Πήξη, Υποδοχείς που ενεργοποιούνται από πρωτεάση, και διαβητική νεφρική νόσος: Μαθήματα από ποντίκια με έλλειψη ENOS

Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Πήξη, Υποδοχείς που ενεργοποιούνται από πρωτεάση και διαβητική νεφρική νόσος: Μαθήματα από ποντίκια με έλλειψη eNOS

Yuji Oe,1 Mariko Miyazaki1 και Nobuyuki Takahashi2

1 Τομέας Νεφρολογίας, Ενδοκρινολογίας και Αγγειακής Ιατρικής, Μεταπτυχιακή Σχολή του Πανεπιστημίου Tohoku

Ιατρική, Sendai, Miyagi, Ιαπωνία

2 Τμήμα Κλινικής Φαρμακολογίας και Θεραπευτικής, Μεταπτυχιακή Σχολή Φαρμακευτικών Επιστημών του Πανεπιστημίου Tohoku & Σχολή Φαρμακευτικών Επιστημών, Sendai, Miyagi, Ιαπωνία

Η δυσλειτουργία του ενδοθηλιακού νιτρικού οξειδίου της συνθάσης (eNOS) είναι γνωστό ότι επιδεινώνει την εξέλιξη και την πρόγνωση της διαβητικής νεφρικής νόσου (DKD). Ένας από τους μηχανισμούς μέσω των οποίων επιτυγχάνεται αυτό είναι ότι τα χαμηλά επίπεδα eNOS σχετίζονται με την υπερπηκτικότητα, η οποία προάγει τη νεφρική βλάβη. Στον καταρράκτη της εξωτερικής πήξης, ο ιστικός παράγοντας (παράγοντας III) και οι κατάντη παράγοντες πήξης, όπως ο ενεργός παράγοντας X (FXa), επιδεινώνουν τη φλεγμονή μέσω της ενεργοποίησης των υποδοχέων που ενεργοποιούνται από πρωτεάση (PARs). Πρόσφατα, έχει αποδειχθεί ότι η έλλειψη ή η μειωμένη έκφραση eNOS σε διαβητικά ποντίκια, ως μοντέλο προχωρημένης DKD, αυξάνει τα επίπεδα παράγοντα νεφρικού ιστού και τις εκφράσεις PAR1 και 2 στους νεφρούς τους. Επιπλέον, η φαρμακευτική αναστολή ή η γενετική διαγραφή παραγόντων πήξης ή PARs βελτίωσε τη φλεγμονή στο DKD σε ποντίκια που δεν είχαν eNOS. Σε αυτήν την ανασκόπηση, συνοψίζουμε τη σχέση μεταξύ eNOS, πήξης και PARs και προτείνουμε μια νέα θεραπευτική επιλογή για τη διαχείριση ασθενών με DKD.

Λέξεις-κλειδιά: διαβητική σπειραματοσκλήρωση; παράγοντας Xa; φλεγμονή; παράγοντα ιστού

Tohoku J. Εχρ. Med., 2021 Σεπτεμβρίου, 255 (1), 1-8.

Το εκχύλισμα Cistanche μπορεί να βοηθήσει πολύ καλά στη νεφρική νόσο

Ο αριθμός των ασθενών με διαβητική νεφρική νόσο (DKD) αυξάνεται παγκοσμίως (de Boer et al. 2011; Kainz et al. 2015; Ogurtsova et al. 2017). Η DKD είναι μια από τις κύριες αιτίες θνησιμότητας σε ασθενείς με διαβητικές επιπλοκές (Afkarian et al. 2013). Επιπλέον, η DKD είναι προ-επιθετική και είναι η κύρια αιτία νεφρικής νόσου τελικού σταδίου που απαιτεί θεραπεία νεφρικής υποκατάστασης (Gregg et al. 2014; Liyanage et al. 2015). Στην Ιαπωνία, η διαβητική νεφροπάθεια αντιπροσωπεύει περισσότερο από το 39 τοις εκατό των νέων ασθενών που υποβάλλονται σε αιμοκάθαρση (Nitta et al. 2020). Ως εκ τούτου, απαιτείται η ανάπτυξη νέων θεραπευτικών επιλογών για τη διαχείριση ασθενών με DKD.

Υπάρχει αυξανόμενο ενδιαφέρον για το ρόλο του συστήματος πήξης στην παθογένεση της DKD. Η υπερπηκτικότητα σχετίζεται με DKD (Goldberg 2009; Domingueti et al. 2016). Ένα αυξημένο επίπεδο ινωδογόνου στο αίμα αποδείχθηκε ότι σχετίζεται με χαμηλό εκτιμώμενο ρυθμό σπειραματικής διήθησης, υψηλή πρωτεϊνουρία και σοβαρή ιστολογική βλάβη και ήταν προγνωστικός παράγοντας της εξέλιξης σε νεφρική νόσο τελικού σταδίου (Dalla Vestra et al. 2005; Pan et al. 2018· Zhang et al. 2018). Ορισμένες μελέτες έχουν δείξει συσχέτιση μεταξύ του επιπέδου του D-διμερούς, ενός προϊόντος αποικοδόμησης του ινώδους, και της νεφρικής δυσλειτουργίας στο DKD (Domingueti et al. 2018; Pan et al. 2018). Η υπερπηκτικότητα σε DKD πιθανότατα καθορίζεται από πολλούς παράγοντες. Για παράδειγμα, το σύστημα ρενίνης-αγγειοτενσίνης-αλδοστερόνης ενεργοποιεί τον ιστικό παράγοντα (TF, παράγοντας III) και αυξάνει τα θρομβωτικά επεισόδια (Dielis et al. 2005). Διαφορετικά, η υπεργλυκαιμία, η δυσλιπιδαιμία, η φλεγμονή ή η ενδοθηλιακή δυσλειτουργία εμπλέκονται στην προθρομβωτική κατάσταση υπό την παθογένεση της DKD (Goldberg 2009).

Η ενδοθηλιακή δυσλειτουργία είναι παρούσα στο DKD που εξελίσσεται σε μικροαγγειακές επιπλοκές (Goldberg 2009; Nakagawa et al. 2011). Η εξασθενημένη παραγωγή συνθάσης του ενδοθηλιακού μονοξειδίου του αζώτου (eNOS) ή η μειωμένη δραστηριότητα eNOS (π.χ. εξασθενημένη φωσφορυλίωση eNOS) είναι χαρακτηριστικό γνώρισμα της ενδοθηλιακής δυσλειτουργίας στο DKD (Nakagawa et al. 2011; Cheng et al. 2012). Έχουμε δείξει ότι η απώλεια έκφρασης eNOS συνδέθηκε με την αύξηση του επιπέδου TF και τη δραστηριότητα του συστήματος εξωγενούς πήξης (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a), η οποία συνδέεται στενά με θρομβωτικά επεισόδια σε ασθενείς με χρόνιο νεφρό ασθένειες (Kolachalama et al. 2018).

πρωτεάσες πήξης, όπως ο ενεργός παράγοντας FVII (FVIIa), ο ενεργός παράγοντας (FXa) και η θρομβίνη, που υπάρχουν στον καταρράκτη της εξωτερικής πήξης, προκαλούν τραυματισμό ιστού μέσω ενός μηχανισμού που εξαρτάται από τον υποδοχέα που ενεργοποιείται από πρωτεάση (PAR) (Madhusudhan et al. 2016, Posma et al. 2019). Σε αυτήν την ανασκόπηση, συνοψίζουμε τα ευρήματα που προέκυψαν από διαβητικά ποντίκια που δεν έχουν eNOS και συζητάμε τη σχέση μεταξύ της οδού πήξης-PAR, των επιπέδων eNOS και της παθογένεσης DKD.

Μονοπάτι ιστικού παράγοντα/ενεργοποιημένου υποδοχέα πρωτεάσης

Ο ιστικός παράγοντας (TF), γνωστός ως παράγοντας III, είναι μια διαμεμβρανική πρωτεΐνη 47 kDa που αλληλεπιδρά με τον παράγοντα VII (FVII) (Grover and Mackman 2018). Το σύμπλεγμα TF/FVIIa είναι ένας ενεργοποιητής του καταρράκτη της εξωτερικής πήξης και καταλύει την ενεργοποίηση των FX και FIX. Το FXa και ο ενεργοποιημένος συμπαράγοντας V (FVa) σχηματίζουν ένα προθρομβωτικό σύμπλεγμα που παράγει θρομβίνη. Τέλος, η θρομβίνη μετατρέπει το ινωδογόνο σε ινώδες, με αποτέλεσμα τον σχηματισμό θρόμβων (Grover and Mackman 2018). Το TF εκφράζεται τόσο σε αγγειακά λεία μυϊκά κύτταρα όσο και σε επιφανειακούς ινοβλάστες. Υπό φλεγμονώδεις συνθήκες, η έκφρασή του προκαλείται σε ενδοθηλιακά κύτταρα ή σε κυκλοφορούντα κύτταρα όπως τα μονοκύτταρα (Østerud and Bjørklid 2006).

Οι ενεργοποιημένοι με πρωτεάση υποδοχείς (PARs) είναι μέλη της υπεροικογένειας υποδοχέων συζευγμένων με πρωτεΐνη G, που περιλαμβάνει τέσσερις πρωτεΐνες PAR (PAR1-4). Τα PAR υφίστανται διάσπαση από πρωτεάσες στο Ν-τερματικό άκρο και ενεργοποιούνται κατά τη σύνδεση σε ένα νέο Ν-άκρο που περιέχει έναν προσδεδεμένο συνδέτη. Τα τέσσερα μέλη των PARs (PAR1-4) ενεργοποιούνται από ειδικές πρωτεάσες πήξης: το σύμπλεγμα TF και FVIIa ενεργοποιεί το PAR2, ο παράγοντας Xa ενεργοποιεί τόσο το PAR1 όσο και το PAR2 και η θρομβίνη ενεργοποιεί τα PAR1, PAR3 και PAR4 (Camerer et al. 2000· Coughlin 2005· Rothmeier and Ruf 2012· Zhao et al. 2014). Η σχέση μεταξύ TF, πρωτεασών πήξης και PARs φαίνεται στο Σχήμα 1.

Οι PARs είναι γνωστό ότι εκφράζονται ευρέως στα νεφρικά κύτταρα και εμπλέκονται στην παθοφυσιολογία της νεφρικής βλάβης. Τόσο το PAR1 όσο και το PAR2 εκφράζονται σε σπειραματικά ενδοθηλιακά κύτταρα, μεσαγγειακά κύτταρα και νεφρικά σωληναριακά κύτταρα που προέρχονται από άνθρωπο ή ποντίκια. Τα PAR2, PAR3 και PAR4 εκφράζονται σε ανθρώπινα ποδοκύτταρα. Τα PAR1, PAR3 και PAR4 εκφράζονται σε ποδοκύτταρα ποντικού (Tanaka et al. 2005; Vesey et al. 2005; Madhusudhan et al. 2012; Dong et al. 2015; Madhusudhan et al. 2016).

Αν και οι επιβλαβείς ή προστατευτικές επιδράσεις των PARs σε νεφρική βλάβη έχουν αποδειχθεί, τα συσσωρευμένα δεδομένα υποδηλώνουν ότι τα PARs επιδεινώνουν τη φλεγμονή διεγείροντας την παραγωγή κυτοκινών και χημειοκινών (Rothmeier and Ruf 2012; Isermann 2017; Posma et al. 2019). Σύμφωνα με αυτό το εύρημα, οι αγωνιστές PAR1 και PAR2 προάγουν την έκφραση φλεγμονωδών μεσολαβητών, όπως η μονοκυτταρική χημειοτακτική πρωτεΐνη 1 (MCP1) και ο αναστολέας του ενεργοποιητή πλασμινογόνου-1 (PAI-1) και ο προϊνωτικός μόρια σε ενδοθηλιακά, μεσαγγειακά και νεφρικά σωληναριακά κύτταρα (Vesey et al. 2005; Vesey et al. 2013; Ellinghaus et al. 2016; Waasdorp et al. 2016; Oe et al. 2019). Σε μελέτες in vivo, η έλλειψη PAR1 ή η παρουσία αναστολέων PAR1 μείωσε τη φλεγμονή σε μοντέλα ημισεληνοειδούς σπειραματονεφρίτιδας ή αποφρακτικής νεφρικής βλάβης (Cunningham et al. 2000; Waasdorp et al. 2019; Lok et al. 2020). Ομοίως, τα θεραπευτικά αποτελέσματα της αναστολής του PAR2 σε νεφρικές βλάβες συνοδεύτηκαν από μείωση της φλεγμονής στα νεφρά (Hayashi et al. 2016; Du et al. 2017; Han et al. 2019; Watanabe et al. 2019).

Πολυμορφισμοί ενδοθηλιακής συνθετάσης μονοξειδίου του αζώτου σε DKD

Η συνθάση του ενδοθηλιακού μονοξειδίου του αζώτου (eNOS) είναι μία από τις τρεις ισομορφές NOS και συμβάλλει στην παραγωγή ΝΟ στο αγγειακό ενδοθήλιο (Walford και Loscalzo 2003). ΝΟ που παράγεται από το eNOS στο αγγειακό ενδοθήλιο

Εικ. 1. Σχέση μεταξύ παραγόντων πήξης και υποδοχέων που ενεργοποιούνται από πρωτεάση (PARs).

Στον καταρράκτη εξωγενούς πήξης, ο ιστικός παράγοντας (TF) και το σύμπλοκο ενεργού FVII (FVIIa) ενεργοποιούν τον ενεργοποιημένο από πρωτεάση υποδοχέα 2 (PAR2), το ενεργό FX (FXa) ενεργοποιεί τόσο το PAR1 όσο και το PAR2 και τους στόχους της θρομβίνης PAR1, PAR3 και PAR4. Η διάσπαση της Ν-τερματικής αλληλουχίας των PARs από πρωτεάσες πήξης αποκαλύπτει μια νέα Ν-τερματική αλληλουχία που δρα ως συνδεδεμένος συνδέτης και προάγει τη φλεγμονή.

παίζει καθοριστικό ρόλο στη ρύθμιση της αγγειακής χαλάρωσης, της αντιφλεγμονής και της πρόληψης του σχηματισμού θρόμβων (Walford και Loscalzo 2003). Η εξασθενημένη έκφραση eNOS σχετίζεται με την ανάπτυξη DKD. Πρόσφατες μετα-αναλύσεις σε ανθρώπους αποκάλυψαν ότι τα γονίδια G894T (rs1799983), C-786T (rs2070744) και ιντρόνιο 4b/4a ​​(rs869109213) στα γονίδια eNOS (NOS3) συνδέονται στενά με ανάπτυξη DKD (Dellamea et al. 2014; Zhang et al. 2015; Dong et al. 2018). Από αυτές τις παραλλαγές, ο ρόλος του πολυμορφισμού G894T (Glu298Asp) στη λειτουργία eNOS έχει καλά χαρακτηριστεί. Η μειωμένη παραγωγή ΝΟ ή συσσώρευσης νιτρωδών ενδείκνυται σε επιμολυσμένα κύτταρα CHO με 298Asp σε σύγκριση με εκείνα με 298Glu (Noiri et al. 2002). Συλλογικά, αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι η μειωμένη παραγωγή ΝΟ από τη δυσλειτουργία eNOS είναι σημαντική για την εξέλιξη της DKD στους ανθρώπους.

Διαβητικά ποντίκια που στερούνται eNOS ως μοντέλο ανθρώπινης διαβητικής νεφροπάθειας

Η δημιουργία αξιόπιστων προκλινικών μοντέλων που μοιάζουν με την ανθρώπινη DKD είναι απαραίτητη για τη μελέτη νέων θεραπευτικών επιλογών. Με βάση τα στοιχεία που δείχνουν μια συσχέτιση μεταξύ του πολυμορφισμού eNOS και της DKD, αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι τα μοντέλα νοκ-άουτ eNOS τύπου Ι και τύπου II ΣΔ είναι μερικά από τα επιτυχημένα μοντέλα που μιμούνται την ανθρώπινη DKD (Brosius et al. 2009, Azushima et al. 2018). Αποδείχθηκε ότι διαβητικά ποντίκια που προκαλούνται από στρεπτοζοτοκίνη χωρίς eNOS αναπτύσσουν σοβαρή λευκωματουρία, μεσαγγειακή επέκταση, πάχυνση της σπειραματικής βασικής μεμβράνης και αρτηριακή υαλίνωση, που μοιάζει με ανθρώπινη DKD (Nakagawa et al. 2007). Ομοίως, τα διαβητικά ποντίκια τύπου II (DB/DB) που δεν είχαν eNOS εμφάνισαν σοβαρή σπειραματοσκλήρωση και λευκωματουρία (Zhao et al. 2006).

Αυξημένη TF σε διαβητικά ποντίκια με έλλειψη eNOS

Το ΝΟ αναστέλλει το σχηματισμό θρόμβων και τη συσσώρευση αιμοπεταλίων (Walford και Loscalzo 2003). Επειδή ο σχηματισμός σπειραματικού θρόμβου παρατηρήθηκε σε διαβητικά ποντίκια που δεν είχαν eNOS (Nakagawa et al. 2007), η εξασθενημένη έκφραση eNOS πιθανότατα σχετίζεται με την αύξηση της πήξης που εξαρτάται από τον TF. Η συσχέτιση μεταξύ eNOS και TF στο DKD έχει εξεταστεί σε προηγούμενες αναφορές μας (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a; Oe et al. 2016) (Εικ. 2).

Η μειωμένη ή η έλλειψη έκφρασης eNOS αυξάνει τη δραστηριότητα της νεφρικής TF σε διαβητικούς ποντικούς Akita

Χαρακτηρίσαμε την έκφραση TF σε διαβητικούς ποντικούς Akita (Ins2Akita/ plus ), ένα μοντέλο ΣΔ τύπου Ι, με διάφορα επίπεδα έκφρασης eNOS (eNOS plus / plus, eNOS plus /- και eNOS-/-) (Wang et al. 2011a ). Βρήκαμε ότι η σοβαρότητα της DKD συσχετίστηκε με μειωμένη έκφραση eNOS. Η απέκκριση λευκωματίνης στα ούρα, η σπειραματοσκλήρωση και η μείωση του ρυθμού σπειραματικής διήθησης επιδεινώθηκαν με την ακόλουθη σειρά: eNOS plus / plus ; Ins2Akita/ συν < enos="" συν="" ;="" ins2akita/="" συν="">< enos-/-;="" ins2akita/="" plus="" .="" είναι="" ενδιαφέρον="" ότι="" η="" έκφραση="" και="" η="" δραστηριότητα="" νεφρικής="" tf="" αυξήθηκαν="" στο="" enos="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="" και="" enos-/-;="" ποντίκια="" ins2akita/="" plus="" σε="" σύγκριση="" με="" αυτά="" του="" enos="" plus="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="" ποντίκια.="" η="" σπειραματική="" εναπόθεση="" ινώδους="" ήταν="" επίσης="" αξιοσημείωτη="" στο="" enos="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="" και="" enos-/-="" ;="" ins2akita/="" plus="" ποντίκια.="" επιπλέον,="" η="" έκφραση="" νεφρικού="" tf="" mrna="" συσχετίστηκε="" με="" τη="" σοβαρότητα="" της="" νόσου,="" την="" απέκκριση="" λευκωματίνης="" στα="" ούρα="" και="" την="" έκφραση="" της="" νεφρικής="" φλεγμονώδους="">

Τα εξουδετερωτικά αντισώματα κατά της TF Βελτιώνουν τη φλεγμονή στους διαβητικούς νεφρούς σε

Ποντίκια eNOS-Knockout

Η αύξηση της πήξης που εξαρτάται από τον TF σχετίζεται με αυξημένη φλεγμονή (Witkowski et al. 2016). Η αναστολή του εξαρτώμενου από το TF συστήματος πήξης βελτίωσε τις φλεγμονώδεις ασθένειες, όπως η σήψη που προκαλείται από LPS (Pawlinski et al. 2010). Για να αποσαφηνιστεί η αιτιώδης σχέση μεταξύ της φλεγμονής και του TF στο DKD, εξετάσαμε τη βραχυπρόθεσμη επίδραση των εξουδετερωτικών αντισωμάτων κατά του TF στη φλεγμονή των διαβητικών νεφρών σε ποντικούς με έλλειψη eNOS (Li et al. 2010). Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η χορήγηση αντισωμάτων κατά του TF μείωσε σημαντικά τα επίπεδα νεφρικής έκφρασης των γονιδίων που σχετίζονται με τη φλεγμονή και την ίνωση όπως τα Tnfa, Ccl2, Tgfb και Col4 mRNA στους νεφρούς ποντικού για τέσσερις ημέρες μετά την εξουδετέρωση του TF.

Ο αναστολέας της πήξης FXa Βελτιώνει τον τραυματισμό των νεφρών σε διαβητικά ποντίκια που δεν έχουν eNOS

Η πήξη FXa, που βρίσκεται κατάντη του TF/VIIa, συμβάλλει επίσης στη φλεγμονή μέσω των εξαρτώμενων από το PAR μονοπατιών. Ο ρόλος του στο DKD έχει αποδειχθεί σε πολλά ζωικά μοντέλα. Οι Sumi et al. (2011) απέδειξε ότι το fondaparinux, ένας αναστολέας FXa, μείωσε τα επίπεδα πρωτεΐνης στα ούρα, τη σπειραματική υπερτροφία και την εναπόθεση ινώδους σε ποντικούς DB/DB. Το θεραπευτικό αποτέλεσμα της αναστολής του FXa σε ποντικούς DKD που δεν έχουν eNOS καταδείχθηκε από την ομάδα μας (Oe et al. 2016). Η εδοξαμπάνη (50 mg/kg/ημέρα), ένας από του στόματος αναστολέας FXa, χορηγήθηκε στο eNOS-/-. Ποντίκια Ins2Akita/ plus για τρεις μήνες και τα αποτελέσματα έδειξαν βελτίωση των ιστολογικών τραυματισμών, όπως ο πολλαπλασιασμός της μεσαγγειακής μήτρας. Τα επίπεδα έκφρασης των φλεγμονωδών γονιδίων στους νεφρούς μειώθηκαν από την εδοξαμπάνη (Πίνακας 1). Το FXa ενεργοποιεί τόσο το PAR1 όσο και το PAR2. Για να αποσαφηνιστεί ο μηχανισμός της νεφρικής βλάβης που προκαλείται από FXa, δείξαμε ότι οι αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις των αναστολέων FXa είναι παρόμοιες με αυτές που βρέθηκαν σε ποντίκια PAR{2-/- και ποντίκια PAR2-/- με αναστολείς FXa . Αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν ότι το FXa πιθανότατα προκάλεσε φλεγμονή μέσω ενός εξαρτώμενου μηχανισμού PAR{{16}στο DKD. Αντίθετα, η εδοξαμπάνη δεν βελτίωσε τη σπειραματική βλάβη στο eNOS συν/συν. Ποντίκια Ins2Akita/ plus, υποδηλώνοντας ότι το θεραπευτικό αποτέλεσμα της αναστολής του FXa συσχετίστηκε με την εξαρτώμενη από το eNOS υπερπηκτικότητα σε διαβητικούς ποντικούς τύπου Ι.

Άλλοι Παράγοντες Πήξης στο DKD

Επειδή η θρομβίνη στοχεύει το PAR1, το οποίο προοδεύει αγγειακή φλεγμονή (Chen and Dorling 2009), η θρομβίνη πιθανότατα επιδεινώνει την DKD. Ωστόσο, οι προστατευτικοί ή επιβλαβείς ρόλοι της θρομβίνης στην παθογένεση της DKD έχουν αποδειχθεί. Η χαμηλή δόση θρομβίνης (50 pM) αποτρέπεται, ενώ η υψηλή δόση θρομβίνης (20 nM) επιδεινώνει την απόπτωση που προκαλείται από τη γλυκόζη στα ποδοκύτταρα (Wang et al. 201lb). Οι επιδράσεις των αναστολέων θρομβίνης όπως το dabigatran σε διαβητικά ποντίκια που δεν έχουν eNOS θα πρέπει να διευκρινιστούν στο μέλλον.

Το ινωδογόνο εμπλέκεται σε διάφορες φλεγμονώδεις καταστάσεις. Είναι ενδιαφέρον ότι η μερική μείωση ή η απουσία ινωδογόνου ήταν ευεργετική για τα μοντέλα νεφρικής ισχαιμίας-επαναιμάτωσης ή την αποφρακτική ίνωση των νεφρών (Sorensen et al.2011; Craciun et al, 2014). Επειδή η εναπόθεση σπειραματικής ινικής είναι αυξημένη σε διαβητικά ποντίκια που δεν έχουν eNOS (Nakagawa et al. 2007; Li et al.2010; Wang et al.201la), η διευκρίνιση του ρόλου της στην παθογένεση της DKD αξίζει περαιτέρω έρευνα.

Πίνακας 1. Επιδράσεις του παράγοντα ιστού (TF), του παράγοντα πήξης Xa (FXa) και της αναστολής του ενεργοποιημένου από πρωτεάση υποδοχέα (PAR) σε ποντικούς με διαβητική νεφρική νόσο (DKD) με μειωμένη ή έλλειψη έκφρασης eNOS.

Έκφραση των PAR1 και PAR2 σε διαβητικά ποντίκια που δεν έχουν eNOS

Η αυξημένη έκφραση των PARs σχετίζεται με νεφρική βλάβη. Εμείς και άλλοι έχουμε αποδείξει ότι τα επίπεδα έκφρασης του Par1 και/ή του Par2 mRNA αυξήθηκαν σε ζωικά μοντέλα με διαβητική νεφροπάθεια, νεφρική βλάβη που προκαλείται από αδενίνη, αποφρακτική νεφρική ίνωση και νεφρική βλάβη που προκαλείται από σισπλατίνη (Chung et al. 2013; Hayashi et al. 2016· Oe et al. 2016· Watanabe et al. 2019). Επιπλέον, τα επίπεδα σπειραματικής πρωτεΐνης PAR2 αυξήθηκαν σε ποντικούς DB/DB, ένα μοντέλο ΣΔ τύπου II (Sumi et al. 2011). Δείξαμε τη συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης PAR και της ανεπάρκειας eNOS σε διαβητικούς ποντικούς (Oe et al. 2016). Το επίπεδο έκφρασης του Par1 mRNA ήταν σημαντικά υψηλότερο στο eNOS-/-. Ins2Akita/ plus ποντίκια σε σχέση με το eNOS−/−; Ποντίκια Ins2Akita/ plus και μη DM. Ομοίως, η έκφραση του Par2 ήταν σημαντικά υψηλότερη στο eNOS−/−. Ποντίκια Ins2Akita/ plus σε σχέση με ποντίκια χωρίς DM. Αντίθετα, τα επίπεδα του Par4 mRNA δεν διέφεραν μεταξύ των γονότυπων. Η έλλειψη eNOS επιδεινώνει τη φλεγμονή στο DKD (Wang et al. 2011a). Επειδή οι προφλεγμονώδεις κυτοκίνες φέρεται να αυξάνουν τα PARs (Nystedt et al. 1996), η αυξημένη φλεγμονή που προκαλείται από έλλειψη eNOS πιθανώς επάγει την έκφραση του νεφρικού Pars σε DKD. Συλλογικά, τα αποτελέσματα των μελετών μας πρότειναν ότι τα επίπεδα έκφρασης των PAR1 και PAR2, παρόμοια με την περίπτωση της TF, αυξήθηκαν στους διαβητικούς νεφρούς όταν έλειπε το eNOS (Εικ. 2).

Διαγραφή PAR2 Βελτιωμένη διαβητική νεφρική βλάβη σε ποντίκια με μειωμένο eNOS

Εμείς και άλλοι έχουμε ασχοληθεί με τον ρόλο του PAR2 στο DKD σε προηγούμενες μελέτες. Η διαγραφή Par2 δεν επηρέασε τη σπειραματική βλάβη σε διαβητικούς άγριου τύπου ποντικούς Akita (Ins2Akita/ plus ) με eNOS (Oe et al. 2016). Επιπλέον, τα επαγόμενα από STZ διαβητικά ποντίκια που δεν είχαν PAR2 εμφάνισαν μειωμένη λευκωματουρία σε σύγκριση με τα διαβητικά ποντίκια άγριου τύπου, αλλά αυξημένη μεσαγγειακή επέκταση (Waasdorp et al. 2017). Συλλογικά, αυτά τα αποτελέσματα καταδεικνύουν ότι δεν υπάρχουν ή υπάρχουν ήπια θεραπευτικά αποτελέσματα της αναστολής του PAR2 στη νεφρική βλάβη στα πρώιμα και ήπια μοντέλα της DKD. Αντίθετα, έχουμε επιδείξει τις επιδράσεις της ανεπάρκειας PAR2 στην DKD σε διαβητικούς ποντικούς Akita με μειωμένη έκφραση του eNOS (eNOS plus /-; Ins2Akita/ plus) (Oe et al. 2016). Η έλλειψη PAR2 μείωσε σημαντικά τα επίπεδα της απέκκρισης λευκωματίνης στα ούρα, τη μεσαγγειακή επέκταση και το πάχος του GBM. Τα επίπεδα έκφρασης των προφλεγμονωδών και σχετιζόμενων με την ίνωση γονιδίων, συμπεριλαμβανομένων των Tnfa, Tgfb και Col4, μειώθηκαν επίσης στους νεφρούς του ποντικού. Αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν ότι το PAR2 είναι παθογόνο όχι σε πρώιμο στάδιο, αλλά στη σχετικά προχωρημένη διαβητική σπειραματική βλάβη που προκαλείται από ανεπάρκεια eNOS (Πίνακας 1).

Διπλός αποκλεισμός PAR1 και PAR2 σε διαβητικά ποντίκια με μειωμένο eNOS

Έχουμε αποδείξει ότι το PAR1 και το PAR2 συμβάλλουν συνεργατικά στην παθογένεση της DKD (Mitsui et al. 2020). Σε αυτή τη μελέτη, αρσενικά διαβητικά ποντίκια Akita τύπου Ι ετερόζυγα για eNOS (Ins2Akita/ plus, eNOS plus /-) χρησιμοποιήθηκαν ως μοντέλο DKD. Αυτά τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε θεραπεία με όχημα, ανταγωνιστή PAR1 (E5555, 60 mg/kg/ημέρα), ανταγωνιστή PAR2 (FSLLRY, 3 mg/kg/ημέρα) ή E5555 συν FSLLRY για 4 εβδομάδες. Η χορήγηση μόνο του ανταγωνιστή PAR1 ή PAR2 μείωσε τη σπειραματική βλάβη, όπως η μεσαγγειακή επέκταση και η εναπόθεση κολλαγόνου IV, σε σύγκριση με τη χορήγηση του φορέα. Παρατηρήθηκαν συνεργιστικά θεραπευτικά αποτελέσματα της αναστολής τόσο του PAR1 όσο και του PAR2 και η αναλογία λευκωματίνης ούρων προς κρεατινίνη μειώθηκε σημαντικά όταν αμφότερα τα PAR1 και PAR2 αποκλείστηκαν με E5555 συν FSLLRY σε σύγκριση με τη χορήγηση του φορέα. Επιπλέον, ο διπλός αποκλεισμός των PAR1 και PAR2 από το E5555 συν FSLLRY βελτίωσε συνεργικά τον ιστολογικό τραυματισμό, συμπεριλαμβανομένης της μεσαγγειακής επέκτασης, της διήθησης σπειραματικών μακροφάγων και της εναπόθεσης κολλαγόνου τύπου IV. Τα επίπεδα έκφρασης των γονιδίων που σχετίζονται με τη φλεγμονή και την ίνωση στους νεφρούς μειώθηκαν επίσης (Πίνακας 1).

Εστιάσαμε στις προφλεγμονώδεις επιδράσεις των αγωνιστών PAR1 και PAR2 σε ανθρώπινα ενδοθηλιακά κύτταρα (Mitsui et al. 2020). Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η διέγερση με αγωνιστές PAR1 και PAR2 αύξησε συνεργικά τα επίπεδα έκφρασης του mRNA MCP1 και PAI1. Η επίδραση του αγωνιστή PAR1 αποκλείστηκε από έναν αναστολέα NF-κB, ενώ αυτή του αγωνιστή PAR2 αποκλείστηκε από αναστολείς NF-kB και MAPK. Συλλογικά, το PAR1 και το PAR2 συμβάλλουν συνεργατικά στην αγγειακή φλεγμονή και την DKD μέσω διαφορετικών οδών σηματοδότησης (Εικ. 3).

συμπέρασμα

Σε αυτήν την ανασκόπηση, εστιάσαμε στη σχέση μεταξύ της οδού πρωτεάσης της πήξης-PAR και της ανεπάρκειας eNOS σε διαβητικούς ποντικούς. Η χαμηλή παραγωγή eNOS συνδέεται με υπερπηκτικότητα και αυξημένη σηματοδότηση PAR, τα οποία είναι επιβλαβή στο DKD. Αυτά τα ευρήματα μπορεί να υποδεικνύουν τους παθολογικούς τους ρόλους στην προχωρημένη ή μεταγενέστερη φάση της DKD (π.χ. με νεφρική ανεπάρκεια και/ή μαζική πρωτεϊνουρία). Οι από του στόματος αναστολείς FXa χρησιμοποιούνται ευρέως για την πρόληψη της θρόμβωσης (Patel et al. 2011; Robertson et al. 2015). Η χρήση τους στη θεραπεία της DKD είναι μια πολλά υποσχόμενη επιλογή. Επιπλέον, ορισμένοι ανταγωνιστές PAR1, συμπεριλαμβανομένου του atopaxar και του vorapaxar, μπορούν να χρησιμοποιηθούν στην αντιαιμοπεταλιακή θεραπεία για την πρόληψη του οξέος στεφανιαίου συνδρόμου

Εικ. 3. Διακεκριμένοι ρόλοι των PAR1 και PAR2 στην αγγειακή φλεγμονή και τη διαβητική νεφρική νόσο (DKD).

Στα ανθρώπινα ενδοθηλιακά κύτταρα, ο αγωνιστής PAR1 αυξάνει την έκφραση χημειοκίνης και κυτοκίνης μέσω της οδού σηματοδότησης NF-κB, ενώ ο αγωνιστής PAR2 τις αυξάνει μέσω των οδών σηματοδότησης NF-κB και MAPK. Το PAR1 και το PAR2 προκαλούν συνεργικά αγγειακή φλεγμονή μέσω διακριτών οδών στο DKD.

(Goto et al. 2010; Tricoci et al. 2012). Επιπλέον, υπάρχει αξιοσημείωτη πρόοδος στην ανάπτυξη ανταγωνιστών PAR2 (Lim et al. 2013; Cheng et al. 2017; Jiang et al. 2018) και μπορούν να αποτελέσουν νέες θεραπευτικές επιλογές για τη θεραπεία ασθενών με DKD.

Ευχαριστίες

Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε από το Ιατρικό Ίδρυμα Gonryo. Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε την Editage (https://www. editage.com) για την επεξεργασία στην αγγλική γλώσσα.

Σύγκρουση συμφερόντων

Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων.

βιβλιογραφικές αναφορές

Afkarian, M., Sachs, MC, Kestenbaum, B., Hirsch, IB, Tuttle, KR, Himmelfarb, J. & de Boer, IH (2013) Νεφροπάθεια και αυξημένος κίνδυνος θνησιμότητας στον διαβήτη τύπου 2. Μαρμελάδα. Soc. Nephrol., 24, 302-308.

Azushima, K., Gurley, SB & Coffman, TM (2018) Μοντελοποίηση διαβητικής νεφροπάθειας σε ποντίκια. Nat. Rev. Nephrol., 14, 48-56.

Brosius, FC, Alpers, CE, Bottinger, EP, Breyer, MD, Coffman, TM, Gurley, SB, Harris, RC, Kakoki, M., Kretzler, M., Leiter, EH, Levi, M., McIndoe, RA , Sharma, Κ., Smithies, Ο., Susztak, Κ., et αϊ. (2009) Μοντέλα ποντικών διαβητικής νεφροπάθειας. Μαρμελάδα. Soc. Nephrol., 20, 2503-2512.

Camerer, Ε., Huang, W. & Coughlin, SR (2000) Η εξαρτώμενη από τον ιστικό παράγοντα και τον παράγοντα Χ ενεργοποίηση του ενεργοποιημένου από πρωτεάση υποδοχέα 2 από τον παράγοντα VIIa. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ, 97, 5255-5260.

Chen, D. & Dorling, A. (2009) Κρίσιμοι ρόλοι για τη θρομβίνη στην οξεία και χρόνια φλεγμονή. J. Thromb. Haemost., 7 Suppl 1, 122-126.

Cheng, H., Wang, H., Fan, X., Paueksakon, P. & Harris, RC (2012) Η βελτίωση της δραστηριότητας της συνθάσης του ενδοθηλιακού μονοξειδίου του αζώτου επιβραδύνει την εξέλιξη της διαβητικής νεφροπάθειας σε ποντικούς DB/DB. Kidney Int., 82, 1176-1183.

Cheng, RKY, Fiez-Vandal, C., Schlenker, O., Edman, K., Aggeler, B., Brown, DG, Brown, GA, Cooke, RM, Dumelin, CE, Doré, AS, Geschwindner, S. , Grebner, C., Hermansson, ΝΟ, Jazayeri, Α., Johansson, Ρ., et αϊ. (2017) Δομική εικόνα για την αλλοστερική διαμόρφωση του υποδοχέα που ενεργοποιείται από πρωτεάση 2. Nature, 545, 112-115.

Chung, H., Ramachandran, R., Hollenberg, MD & Muruve, DA (2013) Η μετενεργοποίηση του υποδοχέα με ενεργοποιημένο από πρωτεϊνάση-2 του υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα και οι μετασχηματιστικές οδοί σηματοδότησης αυξητικού παράγοντα-υποδοχέα συμβάλλουν στη νεφρική ίνωση. J. Biol. Chem., 288, 37319-37331.

Coughlin, SR (2005) Υποδοχείς που ενεργοποιούνται από πρωτεάση στην αιμόσταση, τη θρόμβωση και την αγγειακή βιολογία. J. Thromb. Haemost., 3, 1800-1814.

Craciun, FL, Ajay, AK, Hoffmann, D., Saikumar, J., Fabian, SL, Bijol, V., Humphreys, BD & Vaidya, VS (2014) Η φαρμακολογική και γενετική εξάντληση του ινωδογόνου προστατεύει από τη νεφρική ίνωση. Είμαι. J. Physiol. Renal Physiol., 307, F471-484.

Cunningham, MA, Rondeau, E., Chen, X., Coughlin, SR, Holdworth, SR & Tipping, PG (2000) Ο ενεργοποιημένος από πρωτεάση υποδοχέας 1 μεσολαβεί εξαρτώμενη από τη θρομβίνη, κυτταρομεσολαβούμενη νεφρική φλεγμονή στην μισοφέγγαρη σπειραματονεφρίτιδα. J. Εχρ. Med., 191, 455-462.

Dalla Vestra, M., Mussap, M., Gallina, P., Bruseghin, M., Cernigoi, AM, Saller, A., Plebani, M. & Fioretto, P. (2005) Δείκτες οξείας φάσης της φλεγμονής και των σπειραμάτων δομή σε ασθενείς με διαβήτη τύπου 2. Μαρμελάδα. Soc. Nephrol., 16 Suppl 1, S78-82.

de Boer, IH, Rue, TC, Hall, YN, Heagerty, PJ, Weiss, NS & Himmelfarb, J. (2011) Χρονικές τάσεις στον επιπολασμό της διαβητικής νεφρικής νόσου στις Ηνωμένες Πολιτείες. JAMA, 305, 2532-2539.

Dellamea, BS, Pinto, LC, Leitão, CB, Santos, KG & Canani, LH (2014) Πολυμορφισμοί γονιδίου συνθάσης ενδοθηλιακού νιτρικού οξειδίου και κίνδυνος διαβητικής νεφροπάθειας: συστηματική ανασκόπηση και μετα-ανάλυση. BMC Med. Genet., 15, 9.

Dielis, AW, Smid, M., Spronk, HM, Hamulyak, K., Kroon, AA, ten Cate, H. & de Leeuw, PW (2005) The prothrombotic paradox of hypertension: role of the renin-anggiotensin and kallikrein- συστήματα κινίνης. Υπέρταση, 46, 1236-1242.

Domingue, CP, Dusse, LM, Carvalho, M., de Sousa, LP, Gomes, KB & Fernandes, AP (2016) Σακχαρώδης διαβήτης: η σύνδεση μεταξύ οξειδωτικού στρες, φλεγμονής, υπερπηκτικότητας και αγγειακών επιπλοκών. J. Επιπλοκές διαβήτη, πήξη, eNOS και DKD 7

30, 738-745.

Domingue, CP, Fóscolo, RB, Dusse, LMS, Reis, JS, Carv- also, MDG, Gomes, KB & Fernandes, AP (2018) Συσχέτιση διαφορετικών βιοδεικτών νεφρικής λειτουργίας με επίπεδα D-dimer σε ασθενείς με διαβήτη τύπου 1 σακχαρώδης (νεφρικοί βιοδείκτες και D-διμερές στο διαβήτη). Αψίδα. Endocrinol. Metab., 62, 27-33.

Dong, J., Peng, Y., Wang, Y. & Zhang, Y. (2018) Οι ρόλοι των πολυμορφισμών του γονιδίου της συνθάσης του ενδοθηλιακού νιτρικού οξειδίου στον σακχαρώδη διαβήτη και τις σχετικές αγγειακές επιπλοκές του: μια συστηματική ανασκόπηση και μετα-ανάλυση. Endocrine, 62, 412-422.

Dong, W., Wang, H., Shahzad, K., Bock, F., Al-Dabet, MM, Ranjan, S., Wolter, J., Kohli, S., Hoffmann, J., Dhople, VM, Zhu, C., Lindquist, JA, Esmon, CT, Gröne, Ε., Gröne, HJ, et al. (2015) Η ενεργοποιημένη πρωτεΐνη C βελτιώνει τον τραυματισμό νεφρικής ισχαιμίας-επαναιμάτωσης περιορίζοντας τη δημόσια ούρηση που δεσμεύει την πρωτεΐνη Y-box. Μαρμελάδα. Soc. Nephrol., 26, 2789-2799.

Du, C., Zhang, T., Xiao, X., Shi, Y., Duan, H. & Ren, Y. (2017) Ο ενεργοποιημένος από πρωτεάση υποδοχέας-2 προάγει τη φλεγμονή του νεφρικού σωληναριακού επιθηλίου αναστέλλοντας την αυτοφαγία μέσω η οδός σηματοδότησης PI3K/Akt/mTOR. Biochem. J., 474, 2733-2747.

Ellinghaus, P., Perzborn, E., Hauenschild, P., Gerdes, C., Heit-meier, S., Visser, M., Summer, H. & Laux, V. (2016) Expres- sion of pro- φλεγμονώδη γονίδια σε ανθρώπινα ενδοθηλιακά κύτταρα: σύγκριση rivaroxaban και dabigatran. Thromb. Res.,

142, 44-51.

Goldberg, RB (2009) Δείκτες φλεγμονής κυτοκίνης και παρόμοια με κυτοκίνη, ενδοθηλιακή δυσλειτουργία και ανισορροπημένη πήξη στην ανάπτυξη του διαβήτη και των επιπλοκών του. J. Clin. Endocrinol. Metab., 94, 3171-3182.

Goto, S., Ogawa, H., Takeuchi, M., Flather, MD & Bhatt, DL; the J-LANCELOT (Japanese-Lesson from Antagonizing the Cellular Effect of Thrombin) Investigators (2010) Διπλή-τυφλές, ελεγχόμενες με εικονικό φάρμακο μελέτες Φάσης ΙΙ του ενεργοποιημένου με πρωτεάση ανταγωνιστή του υποδοχέα 1 E5555 (atopaxar) σε Ιάπωνες ασθενείς με οξύ στεφανιαίο σύνδρομο ή στεφανιαία νόσο υψηλού κινδύνου. Ευρώ. Heart J., 31, 2601-2613.

Gregg, EW, Williams, DE & Geiss, L. (2014) Αλλαγές στις επιπλοκές που σχετίζονται με τον διαβήτη στις Ηνωμένες Πολιτείες. N. Engl. J. Med., 371, 286-287.

Grover, SP & Mackman, N. (2018) Ιστικός παράγοντας: βασικός μεσολαβητής της αιμόστασης και πυροδότησης της θρόμβωσης. Αρτηριοσκληρυντικός. Thromb. Vasc. Biol., 38, 709-725.

Han, Y., Tian, ​​L., Ma, F., Tesch, G., Vesey, DA, Globe, GC, Lohman, RJ, Morais, C., Suen, JY, Fairlie, DP & Nikolic- Paterson, DJ (2019) Η φαρμακολογική αναστολή του ενεργοποιημένου με πρωτεάση υποδοχέα-2 μειώνει τον σχηματισμό ημισελήνου σε νεφροτοξική νεφρίτιδα ορού αρουραίου. Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 46,

456-464.

Hayashi, S., Oe, Y., Fushimi, T., Sato, E., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2016) Ο ενεργοποιημένος από πρωτεάση υποδοχέας 2 επιδεινώνει την επαγόμενη από αδενίνη νεφρική σωληναριδική βλάβη σε ποντίκια. Biochem. Biophys. Res. Commun.,483, 547-552.

Isermann, B. (2017) Ομοιοστατικά αποτελέσματα σηματοδότησης που εξαρτώνται από πρωτεάση πήξης και ενεργοποιημένων από πρωτεάση υποδοχέων. J. Thromb. Haemost., 15, 1273-1284.

Jiang, Y., Yau, MK, Lim, J., Wu, KC, Xu, W., Suen, JY & Fairlie, DP (2018) Ένας ισχυρός ανταγωνιστής του ενεργοποιούμενου από πρωτεάση υποδοχέα 2 που αναστέλλει πολλαπλές λειτουργίες σηματοδότησης στον ανθρώπινο καρκίνο κύτταρα. J. Pharmacol. Exp. Ther., 364, 246-257.

Kainz, A., Hronsky, M., Stel, VS, Jager, KJ, Geroldinger, A., Dunkler, D., Heinze, G., Tripepi, G. & Oberbauer, R. (2015) Πρόβλεψη του επιπολασμού χρόνια νεφρική νόσος σε διαβητικούς ασθενείς σε χώρες της Ευρωπαϊκής Ένωσης έως το 2025. Nephrol. Καντράν. Transplant., 30 Suppl 4, iv113-118.

Kolachalama, VB, Shashar, M., Alousi, F., Shivanna, S., Rijal, K., Belghasem, ME, Walker, J., Matsuura, S., Chang, GH, Gibson, CM, Dember, LM, Francis, JM, Ravid, K. & Chitalia, VC (2018) Ο άξονας ουραιμικής διαλυμένης ουσίας-αρυλ υδρογονάνθρακα υποδοχέα-ιστικού παράγοντα σχετίζεται με θρόμβωση μετά από αγγειακό τραυματισμό στον άνθρωπο. Μαρμελάδα. Soc. Nephrol., 29, 1063- 1072.

Li, F., Wang, CH, Wang, JG, Thai, T., Boysen, G., Xu, L., Turner, AL, Wolberg, AS, Mackman, N., Maeda, N. & Takahashi, N. (2010) Η αυξημένη έκφραση ιστικού παράγοντα συμβάλλει στην επιδείνωση της διαβητικής νεφροπάθειας σε ποντίκια που δεν έχουν eNOS που τρέφονται με δίαιτα υψηλής περιεκτικότητας σε λιπαρά. J. Thromb. Haemost., 8, 2122-2132.

Lim, J., Iyer, A., Liu, L., Suen, JY, Lohman, RJ, Seow, V., Yau, MK, Brown, L. & Fairlie, DP (2013) Παχυσαρκία που προκαλείται από δίαιτα, λιπώδης φλεγμονή και η μεταβολική δυσλειτουργία που συσχετίζεται με την έκφραση του PAR2 εξασθενεί από τον ανταγωνισμό του PAR2. FASEB J., 27, 4757-4767.

Liyanage, T., Ninomiya, T., Jha, V., Neal, B., Patrice, HM, Okpechi, I., Zhao, MH, Lv, J., Garg, AX, Knight, J., Rodgers, A ., Gallagher, M., Kotwal, S., Cass, A. & Perkovic, V. (2015) Παγκόσμια πρόσβαση στη θεραπεία για νεφρική νόσο τελικού σταδίου: μια συστηματική ανασκόπηση. Lancet, 385, 1975-1982.

Lok, SWY, Yiu, WH, Li, H., Xue, R., Zou, Y., Li, B., Chan, KW, Chan, LYY, Leung, JCK, Lai, KN & Tang, SCW

(2020) Ο ανταγωνιστής PAR-1 vorapaxar βελτιώνει τον τραυματισμό των νεφρών και τη σωληναρισιακή διάμεση ίνωση. Clin. Sci. (Λονδ.), 134, 2873-2891.

Lv, B., Wang, H., Tang, Y., Fan, Z., Xiao, X. & Chen, F. (2009) Η πρωτεΐνη του κουτιού 1 της ομάδας υψηλής κινητικότητας επάγει την έκφραση ιστικού παράγοντα στα αγγειακά ενδοθηλιακά κύτταρα μέσω της ενεργοποίησης του NF-kappaB και Egr-1. Thromb. Haemost., 102, 352-359.

Madhusudhan, T., Kerlin, BA & Isermann, B. (2016) Ο αναδυόμενος ρόλος των πρωτεασών πήξης στη νεφρική νόσο. Nat. Rev. Nephrol., 12, 94-109.

Madhusudhan, T., Wang, H., Straub, BK, Gröne, E., Zhou, Q., Shahzad, K., Müller-Krebs, S., Schwenger, V., Gerlitz, B., Grinnell, BW, Griffin, JH, Reiser, J., Gröne, HJ, Esmon, CT, Nawroth, ΡΡ, et αϊ. (2012) Η κυτταροπροστατευτική σηματοδότηση από ενεργοποιημένη πρωτεΐνη C απαιτεί ενεργοποιημένο από πρωτεάση υποδοχέα-3 στα ποδοκύτταρα. Blood, 119, 874-883.

Mitsui, S., Oe, Y., Sekimoto, A., Sato, E., Hashizume, Y., Yamakage, S., Kumakura, S., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. ( 2020) Ο διπλός αποκλεισμός των υποδοχέων 1 και 2 που ενεργοποιούνται με πρωτεάση βελτιώνει επιπρόσθετα τη διαβητική νεφρική νόσο. Είμαι. J. Physiol. Renal Physiol., 318, F1067-F1073.

Nakagawa, T., Sato, W., Glushakova, O., Heinig, M., Clarke, T., Campbell-Thompson, M., Yuzawa, Y., Atkinson, MA, Johnson, RJ & Croker, B. ( 2007) Τα διαβητικά ενδοθηλιακά ποντίκια συνθάσης οξειδίου του αζώτου νοκ-άουτ αναπτύσσουν προχωρημένη διαβητική νεφροπάθεια. Μαρμελάδα. Soc. Nephrol., 18, 539-550.

Nakagawa, T., Tanabe, K., Croker, BP, Johnson, RJ, Grant, MB, Kosugi, T. & Li, Q. (2011) Η ενδοθηλιακή δυσλειτουργία ως δυνητικός συντελεστής στη διαβητική νεφροπάθεια. Nat. Rev. Nephrol., 7, 36-44.

Nitta, K., Goto, S., Masakane, I., Hanafusa, N., Taniguchi, M., Hasegawa, T., Nakai, S., Wada, A., Hamano, T., Hoshino, J., Joki, N., Abe, M., Yamamoto, K. & Nakamoto, H.; the Japanese Society for Dialysis Therapy Renal Data Registry Committee (2020) Ετήσια έκθεση δεδομένων αιμοκάθαρσης για το 2018, Μητρώο νεφρικών δεδομένων JSDT: μέθοδοι έρευνας, δεδομένα εγκατάστασης, επίπτωση, επιπολασμός και θνησιμότητα. Ρεν. Αντικαθιστώ. Θερ., 6, 41.

Noiri, E., Satoh, H., Taguchi, J., Brodsky, SV, Nakao, A., Ogawa, Y., Nishijima, S., Yokomizo, T., Tokunaga, K. & Fujita, T. (2002 ) Συσχέτιση πολυμορφισμού eNOS Glu298Asp με νεφρική νόσο τελικού σταδίου. Υπέρταση, 40, 535-540.

Nystedt, S., Ramakrishnan, V. & Sundelin, J. (1996) Ο ενεργοποιημένος από πρωτεϊνάση υποδοχέας 2 επάγεται από φλεγμονώδεις μεσολαβητές σε ανθρώπινα ενδοθηλιακά κύτταρα. Σύγκριση με τον υποδοχέα θρομβίνης. J. Biol. Chem., 271, 14910-14915.

Oe, Y., Fushima, T., Sato, E., Sekimoto, A., Kisu, K., Sato, H., Sugawara, J., Ito, S. & Takahashi, N. (2019) Ενεργοποιημένη από πρωτεάση ο υποδοχέας 2 προστατεύει από τον αναστολέα VEGF που προκαλείται από 8 Y. Oe et al. σπειραματική ενδοθηλιακή και ποδοκυτταρική βλάβη. Sci. Rep., 9, 2986.

Oe, Y., Hayashi, S., Fushima, T., Sato, E., Kisu, K., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2016) Ο παράγοντας πήξης Xa και ο ενεργοποιημένος από πρωτεάση υποδοχέας 2 ως νέους θεραπευτικούς στόχους για τη διαβητική νεφροπάθεια. Αρτηριοσκληρυντικός. Thromb. Vasc. Biol., 36, 1525- 1533.

Ogurtsova, K., da Rocha Fernandes, JD, Huang, Y., Linnenkamp, ​​U., Guariguata, L., Cho, NH, Cavan, D., Shaw, JE & Makaroff, LE (2017) IDF Diabetes Atlas: Global εκτιμήσεις για τον επιπολασμό του διαβήτη για το 2015 και το 2040. Diabetes Res. Clin. Pract., 128, 40-50.

Østerud, B. & Bjørklid, E. (2006) Πηγές παράγοντα ιστού. Σεμιν. Thromb. Hemost., 32, 11-23.

Owens, AP, Passam, FH, Antoniak, S., Marshall, SM, McDaniel, AL, Rudel, L., Williams, JC, Hubbard, BK, Dutton, JA, Wang, J., Tobias, PS, Curtiss, LK , Daugherty, Α., Kirchhofer, D., Luyendyk, JP, et αϊ. (2012) Η ενεργοποίηση της πήξης που εξαρτάται από τον παράγοντα μονοκυττάρου ιστού σε υπερχοληστερολαιμικά ποντίκια και πιθήκους αναστέλλεται από τη σιμβαστατίνη. J. Clin. Invest., 122, 558-568.

Pan, L., Ye, Y., Wo, M., Bao, D., Zhu, F., Cheng, M., Ni, X. & Fei, X. (2018) Κλινική σημασία των αιμοστατικών παραμέτρων στην πρόβλεψη για σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2 και διαβητική νεφροπάθεια. Dis. Μαρκαδόροι, 2018, 5214376.

Patel, MR, Mahaffey, KW, Garg, J., Pan, G., Singer, DE, Hacke, W., Breithardt, G., Halperin, JL, Hankey, GJ, Piccini, JP, Becker, RC, Nessel, CC, Paolini, JF, Berkowitz, SD, Fox, KA, et al. (2011) Rivaroxaban έναντι βαρφαρίνης σε μη βαλβιδική κολπική μαρμαρυγή. N. Engl. J. Med.,

365, 883-891. Pawlinski, R., Wang, JG, Owens, AP, Williams, J., Antoniak, S., Tencati, M., Luther, T., Rowley, JW, Low, EN, Weyrich, AS & Mackman, N. ( 2010) Ο αιματοποιητικός και μη αιμοποιητικός παράγοντας κυτταρικού ιστού ενεργοποιεί τον καταρράκτη πήξης σε ενδοτοξαιμικά ποντίκια. Blood, 116, 806-814. Posma, JJ, Grover, SP, Hisada, Y., Owens, AP, Antoniak, S., Spronk, HM & Mackman, N. (2019) Οι ρόλοι των πρωτεασών πήξης και των PARs (Protease-Activated Receptors) σε μοντέλα ποντικών φλεγμονωδών ασθένειες. Αρτηριοσκληρυντικός. Thromb. Vasc. Biol., 39, 13-24.

Robertson, L., Kesteven, P. & McCaslin, JE (2015) Από του στόματος άμεσοι αναστολείς θρομβίνης ή από του στόματος αναστολείς του παράγοντα Xa για τη θεραπεία της εν τω βάθει φλεβικής θρόμβωσης. Σύστημα βάσης δεδομένων Cochrane. Στροφή μηχανής.,

CD010956.

Rogero, MM & Calder, PC (2018) Παχυσαρκία, φλεγμονή, υποδοχέας 4 που μοιάζει με διόδια και λιπαρά οξέα. Θρεπτικά συστατικά, 10, 432.

Rothmeier, AS & Ruf, W. (2012) Σηματοδότηση υποδοχέα 2 που ενεργοποιείται από πρωτεάση στη φλεγμονή. Σεμιν. Ανοσοπαθόλη. , 34 , 133-149.

Samad, F. & Ruf, W. (2013) Φλεγμονή, παχυσαρκία και θρόμβωση. Blood, 122, 3415-3422.

Shrestha, C., Ito, T., Kawahara, K., Shrestha, B., Yamakuchi, M., Hashiguchi, T. & Maruyama, I. (2013) Το παλμιτικό κορεσμένο λιπαρό οξύ προκαλεί την εξωκυτταρική απελευθέρωση της ιστόνης Η3: α πιθανή μηχανική βάση για φλεγμονή και θρόμβωση που προκαλείται από δίαιτα υψηλής περιεκτικότητας σε λιπαρά. Biochem. Biophys. Res. Commun., 437, 573-578. Sörensen, I., Susnik, N., Inhester, T., Degen, JL, Melk, A., Haller,

H. & Schmitt, R. (2011) Το ινωδογόνο, που δρα ως μιτογόνο για τους σωληνοειδείς διάμεσους ινοβλάστες, προάγει τη νεφρική ίνωση. Kidney Int., 80, 1035-1044.

Sumi, A., Yamanaka-Hanada, N., Bai, F., Makino, T., Mizukami, H. & Ono, T. (2011) Roles of coagulation pathway and factor Xa in the progress of diabetic nephropathy in DB/ Ποντίκια DB. Biol. Pharm. Bull., 34, 824-830.

Tanaka, M., Arai, H., Liu, N., Nogaki, F., Nomura, K., Kasuno, K., Oida, E., Kita, T. & Ono, T. (2005) Role of coagulation παράγοντα Xa και υποδοχέα 2 που ενεργοποιείται από πρωτεάση στον πολλαπλασιασμό των ανθρώπινων μεσαγγειακών κυττάρων. Kidney Int., 67, 2123-2133.

Tricoci, P., Huang, Z., Held, C., Moliterno, DJ, Armstrong, PW, Van de Werf, F., White, HD, Aylward, PE, Wallentin, L., Chen, E., Lokhnygina, Υ., Pei, J., Leonardi, S., Rorick, TL, Kilian, ΑΜ, et αϊ. (2012) Ανταγωνιστής υποδοχέα θρομβίνης vorapaxar σε οξέα στεφανιαία σύνδρομα. N. Engl. J. Med., 366, 20-33.

Vesey, DA, Cheung, CW, Kruger, WA, Poronnik, P., Gobe, G. & Johnson, DW (2005) Η θρομβίνη διεγείρει προφλεγμονώδεις και πολλαπλασιαστικές αποκρίσεις σε πρωτογενείς καλλιέργειες ανθρώπινων εγγύς σωληναριακών κυττάρων. Kidney Int., 67, 1315-1329.

Vesey, DA, Suen, JY, Seow, V., Lohman, RJ, Liu, L., Gobe, GC, Johnson, DW & Fairlie, DP (2013) PAR2-προκαλούμενες φλεγμονώδεις αποκρίσεις στο ανθρώπινο σωληναριακό επιθήλιο κύτταρα. Είμαι. J. Physiol. Renal Physiol., 304, F737-750.

Waasdorp, M., de Rooij, DM, Florquin, S., Duitman, J. & Spek, CA (2019) Ο ενεργοποιημένος από πρωτεάση υποδοχέας-1 συμβάλλει σε νεφρική βλάβη και διάμεση ίνωση κατά τη διάρκεια της χρόνιας αποφρακτικής νεφροπάθειας. J. Cell. ΜοΙ. Med., 23, 1268-1279.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S. & Spek, CA (2016) Η ανεπάρκεια υποδοχέα που ενεργοποιείται από πρωτεάση-1 προστατεύει από τη διαβητική νεφροπάθεια που προκαλείται από στρεπτοζοτοκίνη σε ποντίκια. Sci. Rep., 6, 33030.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S., Spek, CA & Spek, AC (2017) Υποδοχέας 2 ενεργοποιημένος από πρωτεάση στη διαβητική νεφροπάθεια: ένα δίκοπο ξίφος. Είμαι. J. Transl. Res., 9, 4512-4520.

Walford, G. & Loscalzo, J. (2003) Nitric oxide in vascular biology.

J. Thromb. Haemost., 1, 2112-2118.

Wang, CH, Li, F., Hiller, S., Kim, HS, Maeda, N., Smithies, O. & Takahashi, N. (2011a) Μια μέτρια μείωση των ενδοθηλιακών NOS σε ποντικούς συγκρίσιμη με αυτή που σχετίζεται με το ανθρώπινο NOS3 παραλλαγές επιδεινώνει τη διαβητική νεφροπάθεια. Proc. Natl. Ακαδ.

Sci. ΗΠΑ, 108, 2070-2075.

Wang, H., Madhusudhan, T., He, T., Hummel, B., Schmidt, S., Vinnikov, IA, Shahzad, K., Kashif, M., Muller-Krebs, S., Schwenger, V. , Bierhaus, A., Rudofsky, G., Nawroth, PP & Isermann, B. (2011b) Η χαμηλή αλλά παρατεταμένη ενεργοποίηση της πήξης βελτιώνει την απόπτωση των ποδοκυττάρων που προκαλείται από τη γλυκόζη: προστατευτική επίδραση του παράγοντα V Leiden στη διαβητική νεφροπάθεια. Blood, 117, 5231-5242.

Watanabe, M., Oe, Y., Sato, E., Sekimoto, A., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2019) Ο ενεργοποιημένος από πρωτεάση υποδοχέας 2 επιδεινώνει τη νεφροτοξικότητα που προκαλείται από τη σισπλατίνη. Είμαι. J. Physiol. Renal Physiol., 316, F654-F659.

Witkowski, M., Landmesser, U. & Rauch, U. (2016) Ιστικός παράγοντας ως σύνδεσμος μεταξύ φλεγμονής και πήξης. Τάσεις Καρδιοαγγειακή. Med., 26, 297-303.

Zhang, J., Wang, Y., Zhang, R., Li, H., Han, Q., Wu, Y., Wang, S., Guo, R., Wang, T., Li, L. & Liu, F. (2018) Το ινωδογόνο ορού προβλέπει τη διαβητική ESRD σε ασθενείς με σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2. Diabetes Res. Clin. Pract., 141, 1-9.

Zhang, Y., Xiao, HQ, Zeng, XT, Zuo, HX & Xu, YC (2015) Συσχετίσεις μεταξύ των πολυμορφισμών της συνθάσης του ενδοθηλιακού μονοξειδίου του αζώτου και του κινδύνου διαβητικής νεφροπάθειας: μια ενημερωμένη μετα-ανάλυση. Ρεν. Fail., 37, 312-326.

Zhao, HJ, Wang, S., Cheng, H., Zhang, MZ, Takahashi, T., Fogo, AB, Breyer, MD & Harris, RC (2006) Η ανεπάρκεια συνθετάσης ενδοθηλιακού μονοξειδίου του αζώτου προκαλεί επιταχυνόμενη νεφροπάθεια σε διαβητικούς ποντικούς. Μαρμελάδα. Soc. Nephrol., 17, 2664-2669.

Zhao, P., Metcalf, M. & Bunnett, NW (2014) Μεροληπτική σηματοδότηση υποδοχέων που ενεργοποιούνται από πρωτεάση. Εμπρός. Endocrinol. (Λωζάνη), 5, 67.