Μέρος 1: Ένα μοναδικό μοντέλο ποντικού της άσκησης πρώιμης ζωής επιτρέπει τη μνήμη του Ιππόκαμπου και τη συναπτική πλαστικότητα

για περισσότερες information:ali.ma@wecistanche.com

Pls κάντε κλικ εδώ στο Μέρος 2

Φθινόπωρο S. ivy1,4 ✉ , TimYu1, Enikö Kramár3,4, Σόνια Παριέφσκι2, Φρεντ Σον2 &thaoVu2

η σωματική άσκηση είναι ένας ισχυρός διαμορφωτής της μάθησης καιμνήμη. Οι μηχανισμοί που διέπουν τα γνωστικά οφέλη της άσκησης είναι καλά τεκμηριωμένοι σε ενήλικα τρωκτικά. Οι μελέτες άσκησης που στοχεύουν στις μεταγεννητικές περιόδους ωρίμανσης του ιππόκαμπου (ειδικά οι στοχευμένες περίοδοι συναπτικής αναδιοργάνωσης και πλαστικότητας) απουσιάζουν. Χαρακτηρίζουμε ένα μοντέλο άσκησης πρώιμης ζωής (ELE) σε αρσενικά και θηλυκά ποντίκια που έχει σχεδιαστεί για να εντοπίζει κρίσιμες περιόδους με τις οποίες η άσκηση μπορεί να έχει διαρκή αντίκτυπο στον ιππόκαμπομνήμηκαι συναπτική πλαστικότητα. Τα ποντίκια είχαν ελεύθερη πρόσβαση σε έναν τροχό τρεξίματος κατά τη διάρκεια τριών μεταγεννητικών περιόδων: της 4ης μεταγεννητικής εβδομάδας (νεανική ELE, P21–27), της 6ης μεταγεννητικής εβδομάδας (εφηβική ELE, P35–41) ή της 4ης -6ης μεταγεννητικής εβδομάδας (νεανική-εφηβική ELE, P21–41). Όλες οι ομάδες άσκησης αύξησαν τις αποστάσεις τρεξίματός τους κατά τη διάρκεια του ELE. Όταν εκτέθηκαν σε ένα υποβαθμισμένο μαθησιακό ερέθισμα, το juv ELE και το juvadol ELE σχημάτισαν μακροχρόνια μακροχρόνιαμνήμηγια μια θέση αντικειμένουμνήμηέργο, ενώ τα καθιστικά και τα ποντίκια adol ELE δεν το έκαναν. Ηλεκτροφυσιολογικά πειράματα αποκάλυψαν ενισχυμένη μακροχρόνια ενίσχυση στον ιππόκαμπο CA1 στην ομάδα ELE νεαρών-εφήβων. Οι καμπύλες εισόδου/εξόδου διαμορφώθηκαν επίσης σημαντικά

σε όλα τα ποντίκια που υποβλήθηκαν σε ELE. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η άσκηση στα πρώτα χρόνια της ζωής, ειδικά κατά τη διάρκεια της 4ης μεταγεννητικής εβδομάδας, μπορεί να επιτρέψει στον ιππόκαμπομνήμη, τη συναπτική πλαστικότητα και την αλλοίωση της διέγερσης του ιππόκαμπου όταν εμφανίζεται κατά τη διάρκεια μεταγεννητικών περιόδων ωρίμανσης του ιππόκαμπου.

Κάντε κλικ για ναCistanche herba για τη βελτίωση της μνήμης

Η άσκηση κατά τη διάρκεια της ενηλικίωσης είναι ιδιαίτερα αποτελεσματική στη βελτίωση των γνωστικών λειτουργιών τόσο στους ανθρώπους όσο και στα τρωκτικά1,2. Σε παιδιά, οι κλινικές μελέτες συνδέουν θετικά τα υψηλότερα επίπεδα σωματικής δραστηριότητας με βελτιωμένη εργασίαμνήμη3, τις ακαδημαϊκές επιδόσεις4 και τη δομική υγεία του εγκεφάλου5. Προκλινικά μοντέλα άσκησης που χρησιμοποιούν ενήλικα τρωκτικά έχουν εντοπίσει υποκείμενους νευροβιολογικούς μηχανισμούς με τους οποίους η άσκηση μπορεί να βελτιώσει την εξάρτηση από τον ιππόκαμπομνήμη: η άσκηση αυξάνει τη νευρογένεση6, την αγγείωση7, τον αριθμό συνάψεως8, διευκολύνει τη μακροπρόθεσμη ενίσχυση (LTP) στο DG9–11, (αλλά βλέπε12 σχετικά με τα θηλυκά ποντίκια) και σε ορισμένες περιπτώσεις, την περιοχή CA113,14 (αλλά βλέπε15), και επάγει διάφορα συναπτικά γονίδια και πρωτεΐνες, συμπεριλαμβανομένου του βασικού νευροτροφικού παράγοντα που ρυθμίζει την πλαστικότητα του αυξητικού παράγοντα που προέρχεται από τον εγκέφαλο (BDNF;16,17). Υπάρχουν κάποιες ενδείξεις ότι η άσκηση μπορεί να εμπλέξει παρόμοιους μηχανισμούς πλαστικότητας στον αναπτυσσόμενο εγκέφαλο18, ωστόσο, λείπουν μελέτες που εστιάζουν στις νευροβιολογικές επακόλουθες της άσκησης νωρίς στη ζωή. Ωστόσο, είναι ακριβές κατά τη διάρκεια των περιόδων ανάπτυξης της πρώιμης ζωής ότι οι επιπτώσεις της άσκησης μπορεί να έχουν το πιο μακροπρόθεσμο όφελος γιαμνήμηκαι γνωστική ικανότητα καθ' όλη τη διάρκεια της ζωής19.

Οι γνωστικές και νευροτροφικές επιδράσεις της άσκησης κατά την ενηλικίωση είναι παροδικές, φαίνεται να ξεθωριάζουν σε ημέρες έως εβδομάδες. Για παράδειγμα, μια μελέτη άσκησε ενήλικες αρουραίους για τρεις εβδομάδες και στη συνέχεια πραγματοποίησε γνωστικές δοκιμές δύο εβδομάδες μετά τη διακοπή της άσκησης. Οι αρουραίοι είχαν ασθενέστερουςμνήμηαπόδοση σε μια ακτινική εργασία λαβύρινθου βραχίονα μετά από καθιστική ζωή για δύο εβδομάδες μετά την άσκηση. Σε συνδυασμό με αυτή τη χρηματοδότηση ήταν οι σταδιακές μειώσεις του BDNF mRNA και της πρωτεΐνης στον ιππόκαμπο, επιστρέφοντας τελικά στα αρχικά επίπεδα 14 ημέρες μετά τη διακοπή της άσκησης20. Αντίθετα, πιο πρόσφατες μελέτες επικεντρώθηκαν στην άσκηση της πρώιμης ζωής και αυτό ωφελεί τη χωρικήμνήμηκαι η πλαστικότητα του ιππόκαμπου επιμένουν στην ενηλικίωση όταν η άσκηση ξεκινά στην εφηβεία21-23. Το Tis προτείνει μια διαρκή επίδραση της εμπειρίας άσκησης των εφήβων στη μάθηση και τη μνήμη24. Τα ακριβή χρονικά παράθυρα με τα οποία μια πρώιμη εμπειρία άσκησης ζωής μπορεί να προωθήσει διαρκείς αλλαγές στη νευρωνική λειτουργία, την πλαστικότητα του ιππόκαμπου και τη συμπεριφορά δεν έχουν ακόμη διερευνηθεί διεξοδικά.

Ο εγκέφαλος των θηλαστικών υφίσταται παρατεταμένη μεταγεννητική ανάπτυξη με τρόπο ειδικό για την περιοχή και το λειτουργικό δίκτυο25,26. Στους ανθρώπους, η νευρωνική διαφοροποίηση και η συναπτογένεση εντός του ιππόκαμπου φτάνουν σε 1 Τμήμα Παιδιατρικής, Ιατρική Σχολή του Πανεπιστημίου της Καλιφόρνια-Irvine, Irvine, ΗΠΑ. 2 Σχολή Βιολογικών Επιστημών, Πανεπιστήμιο της Καλιφόρνια-Irvine, Irvine, ΗΠΑ. 3 Τμήμα Νευροβιολογίας και Συμπεριφοράς, Πανεπιστήμιο της Καλιφόρνια-Irvine, Irvine, ΗΠΑ. 4 Κέντρο Νευροβιολογίας της Μάθησης καιΜνήμη, Irvine, Καλιφόρνια, ΗΠΑ. ✉ e-mail:aivy@uci.edu

επίπεδα ενηλίκων ηλικίας περίπου 3-5 ετών27 ετών, που είναι περίπου το χρονικό διάστημα που τα παιδιά μπορούν να σχηματίσουν αξιόπιστα μακροπρόθεσμα χωρικάμνήμη28. Στα τρωκτικά, ο ιππόκαμπος φτάνει σε ορόσημα στην πυκνότητα συνάψεων και τη βελτίωση του κυκλώματος κατά τη διάρκεια της 3ης έως 4ης μεταγεννητικής εβδομάδας (αναθεωρείται σε 29,30) που συμπίπτει με την ανάπτυξη σταθερής μακροπρόθεσμης ενίσχυσης (LTP31,32) και την καθιέρωση της μάθησης καιμνήμηλειτουργίες33,34. Ένα χαρακτηριστικό της μεταγεννητικής εγκεφαλικής ωρίμανσης είναι η συναπτική υπερπαραγωγή και το επακόλουθο κλάδεμα35, καθιστώντας έτσι αυτές τις αναπτυξιακές διαδικασίες εξαιρετικά ευαίσθητες στις περιβαλλοντικές εμπειρίες36. Οι φυσιολογικές διαδικασίες της μεταγεννητικής νευροανάπτυξης είναι πιθανό να καθοδηγούνται από συγκεκριμένα πρότυπα γονιδιακής έκφρασης που εξαρτώνται από τη δραστηριότητα και την εμπειρία και τελικά ενημερώνουν την κυτταρική λειτουργία εντός των κυκλωμάτων37,38. Είναι λοιπόν λογικό να στοχεύουμε καθορισμένες περιόδους δομικής και λειτουργικής ωρίμανσης του ιππόκαμπου, χρησιμοποιώντας βιολογικά μοντέλα ποντικών, για να αποκαλύψουμε χρονικά παράθυρα μεταγεννητικής ανάπτυξης με τα οποία η λειτουργία του ιππόκαμπου μπορεί να διαμορφωθεί επίμονα από την εμπειρία της άσκησης.

Σε αυτή τη μελέτη, αναπτύξαμε ένα μοντέλο εθελοντικής σωματικής δραστηριότητας κατά τη διάρκεια συγκεκριμένων αναπτυξιακών περιόδων πρώιμης ζωής σε ποντίκια (άσκηση πρώιμης ζωής ή ELE) για να αντιμετωπίσουμε την υπόθεση ότι ο χρόνος άσκησης κατά τη διάρκεια της μεταγεννητικής ωρίμανσης του ιππόκαμπου μπορεί να οδηγήσει σε διαρκή οφέλη στη γνωστική λειτουργία και τη συναπτική πλαστικότητα. Θα αναφερθούμε στην 4η εβδομάδα της ζωής σε ένα ποντίκι (μεταγεννητικές ημέρες 21-27) ως μια «νεανική» περίοδο, διακριτή από την εφηβεία (5η -6η μεταγεννητική εβδομάδα, όπως αναθεωρήθηκε στο39,40). Δείχνουμε ότι τόσο τα αρσενικά όσο και τα θηλυκά ποντίκια που υποβάλλονται σε άσκηση κατά τη διάρκεια της νεανικής περιόδου παρουσιάζουν χωρική εξάρτηση από τον ιππόκαμπομνήμηαυξημένη μακροπρόθεσμη ενίσχυση και αλλαγές στη συναπτική διέγερση. Είναι σημαντικό ότι το μοντέλο μας ELE μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να αποκαλύψει χρονικά συγκεκριμένους μοριακούς μηχανισμούς που εμπλέκονται από το ELE για να επηρεάσουν τη νευρωνική λειτουργία και συμπεριφορά με διαρκή τρόπο.

Αποτελέσματα

Χαρακτηριστικά συμπεριφοράς τρεξίματος και αύξησης βάρους του μοντέλου ποντικού άσκησης πρώιμης ζωής (ELE). Δεδομένου του αναπτυξιακού χρονοδιαγράμματος της εθελοντικής άσκησης σε αυτό το μοντέλο, υποθέσαμε ότι θα υπήρχαν σημαντικές διαφορές ειδικά για το φύλο και το τρέξιμο για συγκεκριμένες ομάδες στην αύξηση βάρους και την απόσταση που έτρεχαν με την πάροδο του χρόνου. Αυτές οι διαφορές θα εξαρτηθούν από το χρονοδιάγραμμα (νεανική και/ή εφηβική ηλικία) και τη διάρκεια (1- ή 3-εβδομάδων) της έκθεσης στην άσκηση στην πρώιμη ζωή. Αρσενικά και θηλυκά ποντίκια είτε απογαλακτίζονταν απευθείας σε κλουβιά χωρίς τροχό που έτρεχε (sed), ήταν εξοπλισμένα με τροχό κύλισης στο P21 (ομάδες juv ELE και juv-Adol ELE) είτε τοποθετούνταν σε κλουβιά χωρίς τροχούς που έτρεχαν μέχρι το P35 (ομάδα adol ELE, Εικ. 1α). Μια ξεχωριστή ομάδα ποντικών στεγάστηκε με έναν σταθερό τροχό κατά τη διάρκεια του P21-41 (sta). Τα ποντίκια ELE είχαν τη δυνατότητα να τρέξουν είτε για μία εβδομάδα (ομάδες juv ELE και Adol ELE) είτε για τρεις εβδομάδες (ομάδα juv-Adol ELE, Εικ. 1α). Όλα τα ποντίκια στεγάστηκαν σε ζευγάρια για να αποφύγουν τις επιπτώσεις του άγχους της κοινωνικής απομόνωσης41. Τα ποντίκια έτειναν να τρέχουν κατά τη διάρκεια της σκοτεινής φάσης. Για όλες τις ομάδες τρεξίματος, η έκθεση στην άσκηση έλαβε χώρα είτε λίγο πριν είτε κατά τη διάρκεια των εφηβικών εκτοξεύσεων ανάπτυξης σε ποντίκια (συνήθως εμφανίστηκαν κατά τη διάρκεια της 4ης -5ης μεταγεννητικής εβδομάδας), επομένως το βάρος που αποκτήθηκε μεταξύ P21 και P42 συγκρίθηκε μεταξύ ομάδων sed και ELE και μεταξύ των φύλων. Η αμφίδρομη ANOVA αποκάλυψε μια σημαντική αλληλεπίδραση μεταξύ του φύλου και της ομάδας ELE, υποδηλώνοντας ότι η ELE έχει διαφορικές επιδράσεις στην αύξηση του σωματικού βάρους ανάλογα με το φύλο (Εικ. 1β; F(4,94) = 2,48, p = 0,049). Οι post hoc πολλαπλές συγκρίσεις αποκάλυψαν ότι στα αρσενικά, τα ποντίκια juv-Adol ELE είχαν σημαντικά μικρότερη αύξηση βάρους από ό, τι μόνο τα ποντίκια ELE (p = 0,045). Τα θηλυκά ποντίκια που στεγάζονταν με στατικό τροχό (sta) είχαν σημαντικά μεγαλύτερη αύξηση βάρους από το sed (p = 0,0005), το juv-Adol ELE (p = 0,0007) και τα θηλυκά ποντίκια adol ELE (p< 0.0001).="" tese="" findings="" suggest="" that="" a="" longer="" duration="" of="" ele="" exposure="" (three="" weeks)="" during="" juvenile/adolescence="" signifcantly="" reduces="" weight="" gain="" in="" male="" mice,="" whereas,="" in="" female="" mice,="" the="" presence="" of="" a="" stationary="" wheel="" led="" to="" greater="" weight="" gain="" than="" mice="" in="" sedentary="" cages="" without="" running="" wheel="" and="" mice="" that="" ran="" during="">

Στη συνέχεια ασχοληθήκαμε με το ερώτημα εάν υπάρχουν διαφορές φύλου στις καθημερινές και αθροιστικές αποστάσεις τρεξίματος στις τρεις ομάδες ELE. Τα αρσενικά και θηλυκά ποντίκια Jul-adol ELE αύξησαν σταδιακά την καθημερινή τους απόσταση τρεξίματος κατά τη διάρκεια των 3 εβδομάδων (Εικ. 1γ). Μια ANOVA δύο επαναλαμβανόμενη μετρήσεων αποκάλυψε σημαντική επίδραση της μεταγεννητικής ημέρας (F(3,57) = 41,95, p< 0.0001)="" and="" significant="" interaction="" with="" sex="" (f(20,400)="2.15," p="0.003)." tere="" was="" no="" independent="" effect="" of="" sex="" on="" daily="" running="" distance="" (f(1,20)="0.15," p="0.70)," nor="" was="" there="" a="" significant="" difference="" between="" sexes="" in="" total="" cumulative="" distance="" ran="" (p="0.70)." in="" evaluating="" the="" exercise="" behavior="" of="" mice="" running="" for="" the="" shorter="" duration="" (1-week),="" we="" found="" that="" postnatal="" days="" had="" a="" significant="" effect="" on="" daily="" running="" distance="" in="" juv="" ele="" mice="" (fig.="" 1d;="" f(3,51)="35.93," p="">< 0.0001).="" tere="" was="" no="" independent="" effect="" of="" sex="" on="" running="" distance="" (f(1,15)="1.11," p="0.31)" and="" no="" interaction="" (f(6,90)="1.20," p="0.31)." in="" contrast,="" adol="" ele="" mice="" had="" a="" statistically="" significant="" interaction="" of="" postnatal="" day="" x="" sex="" (fig.="" 1e;="" f(6,84)="4.77," p="0.0003)." although="" female="" adol="" ele="" mice="" trended="" toward="" less="" running="" toward="" the="" end="" of="" the="" adolescent="" running="" period="" this="" did="" not="" reach="" significance="" (p="">0,05). Παρόμοια με όλες τις άλλες ομάδες τρεξίματος, τα ποντίκια adol ELE αύξησαν επίσης σημαντικά ότι τρέχουν σε μεταγεννητικές ημέρες (F(4,58) = 24,87, p< 0.0001).="" we="" next="" compared="" daily="" and="" cumulative="" running="" distances="" in="" 1-week="" runners,="" expecting="" that="" running="" distance="" would="" be="" significantly="" greater="" in="" adol="" ele="" mice="" when="" compared="" to="" juv="" ele="" mice="" (regardless="" of="" sex)="" given="" their="" developmental="" stage="" and="" body="" mass="" differences="" when="" entering="" running="" cages.="" tere="" were="" no="" sex="" differences="" in="" total="" running="" distance="" within="" juv="" and="" adol="" ele="" groups="" (fig.="" 1f–h);="" however,="" cumulative="" distance="" traveled="" over="" their="" respective="" running="" periods="" was="" significantly="" greater="" in="" the="" adol="" ele="" group="" when="" compared="" to="" the="" juv="" ele="" group,="" and="" this="" was="" true="" for="" both="" sexes="" (males:="" t(15)="11.96," p="">< 0.0001;="" females:="" t(14)="4.69," p="0.0004)." total="" distances="" ran="" per="" cage="" over="" the="" duration="" of="" the="" exercise="" exposures="" were="" the="" following:="" juv-adol="" ele="" mice;="" males="87.8" ±="" 6.9="" km,="" females="92.2" ±="" 9.3="" km;="" juv="" ele="" mice;="" males="14.7" ±="" 1.8="" km,="" females="12.29" ±="" 1.2="" km;="" adol="" ele="" mice;="" males="53.6" ±="" 2.8="" m,="" females="41.8" ±="" 6.2="" km.="" in="" sum,="" all="" running="" groups="" and="" both="" sexes="" of="" mice="" gradually="" and="" significantly="" increased="" their="" running="" distances="" across="" time.="" the="" cumulative="" amount="" of="" voluntary="" running="" throughout="" the="" running="" period="" was="" dependent="" on="" when="" early="" life="" exercise="" was="" initiated="" (in="" the="" juvenile="" period="" vs="" in="">

Η νεανική άσκηση επιτρέπει τη μακροχρόνια άσκησημνήμητόσο σε αρσενικά όσο και σε θηλυκά ποντίκια με διαρκή τρόπο. Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι σε ενήλικα ποντίκια, απαιτούνται τουλάχιστον 2-3 εβδομάδες άσκησης για βελτιώσεις που προκαλούνται από την άσκηση στη μακροπρόθεσμη μνήμη42,43. Ωστόσο, απαιτείται μια ελάχιστη ποσότητα άσκησης για τα οφέλη από τη μάθηση καιμνήμησε νεαρούς και εφήβους ποντικούς δεν έχει τεκμηριωθεί. Επιπλέον, στο

Σχήμα 1. Πειραματικός σχεδιασμός, συμπεριφορά τρεξίματος και τάσεις βάρους στο μοντέλο πρώιμης άσκησης. α) Πειραματικό διάγραμμα σχεδιασμού. Κατά τον απογαλακτισμό στο P21, αρσενικά και θηλυκά ποντίκια άγριου τύπου στο juv ELE και στο juv- adol ELE στεγάστηκαν σε κλουβιά εξοπλισμένα με προαιρετικούς τροχούς τρεξίματος για 1 εβδομάδα (juv ELE) ή 3 εβδομάδες (juv- adol ELE). Τα ποντίκια Adol ELE στεγάζονταν σε κλουβιά στο P35 και τους επιτρεπόταν να τρέχουν ελεύθερα για 1 εβδομάδα. Στη συνέχεια, όλα τα ποντίκια ελέγχθηκαν στη θέση του αντικειμένουμνήμη(OLM) ή θυσιάστηκαν για ηλεκτροφυσιολογικές μελέτες. β) Παρατηρήθηκε σημαντική διαφορά στο βάρος που αποκτήθηκε κατά τη διάρκεια των περιόδων ELE των ανδρών μεταξύ των ομάδων juv ELE και juvadol ELE. Τα θηλυκά σταθερά ποντίκια κέρδισαν σημαντικά μεγαλύτερο βάρος από τα καθιστικά ποντίκια, juv-adol ELE και adol ELE. γ–ε) Όλα τα ποντίκια ELE αύξησαν σημαντικά την απόσταση τρεξίματός τους καθ 'όλη τη διάρκεια της πρώιμης περιόδου ζωής της πρόσβασης στους τροχούς. στ–η) Δεν υπήρχαν διαφορές φύλου στη συνολική αθροιστική απόσταση σε καμία ομάδα ELE. Τα δεδομένα αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας μονόδρομη ANOVA με μετα-hoc συγκρίσεις ή t-tests του Student: **p ≤0.01, και ***p ≤0.001. n = 8-12 κλωβοί άσκησης ανά ομάδα, 2 ποντίκια ανά κλουβί. Πειραματικό διάγραμμα σχεδιασμού που δημιουργήθηκε με Biorender.com ακαδημαϊκή συνδρομή.

ενήλικα ποντίκια, τα προκαλούμενα από την άσκησημνήμητα οφέλη αρχίζουν να ξεθωριάζουν κατά 3 ημέρες μετά τη διακοπή της άσκησης43. Εάν το ELE ωφελεί τον ιππόκαμπομνήμηγια μεγαλύτερη (ή μικρότερη) διάρκεια από ό, τι σε ενήλικα ποντίκια μετά τη διακοπή της άσκησης είναι ένα αναπάντητο ερώτημα. Επομένως, εξετάσαμε τις ακόλουθες υποθέσεις: 1) ότι ένα μαθησιακό ερέθισμα είναι συνήθως ανεπαρκές για μακροπρόθεσμαμνήμηο σχηματισμός σε καθιστικά ποντίκια άγριου τύπου μπορεί να γίνει επαρκής afer ELE (όπως συμβαίνει μετά από 2-3 εβδομάδες άσκησης στην ενήλικη ζωή) και 2) ο πρώιμος χρόνος άσκησης κατά τη διάρκεια νεανικών ή/και εφηβικών περιόδων θα έχει διαρκή αντίκτυπο στη διάρκεια των βελτιώσεων που προκαλούνται από το ELE μακροπρόθεσμαμνήμη.

Εικόνα 2. Το ELE ανηλίκων-εφήβων έχει ως αποτέλεσμα τη βελτίωση της αναγνώρισης νέων αντικειμένωνμνήμησε αρσενικά και θηλυκά ποντίκια. α) Διάγραμμα πειραματικού σχεδιασμού OLM. β,γ) Η ανάλυση εξοικείωσης αποκάλυψε ότι αρσενικά και θηλυκά έφηβα ποντίκια είχαν παρόμοια εξοικείωση με τους θαλάμους OLM, ανεξάρτητα από την ομάδα, όπως αποδεικνύεται από τη σημαντικά μειωμένη απόσταση που διανύθηκε σε όλες τις δοκιμές. δ) Η απόκτηση OLM σε εκπαιδευμένους αρσενικούς και θηλυκούς ποντικούς ηλικίας 10 λεπτών δεν κατέδειξε σημαντική διάκριση ως προς το αντικείμενο. ε) Κατά τη διάρκεια των δοκιμών OLM, όλοι οι ποντικοί επέδειξαν σημαντική εξερεύνηση του νέου αντικειμένου και δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές στις DIs μεταξύ των ομάδων. στ) Δεν υπάρχουν διαφορές στη συνολική εξερεύνηση κατά τη διάρκεια δοκιμών OLM σε εκπαιδευμένους ποντικούς 10 λεπτών. (ζ) Τα ποντίκια που εκπαιδεύτηκαν για 3 λεπτά κατά τη διάρκεια της απόκτησης OLM δεν έδειξαν προτίμηση αντικειμένου. (η) Τα αρσενικά ποντίκια Juv ELE και juv-adol ELE, καθώς και τα θηλυκά ποντίκια juv ELE, είχαν σημαντική προτίμηση για το αντικείμενο που τοποθετήθηκε σε μια νέα θέση σε σύγκριση με τους καθιστικούς μάρτυρες, ενώ τα ποντίκια adol ELE δεν το έκαναν. (i) Οι συνολικοί χρόνοι εξερεύνησης κατά τη διάρκεια δοκιμών OLM σε εκπαιδευμένους ποντικούς 3 λεπτών δεν διέφεραν μεταξύ ομάδων ή φύλων. Συγκρίσεις post hoc έναντι της ομάδας «χωρίς ELE»: (*p< 0.05;="" **p="">< 0.01;="" ***p=""><0.005 vs="" no="" ele)="" and="" within-group="" comparisons="" vs="" olm="" training="" di:="" (#p="">< 0.05;="" ##p="">< 0.01;="" ###p="">< 0.005="" vs="" training="" di).="" n="6–12" mice="" per="" group.="" experimental="" design="" diagram="" generated="" with="" biorender.com="" academic="">