Χημειοπροληπτικό δυναμικό φλαβονοειδών στο στοματικό ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα σε ανθρώπινες μελέτες

Αφηρημένη

Τα διαθέσιμα στοιχεία από τη διατροφική επιδημιολογία έχουν δείξει μια αντίστροφη συσχέτιση μεταξύ της τακτικής κατανάλωσης φρούτων και λαχανικών και του κινδύνου ανάπτυξης ορισμένων τύπων καρκίνου. Με τη σειρά τους, προκλινικές μελέτες έχουν αποδώσει τις επιδράσεις που προάγουν την υγεία των φυτικών τροφίμων σε ορισμένες ομάδες φυτοχημικών, μέσω των πολλών βιολογικών τους δραστηριοτήτων. Σε αυτή την έρευνα, εξετάζουμε εν συντομία τις χημειοπροληπτικές δυνατότητες των φλαβονοειδών και των τροφών πλούσιων σε φλαβονοειδή στην καρκινογένεση του στόματος στον άνθρωπο. Παρά την έλλειψη δεδομένων από κλινικές δοκιμές και επιδημιολογικές μελέτες, σε σύγκριση με τις in vitro/in vivo έρευνες, έχει αναφερθεί υψηλό επίπεδο στοιχείων για τη γαλλική επιγαλλοκατεχίνη (EGCG) και τις ανθοκυανίνες. Αυτά τα φλαβονοειδή, άφθονα στο πράσινο τσάι και στα μαύρα σμέουρα, αντίστοιχα, αντιπροσωπεύουν πολλά υποσχόμενους χημειοπροληπτικούς παράγοντες στον καρκίνο του στόματος στον άνθρωπο.

Κάντε κλικ για cistanches βότανο και Cistanche τσάι

1. Εισαγωγή

Διατροφικές συνήθειες πλούσιες σε φρούτα, λαχανικά, όσπρια και δημητριακά ολικής αλέσεως έχουν συσχετιστεί σημαντικά με μειωμένο κίνδυνο χρόνιων εκφυλιστικών διαταραχών, ιδιαίτερα καρδιαγγειακών παθήσεων και ορισμένων τύπων καρκίνου [1,2]. Οι επιδράσεις που προάγουν την υγεία των φυτικών τροφών έχουν αποδοθεί στην περιεκτικότητά τους σε δευτερογενείς μεταβολίτες. Αυτά τα φυτοχημικά, με τις βιολογικές τους δραστηριότητες, διαθέτουν διαφορετικούς μοριακούς και βιοχημικούς στόχους τόσο σε υγιή όσο και σε νοσούντα κύτταρα. Οι αντιοξειδωτικές, αντιφλεγμονώδεις, αντιμικροβιακές, προ/αντι-αποπτωτικές και αγγειοδιασταλτικές δραστηριότητες είναι μερικές μόνο από τις ιδιότητες των φυτικών φυσικών προϊόντων που είναι υπεύθυνες για τις αντικαρκινικές, καρδιο- και νευροπροστατευτικές τους επιδράσεις [3].

Οι φυτικοί ιστοί και, κατά συνέπεια, οι φυτικές τροφές περιέχουν εκατοντάδες βιοενεργούς δευτερογενείς μεταβολίτες, συμπεριλαμβανομένων των φαινυλοπροπανοειδών, των ισοπρενειδών και των αλκαλοειδών [4]. Μεταξύ αυτών, τα φαινυλοπροπανοειδή έχουν ερευνηθεί ιδιαίτερα τις δύο τελευταίες δεκαετίες, για να εξακριβωθούν τα οφέλη για την υγεία που αποδίδονται σε δίαιτες πλούσιες σε αυτούς τους μεταβολίτες. Μόνο τα φυτά, συμπεριλαμβανομένων των φυκών και ορισμένων μικροοργανισμών, είναι σε θέση να συνθέσουν φαινυλοπροπανοειδή από τα ελεύθερα αρωματικά αμινοξέα φαινυλαλανίνη ή τυροσίνη. Το βασικό ένζυμο στη βιοσύνθεσή τους είναι η λυάση της αμμωνίας φαινυλαλανίνης, υπεύθυνη για την απαμίνωση του Phe, και, ως εκ τούτου, σε αντίθεση με τα αλκαλοειδή, τα φαινυλοπροπανοειδή είναι τριμερή προϊόντα που περιέχουν C, H και O. Υδροξυβενζοϊκά, υδροξυκινναμικά, κουμαρίνες, λιγνίνες, και οι πολυφαινόλες είναι οι κύριες ομάδες φαινυλοπροπανοειδών.

Ως εκ τούτου, ο όρος πολυφαινόλες δεν είναι συνώνυμος των φαινυλοπροπανοειδών, αλλά αναφέρεται σε μια τεράστια ομάδα παραγώγων φαινυλαλανίνης, που χωρίζονται με τη σειρά τους σε φλαβονοειδή, στιλβένια (συμπεριλαμβανομένης της ρεσβερατρόλης) και προανθοκυανιδίνες (ή συμπυκνωμένες τανίνες) [5]. Η βασική χημική δομή των φλαβονοειδών είναι ο πυρήνας φλαβάνης, ένας σκελετός που αποτελείται από 15 άτομα άνθρακα διατεταγμένα σε τρεις δακτυλίους (C6–C3–C6): δύο αρωματικούς δακτυλίους (Α και Β) που συνδέονται με έναν ετεροκυκλικό δακτύλιο τριών ατόμων άνθρακα, ένα οξυγόνο -που περιέχει δακτύλιο πυρανίου (C). Οι κύριες κατηγορίες φλαβονοειδών (φλαβονόλες, φλαβανόλες, φλαβόνες, φλαβανόνες, ισοφλαβόνες και ανθοκυανιδίνες) διαφέρουν ως προς το επίπεδο οξείδωσης και κορεσμού του δακτυλίου C, ενώ μεμονωμένες ενώσεις σε μια κατηγορία ποικίλλουν ως προς το σχέδιο υποκατάστασης των δακτυλίων Α και Β. Φιγούρα 1).

Οι φλαβονόλες περιλαμβάνουν κυρίως αγλυκόνες καμπφερόλης, κερσετίνης και μυρικετίνης (που δεν συνδέονται με υδατάνθρακες), ενώ οι φλαβανόλες (ή φλαβονόλες) παρέχουν επιμερή κατεχίνης [( συν )-κατεχίνη και (−)-επικατεχίνη], το μονομερές μονάδες βιοσύνθεσης προανθοκυανιδίνης. Οι φλαβανόνες είναι χαρακτηριστικές των εσπεριδοειδών (γένος Citrus), που αντιπροσωπεύονται κυρίως από τις αγλυκόνες εσπερετίνη και ναριγγενίνη, ενώ η απιγενίνη και η λουτεολίνη είναι ευρέως διάχυτες φλαβόνες. Οι ισοφλαβόνες, μια ομάδα φυτοοιστρογόνων που περιλαμβάνει τη γενιστεΐνη σόγιας και τη δαϊδζεΐνη, είναι σημαντικά συστατικά της οικογένειας Fabaceae, με τον δακτύλιο Β στη θέση 3 αντί για 2. Οι ανθοκυανιδίνες είναι οι πιο άφθονες χρωστικές στους ιστούς του ποδιού του φυτού. Τα συζευγμένα τους παράγωγα, οι ανθοκυανίνες, που συνδέονται κυρίως με σάκχαρα (γλυκόνες), υδροξυκινναμικά ή οργανικά οξέα, είναι υδατοδιαλυτές χρωστικές ουσίες που προσδίδουν μπλε, σκούρο μπλε, βιολετί, κόκκινες και μοβ αποχρώσεις σε λουλούδια, φρούτα και άλλα φυτικά όργανα. Οι ανθοκυανίνες βασίζονται δομικά σε έξι αγλυκόνες/ανθοκυανιδίνες ––μαλβιδίνη, κυανιδίνη, δελφινιδίνη, πεονιδίνη, πελαργονιδίνη και πετούνιδίνη–– οι οποίες διαφοροποιούνται με βάση τον αριθμό και τη θέση των υδροξυλομάδων και τον βαθμό μεθυλίωσης [6].

Ο καρκίνος της στοματικής κοιλότητας είναι μια από τις πιο κοινές και θανατηφόρες κακοήθειες κεφαλής και τραχήλου. Η συνολική επίπτωση επιτρέπει να θεωρηθούν αυτές οι ασθένειες την έκτη πιο κοινή μορφή καρκίνου παγκοσμίως, με υψηλό κίνδυνο υποτροπής (20 τοις εκατό -30 τοις εκατό ) και ποσοστό πενταετούς επιβίωσης μικρότερο από 50 τοις εκατό [7,8]. Οι περιφερειακές λεμφαδένες μεταστάσεις και η τοπική-περιοχική υποτροπή είναι οι κύριοι παράγοντες που ευθύνονται για το χαμηλό ποσοστό επιβίωσης των ασθενών [7,8]. Ακόμα κι αν οι καρκίνοι της κεφαλής και του τραχήλου αναπτύσσονται γενικά στον λάρυγγα και τον φάρυγγα, είναι ενδοστοματικοί στο 48% περίπου των περιπτώσεων, με κυρίαρχη εντόπιση στην κοιλιακή/πλάγια γλωσσική περιοχή ή στο έδαφος του στόματος. Λιγότερο συχνά, μπορεί να προσβάλλουν άλλες στοματικές δομές (ούλα και κυψελιδική κορυφογραμμή, στοματικό βλεννογόνο, επιχειλικό βλεννογόνο και σκληρή υπερώα). Περισσότερο από το 90 τοις εκατό αυτών των καρκίνων ταξινομούνται ιστολογικά ως ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα του στόματος (OSCC) [7,8].

Η καρκινογένεση του στόματος είναι μια εξαιρετικά περίπλοκη, πολυπαραγοντική διαδικασία. Οι σημαντικότεροι παράγοντες κινδύνου που συμβάλλουν στην αιτιολογία του καρκίνου του στόματος στις δυτικές χώρες είναι το κάπνισμα και η κατανάλωση αλκοόλ [9]. Αν και το ποτό και το κάπνισμα είναι ανεξάρτητοι παράγοντες κινδύνου, έχουν συνεργιστική επίδραση, αυξάνοντας τον κίνδυνο μαζί [9]. Ένας άλλος σχετικός προδιαθεσικός παράγοντας περιλαμβάνει την παρουσία προκακοήθων βλαβών που σχετίζονται με διαφορετικούς βαθμούς επιθηλιακής δυσπλασίας [10]. Η λευκοπλακία, η πολλαπλασιαστική λευκοπλακία, η ερυθροπλακία, η ερυθρολευκοπλακία, η στοματική υποβλεννογόνος ίνωση και ο ομαλός λειχήνας εμφανίζουν, σε διαφορετικό βαθμό, μια ορισμένη τάση για μετασχηματισμό ιστού σε OSCC. Επιπλέον, οι ιογενείς λοιμώξεις και η γενετική μπορεί να συμβάλλουν περαιτέρω στην καρκινογένεση [10]. Συγκεκριμένα, η λοίμωξη από τον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων (HPV), που σχετίζεται κυρίως με τον τύπο 16, έχει πρόσφατα προταθεί ότι παίζει ρόλο στην ανάπτυξη καρκίνου του στόματος [11-13]. Τέλος, τα άτομα που φέρουν το ταχέως μεταβολιζόμενο αλληλόμορφο αλκοολική αφυδρογονάση τύπου 3 (ADH3) μπορεί να είναι ιδιαίτερα ευάλωτα στην επίδραση της χρόνιας κατανάλωσης αλκοόλ και θα μπορούσαν να διατρέχουν αυξημένο κίνδυνο να αναπτύξουν καρκίνο του στόματος [9,10]

2. Χημειοπρόληψη του καρκίνου του στόματος και προκλινικά στοιχεία

Ο μετασχηματισμός ενός φυσιολογικού κυττάρου σε καρκινικό κύτταρο συμβαίνει μέσω τριών διακριτών φάσεων: έναρξης, προώθησης και εξέλιξης. Η έναρξη του καρκίνου οφείλεται στην έκθεση των φυσιολογικών κυττάρων σε καρκινογόνους και μεταλλαξιογόνους παράγοντες. Τα εκκινημένα κύτταρα αλλοιώνονται μη αναστρέψιμα και διατρέχουν υψηλότερο κίνδυνο νεοπλασματικού μετασχηματισμού. Ωστόσο, η έναρξη από μόνη της δεν είναι επαρκής για την ογκογένεση. Στη φάση της προαγωγής, οι προαγωγείς του καρκίνου μετατρέπουν τα εκκινημένα κύτταρα σε προνεοπλασματικά κύτταρα. Η εξέλιξη περιλαμβάνει μια σταδιακή εξέλιξη των προνεοπλασματικών κυττάρων σε νεοπλασματικά κύτταρα με υψηλότερο βαθμό κακοήθειας. Στη συνέχεια, η ογκική μάζα αποκτά ένα επιθετικό χαρακτηριστικό, όπως εισβολή και μετάσταση. Γενικά, η χημειοπρόληψη συνίσταται στη χρήση χημικών ουσιών για την αναστροφή, την καταστολή ή την πρόληψη του μετασχηματισμού προκακοήθων κυττάρων σε κακοήθη γονότυπο/φαινότυπο. Ως εκ τούτου, οι χημειοπροληπτικοί παράγοντες ταξινομούνται σε δύο κατηγορίες: 1. οι παράγοντες αποκλεισμού εμποδίζουν τα καρκινογόνα να φτάσουν και να αντιδράσουν με κρίσιμες κυτταρικές θέσεις στόχους, δηλαδή εμποδίζουν τη μεταβολική ενεργοποίηση των καρκινογόνων και διεγείρουν την αποτοξίνωση τους [14]. 2. Οι κατασταλτικοί παράγοντες μπορεί να επηρεάσουν τον νεοπλασματικό μετασχηματισμό στα κύτταρα-στόχους, τόσο στα πρώιμα όσο και στα όψιμα στάδια της καρκινογένεσης [14].

Μέχρι στιγμής, η δυνατότητα των φλαβονοειδών στη στοματική υγεία και ως χημειοπροληπτικοί παράγοντες για τον καρκίνο έχει αποδειχθεί σε πολλές προκλινικές μελέτες [15,16]. Πράγματι, όσον αφορά τον καρκίνο του στόματος, πολλά φλαβονοειδή έχουν διερευνηθεί in vitro και in vivo. Δύο ισοφλαβόνες, η γενιστεΐνη και η βιοχανίνη Α, μείωσαν την κυτταρική ανάπτυξη των κυτταρικών σειρών OSCC με IC50 50 μM και ανέστειλαν τη φωσφορυλίωση της ERK (εξωκυτταρικής κινάσης που ρυθμίζεται από το σήμα) και της Akt, μιας ενεργοποιημένης από μιτογόνο πρωτεϊνικής κινάσης (MAPK) και μιας σερίνης/ Η πρωτεϊνική κινάση της θρεονίνης, αντίστοιχα, εμπλέκεται στον πολλαπλασιασμό του καρκίνου του στόματος [17]. Η φλαβόνη βαϊκελαΐνη προκάλεσε διακοπή της φάσης G1 σε καρκινικά κύτταρα του στόματος ενισχύοντας την αποδόμηση της CDK4 (εξαρτώμενη από κυκλίνη κινάση) και της κυκλίνης D1 και ενεργοποιώντας τον AhR (υδρογονανθρακικό υποδοχέα αρυλίου) [18]. Ομοίως, η κερσετίνη (μια φλαβονόλη) ανέστειλε τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων OSCC τόσο μέσω της διακοπής της φάσης G1 όσο και της απόπτωσης που προκαλείται από τα μιτοχόνδρια, εκτός από τη μείωση της κυτταρικής μετανάστευσης και εισβολής [19]. Μια εξαρτώμενη από το p{15}αποπτωτικό μονοπάτι που προκαλείται από τη βιτεξίνη (μια φλαβόνη) καταδείχθηκε επίσης σε καρκινικά κύτταρα του στόματος [20]. Σε 7, πειραματική στοματική καρκινογένεση που προκλήθηκε από12-διμεθυλβενζ(α)ανθρακένιο (DMBA) σε συριακά χάμστερ, η χορήγηση της φλαβόνης απιγενίνης απέτρεψε τον σχηματισμό στοματικών όγκων, μειώνοντας το οξειδωτικό στρες και ρυθμίζοντας την αποτοξίνωση φάσης Ι και φάσης ΙΙ καταρράκτης υπεύθυνος για τον ξενοβιοτικό βιομετασχηματισμό [21,22].

Ωστόσο, το EGCG και άλλες φλαβανόλες από την Camellia sinensis L. είναι τα φλαβονοειδή που έχουν διερευνηθεί περισσότερο στη χημειοπρόληψη του καρκίνου του στόματος. Πρόσφατα, εξαιρετικές ανασκοπήσεις ανέφεραν την κυτταροτοξική δράση αυτών των ενώσεων σε διαφορετικές κυτταρικές σειρές OSCC και σε μοντέλα OSCC που προκαλούνται από χημικά και ξενομοσχεύματα σε τρωκτικά, διερευνώντας επίσης τους μοριακούς μηχανισμούς που εμπλέκονται στη χημειοπρόληψη [23-25]. Ειδικότερα, οι in vitro επιδράσεις του EGCG στα καρκινικά κύτταρα του στόματος περιλάμβαναν τρία κύρια στάδια: (i) αναστολή του κυτταρικού πολλαπλασιασμού μέσω επαγωγής απόπτωσης και διακοπής του κυτταρικού κύκλου. (ii) τροποποίηση παραγόντων μεταγραφής, συγκεκριμένα πυρηνικός παράγοντας-κΒ (NF-κB) και πρωτεΐνη ενεργοποιητής (ΑΡ)-1. (iii) και μείωση της κυτταρικής μετανάστευσης και εισβολής με μείωση της παραγωγής μεταλλοπρωτεϊνασών μήτρας. Σε διαφορετικά ζωικά μοντέλα καρκινογένεσης από το στόμα, οι πολυφαινόλες του τσαγιού μείωσαν το οξειδωτικό στρες και τα ένζυμα φάσης Ι ενώ επάγουν τις ενζυμικές δραστηριότητες φάσης II [23,24]. Με βάση προκλινικά στοιχεία, έχουν διεξαχθεί πρόσφατα κλινικές δοκιμές, επομένως, στην επόμενη ενότητα, θα ασχοληθούμε εν συντομία με ανθρώπινες μελέτες σχετικά με τις χημειοπροληπτικές δυνατότητες των φλαβονοειδών, εστιάζοντας κυρίως στο EGCG και το πράσινο τσάι.

3. Επιδημιολογικές Μελέτες

Μία από τις πρώτες μελέτες που συσχετίζουν τον αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του στόματος με χαμηλή πρόσληψη φρούτων και λαχανικών –πλούσων σε φλαβονοειδή–– δημοσιεύθηκε πριν από τρεις δεκαετίες. Η αυξημένη κατανάλωση φρούτων και λαχανικών αποδείχθηκε ότι είναι προστατευτική έναντι του καρκίνου του στόματος, όταν ελέγχεται στατιστικά για δημογραφικά χαρακτηριστικά, χρήση καπνού και αλκοόλ, σχετικό βάρος και πρόσληψη άλλων τροφίμων [26]. Πιο πρόσφατα, η υψηλή πρόσληψη φρούτων και λαχανικών συσχετίστηκε με μειωμένο κίνδυνο καρκίνου κεφαλής και τραχήλου, σε μια συγκεντρωτική ανάλυση από την κοινοπραξία INHANCE (International Head and Neck Cancer Epidemiology) που συνέλεξε δεδομένα από 22 μελέτες περιπτώσεων ελέγχου με 14.520 περιπτώσεις και 22.737 ελέγχους. . Είναι ενδιαφέρον ότι η πρόσληψη κόκκινου και επεξεργασμένου κρέατος συσχετίστηκε θετικά με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου κεφαλής και τραχήλου [27].

Η κατανάλωση φλαβονοειδών έχει αντιστρόφως συσχετισθεί με τον κίνδυνο καρκίνου του στόματος σε δύο μελέτες περιπτώσεων ελέγχου που πραγματοποιήθηκαν στην Ουρουγουάη και την Ιταλία, οι οποίες ανέφεραν σχετικούς κινδύνους (RRs) για το υψηλότερο επίπεδο πρόσληψης φλαβονοειδών των 0.8 και { {3}}.56, αντίστοιχα [28,29]. Συγκεκριμένα, στην ιταλική μελέτη, βρέθηκε σημαντική αντίστροφη συσχέτιση για τις φλαβανόνες, τις φλαβονόλες και τα συνολικά φλαβονοειδή, με αναλογίες πιθανοτήτων (ORs) για το υψηλότερο έναντι του χαμηλότερου πεμπτημόριο πρόσληψης 0.51, {{9} }.62 και 0.56, αντίστοιχα. Δεν προέκυψε σημαντική συσχέτιση για άλλες κατηγορίες φλαβονοειδών, π.χ. ισοφλαβόνες (OR, 0.90), ανθοκυανιδίνες (OR, 0.86), φλαβάνη{{ 17}}όλες (OR, 0.84) και φλαβόνες (OR, 0.75) [29].

Η συσχέτιση μεταξύ της κατανάλωσης πράσινου τσαγιού και του κινδύνου καρκίνου του στόματος μελετήθηκε στην Ιαπωνική Συνεργατική Μελέτη Κοόρτης. Συνολικά 20,550 άνδρες και 29.671 γυναίκες ηλικίας 40–79 ετών χωρίς ιστορικό καρκίνου του στόματος συμπεριλήφθηκαν κατά την έναρξη σε αυτήν την προοπτική μελέτη. Κατά τη διάρκεια μιας μέσης περιόδου παρακολούθησης 10,3 ετών, εντοπίστηκαν 37 περιπτώσεις καρκίνου του στόματος. Για τις γυναίκες, οι αναλογίες κινδύνου (HRs) του καρκίνου του στόματος για κατανάλωση πράσινου τσαγιού 1–2, 3–4 ή 5 φλιτζάνια/ημέρα ήταν 0,51, 0,60 και 0,31, αντίστοιχα, σε σύγκριση με 1 φλιτζάνι/ημέρα. Για τους άνδρες, η αντίστροφη συσχέτιση ήταν ελαφρώς χαμηλότερη και, σε κάθε περίπτωση, δεν έφτασε σε στατιστική σημασία λόγω του σχετικά χαμηλού αριθμού περιπτώσεων καρκίνου που περιλαμβάνονται στην ανάλυση [30]. Η κατανάλωση τσαγιού δεν συσχετίστηκε με τον καρκίνο του στόματος στη Μελέτη Πρόληψης Καρκίνου II, μια μεγάλη προοπτική μελέτη κοόρτης στις ΗΠΑ που ξεκίνησε το 1982, στην οποία συμμετείχαν 968.432 άνδρες και γυναίκες, χωρίς καρκίνο κατά την εγγραφή [31].

Ωστόσο, σε αυτή τη μελέτη, ο τύπος του τσαγιού που καταναλώθηκε - μαύρο ή πράσινο - δεν προσδιορίστηκε. Ενώ οι κατεχίνες βρίσκονται στο πράσινο τσάι, τα κύρια συστατικά του μαύρου τσαγιού είναι οι θεαφλαβίνες και οι θεαρουμπιγίνες, οι οποίες σχηματίζονται από την οξείδωση και τον πολυμερισμό των κατεχινών κατά τη διάρκεια της ζύμωσης και, πιθανώς, έχουν διαφορετικές βιολογικές δραστηριότητες [32]. Αντίθετα, στη γαλλική μελέτη ICARE (Investigation of Occupational and Environmental Causes of Respiratory Cancers), πραγματοποιήθηκε μια μεγάλη πολυκεντρική, βασισμένη στον πληθυσμό, μελέτη περιπτώσεων ελέγχου για καρκίνους του πνεύμονα και του ανώτερου αεροπεπτικού συστήματος από το 20{{ 8}}1 έως το 2007 σε 10 γαλλικές διοικητικές περιοχές, παρατηρήθηκε μια αντίστροφη συσχέτιση μεταξύ του καρκίνου της στοματικής κοιλότητας και της πρόσληψης τσαγιού ή/και καφέ. Για το υψηλότερο τεταρτημόριο αποκλειστικής κατανάλωσης τσαγιού ή καφέ, τα OR ήταν 0,39 και 0,60, αντίστοιχα, με συνεργιστική επίδραση όταν και τα δύο καταναλώθηκαν από το ίδιο άτομο. Δεν αναφέρθηκε διαφορά στον κίνδυνο μεταξύ ανδρών και γυναικών [33]. Τέλος, σύμφωνα με μια μετα-ανάλυση από το Cochrane Collaboration 51 μελετών που περιλαμβάνουν περισσότερους από 1,6 εκατομμύρια συμμετέχοντες, οι αποδείξεις ότι η κατανάλωση πράσινου τσαγιού μπορεί να μειώσει τον κίνδυνο καρκίνου είναι αντικρουόμενες. Η κατανάλωση πράσινου τσαγιού παραμένει αναπόδεικτη στην πρόληψη του καρκίνου του στόματος, αλλά φαίνεται να είναι ασφαλής για μέτρια, τακτική και συνήθη χρήση [34].

4. Κλινικές Μελέτες

Από όσο γνωρίζουμε, οι κατεχίνες του τσαγιού είναι τα μόνα φλαβονοειδή που ερευνήθηκαν σε κλινικές μελέτες για τον καρκίνο του στόματος. Η πρώτη κλινική δοκιμή με χρήση πράσινου τσαγιού για τη θεραπεία μιας στοματικής προκακοήθους βλάβης ήταν μια διπλά τυφλή, ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο, τυχαιοποιημένη κλινική δοκιμή φάσης ΙΙ σε 59 ασθενείς με λευκοπλακία του στοματικού βλεννογόνου που λάμβαναν είτε 3 g/ημέρα μικτού προϊόντος τσαγιού από το στόμα. κάψουλες, σε τέσσερις διαιρεμένες δόσεις, συν 10 τοις εκατό ανάμεικτη αλοιφή τσαγιού σε γλυκερίνη τοπικά ή εικονικό φάρμακο συν τοπική γλυκερίνη. Η εφαρμογή του εκχυλίσματος τσαγιού απευθείας στις βλάβες μπορεί να βελτιώσει τις τοπικές συγκεντρώσεις των ενεργών συστατικών.

Το ανάμεικτο τσάι αποτελούνταν από ένα αποξηραμένο μείγμα υδατοδιαλυτού εκχυλίσματος πράσινου τσαγιού, πολυφαινολών πράσινου τσαγιού και χρωστικών τσαγιού (θεαφλαβίνες και θεαρουμπίγίνες). Μετά από έξι μήνες παρέμβασης, το μέγεθος των στοματικών βλαβών μειώθηκε στο 37,9 τοις εκατό και αυξήθηκε στο 3,4 τοις εκατό από τους 29 ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με τσάι, ενώ μειώθηκαν στο 10,0 τοις εκατό και αυξήθηκαν στο 6,7 τοις εκατό από τα 30 άτομα στην ομάδα εικονικού φαρμάκου [35]. Η χορήγηση εκχυλίσματος πράσινου τσαγιού (2000–2500 mg/ημέρα) σε καπνιστές για τέσσερις εβδομάδες μείωσε τη βλάβη του DNA στα κερατινοκύτταρα του στόματος. Επιπλέον, η ανάπτυξη των κυττάρων αναστέλλεται επίσης, το ποσοστό των κυττάρων στη φάση S μειώθηκε, τα κύτταρα συσσωρεύτηκαν στη φάση G1, το περιεχόμενο DNA έγινε πιο διπλοειδές και λιγότερο ανευπλοειδές και οι αποπτωτικοί δείκτες ρυθμίστηκαν προς τα πάνω [36]. Μια άλλη τυχαιοποιημένη, ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο, δοκιμή φάσης ΙΙ αξιολόγησε τη χημειοπροληπτική δυνατότητα του εκχυλίσματος πράσινου τσαγιού στον καρκίνο του στόματος.

Τα αποτελέσματα της χορήγησης καψουλών πράσινου τσαγιού που περιέχουν 13,2 τοις εκατό EGCG (26,9 τοις εκατό κατεχίνες) εξετάστηκαν σε 41 ασθενείς με μία ή περισσότερες ιστολογικά επιβεβαιωμένες, δισδιάστατα μετρήσιμες στοματικές προκακοήθεις βλάβες με υψηλό κίνδυνο κακοήθους μετασχηματισμού. Οι ασθενείς τυχαιοποιήθηκαν για να λάβουν εκχύλισμα πράσινου τσαγιού σε 1.0 g/m 2 (n=10), 0.75 g/m 2 (n=9), { {13}}.5 g/m 2 (n=11) ή εικονικό φάρμακο, τρεις φορές την ημέρα για 12 εβδομάδες. Η αποτελεσματικότητα προσδιορίστηκε από την εξαφάνιση όλων των βλαβών (πλήρης απόκριση) ή 5{20}} τοις εκατό ή μεγαλύτερη μείωση στο άθροισμα των διαμέτρων όλων των μετρούμενων βλαβών (μερική απόκριση). Οι συγγραφείς διαπίστωσαν ότι τα δύο σκέλη υψηλής δόσης (0,75 και 1,0 g/m2 ) αποκάλυψαν υψηλότερα ποσοστά κλινικής ανταπόκρισης (58,8 τοις εκατό ) από 0,5 g/m2 (36,4 τοις εκατό ) ή εικονικό φάρμακο (18,2 τοις εκατό ), ακόμη και εάν τα ποσοστά δεν έφτασαν τη στατιστική σημασία, υποδηλώνοντας μια επίδραση δόσης-απόκρισης εκχυλίσματος πράσινου τσαγιού. Το τελευταίο ήταν καλά ανεκτή, με μόνο αϋπνία (με υψηλότερες δόσεις, πιθανώς λόγω της καφεΐνης που υπάρχει στο εκχύλισμα), διάρροια και πόνο στο στόμα/λαιμό. Σε μια μέση παρακολούθηση 27,5 μηνών, δεν υπήρχε διαφορά στην επιβίωση χωρίς καρκίνο του στόματος μεταξύ του σκέλους του εκχυλίσματος πράσινου τσαγιού και του σκέλους του εικονικού φαρμάκου [37].

Τέλος, σε ασθενείς με καρκίνο του στοματικού πεδίου, με υψηλό κίνδυνο εμφάνισης επαναλαμβανόμενων στοματικών προκαρκινικών και καρκινικών αλλοιώσεων, η εφαρμογή του EGCG σε μορφή στοματικού διαλύματος για επτά ημέρες μείωσε τα επίπεδα έκφρασης ορισμένων βιοδεικτών καρκινογένεσης του στόματος, αν και όχι στατιστικά σημαντικά. Αξίζει να σημειωθεί ότι τα ανιχνεύσιμα επίπεδα EGCG μετρήθηκαν στο σάλιο, αλλά όχι στο πλάσμα, αποδεικνύοντας έτσι την τοπική βιοδιαθεσιμότητα αυτής της κατεχίνης στον στοματικό βλεννογόνο χωρίς σημαντική συστηματική απορρόφηση [38].

5. Από του στόματος Βιοδιαθεσιμότητα Φλαβονοειδών

Μελετώντας τη βιολογική δραστηριότητα των φυτοχημικών στον άνθρωπο, η γνώση της φαρμακοκινητικής και της βιοδιαθεσιμότητάς τους είναι ζωτικής σημασίας. Για τα βιοενεργά συστατικά των τροφίμων, η βιοδιαθεσιμότητα από το στόμα ορίζεται ως το κλάσμα των ουσιών, που λαμβάνεται από καταποθείσες τροφές, που φθάνουν στη συστηματική κυκλοφορία για περαιτέρω διανομή στους ιστούς και τα όργανα-στόχους, όπου στη συνέχεια ασκούν τις βιολογικές τους δραστηριότητες. Τα φλαβονοειδή αναγνωρίζονται ως ξενοβιοτικά από τον ανθρώπινο οργανισμό. Κατά συνέπεια, για να παράγουν ευεργετικά αποτελέσματα μετά την κατάποση, πρέπει να απορροφηθούν και να μεταβολιστούν προτού παραδοθούν στους ιστούς και τα όργανα-στόχους από την κυκλοφορία του αίματος [32,39].

Αν και οι βιολογικές δραστηριότητες των φλαβονοειδών έχουν αποδειχθεί σε πολλά προκλινικά μοντέλα, οι αποτελεσματικές συγκεντρώσεις in vitro (υπό- έως χαμηλά μικρομοριακά επίπεδα) είναι τουλάχιστον μία τάξη μεγέθους υψηλότερες από αυτές που μετρώνται συνήθως στο ανθρώπινο πλάσμα (δεκάδες έως εκατοντάδες νανομοριακά). 40]. Για να ανέλθουν σε αποτελεσματικές συγκεντρώσεις στα σημεία δράσης τους, τα φλαβονοειδή που λαμβάνονται πρέπει να ξεπεράσουν έναν αριθμό φραγμών που αντιπροσωπεύονται από τις πολύπλοκες δομές του γαστρεντερικού σωλήνα [41]. Γενικά, η βιοδιαθεσιμότητα των διαιτητικών φλαβονοειδών δεν περιορίζεται μόνο από τις φυσικοχημικές ιδιότητές τους, αλλά και λόγω της ενεργού εκροής από πρωτεΐνες που σχετίζονται με αντοχή σε πολλαπλά φάρμακα ή εκτεταμένου βιομετασχηματισμού από ένζυμα φάσης Ι και φάσης ΙΙ, συμπεριλαμβανομένου του ηπατικού μεταβολισμού πρώτης διόδου και του εντέρου. μικροχλωρίδα [32].

Ειδικότερα, οι διαιτητικές μορφές των φλαβονοειδών, οι φλαβονοειδείς γλυκοσίδες, θεωρούνται ανενεργές. Επομένως, πρέπει πρώτα να υδρολυθούν στις δραστικές τους αγλυκόνες σε εντερικό επίπεδο. Σημαντικά, έχει αναφερθεί υδρόλυση γλυκοσιδών κερκετίνης και γενιστεΐνης στις αγλυκόνες τους στην ανθρώπινη στοματική κοιλότητα, δηλαδή στο σάλιο και στα επιθηλιακά κύτταρα, λόγω τόσο των βακτηριακών όσο και των επιθηλιακών -γλυκοσιδασών. Είναι ενδιαφέρον ότι η υδρόλυση περιοριζόταν στα συζεύγματα γλυκόζης: άλλοι γλυκοσίδες είτε υδρολύονταν πολύ αργά είτε ήταν ανθεκτικοί στην υδρόλυση του σάλιου. Παρατηρήθηκε έτσι μια αξιοσημείωτη μεταβλητότητα μεταξύ των ατόμων στον ρυθμό υδρόλυσης. Η κυτταροτοξικότητα της κερκετίνης και της γενιστεΐνης αποδείχθηκε επίσης in vitro σε καρκινικά κύτταρα του στόματος, υποδηλώνοντας έτσι ότι οι αγλυκόνες που σχηματίζονται στη στοματική κοιλότητα μπορεί να ασκούν αντικαρκινική δράση [42].

Πιο πρόσφατα, έχει περιγραφεί η ενδοστοματική βιοενεργοποίηση των ανθοκυανινών μέσω μικροβιακών, σιελογόνων και επιθηλιακών -γλυκοσιδασών, με υψηλή μεταβλητότητα μεταξύ των ατόμων. Οι συγγραφείς ανέφεραν επίσης ότι, συγκρίσιμα με το λεπτό έντερο, τα ένζυμα υδρολυτικής φάσης ΙΙ και μεταφοράς εκροής που είναι απαραίτητα για την τοπική εντερική ανακύκλωση είναι παρόντα και λειτουργικά στον ανθρώπινο στοματικό βλεννογόνο [43]. Γλυκουρονιδωμένα συζεύγματα ανθοκυανίνης φάσης II ανιχνεύθηκαν επίσης στο σάλιο [43].

6. Μελλοντικές προοπτικές: νανοσωματίδια και στοματική διαβλεννογόνια χορήγηση για τη βελτίωση της συστημικής και τοπικής βιοδιαθεσιμότητας

Η κακή βιοδιαθεσιμότητα είναι το κύριο μειονέκτημα που σχετίζεται με την αποτυχία πολλών φυσικών χημειοπροληπτικών παραγόντων σε κλινικά περιβάλλοντα. Πράγματι, παρά τα πολλά υποσχόμενα δεδομένα που ελήφθησαν από τη χημειοπρόληψη από βιοενεργά συστατικά φυτικής τροφής σε προκλινικές μελέτες, η επίπτωση αυτών των αποτελεσμάτων στους ανθρώπους έδειξε περιορισμένη επιτυχία, πιθανώς λόγω της ανεπαρκούς συστηματικής χορήγησης και της χαμηλής βιοδιαθεσιμότητας αυτών των πολλά υποσχόμενων χημειοπροληπτικών παραγόντων. Μέχρι σήμερα, αναπτύχθηκε μια νέα προσέγγιση βασισμένη στη χρήση της νανοτεχνολογίας για τη βελτίωση του αποτελέσματος της χημειοπρόληψης του καρκίνου και εισήχθη μια νέα έννοια που ονομάζεται «νανοχημειοπρόληψη», αναφερόμενη στην ενθυλάκωση χημειοπροληπτικών παραγόντων σε βιοσυμβατά νανοσωματίδια [44,45].

Το ενθυλακωμένο EGCG σε νανοσωματίδια πολυγαλακτικού οξέος-πολυαιθυλενογλυκόλης διατήρησε τη βιολογική του δραστηριότητα με υπερ 10-πλάσιο πλεονέκτημα δόσης. In vitro, το νανο-EGCG ήταν πιο κυτταροτοξικό για τις κυτταρικές σειρές PC3 του ανθρώπινου καρκινώματος του προστάτη, με αποτέλεσμα την ενισχυμένη κυτταρική απόπτωση και την αναστολή της αγγειογένεσης από το μη ενθυλακωμένο EGCG. Μια υψηλότερη αντικαρκινική δράση του νανοσκευάσματος καταδείχθηκε επίσης σε ξενομοσχευμένα γυμνά αθυμικά ποντίκια [46]. Η χημειοπροληπτική αποτελεσματικότητα των νανοσωματιδίων φορτισμένων με ναριγγενίνη περιγράφηκε στην πειραματική στοματική καρκινογένεση που προκλήθηκε από DMBA σε συριακά χάμστερ. Η από του στόματος χορήγηση νανοσωματιδίων φορτωμένων με ναριγγενίνη απέτρεψε πλήρως τον σχηματισμό όγκου σε σύγκριση με την ελεύθερη ναρινγενίνη και μείωσε σημαντικά τον βαθμό των ιστολογικών βλαβών. Επιπλέον, στον στοματικό βλεννογόνο των ζώων που εκτέθηκαν σε DMBA, τα νανοσωματίδια μείωσαν την έκφραση του PCNA (πολλαπλασιαζόμενο πυρηνικό αντιγόνο κυττάρων) και του p53 και άσκησαν υψηλότερες αντιλιπιδικές υπεροξειδωτική και αντιοξειδωτική δράση, σε σύγκριση με την ελεύθερη ναριγγενίνη [47].

Για να επωφεληθείτε από τα φλαβονοειδή υγιή αποτελέσματα, η τοπική έκθεση της στοματικής κοιλότητας σε αυτές τις ενώσεις φαίνεται να είναι καθοριστική. Με αυτούς τους όρους, οι τεχνολογίες στοματικής και υπογλώσσιας χορήγησης φαρμάκων αντιπροσωπεύουν μια άλλη πολλά υποσχόμενη και προκλητική προσέγγιση. Η διαβλεννογονική στοματική οδός είναι μια μέθοδος συστηματικής χορήγησης φαρμάκου που προσφέρει αρκετά πλεονεκτήματα έναντι της γαστρεντερικής και της παρεντερικής οδού. Ο στοματικός βλεννογόνος αποτελείται από τρία τμήματα, από πάνω προς τα κάτω: (α) ένα εξώτατο στρώμα πολυστρωματοποιημένου πλακώδους επιθηλίου, με διαφορετικούς βαθμούς χερατίνης ανάλογα με τη στοματική περιοχή που εξετάζεται, για παράδειγμα ο βλεννογόνος της σκληρής υπερώας ή ο βλεννογόνος των ούλων είναι περισσότερο κερατινοποιημένος από τον στοματικό βλεννογόνο. η βασική επιθηλιακή στιβάδα τοποθετείται σε (β) μια βασική μεμβράνη, αποτελούμενη από κολλαγόνο, λαμινίνη και φιμπρονεκτίνη, που με τη σειρά της βρίσκεται απευθείας σε (γ) lamina propria ή υποβλεννογόνιο, ως το εσώτερο στρώμα, που αποτελείται από συνδετικό ιστό. Ως εκ τούτου, αντιπροσωπεύει έναν εξαιρετικά διαπερατό και αγγειοποιημένο ιστό που παρέχει μια ταχεία μεταφορά φαρμάκου στη συστηματική κυκλοφορία, αποφεύγοντας την αποικοδόμηση από τον ηπατικό μεταβολισμό πρώτης διόδου και την προ-συστημική αποβολή εντός του γαστρεντερικού σωλήνα. Επιπλέον, σε σύγκριση με τις ενδοφλέβιες και ενδομυϊκές χορηγήσεις, η διαβλεννογονική από του στόματος απορρόφηση του φαρμάκου είναι μη επεμβατική, πιο άνετη και αποδεκτή από τους ασθενείς.

Τα συστήματα παρειακής και υπογλώσσιας χορήγησης χρησιμοποιούν στοματικά διαλύματα, σπρέι αεροζόλ, τσίχλες, βιοσυγκολλητικά δισκία, τζελ και επιθέματα για την τοπική θεραπεία καταστάσεων όπως η ουλίτιδα, η στοματική καντιντίτιδα, οι στοματικές βλάβες, η τερηδόνα και η ξηροστομία [48,49]. Αν και πολλά φάρμακα έχουν διαμορφωθεί για διαβλεννογονική από του στόματος χορήγηση με σκοπό τη θεραπεία τόσο τοπικών όσο και συστηματικών παθήσεων, μόνο πολύ λίγες μελέτες έχουν διεξαχθεί για τα φλαβονοειδή και τον καρκίνο του στόματος [50,51]. Τοπική εφαρμογή σε επιλεγμένη περιοχή του βλεννογόνου (βλεννογόνος ούλων της οπίσθιας κάτω κάτω γνάθου) ενός βιοσυγκολλητικού τζελ πλούσιου σε ανθοκυανίνες, που περιέχει 10 τοις εκατό (w/w) μαύρο βατόμουρο, παρήγαγε ανιχνεύσιμα επίπεδα σάλιου και ιστού ανθοκυανινών μαύρου βατόμουρου σε υγιείς εθελοντές και επιβεβαίωσε ότι η γέλη -Τα χορηγούμενα φλαβονοειδή απελευθερώνονται εύκολα στο σιελογόνο περιβάλλον και διεισδύουν εύκολα στον στοματικό βλεννογόνο [52]. Ομοίως, σε υγιείς εθελοντές, η ενδοστοματική εφαρμογή της ίδιας γέλης αύξησε τα επίπεδα των ανθοκυανινών όχι μόνο στο σάλιο και τους στοματικούς ιστούς, αλλά και σε δείγματα πλάσματος [53]. Η γέλη μαύρου βατόμουρου εφαρμόστηκε τοπικά τέσσερις φορές την ημέρα για έξι εβδομάδες σε 17 ασθενείς με στοματική ενδοεπιθηλιακή νεοπλασία και αξιολογήθηκαν βιοψίες πριν και μετά τη θεραπεία. Επτά ασθενείς εμφάνισαν ιστοπαθολογική βελτίωση, έξι εμφάνισαν σταθερή νόσο και τέσσερις ενδείξεις εξέλιξης. Στη συνέχεια, οι συγγραφείς διερεύνησαν τη συσχέτιση μεταξύ της απώλειας ετεροζυγωτίας και της ιστολογικής τροποποίησης του ιστού, καθώς η απώλεια ετεροζυγωτίας σχετίζεται με την ανάπτυξη πολλών ανθρώπινων καρκίνων, συμπεριλαμβανομένου του OSCC.

Παρατηρήθηκε μείωση της απώλειας της ετεροζυγωτίας στους ογκοκατασταλτικούς γονιδιακούς τόπους: η μελέτη ανέφερε έτσι μια ασθενή συσχέτιση μεταξύ της μείωσης της απώλειας ετεροζυγωτίας και της βελτίωσης του βαθμού ιστοπαθολογίας [54]. Τέλος, οι ίδιοι συγγραφείς κατέδειξαν ότι, σε ασθενείς με στοματικές προκακοήθεις βλάβες, η τοπική εφαρμογή γέλης μούρων ρυθμίζει το προφίλ έκφρασης των στοματικών ενδοεπιθηλιακών νεοπλασματικών γονιδίων, καταστέλλοντας εκείνα που εμπλέκονται στην επεξεργασία RNA, την ανακύκλωση αυξητικού παράγοντα και την αναστολή της απόπτωσης. Η θεραπεία μείωσε επίσης την πρωτεΐνη COX του επιθηλίου (κυκλοοξυγενάση)-2, την αγγειακή πυκνότητα στους επιφανειακούς συνδετικούς ιστούς και τα γονίδια που σχετίζονται με τη διαφοροποίηση των κερατινοκυττάρων [55]. 7. Συμπεράσματα Στο τέλος αυτής της σύντομης έρευνας, μπορούμε να συνοψίσουμε ότι τα τρέχοντα στοιχεία για τη χημειοπρόληψη του καρκίνου του στόματος στον άνθρωπο από φλαβονοειδή είναι ακόμη αποσπασματικά και ασαφή, αλλά εντούτοις πολλά υποσχόμενα, όπως προτείνεται από επιδημιολογικές και προκλινικές μελέτες. Είναι αξιοσημείωτο ότι η αντικαρκινική δράση αυτών των φυτοχημικών έχει αναφερθεί εκτενώς. Ελπιδοφόρα αποτελέσματα έχουν καταγραφεί για το EGCG και τις ανθοκυανίνες από το πράσινο τσάι και τα μαύρα σμέουρα, αντίστοιχα, αν και εξακολουθούν να είναι ασυνεπή.

Απαιτούνται περαιτέρω μελέτες, οι οποίες θα πραγματοποιηθούν σύμφωνα με μια προσέγγιση βασισμένη σε στοιχεία. Συγκεκριμένα, απαιτούνται κλινικές δοκιμές φάσης ΙΙΙ με μεγάλο αριθμό ασθενών για να επιβεβαιωθεί η αποτελεσματικότητα των φλαβονοειδών στην πρόληψη του καρκίνου του στόματος, καθώς και μελέτες ικανές να αποσαφηνίσουν τους μηχανισμούς που εμπλέκονται στη χημειοπρόληψη. Σημαντικά, οι αναδυόμενες τεχνολογίες μπορούν να μεγιστοποιήσουν το χημειοπροληπτικό δυναμικό των φλαβονοειδών, όπως η λειτουργικοποίηση με νανοσωματίδια και η στοματοδιαβλεννογονική παροχή, ενισχύοντας την αποτελεσματικότητα αυτών των φυτοσυστατικών και βελτιώνοντας την τοπική και συστημική βιοδιαθεσιμότητά τους, το κύριο αδύναμο σημείο της διατροφικής θεραπείας. Σε προοπτική, το κύριο αποτέλεσμα αυτών των μελετών θα είναι η ολοένα και μεγαλύτερη κατανόηση της σχέσης αιτιότητας μεταξύ φυτοχημικών και πρόληψης ή/και θεραπείας του καρκίνου του στόματος, ελαχιστοποιώντας έτσι την αιτιότητα.

Πράγματι, τα οφέλη μπορεί να ενισχυθούν περαιτέρω από άλλους συγχυτικούς παράγοντες «προαγωγής της υγείας», όπως η σωματική δραστηριότητα και άλλοι τρόποι ζωής που σχετίζονται με συνθήκες ευεξίας. Τέλος, πρέπει να λάβουμε υπόψη ότι, ανάλογα με τις διατροφικές συνήθειες, εκτιθέμεθα καθημερινά σε εκατοντάδες βιοδραστικές φυτοχημικές ουσίες που υπάρχουν σε ολόκληρα τρόφιμα. Ως εκ τούτου, οι πρόσθετες και συνεργικές επιδράσεις όλων των συστατικών, που μπορούν να εντοπιστούν στα φρούτα και τα λαχανικά, είναι πιο ρεαλιστικά υπεύθυνες για τις ιδιότητες που προάγουν την υγεία που αποδίδονται σε αυτά τα τρόφιμα, ακόμα κι αν in vitro/in vivo μελέτες επικεντρώθηκαν κυρίως στις συγκεκριμένες βιολογικές δραστηριότητες μόνο ενός λίγοι φυτικοί μεταβολίτες.

για περισσότερες πληροφορίες:ali.ma@wecistanche.com