοντας ότι η καλπαστατίνη εμπόδισε τον αποκλεισμό της αυτοφαγίας των ποδοκυττάρων. Αξίζει να σημειωθεί ότι ο αριθμός των επισημάνσεων GFP συν P62 συν κουκκίδες των αυτοφαγοσωμάτων ήταν παρόμοιος σε ποδοκύτταρα από υπερτασικά ποντίκια GFP-LC3 και GFP-LC3 CST, υποδηλώνοντας έτσι ότι το AnglI συν HSD προκάλεσε επιβράδυνση της αυτοφαγικής ροής των ποδοκυττάρων αντί για πλήρη διακοπή (Εικόνα 8ε-ζ).

Πρόβλεψη in silico της θέσης διάσπασης καλπαΐνης σε πρωτεΐνες ποδοκυττάρων

Χρησιμοποιήσαμε πολλά εργαλεία in silico για να προβλέψουμε πιθανούς στόχους καλπαΐνης στα ποδοκύτταρα (Συμπληρωματικοί πίνακες S1 και S2). Συγκρίθηκαν τρεις διαδικτυακές βάσεις δεδομένων: GPS-CCD, 4CaMPDB, 5 και DeepCalpain. βαθμός Σε ανάλυση πυριτίου εντόπισε αρκετές πρωτεΐνες ποδοκυττάρων, μεταξύ αυτών νεφρίνη και ποδοκίνη, που θα μπορούσαν να διασπαστούν από τις καλπαΐνες. Έτσι, η σπειραματική προστασία με τη μεσολάβηση της καλπαστατίνης θα μπορούσε να συνδεθεί με τη μείωση της ενζυμικής δραστηριότητας της καλπαΐνης, οδηγώντας σε μειωμένη αποικοδόμηση ορισμένων πρωτεϊνών των ποδοκυττάρων.

Επιπλέον, τουλάχιστον 3 πρωτεΐνες που σχετίζονται με την αυτοφαγία είναι άμεσοι στόχοι των καλπαϊνών. Το ATG5 διασπάται από τις καλπαϊνες, οδηγώντας σε διαταραχή στο σχηματισμό συμπλόκου ATG12-ATG5.57 Η χορήγηση αναστολέων καλπαΐνης in vivo απέτρεψε επίσης τη διάσπαση της πρωτεΐνης αυτοφαγίας Beclin-1.5"Σε ανάλυση πυριτίου του Η πιθανή θέση διάσπασης σε πρωτεΐνες που σχετίζονται με την αυτοφαγία υποστηρίζει την υπόθεση ότι η καλπαΐνη θα μπορούσε να ρυθμίσει την αυτοφαγία μέσω της ενζυματικής διάσπασης των πρωτεϊνών αυτοφαγίας.

Έκφραση mRNA του ενδοπλασματικού δικτύου (ER) και δεικτών οξειδωτικού στρες σε σπειράματα από ποντικούς που έλαβαν θεραπεία με Angll συν HSD

Αξιολογήσαμε το στρες του ενδοπλασματικού δικτύου (ER) και το οξειδωτικό στρες με ποσοτική PCR στα σπειράματα κατά τη διάρκεια της θεραπείας με AngII συν HSD (Πίνακας 1). Κατά την έναρξη, δεν παρατηρήσαμε καμία αλλαγή στην έκφραση mRNA των αναλυθέντων γονιδίων σε ποντικούς σπειραματο5loxlox (Συμπληρωματικό από WT και Nphs2.cre Atg5 Εικόνα S7). Μετά από 6 εβδομάδες υπέρτασης, σπειράματα από Nphs2. Τα ποντίκια cre Atg5loxlox έδειξαν διαφορετικά προφίλ mRNA των γονιδίων των οδών στρες ER και οξειδωτικού στρες με αυξημένη έκφραση των Sod1, Prdxl, Atf4, Gpxl και Hsp90b1 σε σύγκριση με τα σπειράματα WT, υποδηλώνοντας έτσι ότι η εξάντληση της αυτοφαγίας στα ποδοκύτταρα ευνοούσε την AngII συν HSD Στρες ER και οξειδωτικό στρες. Αντίθετα, σπειράματα από ποντίκια CST παρουσίασαν μείωση αρκετών γονιδίων των οδών του στρες ER και του οξειδωτικού στρες καθώς και μειωμένη έκφραση ορισμένων προ-αποπτωτικών γονιδίων (Εικόνα 9).

Συνολικά, αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι η υπερέκφραση της καλπαστατίνης θα μπορούσε να αποτρέψει τη σπειραματική βλάβη μειώνοντας το ER που προκαλείται από το AngII συν HSD και το οξειδωτικό στρες.

ΣΥΖΗΤΗΣΗ

Στην παρούσα μελέτη, δείξαμε ότι στην υπέρταση που προκαλείται από AngII συν HSD, η αυτοφαγία των ποδοκυττάρων ρυθμίζεται σημαντικά προς τα κάτω. Επιπλέον, τα ποντίκια με ειδική για τα ποδοκύτταρα διαγραφή του Atg5 ήταν πιο επιρρεπή στην επαγόμενη από AngI συν HSD σπειραματοσκλήρωση και απώλεια ποδοκυττάρων, δείχνοντας έτσι ότι η αυτοφαγία στα ποδοκύτταρα εμποδίζει την ανάπτυξη υπερτασικής νεφροπάθειας, υπογραμμίζοντας τον κρίσιμο ρόλο της αυτοφαγίας στην επαγόμενη από Angl και HSD podocy. βλάβη. Λίγα είναι γνωστά για τα εξωκυτταρικά ερεθίσματα που ρυθμίζουν την κυτταρική αυτοφαγία και αυτά τα αποτελέσματα ρίχνουν φως στην παθοφυσιολογική ρύθμιση της αυτοφαγίας των ποδοκυττάρων από το AngII.

Στις περισσότερες ανθρώπινες σπειραματοπάθειες, η εξάλειψη της διαδικασίας του ποδιού του ποδοκυττάρου είναι χαρακτηριστικό γνώρισμα της σπειραματικής βλάβης που οδηγεί σε πρωτεϊνουρία. Η αυτοφαγία είναι πιθανό να διαδραματίσει ουσιαστικό ρόλο στη διατήρηση της λειτουργίας των ποδοκυττάρων επειδή αυτά τα τελικώς διαφοροποιημένα κύτταρα εμφανίζουν υψηλά ποσοστά αυτοφαγίας ακόμη και απουσία στρες. Μια προηγούμενη μελέτη έδειξε ότι το Angi προάγει την αυτοφαγία μέσω της παραγωγής αντιδραστικών ειδών οξυγόνου σε μια υπό όρους απαθανατισμένη υπό όρους κυτταρική σειρά ποδοκυττάρων ποντικού. τα ευρήματα είναι ασαφή. Σε αντίθεση με αυτήν την τελευταία μελέτη, χρησιμοποιήσαμε πρωτογενή καλλιεργημένα ποδοκύτταρα ποντικού που διατηρούσαν την έκφραση ποδοκίνης και νεφρίνης και προσεγγίσεις in vivo και όχι κυτταρικές σειρές ποντικού. Επιβεβαιώνουμε προηγούμενες αναφορές ότι τα μεταμιτωτικά ποδοκύτταρα εμφανίζουν ασυνήθιστα υψηλό επίπεδο συστατικής αυτοφαγίας. Η μέτρηση της αυξημένης ποσότητας LC3-II μετά από διέγερση AngII παρουσία ή απουσία λυσοσωμικών αναστολέων είναι απαραίτητη για τον προσδιορισμό

εάν η αυτοφαγική ροή είναι αυξημένη ή αποκλεισμένη. Προηγούμενες μελέτες έχουν παραμελήσει αυτό το φαινόμενο.

Εδώ, χρησιμοποιήσαμε ένα υπερτασικό μοντέλο που βασίζεται στην αιμάτωση Angle και στην HSD. Τα ποδοκύτταρα εμφανίζουν υποδοχείς ATI και εκτίθενται σε ελεύθερα φιλτραρισμένα πεπτίδια όπως το AngII1,6,26,61-6 Υποτίθεται ότι οι παρατηρούμενες αντιπροστατευτικές επιδράσεις της αναστολής του RAAS θα μπορούσαν --τουλάχιστον εν μέρει- να οφείλονται σε αποκλεισμό αυτού του ποδοκυττάρου -συγκεκριμένο RAAS. Ομοίως, in vivo μελέτες

Cistancheμπορεί να ανακουφίσειΝεφρική Νόσος