Οι αντιγηραντικές επιδράσεις της Ludwigia Octovalvis σε ποντίκια Drosophila Melanogaster και SAMP8 Μέρος 2

Χημική σύνθεση του LOE

Για τον εντοπισμό των μηχανισμών με τους οποίους το LOE προκαλεί παράταση της διάρκειας ζωής στις μύγες, η χημική σύνθεση του LOE αναλύθηκε με GC-MS. Δεκαεπτά κύριες κορυφές παρατηρήθηκαν στο χρωματογράφημα συνολικών ιόντων (Εικ. 4) και αναγνωρίστηκαν ως οι γνωστές ενώσεις που παρατίθενται στον Πίνακα 2.

Το γλυκοσίδιο του cistanche μπορεί επίσης να αυξήσει τη δραστηριότητα του SOD στους ιστούς της καρδιάς και του ήπατος και να μειώσει σημαντικά την περιεκτικότητα σε λιποφουσκίνη και MDA σε κάθε ιστό, καθαρίζοντας αποτελεσματικά διάφορες δραστικές ρίζες οξυγόνου (OH-, H2O2, κ.λπ.) και προστατεύοντας από βλάβη του DNA που προκαλείται από ρίζες ΟΗ. Οι φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες του Cistanche έχουν ισχυρή ικανότητα δέσμευσης ελεύθερων ριζών, υψηλότερη αναγωγική ικανότητα από τη βιταμίνη C, βελτιώνουν τη δραστηριότητα του SOD στο εναιώρημα σπέρματος, μειώνουν την περιεκτικότητα σε MDA και έχουν μια ορισμένη προστατευτική δράση στη λειτουργία της σπερματικής μεμβράνης. Οι πολυσακχαρίτες Cistanche μπορούν να ενισχύσουν τη δραστηριότητα των SOD και GSH-Px σε ερυθροκύτταρα και ιστούς πνευμόνων πειραματικά γηρασμένων ποντικών που προκαλούνται από D-γαλακτόζη, καθώς και να μειώσουν την περιεκτικότητα σε MDA και κολλαγόνο στους πνεύμονες και στο πλάσμα και να αυξήσουν την περιεκτικότητα σε ελαστίνη. ένα καλό αποτέλεσμα σάρωσης στο DPPH, παρατείνει το χρόνο της υποξίας σε γηρασμένα ποντίκια, βελτιώνει τη δραστηριότητα του SOD στον ορό και καθυστερεί τον φυσιολογικό εκφυλισμό του πνεύμονα σε πειραματικά γηρασμένα ποντίκια Με τον κυτταρικό μορφολογικό εκφυλισμό, τα πειράματα έχουν δείξει ότι το Cistanche έχει την καλή αντιοξειδωτική ικανότητα και έχει τη δυνατότητα να είναι φάρμακο για την πρόληψη και τη θεραπεία ασθενειών της γήρανσης του δέρματος. Ταυτόχρονα, η εχινακοσίδη στο Cistanche έχει σημαντική ικανότητα να καθαρίζει τις ελεύθερες ρίζες DPPH και μπορεί να καθαρίζει δραστικά είδη οξυγόνου, να αποτρέπει την αποικοδόμηση του κολλαγόνου που προκαλείται από ελεύθερες ρίζες και επίσης έχει μια καλή επίδραση επιδιόρθωσης στη βλάβη των ανιόντων από τις ελεύθερες ρίζες θυμίνης.

Κάντε κλικ στο Cistanche Chemist Warehouse

【Για περισσότερες πληροφορίες:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Το LOE εξασθενεί την οξεία οξειδωτική βλάβη

Δεδομένου ότι το οξειδωτικό στρες είναι η πιο δημοφιλής θεωρία για την εξήγηση του τρόπου με τον οποίο συμβαίνει η γήρανση σε μοριακό επίπεδο, αποφασίσαμε να εξετάσουμε τη δραστηριότητα σάρωσης ριζών DPPH του LOE ως κρίσιμο δείκτη της αντιοξειδωτικής του ικανότητας. Στις αναλύσεις μας, το LOE είχε ισχυρή δραστηριότητα σάρωσης ριζών DPPH (IC50 3.15 ug/ml), μεταξύ της δραστηριότητας του ασκορβικού οξέος (IC50 1.31 ug/ml) και εκείνης της ρεσβερατρόλης ( IC50 7.86 ug/ml), τα οποία χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες (Εικ. 5α). Ωστόσο, οι δραστηριότητες σάρωσης ριζών DPPH των δύο πιο άφθονων ενώσεων που εντοπίστηκαν στο LOE, - σιτοστερόλη και σκουαλένιο ανιχνεύθηκαν μόνο σε ελάχιστα επίπεδα (Εικ. 5α). Η αντιοξειδωτική ικανότητα του LOE θα μπορούσε να αποδοθεί στην πλούσια σε αντιοξειδωτικά σύνθεσή του, καθώς ένα υψηλό επίπεδο πολυφαινολών (146,3±3,1 mg ισοδύναμο γαλλικού οξέος ανά g ξηρού βάρους· Πίνακας 3) υπήρχε στο παρασκεύασμά μας LOE και τα φλαβονοειδή ήταν κύριο συστατικό μεταξύ των πολυφαινολών (90,2±2,6 mg ισοδύναμου ρουτίνης ανά g ξηρού βάρους).

Επομένως, δοκιμάσαμε περαιτέρω τις αντιοξειδωτικές ιδιότητες του LOE εκθέτοντας 10-θηλυκές μύγες CS που υποβλήθηκαν σε αγωγή με LOE σε paraquat (μεθυλοβιογόνο, μια χημική ουσία που είναι γνωστό ότι παράγει αντιδραστικά είδη οξυγόνου). Βρήκαμε ότι οι μύγες που έλαβαν συμπλήρωμα LOE στην τροφή τους για 10 ημέρες έδειξαν αυξημένη αντίσταση στη θνησιμότητα που προκαλείται από το paraquat (Εικ. 5β). Αυτό το αποτέλεσμα επιβεβαιώθηκε περαιτέρω με την ανάλυση των επιπέδων οξειδωτικής βλάβης σε μύγες που είχαν υποβληθεί σε θεραπεία με paraquat για 12 ώρες. Χρησιμοποιήσαμε το 4-hydroxynonenal (HNE), ένα πρωτεϊνικό προϊόν προσθήκης που παράγεται από προϊόντα οξείδωσης λιπιδίων, ως δείκτη οξειδωτικής βλάβης. Αν και το συμπλήρωμα LOE δεν έδειξε καμία επίδραση στο βασικό επίπεδο της ΗΝΕ σε μύγες ηλικίας 10-ημέρας, μείωσε σημαντικά τη συσσώρευση ΗΝΕ σε μύγες που έλαβαν θεραπεία με 20 mM paraquat (Εικ. 5γ).

-Η σιτοστερόλη είναι ένα σημαντικό συστατικό στο LOE που συμβάλλει στην επέκταση της διάρκειας ζωής

Εξετάσαμε περαιτέρω τις επιδράσεις της -σιτοστερόλης και του σκουαλενίου στη διάρκεια ζωής των μυγών. Περιέργως, - η σιτοστερόλη προκάλεσε παράταση της διάρκειας ζωής σε θηλυκές μύγες CS (Εικ. 6a) με δοσοεξαρτώμενο τρόπο. Αυτό το αποτέλεσμα υπέρ της μακροζωίας, ωστόσο, δεν παρατηρήθηκε σε θηλυκές μύγες CS που λαμβάνουν τις ίδιες δόσεις σκουαλενίου (Εικ. 6β).

Η οδός AMPK έχει αποδειχθεί ότι μεσολαβεί στην επέκταση της διάρκειας ζωής από το DR τόσο στο C. elegans (Apfeld et al. 2004; Greer et al. 2007) όσο και στις μύγες (Stenesen et al. 2013). Επομένως, εξετάσαμε εάν το LOE και η -σιτοστερόλη θα μπορούσαν να ρυθμίσουν τη διάρκεια ζωής διαμορφώνοντας την οδό AMPK. Χρησιμοποιώντας κύτταρα Drosophila S2, βρήκαμε ότι το LOE και η -σιτοστερόλη θα μπορούσαν να ενισχύσουν σημαντικά τη φωσφορυλίωση της ΑΜΡΚ (Εικ. 6γ). Παρόμοιες παρατηρήσεις έγιναν όταν τα κύτταρα διατηρήθηκαν υπό συνθήκες DR (0,5 χ μέσο) (Εικ. 6c). Εάν η AMPK είχε σημαντικό ρόλο στην επέκταση της διάρκειας ζωής που προκαλείται από τη -σιτοστερόλη στις μύγες, η απώλεια της AMPK θα αμβλύνει το αποτέλεσμα μακροζωίας από -σιτοστερόλη. Δοκιμάσαμε αυτήν την υπόθεση καταρρίπτοντας την έκφραση AMPK, ειδικά στα παχιά σώματα ενήλικων μυγών (Εικ. S1). Το λίπος σώμα της Drosophila είναι το ισοδύναμο της μύγας του ήπατος και του λιπώδους ιστού των θηλαστικών και είναι υπεύθυνο για το μεταβολισμό. Η υπερέκφραση ή η πτώση της AMPK στα λιπώδη κύτταρα του σώματος έχει συσχετιστεί με αυξημένη ή μειωμένη διάρκεια ζωής της μύγας, αντίστοιχα (Stenesen et al. 2013). Συνδυάσαμε ένα αλληλόμορφο UAS-AMPK.RNAi με ένα επαγόμενο από RU486- GeneSwitch GAL4 για το λίπος σώμα (S106-GAL4). Οι ενήλικες μύγες που φέρουν κατάλληλα γενετικά στοιχεία τυχαιοποιήθηκαν σε τρόφιμα που περιείχαν RU486 (ο παράγοντας ενεργοποίησης για τους οδηγούς GeneSwitch-Gal4) και/ή - σιτοστερόλη. Βρήκαμε ότι η επέκταση της διάρκειας ζωής που προκαλείται από τη σιτοστερόλη δεν παρατηρήθηκε όταν η έκφραση AMPK καταρρακώθηκε ειδικά στο λιπώδες σώμα των ενήλικων μυγών (Εικ. 6δ). Μαζί, αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν ότι η σιτοστερόλη που προέρχεται από το LOE μπορεί να ρυθμίσει τη διάρκεια ζωής, τουλάχιστον εν μέρει, μέσω της ενεργοποίησης της AMPK στο λιπώδη σώμα των ενήλικων μυγών.

Συζήτηση

Οι μύγες έχουν σχετικά μικρή διάρκεια ζωής, που κυμαίνεται από μερικές εβδομάδες έως αρκετούς μήνες, ανάλογα με τις διατροφικές και άλλες περιβαλλοντικές συνθήκες. Για παράδειγμα, η αλλαγή της πρόσληψης θερμίδων, οι συνθήκες ζευγαρώματος και η θερμοκρασία περιβάλλοντος μπορούν όλα να αλλάξουν σημαντικά τη διάρκεια ζωής της μύγας (Bauer et al. 2004). Σε καλά καθορισμένες συνθήκες, καταφέραμε να αποδείξουμε ότι τα συμπληρώματα διατροφής με LOE θα μπορούσαν να παρατείνουν τη διάρκεια ζωής στις μύγες χωρίς προφανή αρνητικό συμβιβασμό.

Η ανάπτυξη των μιμητικών DR έχει γίνει ένα αναδυόμενο πεδίο για την έρευνα κατά της γήρανσης. 2-Η δεοξυγλυκόζη, ένας αναστολέας της γλυκόλυσης (Lane et al. 1998), και η μετφορμίνη, η οποία διεγείρει την AMPK (Anisimov et al. 2003), είναι δύο μόρια που διερευνώνται επί του παρόντος ως μιμητικά DR. Ωστόσο, η μακροχρόνια χορήγηση 2- δεοξυγλυκόζης ή μετφορμίνης μπορεί να προκαλέσει ανεπιθύμητες παρενέργειες, συμπεριλαμβανομένης της καρδιακής ανεπάρκειας και της γαλακτικής οξέωσης, καθιστώντας τα απίθανα υποψήφια για χρήση ως μιμητικά DR (Ingram et al. 2004, Sinclair 2005). Οι μύγες που έλαβαν μετφορμίνη δεν έδειξαν επίσης ευεργετική επίδραση στην παράταση της διάρκειας ζωής (Slack et al. 2012). Έτσι, οι πολυφαινόλες φυτικής προέλευσης όπως η ρεσβερατρόλη μπορεί να παρέχουν μια εναλλακτική επιλογή. Η ρεσβερατρόλη έχει αποδειχθεί ότι παρατείνει τη διάρκεια ζωής της ζύμης, των σκουληκιών και των μυγών μιμούμενος το DR μέσω ενός μονοπατιού που εξαρτάται από τον Sir{10}}(Wood et al. 2004). Αν και η ρεσβερατρόλη δεν επέκτεινε τη διάρκεια ζωής των ποντικών που τρέφονταν κατά βούληση, βελτίωσε την υγεία και την επιβίωση των παχύσαρκων ποντικών που τρέφονταν με δίαιτα υψηλής θερμιδικής αξίας (Baur et al. 2006; Pearson et al. 2008). Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η ρεσβερατρόλη μπορεί να ενισχύσει την αντίσταση στο στρες που προκαλείται από υψηλές θερμίδες, κάτι που είναι σύμφωνο με τα αποτελέσματα που παρατηρήθηκαν σε μελέτες που δείχνουν ότι η ρεσβερατρόλη προσέφερε κυτταρική προστασία από στρες, συμπεριλαμβανομένης της οξειδωτικής βλάβης (Araki et al. 2004) και της ακτινοβολίας γάμμα (Howitz et al. 2003).

Τα δεδομένα μας υποδηλώνουν ότι το LOE μπορεί να δράσει εν μέρει ως μιμητικό DR. Βρήκαμε ότι το LOE επέκτεινε σημαντικά τη διάρκεια ζωής των μυγών που τρέφονταν με δίαιτα υψηλής θερμιδικής αξίας, αλλά δεν έδειξε πρόσθετο αποτέλεσμα υπό συνθήκες DR (Εικ. 1). Το LOE μείωσε επίσης τη γνωστική έκπτωση που σχετίζεται με την ηλικία, διατηρώντας την σε επίπεδο παρόμοιο με αυτό που παρατηρείται στις μύγες υπό συνθήκες DR. Δείξαμε ότι αυτές οι επιδράσεις που μοιάζουν με DR του LOE δεν οφείλονταν στη χαμηλότερη κατανάλωση τροφής που προκλήθηκε από το LOE (Εικ. 2 και 3). Ούτε άλλες τυπικές συζευγμένες με DR φυσιολογικές αλλαγές, όπως μειωμένη γυναικεία γονιμότητα ή ενισχυμένη κινητική δραστηριότητα, παρατηρήθηκαν σε μύγες που έλαβαν θεραπεία με LOE (Εικ. 2). Η DR έχει αποδειχθεί ότι αυξάνει τη μιτοχονδριακή δραστηριότητα (Nisoli et al. 2005; Lopez-Lluch et al. 2006), αλλά καθυστερεί ή μειώνει το οξειδωτικό στρες και τη βλάβη στις μύγες (Zheng et al. 2005), ποντίκια (Qiu et al. 2010 ), πιθήκους (Zainal et al. 2000) και γυναίκες (Buchowski et al. 2012). Αυτό το παρατηρούμενο αποτέλεσμα έχει προταθεί ότι είναι ένα φαινόμενο "μιτοχόρμησης", μια υπόθεση ότι η αυξημένη μιτοχονδριακή δραστηριότητα και η παραγωγή ROS μπορούν να ενεργοποιήσουν ένα εγγενές πρόγραμμα άμυνας, το οποίο οδηγεί σε βελτιωμένη αντοχή στο στρες και πιθανώς παράταση της διάρκειας ζωής (Schulz et al. 2007). Βρήκαμε ότι το LOE είχε ισχυρή δραστηριότητα σάρωσης ριζών DPPH και ότι μείωσε την οξειδωτική βλάβη και τη θνησιμότητα που προκαλείται από το paraquat στις μύγες (Εικ. 5), υποστηρίζοντας περαιτέρω την υπόθεσή μας ότι το LOE μπορεί να δρα, τουλάχιστον εν μέρει, ως μιμητικό DR.

Οι χημικές μας αναλύσεις επιβεβαίωσαν ότι το LOE ήταν μια πλούσια πηγή αντιοξειδωτικών, συμπεριλαμβανομένων πολυφαινολικών ενώσεων, φυτοστερόλων και σκουαλενίου (Εικ. 4 και Πίνακας 2). Έχει αναφερθεί ότι η σιτοστερόλη μπορεί να ρυθμίζει προς τα πάνω την έκφραση πρωτεΐνης και την αντιοξειδωτική δράση της δισμουτάσης υπεροξειδίου του μαγγανίου μέσω της οδού κινάσης οιστρογόνου/φωσφατιδυλινοσιτόλης σε μακροφάγα (Vivancos and Moreno 2005). Το διαιτητικό συμπλήρωμα σκουαλενίου αποδείχθηκε επίσης ότι μειώνει την οξειδωτική βλάβη που σχετίζεται με την ηλικία και ότι διατηρεί την ενεργειακή κατάσταση των ηπατικών μιτοχονδρίων σε ηλικιωμένους αρουραίους (Buddhan et al. 2007). Αν και η -σιτοστερόλη και το σκουαλένιο ήταν οι δύο πιο άφθονες ενώσεις που ταυτοποιήθηκαν στο LOE με αναλύσεις GC-MS, καμία δεν έδειξε προφανή δραστηριότητα σάρωσης ριζών DPPH στο σύστημα δοκιμασίας μας (Εικ. 5). Είναι πιθανό ότι οι αντιοξειδωτικές δραστηριότητες του LOE θα μπορούσαν να περιλαμβάνουν δεσμευτές ελεύθερων ριζών όπως πολυφαινολικές ενώσεις, ενώ - η σιτοστερόλη και το σκουαλένιο θα μπορούσαν να δράσουν μέσω άλλων οδών, όπως συζητήθηκε παραπάνω. Άλλες παραδοσιακές και ολοκληρωμένες ιατρικές πρακτικές όπως το R. rosea και το C. longa έχει αποδειχθεί ότι παρατείνουν τη διάρκεια ζωής των μυγών μέσω μονοπατιών που σχετίζονται με την αντιοξείδωση και τη ρύθμιση γνωστών γονιδίων που σχετίζονται με τη γήρανση (Lee et al. 2010· Schriner et al. 2013, 2009). Ωστόσο, τα εκχυλίσματα βοτάνων συνήθως περιέχουν πολλές ενώσεις που απαιτούν συστηματικές βιοχημικές αναλύσεις για ταυτοποίηση. Επομένως, μια μηχανιστική ερμηνεία είναι δύσκολη χωρίς την ταυτοποίηση μιας καθαρής ένωσης. Στην παρούσα μελέτη, εντοπίσαμε τη σιτοστερόλη ως κύριο συστατικό που συνέβαλε στην παράταση της διάρκειας ζωής της δραστηριότητας του LOE. Τα δεδομένα μας υποδηλώνουν ότι η επέκταση της διάρκειας ζωής που προκαλείται από τη σιτοστερόλη απαιτεί ενεργοποίηση AMPK στο λιπώδη σώμα των ενήλικων μυγών. Αυτό συμφωνεί σε μεγάλο βαθμό με προηγούμενες αναφορές που καταδεικνύουν ότι το AMPK είναι ο κύριος αισθητήρας θρεπτικών συστατικών και μεσολαβεί στην επέκταση της διάρκειας ζωής από το DR στο C. elegans (Apfeld et al. 2004; Greer et al. 2007) και τις μύγες (Stenesen et al. 2013).

Είναι επιθυμητό οι παρεμβάσεις μακροζωίας όχι μόνο να παρατείνουν τη διάρκεια ζωής αλλά και να καθυστερούν την εμφάνιση και τη νοσηρότητα των ασθενειών που σχετίζονται με την ηλικία, δηλαδή να αυξάνουν τόσο τη διάρκεια ζωής όσο και την υγεία. Οι προγνωστικές επιδράσεις του LOE που περιγράφουμε τόσο σε μύγες όσο και σε ποντίκια SAMP8 μπορεί επίσης να έχουν μεγάλο ενδιαφέρον για τον τομέα της γήρανσης. Έχει αποδειχθεί ότι τα ποντίκια SAMP8 παρουσιάζουν ελλείμματα που σχετίζονται με την ηλικία στη διατήρηση της μνήμης από την ηλικία των 2 μηνών, όταν ελέγχονται σε εργασίες παθητικής αποφυγής (Miyamoto et al. 1986). Σε μια δοκιμή αποφυγής σοκ, τα ποντίκια SAMP8 παρουσιάζουν επίσης σημαντική έκπτωση στην απόκτηση και τη διατήρηση της μνήμης από 6 έως 9 μηνών, σε σύγκριση με νεαρά ποντίκια SAMP8 (Flood και Morley 1993). Χρησιμοποιώντας νέα αναγνώριση αντικειμένων και εργασίες λαβύρινθου ανυψωμένου Τ, μπορούσαμε να παρατηρήσουμε σαφή ελλείμματα που σχετίζονται με την ηλικία στη διατήρηση της μνήμης μεταξύ 3- και 8-μηνών ποντικών SAMP8, αν και δεν υπήρχαν διαφορές κατά την περίοδο απόκτησης η εργασία λαβύρινθου ανυψωμένου Τ (Εικ. 3). Αυτές οι παρατηρήσεις αποτελούν περαιτέρω απόδειξη ότι τα ποντίκια SAMP8 εμφανίζουν πρώιμη έναρξη γνωστικών ελλειμμάτων που σχετίζονται με την ηλικία και ότι η έκπτωση γίνεται χειρότερη με την ηλικία. Ωστόσο, η μακροχρόνια θεραπεία με LOE (περισσότερο από 5 μήνες) σε ποντικούς SAMP8 μείωσε την σχετιζόμενη με την ηλικία μείωση στη διατήρηση της μνήμης χωρίς να επηρεάσει τη σωματική δραστηριότητα, την πρόσληψη τροφής, την κατανάλωση νερού ή το σωματικό βάρος (Εικ. 3). Δεν παρατηρήσαμε παρενέργειες σε ποντικούς που έλαβαν θεραπεία με LOE για 5 μήνες (μη δημοσιευμένες παρατηρήσεις). Αυτά τα ευρήματα συμφωνούν σε μεγάλο βαθμό με μια πρόσφατη αναφορά που καταδεικνύει ότι η επαναλαμβανόμενη χορήγηση του L. octovalvis για 28 ημέρες σε ποντίκια (800 mg/kg≈2.400 ug/ημέρα έναντι 400 ug/ημέρα που χρησιμοποιήθηκαν στη μελέτη μας) δεν προκάλεσε θνησιμότητα ή τοξικολογική επιπτώσεις (Kadum Yakob et al. 2012).

Συνοπτικά, προσδιορίσαμε το LOE ως μια νέα παρέμβαση κατά της γήρανσης, ικανή να παρατείνει τη διάρκεια ζωής των μυγών και να μετριάσει τη γνωστική έκπτωση που σχετίζεται με την ηλικία τόσο στις μύγες όσο και στα ποντίκια SAMP8. Το GC-MS και άλλες βιοχημικές αναλύσεις υποδηλώνουν ότι το LOE μπορεί να ασκήσει τις αντιγηραντικές του επιδράσεις μειώνοντας την οξειδωτική βλάβη και ενεργοποιώντας μονοπάτια που σχετίζονται με την AMPK.

Ευχαριστίες Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε τους Chuan-Hao Lai και Hao-Wei Wang (Hsiehyu Biotech Company Ltd.) και τον Shang-Tse Lee (Εθνικό Πανεπιστήμιο της Ταϊβάν) για την τεχνική βοήθειά τους. Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε τη Fly Core στην Ταϊβάν για τα αποθέματα μυγών και τα αντιδραστήρια. Το Pei-Yu Wang υποστηρίζεται εν μέρει από το Εθνικό Συμβούλιο Επιστημών (NSC 98-2320-B-004-003-MY2 και NSC 100- 2311-B-002-017-MY3), Ταϊβάν.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Alcedo J, Kenyon C (2004) Ρύθμιση της μακροζωίας του C. elegans από συγκεκριμένους γευστικούς και οσφρητικούς νευρώνες. Neuron 41(1):45–55

2. Anisimov V, Semenchenko A, Yashin A (2003) Insulin and longevity: antidiabetic biguanides as geroprotectors. Biogerontology 4(5):297–307

3. Apfeld J, O'Connor G, McDonagh T, DiStefano PS, Curtis R (2004) Η ενεργοποιημένη με AMP πρωτεϊνική κινάση AAK-2 συνδέει τα επίπεδα ενέργειας και τα σήματα που μοιάζουν με ινσουλίνη με τη διάρκεια ζωής στο C. elegans. Genes Dev 18(24):3004–3009

4. Araki T, Sasaki Y, Milbrandt J (2004) Η αυξημένη βιοσύνθεση του πυρηνικού NAD και η ενεργοποίηση του SIRT1 αποτρέπουν τον αξονικό εκφυλισμό. Science 305(5686):1010–1013

5. Bauer JH, Goupil S, Garber GB, Helfand SL (2004) Μια επιταχυνόμενη δοκιμασία για την ταυτοποίηση παρεμβάσεων που παρατείνουν τη διάρκεια ζωής στη Drosophila melanogaster. Proc Natl Acad Sci USA 101(35):12980–12985

6. Baur JA, Pearson KJ, Price NL, Jamieson HA, Lerin C, Kalra A, Prabhu VV, Allard JS, Lopez-Lluch G, Lewis K, Pistell PJ, Poosala S, Becker KG, Boss O, Gwinn D, Wang M, Ramaswamy S, Fishbein KW, Spencer RG, Lakatta EG, Le Couteur D, Shaw RJ, Navas P, Puigserver P, Ingram DK, de Cabo R, Sinclair DA (2006) Η ρεσβερατρόλη βελτιώνει την υγεία και την επιβίωση των ποντικών σε δίαιτα με θερμίδες. Nature 444(7117): 337–342

7. Bishop NA, Guarente L (2007) Δύο νευρώνες μεσολαβούν στη μακροζωία που προκαλείται από περιορισμούς διατροφής στο C. elegans. Nature 447(7144): 545–549

8. Bonkowski MS, Rocha JS, Masternak MM, Al Regaiey KA, Bartke A (2006) Η στοχευμένη διαταραχή του υποδοχέα της αυξητικής ορμόνης παρεμβαίνει στις ευεργετικές δράσεις του περιορισμού των θερμίδων. Proc Natl Acad Sci USA 103(20):7901–7905

9. Boyd O, Weng P, Sun X, Alberico T, Laslo M, Obenland DM, Kern B, Zou S (2011) Το νεκταρίνι προάγει τη μακροζωία στη Drosophila melanogaster. Free Radic Biol Med 50(11):1669–1678

10. Brand-Williams W, Cuvelier ME, Berset C (1995) Χρήση μιας μεθόδου ελεύθερων ριζών για την αξιολόγηση της αντιοξειδωτικής δραστηριότητας. LWT Food Sci Technol 28(1):25–30

11. Buchowski MS, Hongu N, Acra S, Wang L, Warolin J, Roberts LJ II (2012) Επίδραση μέτριου θερμιδικού περιορισμού στο οξειδωτικό στρες στις γυναίκες, μια τυχαιοποιημένη δοκιμή. PLoS ONE 7(10):e47079

12. Buddhan S, Sivakumar R, Dhandapani N, Ganesan B, Anandan R (2007) Προστατευτική επίδραση της διατροφικής συμπλήρωσης σκουαλενίου στη μιτοχονδριακή λειτουργία στο ήπαρ ηλικιωμένων αρουραίων. Προσταγλανδίνες Leukot Essent Fatty Acids 76(6):349–355

13. Chan YC, Hosoda K, Tsai CJ, Yamamoto S, Wang MF (2006) Ευνοϊκές επιδράσεις του τσαγιού στη μείωση των γνωστικών ελλειμμάτων και των μορφολογικών αλλαγών του εγκεφάλου σε ποντίκια με επιτάχυνση της γήρανσης. J Nutr Sci Vitaminol (Τόκιο) 52(4):266–273

14. Chang CI, Kuo CC, Chang JY, Kuo YH (2004) Τρία νέα τριτερπένια τύπου oleanane από την Ludwigia octovalvis με κυτταροτοξική δράση έναντι δύο ανθρώπινων καρκινικών κυτταρικών σειρών. J Nat Prod 67(1):91–93

15. Chen CP, Lin CC, Namba Τ (1989) Διαλογή ακατέργαστων φαρμάκων της Ταϊβάν για αντιβακτηριακή δράση κατά του Streptococcus mutans. J Ethnopharmacol 27(3):285-295

16. Choi JH, Kim D (2000) Επιδράσεις της ηλικίας και του διατροφικού περιορισμού στη διάρκεια ζωής και το οξειδωτικό στρες ποντικών SAMP8 με διαταραχές μάθησης και μνήμης. J Nutr Health Aging 4(3):182–186

17. Chou HJ, Lai DM, Huang CW, McLennan IS, Wang HD, Wang PY (2013) Το BMP4 είναι ένας περιφερειακός παράγοντας για κινητικούς νευρώνες και εξασθενεί την διεγερτική τοξικότητα που προκαλείται από το γλουταμικό in vitro. PLoS ONE 8(3):e58441

18. Colman RJ, Anderson RM, Johnson SC, Kastman EK, Kosmatka KJ, Beasley TM, Allison DB, Cruzen C, Simmons HA, Kemnitz JW, Weinduch R (2009) Ο θερμιδικός περιορισμός καθυστερεί την έναρξη της νόσου και τη θνησιμότητα σε πιθήκους ρέζους. Science 325(5937):201–204

19. Cruz-Morales SE, García-Saldívar NL, González-López MR, Castillo-Roberto G, Monroy J, Domínguez R (2008) Ο οξύς περιορισμός βλάπτει τη μνήμη στον αυξημένο Τ-λαβύρινθο (ETM) και τροποποιεί την πλευρική ραχιαία δραστηριότητα ραβδωτό σώμα. Behav Brain Res 195(1):187–191

20. De-Mello N, Carobrez AP (2002) Ανυψωμένος Τ-λαβύρινθος ως ζωικό μοντέλο μνήμης: επιδράσεις της σκοπολαμίνης. Behav Pharmacol 13(2):139–148

21. Flatt T, Min KJ, D'Alterio C, Villa-Cuesta E, Cumbers J, Lehmann R, Jones DL, Tatar M (2008) Drosophila germline modulation of insulin signaling and lifespan. Proc Natl Acad Sci USA 105(17):6368–6373

22. Flood JF, Morley JE (1992) Πρώιμη έναρξη της σχετιζόμενης με την ηλικία βλάβης της αποτρεπτικής και ορεκτικής μάθησης στο ποντίκι SAM-P/8. J Gerontol 47(2): B52–B59

23. Flood JF, Morley JE (1993) Αλλαγές σχετιζόμενες με την ηλικία στην απόκτηση και διατήρηση αποφυγής σοκ στο ποντίκι με επιτάχυνση της γήρανσης (SAM). Neurobiol Aging 14(2):153–157

24. Galleano M, Verstraeten SV, Oteiza PI, Fraga CG (2010) Antioxidant actions of flavonoids: thermodynamic and kinetic analysis. Arch Biochem Biophys 501(1):23–30

25. Greer EL, Dowlatshahi D, Banko MR, Villen J, Hoang K, Blanchard D, Gygi SP, Brunet A (2007) Ένα μονοπάτι AMPKFOXO μεσολαβεί στη μακροζωία που προκαλείται από μια νέα μέθοδο διατροφικού περιορισμού στο C. elegans. Curr Biol 17(19):1646–1656

26. Howitz KT, Bitterman KJ, Cohen HY, Lamming DW, Lavu S, Wood JG, Zipkin RE, Chung P, Kisielewski A, Zhang LL, Scherer B, Sinclair DA (2003) Small molecule activators of sirtuins παρατείνουν τη ζωή του Saccharomyces. Nature 425(6954):191–196

27. Hubbard BP, Gomes AP, Dai H, Li J, Case AW, Considine T, Riera TV, Lee JE, SY E, Lamming DW, Pentelute BL, Schuman ER, Stevens LA, Ling AJY, Armor SM, Michan S, Zhao H, Jiang Y, Sweitzer SM, Blum CA, Disch JS, Ng PY, Howitz KT, Rolo AP, Hamuro Y, Moss J, Perni RB, Ellis JL, Vlasuk GP, Sinclair DA (2013) Αποδεικτικά στοιχεία για έναν κοινό μηχανισμό Ρύθμιση SIRT1 από αλλοστερικούς ενεργοποιητές. Science 339(6124):1216– 1219

28. Ingram DK, Anson RM, De Cabo R, Mamczarz J, Zhu MIN, Mattison J, Lane MA, Roth GS (2004) Ανάπτυξη μιμητικών περιορισμού θερμίδων ως στρατηγική υπέρ της μακροζωίας. Ann NY Acad Sci 1019(1):412–423

29. Kadum Yakob H, Manaf Uyub A, Fariza Sulaiman S (2012) Τοξικολογική αξιολόγηση 80 τοις εκατό μεθανολικού εκχυλίσματος Ludwigia octovalvis (Jacq.) PH Φύλλα κορακιού (Onagraceae) σε ποντίκια BALB/c. J Ethnopharmacol 142(3):663-668

30. Kaeberlein M, Powers RW, Steffen KK, Westman EA, Hu D, Dang N, Kerr EO, ​​Kirkland KT, Fields S, Kennedy BK (2005) Ρύθμιση της διάρκειας αναπαραγωγής ζυμομύκητα από τους TOR και Sch9 σε απόκριση στα θρεπτικά συστατικά. Science 310(5751):1193–1196

31. Lane MA, Ingram DK, Roth GS (1998) 2-Η σίτιση με δεοξυ-ϋ-γλυκόζη σε αρουραίους μιμείται τις φυσιολογικές επιδράσεις του περιορισμού των θερμίδων. J Anti Aging Med 1(4):327–337

32. Lee KS, Lee BS, Semnani S, Avanesian A, Um CY, Jeon HJ, Seong KM, Yu K, Min KJ, Jafari M (2010) Η κουρκουμίνη παρατείνει τη διάρκεια ζωής, βελτιώνει τη διάρκεια της υγείας και ρυθμίζει την έκφραση της ηλικίας γονίδια γήρανσης στο Drosophila melanogaster. Rejuvenation Res 13(5):561–570

33. Lin SJ, Defossez PA, Guarente L (2000) Απαίτηση NAD και SIR2 για παράταση της διάρκειας ζωής με περιορισμό θερμίδων σε Saccharomyces cerevisiae. Science 289(5487):2126–2128

34. Lin SJ, Ford E, Haigis M, Liszt G, Guarente L (2004) Ο περιορισμός των θερμίδων παρατείνει τη διάρκεια ζωής της ζύμης μειώνοντας το επίπεδο NADH. Genes Dev 18(1):12–16

35. Lopez-Lluch G, Hunt N, Jones B, Zhu M, Jamieson H, Hilmer S, Cascajo MV, Allard J, Ingram DK, Navas P, de Cabo R (2006) Ο περιορισμός των θερμίδων προκαλεί μιτοχονδριακή βιογένεση και βιοενεργειακή απόδοση. Proc Natl Acad Sci USA 103(6):1768–1773

36. Maia CSF, Ferreira VMM, Diniz JSV, Carneiro FP, de Sousa JB, da Costa ET, Tomaz C (2010) Απόκτηση ανασταλτικής αποφυγής σε ενήλικες αρουραίους που εκτέθηκαν σε συνδυασμό αιθανόλης και μεθυλυδράργυρου κατά την ανάπτυξη του κεντρικού νευρικού συστήματος. Behav Brain Res 211(2):191–197

37. Mattison JA, Roth GS, Beasley TM, Tilmont EM, Handy AM, Herbert RL, Longo DL, Allison DB, Young JE, Bryant M, Barnard D, Ward WF, Qi W, Ingram DK, de Cabo R (2012) Επίδραση του θερμιδικού περιορισμού στην υγεία και την επιβίωση σε πιθήκους rhesus από τη μελέτη NIA. Nature 489(7415):318–321

38. Miyamoto M, Kiyota Y, Yamazaki N, Nagaoka A, Matsuo T, Nagawa Y, Takeda T (1986) Age-related change in learning and memory in the senescence-accelerated mouse (SAM). Physiol Behav 38(3):399–406

39. Nisoli E, Tonello C, Cardile A, Cozzi V, Bracale R, Tedesco L, Falcone S, Valerio A, Cantoni O, Clementi E, Moncada S, Carruba MO (2005) Ο περιορισμός θερμίδων προάγει τη μιτοχονδριακή βιογένεση επάγοντας την έκφραση eNOS. Science 310(5746):314–317

40. Pearson KJ, Baur JA, Lewis KN, Peshkin L, Price NL, Labinskyy N, Swindell WR, Kamara D, Minor RK, Perez E, Jamieson HA, Zhang Y, Dunn SR, Sharma K, Pleshko N, Woollett LA, Csiszar A, Ikeno Y, Le Couteur D, Elliott PJ, Becker KG, Navas P, Ingram DK, Wolf NS, Ungvari Z, Sinclair DA, de Cabo R (2008) Η ρεσβερατρόλη καθυστερεί την επιδείνωση που σχετίζεται με την ηλικία και μιμείται τις μεταγραφικές πτυχές του διατροφικού περιορισμού χωρίς παράταση της διάρκειας ζωής. Cell Metab 8(2):157–168

41. Peng C, Chan HYE, Huang Y, Yu H, Chen ZY (2011) Οι πολυφαινόλες μήλου παρατείνουν τη μέση διάρκεια ζωής του Drosophila melanogaster. J Agric Food Chem 59(5):2097–2106

42. Qiu X, Brown K, Hirschey MD, Verdin E, Chen D (2010) Ο περιορισμός των θερμίδων μειώνει το οξειδωτικό στρες μέσω της διαμεσολαβούμενης από SIRT3-ενεργοποίησης SOD2. Cell Metab 12(6):662–667

43. Santos P, Bittencourt AS, Schenberg LC, Carobrez AP (2006) Αυξημένη αξιολόγηση του λαβύρινθου Τ του άγχους και των επιδράσεων μνήμης των προσδεμάτων θέσης NMDA/γλυκίνης-Β που εγχύθηκαν στη ραχιαία περιυδραγωγική φαιά ουσία και στο ανώτερο κολλύριο των αρουραίων. Neuropharmacology 51(2):203-212

44. Schriner SE, Abrahamyan A, Avanessian A, Bussel I, Maler S, Gazarian M, Holmbeck MA, Jafari M (2009) Μειωμένα επίπεδα μιτοχονδριακού υπεροξειδίου και ενισχυμένη προστασία έναντι του paraquat στο Drosophila melanogaster συμπληρωμένο με Rhodiola rosea. Free Radic Res 43(9):836–843

45. Schriner SE, Lee K, Truong S, Salvadora KT, Maler S, Nam A, Lee T, Jafari M (2013) Extension of Drosophila lifespan by Rhodiola rosea μέσω μηχανισμού ανεξάρτητου από διαιτητικό περιορισμό. PLoS ONE 8(5):e63886

46. ​​Schulz TJ, Zarse K, Voigt A, Urban N, Birringer M, Ristow M (2007) Ο περιορισμός της γλυκόζης παρατείνει τη διάρκεια ζωής του Caenorhabditis elegans προκαλώντας μιτοχονδριακή αναπνοή και αυξάνοντας το οξειδωτικό στρες. Cell Metab 6(4):280–293

47. Shih PH, Chan YC, Liao JW, Wang MF, Yen GC (2010) Αντιοξειδωτικές και γνωστικές επιδράσεις προώθησης της μουριάς πλούσιας σε ανθοκυανίνη (Morus atropurpurea L.) σε ποντίκια με επιτάχυνση της γήρανσης και πρόληψη της νόσου του Αλτσχάιμερ. J Nutr Biochem 21(7):598–605

48. Simons MJP, Koch W, Verhulst S (2013) Ο διαιτητικός περιορισμός των τρωκτικών μειώνει τον ρυθμό γήρανσης χωρίς να επηρεάζει το αρχικό ποσοστό θνησιμότητας - μια μετα-ανάλυση. Κύτταρο γήρανσης 12(3):410–414

49. Sinclair DA (2005) Προς μια ενοποιημένη θεωρία θερμιδικού περιορισμού και ρύθμισης της μακροζωίας. Mech Aging Dev 126(9):987–1002

50. Slack C, Foley A, Partridge L (2012) Η ενεργοποίηση της AMPK από τον υποτιθέμενο διατροφικό περιορισμό μιμητική μετφορμίνη είναι ανεπαρκής για να παρατείνει τη διάρκεια ζωής στη Drosophila. PLoS ONE 7(10):e47699

51. Slinkard K, Singleton VL (1977) Ολική ανάλυση φαινόλης: αυτοματοποίηση και σύγκριση με χειροκίνητες μεθόδους. Am J Enol Vitic 28(1):49–55

52. Soh JW, Marowsky N, Nichols TJ, Rahman AM, Miah T, Sarao P, Khasawneh R, Unnikrishnan A, Heydari AR, Silver RB, Arking R (2013) Η κουρκουμίνη είναι ένας ειδικός επαγωγέας σταδίου πρώιμης δράσης εκτεταμένης λειτουργικότητας μακροζωία στη Δροσόφιλα. Exp Gerontol 48(2):229–239

53. Sohal RS, Buchan PB (1981) Σχέση μεταξύ φυσικής δραστηριότητας και διάρκειας ζωής στην ενήλικη οικιακή μύγα, Musca domestica. Exp Gerontol 16(2):157–162

54. Stenesen D, Suh JM, Seo J, Yu K, Lee KS, Kim JS, Min KJ, Graff JM (2013) Η βιοσύνθεση νουκλεοτιδίων αδενοσίνης και η AMPK ρυθμίζουν τη διάρκεια ζωής των ενηλίκων και μεσολαβούν στο όφελος μακροζωίας του θερμιδικού περιορισμού στις μύγες. Cell Metab 17(1):101–112

55. Takahashi RN, Pamplona FA, Fernandes MS (2005) Ο ανταγωνιστής κανναβινοειδών SR141716A διευκολύνει την απόκτηση μνήμης και την εδραίωση στον ανυψωμένο Τ-λαβύρινθο του ποντικιού. Neurosci Lett 380(3):270–275

56. Takeda T (2009) Ποντίκι με επιτάχυνση γήρατος (SAM) με ειδικές αναφορές σε μοντέλα νευροεκφυλισμού, ποντίκια SAMP8 και SAMP10. Neurochem Res 34(4):639-659

57. Valenzano DR, Terzibasi E, Genade T, Cattaneo A, Domenici L, Cellerino A (2006) Η ρεσβερατρόλη παρατείνει τη διάρκεια ζωής και καθυστερεί την εμφάνιση δεικτών που σχετίζονται με την ηλικία σε ένα βραχύβιο σπονδυλωτό. Curr Biol 16(3):296–300

58. Vivancos M, Moreno JJ (2005) Η βήτα-σιτοστερόλη ρυθμίζει την απόκριση αντιοξειδωτικού ενζύμου σε μακροφάγους RAW 264.7. Free Radic Biol Med 39(1):91–97

59. Wang PY, Koishi K, McGeachie AB, Kimber M, MacLaughlin DT, Donahoe PK, McLennan IS (2005) Η ανασταλτική ουσία Mullerian δρα ως παράγοντας επιβίωσης κινητικού νευρώνα in vitro. Proc Natl Acad Sci USA 102(45):16421–16425

60. Wang PY, Neretti N, Whitaker R, Hosier S, Chang C, Lu D, Rogina B, Helfand SL (2009) Το Long-lived Indy και ο περιορισμός των θερμίδων αλληλεπιδρούν για να παρατείνουν τη διάρκεια ζωής. Proc Natl Acad Sci USA 106(23):9262–9267

61. Weinduch R, Walford R (1982) Διαιτητικός περιορισμός σε ποντίκια που ξεκινά από την ηλικία του 1 έτους: επίδραση στη διάρκεια ζωής και στην αυθόρμητη συχνότητα εμφάνισης καρκίνου. Science 215(4538):1415–1418

62. Wood JG, Rogina B, Lavu S, Howitz K, Helfand SL, Tatar M, Sinclair D (2004) Οι ενεργοποιητές Sirtuin μιμούνται τον θερμιδικό περιορισμό και καθυστερούν τη γήρανση στα μεταζωάρια. Nature 430(7000): 686–689

63. Wu Z, Liu SQ, Huang D (2013) Ο διατροφικός περιορισμός εξαρτάται από τη σύνθεση των θρεπτικών συστατικών για την παράταση της χρονολογικής διάρκειας ζωής στην εκκολαπτόμενη ζύμη Saccharomyces cerevisiae. PLoS ONE 8(5): e64448

64. Xiao B, Sanders MJ, Underwood E, Heath R, Mayer FV, Carmena D, Jing C, Walker PA, Eccleston JF, Haire LF, Saiu P, Howell SA, Aasland R, Martin SR, Carling D, Gamblin SJ ( 2011) Δομή του ΑΜΠΚ θηλαστικού και η ρύθμισή του από την ΑΔΠ. Nature 472(7342):230–233

65. Zainal TA, Oberley TD, Allison DB, Szweda LI, Weinduch R (2000) Ο θερμιδικός περιορισμός των πιθήκων rhesus μειώνει την οξειδωτική βλάβη στους σκελετικούς μυς. FASEB J 14(12):1825–1836

66. Zheng J, Mutcherson R, Helfand SL (2005) Ο περιορισμός των θερμίδων καθυστερεί την οξειδωτική βλάβη των λιπιδίων στο Drosophila melanogaster. Κύτταρο γήρανσης 4(4):209–216

【Για περισσότερες πληροφορίες:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】