Βιωσιμότητα και αντιοξειδωτικές επιδράσεις της παραδοσιακής δροσιστικής σκόνης ρυζιού (bedak Sejuk) από Oryza Sativa Ssp. Indica And Oryza Sativa Ssp. Japonica σε κύτταρα μελανώματος B164A5 που προκαλούνται από την UVB

Επικοινωνία: ali.ma@wecistanche.com

Ahmad Rohi Ghazali1*, Raveena Vaidheswary Muralitharan1, Chan Kam Soon1, Tharsini Salyam1, Nurul Najihah Ahmad Maulana1, Ummul Aqeela Balqees Mohamed Thaha1, Rasyidah Mohamad Halim1, Sajidah Suhaifi1, Muhamad Khahamdif Ahmadnis

Αφηρημένη

Ιστορικό:Η παραδοσιακή σκόνη ρυζιού ψύξης (bedak sejuk) είναι μια ζύμωση με βάση το ρύζικαλλυντικόπου εφαρμόζεται τοπικά στο δέρμα κάποιου, ως μάσκα προσώπου για μια νύχτα. Σύμφωνα με μαρτυρίες χρηστών,μπεντάκ σετζούκομορφαίνει και λευκαίνει το δέρμα, οπότε αυτά τα οφέλη θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν ως πιθανός χημειοπροληπτικός παράγοντας μελανώματος.

Σκοπός:Ως εκ τούτου, αυτή η μελέτη είχε ως στόχο να προσδιορίσει τις επιπτώσεις τουμπεντάκ σετζούκαπό Oryza sativa ssp. indica (Indica) και Oryza sativassp. japonica (Japonica) σε κύτταρα μελανώματος B164A5 που προκαλούνται από την UVB, και επίσης αναγνωρίζουναντιοξειδωτικόχωρητικότητα και των δύο τύπων μπεντάκ σετζούκ.

Μέθοδοι:Η βέλτιστη δόση Indica και Japonica bedak sejuk για τη θεραπεία των κυττάρων προσδιορίστηκε μέσω της ανάλυσης ΜΤΤ. Μετά τοαντιοξειδωτικόικανότητες και των δύο τύπωνμπεντάκ σετζούκπροσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας τη δοκιμασία FRAP.

Αποτελέσματα:Από τη δοκιμασία ΜΤΤ, βρέθηκε ότι το Indica και το Japonica bedak sejuk δεν παρουσίασαν κυτταροτοξικές επιδράσεις στα κύτταρα. Ως εκ τούτου, δεν μπορεί να ληφθεί IC50 και επιλέχθηκαν δύο από τις υψηλότερες δόσεις, 50 και 100 g/L για θεραπεία. Στην ανάλυση FRAP, το Indica bedak sejuk στα 50 και 100 g/L έδειξε τιμές FRAP 0,003 ± 0,001 ug AA (ασκορβικό οξύ)/g bedak sejuk και 0,004 ± 0,0003 ug AA/gμπεντάκ σετζούκ. Ενώ το Japonica bedak sejuk στα 50 g/L είχε την ίδια τιμή FRAP με το Indica bedak sejuk στα 100 g/L. Όσο για το Japonica bedak sejuk στα 100 g/L, έδειξε το υψηλότεροαντιοξειδωτικόχωρητικότητα με την τιμή FRAP {{0}}.01 ± 0,0007 ug AA/g bedak sejuk που ήταν στατιστικά σημαντικό (p < 0,05) σε σύγκριση με άλλες ελεγμένες συγκεντρώσεις.

Συμπέρασμα:Εν κατακλείδι, Japonicaμπεντάκ σετζούκέχει υψηλότεροαντιοξειδωτικόικανότητα σε σύγκριση με το Indica bedak sejuk παρόλο που και τα δύο δεν είναι κυτταροτοξικά για τα κύτταρα. Ανεξάρτητα από αυτό, πρέπει να γίνουν περαιτέρω έρευνες πριν αναπτυχθεί το bedak sejuk ως πιθανοί παράγοντες χημειοπροφύλαξης του μελανώματος.

Λέξεις-κλειδιά:Μπεντάκ σετζούκ- ζυμωμένο ρύζι- ζυμωμένοκαλλυντικά- Oryza sativa Indica- Oryza sativa Japonica

Κάντε κλικ στοεκχύλισμα cistanche και cistanche deserticola ma για αντιοξειδωτικό

Εισαγωγή

Το μεγαλύτερο όργανο του ανθρώπινου σώματος είναι το δέρμα, το οποίο αντιπροσωπεύει το 16 τοις εκατό του ανθρώπινου σωματικού βάρους. Η επιδερμίδα του δέρματος λειτουργεί ως προστατευτικό στρώμα που διαχωρίζει τους οργανισμούς από το εξωτερικό περιβάλλον. Αυτό είναι ζωτικής σημασίας για την αντιμετώπιση περιβαλλοντικών στρεσογόνων παραγόντων όπως το υπεριώδες φως (UV). Όταν το υπεριώδες φως διεισδύει στην επιδερμίδα, οι χρωστικές μελανίνης στα κερατινοκύτταρα σχηματίζουν ένα προστατευτικό κάλυμμα πάνω από τους πυρήνες των κερατινοκυττάρων. Αυτό παρέχει προστασία στο δέρμα από τη διείσδυση της υπεριώδους ακτινοβολίας καθώς και εξουδετέρωση των ενεργών ειδών οξυγόνου (ROS) που έχουν παραχθεί (D'Orazio et al., 2013; Aluwi et al., 2016; Woolridge Cooper, 2018).

Ωστόσο, η αυξημένη έκθεση στο υπεριώδες φως είναι η κύρια αιτία υπερμελάγχρωσης και βλάβης του δέρματος (Chan et al., 2014; American Cancer Society, 2020). Η υπεριώδης ακτινοβολία από τον Ήλιο που διαπερνά το δέρμα είναι ακτίνες UVA (90 - 95 τοις εκατό) και ακτίνες UVB (5 – 10 τοις εκατό), όπου η έκταση της βλάβης του δέρματος εξαρτάται από το μήκος κύματος κάθε ακτίνας. Οι ακτίνες UVA έχουν μεγαλύτερα μήκη κύματος (320 – 400 nm) που διεισδύουν βαθιά στο χόριο και έχουν ως αποτέλεσμα τον σχηματισμό ελεύθερων ριζών, ειδικά ROS. Όσον αφορά τις ακτίνες UVB, με μικρότερα μήκη κύματος (280 – 320 nm) που διεισδύουν μόνο μέχρι την επιδερμική στιβάδα, οι ακτίνες καταστρέφουν το DNA το οποίο με τη σειρά του προκαλεί μεταλλάξεις. Αυτός ο συνδυασμός σχηματισμών και μεταλλάξεων ROS συμβάλλει τελικά στην ανάπτυξη καρκίνου του δέρματος (Sander et al., 2003; Pfeifer and Besaratinia, 2012; D'Orazio et al., 2013; Kamarulzaman et al., 2017; Pavel et al., 2017; Nagapan et al., 2018).

Ένας τύπος καρκίνου του δέρματος που εμφανίζεται λόγω υπερβολικής έκθεσης στην υπεριώδη ακτινοβολία είναι το μελάνωμα. Το μελάνωμα εμφανίζεται όταν τα μελανοκύτταρα αναπτύσσονται εκτός ελέγχου λόγω μεταλλάξεων στο DNA. Αν και το μελάνωμα ευθύνεται μόνο για λιγότερο από το 10 τοις εκατό όλων των καρκίνων του δέρματος, συμβάλλει στην πλειονότητα των θανάτων που σχετίζονται με τον καρκίνο του δέρματος. Αυτό μπορεί να αποδοθεί στο υψηλό μεταστατικό δυναμικό του μελανώματος και στην αντίσταση στη θεραπεία (Pfeifer and Besaratinia, 2012; American Cancer Society, 2020). Ως εκ τούτου, οι στρατηγικές χημειοπρόληψης μελανώματος είναι πιο κατάλληλες για την αντιμετώπιση αυτής της εμφάνισης της νόσου (Chhabra et al., 2017).

Σύμφωνα με τις στρατηγικές χημειοπροφύλαξης του μελανώματος, η ιδέα να χρησιμοποιήσετε ένα τοπικόκαλλυντικόπροέκυψε προϊόν που έχει τη δυνατότητα να μειώσει τη δημιουργία ROS και μετάλλαξη στο ανθρώπινο δέρμα. Αυτό το προϊόν, παραδοσιακή σκόνη ρυζιού ψύξης, ευρύτερα γνωστό ωςμπεντάκ σετζούκστη Μαλαισία, είναι ένα παραδοσιακό καλλυντικό προϊόν με βάση το ρύζι που έχει υποστεί ζύμωση. Οι κόκκοι ρυζιού που έχουν υποστεί ζύμωση σε προηγούμενες μελέτες για την παραγωγή μπεντάκ σετζούκ είναι Oryza sativa ssp. indica (Indica) και Oryza sativa ssp. japonica (Japonica) (Dzulfakar et al., 2015a). Οι κόκκοι ρυζιού Indica είναι μακροί, επίπεδοι, λεπτοί, θρυμματίζονται εύκολα και έχουν υψηλή περιεκτικότητα σε αμυλόζη ενώ οι κόκκοι ρυζιού Japonica είναι κοντοί, στρογγυλοί, δεν θρυμματίζονται εύκολα και έχουν χαμηλή περιεκτικότητα σε αμυλόζη (Ricepedia, nd). Το Bedak sejuk ως προϊόν ζύμωσης κόκκων ρυζιού έχει σχήμα σταγονιδίων νερού ή παστίλιες σε σχήμα κώνου. Όταν αυτές οι παστίλιες αναμειγνύονται με νερό και εφαρμόζονται στο δέρμα ως μάσκα προσώπου για μια νύχτα, δίνει ένα δροσιστικό αποτέλεσμα. Έχει υποστηριχθεί από μαρτυρίες χρηστών από γενιά σε γενιά, ότι το ισχυριζόμενο bedak sejuk είναι σε θέση να ομορφαίνει αλλά και να λευκαίνει το δέρμα (Dzulfakar et al., 2015b; Dzulfakar et al., 2016c; Johar et al., 2018). Ωστόσο, αυτές οι μαρτυρίες δεν έχουν ποτέ δοκιμαστεί σε εργαστηριακό περιβάλλον, ειδικά για τις επιδράσεις του στα κύτταρα του δέρματος, τόσο στα φυσιολογικά όσο και στα κακοήθη.

Ως εκ τούτου, η μελέτη μας είχε ως στόχο να προσδιορίσει τις επιπτώσεις τουμπεντάκ σετζούκφτιαγμένο από τα υποείδη ρυζιού Indica και Japonica χρησιμοποιώντας κύτταρα μελανώματος B164A5 που προκαλούνται από την UVB, καθώς και ταυτοποίηση τωναντιοξειδωτικόχωρητικότητα και των δύο τύπων μπεντάκ σετζούκ.

Υλικά και μέθοδοι

Παρασκευή Indica και Japonica bedak sejuk

ομπεντάκ σετζούκφτιαγμένο από τα υποείδη ρυζιού Indica και Japonica παρασχέθηκαν ευγενικά από τη Σχολή Μηχανικών και Δομημένου Περιβάλλοντος, Universiti Kebangsaan Malaysia, 43600 Bangi, Selangor. Προκειμένου να παρασκευαστεί το bedak sejuk, οι κόκκοι ρυζιού Indica και Japonica εμποτίστηκαν σε νερό βρύσης σε αναλογία 1:1 (β/ο) σε χωριστά κλειστά δοχεία που δεν αποστειρώθηκαν. Οι κόκκοι ρυζιού στη συνέχεια αφέθηκαν να υποστούν φυσική ζύμωση για 14 ημέρες σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Την 14η ημέρα, οι κόκκοι του ρυζιού διηθήθηκαν χρησιμοποιώντας ένα πανί μουσελίνας και εμποτίστηκαν ξανά σε μια νέα παρτίδα νερού (w/v). Το μούλιασμα των κόκκων του ρυζιού επαναλαμβανόταν έξι φορές κάθε 14 ημέρες, ανεβάζοντας τη συνολική διαδικασία εμποτισμού σε 84 ημέρες. Μετά από 84 ημέρες, η προκύπτουσα πάστα ρυζιού από κάθε υποείδος ρυζιού συλλέχθηκε και ξηράνθηκε σε φούρνο για να παραχθεί η κονιοποιημένη μορφή του bedak sejuk (Dzulfakar et al., 2016a). Στη συνέχεια το μπεντάκ σετζούκ διατηρήθηκε σε ψυγείο στους 4οC μέχρι περαιτέρω χρήση. Πριν από τα πειράματα, το bedak sejuk διαλύθηκε σε απεσταγμένο νερό και διηθήθηκε μέσω φίλτρου σύριγγας Millipore 0,22 μm για αποστείρωση.

Κυτταρικής καλλιέργειας

Η κυτταρική σειρά μελανώματος ποντικού B164A5 αγοράστηκε από την European Collection of Authenticated Cell Cultures (ECACC). Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) εμπλουτισμένο με 10 τοις εκατό εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS), 1 τοις εκατό μίγμα πενικιλλίνης-στρεπτομυκίνης (Pen/Strep, 10,000 IU/ml), γλυκόζη και L- γλουταμίνη. Τα κύτταρα στη συνέχεια επωάστηκαν σε υγρή ατμόσφαιρα στους 37oC σε 5 τοις εκατό CO2. Όταν η συρροή των κυττάρων φτάσει το 80 τοις εκατό, τα κύτταρα υποκαλλιεργήθηκαν (Public Health England, nd). Πριν από τη διεξαγωγή των δοκιμασιών, σχεδιάστηκε η καμπύλη ανάπτυξης των κυττάρων Β164Α5. Από την καμπύλη ανάπτυξης, προέκυψε ο χρόνος διπλασιασμού των 24 ωρών, με τον οποίο αυτό το εύρημα υποστηρίχθηκε από μια μελέτη από τους Danciu et al., (2013).

Δοκιμασία ΜΤΤ

Η κυτταροτοξικότητα και των δύο τύπωνμπεντάκ σετζούκπρος τα κύτταρα B164A5 αξιολογήθηκαν μέσω της δοκιμασίας βιωσιμότητας των κυττάρων 3-(4,5-διμεθυλθειαζολ-2-υλ)-2,5-βρωμιούχου διφαινυλ τετραζολίου (MTT) σύμφωνα με η μέθοδος του Mosmann (1983) με μικρές τροποποιήσεις. 200 μL 5 x 104 κυττάρων σπάρθηκαν σε 96-πλάκα με επίπεδο πυθμένα καλά και επωάστηκαν για 24 ώρες σε υγρή ατμόσφαιρα στους 37oC σε 5 τοις εκατό CO2. Μετά από 24 ώρες επώασης, το μέσο απορρίφθηκε και αντικαταστάθηκε με 200 μL PBS. Στη συνέχεια, τα κύτταρα εκτέθηκαν σε ακτινοβολία UVB στα 30 mJ/cm2 για 36,4 δευτερόλεπτα (Lin et al., 2002). Αμέσως μετά την έκθεση στην υπεριώδη ακτινοβολία, το PBS απορρίφθηκε και τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με αμφότερους τους τύπους bedak sejuk σε σειριακά αραιωμένες συγκεντρώσεις 6,25, 12,5, 25, 50 και 100 g/L. Όσον αφορά τον θετικό μάρτυρα, τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με μεναδιόνη σε σειριακά αραιωμένες συγκεντρώσεις 0,0625, 0,125, 0,25, 0,5 και 1 mM σύμφωνα με τους Basri et al., (2015), ενώ ο αρνητικός έλεγχος ήταν τα κύτταρα που δεν υποβλήθηκαν σε αγωγή. Μετά την αγωγή, τα κύτταρα επωάστηκαν για άλλες 24 ώρες. Μετά την περίοδο επώασης, 20 μL διαλύματος ΜΤΤ 5 mg/mL προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο και επωάστηκαν για 4 ώρες. Στη συνέχεια, 190 μL μίγματος απορρίφθηκαν από κάθε φρεάτιο και 200 ​​μL DMSO προστέθηκαν και επωάστηκαν για 15 λεπτά. Τελικά, η πλάκα αναταράχθηκε για 5 λεπτά και οι μετρήσεις απορρόφησης λήφθηκαν στα 570 nm χρησιμοποιώντας συσκευή ανάγνωσης μικροπλάκας. Το ποσοστό της κυτταρικής βιωσιμότητας υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας τον ακόλουθο τύπο: Κυτταρική βιωσιμότητα ( ποσοστό )= (Μέση OD των επεξεργασμένων κυττάρων)/(Μέση OD αρνητικού ελέγχου) ×100

Δοκιμασία αντιοξειδωτικής δύναμης μείωσης σιδήρου (FRAP).

οαντιοξειδωτικόικανότητες και των δύο τύπωνμπεντάκ σετζούκπροσδιορίστηκαν μέσω της δοκιμασίας FRAP όπως περιγράφεται από τους Benzie and Strain (1996). Είναι μια μέθοδος αξιολόγησης της αντιοξειδωτικής ισχύος μέσω της αναγωγής του σιδήρου (Fe3 plus) σε ιόντα σιδήρου (Fe2 plus) σε χαμηλό pH που έχει ως αποτέλεσμα το σχηματισμό έγχρωμου συμπλόκου σιδήρου-τριπυριδυλτριαζίνης. Πρώτον, το αντιδραστήριο εργασίας FRAP παρασκευάστηκε πρόσφατα με ανάμιξη ρυθμιστικού διαλύματος οξικού (30 mM, ρΗ 3,6), διαλύματος χλωριούχου σιδήρου (III) (FeCl3) (20 mM) και διαλύματος TPTZ (10 mM) σε αναλογία 10:1:1 . Το παρασκευασμένο αντιδραστήριο εργασίας FRAP στη συνέχεια διατηρήθηκε σε υδατόλουτρο στους 37oC και προστατεύτηκε από το φως. Ακολουθεί η προετοιμασία της καμπύλης βαθμονόμησης θειικού σιδήρου (ΙΙ) (FeSO4) χρησιμοποιώντας σειριακά αραιωμένες συγκεντρώσεις που κυμαίνονται από 100 – 1,000 μΜ. Το ασκορβικό οξύ χρησιμοποιήθηκε ως θετικός μάρτυρας και είχε παρασκευαστεί χρησιμοποιώντας σειριακά αραιωμένες συγκεντρώσεις που κυμαίνονται από 3,125 – 50 μg/mL, στο σκοτάδι (Hasiah et al., 2011). Όσον αφορά τα πειραματικά στάδια, 50 μL FeSO4, ασκορβικό οξύ και αμφότεροι οι τύποι bedak sejuk προστέθηκαν στα κατανεμημένα φρεάτια τους σε μια πλάκα 96-πηγαδιού. Μετά από αυτό, 175 μL θερμανθέντος αντιδραστηρίου εργασίας FRAP προστέθηκαν στη συνέχεια σε κάθε φρεάτιο. Στη συνέχεια, η πλάκα επωάστηκε στους 37oC για 5 λεπτά. Τέλος, οι μετρήσεις απορρόφησης λήφθηκαν στα 595 nm χρησιμοποιώντας συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών και οι τιμές FRAP εκφράστηκαν ως ισοδύναμη αντιοξειδωτική ικανότητα ασκορβικού οξέος (AEAC) (Gashahun and Solomon, 2019).

σκόνη κιστάνι

Στατιστική ανάλυση

Για την παρουσίαση δεδομένων χρησιμοποιήθηκε το λογισμικό SPSS v25. Τα δεδομένα κάθε δοκιμής από τρία ανεξάρτητα πειράματα (n=3) εκφράστηκαν ως μέσος όρος ± SEM. Χρησιμοποιήθηκε δοκιμή ANOVA μονής κατεύθυνσης για σύγκριση μεταξύ των μέσων. Το άλφα που χρησιμοποιήθηκε ήταν 0.05 και η τιμή p < 0,05="" θεωρήθηκε="" στατιστικά="">

Αποτελέσματα

Κυτταροτοξικότητα Indica και Japonica bedak sejuk

Η κυτταροτοξικότητα και των δύο τύπωνμπεντάκ σετζούκαξιολογήθηκε έναντι των επαγόμενων από την UVB κυττάρων μελανώματος B164A5 μέσω της δοκιμασίας ΜΤΤ. Η μεναδιόνη, η οποία χρησιμοποιήθηκε ως θετικός μάρτυρας έδειξε κυτταροτοξικότητα με IC50 0.04 ± {0,02 mM (Εικόνα 1). Κάθε συγκέντρωση μεναδιόνης ήταν στατιστικά σημαντική (p < 0,05)="" σε="" σύγκριση="" με="" τον="" αρνητικό="" έλεγχο.="" ενώ="" το="" indica="" και="" το="" japonicabedak="" sejuk="" δεν="" έδειξαν="" κυτταροτοξικότητα,="" επομένως="" δεν="" ελήφθησαν="" τιμές="" ic50.="" και="" οι="" δύο="" τύποι="" bedak="" sejuk="" είχαν="" μείωση="" της="" κυτταρικής="" βιωσιμότητας="" στην="" αρχή="" αλλά="" σταδιακά="" αυξήθηκαν="" καθώς="" αυξανόταν="" η="" συγκέντρωση="" (εικόνες="" 2="" και="" 3).="" επιπλέον,="" όλες="" οι="" συγκεντρώσεις="" και="" των="" δύο="" τύπων="" μπεντάκ="" σετζούκ="" δεν="" ήταν="" στατιστικά="" σημαντικές="" (p=""> 0,05) σε σύγκριση με τον αρνητικό έλεγχο. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι και οι δύο τύποι bedak sejuk δεν ήταν κυτταροτοξικοί στα κύτταρα μελανώματος B164A5 που προκαλούνται από την UVB.

Αντιοξειδωτικές ιδιότητες Indica και Japonica bedak sejuk

Οι αναγωγικές δυνατότητες και των δύο τύπων μπεντάκ σετζούκ όπωςαντιοξειδωτικάπροσδιορίστηκαν μέσω της ανάλυσης FRAP. Οι τιμές FRAP εκφράστηκαν ως ισοδύναμη αντιοξειδωτική ικανότητα ασκορβικού οξέος (AEAC) στη μονάδα μg AA (ασκορβικό οξύ)/g του bedak sejuk. Οι τιμές FRAP για 50 και 100 g/L Indica bedak sejuk ήταν 0.003 ± {{ 17}}.001 και 0,004 ± 0,0003 μg AA/g bedak sejuk αντίστοιχα (Εικόνα 4). Όσον αφορά το Japonica bedak sejuk, οι τιμές FRAP για 50 και 100 g/L ήταν 0,004 ± 0,0003 και 0,01 ± 0,0007 μg AA/gμπεντάκ σετζούκαντίστοιχα, δείχνοντας έναν δοσοεξαρτώμενο τρόπο (Εικόνα 4).

Όταν συγκρίθηκαν οι τιμές FRAP του Indica bedak sejuk για 50 και 100 g/L, δεν ήταν στατιστικά σημαντικό (p=0.803). Όμως, οι τιμές FRAP του Japonica bedak sejuk για 50 και 100 g/L ήταν στατιστικά σημαντικές (p=0.006) όταν συγκρίθηκαν. Επιπλέον, η τιμή FRAP του Japonica bedak sejuk για 100 g/L που δείχνει την υψηλότερη αντιοξειδωτική ικανότητα ήταν στατιστικά σημαντική σε σύγκριση με τις τιμές FRAP της Indicaμπεντάκ σετζούκτόσο για 50 (p=0.001) όσο και για 100 g/L (ρ=0.003).

Συζήτηση

Τον τελευταίο καιρό, η χρήση φυσικών προϊόντων στην περιποίηση της επιδερμίδας παρουσιάζει αυξητική τάση. Τα περισσότερα από αυτά τα φυσικά προϊόντα έχουν αποδειχθεί ότι έχουναντιοξειδωτικόχαρακτηριστικά εκτός από την παροχή προστασίας στο δέρμα από την υπεριώδη ακτινοβολία (Abdul Wahab et al., 2014). Ένα παράδειγμα τέτοιου προϊόντος είναι το bedak sejuk, ένα καλλυντικό προϊόν με βάση το ρύζι που έχει υποστεί ζύμωση. Για γενιές,μπεντάκ σετζούκΟι παστίλιες αναμιγνύονται με νερό και εφαρμόζονται τοπικά στο δέρμα κάποιου ως μάσκα προσώπου για μια νύχτα (Dzulfakar et al., 2016c; Johar et al., 2018).

Στη ζύμωση κόκκων ρυζιού για την παραγωγή μπεντάκ σετζούκ, συνήθως εμπλέκονται βακτήρια γαλακτικού οξέος (LAB), μαζί με τη μούχλα και τη μαγιά (Dzulfakar et al., 2015a; Dzulfakar et al., 2016b). Η χρήση τουκαλλυντικόπροϊόντα που έχουν αυτό το συστατικό ρυζιού που έχει υποστεί ζύμωση LAB έχει ως αποτέλεσμα τη διαστολή και την απαλότητα του προϊόντος καθώς και μια αίσθηση υγρασίας κατά την εφαρμογή στο δέρμα (Sawaki et al., 2010). Μια παρόμοια εμπειρία αναφέρεται επίσης απόμπεντάκ σετζούκχρήστες, όπου η εφαρμογή του bedak sejuk παράγει μια δροσερή αίσθηση (Dzulfakar et al., 2015a). Υπάρχει επίσης μια ενδιαφέρουσα σχέση μεταξύ του δέρματος και της ζύμωσης από το LAB, όπου το νερό εμποτισμού LAB που χρησιμοποιείται κατά τη ζύμωση κόκκων ρυζιού, περιέχει γαλακτικό οξύ και άλλα αμινοξέα που συμβάλλουν στην ενυδάτωση του δέρματος. Αυτά τα οφέλη κάνουν το νερό εμποτισμού LAB χρήσιμο ως πηγή καλλυντικών προϊόντων. Ως εκ τούτου, ο συνδυασμός ενός υποστρώματος ή μέσου όπως οι κόκκοι ρυζιού και τα στελέχη LAB μπορεί να επιφέρει καλλυντικά αποτελέσματα όπως αντιοξειδωτικά αποτελέσματα, έλεγχο του pH και πρόληψη του στρες των κυττάρων (Izawa and Sone, 2014). Αυτά τα οφέλη συνάδουν με τις στρατηγικές χημειοπρόληψης του μελανώματος. Ωστόσο, το bedak sejuk δεν έχει ακόμη διερευνηθεί για τις επιπτώσεις του στα κακοήθη κύτταρα του δέρματος στο εργαστήριο. Ως εκ τούτου, ως προκαταρκτική μελέτη για έναν πιθανό παράγοντα χημειοπροφύλαξης μελανώματος, τα κύτταρα μελανώματος ποντικού B164A5 που έχουν προκληθεί από την UVB είναι ένα κατάλληλο μοντέλο καρκίνου.

Πρώτον, στην ανάλυση MTT, βρέθηκε ότι η Indica και η Japonicaμπεντάκ σετζούκδεν ήταν κυτταροτοξικά για τα επαγόμενα από την UVB κύτταρα μελανώματος B164A5. Ωστόσο, σημειώθηκε ότι υπήρξε μείωση στη βιωσιμότητα των κυττάρων σε χαμηλότερες συγκεντρώσεις bedak sejuk, ακολουθούμενη από αύξηση της βιωσιμότητας των κυττάρων σε υψηλότερες συγκεντρώσεις bedak sejuk. Αυτή η μείωση στη βιωσιμότητα των κυττάρων μπορεί να αποδοθεί στο γεγονός ότι οι ακτίνες UVB είναι κυτταροτοξικές προς τα κύτταρα, σε αυτήν την περίπτωση, τα κύτταρα B164A5 (Pavel et al., 2017). Ταυτόχρονα, οι χαμηλότερες συγκεντρώσεις του bedak sejuk δεν ήταν αρκετές για να αυξήσουν τον αριθμό των κυττάρων που έχουν προκληθεί από την UVB. Ανεξάρτητα από αυτό, η μείωση στη βιωσιμότητα των κυττάρων δεν έπεσε κάτω από το όριο του 50 τοις εκατό και ως εκ τούτου, δεν μπόρεσε να ληφθεί IC50 και για τους δύο τύπους μπεντάκ σετζούκ. Ως αποτέλεσμα, δύο από τις υψηλότερες δόσεις, 50 g/L και 100 g/L επιλέχθηκαν ως δόσεις θεραπείας για την επόμενη δοκιμασία.

Στην ανάλυση FRAP, βρέθηκε ότι το Japonica bedak sejuk είχε υψηλότεροαντιοξειδωτικόχωρητικότητας σε σύγκριση με αυτή της Indicaμπεντάκ σετζούκ. Οι διαφορές θα μπορούσαν να εξηγηθούν από το γεγονός ότι οι κόκκοι ρυζιού Japonica καλλιεργούνται σε εύκρατες και ψυχρότερες περιοχές της Ασίας, ενώ οι κόκκοι ρυζιού Indica καλλιεργούνται σε όλη την τροπική Ασία (Garris et al., 2005). Η θερμοκρασία του περιβάλλοντος παίζει ουσιαστικό ρόλο στις αντιοξειδωτικές δραστηριότητες των φυτών και τα φυτά που καλλιεργούνται σε πιο κρύο καιρό έχουν πιο έντονες αντιοξειδωτικές δράσεις σε αντίθεση με τα φυτά που καλλιεργήθηκαν σε θερμότερο καιρό. Αυτή η αύξηση στην αντιοξειδωτική δράση μπορεί να αποδοθεί στην παραγωγή περισσότερων φυτοχημικών καθώς τα φυτά υφίστανται στρες σε ψυχρότερο καιρό (Kumar et al., 2017).

Υπάρχουν επίσης άλλα προϊόντα ρυζιού που έχουν υποστεί ζύμωση που έχουν δείξει πολλά υποσχόμενα αποτελέσματα. Πρώτον, υπάρχει το διήθημα ζύμωσης Galactomyces (GFF) το οποίο είναι υποπροϊόν της ζύμωσης ρυζιού από τη μαγιά Galactomyces. Το εκχύλισμα GFF περιέχει ένα μοναδικό μείγμα βιταμινών, μετάλλων, μικρών πεπτιδίων και ολιγοσακχαριτών που χρησιμοποιούνται ωςκαλλυντικόσυστατικά σε προϊόντα περιποίησης δέρματος. Το απόσπασμα έχει αποδείξειαντιοξειδωτικόχαρακτηριστικά προστατεύοντας τα φυσιολογικά ανθρώπινα επιδερμικά μελανοκύτταρα (NHEM) από το οξειδωτικό στρες (Woolridge Cooper, 2018). Αυτά τα ευρήματα του GFF ήταν παρόμοια με τα ευρήματα τουμπεντάκ σετζούκσε αυτη τη ΜΕΛΕΤΗ.

Το πίτουρο ρυζιού έχει επίσης ισχυρές αντιοξειδωτικές δράσεις σε σημείο που οδηγεί σε κυτταροτοξικότητα προς τα μελανοκύτταρα. Όμως, όταν το πίτουρο ρυζιού ζυμώνεται, η κυτταροτοξικότητα του εκχυλίσματος πίτουρου ρυζιού προς τα κύτταρα B16F1 έχει εξαλειφθεί. Αυτό δείχνει ότι η ζύμωση του εγκεφάλου του ρυζιού παρήγαγε νέες ευεργετικές ενώσεις με βιολογικές λειτουργίες, αν και οι ακριβείς ενώσεις δεν έχουν ακόμη διευκρινιστεί (Chung et al., 2009).

Τέλος, το νερό που μουλιάζει το ρύζι από τη σκόνη τουμπεντάκ σετζούκΣτην πραγματικότητα περιέχει αμινοξέα που θα μπορούσαν να είναι ευεργετικά για καλλυντικές εφαρμογές. Υπάρχουν 16 από τα 17 αμινοξέα που ανιχνεύονται στο Indica bedak sejuk καθώς και στο νερό που μουλιάζει. Το γλουταμινικό οξύ ήταν η υψηλότερη συγκέντρωση αμινοξέος που βρέθηκε τόσο στο Indica bedak sejuk όσο και στο νερό του εμποτισμού (Johar et al., 2018). Η γλουταμίνη (ένα παράγωγο γλουταμινικού οξέος), μαζί με την αργινίνη, την τυροσίνη και τη λυσίνη που ανιχνεύονται στο μπεντάκ σετζούκ και στο νερό εμποτισμού του είναι από τα κύρια αμινοξέα που χρησιμοποιούνται στις βιομηχανίες καλλυντικών (Ha et al., 2018). Εκτός αυτού, τα αμινοξέα σεκαλλυντικότα προϊόντα λειτουργούν ωςαντιοξειδωτικά(Ivanov et al., 2013) και η περιεκτικότητα σε αμινοξέα στο Indica bedak sejuk ήταν πολύ υψηλότερη σε σύγκριση με το εμποτισμένο νερό του. Ως εκ τούτου, η εφαρμογή του bedak sejuk ήταν πιο αποτελεσματική όσον αφορά την περιεκτικότητα σε αμινοξέα σε σύγκριση με το νερό εμποτισμού (Johar et al., 2018).

Συνοπτικά, Indica και Japonicaμπεντάκ σετζούκπρέπει να διερευνηθούν περαιτέρω προτού ειπωθεί ότι έχουν τη δυνατότητα ως παράγοντας χημειοπροφύλαξης του μελανώματος που είναι ικανός (1) να αποτρέψει το μελάνωμα, (2) να αποτρέψει την ανάπτυξη κακοήθους μελανώματος από προκακοήθεις βλάβες ή (3) να αποτρέψει την επανεμφάνιση του μελανώματος μετά από επιτυχή θεραπεία μελανώματος (Chhabra et al., 2017).