Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Κάντε κλικ εδώ για το Μέρος 1

Η έκφραση των CD30 και OX40 είναι απαραίτητη για τον πολλαπλασιασμό των μεσολαβούντων στη νόσο CD4 συν Τ κυττάρων CD90.2 Τα κύτταρα CD30OX40 παρουσίασαν σημαντική μείωση στον πολλαπλασιασμό (Εικόνα 4p και q) και στην ενεργοποίηση (Εικόνα 4r και s). Ο πολλαπλασιασμός των CD30OX40- CD4 συν Τ κυττάρων που διεγείρονται με κονκαναβαλίνη Α (Εικόνα 6α και β) ή φυτοαιμοσυγκολλητίνη (δεδομένα δεν φαίνονται) μειώθηκε εξίσου κατά 50 τοις εκατό σε σύγκριση με τα κύτταρα CD4 συν Τ από WTmice, αν και αυτή η διαφορά δεν ήταν φθάνουν σε στατιστική σημασία λόγω ορισμένων ακραίων τιμών. Η θετικότητα για σχισμένη κασπάση3 στους λεμφαδένες ήταν συγκρίσιμη σε CD4 συν Τ κύτταρα υγιών και νεφρικών ποντικών WT και CD30OX40~-(Εικόνα 6γ). Το Ki-67 ήταν αραιό σε CD4 συν Τ ποντίκια. Ωστόσο, τα κύτταρα τους υγιούς WT και CD30OX{40-r είχαν θετικότητα Ki-67 σε λεμφαδένες νεφρικών ποντικών WT (Εικόνα 6δ). Οι λεμφαδένες νεφρικών ποντικών CD30OX40-/ είχαν μοτίβο χρώσης συγκρίσιμο με υγιή ποντίκια (Εικόνα 6δ). CD30OX40-/- νεφρικά ποντίκια εμφάνισαν χαμηλότερα ποσοστά πολλαπλασιαζόμενου Ki{-67 συν κύτταρα κεντρικής μνήμης, τελεστικά Τ κύτταρα και Tregs (Εικόνα 6e) στον λεμφαδένα.

Το Cistanche μπορεί να βοηθήσει στη θεραπεία της νεφρικής νόσου

Η θεραπεία με αντισώματα CD30LcOX40L βελτιώνει τους δείκτες NTS

Το θεραπευτικό δυναμικό της στόχευσης CD30 και OX40 αξιολογήθηκε με θεραπεία ποντικών με αντισώματα aCD30LxOX40L, aCD30L ή aOX40L ξεκινώντας 3 ημέρες πριν από την επαγωγή του NTS. Υπήρξε μείωση της λευκωματουρίας (Εικόνα 7α), των βαθμολογιών PAS, των βαθμολογιών ημισελήνου και των σωληναριακών εκμαγείων (Εικόνα 7β, γ και ε) σε ποντικούς που έλαβαν αντισώματα xCD30LaOX40L σε σύγκριση με ποντικούς που έλαβαν ισότυπο (Εικόνα 7α και β). Βρήκαμε σημαντική μείωση της βαθμολογίας ενδοαυλικών θρόμβων (Εικόνα 7δ) και της βαθμολογίας οξείας σωληναριακής βλάβης (Εικόνα 7στ) σε ποντικούς που έλαβαν προληπτική θεραπεία με αντισώματα xCD30LaOX40L σε σύγκριση με ποντίκια που έλαβαν ισότυπο, ενώ δεν παρατηρήθηκε καμία επίδραση μετά από έναν μόνο αποκλεισμό των προσδεμάτων.Νεφρό-διηθητικά CD4 συν Τ κύτταρα και ουδετερόφιλα (Εικόνα 7g, h, και j) μειώθηκαν σημαντικά σε ποντικούς που έλαβαν θεραπεία με αντισώματα aCD30LxOX40L. Καμία αλλαγή στους αριθμούς τωννεφρό-Διηθητικά CD8 συν Τ κύτταρα και CD68 συν μακροφάγα (Εικόνα 7i και k) ανιχνεύθηκαν.

Εάν η θεραπεία με αντισώματα xCD30LxOX40L ξεκίνησε 3 ημέρες μετά την εγκατεστημένη νόσο, οι βαθμολογίες της λευκωματουρίας και του σπειραματικού PAS έτειναν να μειώνονται, αλλά δεν ανιχνεύθηκε διαφορά στο BUN ορού (Συμπληρωματικό Σχήμα 7A-C). Εδώ, η διήθηση των νεφρικών CD4 συν Τ κυττάρων και των ουδετερόφιλων μειώθηκε επίσης σημαντικά (Συμπληρωματικό Σχήμα S7F). Δεν υπήρχε διαφορά στους συνολικούς αριθμούς CD4 συν Τ-κυττάρων στο περιφερικό αίμα ποντικών που έλαβαν θεραπεία είτε με αντίσωμα ελέγχου ισοτύπου είτε με αντισώματα aCD30LaOX40L (Συμπληρωματικό Σχήμα 7G) ή στην έκφραση των CD44 και CD62L σε CD4 συν Τ κύτταρα σε λεμφαδένες (Συμπληρωματικό Εικόνα 6Η). Επίσης, Tregs βρέθηκαν σε συγκρίσιμους αριθμούς και στις δύο ομάδες (τα δεδομένα δεν εμφανίζονται). Οι δείκτες Th1, Th17 και Treg σε επίπεδο mRNA ήταν συγκρίσιμοι σε λεμφαδένες ποντικών που έλαβαν θεραπεία είτε με αντίσωμα ελέγχου ισοτύπου είτε με αντισώματα xCD30LaOX40L (Συμπληρωματικό Σχήμα S7I). Όταν τα σπληνικά κύτταρα νεφρικών ποντικών που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με αντισώματα aCD30LxOX40L διεγέρθηκαν εκ νέου με IgG κουνελιού, ωστόσο, βρέθηκε σημαντικά μειωμένη ικανότητα πολλαπλασιασμού των CD4 συν Τ κυττάρων σε σύγκριση με ποντίκια που υποβλήθηκαν σε αγωγή με ισότυπο, χωρίς να επηρεαστεί η απόπτωση (Εικόνα 7). Δεν ανιχνεύθηκαν διαφορές στους τίτλους C3νεφρόδιαφάνειες, και δεν ανιχνεύθηκε διαφορά στο IgG ποντικού κατά του κουνελιού στον ορό ποντικών που έλαβαν xCD30LoOX4OL ξεκινώντας 3 ημέρες μετά την επαγωγή NTS σε σύγκριση με ποντίκια που έλαβαν αγωγή με ισότυπο έλεγχο (Συμπληρωματικό Σχήμα S7D και E).

ΣΥΖΗΤΗΣΗ

Σε αυτή τη μελέτη, καταδεικνύουμε μια σημαντική συμβολή της συνδιεγερτικής σηματοδότησης μέσω των μελών της υπεροικογένειας TNF CD30 και OX40 σε CD4 συν εξαρτώμενη από Τ-κύτταρα σπειραματονεφρίτιδα του ανοσοσυμπλέγματος ποντικού. Δείχνουμε ότι ο προληπτικός αποκλεισμός των προσδεμάτων CD30 και OX40 βελτιώνει σημαντικά τη νόσο με την επαγωγή περιφερειακής ανοχής μέσω μιας σημαντικής μείωσης του πολλαπλασιασμού των Τ-κυττάρων CD4 συν τελεστών και της ελαττωματικής μετανάστευσης των κυττάρων Th17 με τη μεσολάβηση CCR{10}}νεφρό.

Με βάση τις τρέχουσες γνώσεις σχετικά με τη συμμετοχή των CD30 και OX40 στην αυτοανοσία, εξετάσαμε εάν αυτοί οι υποδοχείς εμπλέκονται στην παθογένεση του NTS. Τα CD30 και OX40 ρυθμίζονται προς τα πάνω στα Τ κύτταρα κατά την επαφή με το αντιγόνο. Η έκφραση τόσο του CD30 όσο και του OX40, καθώς και των CD30L και OX40L, αυξήθηκε στα CD4 συν Τ κύτταρα στο μοντέλο NTS μας, το οποίο είχε επίσης βρεθεί στο παρελθόν σε ασθενείς με ΣΕΛ.16-20 Τα CD30 και OX40 αυξήθηκαν πιο έντονα στα κύτταρα Th17. και Tregs, ενώ το CD30L αυξήθηκε στα Tregs και το OX40L έδειξε αυξημένη έκφραση και στα δύο. Είναι ενδιαφέρον ότι οι συνδέτες CD30L και OX40L ρυθμίστηκαν προς τα κάτω σε δενδριτικά κύτταρα, ουδετερόφιλα και μονοκύτταρα κατά τη διάρκεια της μετέπειτα πορείας του NTS. Υποθέτουμε ότι αυτή η καθοδική ρύθμιση συμβαίνει αντιδραστικά μετά από παρατεταμένη ενεργοποίηση.

Τα CD30OX40-/ποντίκια βρέθηκαν να προστατεύονται πλήρως από τη νόσο, ενώ ο φαινότυπος NTS στα CD30~ και OX40 ήταν συγκρίσιμος με τους ελέγχους WT. Ούτε τα υγιή ποντίκια CD30OX40-/- ούτε τα μεμονωμένα νοκ-άουτ ποντίκια εμφάνισαν αλλαγές στον φαινότυπο των λευκοκυττάρων ή αλλαγές στον σχετικό αριθμό κυττάρων σε δευτερεύοντα λεμφοειδή όργανα.

Διακεκριμένοι υποπληθυσμοί CD4 συν Τ-κυττάρων, όπως τα κύτταρα Th1 και Th17, έχει αποδειχθεί ότι επηρεάζουν κρίσιμα το NTS μέσω της στρατολόγησης μακροφάγων και ουδετερόφιλων.28,5

Εικόνα 4| Τα CD30OX40-/ποντίκια εμφανίζουν ελάττωμα διακίνησης κυττάρου Thelper 17 (Th17). Μετά από μεταβίβαση υιοθέτησης CD4* Tcells από ποντίκια CD90.1 άγριου τύπου (W) και CD90.2 CD30OX407 ποντίκια σε αναλογία 1:1 σε Rag1 ποντίκια (n =5 ποντίκια), ποντίκια υποβλήθηκαν σε νεφροτοξική νεφρίτιδα ορού και παρακολουθήθηκαν για 4 ημέρες. -Κύτταρα iTh17 είτε CD90.1 WT είτε CD90.2 CD30OX40-/ποντικών αξιολογήθηκαν σε (a,b,de,g,h) σπλήνες (c,f,i) καινεφρά. Έκφραση υποδοχέων χημειοκίνης (k) CXC χημειοκίνη (συνέχεια)

Εικόνα 5|Η ανεπάρκεια CD30OX40 δεν επηρεάζει τη διαφοροποίηση των CD4 συν Τ κυττάρων. (α) Αντιπροσωπευτικά διαγράμματα κουκκίδων και (β) αναλογίες CD4 συν Τ κύτταρα με φαινότυπο Τ βοηθητικού κυττάρου 17 (Th17) μετά από διέγερση των CD4* Τ κυττάρων από άγριου τύπου (WT) και CD30OX40~7 ποντίκια υπό συνθήκες πόλωσης Th17 (n { {13}} ποντίκια ανά ομάδα). (γ) Αντιπροσωπευτικά διαγράμματα κουκκίδων και (δ) αναλογίες CD4*T κυττάρων με τον φαινότυπο Τ βοηθητικού κυττάρου 1 (Th1) μετά τη διέγερση των CD4 συν Τ κυττάρων από WT και CD30OX40~-ποντίκια υπό συνθήκες πόλωσης Th1 (n {{22 }} ποντίκια ανά ομάδα). Όλα τα δεδομένα δείχνουν μέσο όρο ± SEM από 2 ανεξάρτητα πειράματα. Ifn, ιντερφερόνη, Il, ιντερλευκίνη.

Αποδείξαμε ότι η προστασία από ασθένεια εξαρτάται από τα CD4 συν Τ-κύτταρα επάγοντας NTS σε Rag1-/ποντίκια που ανασυστάθηκαν με CD4 συν Τ κύτταρα. Συγκρίσιμοι αριθμοί κυττάρων CD4 συν σε σπλήνες και των δύο ομάδων νωρίς μετά τη μεταφορά Τ-κυττάρων απέκλεισαν την ελαττωματική ανασύσταση των κυττάρων CD30OX40--. Κατά τη διάρκεια της νόσου, ο αριθμός των CD4 συν Τ κυττάρων μειώθηκε σημαντικά σε σπλήνες ποντικών Rag1- που έλαβαν CD4 συν Τ κύτταρα από CD30OX40~-ποντίκια. Rag1-/ποντίκια εμφάνισαν σημαντικά πιο ήπια ασθένεια μετά από 14 ημέρες όταν ανασυστάθηκαν με CD30OX40~- CD4 συν Τ κύτταρα σε σύγκριση με WT CD4 συν Τ κύτταρα. CD30OX40-/- CD4 συν Τ κύτταρα (δηλαδή, κύτταρα μνήμης, τελεστές CD4 συν Τ κύτταρα και Tregs) βρέθηκε να έχουν μειωμένη πολλαπλασιαστική ικανότητα τόσο in vitro όσο και in vivo στους λεμφαδένες.

Οι επαρκείς ανοσολογικές αποκρίσεις κατά την αντιμετώπιση ενός αντιγόνου απαιτούν γρήγορο πολλαπλασιασμό, διαφοροποίηση και μετανάστευση των Τ κυττάρων. Ο πολλαπλασιασμός των Τ-κυττάρων σε δευτερογενή λεμφοειδή όργανα δεν σχετίζεται μόνο με αποκρίσεις που στρέφονται εναντίον ενός αντιγόνου, αλλά μπορεί επίσης να ευνοήσει την αυτοανοσία όταν λαμβάνει χώρα ο ομοιοστατικός πολλαπλασιασμός.7 Αν και πολλοίνεφρό-Τα διηθητικά Τ κύτταρα, τα μακροφάγα και τα ουδετερόφιλα μειώθηκαν σε CD30OX40-/ποντίκια που υποβλήθηκαν σε NTS, η συνολική κυτταρικότητα στους λεμφαδένες ήταν σταθερή. Ωστόσο, ο πολλαπλασιασμός των Τ-κυττάρων σε λεμφαδένες νεφρικών ποντικών CD30OX40- μειώθηκε στο επίπεδο των υγιών ποντικών WT, υποδηλώνοντας μια πιθανή μείωση των παθογόνων κλώνων Τ-κυττάρων ενώ προϋπήρχαν οι συνθήκες σταθερής κατάστασης. Ως εκ τούτου, ένα ελάττωμα στο ρεπερτόριο των Τ-κυττάρων ως αιτία για μείωσηνεφρόΤα διεισδυτικά κύτταρα CD4 plus αποκλείστηκαν.

Αν και η σηματοδότηση μέσω CD30 και OX40 έχει συνδεθεί με τη διαφοροποίηση των Τ-κυττάρων, 8η απώλεια των CD30 και OX40 - στα χέρια μας - δεν επηρέασε αρνητικά τη δυνατότητα των CD4 συν Τ κυττάρων να διαφοροποιηθούν προς φαινότυπο Th1 ή Th17 υπό συνθήκες πόλωσης vitro. Ωστόσο,

Τα δεδομένα για τον ρόλο του OX40 για την προώθηση του Th17 φαίνεται να είναι διχαστικά.38,40

Σύμφωνα με τα in vitro δεδομένα μας, τα κύτταρα CD90.2 CD30OX40-- που μεταφέρθηκαν υιοθετημένα έδειξαν αυξημένα ποσοστά κυττάρων Th1, Th2 και Th17 στους σπλήνες σε σύγκριση με τα κύτταρα CD90.1 WT. Το εύρημα μας μπορεί να εξηγηθεί από την αντισταθμιστική ανοδική ρύθμιση της σηματοδότησης CD28 υπό τις μη φυσιολογικές συνθήκες in vitro και θετικής μεταφοράς, όπου τα CD30 και OX40 δεν είναι διαθέσιμα στα κύτταρα CD4 plus. Συνεπώς, CD4 συν Τ κύτταρα που εκφράζουν CD28 βρέθηκαν σε σημαντικά αυξημένους αριθμούς σε λεμφαδένες νεφρικών ποντικών CD30OX407/- σε σύγκριση με ποντίκια WT. Τα συγμεταφερόμενα CD30OX40-/κύτταρα είχαν αυξημένα ποσοστά Th1 και Th2 κυττάρων σενεφράσε σύγκριση με τα κύτταρα WT, μιμούμενο τον αυξημένο φαινότυπο Th1 και Th2 των CD4 CD30OX40~-κυττάρων στον σπλήνα. Αυτά τα ευρήματα είναι σύμφωνα με την αυξημένη έκφραση του CXCR3 σε κύτταρα CD30OX40-- στον σπλήνα, επειδή το CXCR3 είναι γνωστό ότι μεσολαβεί στη μετανάστευση Th1 στο νεφρό.1 Το CCR6 μεσολαβεί στη μετανάστευση Th17 στονεφρό.2 Εδώ, η σημαντική μείωση της έκφρασης του CCR6 στα κύτταρα CD30OX40-- έχει ως αποτέλεσμα μειωμένη μετανάστευση των κυττάρων CD30OX40- Th17 στον νεφρό και τελικά μειώνει τον τραυματισμό των ιστών. Ωστόσο, πρέπει να έχουμε κατά νου ότι οι απόλυτοι αριθμοί διεισδύσεων CD4 συν Τ κύτταρα στονεφρόμειώθηκαν μαζικά όταν μεταφέρθηκαν κύτταρα CD30OX40~/-, γεγονός που εξηγεί την προστασία αυτών των ποντικών ακόμη και

Εικόνα 7|Η προληπτική θεραπεία με αντισώματα aCD30LoOX40L μειώνει την ιστολογική βλάβη και τους δείκτες ασθενειών στη νεφροτοξική νεφρίτιδα ορού (NTS). Η θεραπεία με αντισώματα xCD30LaOX40L ξεκίνησε 3 ημέρες πριν από την επαγωγή του NTS. (α) Η λευκωματουρία αξιολογήθηκε σε ποντικούς που έλαβαν θεραπεία με ισότυπο, aCD30LxOX40L, CD30L, ή xOX40L μετά από 14 ημέρες NTS (n =5 ποντίκια ανά ομάδα), (β) βαθμολογία σπειραματικού περιοδικού οξέος-Schiff (PAS), (γ ) αξιολογήθηκε η βαθμολογία ημισελήνου, (δ) βαθμολογία τριχοειδών ενδοαυλικών θρόμβων, (ε) σωληνοειδείς γύψοι και (στ) βαθμολογία οξείας σωληναριακής βλάβης. Αξιολογήθηκαν οι αριθμοί (g,h)CD4 συν Τ κύτταρα, (i) CD8 συν Τ κύτταρα, (i)ουδετερόφιλα και (k) CD68 συν μακροφάγα.() Σπληνοκύτταρα νεφρικών ποντικών που έλαβαν θεραπεία με αντισώματα aCD30L και aOX40L (n {18}} ποντίκια ανά ομάδα) ή αντίσωμα ισοτύπου (n =4) που ξεκινούν 3 ημέρες μετά την εγκαθίδρυση της νόσου προκλήθηκαν με lgG κουνελιού για 24 ώρες. Δίνονται ποσοστά όψιμων αποπτωτικών κυττάρων CD4 συν (αννεξίνη V ιωδιούχο προπίδιο [PI) και πολλαπλασιαζόμενων (Ki-67) CD4* κυττάρων. Τα δεδομένα δείχνουν (a,l) μέσος όρος± SEM· (bg,ik) υποδεικνύονται οι διάμεσοι από μια οριζόντια γραμμή. Τα δεδομένα είναι αντιπροσωπευτικά 2 ανεξάρτητων πειραμάτων.*Σ<><0.01. hpf,="" high-power="" field.="" to="" optimize="" viewing="" of="" this="" image,="" please="" see="" the="" online="" version="" of="" this="" article="" at="">νεφρό-international.org.

αν και τα λίγα διεισδυτικά κύτταρα έδειξαν έναν προεξέχοντα φαινότυπο Th1.

Tregs περιορίζουν το NTS σε περιφερειακούς λεμφαδένες παροχέτευσης,7,30 αλλά και εντός τουνεφρόστην παρατεταμένη φάση της νόσου. Odobasic et al. υπέθεσε ότι το OX40L ενισχύει τη λειτουργία Treg στο NTS. Προηγούμενα δεδομένα, ωστόσο, έδειξαν περαιτέρω ότι ακόμη και απουσία Tregs, η συνδυασμένη κατάργηση των σημάτων CD30 και OX40 έσωσε τα ποντίκια από θανατηφόρα αυτοάνοση νόσο. Στα χέρια μας, δεν βρέθηκαν αλλαγές στα ποσοστά των Tregs σε νεφρικά ποντίκια CD30OX40 σε σύγκριση με τα ποντίκια WT, αλλά τα Τ κύτταρα τελεστές και μνήμης, καθώς και τα Tregs, πολλαπλασιάστηκαν λιγότερο σε ποντίκια CD30OX40--. Έτσι, η περιφερειακή ανοχή, που προκαλείται από τον αποκλεισμό της σηματοδότησης CD30 και OX40, φαίνεται να προκαλείται από τον αποκλεισμό των παθογόνων κλώνων τελεστών Τ-κυττάρων αντί της αύξησης των αριθμών Treg. Ωστόσο, απαιτούνται περαιτέρω πειράματα για να εξεταστεί εάν η συνάρτηση Treg επηρεάζεται στις ρυθμίσεις μας.

Η προληπτική συνδυασμένη εφαρμογή αντισωμάτων αποκλεισμού xCD30L και xOX40L σε ποντίκια με NTS έδειξε ότι ο αποκλεισμός της συνδιεγερτικής οδού CD30 και OX40 μειώνει την απέκκριση της νεφρικής λευκωματίνης και, το πιο σημαντικό, τους ιστοπαθολογικούς δείκτες καθώς και την κυτταρική διήθηση των CD4 συν Τ κυττάρων και των ουδετερόφιλωννεφρό. Όταν ο συνδυασμένος αποκλεισμός αντισωμάτων ξεκίνησε 3 ημέρες μετά την έναρξη της νόσου, οι δείκτες της νόσου μειώθηκαν επίσης, αν και τα αποτελέσματα δεν ήταν τόσο έντονα. Τα συνολικά Τ κύτταρα του αίματος και των λεμφαδένων CD4 δεν διέφεραν σε αριθμούς και οι αναλογίες των Τ-κυττάρων-τελεστών, των Τ-κυττάρων κεντρικής μνήμης, των Τ-λεμφοκυττάρων τελεστικής μνήμης και των παρελθοντικών Τ κυττάρων ήταν συγκρίσιμες μεταξύ ποντικών που υποβλήθηκαν σε αγωγή και χωρίς θεραπεία. Αυτό είναι σημαντικό για μια πιθανή μελλοντική κλινική εφαρμογή γιατί δείχνει ότι η συστηματική ανοσοαπόκριση δεν μεταβάλλεται. Ως εκ τούτου, ο συνδιεγερτικός αποκλεισμός είναι μια ελκυστική θεραπευτική επιλογή σε αυτοάνοσες ασθένειες που προκαλούνται από Τ-κύτταρα. Αυτή η θεραπευτική προσέγγιση έχει το πλεονέκτημα ότι αναστέλλει επιλεκτικά την επέκταση και τη μετανάστευση των ειδικών για το αντιγόνο Τ κυττάρων, οδηγώντας έτσι σε ανοχή έναντι ξένων και αυτο-αντιγόνων. 4-45"

Ο ξεχωριστός αποκλεισμός είτε του CD30L είτε του OX40L χρησιμοποιώντας αντισώματα προληπτικά σε νεφρικό μικρόφωνο δεν έδειξε σημαντική βελτίωση, όπως φαίνεται με τον διπλό αποκλεισμό των CD30L και OX40L. Όσον αφορά τον ρόλο του OX40, έχουν βρεθεί αποκλίνοντα αποτελέσματα σε πειραματικά μοντέλα νεφρίτιδας. Αν και σύμφωνα με τα ευρήματά μας, τα αγωνιστικά μονοκλωνικά αντισώματα OX40 επιδείνωσαν τη νεφρική νόσο σε ένα μοντέλο ποντικού SLE", αναφέρθηκε πρόσφατα μια προστατευτική δράση του OX40L στην ημισφαίριο σπειραματονεφρίτιδα. Σε αναλογία με προηγούμενα ευρήματα, τα CD30 και OX40 φαίνεται να λειτουργούν συνεργιστικά στο NTS μας Ωστόσο, η πειραματική ρύθμιση και η επιλογή μοντέλων, όπως ο ξενιστής αντιορού, ο χρόνος και η ποσότητα της εφαρμογής αντισώματος, μπορεί να συμβάλλουν σε διαφορετικά αποτελέσματα.

Αυτή η μελέτη προτείνει τη δυνατότητα συνδυασμένου αποκλεισμού των συνδιεγερτικών μονοπατιών CD30 και OX40 ως νέα θεραπευτική στρατηγική για την επίτευξη περιφερικής ανοχής στην αυτοανοσία με τη μείωση του παθογόνου υπερπολλαπλασιασμού σε δευτερογενή λεμφικά όργανα και τη μετανάστευση των κυττάρων Th17 που προάγουν την ασθένεια. Επιπλέον, είναι πιθανό ο συνδυασμένος αποκλεισμός CD30 και OX40 να οδηγήσει σε λιγότερες απειλητικές για τη ζωή λοιμώξεις από τις παραδοσιακές ανοσοκατασταλτικές θεραπείες.

ΑΠΟΚΑΛΥΨΗ

Όλοι οι συγγραφείς δεν δήλωσαν ανταγωνιστικά συμφέροντα.

ΕΥΧΑΡΙΣΤΙΕΣ

Αυτή η εργασία υποστηρίχθηκε από τα Αυστριακά Επιστημονικά Ταμεία στο PE (P27537-B26) και την Εθνική Τράπεζα της Αυστρίας OeNB (αριθμός 17212 στο KE) καθώς και από τα προγράμματα διδακτορικών σπουδών MOL MED και MOLIN (W1241) του Ιατρικού Πανεπιστημίου Γκρατς, τα οποία υποστηρίζονται από τα Αυστριακά Ταμεία Επιστήμης. Το KS χρηματοδοτείται από μια ερευνητική επιχορήγηση που ξεκίνησε από ερευνητές από την Baxter. Η οπτική περίληψη δημιουργήθηκε με το BioRender.com.

ΣΥΝΕΙΣΦΟΡΕΣ ΣΥΓΓΡΑΦΕΩΝ

Οι KA, AHK, PE, ARR, ALL, HY, JPL και KE σχεδίασαν τη μελέτη. Οι KA, AHK, AAM, DJC, IA, CS, KAK, KS, MS και KE πραγματοποίησαν πειράματα. Οι KA, AHK, DJC και KE ανέλυσαν τα δεδομένα. Ο KA έκανε τα στοιχεία. Η ΚΑ και η ΚΕ συνέταξαν και αναθεώρησαν το άρθρο. όλοι οι συγγραφείς ενέκριναν την τελική έκδοση του άρθρου.

ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΙΚΟ ΥΛΙΚΟ Συμπληρωματικό αρχείο (PDF)

Εικόνα S1. Έκφραση CD30, CD30L, OX40 και OX40L σε σπλήνα, λεμφαδένα καινεφρά.

Εικόνα S2. Λευκοκυτταρικός φαινότυπος υγιούς CD30-/-, OX40-/ και CD30OX40-/-

Εικόνα S3. Tregs σε λεμφαδένες WT και CD30OX40-/ποντίκια. Εικόνα S4. Καθαρότητα απομονωθέντων CD4 συν Τ κυττάρων.

Σχήμα S5. Τα ποντίκια Rag1-ανασυντίθενται αποτελεσματικά με CD4 συν Tcells από ποντίκια WT και CD30OX40-/-.

Εικόνα S6. Στρατηγικές πύλης για την κυτταρομετρία ροής Th1 και Th17, Εικόνα S7. Η θεραπεία ξεκινά με αντισώματα xCD30LxOX40L αφού η εγκατεστημένη νόσος βελτιώνει τη διήθηση των νεφρικών κυττάρων στο NTS. Συμπληρωματικές Μέθοδοι.

ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΚΕΣ ΑΝΑΦΟΡΕΣ

1. Chen L Flies DB. Μοριακοί μηχανισμοί συνδιέγερσης και αναστολής των Τ κυττάρων. Nat Rey Immunol, 2013:13:227-242.

2. Adams AB, Ford ML, Larsen CP. Costimulation blockade in autoimmunity and transplantation: the CD28pathway.J Immunol.2016:197:2045-2050. 3. Croft Μ, Duan W, Choi Η, et αϊ. Υπεροικογένεια TNF σε φλεγμονώδη νόσο: μετάφραση βασικών γνώσεων. Τάσεις Immunol. 2012;33:144-152.

4. Gaspal F, Bekiaris V, Kim MY, et al. Κρίσιμη συνέργεια των σημάτων CD30 και OX40 στην ομοιόσταση των Τ κυττάρων CD4 και στην ανοσία Th1 στη σαλμονέλα. J Immunol, 2008:180:2824-2829.

5. Gaspal FMC, Kim MY, McConnell FM, et al. Τα ποντίκια με ανεπάρκεια σε σήματα OX40 και CD30 δεν έχουν αποκρίσεις αντισωμάτων μνήμης λόγω της ανεπαρκούς μνήμης των CD4 Τ κυττάρων. J Immunol. 2005;174:3891-3896.

6. Gaspal FM, Withers D, Saini M, et al. Η κατάργηση των σημάτων CD30 και OX40 αποτρέπει την αυτοάνοση νόσο σε ποντίκια με έλλειψη FoxP3-. J Εχρ Med. 2011;208:1579-1584.

7. Z.Croft M. Ο ρόλος των μελών της υπεροικογένειας ΤΝΕ στη λειτουργία και στις ασθένειες των Τ-κυττάρων. Nat Rev Immunol. 2009;9:271-285.

8. Wright CW, Rumble JM, Duckett CS. Το CD30 ενεργοποιεί τόσο την κανονική όσο και την εναλλακτική οδό NF-kappaB σε κύτταρα αναπλαστικού λεμφώματος μεγάλου κυττάρου. J Biol Chem. 2007;282:10252-10262.

9. Chakrabarty S, Nagata Μ, Yasuda Η, et al. Κρίσιμοι ρόλοι των αλληλεπιδράσεων CD30/CD3OL στον αυτοάνοσο διαβήτη ποντικού. Cin Εχρ Immunol. 2003;133:318-325.

10. Sun X, Yamada Η, Shibata Κ, et αϊ. Ο συνδέτης CD30 είναι ένας στόχος για μια νέα βιολογική θεραπεία κατά της κολίτιδας που σχετίζεται με τις αποκρίσεις Th17. J Immunol.2010;185:7671-7680.

11. Shinoda K, Sun X, Oyamada A, et al. Απαίτηση έκφρασης CD30 σε CD4 Τ κύτταρα στην παθογένεση πειραματικής αυτοάνοσης εγκεφαλομυελίτιδας.J Neuroimmunol.2016;291:39-45.

12. Wu X, Rosenbaum JT, Adamus G, et αϊ. Η ενεργοποίηση του OX40 παρατείνει και επιδεινώνει την αυτοάνοση πειραματική ραγοειδίτιδα. Invest Ophthalmol Vs Sci. 2011;52:8520-8526.

13. Aristides RSS, He H, Westlake RM, et al. Συνδιεγερτικό μόριο OX40Lis κρίσιμο για τις αποκρίσεις Th1 και Th2 στην αλλεργική φλεγμονή. Eur J Immunol. 2002;32:2874-2880.

14. Saijo S, Asano Μ, Horai R, et αϊ. Καταστολή της αυτοάνοσης αρθρίτιδας σε ποντίκια με ανεπάρκεια ιντερλευκίνης-1- στα οποία η ενεργοποίηση των Τ κυττάρων είναι μειωμένη λόγω χαμηλών επιπέδων συνδέτη CD40 και έκφρασης OX40 στα Τ κύτταρα. Ρευματική αρθρίτιδα. 2002;46:533-544.

15. Odobasic D, Ruth A, Oudin V, et al. Ο συνδέτης OX40 είναι ανασταλτικός κατά τη φάση τελεστή της ημισεληνοειδούς σπειραματονεφρίτιδας. Μεταμόσχευση Nephrol Dial. 2019;34:429-441.

16. Caligaris-Cappio F, Bertero MT, Converso M, et al. Τα κυκλοφορούντα επίπεδα του διαλυτού CD30, ενός δείκτη κυττάρων που παράγουν κυτοκίνες τύπου Th2-, είναι αυξημένα σε ασθενείς με συστηματικό ερυθηματώδη λύκο και συσχετίζονται με τη δραστηριότητα της νόσου. Clin Exp Rheumatol.1995;13:339-343.

17. Dong L, Hu S, Chen F, et al. Η αυξημένη έκφραση της γαγγλιοσίδης GM1 σε περιφερικά CD4 συν Τ κύτταρα συσχετίζει τη διαλυτή μορφή του CD30 σε ασθενείς με συστηματικό ερυθηματώδη λύκο. J Biomed Biotechnol.2010;2010:569053. 18. Graham DSC, Graham RR, Manku Η, et αϊ. Ο πολυμορφισμός στο γονίδιο της υπεροικογένειας TNF TNFSF4 προσδίδει ευαισθησία στον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο. Nat Genet. 2008;40:83-89.

19. Dolff S, Quandt D, Wilde Β, et αϊ. Αυξημένη έκφραση συνδιεγερτικών δεικτών CD134 και CD80 σε Τ κύτταρα που παράγουν ιντερλευκίνη-17 σε ασθενείς με συστηματικό ερυθηματώδη λύκο. Arthritis Res Ther.2010;12:R150. 20.Aten J, Roos A, Claessen N, et al. Ισχυρός και εκλεκτικός σπειραματικός εντοπισμός του συνδέτη CD134 και του υποδοχέα TNF-1 στην πολλαπλασιαστική νεφρίτιδα του λύκου. J Am Soc Nephrol.2000;11:1426-1438.

21. Javaid B, Quigg RJ. Θεραπεία της σπειραματονεφρίτιδας: Θα έχουμε ποτέ άλλες επιλογές εκτός από στεροειδή και κυτταροτοξικά;ΝεφρόInt.2005;67:1692-1703. 22. Jefferson JA. Επιπλοκές ανοσοκαταστολής στη σπειραματική νόσο, Clin JAm Soc Nephrol, 2018:13:1264-1275.

23. Lechler R, Chai JG, Marelli-Berg F, et al. Η συμβολή της ενέργειας των Τ-κυττάρων στην ανοχή των περιφερειακών Τ-κυττάρων. Immunology.2001;103:262-269. 24. Riella LV, Sayegh MH. Συνδιεγερτικός αποκλεισμός Τ-κυττάρων σενεφρόμεταμόσχευση: πίσω στον πάγκο.ΝεφρόInt Suppl.2011;1:25-30. 25. Gauvreau GM, Boulet LP, Cockcroft DW, et al. Αποκλεισμός του OX40L και αποκρίσεις αεραγωγών που προκαλούνται από αλλεργιογόνα σε άτομα με ήπιο άσθμα. Clin Exp Allergy.2014;44:29-37.

26. Nawaf MG, Ulvmar MH, Withers DR, et al. Ο ταυτόχρονος αποκλεισμός του προσδέματος OX40 και CD30 καταργεί την αυτοανοσία που οφείλεται σε CD4-που σχετίζεται με τον αποκλεισμό CTLA4 και PD1, ενώ διατηρεί την εξαιρετική ανοσία κατά του όγκου κατά του CD8. J Immunol.2017;199:{10}}.

27. Eller Κ, Weber Τ, Pruenster Μ, et αϊ. Η ανεπάρκεια CCR7 επιδεινώνει τον τραυματισμό στην οξεία νεφρίτιδα λόγω ανώμαλου εντοπισμού των ρυθμιστικών Τ-κυττάρων.JAm Soc Nephrol.2010;21:42-52

28. Kurts C, Panzer U, Anders HJ, et αϊ. Το ανοσοποιητικό σύστημα καινεφρόασθένεια: βασικές έννοιες και κλινικές επιπτώσεις. Nat Rev Immunol. 2013;13:738-753.

29. Rosenkranz AR, Mendrick DL, Cothran RS, et αϊ. Η ανεπάρκεια P-σελεκτίνης επιδεινώνει την πειραματική σπειραματονεφρίτιδα: ένας προστατευτικός ρόλος για την ενδοθηλιακή P-σελεκτίνη στη φλεγμονή. J Clin Invest.1999;103:649-659.

30. Wolf D, Hochegger K, Wolf AM, et al. CD4 συν CD25 συν ρυθμιστικά Τ κύτταρα αναστέλλουν την πειραματική αντι-σπειραματική βασική μεμβράνη σπειραματονεφρίτιδα σε ποντίκια.J Am Soc Nephrol.2005;16:1360-1370. 31. Kitching AR, Holdsworth SR, Ploplis VA, et al. Plasminogen and

Οι ενεργοποιητές πλασμινογόνου προστατεύουν από νεφρική βλάβη στην μισοφέγγαρη σπειραματονεφρίτιδα. J Εχρ Med. 1997;185:963-968.