Το Mahanimbine βελτίωσε τα ελλείμματα μνήμης που σχετίζονται με τη γήρανση σε ποντίκια μέσω ενισχυμένης χολινεργικής μετάδοσης και καταστολής του οξειδωτικού στρες, των επιπέδων αμυλοειδούς και της νευροφλεγμονής Μέρος 2

2.6. Αξιολόγηση των επιπέδων της Μαλονοδιαλδεΰδης (MDA) και της Γλουταθειόνης (GSH)

Χρησιμοποιώντας εμπορικά διαθέσιμα κιτ, τα επίπεδα MDA και GSH αναλύθηκαν σε δείγματα εγκεφάλου (Cayman Chemical Company, Ann Arbor, MI, ΗΠΑ).

Καθώς η επιστήμη και η τεχνολογία συνεχίζουν να προοδεύουν, οι επιστήμονες προσπαθούν να αποκαλύψουν τα μυστήρια των μυστηριωδών και σημαντικών ανθρώπινων ψυχολογικών δραστηριοτήτων όπως η μνήμη, η σκέψη και η συνείδηση. Μεταξύ αυτών, η μελέτη δειγμάτων εγκεφάλου θεωρείται ένα πεδίο μεγάλης ανησυχίας γιατί μπορεί να μας βοηθήσει να κατανοήσουμε βαθύτερα τη σχέση μεταξύ μνήμης και εγκεφάλου.

Κάντε κλικ στα συμπληρώματα γνώσης για να ενισχύσετε τη μνήμη

Πρώτα απ 'όλα, τι είναι ένα δείγμα εγκεφάλου; Με απλά λόγια, αναφέρεται σε μια μέθοδο σύλληψης, διατήρησης και ανάλυσης νευρώνων (εγκεφαλικά κύτταρα) και των συνδέσεών τους στον εγκέφαλο. Με απλούς όρους, είναι σαν ένας χάρτης του εγκεφάλου που μπορεί να δείξει τις συνδέσεις και τις λειτουργίες μεταξύ διαφορετικών περιοχών.

Στη συνέχεια, ας μιλήσουμε για τη σχέση μεταξύ δειγμάτων εγκεφάλου και μνήμης. Η επιστημονική έρευνα έχει δείξει ότι η μνήμη μας σχετίζεται στενά με τη δομή του εγκεφάλου. Όταν μαθαίνουμε νέες γνώσεις, δημιουργούνται νέες νευρωνικές συνδέσεις στον εγκέφαλο και αυτές οι συνδέσεις γίνονται ισχυρότερες με την πάροδο του χρόνου. Μέσω της μελέτης δειγμάτων εγκεφάλου, οι επιστήμονες εργάζονται σκληρά για να μελετήσουν αυτές τις εγκεφαλικές συνδέσεις και προσπαθούν να κατανοήσουν πώς να ενισχύσουν τη μάθηση και τη μνήμη μέσω αυτών.

Επιπλέον, μέσω της ανάλυσης δειγμάτων εγκεφάλου, οι επιστήμονες μπορούν επίσης να βρουν μερικά ενδιαφέροντα πράγματα. Για παράδειγμα, βρήκαν ότι ο ιππόκαμπος στον ανθρώπινο εγκέφαλο είναι μια περιοχή στενά συνδεδεμένη με τη μνήμη. Αυτό συμβαίνει επειδή ο ιππόκαμπος έχει μια σημαντική λειτουργία στον ανθρώπινο εγκέφαλο να μετατρέπει πληροφορίες από τη βραχυπρόθεσμη μνήμη σε μακροπρόθεσμη μνήμη.

Επομένως, η αξία της έρευνας δειγμάτων εγκεφάλου δεν είναι μόνο να μας βοηθήσει να κατανοήσουμε καλύτερα τη σχέση μεταξύ εγκεφάλου και μνήμης, αλλά και να μας βοηθήσει να ανακαλύψουμε τις βαθύτερες αιτίες των διαταραχών της μνήμης ή των γνωστικών ασθενειών, προωθώντας έτσι τη θεραπεία και την πρόληψη σχετικών ασθενειών.

Τέλος, θα πρέπει να έχουμε θετική άποψη για τη βοήθεια της έρευνας δειγμάτων εγκεφάλου στη μνήμη. Αν και υπάρχουν ακόμη πολλά επιστημονικά προβλήματα που πρέπει να επιλυθούν, με τη συνεχή βελτίωση της επιστήμης και της τεχνολογίας, πιστεύουμε ότι θα υπάρξουν περισσότερες ανακαλύψεις στο μέλλον. Ας προσβλέπουμε στο μέλλον μαζί και ας προσβλέπουμε στο να κάνουμε το μυαλό μας πιο έξυπνο μέσω της επιστημονικής έρευνας! Μπορεί να φανεί ότι πρέπει να βελτιώσουμε τη μνήμη. Το Cistanche μπορεί να βελτιώσει σημαντικά τη μνήμη επειδή το Cistanche έχει αντιοξειδωτικά, αντιφλεγμονώδη και αντιγηραντικά αποτελέσματα, τα οποία μπορούν να βοηθήσουν στη μείωση των οξειδωτικών και φλεγμονωδών αντιδράσεων στον εγκέφαλο, προστατεύοντας έτσι την υγεία του νευρικού συστήματος. Επιπλέον, το Cistanche μπορεί επίσης να προωθήσει την ανάπτυξη και την επισκευή των νευρικών κυττάρων, ενισχύοντας έτσι τη συνδεσιμότητα και τη λειτουργία των νευρωνικών δικτύων. Αυτά τα αποτελέσματα μπορούν να βοηθήσουν στη βελτίωση της μνήμης, της ικανότητας μάθησης και της ταχύτητας σκέψης και μπορούν επίσης να αποτρέψουν την εμφάνιση γνωστικής δυσλειτουργίας και νευροεκφυλιστικών ασθενειών.

Τα επίπεδα MDA και GSH μετρήθηκαν σε νανογραμμομόρια/χιλιοστόγραμμα πρωτεΐνης και μικρογραμμομόρια/χιλιοστόγραμμα πρωτεΐνης, αντίστοιχα. Ακολουθήθηκε η τεχνική Bradford για την εκτίμηση της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνη στους ιστούς του εγκεφάλου.

2.7. Εκτίμηση Δραστηριοτήτων Ακετυλοχολίνης (ACh) και Ακετυλοχολινεστεράσης (AchE)

Τα επίπεδα ACh και AChE στο ομογενοποίημα του εγκεφάλου αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας κιτ που διατίθενται στο εμπόριο (BioAssay System, Hayward, CA, USA), τα οποία ήταν κιτ EnzyChromTM AcetylcholineAssay και QuantiChromTM Ακετυλχολινεστεράση Kit, αντίστοιχα.

Η ένταση του σχηματισμού χρώματος ανιχνεύθηκε σε συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών στα 570 και 412 nm, αντίστοιχα. Το επίπεδο της λαμβανόμενης ACh εκφράστηκε ως μΜ, ενώ η δραστηριότητα της AChE εκφράστηκε ως U/L.

2.8. Μέτρηση επιπέδων -αμυλοειδούς

Τα κιτ ELISA από την Cloud Clone Corp (Katy, TX, ΗΠΑ) χρησιμοποιήθηκαν για την αξιολόγηση των επιπέδων των A 1-40 και A 1-42 σε ομογενοποιήματα εγκεφάλου. Για τη μέτρηση του σχηματισμού χρώματος χρησιμοποιήθηκε συσκευή ανάγνωσης μικροπλάκας στα 450 nm.

Η συγκέντρωση των A 1-40 και A 1-42 στο δείγμα συσχετίστηκε αντιστρόφως με την ένταση του χρώματος. Τα αποτελέσματα αντιπροσωπεύτηκαν σε όρους pg/mLof ολικής πρωτεΐνης.

2.9. Εκτίμηση της δραστηριότητας -Secretase (BACE-1) στον εγκέφαλο ποντικιού

Η δραστηριότητα BACE-1 στο ομογενοποίημα ποσοτικοποιήθηκε χρησιμοποιώντας ένα κιτ που διατίθεται στο εμπόριο (SensoLyte® -Secretase Assay Kit από την AnaSpec, Fremont, CA, USA). Η ανίχνευση του κιτ βασίζεται σε ένα πεπτίδιο, το οποίο διασπάται με BACE-1 και το σήμα ανιχνεύεται χρησιμοποιώντας φασματοφωτόμετρο με διέγερση/εκπομπή στα 490/520 nm.

2.10. Μέτρηση της Δραστικότητας Ολικής Κυκλοοξυγενάσης (COX).

Η δραστηριότητα της ολικής COX στο ομογενοποίημα εγκεφάλου υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας κιτ ELISA (Cayman Chemical Company, Ann Arbor, ΜΙ, ΗΠΑ). Ο σχηματισμός χρώματος ήταν ευθέως ανάλογος με τη συνολική δραστηριότητα COX. Ένας αναγνώστης μικροπλάκας χρησιμοποιήθηκε για την ανάγνωση της απορρόφησης στα 590 nm.

2.11. Γονιδιακή έκφραση BACE-1 και COX-2

Η έκφραση των BACE-1 και COX-2 σε απομονωμένο RNA εγκεφάλου αναλύθηκε χρησιμοποιώντας RT-PCR. Τα τρία κύρια βήματα που εμπλέκονταν ήταν: η εκχύλιση RNA, η μετατροπή του RNA tocDNA και η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης σε πραγματικό χρόνο (RT-PCR).

Όλα τα βήματα περιελάμβαναν κιτ που παρέχονται από την Qiagen Valencia, CA, USA. Πρώτον, το RNA εκχυλίστηκε από το δείγμα εγκεφάλου που διατηρήθηκε στο RNA. Σε αυτό το βήμα, περίπου 100 mg δείγματος ιστού εγκεφάλου πλυσμογενοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας TissueRuptor σε 1 mL αντιδραστηρίου λύσης QIAzol και επωάστηκαν για 5 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου.

Το μίγμα του προϊόντος λύσης εγκεφάλου και του αντιδραστηρίου λύσης QIAzol προστέθηκε με χλωροφόρμιο και ανακινήθηκε έντονα για 15 δευτερόλεπτα, ακολουθούμενο από επώαση σε θερμοκρασία δωματίου για 2-3 λεπτά.

Το μίγμα φυγοκεντρήθηκε στους 12,000× g για 15 λεπτά στους 4 ◦C, και οι τρεις φάσεις σχημάτισαν μια άχρωμη φάση (άνω φάση), η οποία αποτελούνταν από RNA και συλλέχθηκε με 1 όγκο αιθανόλης 70% που προστέθηκε σε το.

Στη συνέχεια, 700 µL του δείγματος μεταφέρθηκαν σε στήλη περιδίνησης και φυγοκεντρήθηκαν σε θερμοκρασία δωματίου στα 8000 x g για 15 δευτερόλεπτα. η διέλευση απορρίφθηκε. Μετά την προσθήκη 700 µL ρυθμιστικού διαλύματος RW1 (παρέχεται στο κιτ) και φυγοκέντρηση για 15 δευτερόλεπτα στα 8000 × g, η διέλευση απορρίφθηκε. Το βήμα συνεχίστηκε με την προσθήκη 500 μL ρυθμιστικού διαλύματος RPE (παρέχεται στο κιτ) και φυγοκέντρηση για 15 δευτερόλεπτα στα 8000× g.

Αυτό το βήμα επαναλήφθηκε δύο φορές για να πλυθεί οποιαδήποτε οργανική μόλυνση στο RNA. Τέλος, το RNA εκλούστηκε προσθέτοντας 50 μL νερού χωρίς RNAse και φυγοκεντρήθηκε για 1 λεπτό στα 8000 x g.

Η συγκέντρωση του RNA μετρήθηκε χρησιμοποιώντας ananodrop (nanodrop 2000c, Thermofisher Scientific, Waltham, MA, USA). Το εκχυλισμένο RNA στη συνέχεια μετατράπηκε σε cDNA, το οποίο χρησιμοποιήθηκε για την εκτέλεση RT-PCR.

Πρώτον, προστέθηκαν 14 μLof RNA εκμαγείου με το κύριο μίγμα 6 μL ανάστροφης μεταγραφής (1 μL ανάστροφης μεταγραφάσης Quantiscript, 4 μL ρυθμιστικού διαλύματος Quantiscript RT, 1 μL μίγματος εκκινητών RT). Μετά την ανάμιξη, επωάστηκε για 15 λεπτά στους 42 ◦C, ακολουθούμενη από επώαση στους 95 ◦C για 3 λεπτά για να απενεργοποιηθεί η ανάστροφη μεταγραφάση Quantiscript.

Το προϊόν που σχηματίστηκε ήταν cDNA και τελικά διεξήχθη RT-PCR. Οι συνθήκες RT-PCR σταθεροποιήθηκαν ως 95 ◦C για 5 λεπτά ακολουθούμενοι από 40 κύκλους στους 95 ◦C για 10 λεπτά και 60 ◦C για 30 λεπτά.

Η έκφραση των γονιδίων BACE-1 και COX{-2 ποσοτικοποιήθηκε και κανονικοποιήθηκε έναντι των δύο γονιδίων οικιακής φροντίδας (-actin και GAPDH). Οι εκκινητές των αλληλουχιών νουκλεοτιδίων βασίστηκαν σε BACE ποντικιού-1 (μπροστινό50-GCATGATCATTGGTGGTATC-30: αντίστροφη 50-CCATCTTGATCTTGAC-CA-30) ​​και COX-2 (προώθηση 50-GTGTGCGACATACTCAAGCAGGA) αλληλουχίες cDNA. -30: reverse 50-TGAAGTGGTAACCGCTCAGGTG-30), GAPDH (προώθηση 50-TGACAGGATGCAGAAGGAGA-30: reverse 50-GCTGGAAGGTGGACAGTGAG) και{17} -ακτίνη (προώθηση 50-TGACAGGATGCAGAAGGAGA-30: αντίστροφη 50-GCTGGAAGGTGGACAGTGAG-30).

Ελήφθησαν μετρήσεις φθορισμού και χρησιμοποιήθηκε λογισμικό Rotor-Gene 6000 για την αξιολόγησή τους (Qiagen, Hilden, Γερμανία).

Τα αποτελέσματα παρουσιάστηκαν ως τα επίπεδα έκφρασης μετά την κανονικοποίηση στο γονίδιο housekeeping, τα οποία ήταν η Β-ακτίνη και η GAPDH χρησιμοποιώντας τη συγκριτική προσέγγιση CT (κύκλος κατωφλίου). Η εξίσωση (1) χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό της γονιδιακής έκφρασης του δείγματος.

Η τιμή CT κάθε δείγματος λήφθηκε με βάση την τυπική καμπύλη που δημιουργήθηκε για κάθε γονίδιο (γονίδιο στόχος και γονίδιο αναφοράς).

∆∆CT=∆είγµα ∆CT − ∆CT έλεγχος (1)

όπου

ΔCT δείγμα: τιμή CT του γονιδίου στόχου − Τιμή CT του γονιδίου αναφοράς

Έλεγχος ∆CT: Τιμή CT του γονιδίου στόχου − Τιμή CT του γονιδίου αναφοράς

2.12. Στατιστική ανάλυση

Τα πειραματικά δεδομένα παρουσιάστηκαν ως μέσος όρος ± SEM. Η διαδικασία ANOVA μονής κατεύθυνσης (Graph Pad έκδοση 9, GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, USA) και η δοκιμή Tukey–Kramerpost hoc χρησιμοποιήθηκαν για την κατηγοριοποίηση των στατιστικών παραλλαγών. Το σημαντικό ορίστηκε ως η τιμή πιθανότητας 0.05.

3. Αποτελέσματα

3.1. Ενισχυμένη μνήμη με Μαχανιμπίνη σε ηλικιωμένα ποντίκια

Η ικανότητα χωρικής μάθησης και μνήμης της μαχανιμβίνης στο μοντέλο ποντικιού εξετάστηκε χρησιμοποιώντας τη δοκιμή MWM. Μετρήθηκαν η καθυστέρηση διαφυγής (EL), η απόσταση διαφυγής (ED) και ο χρόνος που αφιερώθηκε στο τεταρτημόριο στόχου.

Επιπλέον, η κινητική δραστηριότητα λήφθηκε επίσης υπόψη με βάση τη μέση ταχύτητα κολύμβησης των ποντικών. Το Σχήμα 2Α δείχνει ότι η ηλικιωμένη ομάδα ελέγχου είχε σημαντικά μεγαλύτερο EL από την 1η ημέρα σήμερα 3 (22.{15}}5 ± 1.70 s, 21,35 ± 1,85 δευτ., 19,96 ± 2,34 δευτ.

Αποκάλυψε ότι τα ηλικιωμένα ποντίκια παρουσίασαν σημαντικό έλλειμμα στη λειτουργία μάθησης και μνήμης στο MWMtest. Ωστόσο, η από του στόματος θεραπεία με διαφορετικές δόσεις (1 και 2 mg/kg) μαχανιμβίνης έδειξε αντιστροφή των προαναφερθεισών αλλαγών στο EL των ηλικιωμένων ποντικών.

Οι τιμές EL για την ομάδα μαχανιμβίνης 1 mg/kg ήταν 22.01 ± 1,60 s, 15,88 ± 1,54 s (p < 0.01) και 8 .26 ± {0.93 s (p < {0.001) για τις ημέρες 1, 2 και 3, αντίστοιχα σε σύγκριση με τον έλεγχο ηλικίας, ενώ το EL οι τιμές για την ομάδα μαχανιμβίνης των 2 mg/kg ήταν 16.09 ± 0,33 s(p < 0,05), 17,14 ± 0,57 s (p < 0,05), 10,57 ± 0.86 s (p < 0,05), 0,01), αντίστοιχα, όταν παραλληλίζεται με τον μάρτυρα ηλικίας. Την ημέρα 3, το EL και των δύο ομάδων (1 και 2 mg/kg) μαχανιμβίνης δεν ήταν σημαντικά διαφορετικό από το νεαρό μάρτυρα.

Σχήμα 2. Επίδραση της μαχανιμβίνης στην (Α) λανθάνουσα κατάσταση διαφυγής, χρόνος που απαιτείται για την εύρεση της κρυφής πλατφόρμας. (Β) Απόσταση διαφυγής, απόσταση που διανύθηκε από το σημείο εκκίνησης μέχρι την εύρεση της κρυφής πλατφόρμας. (Γ) μέση ταχύτητα, ταχύτητα κολύμβησης του ζώου για να βρει την κρυμμένη πλατφόρμα. (Δ) δοκιμή ανιχνευτή, ποσοστιαία αναλογία χρόνου των ηλικιωμένων ποντικών που ξοδεύτηκαν στο τεταρτημόριο στόχο χρησιμοποιώντας τη δοκιμή υδατικού λαβύρινθου Morris. Υπήρξαν σημαντικές βελτιώσεις στον λανθάνοντα χρόνο διαφυγής και στην απόσταση διαφυγής με τη μαχανιμβίνη σε ηλικιωμένα ποντίκια.

Επιπλέον, η θεραπεία αύξησε τον χρόνο που αφιερώθηκε στο τεταρτημόριο στόχο των ηλικιωμένων ποντικών. Όλα τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέσος όρος ± SEM (n {{0}}). ANOVA μονής κατεύθυνσης (ημέρα 1: F(3,20)=11.74, p < 0.001, ημέρα 2: F(3,20)=17.38,p < 0.001 και ημέρα 3: F(3,20 }})=14.88, p < 0.001 για λανθάνουσα κατάσταση διαφυγής 1η ημέρα: F(3,20) {{ 26}}.22, p < 0.001, ημέρα 2: F(3,20)=28.62, p < 0,001 και ημέρα 3: F(3,20) {{40 }}.15, p < 0.001 για απόσταση διαφυγής ημέρα 1:F(3,20)=1.939, p > 0.05, ημέρα 2: F(3,20)=3.467, p > 0.05 και ημέρα 3: F(3,20)=2.497, p > 0.05 για μέση ταχύτητα F(3,20)=7.185, p <0.01 για δοκιμή ανιχνευτή. Δοκιμή πολλαπλών συγκρίσεων Tukey–Kramer.** p < 0,01 και *** p < 0,001 σε σύγκριση με νεαρό μάρτυρα, # p < 0,05, ## p < 0,01 και ### p < 0,001 σε σύγκριση με ηλικιωμένο μάρτυρα.

Το Σχήμα 2Β αντιπροσωπεύει την επίδραση της μαχανιμβίνης στην απόσταση που διανύθηκε από το σημείο εκκίνησης μέχρι την εύρεση της κρυμμένης πλατφόρμας. Η ηλικιωμένη ομάδα ελέγχου διένυσε τη μεγαλύτερη απόσταση πριν βρει την κρυφή πλατφόρμα τις ημέρες 1, 2 και 3 (4,79 ± 0.73 m, 4,34 ± {{1{0}}.11 m και 4,38 ± 0.59 m; p < {{20}. 0,24 m και 0,78 ± 0,14 m αντίστοιχα).

Τα ηλικιωμένα ποντίκια που έλαβαν 1 mg/kg μαχανιμβίνης μείωσαν σημαντικά την ΕΔ (2,17 ± 0,11 m (p < 0.01), 2,10 ± { {13}}.24 m (p < 0.001), 0,89 ± 0,18 (p < 0,001 αντίστοιχα) για την ημέρα 1 έως την ημέρα 3 που αντιστοιχεί στον ηλικιωμένο έλεγχο.

Σημαντική παράλληλη μείωση στο ΣΔ παρατηρήθηκε σε ποντίκια που χορηγήθηκαν 2 mg/kg μαχανιμβίνης για τις ημέρες 1, 2 και 3 (2,43 ± 0.28 (p < 0.01) , 2,78 ± 0,32(p < 0.001), 1,47 ± 0,30 (ρ < 0,001 αντίστοιχα).

Όσον αφορά τις μέσες ταχύτητες κολύμβησης κατά τη διάρκεια της εργασίας, δεν παρατηρήθηκαν διαφορές μεταξύ των ομάδων (Εικόνα 2Γ). Αυτό δείχνει ότι η μαχανιμβίνη δεν άλλαξε καμία κινητική δραστηριότητα που σχετίζεται με την κινητική λειτουργία σε ηλικιωμένους ποντικούς.

Μετά από 24 ώρες της πραγματικής εργασίας, διεξήχθη μια συνεδρία δοκιμής ανιχνευτή (ημέρα 30) για την αξιολόγηση της διατήρησης μνήμης των ζώων. Η ηλικιωμένη ομάδα ελέγχου (Εικόνα 2Δ) πέρασε λιγότερο χρόνο στο τεταρτημόριο-στόχο (10.10 ± 1,14% (p <0,001)) και έδειξε σημαντικά μειωμένο χρόνο στο στοχευόμενο τεταρτημόριο σε σύγκριση με το νεαρός μάρτυρας (19,53 ± 2,56%), ενώ τα ηλικιωμένα ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με 1 mg/kg (20,27 ± 4,84%, p < 0,01) και 2 mg/kg (17,85 ± 1,56%, p < 0,05) μαχανιμβίνης από του στόματος έδειξαν σημαντική μεγαλύτερος χρόνος παραμονής στο στοχευόμενο τεταρτημόριο σε σύγκριση με τον ηλικιωμένο μάρτυρα.

3.2. Επίδραση της Μαχανιμβίνης στα Επίπεδα MDA και GSH στον εγκέφαλο ηλικιωμένου ποντικιού

Τα επίπεδα MDA στον ηλικιωμένο μάρτυρα (Εικόνα 3Α) ήταν σημαντικά υψηλότερα (11,54 ± 0,88 μM;p < 0.001) που σχετίζονται με τον νεαρό μάρτυρα (4,37 ± 0,09). μΜ). Η αύξηση του επιπέδου MDA στο ομογενοποιημένο εγκέφαλο ηλικιωμένων ποντικών αντανακλά υψηλότερη δραστηριότητα LPO, η οποία έδειξε αύξηση του οξειδωτικού στρες στον εγκεφαλικό ιστό.

Αντίθετα, η χορήγηση μαχανιμβίνης (1 mg/kg, po) μείωσε σημαντικά τα επίπεδα MDA του εγκεφάλου σε ηλικιωμένα ποντίκια (7,56 ± 0.35 μΜ; p < 0).001) συγκρίθηκε. στον έλεγχο ηλικιωμένων. Δεν σημειώθηκαν σημαντικές αλλαγές με 2 mg/kgof μαχανιμβίνης (9,65 ± 0,51 μΜ).

Η ποσότητα της γλουταθειόνης (GSH) στο ομογενοποίημα του εγκεφάλου υποδηλώνει το αντιοξειδωτικό δυναμικό της μαχανιμβίνης. Η στατιστική ανάλυση της GSH (Εικόνα 3Β) έδειξε σημαντική εξασθένηση μεταξύ της ηλικιωμένης ομάδας ελέγχου (0.0028 ± 0.0004 μmoles/ mg, p < 0,001) όταν σχετίζεται με τον νεαρό μάρτυρα (0,0447 ± 0,0029 μmoles/mg).

Η παρούσα μελέτη διαπίστωσε επίσης ότι η θεραπεία με μαχανιμβίνη (1 και 2 mg/kg, po) ανέστρεψε το επίπεδο GSH, το οποίο ήταν σημαντικά υψηλότερο (0.0372 ± 0.{{8} }{{10}38 µmoles/mg, p < 0,001 και 0,0282 ± 0,0041 µmoles/mg, p < 0,001 αντίστοιχα.

3.3. Η Μαχανιμπίνη βελτίωσε τη χολινεργική δραστηριότητα στον εγκέφαλο ηλικιωμένου ποντικιού

Το Σχήμα 4Α δείχνει τα επίπεδα ACh στον εγκέφαλο του ποντικού. Η ACh ήταν συγκριτικά μειωμένη (ρ < 0.001) στον ηλικιωμένο μάρτυρα (17,79 ± 1,54 μΜ) όπως αντιστοιχίστηκε με τον νεαρό έλεγχο (34,82 ± 0). 31 μΜ). Η χορήγηση μαχανιμβίνης (1 και 2 mg/kg), ωστόσο, αυξήθηκε σημαντικά (35,61 ± 0,85 μΜ, (ρ < 0,001), 39,42 ± 0,88 μΜ (ρ < 0,001). αντίστοιχα) το επίπεδο της ACh στον εγκέφαλο που σχετίζεται με τον ηλικιωμένο μάρτυρα.

Το Σχήμα 4Β αντιπροσωπεύει την επίδραση της μαχανιμβίνης έναντι της δραστηριότητας ACHE στον εγκέφαλο. Η δραστικότητα της AChE στην ηλικιωμένη ομάδα ελέγχου (204,80 ±1,55 U/L) ήταν σημαντικά αυξημένη (p < 0,001) σε σύγκριση με τη νεαρή ομάδα ελέγχου (51,06 ± 1,36 U/L).

Ωστόσο, το AChElevel αναστέλλεται ενδεικτικά με τη θεραπεία 1 mg/kg (62.{5}}3 ± 4.64 U/L, p < 0.001) και 2 mg/kg (43.73 ± 4.76 U. /L; Συνολικά, η χορήγηση υψηλής δόσης μαχανιμβίνης (2 mg/kg, po) παρήγαγε καλύτερα αποτελέσματα για τη χολινεργική δραστηριότητα, καθώς ενίσχυσε το επίπεδο ACh και κατέστειλε τη δραστηριότητα της AChE.

For more information:1950477648nn@gmail.com