Βιοχημικές και ιστοπαθολογικές αποκρίσεις της Biomphalaria Alexandrina στο RIPEX (Ρυθμιστής Ανάπτυξης φυτών)Ⅰ

Αφηρημένη

Ιστορικό

Οι ρυθμιστές ανάπτυξης φυτών χρησιμοποιούνται ευρέως στη γεωργία για την αύξηση της ανάπτυξης και της ωρίμανσης των φυτών, αλλά θέτουν σε κίνδυνο το υδάτινο οικοσύστημα. Η τρέχουσα μελέτη αξιολόγησε την επίδραση της υποθανατηφόρου έκθεσης σε συγκεντρώσεις RIPEX 48 τοις εκατό EC (8 και 16 μL/L) στις παραμέτρους του οξειδωτικού στρες, τις ορμόνες του φύλου, τα ένζυμα ανοσοποιητικού δυναμικού, τους διαφορετικούς αριθμούς αιμοκυττάρων και την ιστοπαθολογία των πεπτικών αδένων και των ωοθηκών σε Σαλιγκάρια Biomphalaria alexandrina.

Κάντε κλικ στο cistanche herba για τεστοστερόνη

Αποτελέσματα

Η έκθεση RIPEX προκάλεσε συνολική αύξηση στις δραστηριότητες της υπεροξειδικής δισμουτάσης και της γλουταθειόνης-S-τρανσφεράσης στη Β. Αλεξανδρινή. Ωστόσο, η ακραία έκθεση RIPEX αναστέλλει τη δραστηριότητα SOD στα σαλιγκάρια. Η δραστηριότητα της μηλονοδιαλδεΰδης έδειξε αύξηση στο B. Alexandrina που εκτέθηκε και στις δύο συγκεντρώσεις μετά από όλες τις περιόδους έκθεσης. Το RIPEX προκάλεσε επίσης σημαντική αύξηση της τεστοστερόνης σε σαλιγκάρια που εκτέθηκαν σε 16 μL/L, ωστόσο, μείωσε τα επίπεδα ορμονών σε σαλιγκάρια που εκτέθηκαν σε 8 μL/L στις 7 ημέρες. Όσον αφορά την οιστραδιόλη, υπήρξε σημαντική αύξηση μετά από 3 ημέρες έκθεσης σε 16 μl/L και 7 ημέρες έκθεσης σε 8 μL/L. Η έκθεση στο RIPEX αύξησε επίσης τις δραστηριότητες των ενζύμων μυελοϋπεροξειδάσης και απαμινάσης αδενοσίνης στους πεπτικούς αδένες των σαλιγκαριών. Αύξησε τον συνολικό αριθμό αιμοκυττάρων των εκτεθειμένων σαλιγκαριών καθώς και τον αριθμό των κοκκιοκυττάρων. Οι πεπτικοί αδένες και οι ωοθηκοί των σαλιγκαριών εμφάνισαν παθολογικές αλλοιώσεις μετά από 7 ημέρες έκθεσης στο RIPEX.

συμπεράσματα

Αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν ότι το RIPEX είναι τοξικό για το B. Alexandrina και ότι αυτό το σαλιγκάρι μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως βιοδείκτης μόλυνσης του περιβάλλοντος με ρυθμιστές ανάπτυξης φυτών.

Λέξεις-κλειδιά

Biomphalaria alexandrina, RIPEX, Τεστοστερόνη, Οιστραδιόλη, Μυελοϋπεροξειδάση, Αδενοσίνη απαμινάση, Ιστοπαθολογία

1 Φόντο

Η αγροχημική ρύπανση των επιφανειακών υδάτων αποτελεί μια αυξανόμενη παγκόσμια περιβαλλοντική ανησυχία, ιδιαίτερα σε περιοχές όπου η γεωργία επεκτείνεται και εντείνεται ταχέως. Διάφορα συνθετικά χημικά, όπως φυτοφάρμακα ή λιπάσματα, χρησιμοποιούνται για την τροποποίηση της ποσότητας και της ποιότητας των καλλιεργειών για να ικανοποιηθούν οι ανάγκες των πελατών [7, 40]. Οι προαγωγοί ανάπτυξης φυτών είναι κοινά αγροχημικά σε πολλές χώρες [18].

Όταν αυτές οι χημικές ουσίες εισπνέονται απευθείας ή καταναλώνονται με μολυσμένα λαχανικά, βλάπτουν την ανθρώπινη υγεία [39]. Το οργανοφωσφορικό παρασιτοκτόνο, το αιθέφον (2-χλωροαιθυλοφωσφονικό οξύ) είναι μια συνθετική χημική ουσία που απελευθερώνει αιθυλένιο και χρησιμοποιείται συνήθως ως ρυθμιστής ανάπτυξης φυτών (PGR) για την προώθηση της επαγωγής πουλερικών, της ωρίμανσης των καρπών και άλλων φυσιολογικών αντιδράσεων. Έχει εγκριθεί για χρήση σε ποικιλία τροφίμων, ζωοτροφών, μη εδώδιμων, φυτωρίων θερμοκηπίου και καλλωπιστικών φυτών που καλλιεργούνται σε εξωτερικούς χώρους [3, 50]. Η εργαστηριακή αξιολόγηση της τοξικότητας του αιθέφονα έδειξε ότι το αιθέφον προκάλεσε μορφομετρικές δυσπλασίες της δεύτερης κεραίας, των αισθητήριων τριχών, της σπονδυλικής στήλης της ουράς και του βάθρου του Daphnia magna που οδήγησαν σε απώλεια λειτουργίας και θάνατο [54].

Ο Abd-El Azeem [1] κατέγραψε μείωση του ρυθμού ανάπτυξης, βλάβη του DNA και αποπτωτικά αποτελέσματα στα κύτταρα του πεπτικού αδένα του γυμνοσάλιαγκου Deroceras reticulatum μετά από έκθεση σε αιθέφον. Πολλοί συγγραφείς ενέκριναν την τοξικότητα του Ethephon σε αρουραίους και πτηνά [2, 17, 55]. Επιπλέον, η έκθεση σε αιθέφον προκάλεσε γονοτοξικότητα, οξειδωτικό στρες και αναπαραγωγική τοξικότητα σε ποντίκια [16]. Η τερατογένεση και η δυσλειτουργία του γοναδικού συστήματος σε ποντίκια έχουν επίσης συνδεθεί με την έκθεση σε αιθεφόνη [2, 16]. Το Ethephon έχει επίσης αποδειχθεί ότι είναι ανοσοτοξικό, έχει μεταλλαξιογόνες επιδράσεις [26], αυξάνει το οξειδωτικό στρες και χαμηλότερες συγκεντρώσεις δεοξυριβονουκλεϊκών και ριβονουκλεϊκών οξέων [4].

Το Ethephon σε υδάτινα σώματα μπορεί να θέσει σε κίνδυνο την υδρόβια πανίδα. Ωστόσο, τα δεδομένα για την επίδρασή του στους υδρόβιους οργανισμούς είναι σπάνια. Αρκετά υδρόβια είδη έχουν χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση φυτικών αυξητικών ορμονών σε υδάτινα συστήματα. Ωστόσο, ορισμένοι από αυτούς τους οργανισμούς είναι δύσκολο να χειριστούν και να διατηρηθούν στο εργαστήριο, γεγονός που καθιστά πιο δύσκολη τη χρήση τους σε οικοτοξικολογικές αξιολογήσεις [54]. Τα υδρόβια μαλάκια, συμπεριλαμβανομένων των σαλιγκαριών, έχουν πρόσφατα κερδίσει την προσοχή ως δοκιμαστικοί οργανισμοί λόγω της ανάγκης ανάπτυξης μοντέλων ασπόνδυλων για την περιβαλλοντική παρακολούθηση των υδρόβιων ρύπων [21, 45]. Τα σαλιγκάρια είναι η πιο άφθονη ομάδα μαλακίων στα υδάτινα συστήματα. Τα σαλιγκάρια παρουσιάζουν μια λιγότερο εκμεταλλευτική εναλλακτική λύση έναντι των ανώτερων σπονδυλωτών ως βιοδείκτες επειδή μπορούν να χρησιμοποιηθούν σε ποικίλα πειράματα χωρίς να ζητήσουν ηθική έγκριση και η απόκτηση και η συντήρησή τους είναι φθηνή [13].

Από αυτή την άποψη, το σαλιγκάρι Biomphalaria alexandrina έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως ως οργανισμός δείκτης της ρύπανσης των γλυκών υδάτων με φυτοφάρμακα [29, 30]. Πέρα από τις δυνατότητές του ως βιοδείκτη, αυτό το σαλιγκάρι δρα ως ενδιάμεσος ξενιστής για τη μετάδοση του Schistosoma mansoni [35]. Επομένως, οι αγροχημικές συγκεντρώσεις στο περιβάλλον μπορούν να επηρεάσουν τη μετάδοση της σχιστοσωμίασης μέσω άμεσων και έμμεσων επιδράσεων στον ενδιάμεσο ξενιστή και την πυκνότητα των παρασίτων [27]. Η παρούσα έρευνα αποσκοπούσε στη διερεύνηση της επίδρασης της υποθανατηφόρου έκθεσης στον ρυθμιστή ανάπτυξης των φυτών, RIPEX 48 τοις εκατό EC (η εμπορική ονομασία του ethephon, 2-chloroethyl phosphonic acid) σε διάφορες βιοχημικές, ανοσολογικές και ιστολογικές πτυχές του B. alexandrina τα σαλιγκάρια ως οργανισμός βιοδείκτη.

2 Μέθοδοι

2.1 Δοκιμαστικός οργανισμός

Τα σαλιγκάρια Biomphalaria alexandrina συλλέχθηκαν από τη λίμνη Manzalah που βρίσκεται στο El-Matareya, στην επαρχία Dakahlia, στην Αίγυπτο (31 μοίρες 11′ N 32 βαθμοί 2′ E) και διατηρήθηκαν σε καλά αεριζόμενο νερό της βρύσης σε σταθερή θερμοκρασία 20 βαθμών. Ταΐζονταν καθημερινά με φρέσκα φύλλα μαρουλιού. Μετά από συντήρηση για 4 εβδομάδες σε εργαστηριακές συνθήκες, στα επόμενα πειράματα χρησιμοποιήθηκαν υγιή ώριμα σαλιγκάρια (10-12 mm σε διάμετρο κελύφους).

2.2 Πειραματικό υλικό και συνθήκες έκθεσης

Ο ρυθμιστής ανάπτυξης φυτών, RIPEX (μια μορφή διαλύματος που περιέχει 48 τοις εκατό αιθεφόνη [2- χλωροαιθυλοφωσφονικό οξύ (C2H6ClO3P)] και 52 τοις εκατό αδρανή συστατικά) αγοράστηκε από την Chema Industries (πόλη New Nubaria, Behira, Αίγυπτος· άδεια μητρώου Αρ. . 1840). Παρασκευάστηκε μια σειρά από συγκεντρώσεις. Εκτέθηκαν αντίγραφα δέντρων με δέκα σαλιγκάρια το καθένα. Μετά από 1-ημέρα έκθεσης, τα νεκρά σαλιγκάρια μετρήθηκαν και αφαιρέθηκαν και τα LC50 και LC90 υπολογίστηκαν από στατιστικό λογισμικό κοινωνικών επιστημών (SPSS; IBM Corp. Armonk, Νέα Υόρκη, ΗΠΑ).

2.3 Πειραματικός σχεδιασμός

Χρησιμοποιήθηκαν δύο υποθανατηφόρες συγκεντρώσεις που αντιπροσωπεύουν LC10 και LC20 (8 και 16 μL/L). 90 σαλιγκάρια χωρίστηκαν σε τρεις ομάδες, κάθε ομάδα με τρία αντίγραφα (δέκα σαλιγκάρια/αντίγραφο): η ομάδα ελέγχου, η ομάδα που εκτέθηκε σε 8 μL/L και η ομάδα που εκτέθηκε σε 16 μL/L. Σε μεσοδιαστήματα 1-, 3- και 7-ημέρας, αξιολογήθηκαν βιοδείκτες οξειδωτικού στρες και ένζυμα ανοσοποιητικού δυναμικού στον πεπτικό αδένα. Οι στεροειδείς ορμόνες αξιολογήθηκαν στο Ovotestis. Αξιολογήθηκε ο διαφορικός αριθμός αιμοκυττάρων και η ιστολογία των πεπτικών αδένων και του ωοθυλακίου. Για βιοχημικές έρευνες, 0,5 g ιστού (πεπτικοί αδένες ή ωοθηκοί) από κάθε ομάδα ομογενοποιήθηκαν σε 0,5 mL ρυθμιστικού διαλύματος φωσφορικών (pH 6,5) χρησιμοποιώντας ομογενοποιητή γυαλιού και φυγοκεντρήθηκαν στους 10,000×g, στους 4 βαθμούς για 10 λεπτά. . Τα προκύπτοντα υπερκείμενα χρησιμοποιήθηκαν για μετέπειτα προσδιορισμούς.

2.4 Προσδιορισμός δεικτών οξειδωτικού στρες

2.4.1 Υπεροξειδική δισμουτάση (SOD, EC 1.15.1.1)

Η δραστηριότητα SOD προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας το κιτ δοκιμασίας υπεροξειδικής δισμουτάσης EnzyChrom™ (Αρ. Κατ.: ESOD{{0}}; BioAssay Systems, Hayward, CA, USA) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Το ομογενοποίημα ιστού χρησιμοποιώντας ψυχρό ρυθμιστικό λύσης (50 mM φωσφορικό κάλιο, 0,1 mM EDTA και 0,5 τοις εκατό Triton X-100) φυγοκεντρήθηκε στους 12,000g για 5 λεπτά στους 4 βαθμούς , και το υπερκείμενο συλλέχθηκε για προσδιορισμό του SOD [43]. Η δραστικότητα του SOD μετρήθηκε στην οπτική πυκνότητα (OD) στα 440 nm.

2.4.2 Γλουταθειόνη-S-τρανσφεράση (GST, EC 2.5.1.18)

Το ένζυμο αυτό καταλύει τη σύζευξη GSH με {{0}}χλωρο-2,4-δινιτροβενζόλιο (CDNB). Μετριέται φασματοφωτομετρικά στα 340 nm. Το μίγμα της αντίδρασης περιέχει ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικού καλίου 0,1 Μ, ρΗ 6,5, GSH διαλυμένο στο ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικού καλίου (140 mg/100 mL) και CDNB 4 mg/ml σε αιθυλική αλκοόλη. Μία μονάδα ενζυμικής δραστηριότητας ορίζεται ως η ποσότητα του ενζύμου που καταλύει το σχηματισμό 1 μmole S-συζυγούς ανά λεπτό [11].

2.4.3 Μαλονοδιαλδεΰδη (MDA)

Η μηλονοδιαλδεΰδη σε ολόκληρα ομογενοποιήματα προσδιορίστηκε ως δραστικές ουσίες θειοβαρβιτουρικού οξέος (TBARS) σύμφωνα με την τυπική μέθοδο των Ohkawa et al. [37]. Το μίγμα της αντίδρασης περιελάμβανε 0.1 mL ομογενοποιήματος ιστού, ίσο όγκο διαλύματος δωδεκυλοθειικού νατρίου, 0.75 mL οξικού οξέος, 0.75 mL θειοβαρβιτουρικού οξέος, και 0.3 mL απεσταγμένου νερού. Αυτά τα συστατικά αναμίχθηκαν σε στροβιλισμό και επωάστηκαν σε λουτρό ζέοντος νερού για 1 ώρα και στη συνέχεια ψύχθηκαν σε θερμοκρασία δωματίου. Δέκα 0,5 mL απεσταγμένου νερού και 2,5 mL n-βουτανόλης προστέθηκαν σε κάθε σωλήνα και αναμίχθηκαν έντονα με στροβιλισμό και στη συνέχεια περιστράφηκαν σε φυγόκεντρο στα 2.500×g για 10 λεπτά. Η απορρόφηση μετρήθηκε στα 532 nm.

2.5 Προσδιορισμός ορμονών

2.5.1 Τεστοστερόνη

Η τεστοστερόνη προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας κιτ ανοσοπροσροφητικού προσδιορισμού τεστοστερόνης (ELISA) (Αρ. Κατ.: ADI-900-065· Enzo Life Sciences, NY, ΗΠΑ). Η τεστοστερόνη είναι το κύριο ανδρογόνο που επηρεάζει τόσο την πρωτογενή όσο και τη δευτερογενή σεξουαλική ανάπτυξη ως σεξουαλική ορμή. 100 μL τυπικού αραιωτικού (ρυθμιστικό διάλυμα ανάλυσης 3 ή μέσο καλλιέργειας ιστού) μεταφέρθηκε με πιπέτα στα φρεάτια μη ειδικής δέσμευσης και μέγιστης δέσμευσης (0 pg/mL πρότυπο). Στη συνέχεια, 100 µL του προτύπου #1 έως #5 στα κατάλληλα φρεάτια. Το δείγμα (100 μL) μεταφέρθηκε με πιπέτα στα κατάλληλα φρεάτια και 50 μL ρυθμιστικού διαλύματος ανάλυσης 3 στα φρεάτια μη ειδικής δέσμευσης. Επίσης, 50 μL κίτρινου αντισώματος προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο, εκτός από το τυφλό, τη συνολική δραστηριότητα και τα φρεάτια μη ειδικής δέσμευσης. Η επώαση της πλάκας σε θερμοκρασία δωματίου σε αναδευτήρα πλάκας για 1 ώρα στις 500 rpm. Μετά από αυτό, 50 μL του μπλε συζυγούς προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο, εκτός από τη συνολική δραστηριότητα και τα τυφλά φρεάτια. Μετά την εκκένωση των φρεατίων από το περιεχόμενο, η πλύση έγινε με την προσθήκη 400 μL διαλύματος πλύσης σε κάθε φρεάτιο 3 φορές. Μπλε συζυγές (5 μL) προστέθηκε στα φρεάτια συνολικής δραστικότητας και 200 ​​μL ενός διαλύματος φωσφορικού ρ-νιτροφαινυλεστέρα προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο και επωάστηκαν στους 37 βαθμούς για 1 ώρα χωρίς ανακίνηση. Η ανάγνωση της πλάκας στα 405 nm πραγματοποιήθηκε μετά την προσθήκη 50 μL διαλύματος τερματισμού σε κάθε φρεάτιο [12, 48].

2.5.2 Οιστραδιόλη

Η οιστραδιόλη προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας κιτ οιστραδιόλης ELIZA (Κατ. Αρ.: 501890; Cayman Chemical, Michigan, USA) σύμφωνα με τα πρωτόκολλα του κατασκευαστή. Η αρχή αυτής της αντίδρασης βασίζεται στο ότι η συγκέντρωση του ιχνηθέτη της ακετυλοχολινεστεράσης της οιστραδιόλης (AChE) είναι σταθερή, αλλά η συγκέντρωση της φυσικής οιστραδιόλης ποικίλλει, επομένως η ποσότητα του ιχνηθέτη της ακετυλοχολινεστεράσης της οιστραδιόλης (AChE) που συνδέεται με τον αντιορό της οιστραδιόλης είναι αντιστρόφως ανάλογη με τη συγκέντρωση της φυσικής οιστραδιόλης στο πηγάδι. 100 μL ρυθμιστικού ELISA προστέθηκαν σε φρεάτια μη ειδικής δέσμευσης και μέγιστης δέσμευσης. Προσθήκη 50 µL από το σωληνάριο #8 και στα δύο χαμηλότερα πρότυπα φρεάτια (Πρότυπο 8) και 50 µL από το σωλήνα #7 σε καθένα από τα επόμενα τυπικά φρεάτια (Πρότυπο 7). Ένα δείγμα (50 μL) προστέθηκε σε κάθε φρεάτιο. Προστέθηκε Estradiol AChE Tracer (50 μL) σε κάθε συνολική δραστικότητα και κενά φρεάτια. Μετά από αυτό, αντιορός ELISA Estradiol (50 μL) προστέθηκε σε κάθε φρεάτιο εκτός από τη συνολική δραστικότητα, τη μη ειδική δέσμευση και τα τυφλά φρεάτια. Μετά την επώαση με τροχιακό αναδευτήρα (2 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου), η απορρόφηση μετρήθηκε στα 414 nm [52].

2.6 Προσδιορισμός ενζύμων ανοσολογικού δυναμικού

2.6.1 Μυελοϋπεροξειδάση (MPO, EC 1.11.2.2)

Μία μονάδα δραστηριότητας MPO ορίζεται ως η ποσότητα του ενζύμου που υδρολύει το υπόστρωμα και παράγει ταυρίνη χλωραμίνη για να καταναλώσει 1.0 μmole TNB ανά λεπτό στους 25 βαθμούς. Η ΜΡΟ προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας κιτ χρωματομετρικής δραστικότητας μυελοϋπεροξειδάσης (Αρ. Κατ.: MAK068, Sigma-Aldrich, ΜΟ, ΗΠΑ). Η απορρόφηση μετρήθηκε στα 412 nm.

2.6.2 Απαμινάση αδενοσίνης (ADA, EC 3.5.4.4)

Το ADA είναι ένα ένζυμο που καταλύει τη μετατροπή της αδενοσίνης και της 2'-δεοξυαδενοσίνης σε ινοσίνη και 2'-δεοξυϊνοσίνη. Το ADA προσδιορίστηκε σύμφωνα με τις αρχές του κιτ προσδιορισμού δραστηριότητας αποαμινάσης αδενοσίνης τεχνικού δελτίου (Αρ. Κατ.: MAK400· Merck KGaA, Darmstadt, Γερμανία). Μία μονάδα απαμινάσης αδενοσίνης είναι η ποσότητα του ενζύμου που υδρολύει την αδενοσίνη για να δώσει 1,0 μmol ινοσίνης ανά λεπτό στους 37 βαθμούς. Τα αντιδραστήρια είναι ρυθμιστικό διάλυμα ανάλυσης 1×ADA (41 μL), μετατροπέας ADA (2 μL), προγραμματιστής ADA (2 μL) και υπόστρωμα ADA (5 μL).

2.7 Διαφορικός αριθμός αιμοκυττάρων

Η αιμολέμφος συλλέχθηκε από το σαλιγκάρι (έλεγχος, εκτέθηκε) σύμφωνα με τον Sminia [47]. Αφού άγγιξε το κεφάλι-πόδι από μια πιπέτα Παστέρ, το σαλιγκάρι αναγκάστηκε να αποσυρθεί βαθιά στο κέλυφός του και να εξωθήσει την αιμολέμφο, η οποία συλλέχθηκε για διαφορική μέτρηση αιμοκυττάρων. Η αιμολέμφος επαλείφθηκε στην αντικειμενοφόρο πλάκα του μικροσκοπίου για εξάπλωση. Μετά από σταθεροποίηση σε μεθανόλη 99,8 τοις εκατό για 5 λεπτά, η αντικειμενοφόρος πλάκα περιστράφηκε σε γωνία 45 μοιρών για ξήρανση σε θερμοκρασία δωματίου και χρωματίστηκε με χρώση Giemsa για 20 λεπτά. Η διαφοροποίηση των αιμοκυττάρων προσδιορίστηκε ότι είναι ανάλογη με την μέτρηση 100.

2.8 Ιστολογικές έρευνες

Πραγματοποιήθηκαν ιστολογικές εξετάσεις μετά από 7 ημέρες έκθεσης σε 8 και 16 μL/L RIPEX. Οι πεπτικοί αδένες και ο ωοθώρακας αφαιρέθηκαν και στερεώθηκαν αμέσως στο υγρό του Bouin᾿s. Μετά από 1 ημέρα μονιμοποίησης, τα δείγματα στη συνέχεια αφυδατώθηκαν μέσω μιας σειράς αλκοολών και καθαρίστηκαν σε ξυλόλιο. Κατασκευάστηκαν μπλοκ κεριού παραφίνης [42]. Δέκα Σεκτές. (πάχους 5-7 μm) κόπηκαν και χρωματίστηκαν με αιματοξυλίνη και ηωσίνη (Mayer's H και E). Η χρώση ακολουθήθηκε από καλό πλύσιμο με νερό βρύσης. Οι ιστολογικές τομές φωτογραφήθηκαν με χρήση φωτοαυτοματοποιημένης κάμερας (Optika, Ιταλία).

2.9 Στατιστική ανάλυση

Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως η μέση ± τυπική απόκλιση και αναλύθηκαν με στατιστικό λογισμικό κοινωνικών επιστημών (SPSS, IBM Corp. Armonk, ΝΥ, ΗΠΑ). Η αμφίδρομη ανάλυση διακύμανσης ANOVA χρησιμοποιήθηκε για τον εντοπισμό διαφορών μεταξύ της ομάδας ελέγχου και των εκτεθειμένων ομάδων, μεταξύ των διαφορετικών συγκεντρώσεων και των χρονικών σημείων έκθεσης. Το επίπεδο σημαντικότητας ορίστηκε στο p Μικρότερο ή ίσο με 0.05.

Ο μηχανισμός του Cistanche ενισχύει την επίδραση της τεστοστερόνης

Το Cistanche έχει βρεθεί ότι ενισχύει τα επίπεδα τεστοστερόνης με διάφορους τρόπους. Πρώτον, περιέχει ενώσεις γνωστές ως εχινακοσίδη και ακτεοσίδη, οι οποίες έχει αποδειχθεί ότι ενισχύουν την παραγωγή της ωχρινοτρόπου ορμόνης (LH) στην υπόφυση. Η LH διεγείρει τα κύτταρα Leydig στους όρχεις να παράγουν τεστοστερόνη. Το Cistanche περιέχει επίσης πολυσακχαρίτες και φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες, που έχει αποδειχθεί ότι έχουν αντιοξειδωτικές και αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες. Αυτό μπορεί να βοηθήσει στη μείωση του οξειδωτικού στρες και της φλεγμονής στους όρχεις, η οποία μπορεί να βλάψει την παραγωγή τεστοστερόνης Επιπλέον, το Cistanche έχει βρεθεί ότι αυξάνει την έκφραση των γονιδίων που εμπλέκονται στη σύνθεση τεστοστερόνης και μειώνει τη δραστηριότητα των ενζύμων που διασπούν την τεστοστερόνη, όπως το {{1} }άλφα-ρεδουκτάση. Συνολικά, ο συνδυασμός αυτών των μηχανισμών θεωρείται ότι συμβάλλει στην ενίσχυση της τεστοστερόνης του Cistanche.

Hoda H. Abdel-Azeem1*, Azza H. Mohamed1 και Mohamed R. Habib2