Πώς η συνθάση του μονοξειδίου του αζώτου επηρεάζει τα νεφρά;

Επικοινωνία: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

Μοριακή Μελέτη Τοξικότητας Διαζινόνης Βασισμένη στην Έκφραση Επαγώγιμης Συνθάσης Νιτρικού Οξειδίου (iNOS) σε Ηπατοκύτταρα και Ιστοπαθολογία Νεφρού Αρουραίων (Rattus norvegicus)

Αφηρημένη

Το Diazinon είναι ένα οργανοφωσφορικό εντομοκτόνο που χρησιμοποιείται ευρέως για την εξάλειψη των παρασίτων αλλά έχει υψηλότερη τοξικότητα από άλλα εντομοκτόνα. Η διαζινόνη που καταναλώνεται κατά λάθος από το στόμα έχει αντίκτυπο στην αύξηση των ενεργών ειδών οξυγόνου (ROS) στο σώμα. Τα αντιδραστικά είδη οξυγόνου (ROS) θα ενεργοποιήσουν την προφλεγμονώδη κυτοκίνη η οποία θα προκαλέσει την επαγώγιμηΣυνθάση μονοξειδίου του αζώτου(iNOS) στο οποίο iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου) θα παράγειΝιτρικό οξύ(ΟΧΙ) ως ελεύθερη ρίζα. Ένα υψηλό επίπεδο ROS θα προκαλέσει βλάβη στα κύτταρα. Αυτή η μελέτη είχε στόχο να καθορίσει την τοξικότητα της διαζινόνης στο iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση στο συκώτι καινεφρόιστοπαθολογία αρουραίων (Rattus norvegicus). Οι αρουραίοι χωρίστηκαν σε 4 ομάδες που αποτελούνταν από την ομάδα αρνητικού ελέγχου και τρεις πειραματικές ομάδες στις οποίες δόθηκε διαζινόνη 20 mg/kg BW(P1), 40 mg/kg BW(P2) και 60 mg/kg BW (Ρ3). Οι παράμετροι που παρατηρήθηκαν σε αυτή την έρευνα είναι η έκφραση του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)στο ήπαρ με χρήση χρώσης ανοσοϊστοχημείας και, στη συνέχεια, αναλύθηκε με χρήση ANOVA μονής κατεύθυνσης και στη συνέχεια δοκιμή Tukey (a=0,05) καινεφρόιστοπαθολογία που παρατηρήθηκε χρησιμοποιώντας χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης και αναλύθηκε ποιοτικά περιγραφικά. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η χορήγηση διαζινόνης από το στόμα ήταν σημαντικά αυξημένη στο iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση (σελ<0,001)in the="" liver="" and="" caused="" damage="" to="" the="">νεφράφλοιός που φάνηκε με φλεγμονώδη κυτταρική διήθηση, νεκρωτική τουνεφρόκύτταρα σωληναρίων και αιμορραγία στο διασωληνάριο χώρο.

Λέξεις-κλειδιά:Diazinon, Organophosphate, iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση,νεφρόιστοπαθολογία.

Το Cistanche βελτιώνει τη λειτουργία των νεφρών

1. Εισαγωγή

Η χρήση φυτοφαρμάκων έχει θεωρηθεί ότι αυξάνει την παραγωγή, ειδικά ως προληπτικό κατά των παρασίτων και των ζιζανίων (Kusriani, 2012). Ωστόσο, η συχνή χρήση φυτοφαρμάκων μπορεί να κάνει αυτά τα φυτοφάρμακα να είναι τοξικά για τους καταναλωτές, συμπεριλαμβανομένων των ζώων τόσο με εισπνοή όσο και από το στόμα και μέσω του δέρματος (Ameriana, 2006). Ένα φυτοφάρμακο που χρησιμοποιείται συνήθως είναι η διαζινόνη. Το Diazinon είναι ένα οργανοφωσφορικό παρασιτοκτόνο που έχει μηχανισμό με αναστολή της λειτουργίας του ενζύμου χολινεστεράση. Αυτά τα φυτοφάρμακα έχουν επίσης μικρότερη επίδραση σε οργανισμούς μη στόχους και είναι πιο τοξικά για τα σπονδυλωτά ζώα σε σύγκριση με τα οργανοχλωρίδια (Luthfanto, 2014). Κανονικά τα φυτοφάρμακα θα εξουδετερωθούν στο ήπαρ από τα ηπατοκύτταρα μέσω της αποτοξίνωσης, αλλά αυτές οι ενώσεις είναι επίσης ικανές να σχηματίσουν ελεύθερες ρίζες λόγω κυτταρικής βλάβης. Η έκθεση σε οργανοφωσφορικά άλατα που συμβαίνει συνεχώς μπορεί να προκαλέσει ηπατική βλάβη ως όργανο που παίζει ρόλο στη διαδικασία αποτοξίνωσης (Ginting, 2014). Τα οργανοφωσφορικά που έχουν μεταβολιστεί στο ήπαρ έχουν την ισχύ να αναστέλλουν το ένζυμο AChE. Η αναστολή αυτού του ενζύμου οδηγεί άμεσα σε αύξηση των επιπέδων ακετυλοχολίνης στο νευρικό σύστημα και στο νευρομυϊκό σύστημα. Η αύξηση της AChE μπορεί να προκαλέσει τα ιόντα στα κύτταρα να γίνουν ασταθή και να πυροδοτήσει το σχηματισμό Reactive Oxygen Species (ROS) (Uchendu, 2012). Η αυξημένη ROS θα προκαλέσει την παραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών. Οι Naik και Vishva (2011) δηλώνουν ότι το ROS επηρεάζει τη μεταγραφή των προφλεγμονωδών κυτοκινών όπου τα υψηλά επίπεδα ROS θα ακολουθούνται από υψηλά επίπεδα προφλεγμονωδών κυτοκινών, καθώς και εάν η παραγωγή ROS αναστέλλεται από αναστολείς θα επηρεάσει τη μείωση της παραγωγής προφλεγμονωδών κυτοκινών όπως ως IL-6 και TNF. Η αυξημένη παραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών θα προκαλέσει iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)και σχηματίζουν ΝΟ σε υπερβολικές ποσότητες (Aktan, 2004).

ονεφρόείναι το κύριο όργανο που διατηρεί την ισορροπία του Extra Cellular Fluid (ECF) εκτελώντας τις λειτουργίες του στην απέκκριση και τον μεταβολισμό (Curthoys, 2014). Η απέκκριση ή η αποβολή του ξενοβιοτικού μεταβολισμού έχει ως αποτέλεσμα τηννεφρό. ονεφρόΗ βλάβη μπορεί να μειώσει το επίπεδο απέκκρισης χημικών ουσιών χωρίς να αυξήσει την τοξικότητα των τοξικών ουσιών (Gupta, 2012). Η συνθήκη οξειδωτικού στρες θα ξεκινήσει τη διαδικασία υπεροξείδωσης των λιπιδίων λαμβάνοντας ιόντα υδρογόνου από τον δεσμό Πολυακόρεστων λιπαρών οξέων (PUFA) για να σχηματιστεί ένα πιο σταθερό μόριο. Η διαδικασία διάσπασης του δεσμού στο PUFA μπορεί να προκαλέσει νέκρωση κυττάρων ή ιστών (Sharma et al.. 2003).

Αυτή η μελέτη διεξήχθη για να προσδιοριστεί η επίδραση τοξικότητας της διαζινόνης έναντι του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση στην ιστοπαθολογία του ήπατος και των νεφρών αρουραίων.

Η συνθάση του μονοξειδίου του αζώτου επηρεάζει τη λειτουργία των νεφρών

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1. Ζωικά μοντέλα και πειραματικός σχεδιασμός

Είκοσι αρουραίοι (Rattus norvegicus) χωρίστηκαν σε 4 ομάδες: ομάδα αρνητικού ελέγχου (υγιείς αρουραίοι). Οι ομάδες Ρ1, Ρ2 και Ρ3 χορηγήθηκαν με διαζινόνη για 8 εβδομάδες από του στόματος χρησιμοποιώντας σωληνάριο σίτισης με δόσεις 20 mg/kg ΣΒ, 40 mg/kg ΣΒ και 60 mg/kg ΣΒ, αντίστοιχα. Το Diazonium 600EC αναμίχθηκε με απεσταγμένο νερό μέχρις ότου περιείχε 5 mg διαζωνίου σε 1 mL (Baconi et al., 2013).

Οι αρουραίοι εγκλιματίστηκαν για μια εβδομάδα πριν λάβουν θεραπεία. Όλες οι συνθήκες και ο χειρισμός των ζώων διεξήχθησαν με το πρωτόκολλο που εγκρίθηκε από την Επιτροπή Ηθικών Εκκαθαρίσεων του Πανεπιστημίου Brawijaya (Αρ.: 732-KEP-UB).

2.2.Προετοιμασία και Παρατήρηση Ιστοπαθολογίας Νεφρού

Προετοιμασια τουνεφρόΗ ιστοπαθολογία αποτελείται από τα ακόλουθα στάδια: στερέωση, αφυδάτωση, καθαρισμός, ενσωμάτωση, τομή, κόλληση σε γυάλινα αντικείμενα σύμφωνα με τον Muntiha (2001). Παρατηρήσεις τωννεφρόΗ ιστοπαθολογία διεξήχθη χρησιμοποιώντας διόφθαλμο μικροσκόπιο φωτός με μεγέθυνση μικροσκοπίου 100x ακολουθούμενη έως 400x. Η παρατήρηση έγινε σε νεφρικό σπείραμα και νεφρικά σωληνάρια.

2.3.Ανάλυση της έκφρασης iNOS (Nitric Oxide Synthase) στο ήπαρ

iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)Η έκφραση στο ήπαρ αναλύθηκε με μεθόδους ανοσοϊστοχημείας, χρησιμοποιώντας anti iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου) ως πρωτεύον αντίσωμα και αντι-κουνελιού IgG βιοτίνη επισημασμένη ως δευτερεύον αντίσωμα. Η μέτρηση του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση στο ήπαρ πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το λογισμικό Immunoratio. Τα αποτελέσματα της εκατοστιαίας περιοχής έκφρασης iNOS αναλύθηκαν ποσοτικά με τη χρήση της δοκιμής μονόδρομης ανάλυσης διακύμανσης (ANOVA) και ακολουθήθηκαν με τη δοκιμή Tukey.

3. Αποτελέσματα και Συζητήσεις

3.1.Ανάλυση της έκφρασης iNOS (Nitric Oxide Synthase) στο ήπαρ

Να αναλύσει την έκφραση του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)στα ηπατικά κύτταρα έγινε με τη μέθοδο της ανοσοϊστοχημείας. Η έκφραση του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)μπορεί να παρουσιαστεί ως έκφραση καφέ χρώματος στα ηπατοκύτταρα, η οποία φαίνεται στο Σχήμα 1.

Εικόνα 1. iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση στο συκώτι.

(1) Αρνητική ομάδα ελέγχου (Κ-). (2) Ρ1 (Προκαλείται με διαζινόνη 20 mg/kg ΣΒ. (3) Ρ2 (επαγόμενη με διαζινόνη 40 mg/kg ΣΒ).

(4) P3 (επαγόμενη με διαζινόνη 60 mg/kg Σ.Β. Ο λευκός κύκλος δείχνει την περιοχή του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση.

Το αποτέλεσμα της ανοσοϊστοχημείας αναλύθηκε ποιοτικά και έδειξε ότι υπάρχει αύξηση της έντασης του καφέ χρώματος (Εικόνα 1). Αυτό το αποτέλεσμα δείχνει ότι υπάρχει αύξηση στο iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)επίπεδα έκφρασης στην ομάδα θεραπείας σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου.

Για να μετρήσετε το επίπεδο του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση στα ηπατοκύτταρα που χρησιμοποιήθηκε για ανοσοαντίδραση λογισμικού. Τα αποτελέσματα της ποσοτικής ανάλυσης του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)Η έκφραση στο ήπαρ των αρουραίων φαίνεται στον Πίνακα 1 και μπορεί να συναχθεί το συμπέρασμα ότι υπάρχει σημαντική διαφορά (σ.<0.001) between="" the="" treatment="" groups="" compared="" to="" the="" negative="" control="" group="" (k-).="" in="" the="" negative="" control="" group="" that="" was="" the="" group="" without="" diazinon="" organophosphate="" induction,="" the="" average="" percentage="" area="" of=""> (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)Η σεξουαλική έκφραση ήταν 1,340 ±0,092 τοις εκατό. Στην ομάδα θεραπείας 1(P1) που ήταν η ομάδα που προκλήθηκε από οργανοφωσφορική διαζινόνη σε δόση 20 mg/kg ΣΒ, η μέση ποσοστιαία περιοχή του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση ήταν 4,184±1,041 τοις εκατό. Η ομάδα θεραπείας 2(P2) ήταν μια ομάδα που προκλήθηκε από οργανοφωσφορική διαζινόνη σε δόση 40 mg/kg ΣΒ και τον μέσο όρο του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση ήταν 7,496±0,997 τοις εκατό . Η ομάδα θεραπείας 3(P3) ήταν μια ομάδα που προκλήθηκε από οργανοφωσφορική διαζινόνη σε δόση 60 mg/kg Σ.Β και τον μέσο όρο του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση ήταν 11,604 ± 0.864.

Η ομάδα αρνητικού ελέγχου έδειξε iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση σε χαμηλή ένταση (1,340 ± 0,092 τοις εκατό ). Οι McNaughton et al. (2002) βρήκαν ότι το iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)εκφράστηκε σε φυσιολογικά ηπατικά ακίνια. Η εξάπλωση του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)στο φυσιολογικό ήπαρ δείχνει την περιοχή γύρω από την πύλη με την ισχυρότερη έκφραση και η ένταση μειώνεται κατά μήκος των ηπατικών ακίνων. Σύμφωνα με τον Kubes (2000), iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)μπορεί να προσφέρει θεραπευτικά αποτελέσματα εάν ρυθμιστεί στη σωστή ποσότητα και θέση, το iNOS έχει θετικό ρόλο, συμπεριλαμβανομένης της επούλωσης του δέρματος και του εντερικού βλεννογόνου, την καταπολέμηση ορισμένων βακτηρίων, τη δυνατότητα στη ρύθμιση του πολλαπλασιασμού των Τ κυττάρων και τη διαφοροποίηση και τη ρύθμιση της στρατολόγησης λευκοκυττάρων .

Η ομάδα θεραπείας έδειξε σημαντική αύξηση στην ποσοστιαία περιοχή του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου) (p<0,001). diazinon="" such="" as="" organophosphate="" in="" general="" will="" be="" metabolized="" which="" mainly="" takes="" place="" in="" the="" liver.="" the="" metabolism="" that="" occurs="" in="" phase="" 1="" metabolism="" is="" an="" oxidation="" process,="" where="" organophosphate="" will="" be="" broken="" down="" into="" oxon-organophosphate="" metabolites="" and="" free="" sulfur="" ions="" with="" the="" help="" of="" cytochrome="" enzymes(cyp)(gupta,="" 2009).="" metabolites="" from="" phase="" 1="" metabolism="" are="" free="" radicals,="" unstable="" substances="" that="" have="" no="" electron="" pairs.="" free="" radicals="" will="" produce="" reactive="" oxygen="" species="" (ros)such="" as="" superoxide,="" hydroxyl="" radicals,="" and="" hydrogen="" peroxide="" through="" interactions="" with="" other="" molecules.="" free="" radicals="" react="" with="" phospholipids="" from="" the="" plasma="" membrane,="" endoplasmic="" reticulum="" membrane,="" or="" mitochondrial="" membrane="" and="" cause="" cell="" death="" (gupta,="" 2012).="" organophosphate="" pesticides="" can="" also="" cause="" oxidative="" stress(mishra,="" 2013).="" this="" oxidative="" stress="" condition="" is="" caused="" by="" diethyl="" as="" an="" organophosphate="" free="" radical(diazinon)that="" is="" capable="" to="" produce="" large="" amounts="" of="" ros.="" oxidative="" stress="" is="" an="" impaired="" balance="" between="" prooxidants="" and="" antioxidants="" that="" causes="" potential="" damage="" (uchendu="" et="" al.,="">

Το αυξανόμενο ROS θα πυροδοτήσει την παραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών. Τα αντιδραστικά είδη οξυγόνου επηρεάζουν τη μεταγραφή των προφλεγμονωδών κυτοκινών όπου τα υψηλά επίπεδα ROS θα ακολουθούνται από υψηλά επίπεδα προφλεγμονωδών κυτοκινών, ομοίως, εάν η παραγωγή ROS ανασταλεί με αναστολείς θα επηρεάσει επίσης τη μείωση της παραγωγής προφλεγμονωδών κυτοκινών όπως η IL{{0 }} και TNF (Naik and Vishva, 2012). Οι Dunlop et al. (2014) και Pahan et al. (2000) δήλωσαν ότι το TNF- και το IL-1 παίζουν ρόλο στην αύξηση της έκφρασης του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)στους ιστούς μέσω της ενεργοποίησης του Nappar Kappa B(NF-kB) όπου το NF-kB εισέρχεται στον πυρήνα και συνδέεται με την περιοχή προαγωγέα του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου). Η αυξημένη παραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών θα προκαλέσει iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)και σχηματίζουν υπερβολικές ποσότητεςΝιτρικό οξύ(ΟΧΙ) (Aktan, 2004).

3.2.Ανάλυση Ιστοπαθολογίας Νεφρού

Τα αποτελέσματα αυτής της έρευνας σχετικά με την επίδραση της τοξικότητας της διαζινόνης στονεφρόΤα ιστοπαθολογικά χαρακτηριστικά που χρησιμοποιούν τη χρώση Αιματοξυλίνης-Ηωσίνης (ΗΕ) παρουσιάζονται στο Σχήμα 2. Η ιστολογική εικόνα του νεφρικού φλοιού του αρουραίου στην ομάδα αρνητικού ελέγχου (Κ-) έδειξε μια φυσιολογική κατάσταση και δεν βρέθηκε ανωμαλία. Αυτό αποδεικνύεται από την εμφάνιση του νεφρικού σώματος, των εγγύς και άπω σπασμωδικών σωληναρίων με ένα στρώμα κυβοειδών επιθηλιακών κυττάρων (Εικόνα 2(1)).

Η ιστοπαθολογική εικόνα του νεφρικού φλοιού των αρουραίων στην ομάδα P1 έδειξε ανωμαλίες, που χαρακτηρίζονται από την παρουσία κυττάρων που υφίστανται καρυόλυση και υπερτροφία. Τα κύτταρα καρυόλυσης χαρακτηρίστηκαν από την εξαφάνιση του κυτταρικού πυρήνα, ενώ τα επιθηλιακά κύτταρα που υφίστανται υπερτροφία έχουν χαρακτηριστικά διευρυμένου μεγέθους κυττάρων έτσι ώστε η δομή των νεφρικών σωληναρίων να φαίνεται ακανόνιστη. Σε αυτή την εικόνα φαίνονται ερυθροκύτταρα στον διασωληνάριο χώρο, η οποία υποδεικνύει την παρουσία αιμορραγίας (Εικόνα 2(2). Η ιστοπαθολογική εικόνα στην ομάδα P2 δείχνει τις ανωμαλίες παρόμοιες με την ομάδα P1. Ανωμαλίες που μπορούν να παρατηρηθούν στον νεφρικό φλοιό των αρουραίων P2 περιλαμβάνουν την εμφάνιση κυττάρων που υποβάλλονται σε καρύλυση, υπερτροφία κυττάρων και αιμορραγία.Επιπλέον, η δομή τουνεφρότα σωληνάρια φαίνονται ακανόνιστα, σε σύγκριση με την ομάδα Κ (Εικόνα 2(3)). Η ιστοπαθολογική εικόνα του νεφρικού φλοιού των αρουραίων στην ομάδα P3 έδειξε ανωμαλίες όπως φαίνεται στην ιστοπαθολογική εικόνα του νεφρικού φλοιού σε αρουραίους Pl και P2, που χαρακτηρίζονται από την εμφάνιση υπερτροφίας κυττάρων, καρυόλυσης και ερυθροκυττάρων στον διασωληνιακό χώρο (αιμορραγία ). Μπορεί επίσης να παρατηρηθεί η παρουσία φλεγμονώδους κυτταρικής διήθησης στους ιστούς (Εικόνα 2(4)).

Η οργανοφωσφορική διαζινόνη που χορηγήθηκε στους αρουραίους από το στόμα θα αφομοιωθεί από την πεπτική οδό η οποία στη συνέχεια θα απορροφηθεί από το έντερο, ειδικά από το δωδεκαδάκτυλο. Ο μεταβολισμός των οργανοφωσφορικών λαμβάνει χώρα κυρίως στο ήπαρ, αλλά σε μικρότερο βαθμό ο μεταβολισμός συμβαίνει επίσης στην παλάμη και το έντερο. Τα οργανοφωσφορικά θα υποβληθούν σε μεταβολισμό φάσης 1, που είναι μια διαδικασία οξείδωσης όπου τα οργανοφωσφορικά θα διασπαστούν σε μεταβολίτες οξόνων-οργανοφωσφορικών και ελεύθερα ιόντα θείου με τη βοήθεια ενζύμων κυτοχρώματος (CYP) (Gupta, 2009· Elersek and Metka 2011). Ο μεταβολίτης οξόνη-οργανοφωσφορικό στη συνέχεια εισέρχεται στην κυκλοφορία του αίματος και πηγαίνει στο ήπαρ για περαιτέρω μεταβολισμό. Στο ήπαρ, οι μεταβολίτες οξόνων-οργανοφωσφορικών θα υδρολυθούν με τη βοήθεια των ενζύμων καρβοξυλεστεράση (CE) και παραοξονάση (PON), χωρίζονται σε φωσφορικό διαλκυλεστέρα και φεύγουν από την ομάδα. Στη συνέχεια, η διαλκυλοφωσφατάση θα καταλυθεί από ένζυμα στο μεταβολισμό της φάσης 2 που θα παράγουν μόρια που είναι υδρόφιλα και μπορούν να απεκκριθούν στα ούρα ενώ αφήνουν ομάδες (με τη μορφή διαιθυλίου) που μπορούν να προκαλέσουν οξειδωτικό στρες στο σώμα. Το διαιθύλιο είναι ένα πολύ αντιδραστικό μόριο και μπορεί να αντιδράσει με ομάδες ριζών υδροξυλίου (-ΟΗ) για να σχηματίσει νέες ελεύθερες ρίζες (Elersek και Metka, 2011). Ο υψηλός αριθμός ελεύθερων ριζών στο σώμα δεν μπορεί να εξουδετερωθεί από ενδογενή αντιοξειδωτικά, με αποτέλεσμα μια ανισορροπία μεταξύ των ελεύθερων ριζών και των αντιοξειδωτικών που προκαλεί οξειδωτική βλάβη (Caramori και Papi, 2004). Αυτή η οξειδωτική βλάβη συμβαίνει επειδή το διαιθυλ-υδροξύλιο ως ελεύθερη ρίζα από την οργανοφωσφορική διαζινόνη είναι σε θέση να παράγει μεγάλες ποσότητες ROS (Uchendu et al., 2012). Το αυξανόμενο ROS θα προκαλέσει στη συνέχεια συνθήκες οξειδωτικού στρες και θα ξεκινήσει τη διαδικασία της υπεροξείδωσης των λιπιδίων λαμβάνοντας ιόντα υδρογόνου από πολυακόρεστα λιπαρά οξέα (PUFA) για να σχηματίσουν πιο σταθερά μόρια. Η διαδικασία διάσπασης του δεσμού του PUFA μπορεί να προκαλέσει νέκρωση κυττάρων ή ιστών (Sharma et al., 2003).

Οι ανωμαλίες εμφανίστηκαν στονεφρόσωληνωτό επιθήλιο λόγω της άμεσης επαφής του επιθηλίου με την τοξική ουσία της διαζινόνης και στηννεφρόσωληνάριο, υπάρχει μια διαδικασία επαναρρόφησης και αύξησης στη διαδικασία σχηματισμού ούρων (Mescher, 2010). Η τοξική ουσία της διαζινόνης που βρίσκεται ακόμα στα αιμοφόρα αγγεία θα βρίσκεται σε άμεση επαφή με το ενδοθήλιο, προκαλώντας έτσι διαταραχή της διαπερατότητας της αγγειακής μεμβράνης. Η αιμορραγία στον διασωληνάριο χώρο προκλήθηκε από διαταραχή της διαπερατότητας της μεμβράνης των αιμοφόρων αγγείων (περισωληνοειδή τριχοειδή αγγεία) έτσι ώστε τα ερυθροκύτταρα να μπορούν να εισέλθουν στον ιστό (Djumadi et al., 2008). Ο τραυματισμός των ενδοθηλιακών κυττάρων προκαλεί φλεγμονώδεις αντιδράσεις, με αποτέλεσμα τη συσσώρευση μακροφάγων και αιμοπεταλίων έξω και μέσα στις αρτηρίες. Η εμφάνιση διήθησης φλεγμονωδών κυττάρων σε κατεστραμμένο ιστό υποδεικνύει ότι οι μεταβολίτες από τη διαζινόνη προκαλούν τοξικότητα στονεφρό(Khudair et al., 2017).

Με βάση τα αποτελέσματα της ιστοπαθολογικής εμφάνισης, ο νεφρικός φλοιός στην ομάδα θεραπείας παρουσίασε ανωμαλίες σε σύγκριση με την ομάδα Κ. Η ομάδα P1 με τη χαμηλότερη δόση των 20 mg/Kg Σ.Β ήταν γνωστό ότι είχε δείξει τη βλάβη τουνεφρόσωληνοειδή κύτταρα σε σύγκριση με την ομάδα Κ.

Το Cistanche βελτιώνει τη νεφρική λειτουργία

4. Συμπέρασμα

Η χορήγηση διαζινόνης με τη χαμηλότερη δόση των 20 mg/kg ΣΒ αποδείχθηκε ότι έχει τοξική δράση σε αρουραίους, όπως υποδεικνύεται από μια σημαντική αύξηση του iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)έκφραση (σελ<0.001)and showed="" the="" damage="" of="" the="" renal="" cortex="" in="" the="" form="" of="" renal="" tubular="" cell="" necrosis,="" hemorrhage,="" and="" renal="" tubular="" cell="">

5. Αναφορές

[1] Aktan, F 2004 iNOS (Συνθάση μονοξειδίου του αζώτου)-Μεσολαβημένη παραγωγή μονοξειδίου του αζώτου και κανονισμός αυτής. Life Sciences,75:639-653.

[2] Ameriana, M. 2006. Perilaku Petani Sayuran dalam Menggunakan Pestisida Kimia.J. Hort.18(1):95-106,2008.

[3] Arthur,CGand EHJohn.1997.Fisiologi Kedokteran.EGC.Edisi9.1997.

[4] Aulanni'am, A. Rosdiana και NL Rahmah.2012. The Potency of Sargassum duplicated Bory Extracts on Inflammatory Bowel Extract Disease Disease Therapy in Rattus norvegicus.Journal of Life Sciences 6:144-154.

[5] Caramori, G.and A. Papi.2004.Antioxidants in Organophosphorus Compounds Poisoning. IntJ Pharm Bio Sci,59 (2): 170-173.

[6] Cox, C.2000.Diazinon: Toxicology.Journal of Pesticide Reform/ Summer 20(2).

[7] Curthoys, NPand WM Orson.2014. Proximal Tubule Function and Response to Acidosis. Η Αμερικανική Εταιρεία Νεφρολογίας. Clinical Journal of the American Society of Nephrology 9:1627-1638

[8] Djumadi, H., dan H. Sugiyono.2008. Pengaruh Pemberian Insektisida Diazinon and Kurkumin Kunyit(Curcuma domestica) Per-Oral terhadap Perubahan Struktur Histologis Duodenum Mencit (Mus musculus).Jurnal Penelitian Sains & Teknologi,Τόμος 9(1):62-83.

[9] Dunlop, K., G.Kiranjot, K. Crystal, I.Julijana, D.Rupinder, D.Jean-Francois, ACKim, J. Amish, PJ McNamara και PJ Robert. 2014. Η θεραπευτική υπερκαπνία αποτρέπει τη συστολική δυσλειτουργία της δεξιάς κοιλίας που προκαλείται από εισπνεόμενο μονοξείδιο του αζώτου σε νεαρούς αρουραίους. Elsevier Inc. Free Radical Biology and Medicine 9: 35-49.

[10] Elersek,T.and F.Metka.2011.Pesticides: The Impacts of Pesticides Exposure.InTech Europe. Ριέκα.

[11] Frazier,SK, CSJohn,CHGordon,B.Graham, B.Roger, N.Shinji, N.Akiyoshi, D.Beate και B. Axel.2012. Πολλαπλασιαστικές και μη πολλαπλασιαστικές βλάβες του ουροποιητικού συστήματος αρουραίου και ποντικού. Toxicologic Pathology, 40:14S-86S

[12] Georgievskii, V.1.,BNAnnenkov, and VTSamokhin.2013.Material Nutrition of Animals: Studies in the Agricultural and Food Sciences. Butterworths & Co.(Publishers)Ltd.London. 160-161.

[13] Gupta, RC2012. Veterinary Toxicology Second Edition.Elsevier inc. Waltham.Οι ΗΠΑ.

[14]Hubrecht,R., and J.Kirkwood. 2010.The UFAW: Handbook of The Care and Management of Laboratory and Other Research Animals. Πανεπιστημιακή Ομοσπονδία για την Προστασία των Ζώων. Το Ηνωμένο Βασίλειο.

[15]Khudair, ZW, ASHanan και KE Manal.2017. Ιστοπαθολογικές αλλαγές που προκλήθηκαν στα εσωτερικά όργανα του λευκού αρουραίου μετά από έκθεση στο Diazinon.Bas..Vet.Res. 1(2)

[16] Kubes, P.2000.Inducible Nitric Oxide Synthase: A Little Bit of Good in All of Us. http://dx.doi.org/10.1136/gut.47.1.6 [24 Ιουλίου 2019].

[17] McNaughton, L., P.Lakshmi, AMMaria, K. Norm, M. Irvin, M. Redwan, H. Outayba, and WR Marek.2002. Κατανομή της συνθάσης μονοξειδίου του αζώτου σε φυσιολογικό και κιρρωτικό ανθρώπινο ήπαρ. Proceedings of the National Academy of Science Vol.99, No.26 17161-17166.

[18] Mescher, AL2010. Junqueira's Basic Histology: Text & Atlas 12 Edition.The McGraw-Hill Companies, Inc.Ηνωμένες Πολιτείες Αμερικής.

[19] Mishra, BP 2013. Antioxidant Status and Oxidative Stress in Organophosphate Pesticide Poisoning.IOSR.Journal of Dental and Medical Sciences (IOSR-JDMS)e-ISSN:2279-0853, p-ISSN:{{6} .Τόμος 7, Τεύχος 6 (Μάιος-Ιούν. 2013), PP 20-24