Αλβουμίνη και μεγαλίνη που πρέπει να γνωρίζετε

Επαφή:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Μέρος ΙΙ.:Νεφρικός χειρισμός της αλβουμίνης—Από τα πρώιμα ευρήματα στις τρέχουσες έννοιες

Γιακούμπ Γκούρεκ, Μπογκουσλάουα Κονόπσκα και Κριστόφ Γκολ ̨ab

ΠΑΤΗΣΤΕ ΕΔΩ ΣΤΟ ΜΕΡΟΣ Ι. // ΠΑΤΗΣΤΕ ΕΔΩ ΣΤΟ ΜΕΡΟΣ ΙΙΙ.

cistancheμπορεί να θεραπεύσεινεφρόςαρρώστιαβελτιώνωνεφρική λειτουργία

3.3. Κουβιλίνη

Κουβιλίνηαναγνωρίστηκε ως ηλευκωματίνηυποδοχέας από τους Birn et al. το 2000 [64]. Οι συγγραφείς απομονωμένοικουβιλίνηαπό τις μεμβράνες του περιγράμματος της βούρτσας-περιγράμματος νεφρού αρουραίων χρησιμοποιώντας χρωματογραφία συγγένειας με ακινητοποιημένη αλβουμίνη. Προσδιόρισαν επίσης τη σταθερά διάστασης του συμπλόκου με επιφανειακό συντονισμό πλασμονίου (Kd=0,63 uM) και απέδειξαν ότι οι έμφυτοι σκύλοι με λειτουργικό ελάττωμα τουκουβιλίνηκαι ποντίκια με αναστολήμεγαλίνηέκφραση εκκρίνουν σημαντικές ποσότητες λευκωματίνης στα ούρα. Επιπλέον, έδειξαν επίσης την αμοιβαία αλληλεπίδραση και των δύο υποδοχέων στην ενδοκυττάρωση της λευκωματίνης.

Κουβιλίνηείναι μια εξωκυτταρική γλυκοπρωτεΐνη με μοριακό βάρος περίπου 460 kDa. Αρχικά, αναγνωρίστηκε ως το αντιγόνο των τερατογόνων αντισωμάτων που παράγονται σε κουνέλια μετά από ένεση νεφρικού περιγράμματος βούρτσας. Αρχικά γνωστή ως γλυκοπρωτεΐνη 280 (gp280), εντοπίστηκε στα εγγύς νεφρικά σωληνάρια και στο επιθήλιο του σάκου κρόκου. Η έκφρασή του βρέθηκε επίσης στον ειλεό, τη μήτρα και τον πλακούντα. Αρχικά, δεν αποδόθηκαν σύνδεσμοι σε αυτή την πρωτεΐνη. Μεταγενέστερες μελέτες έδειξαν ότικουβιλίνηήταν πανομοιότυπη με τον υποδοχέα του εγγενούς παράγοντα-βιταμίνης Β12 (IF-B12) σύμπλοκο που υπάρχει στο λεπτό έντερο. Η λειτουργία μιας πρωτεΐνης υποδοχέα ανατέθηκε σε αυτήν [65]. Ο άνθρωποςκουβιλίνηγονίδιο εντοπίστηκε στο χρωμόσωμα 10p12.33-p13. Αυτή η πρωτεΐνη αποτελείται από ένα 110 αμινοξύ Ν-τερματικό τμήμα, ακολουθούμενο από 8 επιδερμικούς αυξητικούς παράγοντες (τύπου EGF) τομείς και 27 τομείς παρόμοιους με αυτούς που συμπληρώνουν το C1r / C1s, την επιδερμική πρωτεΐνη αχινού που σχετίζεται με τον αυξητικό παράγοντα (Uegf) και τη μορφογόνο πρωτεΐνη των οστών1 (CUB).Κουβιλίνηδεν έχει διαμεμβρανικό τομέα. Το N-terminus είναι υπεύθυνο για την ενσωμάτωση πρωτεϊνών στη μεμβράνη. Κάθε τομέας CUB αποτελείται από 110 υπολείμματα αμινοξέων. Η δομή των τομέων CUB αποτελείται από δύο στρώματα πέντε αντιπαραλληλιακών β-φύλλων που συνδέονται επίσης με β-δομές. Αποτελούν την πιο συντηρητική περιοχή του μορίου και είναι υπεύθυνα για τη δέσμευση του συνδέτη. Εκτός από τηνλευκωματίνηκαι IF-B12, πρωτεΐνες που περιέχουν σίδηρο (τρανσφερρίνη, αιμοσφαιρίνη, μυοσφαιρίνη), απολιποπρωτεΐνη Al και πρωτεΐνη δέσμευσης βιταμίνης D μπορεί επίσης να δεσμευτούν 56,59,66,67I. Ανάλυση της δέσμευσης της λευκωματίνης σε in vitro εκφραζόμενηκουβιλίνητα θραύσματα κατέστησαν δυνατό τον προσδιορισμό των δεσμευτικών τοποθεσιών εντός των τομέων CUB 6-8 [68]. Αυτές οι θέσεις είναι πιθανό να αλληλεπικαλύπτονται εν μέρει με τις θέσεις δέσμευσης της αιμοσφαιρίνης, όπως αποδείχθηκε σε μια μελέτη ανταγωνισμού που χρησιμοποίησε κύτταρα HK-2 (ανθρώπινο νεφρό εγγύς σωληνάριο, ενήλικο αρσενικό, θηλώωμα αθάνατο) [69].

Κουβιλίνηδεν είναι ένας πλήρως ανεξάρτητος ενδοκυτταρικός υποδοχέας. Για τον σωστό εντοπισμό της μεμβράνης και τη σταθερότητά του, πρέπει να αλληλεπιδρά με την πρωτεΐνη AMN. Επιπλέον, αυτή η πρωτεΐνη είναι υπεύθυνη γιακουβιλίνηΕσωτερίκευση. Πρόσφατα, αποδείχθηκε ότι η αλληλουχία FXNPXF στον κυτταροπλασματικό τομέα amn είναι λειτουργικά ενεργή και μεσολαβεί στην απομόνωση του συμπλόκου αλληλεπιδρώντας με πρωτεΐνες προσαρμογέα: την αναπήραιμη πρωτεΐνη-2 (Dab2) και την αυτοσωμική υπολειπόμενη πρωτεΐνη χοληστερόλης (ARH). Η εσωτερίκευση του CUBAM μπορεί επίσης να συμβεί μέσω της σύνδεσης μεμεγαλίνη[55,70].Μεγάληφαίνεται να είναι υπεύθυνη γιακουβιλίνηδιατηρώντας την κυτταρική μεμβράνη. Ταυτόχρονη αποβολή τουκουβιλίνηαπό τη μεμβράνη και η απώλεια της με τα ούρα βρέθηκε σε έναν ασθενή με το σύνδρομο Donnai-Barrow/FOAR (Facio-Oculo-Acustico-Renal Syndrome) λόγω μιας λειτουργικής μετάλλαξης σε αυτό το γονίδιο υποδοχέα που οδήγησε στην κυτταροπλασματική του κατακράτηση [71].

Ο κύριος ρόλος του CUBAM σε σωληνοειδήλευκωματίνηη πρόσληψη καταδείχθηκε σε πρόσφατες μελέτες σε ποντικούς με νεφρική ειδική νοσηλότητακουβιλίνηκαιμεγαλίνη, στην οποία παρατηρήθηκε μέτρια σωληνοειδής λευκωματουρία [54,72]. Αυτή η παρατήρηση επιβεβαιώθηκε επίσης από τη γενετική και φαινοτυπική ανάλυση ασθενών με σύνδρομο Imerslund-Gräsbeck, που προκλήθηκε από μετάλλαξη στοκουβιλίνηή γονίδιο AMN. Και στις δύο περιπτώσεις, η αλβουμίνη και άλλοι σύνδεσμοι τηςκουβιλίνηχάθηκαν στα ούρα [58].

Ενδιαφέρονκουβιλίνηκαιμεγαλίνηέχουν επίσης ανιχνευθεί σε αρουραίους και ανθρώπινα σπειράματα σύμφωνα με πρότυπο παρόμοιο με αυτό που αναφέρθηκε γιαμεγαλίνη.Κουβιλίνηαποκάλυψε τόσο την επιφανειακή όσο και την ενδοκυτταρική έκφραση στα ποδοκύτταρα [73]. ΕπιπλέονκουβιλίνηΗ έκφραση mRNA ανιχνεύθηκε στα μεσαγγιακά κύτταρα, αλλά η απουσία αμνίου υπονοούσε ότικουβιλίνηδεν είναι πλήρως λειτουργικό σε αυτά τα κύτταρα. Όμωςλευκωματίνηη ενδοκυττάρωση ήταν σημαντικά μειωμένη υπό επαγωγήμεγαλίνησυνθήκες κρούσης σε σταθερά μορφοποιημένα μεσαγγικά κύτταρα |74]. Αυτά τα ευρήματα μπορεί να είναι σημαντικά για την καλύτερη κατανόηση των παθών σπειραμάτων.

cistanche αρσενικά οφέλη

3.4. Μεγαλίνη

Μεγάληαναγνωρίστηκε ως ηλευκωματίνηυποδοχέας από τους Cui et al. το 1996 [75]. Η μελέτη πραγματοποιήθηκε in vivo με ένεση εγγύς σωληναρίων αρουραίων με διαλύματα αλβουμίνης που επισημαίνονται με κολλοειδή χρυσό ή ισότοπο 125Iiodine. Στο πείραμα, προσδιορίστηκε η επίδραση πολλών ενώσεων στην σωληναριακή πρόσληψη αυτών των πρωτεϊνών. Η χορήγηση πρωτεΐνης που σχετίζεται με τους υποδοχείς (RAP), το κυτόχρωμα C μείωσε και η γενταμικίνη ανέστειλε πλήρως την σωληναριακή επαναρρόφηση της επισημασμένης αλβουμίνης. Αυτοί οι σύνδεσμοι χαρακτηρίζονται από υψηλή συγγένεια γιαμεγαλίνη, και η παρουσία τους εμποδίζει αποτελεσματικά τη δέσμευση της αλβουμίνης μέσω αυτού του υποδοχέα. Το ίδιο ίσχυε και για το EDTA, έναν χηλικό παράγοντα των ιόντων Ca2+, ο οποίος επίσης ανέστειλε την πρόσληψη. Αυτό έδειχνε ότιμεγαλίνησυμβάλλει στην σωληναριακή επαναρρόφηση αυτής της πρωτεΐνης. Τα συμπεράσματα αυτά επιβεβαιώθηκαν με χρωματογραφία συγγένειας σε στήλη με ακινητοποιημένημεγαλίνη.

Μεγάληανακαλύφθηκε αρχικά ως αντιγόνο στη μεμβρανώδη νεφροπάθεια τύπου Heymann και ονομάστηκε γλυκοπρωτεΐνη 330(gp 330). Το 1994, μετά από μια επιτυχημένη απόπειρα κλωνοποίησης, η δομή του ήταν περισσότερο γνωστή και το όνομα άλλαξε σε αυτό που χρησιμοποιείται σήμερα [76. Ο άνθρωποςμεγαλίνηγονίδιο εντοπίστηκε στο χρωμόσωμα 2g24-g31.Μεγάληείναι μια μεγάλη διαμεμβρανική πρωτεΐνη που ανήκει στην οικογένεια των υποδοχέων λιποπρωτεϊνών χαμηλής πυκνότητας. Σε εγγύς σωληνάρια,μεγαλίνηβρίσκεται στην κορυφαία μεμβράνη και στα ενδοκυτταρικά κυστίδια με επικάλυψη κλαθρίνης. Αυτή η πρωτεΐνη έχει μοριακό βάρος 600 kDa και αποτελείται από περίπου 4600 υπολείμματα αμινοξέων. Ομεγαλίνητο μόριο περιέχει μια μεγάλη Ν-τερματική εξωκυτταρική περιοχή, μια ενιαία διαμεμβρανική περιοχή και ένα κοντό C-τερματικό κυτταροπλασματικό θραύσμα. Ο εξωκυτταρικός τομέας έχει τέσσερις περιοχές πλούσιες σε κυστεΐνη και είναι υπεύθυνη για τη δέσμευση των συνδέσμων. Αρκετές επαναλήψεις αλληλουχίας παρόμοιες με τον επιδερμικό αυξητικό παράγοντα (EGF) και ένα θραύσμα φτωχό σε κυστεΐνη που περιέχει μοτίβο YWTD διαχωρίζουν την περιοχή δέσμευσης συνδέτη από το τμήμα ενσωμάτωσης. Η αλληλουχία σηματοδότησης είναι υπεύθυνη για τη διάσταση του συνδέτη στο όξινο περιβάλλον ενδοσωμάτων. Το κυτταροπλασματικό τμήμα περιέχει τρία μοτίβα NPXY που ξεκινούν τη διαδικασία της ενδοκυττάρωσης της λευκωματίνης συγκεντρώνοντας υποδοχείς σε επικαλυμμένους λάκκους μέσω της πρωτεΐνης προσαρμογέα απενεργοποιημένης πρωτεΐνης-2 (Dab2) [77]. Η πρόσληψη αυτού του προσαρμογέα εξαρτάται με τη σειρά του από τη φωσφορυλίωση που καταλύεται από πρωτεϊνικές κινάσες Β(Aktl και Akt2) [78,79].

Μεγάληέχει επίσης την ικανότητα να δεσμεύει πολλές άλλες πρωτεΐνες. Εκτός από την αλβουμίνη, οι σύνδεσμοί της περιλαμβάνουν μεταξύ άλλων: απολιποπρωτεΐνες (Β, Ε, HD), πρωτεΐνες μεταφοράς βιταμινών (Α, D, Β12), ορμόνες (αγγειοτενσίνη Ι, επιθηλιακός αυξητικός παράγοντας, λεπτίνη), ένζυμα και τους αναστολείς τους (λυσοζύμη, πλασμινογόνο) και άλλα [80]. Στην περίπτωση της αλβουμίνης, οι θέσεις δέσμευσης στο μόριο του υποδοχέα δεν έχουν ακόμη χαρτογραφηθεί. Εσωτερικεύει επίσης το συγκρότημα CUBAM και τους συνδέσμους του, συμπεριλαμβανομένης της αλβουμίνης. Τα σύμπλοκα που σχηματίζονται εσωτερικεύονται με το σχηματισμό πρώιμων ενδοσωμάτων. Μετά την οξίνιση του περιβάλλοντος του ενδοσωμάτων, το σύμπλοκο διασπάται και ένας ελεύθερος υποδοχέας ανακυκλώνεται στην κυτταρική επιφάνεια μέσω πυκνών κορυφαίων σωληναρίων [59,66,67,81].

Αξίζει να σημειωθεί ότι η υψηλή γλυκόζη ρυθμίζειμεγαλίνη-μεσολαβούμενη ενδοκυττάρωση λευκωματίνης σε κύτταρα νεφρικών εγγύς σωληναρίων. Τα αυξημένα επίπεδα γλυκόζης πλάσματος ανέστειλαν τηνμεγαλίνηέκφραση και κατά συνέπεια ενδοκυττάρωση αλβουμίνης [61].

cistanche αρσενικά οφέλη

3.5. Νεογνικός υποδοχέας Fc του θραύσματος ανοσοσφαιρίνης

Πρόσφατες μελέτες σχετικά με την απορρόφηση της νεφρικής λευκωματίνης υποδεικνύουν τον σημαντικό ρόλο του νεογνικού υποδοχέα Fc (FcRn) στη διαδικασία ανάκτησης της αλβουμίνης από το διήθημα και την προστασία αυτής της πρωτεΐνης από την ενδοκυτταρική αποικοδόμηση. Το FcRn είναι μια ετεροδιμερής διαμεμβρανική πρωτεΐνη παρόμοια στη δομή της με τα μείζονα μόρια συμπλέγματος ιστοσυμβατότητας (MHC) κατηγορίας Ι. Είναι συχνή στα ενδοθηλιακά και επιθηλιακά κύτταρα. Η παρουσία του επιβεβαιώθηκε σε σπειραματικά ποδοκύτταρα και σε εγγύς σωληνάρια. Έχει την ικανότητα να δεσμεύει ανεξάρτητα την αλβουμίνη και τις ανοσοσφαιρίνες IgG σε όξινο περιβάλλον (pH 5-6). Η αύξηση της τιμής του pH πάνω από7 έχει ως αποτέλεσμα την απελευθέρωση συνδέσμων από τον υποδοχέα [82]. Το FcRn στα ποδοκύτταρα είναι παρόν σε κυστίδια που ανήκουν στο όξινο ενδοσωμικό διαμέρισμα και είναι υπεύθυνο για τη δέσμευση ανοσοσφαιρινών και αλβουμίνης που πέρασαν μέσω του σπειραματικού τριχοειδούς ενδοθηλίου στο χώρο διήθησης. Οι φιλτραρισμένες πρωτεΐνες απορροφώνται από το ποδοκύτταρο μέσω ενδοκυττάρωσης και/ή πινοκυττάρωσης και στη συνέχεια δεσμεύονται από το FcRn στο όξινο pH των ενδοσωμάτων. Τα ενδοκυτταρικά κυστίδια φορτωμένα με πρωτεΐνες υποβάλλονται σε τρανσκύτωση προς τον αυλό της κάψουλας Bowman. Σε συνθήκες αυξανόμενου pH, το σύμπλοκο πρωτεϊνών-υποδοχέων διαχωρίζεται και η άθικτη πρωτεΐνη απελευθερώνεται από το κύτταρο στο πρωτογενές διήθημα. Αυτή η διαδικασία υποτίθεται ότι προστατεύει τις στενές σχισμές διήθησης από το φράξιμο με μεγάλες πρωτεΐνες [83,84]. Μέρος της αλβουμίνης, που διηθείται και απορροφάται εκ νέου στα εγγύς σωληνάρια, δεν αποτελεί αντικείμενο αποικοδόμησης στα λυσοσώματα του σωληνοειδούς επιθηλίου και πιθανότατα ανακτάται κατά τη διαδικασία της τρανσκυττάρωσης. Σε αυτό το θεωρητικό μοντέλο, το FcRn δεσμεύει την αλβουμίνη, η οποία απελευθερώνεται από τους υποδοχείς της, πιθανώς τηνμεγαλίνη/κουβιλίνησύμπλεγμα στο όξινο περιβάλλον ενδοσωμάτων και στη συνέχεια κατευθύνεται μέσω της τρανσκύτωσης στη βασική θέση των σωληνοειδών επιθηλιακών κυττάρων, όπου απελευθερώνεται στον διάμεσο ιστό ως συνέπεια της αύξησης του pH [85]. Αν και υπό το φως των τρεχόντων ερευνητικών αποτελεσμάτων, λαμβάνει χώρα η ανάκτηση της λευκωματίνης με τρανσκύτωση που περιλαμβάνει το FcRn σε εγγύς σωληνάρια, αυτό είναι ένα οριακό φαινόμενο για τη φυσιολογική ομοιόσταση της λευκωματίνης στο σώμα [56].

cistanche αρσενικά οφέλη