Επιδράσεις ενός θρεπτικού προϊόντος με βάση τα φρούτα και τα λαχανικά σε βιοδείκτες φλεγμονής και οξειδωτικής κατάστασης στο πλάσμα ενός υγιούς πληθυσμού: Ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο, διπλή-τυφλή και τυχαιοποιημένη κλινική δοκιμή

Email επικοινωνίαςtina.xiang@wecistanche.comΓια περισσότερες πληροφορίες

Αφηρημένη: Υπάρχουν επιστημονικές αποδείξεις για τη θετική επίδραση τουπολυφαινόλεςαπό φυτικές τροφές επάνωφλεγμονή καιοξειδωτικόκατάσταση. Ο σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να διερευνήσει εάν η θεραπεία με ένα θρεπτικό προϊόν υψηλής πολυφαινόλης μειώνει τη συγκέντρωση στο πλάσμα ορισμένωνοξειδωτικόκαιφλεγμονώδηςβιοδείκτες σε έναν υγιή πληθυσμό. Εκατόν οκτώ άτομα επιλέχθηκαν και στρωματοποιήθηκαν ανά φύλο στην ομάδα παρέμβασης (n {{0}}) και στην ομάδα εικονικού φαρμάκου (n=55). Ενενήντα δύο άτομα ολοκλήρωσαν τη μελέτη μετά από δύο 16-εβδομαδιαίες περιόδους θεραπείας που χωρίστηκαν από μια περίοδο έκπλυσης τεσσάρων εβδομάδων. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν στατιστικά σημαντικές διαφορές στα άτομα που έλαβαν θεραπεία με το πολυφαινολικό εκχύλισμα σε σύγκριση με το εικονικό φάρμακο: Μείωση στην ομοκυστεΐνη, οξειδωμένη λιποπρωτεΐνη χαμηλής πυκνότητας (OxLDL), TNF-, sTNFR1 και C-αντιδρώσα πρωτεΐνη (CRP). Η πιο σημαντική μείωση παρατηρήθηκε για το OxLDL (από 78,98 ± 24,48 σε 69,52 ± 15,64, p < 0.05)="" και="" crp="" (από="" 1,50="" ±="" 0.="" 33="" έως="" 1,39="" ±="" 0,37,="" p="">< 0,05),="" και="" τα="" δύο="" παρουσιάζουν="" σημαντικές="" διαφορές="" σε="" σύγκριση="" με="" το="" εικονικό="" φάρμακο="" (p="">< 0,001).="" επιπλέον,="" οι="" κατεχολαμίνες="" αυξήθηκαν="" μετά="" τη="" χορήγηση="" του="" υπό="" έρευνα="" προϊόντος,="" ειδικά="" στην="" περίπτωση="" της="" ντοπαμίνης="" (από="" 15,43="" ±="" 2,66="" σε="" 19,61="" ±="" 5,73,="" p="">< 0,05).="" ως="" εκ="" τούτου,="" η="" κατανάλωση="" ενός="" θρεπτικού="" προϊόντος="" με="" βάση="" τα="" φρούτα="" και="" τα="" λαχανικά="" με="" υψηλή="" περιεκτικότητα="" σε="" πολυφαινόλες="" φαίνεται="" να="" βελτιώνει="" τις="" παραμέτρους="" που="" σχετίζονται="" με="" τα="" οφέλη="" για="" την="" υγεία="">οξειδωτικόκαιφλεγμονώδηςβιοδείκτες), συμπεριλαμβανομένων αξιοσημείωτων αλλαγών στην έκφραση των κατεχολαμινών.

Λέξεις-κλειδιά: πολυφαινόλη; βιοδείκτες; οξειδωτικό στρες? καρπός; λαχανικό; διατροφική

1. Εισαγωγή

Η επιστημονική βιβλιογραφία έχει τεκμηριώσει το ρόλο της διατροφής στην πρόληψη μη μεταδοτικών ασθενειών όπως η παχυσαρκία, τα καρδιαγγειακά νοσήματα, ο καρκίνος και όλες οι αιτίες θανάτου, ιδιαίτερα μέσω της κατανάλωσης φρούτων και λαχανικών για την υψηλή περιεκτικότητά τους σε βιοδραστικές ενώσεις, κυρίως πολυφαινόλες [1. ,2]. Υπάρχει μια αντίστροφη σχέση μεταξύ της μεσογειακής διατροφής, που χαρακτηρίζεται από υψηλή κατανάλωση προϊόντων πλούσιων σε πολυφαινόλες, μέσω της κατανάλωσης τροφών και ποτών πλούσιων σε πολυφαινόλες όπως φρούτα, λαχανικά, κακάο, τσάι και καφές, και τον κίνδυνο για κάθε αιτία θνησιμότητα [3,4]. Παρά το γεγονός ότι έχει αποδειχθεί ότι η κατανάλωση 800 g/ημέρα φρούτων και λαχανικών μειώνει τον κίνδυνο καρδιαγγειακών παθήσεων και θνησιμότητας από όλες τις αιτίες και 600 g/ημέρα μειώνει τον κίνδυνο καρκίνου, ο ΠΟΥ και αρκετές διατροφικές οδηγίες εξακολουθούν να συνιστώ 400 g/ημέρα [5]. Ωστόσο, το μεγαλύτερο μέρος του πληθυσμού δεν φτάνει καν το ελάχιστο που καθορίζουν οι υγειονομικές αρχές, το οποίο ισοδυναμεί με πέντε μερίδες φρούτων και λαχανικών την ημέρα [6,7]. Τα οφέλη που σχετίζονται με τον υγιεινό τρόπο ζωής είναι γνωστά παγκοσμίως, με νέα προϊόντα να εμφανίζονται που προσφέρουν τη δυνατότητα ενσωμάτωσης των προαναφερθέντων βιοδραστικών ενώσεων μέσω συμπληρωμάτων/θρεπτικών ουσιών, γεγονός που βοηθά στην επίτευξη των διατροφικών συστάσεων [8].

Επιπλέον, λόγω της προοδευτικής γήρανσης του πληθυσμού, μεταξύ άλλων παραγόντων όπως η διατροφή και ο τρόπος ζωής, παρατηρείται επιταχυνόμενη αύξηση των νευροεκφυλιστικών νοσημάτων, με κύριο εκθέτη την ΝΑ, της οποίας ο επιπολασμός διπλασιάζεται κάθε 20 χρόνια. Λόγω του αντίκτυπου και του κοινωνικού κόστους που προκαλεί, έχουν διεξαχθεί πολλές μελέτες σχετικά με τη σχέση μεταξύ της κατανάλωσης φρούτων και λαχανικών ως συμβολή αντιοξειδωτικών που μειώνουνοξειδωτικόβλάβη στο επίπεδο του εγκεφάλου [9].

Οι πολυφαινόλες παράγονται ως δευτερογενείς μεταβολίτες των φυτών ως αμυντικός μηχανισμός έναντι δυσμενών συνθηκών (παράσιτα, κλίμα ή ρύπανση, μεταξύ άλλων) [10] και σχηματίζουν μια ευρεία ομάδα βιοδραστικών φυτοχημικών, συμπεριλαμβανομένων των φαινολικών οξέων, στιλβενίων, λιγνάνων, φαινολικών αλκοολών και φλαβονοειδή [11,12]. Παρέχουν πιθανές επιδράσεις στην πρόληψη και τη θεραπεία πολλών παθολογιών, όπως καρδιαγγειακών παθήσεων, καρκίνου, σακχαρώδη διαβήτη και γήρανσης και νευροεκφυλιστικών ασθενειών [13] μέσω πολλών βιοδραστηριοτήτων (καρδιοπροστατευτική δράση, αντι-φλεγμονώδηςδραστηριότητα, αντιγηραντική δράση, αντιοξειδωτική δράση, αντικαρκινική δράση, αντιμικροβιακές επιδράσεις, νευροπροστατευτικές επιδράσεις, προστατευτικές επιδράσεις των πνευμόνων, προστατευτικές επιδράσεις στα νεφρά, πρόληψη της οστεοπόρωσης και προστασία από την υπεριώδη ακτινοβολία) [14]. Οι πολυφαινόλες εξασθενούνφλεγμονήμε την καταστολή προ-φλεγμονώδηςμεταγραφικοί παράγοντες από την αλληλεπίδραση με τις πρωτεΐνες που εμπλέκονται στη γονιδιακή έκφραση και τη σηματοδότηση των κυττάρων [15]. Η αγγειοδιασταλτική, αγγειοπροστατευτική, αντιθρομβωτική, αντιλιπαιμική, αντισκληρωτική, αντιφλεγμονώδης και αντι-αποπτωτική ικανότητα των πολυφαινολών είναι συνέπεια των υγιεινών ιδιοτήτων τους [12], λαμβάνοντας υπόψη ότι οι πολυφαινόλες είναι η κύρια πηγή αντιοξειδωτικών (10 φορές υψηλότερη από τη βιταμίνη C και 100 φορές υψηλότερο από τη βιταμίνη Ε και τα καροτενοειδή) [16]. Στην πραγματικότητα, η κερσετίνη, η μυρικετίνη και η καμπφερόλη είναι φλαβανόλες, τα φλαβονοειδή με την υψηλότερη ικανότητα εξουδετέρωσης των ελεύθερων ριζών, καθώς η δομή της φαινολικής ομάδας τους είναι ικανή να συλλαμβάνει τα ασύζευκτα ηλεκτρόνια του ROS, δημιουργώντας εξουδετερωμένα αντιδραστικά είδη [17]. Ωστόσο, η συγκέντρωση των πολυφαινολών στο πλάσμα εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τη χημική δομή και τη διατροφική πηγή, επομένως συνιστάται η μακροχρόνια λήψη για να επιτευχθούν όλα τα σχετικά οφέλη [12].

Ο στόχος της τρέχουσας κλινικής δοκιμής ήταν να αξιολογήσει εάν η μακροχρόνια κατανάλωση μεγάλης ποικιλίας πολυφαινολών μέσω ενός θρεπτικού προϊόντος με βάση τα φρούτα και τα λαχανικά είναι ικανή να βελτιώσει τους βιοδείκτες που σχετίζονται μεφλεγμονήκαιοξειδωτικόκατάσταση σε υγιή άτομα που δεν καταναλώνουν τις συνιστώμενες ποσότητες φρούτων και λαχανικών. Επιπλέον, ο υγιής μη ηλικιωμένος πληθυσμός έχει αποτελέσει αντικείμενο ελάχιστων μελετών παρέμβασης που συσχετίζουν την κατανάλωση φρούτων και λαχανικών και τα επίπεδα κατεχολαμινών ως μεταβλητές που σχετίζονται με τη γνωστική λειτουργία [27,28,34].

2. Αποτελέσματα

2.1. Πληθυσμός Μελέτης

Συνολικά 108 άτομα συμπεριλήφθηκαν σε αυτή τη μελέτη (Ο Πίνακας 1 δείχνει τα δημογραφικά τους δεδομένα), χωρισμένα σε δύο ομοιογενείς ομάδες (Ν1 και Ν2). Τέλος, μετά από διασταύρωση και απώλεια παρακολούθησης, 92 άτομα (N1=48, N2=44) ​​ολοκλήρωσαν την παρέμβαση και συμπεριλήφθηκαν στην τελική στατιστική ανάλυση, όπως απεικονίζεται στο Σχήμα 1.

2.2. Πλαστικοί Βιοδείκτες

Οι μέσοι όροι και οι τυπικές αποκλίσεις όλων των βιοδεικτών που αναλύθηκαν σε όλα τα άτομα, τόσο κατά την έναρξη όσο και στο τέλος της παρέμβασης μετά την πρόσληψη πολυφαινολικού εκχυλίσματος (EXT) ή την πρόσληψη εικονικού φαρμάκου (PLA), απεικονίζονται στον Πίνακα 2.

Όσον αφορά το λιπιδικό προφίλ, η διακύμανση της υψηλής πυκνότητας λιποπρωτεΐνης (HDL) χοληστερόλης ανάλογα με τον τύπο του προϊόντος που καταναλώθηκε ήταν αξιοσημείωτη. Οι τιμές HDL μειώθηκαν σημαντικά μετά την κατανάλωση PLA (Δ4,52 mg/dL, p<0.05),while increased="" significantly="" in="" the=""><0.05).additionally, the="" difference="" between="" both="" groups="" was="" also="" statistically="" significant="" at="" the="" end="" of="" the=""><0.05). finally,="" total="" cholesterol="" and="" triglycerides="" values="" did="" not="" show="" significant="" differences="" throughout="" the="" intervention="" after="" pla="" or="" ext="">
Regarding the vitamins analyzed, a slight increase in vitamin B12 was observed in both groups, as well as small non-significant variations in vitamin E values, as shown in Table2(p>0.05). Για παράδειγμα, η βιταμίνη Β12 ποικίλλει μετά τη θεραπεία κατά τη λήψη και στις δύο ομάδες PLA και EXT. Ωστόσο, δεν βρέθηκαν σημαντικές διαφορές (p=0.43 και p=0.20, αντίστοιχα). Στην περίπτωση της βιταμίνης Ε, οι τιμές διέφεραν στις ομάδες PLA(p=0.98) και EXT(p=0.91).Επιπλέον, συγκρίνοντας μεταξύ των ομάδων στο τέλος της παρέμβασης, δεν Παρατηρήθηκαν σημαντικές διαφορές είτε για τη βιταμίνη Β12 (ρ=0.205) ή τη βιταμίνη Ε (ρ=0.974).

Όσον αφορά τις τιμές των κατεχολαμινών, το κύριο εύρημα ήταν η σημαντική αύξηση της ντοπαμίνης (Δ4,18 pg/mL, p<0.001)after consumption="" of="" ext="" with="" respect="" to="" pla="" (p="0.22)," showing="" significant="" differences="" between="" groups="" at="" the="" end="" of="" the="" intervention=""><0.001). a="" significant="" increase="" in="" norepinephrine="" values="" was=""><0.05), with="" an="" increase="" of="" ∆="" 39.21="" pg/ml="" in="" the="" ext="" group,="" not="" observed="" in="" the="" pla="" group="" (p="0.72)." there="" was="" no="" signifificant="" difference="" between="" the="" groups="" at="" the="" end="" of="" the="" study.="" analyzing="" the="" cortisol="" and="" adrenaline="" values,="" no="" signifificant="" differences="" were="" observed="" in="" any="" group="" during="" the="" intervention,="" nor="" at="" the="" end="" of="" the="">

Η λειτουργία του θυρεοειδούς προσδιορίστηκε από τις ορμόνες T3, T4 και TSH. Κατά τη διάρκεια της παρέμβασης, παρατηρήθηκε ότι οι τιμές της ορμόνης Τ3 μειώθηκαν σημαντικά και στις δύο ομάδες (p < 0.05).="" οι="" τιμές="" της="" ορμόνης="" τ4="" κυμαίνονταν="" με="" διαφορετικούς="" τρόπους,="" αυξάνοντας="" σημαντικά="" στην="" ομάδα="" pla="" (δ="" 0.57="" mcg/l,="" p="">< 0.001)="" και="" μειώθηκαν="" μη="" σημαντικά="" στην="" ομάδα="" ext="" (δ="" 0,47="" mcg="" εγαλο).="" εν="" τω="" μεταξύ,="" οι="" τιμές="" της="" ορμόνης="" tsh="" παρέμειναν="" σταθερές="" μετά="" την="" κατανάλωση="" και="" των="" δύο="" προϊόντων.="" συγκρίνοντας="" την="" εξέλιξη="" των="" τριών="" ορμονών="" μεταξύ="" των="" ομάδων="" στο="" τέλος="" της="" μελέτης,="" δεν="" παρατηρήθηκαν="" σημαντικές="" διαφορές="" για="" την="" t3="" (p="0.195)," την="" t4="" (p="0.195)" ή="" την="" tsh="" (ρ.="">

Για να προσδιοριστεί η ασφάλεια των υπό έρευνα προϊόντων, οι τρανσαμινάσες (GOT, GPT και GAMMA GT) αναλύθηκαν προκειμένου να αξιολογηθεί η ηπατική λειτουργία των υποκειμένων, χωρίς να παρατηρηθούν σημαντικές αλλαγές (p > 0.05) σε οποιαδήποτε των προαναφερθέντων ηπατικών ενζύμων μετά την κατανάλωση είτε του προϊόντος είτε του εικονικού φαρμάκου. Επομένως, μπορεί να υποτεθεί ότι η πρόσληψη των προϊόντων είναι ασφαλής.

3. Συζήτηση

Όπως σχολιάστηκε παραπάνω, τα δεδομένα που λαμβάνονται στο παρόν χειρόγραφο αντικατοπτρίζουν ορισμένες διαφορές μεταξύ των θεραπειών. Ωστόσο, υπό βασικές συνθήκες, δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων, γεγονός που ενισχύει τις σημαντικές αλλαγές που προέκυψαν μετά την κατανάλωση του προϊόντος.

Η πλασματική ομοκυστεΐνη θεωρείται δείκτης καρδιαγγειακού κινδύνου που μπορεί να τροποποιηθεί μέσω της άσκησης και της διατροφής. Επιπλέον, η υψηλή νευροπροστατευτική του δράση είναι ευρέως γνωστή [35,36]. Ωστόσο, φαίνεται ότι τα τρόφιμα παρέχουν μια σταθερή παροχή θρεπτικών συστατικών για τη διατήρηση του βέλτιστου μεταβολισμού της ομοκυστεΐνης [37]. Στη μελέτη μας, η ομοκυστεΐνη μειώθηκε σημαντικά μετά την κατανάλωση του προϊόντος, όπως και σε προηγούμενες μελέτες [22,38]. Επομένως, η κατανάλωση πολυφαινολών σε υψηλές δόσεις βοηθά στη μείωση της ομοκυστεΐνης, η οποία θα μπορούσε να θεωρηθεί ως καρδιοπροστατευτική ικανότητα. Με τη σειρά τους, το λιπιδικό προφίλ, η ολική χοληστερόλη και τα τριγλυκερίδια δεν επηρεάστηκαν καθ' όλη τη διάρκεια της παρέμβασης. Ωστόσο, ήταν αξιοσημείωτο ότι η HDL χοληστερόλη στο πλάσμα αυξήθηκε σημαντικά μετά την κατανάλωση του προϊόντος και μειώθηκε μετά την κατανάλωση του εικονικού φαρμάκου. Αυτές οι αλλαγές στις πλασματικές λιποπρωτεΐνες ενισχύουν την ιδέα της καρδιοπροστατευτικής ικανότητας του υπό έρευνα προϊόντος.

Το κύριο εύρημα στην παρούσα έρευνα ήταν η σημαντική μείωση της OxLDL, μαζί με την αύξηση της HDL χοληστερόλης μετά τη χρόνια κατανάλωση του πλούσιου σε πολυφαινόλες εκχυλίσματος σε σχέση με το εικονικό φάρμακο. Αυτά τα αποτελέσματα είναι σε συμφωνία με προηγούμενες μελέτες που υποστηρίζουν ότι οι πολυφαινόλες δείχνουν προστασία έναντι της αθηροσκλήρωσης, αναστέλλοντας έτσι τον πολλαπλασιασμό των λείων μυών των αγγείων [12,39,40]. Η OxLDL είναι μια από τις λίγες παραμέτρους που αναγνωρίζονται από την Ευρωπαϊκή Αρχή για την Ασφάλεια των Τροφίμων (EFSA), στο πλαίσιο των ισχυρισμών λειτουργίας, και φαίνεται να είναι μια κατάλληλη μεταβλητή έκβασης για την τεκμηρίωση ισχυρισμών υγείας που σχετίζονται με τη μείωση της οξειδωτικής βλάβης στα λιπίδια. 41,42]. Επιπλέον, το OxLDL προάγει την προσκόλληση μονοκυττάρων στα ενδοθηλιακά κύτταρα μέσω ενός μηχανισμού ανεξάρτητου από την έκφραση του ICAM-1 και του VCAM-1, δημιουργώντας αφρώδη κύτταρα [43]. Ωστόσο, αυτό δεν συμβαίνει με την LDL [44]. Αυτή η σύνδεση πραγματοποιείται μέσω ορισμένων υποδοχέων, όπως το CD36. Το OxLDL είναι ένας συνδέτης για το PPAR και ρυθμίζει προς τα πάνω την έκφραση του CD36, ευνοώντας την πρόσληψη του OxLDL στα μακροφάγα [45] και κατά συνέπεια συμβάλλοντας στην ανάπτυξη αθηροσκλήρωσης μέσω της ενεργοποίησης του ανοσοποιητικού συστήματος [46]. Είναι ενδιαφέρον ότι το OxLDL προάγει την ενδοθηλιακή δυσλειτουργία και την αθηροσκλήρωση, μειώνοντας έτσι τον καρδιαγγειακό κίνδυνο [47,48].

Με τη σειρά της, η θεραπεία με το υπό έρευνα προϊόν οδήγησε σε πλασματική μείωση της CRP, μιας πρωτεΐνης οξείας φάσης που συντίθεται στο ήπαρ, με τη μεσολάβηση άλλων κυτοκινών, ιδιαίτερα της IL-1 και της IL-6 [49]. Τα υψηλά επίπεδα CRP συσχετίζονται με αυξημένο κίνδυνο καρδιαγγειακών επεισοδίων, ακόμη και σε υγιή άτομα [50]. Αρκετές μελέτες έχουν βρει συσχέτιση μεταξύ των συγκεντρώσεων της CRP και των καρδιαγγειακών συμβάντων όπως το οξύ έμφραγμα του μυοκαρδίου, το εγκεφαλικό επεισόδιο και την εξέλιξη της περιφερικής αποφρακτικής νόσου των αρτηριών [51,52]. Αν και τα επίπεδα που λαμβάνονται στη CRP είναι εντός των φυσιολογικών ορίων για ένα υγιές άτομο, η μείωση αυτών των επιπέδων δείχνει την εγκυρότητα των πολυφαινολών από αυτή την άποψη.

Επιπλέον, ο ανοσοφλεγμονώδης δείκτης TNF- μειώθηκε σημαντικά μετά την κατανάλωση του εκχυλίσματος. Το TNF- είναι μια προφλεγμονώδης κυτοκίνη που εκφράζεται σημαντικά στον λιπώδη ιστό, καθώς και σε λευκοκύτταρα, ενδοθηλιακά κύτταρα και μυϊκά κύτταρα [53], συμμετέχοντας στην ενδοθηλιακή απορρύθμιση, διεγείροντας τη μετανάστευση μονοκυττάρων και μακροφάγων και επάγοντας την έκφραση μορίων προσκόλλησης [54]. Στην πραγματικότητα, μια αύξηση του TNF- μπορεί να συμβεί σε μια δίαιτα με χαμηλή συγκέντρωση καροτενίων, γεγονός που μπορεί να εξηγήσει τη μείωση που παρατηρείται στα επίπεδα του TNF- [55]. Επομένως, είναι λογικό ότι στη μελέτη μας μειώνει την αξία του μετά την κατανάλωση του προϊόντος λόγω της υψηλής παρουσίας καροτενίων στο προϊόν.

Το πολυφαινολικό εκχύλισμα που χρησιμοποιήθηκε για την παρούσα έρευνα έχει δοκιμαστεί σε διάφορες μελέτες παρέμβασης, με διαφορετικούς χρόνους κατανάλωσης και σε διαφορετικές ομάδες πληθυσμού, οδηγώντας σε ασυνεπή αποτελέσματα. Σε μια παρέμβαση {{0}}εβδομάδας σε εκπαιδευμένους άνδρες που ανήκουν στις αυστριακές ειδικές αστυνομικές δυνάμεις, αναφέρθηκαν σημαντικές μειώσεις (p < 0,001)="" στη="" συγκέντρωση="" των="" καρβονυλικών="" ομάδων="" στις="" πρωτεΐνες="" και="" στο="" tnf-="" τη="" 16η="" και="" 28η="" εβδομάδα="" .="" μια="" διαφορά="" με="" τη="" μελέτη="" μας="" ήταν="" ότι="" στη="" μελέτη="" τους="" τα="" δείγματα="" ελήφθησαν="" στις="" εβδομάδες="" 4,="" 8,="" 16="" και="" 28.="" σημειωτέον,="" οι="" τιμές="" αυξήθηκαν="" μέχρι="" την="" εβδομάδα="" 8="" και="" μειώθηκαν="" από="" την="" εβδομάδα="" 16="" και="" μετά="" [56].="" σε="" μια="" παρέμβαση="" οκτώ="" εβδομάδων="" σε="" υπέρβαρα="" και="" παχύσαρκα="" άτομα="" ηλικίας="" άνω="" των="" 40="" ετών,="" αναφέρθηκαν="" σημαντικές="" μειώσεις="" της="" ολικής="" χοληστερόλης,="" της="" ldl="" χοληστερόλης="" και="" του="" tnf-,="" οι="" οποίες="" δεν="" ελήφθησαν="" με="" το="" εικονικό="" φάρμακο.="" ωστόσο,="" δεν="" βρέθηκαν="" σημαντικές="" διαφορές="" στα="" crp,="" stnfr1="" ή="" oxldl="" [57].="" και="" τα="" δύο="" αποτελέσματα="" φαίνεται="" να="" επιβεβαιώνουν="" ότι="" η="" μακροχρόνια="" πρόσληψη="" πολυφαινόλης,="" όπως="" στη="" μελέτη="" μας="" (16="" εβδομάδες),="" σχετίζεται="" με="" μεγαλύτερη="" αποτελεσματικότητα="" κατά="" της="" φλεγμονής.="" σε="" μια="" άλλη="" παρέμβαση="" οκτώ="" εβδομάδων="" σε="" παχύσαρκες="" γυναίκες,="" παρατηρήθηκαν="" σημαντικές="" βελτιώσεις="" σε="" αρκετούς="" δείκτες="" οξείδωσης="" πρωτεϊνών="" όπως="" οι="" πρωτεΐνες="" καρβονυλίου,="" η="" oxldl="" (ρ="0.015)" και="" η="" ολική="" οξείδωση="" των="" λιπιδίων="" όλων="" των="" λιπιδίων.="" σχετικά="">φλεγμονώδηςδείκτες, παρατηρήθηκαν σημαντικές μειώσεις στο TNF- (ρ=0.011). Κατά την έναρξη, οι τιμές TNF- ήταν πάνω από το καθορισμένο εύρος στις ομάδες εικονικού φαρμάκου και εκχυλίσματος. στο τέλος της παρέμβασης, παρέμειναν αυξημένα στην ομάδα του εικονικού φαρμάκου και μειώθηκαν σε φυσιολογικές τιμές στην ομάδα που κατανάλωσε το προϊόν [58]. Τέλος, η αποτελεσματικότητα του εκχυλίσματος έχει επίσης δοκιμαστεί σε μη υγιή άτομα, αναφέροντας μείωση της OxLDL μετά από τρίμηνη περίοδο κατανάλωσης από βαρείς καπνιστές [59].

Όσον αφορά τις κατεχολαμίνες, παρατηρήθηκαν σημαντικές αυξήσεις στη νορεπινεφρίνη και, ιδιαίτερα, στη ντοπαμίνη μετά την κατανάλωση του υπό έρευνα προϊόντος. Ωστόσο, δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές αλλαγές για την κορτιζόλη και την αδρεναλίνη σε καμία ομάδα. Παρά το γεγονός ότι ορισμένες προηγούμενες μελέτες έχουν αναφέρει μείωση της κορτιζόλης στο πλάσμα [60] ή στο σάλιο [61] μετά από λήψη πολυφαινόλης, αυτό δεν είναι σύνηθες και οι τιμές σπάνια δείχνουν σημαντικές αλλαγές [62-64] όσον αφορά την πρόσληψη πολυφαινόλης. Το γεγονός ότι τόσο οι τιμές της αδρεναλίνης όσο και της κορτιζόλης δεν αυξήθηκαν υποδηλώνει ότι δεν αναπτύχθηκε αδρενεργική απόκριση που σχετίζεται με την κατανάλωση του προϊόντος. Η νοραδρεναλίνη και η ντοπαμίνη είναι επίσης αυξημένες σε ηλικιωμένους ασθενείς με νευροεκφυλιστικές ασθένειες [65,66] και σχετίζονται με το άγχος [67] και τη γνωστική ενίσχυση [68]. Επιπλέον, η νορεπινεφρίνη σχετίζεται στενά με την προσοχή, καθώς και με την εγρήγορση [69,70]. Τα αποτελέσματα που ελήφθησαν στην παρούσα μελέτη όσον αφορά τη ντοπαμίνη και τη νοραδρεναλίνη θα μπορούσαν να σχετίζονται με τις βελτιώσεις στο γνωστικό επίπεδο που παρατηρήθηκαν σε άλλη δημοσίευση [71]. Μπορούμε να επιβεβαιώσουμε ότι η κατανάλωση πολυφαινολών, επομένως, αυξάνει τα επίπεδα εγρήγορσης και προσοχής, τα οποία συσχετίζονται με τα αποτελέσματα σε επίπεδο γνωστικών τεστ [71]

Ένας περιορισμός της παρούσας κλινικής δοκιμής, όπως περιγράφεται από τους Di Lorenzo et al. [10] σε μια συστηματική μελέτη για τη βιοδιαθεσιμότητα πολυφαινόλης, είναι ότι η συμπερίληψη υγιών ατόμων σε κλινικές δοκιμές καθιστά δύσκολη την αξιολόγηση σημαντικών διαφορών στους βιοδείκτες, οι οποίοι μεταβάλλονται υπό παθολογικές συνθήκες. Άλλοι περιορισμοί αυτής της μελέτης περιλαμβάνουν το γεγονός ότι οι μεταβολίτες των φαινολικών ενώσεων στο προϊόν δεν προσδιορίστηκαν πέρα ​​από την περιεκτικότητα σε βιταμίνη Ε ή την ατομική απόκριση, γεγονός που θα μπορούσε να επηρεάσει τη βιοδιαθεσιμότητα και τη βιοδραστηριότητα της πολυφαινόλης [72].

Είναι σημαντικό να θυμόμαστε ότι οι εθελοντές της παρούσας μελέτης είναι υγιή άτομα και οι βιοδείκτες της φλεγμονής που έχουμε προσδιορίσει βρίσκονται μεταξύ των φυσιολογικών τιμών στο πλάσμα. Επομένως, οι διαφορές που παρατηρούνται εντός του εύρους των φυσιολογικών τιμών για αυτούς τους βιοδείκτες, παρά το γεγονός ότι είναι στατιστικά σημαντικές, δεν είναι εντυπωσιακές από κλινική άποψη. Ωστόσο, εάν το υπό μελέτη προϊόν έχει επιτύχει στατιστικά σημαντικές αλλαγές σε υγιείς ανθρώπους, αυτές οι αλλαγές θα μπορούσαν να είναι ακόμη μεγαλύτερες σε ασθενείς με μη φυσιολογικές τιμές [73,74], καθώς οι πολυφαινόλες στο προϊόν θα βοηθούσαν στην καταπολέμηση τουλάχιστον εν μέρει του παράγοντα που προκαλεί αυτή τη διαταραχή του επιπέδου του πλάσματος [75].

Ως εκ τούτου, η μελλοντική έρευνα θα μπορούσε να επικεντρωθεί στην εξέταση αυτών των πτυχών τόσο σε υγιείς όσο και σε μη υγιείς πληθυσμούς.

4. Υλικά και Μέθοδοι

4.1. Δοκιμαστική σχεδίαση

Αυτή η μελέτη περιελάμβανε μια τυχαιοποιημένη, διασταυρούμενη, διπλά τυφλή, στρωματοποιημένη με το φύλο και ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο κλινική δοκιμή για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της καθημερινής κατανάλωσης ενός ενθυλακωμένου θρεπτικού (Juice Plus plus Premium®, The Juice Plus Plus Company, Collierville , TN, USA) με βάση διαφορετικά φρούτα και λαχανικά σε βιοδείκτες πλάσματος αίματος φλεγμονής και οξειδωτικής κατάστασης. Η παρέμβαση είχε διάρκεια 36 εβδομάδων—δύο περιόδους των 16 εβδομάδων που χωρίζονταν από μια περίοδο έκπλυσης 4 εβδομάδων. Κατά τη διάρκεια της παρέμβασης, τα άτομα προσήλθαν στο εργαστήριο τέσσερις φορές (στην αρχή και στο τέλος κάθε φάσης), λαμβάνοντας δείγματα αίματος υπό συνθήκες νηστείας. Στην αρχή κάθε φάσης, το προϊόν (EXT ή PLA) παραδόθηκε στα άτομα και στο τέλος κάθε φάσης, τα άτομα έπρεπε να επιστρέψουν τις συσκευασίες για να ποσοτικοποιήσουν οι ερευνητές τα υπόλοιπα προϊόντα.

Κάθε υποκείμενο υπέγραψε ένα έγγραφο συγκατάθεσης κατόπιν ενημέρωσης και του δόθηκε ένας αριθμητικός κωδικός κατά σειρά άφιξης. Στη συνέχεια, ένας εξωτερικός ερευνητής πραγματοποίησε την τυχαιοποίηση χρησιμοποιώντας μια υπολογισμένη γεννήτρια (Epidat v4.1 Epi-dat, Ισπανία) αναθέτοντας τα υποκείμενα σε μία από τις ομάδες. Ούτε οι ερευνητές ούτε τα υποκείμενα γνώριζαν σε ποιες ομάδες ανήκαν τα υποκείμενα. Τόσο το προϊόν όσο και το εικονικό φάρμακο επισημάνθηκαν με κωδικούς που παρέχονται από την εταιρεία διανομής και ταξινομήθηκαν σε Α και Β, και μόνο στο τέλος της μελέτης ειδοποιήθηκαν οι ερευνητές ποιος κωδικός αντιστοιχούσε στο προϊόν και ποιος στο εικονικό φάρμακο. Το πρωτόκολλο εγκρίθηκε από την Επιτροπή Θεσμικής Αναθεώρησης του Καθολικού Πανεπιστημίου San Antonio of Murcia (UCAM) (ημερομηνία: 24 Νοεμβρίου 2017, κωδικός: CE111072). Αυτή η μελέτη πραγματοποιήθηκε σύμφωνα με τα Πρότυπα Ορθής Κλινικής Πρακτικής και διεξήχθη σύμφωνα με τη Διακήρυξη του Ελσίνκι. Η δοκιμή καταχωρήθηκε στη διεύθυνση www.clinicaltrials.gov (πρόσβαση στις 11 Ιουνίου 2020) (αναγνωριστικό CFE/JU/44-17.) Η μελέτη πραγματοποιήθηκε στο Τμήμα Φαρμακευτικής της Σχολής Επιστημών Υγείας του Καθολικού Πανεπιστημίου San Antonio of Murcia (UCAM). Τηρήθηκε η ισχύουσα ευρωπαϊκή νομοθεσία για την προστασία των προσωπικών δεδομένων (Κανονισμός (ΕΕ) 2016/679).

4.2. Συμμετέχοντες

Τα άτομα έπρεπε να πληρούν όλα τα κριτήρια συμπερίληψης (υπογράψτε το έντυπο συγκατάθεσης μετά από ενημέρωση, ΔΜΣ μεταξύ 18,5 και 35 kg/m2, να μην πάσχουν από χρόνια ασθένεια, να μην καταναλώνουν περισσότερες από τρεις μερίδες φρούτων και λαχανικών την ημέρα και ηλικία μεταξύ 18 και 65 ετών) και δεν πληρούν κανένα από τα κριτήρια αποκλεισμού (είναι υπό φαρμακευτική αγωγή ή υποβάλλονται σε φαρμακολογική θεραπεία, λήψη πολυβιταμινών, αλλεργία σε φρούτα ή λαχανικά, σε δίαιτα, χορτοφάγος ή vegan, κάπνισμα, κατανάλωση άνω των 3 ποτηριών αλκοόλ ( κρασί ή μπύρα) την ημέρα, όταν ήμουν έγκυος, είχατε σοβαρή χειρουργική επέμβαση τους τελευταίους τρεις μήνες, είχα προβλήματα ύπνου και είχα δώσει 0.5 L αίματος τους τελευταίους τρεις μήνες). Μετά τον έλεγχο των κριτηρίων ένταξης/αποκλεισμού, συνολικά 108 άτομα και των δύο φύλων ξεκίνησαν τη μελέτη. Πραγματοποιήθηκε επαλήθευση για να διασφαλιστεί ότι τα άτομα συνέχισαν να πληρούν τα κριτήρια σε όλες τις επισκέψεις στη μονάδα μέσω μιας έρευνας δείκτη Μεσογειακού τρόπου ζωής (MEDLIFE) για την αξιολόγηση των διατροφικών συνηθειών και της φυσικής δραστηριότητας [76]. Κατά τη διάρκεια της παρέμβασης, 16 άτομα χάθηκαν για παρακολούθηση, οπότε το

ο αριθμός των ατόμων που ολοκλήρωσαν τη μελέτη ήταν 92, των οποίων τα δημογραφικά στοιχεία φαίνονται στον Πίνακα 1.

4.3. Συμπλήρωμα δοκιμής

Το υπό έρευνα προϊόν και το εικονικό φάρμακο είχαν τα ίδια χαρακτηριστικά, και τα δύο κατασκευάστηκαν και παρασχέθηκαν από την The Juice Plus Plus Company, Collierville, TN, ΗΠΑ. Η παρουσίαση ήταν με τη μορφή λευκών έγκλειστων φαρμακευτικών προϊόντων, που παρέχονται σε φιάλες που διαφοροποιούνται μόνο από έναν κωδικό. Μόλις ολοκληρώθηκε η μελέτη, δόθηκε στους ερευνητές ποιος κωδικός ανήκε στο προϊόν και ποιος στο εικονικό φάρμακο. Οι διαφορές στο εμπορικό προϊόν ήταν ότι αποτελούνταν από μια πρόσληψη τριών διαφορετικών τύπων καψουλών την ημέρα—δύο ανάμεικτα μούρα, δύο ανάμεικτα φρούτα και δύο ανάμεικτα λαχανικά, το καθένα σε ξεχωριστό μπουκάλι. Για το λόγο αυτό, και για να μπορέσουμε να παρασκευάσουμε ένα παρόμοιο προϊόν και εικονικό φάρμακο, αποφασίστηκε να κατασκευαστούν κάψουλες που περιέχουν ένα μείγμα από τις τρεις προαναφερθείσες κάψουλες (μούρα, φρούτα και λαχανικά), όπου η ημερήσια κατανάλωση για αυτή τη μελέτη ήταν έξι κάψουλες-τρεις πριν το πρωινό και τρεις το απόγευμα, συνοδευόμενες από νερό.

Το υπό έρευνα προϊόν παρασχέθηκε σε αδιαφανείς λευκές κάψουλες και περιείχε σκόνη και πολτό χυμού φρούτων, λαχανικών και μούρων από μήλο, πορτοκάλι, ανανά, κράνμπερι, ροδάκινο, κεράσι acerola, παντζάρι, δαμάσκηνο, χουρμά, μάνγκο, καρότο, μαϊντανό, λάχανο, μπρόκολο, λάχανο, σπανάκι, πίτουρο ρυζιού, ντομάτα, φύλλα αγκινάρας, μύρτιλλα, βατόμουρα, μαύρη σταφίδα, βατόμουρα, κράνμπερι, κονκόρντ σταφύλια, σαμπούκους, εκχύλισμα σπόρων σταφυλιού, εκχύλισμα πράσινου τσαγιού, ρίζα τζίντζερ, σμέουρα, κακάο, ρόδι, φυσικό μείγμα τοκοφερόλης ( , δ, , -τοκοφερόλες, ηλίανθος -τοκοφερόλη), φυσικό μίγμα καροτενοειδών (λουτεΐνη, -καροτένιο, λυκοπένιο, ασταξανθίνη), πηκτίνη εσπεριδοειδών, βιοφλαβονοειδή εσπεριδοειδών, φλούδα λεμονιού, ανθρακικό ασβέστιο, σκόνη σκόρδου, σπιρουλίνα, μείγμα φυσικού διοξειδίου ενζύμου, , στεατικό μαγνήσιο που προέρχεται από φυτικά, τανγκερετίνη και Lactobacillus acidophilus. Μια ημερήσια δόση 6 καψουλών παρείχε 2,91 mg -καροτίνη, 18,7 mg βιταμίνη Ε, 159 mg βιταμίνη C, 318 μg φυλλικό οξύ, 6,1 mgλουτεΐνη, 1 mg λυκοπένιο και 0,15 mg ασταξανθίνη. Το εικονικό φάρμακο αποτελούνταν από μικροκρυσταλλική κυτταρίνη, άμυλο ρυζιού, χορτοφαγική κάψουλα (κυτταρίνη), στεατικό μαγνήσιο και τεχνητά χρώματα (FD&C κίτρινο #6 και FD&C μπλε #1).

Ο πολυφαινολικός χαρακτηρισμός του προϊόντος πραγματοποιήθηκε σε προηγούμενη μελέτη από τους Bresciani et al. μέσω του UHPLC-QqQ-MS, παρουσιάζοντας συνολικά 119 πολυφαινολικές ενώσεις διαφορετικών φαινολικών οικογενειών, συμπεριλαμβανομένων των φλαβονολών όπως η καμπφερόλη και η κερκετίνη, οι ανθοκυανίνες και οι φλαβόνες [77]. Όσον αφορά τη βιοδιαθεσιμότητα, η γνώση της βιοδιαθέσιμης ποσότητας των πολυφαινολών είναι πιο ενδιαφέρουσα από τη συνολική ποσότητα, καθώς, σε πολλές περιπτώσεις, οι πολυφαινόλες που είναι πιο άφθονες δεν είναι οι πιο δραστικές για τον οργανισμό [78]. Για το λόγο αυτό, οι Bresciani et al. αξιολόγησε τη βιοδιαθεσιμότητα του προϊόντος, διαπιστώνοντας ότι από τα 92 μόρια που παρακολουθήθηκαν, εντοπίστηκαν μόνο 20 κυκλοφορούντες μεταβολίτες στο πλάσμα, όλοι τους ως υπολείμματα θειικού, γλυκουρονιδίου ή γλυκίνης, που εμφανίζονται σε διαφορετικούς χρόνους στο πλάσμα ανάλογα με τη θέση απορρόφησης στο πεπτικό σύστημα [79].

4.4. Μεταβλητές Μελέτης

Όλες οι μεταβλητές αναλύθηκαν τέσσερις φορές κατά τη διάρκεια της μελέτης: Στην αρχή και στο τέλος κάθε 16-εβδομαδιαίας φάσης κατανάλωσης προϊόντος. Κατά τη διάρκεια της μελέτης, τα άτομα δεν επιτρεπόταν να ξεκινήσουν ή να τροποποιήσουν οποιαδήποτε ορμονική θεραπεία, ούτε να κάνουν σημαντικές αλλαγές στη διατροφή ή τη σωματική δραστηριότητα που θα μπορούσαν να επηρεάσουν τις μεταβλητές της μελέτης.

Μετρήσεις δειγμάτων αίματος

Τα άτομα έπρεπε να φτάσουν μετά από περίοδο νηστείας 12 ωρών, επιτρέποντας μόνο την πρόσληψη νερού τις προηγούμενες 3 ώρες. Η μέτρια-υψηλής έντασης άσκηση δεν επιτρεπόταν 24 ώρες πριν από την εξαγωγή. Δείγματα αίματος συλλέχθηκαν από την προθάλαμο φλέβα σε σωληνάριο συλλογής αίματος k3E/K3EDTA (3 mL) και σωλήνες συλλογής πηκτώματος ορού και ενεργοποιητή θρόμβου (5 mL) *3. Πριν σταλούν στο εργαστήριο (Laboratorios MUNUERA SL Murcia, Ισπανία), φυγοκεντρήθηκαν μόνο τα σωληνάρια συλλογής αίματος Serum Gel και Clot Activator (4500 rpm, 5 λεπτά, 4 ◦C). Οι βιοδείκτες που αναλύθηκαν για κάθε μεταβλητή ήταν: (α) Προφλεγμονώδεις βιοδείκτες: OxLDL (ng/mL) με ανάλυση ELISA σε δείγματα ορού, TNF- (pg/mL) και sNTFR1 (ng/mL) με ανταγωνιστική ELISA (διαγνωστική μάρκα DRG), CRP (mg/L) με turbidi metric immunoassay (PETIA) και ομοκυστεΐνη (pg/mL) σε αναλυτή BN ProSpec® (σύμφωνα με το πρωτόκολλο που παρέχεται στο κιτ Siemens N Latex HCYOPAX 03). (β) βιταμίνες: Βιταμίνη Ε (mcg/mL) με HPLC με χρωματογράφο JASCO (PU-980 IntelligentPLC-Plus) και στήλη Betasil-C18 (μέγεθος σωματιδίων 5 μm, 250 × 4,6 mm) συνδεδεμένη με φθορισμό JASCO ανιχνευτή (FP{24}} Έξυπνος ανιχνευτής φθορισμού) και βιταμίνη Β12 (pg/mL) με χημειοφωταύγεια με εμπορικές ανοσοδοκιμασίες που χρησιμοποιούν αυτοματοποιημένο εξοπλισμό Centaur XPSiemens Diagnostics (Siemens Healthcare SA). (γ) κατεχολαμίνες: Κορτιζόλη (mcg/L) με τη χρήση της τεχνικής chemuminescence με ανοσοδοκιμασία Immulite 2000 (DPC, Gwynedd, RU) και νοραδρεναλίνη (pg/mL), αδρεναλίνη (pg/mL) και ντοπαμίνη (pg/mL) HPLC με ροή ροής 0,5 mL/min, Tº 35 ◦C, ευαισθησία 20, δυναμικό 0,7, κινητή φάση ακετονιτριλίου-νερού και αντίστροφη φάση C18 χρησιμοποιώντας n ηλεκτροχημικό ανιχνευτή. (δ) θυρεοειδικές ορμόνες: T3 (mcg/L), T4 (mcg/L) και TSH (mU/l) με χρήση αυτοματοποιημένου εξοπλισμού CentaurXP Siemens Diagnostics (Siemens Healthcare SA). (ε) ανοσοκατάσταση: IgA (mg/L) με τη χρήση της τεχνικής θολερότητας με τη δοκιμή Monolab. Ως αντιδραστήρια, χρησιμοποιήθηκαν ρυθμιστικό Tris (20 mmol/L), PEG 8000 και ρΗ 8,3 ως αραιωτικό και ορός κατσίκας, αντι-ανθρώπινη IgA και ρΗ 7,5 ως αντίσωμα.

4.5. Στατιστική ανάλυση

Οι συνεχείς μεταβλητές παρουσιάζονται ως μέση ± τυπική απόκλιση (SD) στη γραμμή βάσης και στην εξέλιξή τους, εφαρμόζοντας τη δοκιμή Kolmogorov–Smirnov για την επαλήθευση της κανονικής κατανομής των ασυνεχών δεδομένων. Η ανάλυση πραγματοποιήθηκε για όλα τα άτομα που συμμετείχαν στη μελέτη, τόσο στην περίοδο κατανάλωσης προϊόντος όσο και σε εικονικό φάρμακο. Για τις ποσοτικές μεταβλητές, πραγματοποιήθηκε σύγκριση t-test Student μεταξύ των δύο κλάδων της μελέτης. Για να αναλυθούν οι διαφορές μεταξύ των ομάδων (EXT και PLA) στην εξέλιξη των διαφορετικών μεταβλητών, πραγματοποιήθηκε ανάλυση διακύμανσης επαναλαμβανόμενων μετρήσεων με τον χρόνο ως παράγοντα εντός του υποκειμένου. Με αυτόν τον τρόπο, καθορίστηκαν διαφορές για κάθε μεταβλητή που αναλύθηκε, λαμβάνοντας υπόψη αυτούς τους παράγοντες. Πραγματοποιήθηκε δοκιμή Bonferroni για την εκ των υστέρων ανάλυση. Συγκρίθηκαν σημαντικές διαφορές (με την επιλογή να υποθέσουμε ισότητα διακύμανσης ή όχι). Στο σύνολο των στατιστικών δοκιμών, το επίπεδο σημαντικότητας που επιλέχθηκε ήταν 0.05. Η στατιστική ανάλυση πραγματοποιήθηκε με λογισμικό SPSS 24 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA).

5. Συμπεράσματα

Η έρευνά μας έδειξε ότι η χρόνια κατανάλωση ενός πολυφαινολικού εκχυλίσματος με βάση τα μούρα, τα φρούτα και τα λαχανικά σε έναν υγιή πληθυσμό που δεν τρώει τις συνιστώμενες ποσότητες φρούτων και λαχανικών ημερησίως βελτιώνει την οξειδωτική κατάσταση και τη φλεγμονή μέσω της βελτίωσης πολλών βιοδεικτών του αίματος, ιδιαίτερα OxLDL, CRP και HDL-χοληστερόλη, βελτιώνοντας επίσης τις τιμές των κατεχολαμινών - ιδιαίτερα της ντοπαμίνης.

Συνεισφορές συγγραφέα: Εξαγορά χρηματοδότησης, MPZ και JM. έρευνα, RA και JM. μεθοδολογία, RA, J.Á.C., RX-M., BC, DV, MPZ και JM; διαχείριση έργου, JM; εποπτεία, JM; επικύρωση, JM; συγγραφή—αναθεώρηση και επεξεργασία, RA, J.Á.C. και JM Όλοι οι συγγραφείς έχουν διαβάσει και έχουν συμφωνήσει με τη δημοσιευμένη έκδοση του χειρογράφου.
Χρηματοδότηση: Αυτή η μελέτη χρηματοδοτήθηκε από την εταιρεία Juice Plus. Σε καμία περίπτωση η εταιρεία δεν έχει συνεργαστεί για το σχεδιασμό ή τη διαχείριση των δεδομένων που λαμβάνονται.
Δήλωση Επιτροπής Θεσμικής Αναθεώρησης: Αυτή η μελέτη διεξήχθη σύμφωνα με τις οδηγίες της Διακήρυξης του Ελσίνκι, που εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας του Καθολικού Πανεπιστημίου San Antonio of Murcia (UCAM) (ημερομηνία: 24 Νοεμβρίου 2017, κωδικός: CE111702).
Δήλωση ενημερωμένης συναίνεσης: Λήφθηκε ενημερωμένη συγκατάθεση από όλα τα υποκείμενα που συμμετείχαν στη μελέτη.

Δήλωση διαθεσιμότητας δεδομένων: Δεν είναι απαραίτητο.
Ευχαριστίες: Οι συγγραφείς ευχαριστούν τα υποκείμενα για τη συμμετοχή τους στη μελέτη, καθώς και την εταιρεία JuicePlus για την υποστήριξη και την προώθηση της έρευνας.
Σύγκρουση συμφερόντων: Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν έχουν καμία σύγκρουση συμφερόντων σχετικά με το παρόν χειρόγραφο.
Διαθεσιμότητα δείγματος: Δεν ισχύει.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Aune, D.; Giovannucci, Ε.; Boffetta, Ρ.; Fadnes, LT; Keum, Ν.; Norat, Τ.; Greenwood, DC; Riboli, Ε.; Vatten, LJ; Tonstad, S. Πρόσληψη φρούτων και λαχανικών και ο κίνδυνος καρδιαγγειακής νόσου, ολικού καρκίνου και θνησιμότητας από κάθε αιτία — Μια συστηματική ανασκόπηση και μετα-ανάλυση δόσης-απόκρισης προοπτικών μελετών. Int. J. Epidemiol. 2017, 46, 1029–1056. [CrossRef] [PubMed]
2. Slavin, JL; Lloyd, B. Οφέλη για την υγεία των φρούτων και των λαχανικών. Adv. Nutr. 2012, 3, 506–516. [CrossRef]
3. Tresserra-Rimbau, Α.; Rim, EB; Medina-Remón, Α.; Martínez-González, MA; López-Sabater, MC; Covas, MI; Corella, D.; Salas-Salvadó, J.; Gómez-Gracia, Ε.; Lapetra, J.; et al. Πρόσληψη πολυφαινόλης και κίνδυνος θνησιμότητας: Μια εκ νέου ανάλυση της δοκιμής PREDIMED. BMC Med. 2014, 12, 77. [CrossRef]
4. Tresserra-Rimbau, Α.; Rim, EB; Medina-Remón, Α.; Martínez-González, MA; de la Torre, R.; Corella, D.; Salas-Salvadó, J.; Gómez-Gracia, Ε.; Lapetra, J.; Arós, F.; et al. Αντίστροφη συσχέτιση μεταξύ της συνήθους πρόσληψης πολυφαινόλης και της συχνότητας καρδιαγγειακών παθήσεων στη μελέτη PREDIMED. Nutr. Metab. Καρδιοαγγειακή. Dis. 2014, 24, 639–647. [CrossRef]
5. Blomhoff, R.; Andersen, LF; Iversen, PO; Johansson, L.; Smeland, S. Kostråd for å fremme folkehelsen og forebygge kroniske syk dommer. Metodol. Vitensk. kunnskapsgrunnlag 2011. Διαθέσιμο στο διαδίκτυο: https://www.helsedirektoratet.no/rapporter/kostrad for-a-fremme-folkehelsen-og-forebygge-kroniske-sykdommer-metodologi-og-vitenskapelig-kunnskapsgrunnlag/Kostr τοις εκατό C3 τοις εκατό A5d τοις εκατό 2{{52 }}για τοις εκατό 20 τοις εκατό C3 τοις εκατό A5 τοις εκατό 20 τοις εκατό 20 τοις εκατό 20 folkehelsen τοις εκατό 20 og τοις εκατό 20 τοις εκατό forebygge τοις εκατό 20 kroniske τοις εκατό 20sykdommer τοις εκατό 20 τοις εκατό E2 τοις εκατό 80 τοις εκατό 93 τοις εκατό 2 0metodologi τοις εκατό 20og τοις εκατό 20og τοις εκατό 20og τοις εκατό 20vitenska. /attachment/inline/2a6293e0-169e-41bd-a872-f3952dbb22c2:0d09926111d614e6059e804b7f9b21c17bd0c1cd/για 50% τοις εκατό C forebygge % 20kroniske % 20sykdommer % 20 % E2 % 80 % 93 % 20metodologi % 20og % 20vitenskapelig % 20kunnskapsgrunnlag.pdf (πρόσβαση στις 11 Ιανουαρίου 2021).
6. Benton, D.; Young, HA Ο ρόλος του χυμού φρούτων στην επίτευξη της 5-ημερήσιας σύστασης για πρόσληψη φρούτων και λαχανικών. Nutr. Αναθ. 2019, 77, 829–843. [CrossRef] [PubMed]
7. Li, Υ.; Zhang, D.; Pagán, JA Social Norms and the Consumption of Fruit and Vegetables σε όλες τις γειτονιές της Νέας Υόρκης. J. Urban Health 2016, 93, 244–255. [CrossRef] [PubMed]
8. Sachdeva, V.; Roy, Α.; Bharadvaja, N. Current Prospects of Nutraceuticals: A Review. Curr. Pharm. Biotechnol. 2020, 21, 884–896. [CrossRef]
9. Román, GC; Jackson, RE; Gadhia, R.; Román, AN; Reis, J. Μεσογειακή διατροφή: Ο ρόλος των ω-3 λιπαρών οξέων μακριάς αλυσίδας στα ψάρια. πολυφαινόλες σε φρούτα, λαχανικά, δημητριακά, καφέ, τσάι, κακάο και κρασί. προβιοτικά και βιταμίνες για την πρόληψη του εγκεφαλικού, της γνωστικής έκπτωσης που σχετίζεται με την ηλικία και της νόσου Αλτσχάιμερ. Rev. Neurol. 2019, 175, 724–741. [CrossRef]
10. Di Lorenzo, C.; Colombo, F.; Biella, S.; Stockley, C.; Ρεστάνη, P. Polyphenols, and Human Health: The Role of Bioavailability. Nutrients 2021, 13, 273. [CrossRef]
11. Manach, C.; Williamson, G.; Morand, C.; Scalbert, Α.; Rémésy, C. Βιοδιαθεσιμότητα και βιοαποτελεσματικότητα πολυφαινολών στον άνθρωπο. I. Ανασκόπηση 97 μελετών βιοδιαθεσιμότητας. Είμαι. J. Clin. Nutr. 2005, 81, 230S–242S. [CrossRef]
12. Quiñones, Μ.; Miguel, Μ.; Aleixandre, A. Πολυφαινόλες, φυσικά απαντώμενες ενώσεις με ευεργετικές επιδράσεις στις καρδιαγγειακές παθήσεις. Nutr. Hosp. 2012, 27, 76–89. [CrossRef]
13. Li, S.; Tan, HY; Wang, Ν.; Cheung, F.; Hong, Μ.; Feng, Y. The Potential and Action Mechanism of Polyphenols in the Treatment of Liver Diseases. Οξείδιο. Med. Κύτταρο. Λόνγκεφ. 2018, 2018, 8394818. [CrossRef]
14. Li, Α.; Li, S.; Zhang, Υ.; Xu, Χ.; Chen, Υ.; Li, H. Resources and Biological Activities of Natural Polyphenols. Nutrients 2014, 6, 6020–6047. [CrossRef]
15. Ομάδα EFSA για τα πρόσθετα τροφίμων και τις θρεπτικές πηγές που προστέθηκαν στα τρόφιμα (ANS). Εκτίμηση κινδύνου για γυναίκες πριν και μετά την εμμηνόπαυση που λαμβάνουν συμπληρώματα διατροφής που περιέχουν απομονωμένες ισοφλαβόνες. EFSA J. 2015, 13, 4246. [CrossRef]
16. Rice-Evans, CA; Miller, NJ Αντιοξειδωτικές δραστηριότητες των φλαβονοειδών ως βιοενεργών συστατικών των τροφίμων. Biochem. Soc. Μεταφρ. 1996, 24, 790-795. [CrossRef] [PubMed]
17. Korkina, LG; Afanas' Ev, IB Αντιοξειδωτικές και χηλικές ιδιότητες φλαβονοειδών. Adv. Pharmacol. 1996, 38, 151-163.
18. Dorjgochoo, T.; Gao, Υ.-Τ.; Chow, W.-H.; Shu, Χ.; Yang, G.; Cai, Q.; Rothman, Ν.; Cai, Η.; Li, Η.; Deng, Χ.; et al. Ο κύριος μεταβολίτης του F2-ισοπροστανίου στα ούρα μπορεί να είναι πιο ευαίσθητος βιοδείκτης οξειδωτικού στρες από το ίδιο το ισοπροστάνη. Είμαι. J. Clin. Nutr. 2012, 96, 405–414. [CrossRef] [PubMed]
19. Santilli, F.; D'Ardes, D.; Davì, G. Οξειδωτικό στρες στη χρόνια αγγειακή νόσο: Από την πρόβλεψη στην πρόληψη. Vascul. Pharmacol. 2015, 74, 23–37. [CrossRef] [PubMed]
20. McGuire, S. Υπουργείο Γεωργίας των ΗΠΑ και Υπουργείο Υγείας και Ανθρώπινων Υπηρεσιών των ΗΠΑ, διατροφικές οδηγίες για Αμερικανούς, 2010. Ουάσιγκτον, DC: τυπογραφείο της κυβέρνησης των ΗΠΑ, Ιανουάριος 2011. Adv. Nutr. 2011, 2, 293–294. [CrossRef] [PubMed]

21. Baroni, L.; Bonetto, C.; Rizzo, G.; Bertola, C.; Caberlotto, L.; Bazzerla, G. Association Between Cognitive Impairment and Vitamin B12, Folate, and Homocysteine ​​Status in Elderly Adults: A Retrospective Study. J. Alzheimer. Dis. 2019, 70, 443–453. [CrossRef]
22. Samman, S.; Sivarajah, G.; Man, JC; Ahmad, ZI; Petocz, Ρ.; Caterson, ID Ένα ανάμεικτο συμπύκνωμα φρούτων και λαχανικών αυξάνει τις αντιοξειδωτικές βιταμίνες και το φυλλικό οξύ στο πλάσμα και μειώνει την ομοκυστεΐνη του πλάσματος στους άνδρες. J. Nutr. 2003, 133, 2188–2193. [CrossRef] [PubMed]
23. Meng, Η.; Li, Υ.; Zhang, W.; Zhao, Υ.; Niu, Χ.; Guo, J. Η σχέση μεταξύ γνωστικής εξασθένησης και ομοκυστεΐνης σε πληθυσμό με έλλειψη Β12 και φυλλικού οξέος στην Κίνα: Μια συγχρονική μελέτη. Ιατρική 2019, 98, e17970. [CrossRef]
24. Lin, F.; Pei, L.; Zhang, Q.; Han, W.; Jiang, S.; Lin, Υ.; Dong, Β.; Cui, L.; Li, M. Ox-LDL επάγει την απόπτωση των ενδοθηλιακών κυττάρων και τη μετανάστευση των μακροφάγων ρυθμίζοντας τη φωσφορυλίωση της καβεολίνης-1. J. Cell. Physiol. 2018, 233, 6683–6692. [CrossRef] [PubMed]
25. Calder, PC; Albers, R.; Antoine, J.-M.; Blum, S.; Bourdet-Sicard, R.; Ferns, GA; Folkerts, G.; Friedmann, PS; Frost, GS; Guarner, F. Διεργασίες φλεγμονώδους νόσου και αλληλεπιδράσεις με τη διατροφή. Br. J. Nutr. 2009, 101, 1–45. [CrossRef]
26. Karlsen, Α.; Paur, Ι.; Bøhn, SK; Sakhi, AK; Borge, GI; Serafini, Μ.; Erlund, Ι.; Laake, Ρ.; Tonstad, S.; Ο χυμός Blomhoff, R. Bilberry ρυθμίζει τη συγκέντρωση στο πλάσμα των φλεγμονωδών δεικτών που σχετίζονται με το NF-κB σε άτομα με αυξημένο κίνδυνο καρδιαγγειακής νόσου. Ευρώ. J. Nutr. 2010, 49, 345–355. [CrossRef] [PubMed]
27. Gonçalves, CFL; Santos, MC; Ginabreda, MG; Fortunato, RS; Carvalho, DPd; Freitas Ferreira, AC φλαβονοειδές ρουτίνη αυξάνει την πρόσληψη ιωδιούχου θυρεοειδούς σε αρουραίους. PLoS ONE 2013, 8, e73908. [CrossRef]
28. Mancini, Α.; Martorana, GE; Magini, Μ.; Festa, R.; Raimondo, S.; Silvestrini, Α.; Nicolotti, Ν.; Mordente, Α.; Mele, MC; Miggiano, GAD; et al. Οξειδωτικό στρες και μεταβολικό σύνδρομο: Επιδράσεις της διατροφής εμπλουτισμένης με φυσικά αντιοξειδωτικά στην αντίσταση στην ινσουλίνη. Clin. Nutr. ESPEN 2015, 10, e52–e60. [CrossRef]
29. Giuliani, C.; Noguchi, Υ.; Harii, Ν.; Napolitano, G.; Tatone, D.; Bucci, Ι.; Piantelli, Μ.; Μονακό, F.; Kohn, LD Το φλαβονοειδές κερκετίνη ρυθμίζει την ανάπτυξη και την έκφραση γονιδίων σε κύτταρα FRTL-5 του θυρεοειδούς αρουραίου. Endocrinology 2008, 149, 84–92. [CrossRef]
30. Kanazawa, Κ.; Sakakibara, H. Υψηλή περιεκτικότητα σε ντοπαμίνη, ένα ισχυρό αντιοξειδωτικό, στη μπανάνα cavendish. J. Agric. Food Chem. 2000, 48, 844–848. [CrossRef]
31. Parmar, HS; Kar, A. Προστατευτικός ρόλος εκχυλισμάτων φλούδας Mangifera indica, Cucumis melo και Citrullus vulgaris στον χημικά επαγόμενο υποθυρεοειδισμό. Chem. Biol. Αλληλεπιδρώ. 2009, 177, 254–258. [CrossRef]
32. Rahman, MM; Ichiyanagi, Τ.; Komiyama, Τ.; Sato, S.; Konishi, T. Επιδράσεις των ανθοκυανινών στο οξειδωτικό στρες που προκαλείται από ψυχολογικό στρες και την κατάσταση του νευροδιαβιβαστή. J. Agric. Food Chem. 2008, 56, 7545–7550. [CrossRef]
33. Graumann, R.; Παρίσι, Ι.; Martinez-Alvarado, P.; Rumanque, Ρ.; Perez-Pastene, C.; Cardenas, SP; Marin, Ρ.; Diaz-Grez, F.; Caviedes, R.; Caviedes, P. Οξείδωση ντοπαμίνης σε αμινοχρώμιο ως μηχανισμός νευροεκφυλισμού ντοπαμινεργικών συστημάτων στη νόσο του Πάρκινσον. Πιθανός νευροπροστατευτικός ρόλος της DT-διαφόρας. Πολ. J. Pharmacol. 2002, 54, 573-580. [PubMed]
34. Jiang, Χ.; Huang, J.; Τραγούδι, Δ.; Deng, R.; Wei, J.; Zhang, Z. Η αυξημένη κατανάλωση φρούτων και λαχανικών σχετίζεται με μειωμένο κίνδυνο γνωστικής έκπτωσης και άνοιας: Μετα-ανάλυση. Εμπρός. Γηράσκοντα Νευροσκί. 2017, 9, 18. [CrossRef] [PubMed]
35. Borai, IH; Ezz, MK; Rizk, MZ; Aly, HF; El-Sherbiny, Μ.; Matloub, AA; Fouad, GI Θεραπευτική επίδραση των πολυφαινολών φύλλων σταφυλιού σε ορισμένους βιοχημικούς και νευρολογικούς δείκτες στη νόσο του Alzheimer που προκαλείται από AlCl(3). Biomed. Pharmacother. 2017, 93, 837–851. [CrossRef] [PubMed]
36. Zeng, Q.; Li, F.; Xiang, Τ.; Wang, W.; Μακ.; Yang, C.; Chen, Η.; Xiang, H. Επίδραση ομάδων τροφίμων στην ολική ομοκυστεΐνη του πλάσματος για συγκεκριμένους γονότυπους MTHFR C677T στον κινεζικό πληθυσμό. ΜοΙ. Nutr. Food Res. 2017, 61. [CrossRef] [PubMed]
37. Ganguly, Ρ.; Alam, SF Ο ρόλος της ομοκυστεΐνης στην ανάπτυξη καρδιαγγειακών παθήσεων. Nutr. J. 2015, 14, 6. [CrossRef]
38. Upadya, Η.; Prabhu, S.; Prasad, Α.; Subramanian, D.; Gupta, S.; Goel, A. Μια τυχαιοποιημένη, διπλά τυφλή, ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο, πολυκεντρική κλινική δοκιμή για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας και της ασφάλειας του εκχυλίσματος Emblica Officinalis σε ασθενείς με δυσλιπιδαιμία. Συμπλήρωμα BMC. Εναλλακτική. Med. 2019, 19, 27. [CrossRef] [PubMed]
39. Bulotta, S.; Celano, Μ.; Lepore, SM; Montalcini, Τ.; Pujia, Α.; Russo, D. Ευεργετικές επιδράσεις των φαινολικών συστατικών του ελαιολάδου oleuropein και hydroxytyrosol: Εστίαση στην προστασία από καρδιαγγειακές και μεταβολικές παθήσεις. J. Transl. Med. 2014, 12, 219. [CrossRef]
40. Osakabe, Ν.; Baba, S.; Yasuda, Α.; Iwamoto, Τ.; Kamiyama, Μ.; Takizawa, Τ.; Itakura, Η.; Kondo, K. Η ημερήσια πρόσληψη κακάο μειώνει την ευαισθησία της λιποπρωτεΐνης χαμηλής πυκνότητας στην οξείδωση, όπως αποδεικνύεται σε υγιείς ανθρώπους εθελοντές. Free Radic. Res. 2001, 34, 93–99. [CrossRef] 41. Martini, D.; Rossi, S.; Biasini, Β.; Zavaroni, Ι.; Bedogni, G.; Musci, Μ.; Pruneti, C.; Passeri, G.; Ventura, Μ.; Di Nuzzo, S.; et al. Ισχυρισμένες επιδράσεις, μεταβλητές έκβασης και μέθοδοι μέτρησης για ισχυρισμούς υγείας που προτείνονται βάσει του κανονισμού της Ευρωπαϊκής Κοινότητας 1924/2006 στο πλαίσιο της προστασίας από την οξειδωτική βλάβη και την καρδιαγγειακή υγεία. Nutr. Metab. Καρδιοαγγειακή. Dis. 2017, 27, 473–503. [CrossRef] [PubMed]
42. Turck, D.; Bresson, J.-L.; Burlingame, Β.; Dean, Τ.; Fairweather-Tait, S.; Heinonen, Μ.; Hirsch-Ernst, KI; Mangelsdorf, Ι.; McArdle, HJ; Naska, Α.; et al. Οδηγίες για τις επιστημονικές απαιτήσεις για ισχυρισμούς υγείας που σχετίζονται με αντιοξειδωτικά, οξειδωτική βλάβη και καρδιαγγειακή υγεία: (Αναθεώρηση 1). EFSA J. Eur. Food Saf. Auth. 2018, 16, e05136. [CrossRef]
43. Dwivedi, Α.; Anggård, EE; Φορέας, MJ Η προσκόλληση μονοκυττάρων που προκαλείται από οξειδωμένη LDL σε ενδοθηλιακά κύτταρα δεν περιλαμβάνει NFkappaB. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001, 284, 239-244. [CrossRef]
44. Quinn, MT; Parthasarathy, S.; Fong, LG; Steinberg, D. Οξειδωτικά τροποποιημένες λιποπρωτεΐνες χαμηλής πυκνότητας: Ένας πιθανός ρόλος στη στρατολόγηση και διατήρηση μονοκυττάρων/μακροφάγων κατά τη διάρκεια της αθηρογένεσης. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 1987, 84, 2995–2998. [CrossRef] [PubMed]