Αξιολόγηση της Αντικόπωσης και των Αντιοξειδωτικών Δραστηριοτήτων των Θαλάσσιων Μικροφυκών Isochrysis Galbana σε ποντίκια Ⅰ

Αφηρημένη

Η παρούσα εργασία είχε ως στόχο να εκτιμήσει το δυνατόκατά της κούρασηςεπίδραση και δυνητικός μηχανισμός τηςCistanche (σε ποντίκια. Τοκατά της κούρασηςδραστηριότητα 100,200, και 400 mg/kg) διευκρινίστηκε με φορτίο βάρουςτεστ αναγκαστικής κολύμβησης, και ο δυνητικός μηχανισμός ήτανδιερευνάται από τον προσδιορισμό τουπου σχετίζονται με την κούρασηβιοχημικήΠαράμετροι. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η προεπεξεργασία μεκιστανάκιπαρέτεινε τον εξαντλητικό χρόνο κολύμβησης καιαύξησαν τα επίπεδα του ηπατικού γλυκογόνου, του μυϊκού γλυκογόνου καιγλυκόζης αίματος με δοσοεξαρτώμενο τρόπο. Εκτός από τοαυξημένα επίπεδα αμινοτρανσφεράσης αλανίνης, ασπαρτικούαμινοτρανσφεράση, γαλακτικό οξύ αίματος, γαλακτική αφυδρογονάση,η κινάση της κρεατίνης και το άζωτο της ουρίας του αίματος από την εξάντλησηκολύμβηση, μετριάστηκαν δραματικά με την προεπεξεργασίαμε Επιπλέον, συμπλήρωση μεκιστανάκιενίσχυσε την υπεροξειδάση και το υπεροξείδιο της γλουταθειόνηςεπίπεδα δισμουτάσης, ενώ μειώνει το επίπεδο της μηλοναλδεΰδης. Συνολικά, αποκαλύφθηκε αξιοσημείωτη αποτελεσματικότηταανακουφίζει το λίπος, και ο μηχανισμός σχετίζεταιμε ευνοϊκή τροποποίηση της διαδικασίας κατανάλωσης ενέργειας, το μεταβολισμό και την άμβλυνση του οξειδωτικού στρεςβλάβη.

Λέξεις-κλειδιά:Cistanche, Δραστηριότητα κατά της κούρασης, Αντιοξειδωτική δράσηκαιΏρα κολύμβησης και Βιοχημικήδείκτης,Εχινακοσίδη, Βερμπασκοσίδη

Για περισσότερες πληροφορίες: Επινεφριδιακή κόπωση

Εισαγωγή

Η κόπωση θεωρείται ότι είναι σωματική ή/και πνευματική κόπωσηπου επηρεάζει αρνητικά την αθλητική ικανότητα, την εργασιακή επίδοση,οικογενειακές σχέσεις και κοινωνική αλληλεπίδραση (Mehta και Agnew,2012). Σωματική κόπωσηορίζεται συνήθως ως έλλειψηικανότητα διατήρησης εθελοντικών δραστηριοτήτων, η οποία λαμβάνεται υπόψησχετίζεται με φυσιολογική πτώση και συνήθως προκαλείται από υπερβολική άσκηση που συνοδεύεται από εκφυλισμό στην απόδοση της άσκησης (Tanaka et al.,2008). Έχει αναφερθεί ότι το μακροχρόνιο σωρευτικό σωματικό λίπος μπορεί να οδηγήσει σε πολλαπλά σοβαράσύνδρομα που σχετίζονται με την κόπωση(Fischer et al.,2014). Αρκετές ελκυστικές θεωρίες, συμπεριλαμβανομένης της «θεωρίας της εξάντλησης», της «ριζικής θεωρίας», της «θεωρίας απόφραξης» και ορισμένων άλλων έχουν παρουσιαστεί για να εξηγήσουν τους μηχανισμούςσωματική κόπωση(Zhong et al.,2017). Σύμφωνα με αυτές τις θεωρίες, η εξάντληση ενέργειας, η συσσώρευση ριζών και η μεταβολική απόφραξη είναι καλά καθιερωμένες ως οι κύριοι επαγωγείς λίπους (Zhao et al.,2015). Ωστόσο, λίγα αποτελεσματικά φαρμακολογικά φάρμακα ή θεραπείες είναι επί του παρόντος διαθέσιμα για την εξάλειψη του λίπους (Gupta et al.,2009). Ως εκ τούτου, αξίζει τον κόπο να αναπτυχθούν ασφαλείς και αποτελεσματικές λειτουργικές τροφές κατά του λίπους για την ενίσχυση της αντοχής στην άσκηση, την αναβολή της παραγωγής ή την προώθηση της αποβολής του λίπους. Λόγω της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνες, βιταμίνες,πολυσακχαρίτες, πολυακόρεστα λιπαρά οξέα (PUFAs), μονοακόρεστα λιπαρά οξέα (MUFAs) και φωτοσυνθετικά φυτά (Matos et al.,2017), τα μικροφύκη έγιναν ένας από τους πιο επίδοξους προμηθευτές συστατικών και βιοδραστικών ενώσεων για νέα προϊόντα διατροφής για την ανύψωση της θρεπτικής και γευστικής αξίας των τροφίμων και την προώθηση της ανθρώπινης υγείας (Nuno et al.,2013). Cistanche (είναι σημαντικό είδος θαλάσσιων μικροφυκών. Περιέχει πλούσια βιοενεργά υλικά και αναγνωρίζεται ως πλούσια πηγή PUFAs, γεγονός που το καθιστά σημαντικής φαρμακευτικής αξίας και δυνητικά πολλά υποσχόμενο για τη βιομηχανία τροφίμων (Bandarra et al.,2003). Έρευνες έχουν δείξει ότι τα PUFA παίζουν ευεργετικό ρόλο στην άσκηση αντοχής (Shei et al.,2014), και το οξειδωτικό στρες (Devos et al.,2006). Αν και οι βιοδραστικές ιδιότητες της βιομάζας ή/και του εκχυλίσματος της έχουν αποδειχθεί (Raposo et al.,2013), λίγη προσοχή έχει αφιερωθεί στη διερεύνηση των πιθανών φαρμακολογικών δραστηριοτήτων του, Ως εκ τούτου, η παρούσα μελέτη διεξήχθη σε μια πρωτοποριακή προσπάθεια να επενδύσει την πιθανή αντιλιπιδική δράση και μηχανισμό της δυνητικής θρεπτικής ουσίας.

Η αντιλιπιδική δράση της σπιρουλίνας (Cyanophyceae) επενδύθηκε συγκριτικά από την προοπτική της ενέργειαςκατανάλωση, συσσώρευση μεταβολιτών, κυτταρική βλάβη καιενδοσωματική οξειδωτική κατάσταση. Συγκεκριμένα, η αντιλιπιδική δράσητου όπως αξιολογείται διαισθητικά με τη μέτρηση της κολύμβησηςχρόνος αντοχής των ποντικών. Και κάποιες βιοχημικές παραμέτρουςπου σχετίζονται στενά με το λίπος προσδιορίστηκαν για να απεικονίσουν τοπιθανούς μηχανισμούς στους οποίους βασίζεται η αντιλιπιδική του δράση.Αυτή είναι η πρώτη μελέτη που αναφέρει τη δράση κατά του λίπουςτου nd τα μικροφύκια τουPrymnesiophyceae. Τα αποτελέσματαπαρείχε αναζωογονητική δράση κατά της κόπωσηςπου συνέβαλε στην ενίσχυση της σύγχρονης εφαρμογήςκαι φαρμακοδυναμική δραστηριότητα αυτού του θαλάσσιουμικροφύκη. Η πολλά υποσχόμενη αντιλιπιδική δράση τουυποδηλώνει ότι έχει τις ελπιδοφόρες δυνατότητες ανάπτυξηςσε ένα θαλάσσιο συμπλήρωμα διατροφής για την ανακούφιση της κούρασης.

Υλικά και μέθοδοι

Υλικά και αντιδραστήριακαι η σπιρουλίνα παρασχέθηκαν από το Freshwater Algae CultureΣυλλογή στο Ινστιτούτο Υδροβιολογίας (FACHBσυλλογή) της Κινεζικής Ακαδημίας Επιστημών (Wuhan,Κίνα). Τα κιτ βιοχημικής ανάλυσης γαλακτικού οξέος(LA), ηπατικό γλυκογόνο, μυϊκό γλυκογόνο, υπεροξειδική δισμουτάση(SOD), μηλονοδιαλδεΰδη (MDA) και γλουταθειόνηΗ υπεροξειδάση (GSH-Px) ελήφθη από την Jiancheng BioengineeringΙνστιτούτο (Ναντζίνγκ, Κίνα). Χρησιμοποιούνται όλα τα αντιδραστήριαστο πείραμα ήταν τουλάχιστον αναλυτικού βαθμού.Παρασκευή εξαιρετικά λεπτής σκόνης απόΤο G και η σπιρουλίνα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία σε εξαιρετικά λεπτή σκόνη γιαπειράματα σε ζώα σύμφωνα με προηγούμενες μελέτες (Luoet al.,2017). Εν συντομία, τα δείγματα ξηράνθηκαν στους 50°C C για 24 ώρες,έσπασε από έναν σφαιρόμυλο και κοσκινίστηκε διαδοχικά μέσα από τομέγεθος ματιών 80 και 500 για να ληφθεί το ικανοποιητικό σωματίδιομέγεθος nd σπιρουλίνας. και η σπιρουλίνα ανεστάλησε φυσιολογικό ορό για από του στόματος χορήγηση.

Ζώο

Συνολικά 120 αρσενικά και 10 θηλυκά ποντίκια Kunming (KM).(20-25 g) ελήφθησαν από το Medical Experiment AnimalΚέντρο Κινέζικης Ιατρικής του Πανεπιστημίου Guangzhou(GZUCM, Guangzhou, Κίνα). Όλα τα ζώα στεγάστηκανπροσαρμοστικά για 7 ημέρες σε ελεγχόμενη θερμοκρασία(23 ± 1  Γ) και 40–60 τοις εκατό υγρασία πριν από το πείραμα.Το πείραμα διεξήχθη τηρώντας τις οδηγίεςπαρέχονται από την Επιτροπή Μέριμνας Ζώων και εγκρίνονται από τηνΕπιτροπή Θεσμικής Δεοντολογίας της GZUCM (Αρ. 2016047) καιδιεξάγονται σύμφωνα με τα Εθνικά Ινστιτούτα Υγείας(NIH) κατευθυντήριες γραμμές. Όλες οι θεσμικές και εθνικές κατευθυντήριες γραμμές γιαακολουθήθηκε η φροντίδα και η χρήση των πειραματόζωων.

Οξεία στοματική τοξικότητα του

Μελέτη οξείας στοματικής τοξικότητας σχετικά με την παροχήπροκαταρκτικές πληροφορίες ασφαλείας σύμφωνα με το πάνω και το κάτωδιαδικασία (UDP)'' που συνιστάται από την κατευθυντήρια γραμμή του ΟΟΣΑ(ΟΟΣΑ,2008). Εν συντομία, δύο πειραματικές ομάδες ποντικών(5 αρσενικά ποντίκια και 5 θηλυκά ποντίκια σε κάθε ομάδα, αντίστοιχα) υποβλήθηκαν σε θεραπεία από το στόμα με εφάπαξ δόση 0 και5000 mg/kg σώματος εμείς. Ποντίκια που λαμβάνουν το όχημα (αλατόνερο) χρησίμευε ως έλεγχος. Τα ποντίκια παρατηρήθηκαν για μια περίοδο14 ημέρες. Τροφή και νερό παρείχαν σε όλη την έκτασηπείραμα. Για 14 ημέρες τα ζώα παντρεύονταν και τασημειώθηκε αριθμός θανάτων. Εάν υπάρχουν περισσότερα από 3 ζώα από κάθε φύλοεπιβιώσει στην ομάδα επανάληψης θεραπείας, το LD50 θεωρείται ότιείναι μεγαλύτερη από την οριακή δόση χορήγησης (5000 mg/kg).

Πειραματική δόση Cistanch σε ζώα για κατά της κούρασης

Το πείραμα (F1) πραγματοποιήθηκε όπως προηγουμένωςπεριγράφεται με τροποποιήσεις sl (Duan et al.,2017; Zamanian et al.,2017). Τα ποντίκια χρησιμοποιήθηκαν σε 6 ομάδες:κανονική ομάδα ελέγχου (NC), ομάδα μοντέλου (MC), θετικήομάδα ελέγχου (σπιρουλίνα, 800 mg/kg) και επανάληψη θεραπείαςομάδες (100, 200 και 400 mg/kg). 20 ποντίκια ήταν τυχαίαχρησιμοποιήθηκαν σε κάθε ομάδα ενώ 10 ποντίκια συμμετείχαν στην ομάδαΗ ομάδα NC [10 ποντίκια ανά ομάδα εκτός από την ομάδα NC ήτανυποβλήθηκε σε δοκιμασία αναγκαστικής κολύμβησης για την καταγραφή της κολύμβησηςχρόνο (n=10) και τα υπόλοιπα 10 ποντίκια σε κάθε ομάδα ήτανδόθηκε ένα 90-λεπτό κολύμπι για τη μέτρηση των βιοχημικώνπαραμέτρους που σχετίζονται με το λίπος (n=10)]. Οι δόσεις τωνεπιλέχθηκαν με βάση τα προκαταρκτικά πειράματά μας. NCκαι MC ομάδες χορηγήθηκαν ενδογαστρικά μεφυσιολογικό ορό, ενώ άλλες ομάδες υποβλήθηκαν σε προεπεξεργασία μεαντίστοιχους αντιπροσώπους για 14 συνεχόμενες ημέρες, αντίστοιχα.

Προπόνηση άσκησης κολύμβησης

Η προπόνηση κολύμβησης γινόταν δύο φορές την εβδομάδαγια 20 λεπτά κάθε φορά. Εν συντομία, όλες οι ομάδες ποντικών ήτανεκτελείται με βάση μια τακτική και μέτρια κολύμβησηπρόγραμμα χωρίς φόρτωση βάρους σε πισίνα με αλεία επιφάνεια (40 cm9 35 cm). Το νερό μέσαη πισίνα είχε βάθος 30 cm και διατηρήθηκε στα 25± 2  C. 

Τεστ αναγκαστικής κολύμβησης με βάρος

Το τεστ αναγκαστικής κολύμβησης (FST) προχώρησεόπως αναφέρθηκε προηγουμένως με ήπιες τροποποιήσεις(Zhong et al.,2017). Εν συντομία, 30 λεπτά μετά την τελευταία διοίκηση10 ποντίκια σε κάθε ομάδα εκτός από την ομάδα NC υποβλήθηκαν σεFST. Τα ποντίκια φορτώθηκαν το 5 τοις εκατό του αντίστοιχου τουςσώμα στερεώσαμε στη βάση της ουράς και αναγκάσαμε να κολυμπήσουμε στοίδιες συνθήκες με την προπόνηση κολύμβησης. Εξάντλησηορίστηκε από παρατηρήσιμη ανισορροπία κινητικότητας και αποτυχία ναεπιστρέψτε στην επιφάνεια μέσα σε 10 δευτερόλεπτα, και ο χρόνος αντοχής ήτανκαταγράφηκε αμέσως. Η διάρκεια για επίπλευση, αγώνας καιΟι απαραίτητες κινήσεις των ποντικών μετρήθηκαν στην κολύμβησηαντοχή μέχρι εξάντλησης και πιθανή βύθιση.

Συλλογή δειγμάτων

Τα υπόλοιπα ποντίκια κάθε ομάδας (n=10) χωρίς FST, ήτανπου λαμβάνονται για τη μέτρηση των βιοχημικών παραμέτρωνσυνδέονται με το λίπος. Εν συντομία, 30 λεπτά μετά την τελική ελαστικότηταποντίκια τοποθετήθηκαν στην πισίνα και αναγκάστηκαννα κολυμπάς συνεχώς χωρίς φορτία για 90 λεπτά και μετάαμέσως αναισθητοποιήθηκε. Στη συνέχεια, το αίμα των ζώωνσυλλέχθηκε σε ηπαρινισμένους σωλήνες με αφαίρεση των βολβών καιτοποθετείται σε θερμοκρασία δωματίου για 30 λεπτά. Ορός υποβλήθηκε σεφυγοκέντρηση στους 10009g στις 4 C για 15 λεπτά και αποθηκεύεται σε- 80  C για περαιτέρω ανάλυση των επιπέδων γλυκόζης στο αίμα (Glu),LA, γαλακτική αφυδρογονάση (LDH), κινάση κρεατίνης (CK), αίμαάζωτο ουρίας (BUN), αμινοτρανσφεράση αλανίνης (ALT), ασπαρτικόαμινοτρανσφεράση (AST), MDA, GSH-Px και SOD. Συκώτικαι οι γαστροκνήμιοι μύες αφαιρέθηκαν και πλύθηκαν σε παγωμένοαλατούχο διάλυμα και διατηρείται σε- 80  Γ μέχρι τον προσδιορισμόπραγματοποιήθηκε περιεκτικότητα σε γλυκογόνο.

Μέτρηση βιοχημικών που σχετίζονται με το λίποςΠαράμετροι

Τα επίπεδα BUN, Glu, CK, LDH, ALT και AST ήτανμετρήθηκε με βιοχημικό αναλυτή τύπου Hitachi -7180ακολουθώντας τις τυπικές μεθόδους. Τα επίπεδα SOD, GSHPx, MDA, LA, ηπατικό γλυκογόνο και μυϊκό γλυκογόνο ήτανεκτιμάται από εμπορικά κιτ προσδιορισμού μετά το manualοδηγός κατασκευαστή.

Στατιστική ανάλυση

Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος± τυπική απόκλιση (SD) καιαναλύθηκε από το λογισμικό SPSS 19.0 (IBM, Armonk, NY,ΗΠΑ). Αναλύθηκαν οι διαφορές μεταξύ πολλαπλών ομάδωνΑκολούθησε μια μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης (ANOVA).με τη δοκιμή πολλαπλής σύγκρισης LSD και το Dunnett T3δοκιμή.p \Το 0.05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντικό.