Μελέτη Ιστοπαθολογίας και Φυσιολογικών Λειτουργιών Νεφρού

Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Ahmad Fauzi, et al

Αφηρημένη.

The purpose of this study was to analyze abnormal changes in kidney histology and physiology in acute kidney injury animal models with multiple doses of gentamicin. Induction of experimental animals was carried out on 20 rats (Rattus norvegicus) Wistar strain which was divided into 4 groups, group I was a negative control group, groups II, III, and IV are gentamicin-induced groups at doses of 30 mg/kg, 40 mg/kg, and 50 mg/kg, respectively. Kidney histopathology was stained with Hematoxylin Eosin (HE), while analysis of serum BUN and creatinine by spectrophotometric method. Data analysis for kidney histopathology was descriptive while BUN and Creatinine were statistically tested with one-way ANOVA. The results of this study showed there was kidney damage in all gentamicin-induced groups, which is necrosis in the contortions tubule and the Bowman's capsule compared to the negative control group. The group of rats with the higher doses of gentamicin showed a more severe level of histopathological changes, however, BUN and creatinine levels were not significantly different (p>0.05). Αυτή η μελέτη καταλήγει στο συμπέρασμα ότι η επαγωγή γενταμυκίνης θα μπορούσε να προκαλέσει ιστοπαθολογικές αλλαγές στα νεφρά αλλά όχι στη φυσιολογία των νεφρών.

Λέξεις-κλειδιά:ζωικό μοντέλο, αντιβιοτικό, BUN, κρεατινίνη, νεφροτοξικότητα.

cistanche στα χίντιμπορεί να βελτιώσει τη λειτουργία των νεφρών

1. Εισαγωγή

Η οξεία νεφρική βλάβη είναι μια ασθένεια νεφρικής ανεπάρκειας ή νεφρικής βλάβης που εμφανίζεται γρήγορα μέσα σε διάστημα λίγων ωρών ή λίγων ημερών. Συμπτώματα που εμφανίζονται στην επίπτωση της οξείαςνεφρότραυματισμοίόπως κοιλιακό άλγος, πολυουρία, ολιγουρία και άλλα(1). Αυτή η ασθένεια διαγιγνώσκεται κυρίως με τη μέτρηση του επιπέδου βιοδεικτών. όπως το άζωτο ουρίας αίματος (BUN) και η κρεατινίνη. Ωστόσο, αυτές οι αλλαγές βιοδεικτών συχνά δεν περιγράφουν την πραγματική κατάσταση των νεφρών. Οι καταστάσεις οξείας νεφρικής βλάβης μπορούν να φανούν καθαρά με την παρατήρηση μακροσκοπικά και μικροσκοπικά του νεφρού.Σκάρτοςνεφράμπορεί να χαρακτηριστεί από οίδημα του νεφρικού φλοιού και επίσης νέκρωση του κυττάρου(2). Ενώ τα αυξημένα επίπεδα BUN και βιοδεικτών κρεατινίνης στο αίμα συμβαίνουν όταν οι νεφροί έχουν υποστεί βλάβη κατά περίπου 30 τοις εκατό - 59 τοις εκατό , συνοδευόμενα από αναιμία και λήθαργο(3). Ο νεφρός είναι γνωστό ότι μπορεί να αναγεννηθεί, αλλά με ποσοστό κυτταρικής βλάβης έως και 50 τοις εκατό, θα είναι δύσκολο να αποκατασταθούν φυσιολογικά οι φυσιολογικές του λειτουργίες. Αυτό ώθησε πολλούς ερευνητές να διερευνήσουν διάφορες ουσίες που έχουν τη δυνατότητα να προκαλέσουν νεφροτοξικότητα προκειμένου να μειωθεί η συχνότητα εμφάνισης αυτής της νόσου

Επιπλέον, είναι επίσης σημαντικό να μελετηθεί ο μηχανισμός της οξείας νεφρικής βλάβης χρησιμοποιώντας ζωικά μοντέλα. Ζωικά μοντέλα οξείας νεφρικής βλάβης συμβαίνουν λόγω της βλάβης του νεφρώνα στα νεφρά. Στον νεφρώνα που αποτελείται από το σπειράμα, την κάψα του Bowman, τον σωληναριακό κόγχο ή το τόξο Henle, θα συμβεί κυτταρική νέκρωση. Σύμφωνα με τον Halim, (2014) η δημιουργία ενός μοντέλου ζώου με οξεία νεφρική βλάβη διαρκεί περίπου ένα μήνα(4). Το υλικό που μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την πρόκληση νεφρικής βλάβης είναι ποικίλο, όπως φάρμακα. Ένα από τα φάρμακα που μπορεί να προκαλέσουν νεφρική βλάβη είναι τα αντιβιοτικά(2). Τα αντιβιοτικά που χρησιμοποιούνται συχνά για τη δημιουργία ζωικών μοντέλων νεφρικής βλάβης είναι τα αντιβιοτικά γενταμυκίνης. Οι επαγωγικές δόσεις των αντιβιοτικών για την τόνωση της νεφρικής βλάβης ποικίλλουν ευρέως. Έχουν αναφερθεί ευρέως διάφορες μελέτες για τη νεφροτοξική γενταμυκίνη, όπως σε χαμηλές δόσεις 10 mg/kg Σ.Β σε περίοδο μηνών(4), σε υψηλές δόσεις 60 mg/kg Σ.Β εντός 10 ημερών(5, 6), δόσεις των 100 mg/kg ΣΒ εντός 8 ημερών (7).

Στις μέρες μας, η χρήση της ενέσιμης γενταμυκίνης στα ζώα εξακολουθεί να χρησιμοποιείται συχνά, ενώ στους ανθρώπους έχει αρχίσει να εγκαταλείπεται. Η ασφαλής δόση που χρησιμοποιείται συχνά στους ανθρώπους είναι 5-7 mg/kg ΣΒ(8), το επόμενο έτος πέφτει σε 3-5 mg/kg ΣΒ(9). Δόση γενταμικίνης, η οποία είναι γνωστό ότι προκαλεί τοξικότητα σε αρουραίους δέκα φορές μεγαλύτερη από την ασφαλή δόση. Αυτή η ασφαλής αλλαγή δόσης μπορεί επίσης να επιτρέψει τοξικές αλλαγές δόσεων, επομένως αυτή η μελέτη στοχεύει να αναλύσει τις ιστολογικές και φυσιολογικές αλλαγές των αρουραίων ως ζωικά μοντέλα οξείας νεφρικής βλάβης λόγω ένεσης γενταμυκίνης σε δόσεις πολλαπλών επιπέδων από 30 mg/kg σωματικού βάρους έως 50 mg/ kg σωματικού βάρους.

2. Υλικό και μέθοδοι

2.1. Ζωικό μοντέλο

Είκοσι αρσενικοί αρουραίοι στελέχη Wistar, που ελήφθησαν από την de Wistar Bandung χωρίστηκαν σε 4 ομάδες, η ομάδα Ι ήταν ελεγχόμενη ομάδα με ένεση εικονικού φαρμάκου, η ομάδα II προκλήθηκε με δόση γενταμυκίνης 30 mg/kg ΣΒ, η ομάδα III προκλήθηκε δόση γενταμυκίνης κατά 40 mg/kg ΣΒ, και η Ομάδα IV προκλήθηκε με δόση γενταμυκίνης 50 mg/kg ΣΒ. Τα ζώα υποβλήθηκαν σε ευθανασία τη 10η ημέρα. Πραγματοποιήθηκε ιστοπαθολογική εξέταση στον νεφρικό ιστό αρουραίων μετά από ευθανασία. Ολόκληρο το ζώο έχει συμμορφωθεί με τις οδηγίες που δηλώθηκαν από την ιδρυματική επιτροπή φροντίδας και χρήσης ζώων με αριθμό μητρώου 954-ΚΕΠ.

2.2. Ένεση γενταμικίνης

Κάθε αρουραίος λάμβανε καθημερινή ενδομυϊκή ένεση (μεταξύ ημιμεμβρανώδους και ημιτενοντώδους) θειικής γενταμυκίνης (Genta-100®) για 10 ημέρες με διάφορες δόσεις ανάλογα με την ομάδα τους.

2.3. Εξέταση νεφρικών ιστολογικών σκευασμάτων

Τα νεφρικά όργανα εισήχθησαν σε φορμαλίνη με ρυθμιστικό διάλυμα 10 τοις εκατό για την παρασκευή παρασκευασμάτων για ιστοπαθολογία. Ο νεφρός μετατράπηκε σε ιστολογικό παρασκεύασμα με μεταφορά ιστού σε 70 τοις εκατό αλκοόλ ως σημείο διακοπής. Στη συνέχεια ο ιστός αφυδατώθηκε με αλκοόλη πολλαπλών επιπέδων με συγκέντρωση 70 τοις εκατό για 24 ώρες, 80 τοις εκατό αιθανόλη για 2 ώρες, 90 τοις εκατό αιθανόλη, 95 τοις εκατό, και απόλυτη αιθανόλη για 20 λεπτά. Στη συνέχεια τα όργανα εμποτίστηκαν σε ξυλόλη Ι για 20 λεπτά και ξυλόλη II για 30 λεπτά, έτσι ώστε τα όργανα να είναι καθαρά. Στη συνέχεια φιλτράρετε τον ιστό και τοποθετήστε το σε μπλοκ παραφίνης 56-58 C. Το όργανο του νεφρού κόβεται σε φέτες σε πάχος 5 μικρομέτρων χρησιμοποιώντας περιστροφικό μικροτόμο. Κάθε επανάληψη έγιναν 4 τομές σε διαστήματα 10 τομών και τοποθετήθηκαν στο γυαλί του αντικειμένου στο οποίο έχει δοθεί διάλυμα αλκοόλης 70 τοις εκατό και στη συνέχεια χρωματίστηκε με χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης (ΗΕ) (10).

2.4. Συλλογή αίματος σε πειραματόζωα

Συλλογή αίματος σε ζωικά μοντέλα μέσω του υποκογχικού κόλπου με χρήση μικροαιματοκρίτη, και στη συνέχεια εισάγεται στο vacutainer. Ο ορός που σχηματίστηκε εισήχθη σε μη πηκτικό μικροσωλήνα για να αναλυθεί για BUN ορού και κρεατινίνη.

2.5. Μέτρηση των επιπέδων BUN και κρεατινίνης

Τα επίπεδα BUN και κρεατινίνης εξετάστηκαν χρησιμοποιώντας φασματοφωτομετρία (ABX Pentra). Η φυσιολογία των νεφρών αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας τη χρωματομετρική μέθοδο Jaffe (κιτ κρεατινίνης και ουρίας DiaSys diagnostic systems GmbH Germany) για τον υπολογισμό των επιπέδων αζώτου ουρίας αίματος (BUN) και κρεατινίνης στον ορό.

2.6. Στατιστική ανάλυση

Στη συνέχεια αναλύθηκαν περιγραφικά οι παρατηρήσεις της ιστοπαθολογίας των νεφρών χρησιμοποιώντας ηλεκτρονικό μικροσκόπιο. Τα δεδομένα BUN και κρεατινίνης αναλύθηκαν ποσοτικά με τη χρήση του προγράμματος Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, v20). Η δοκιμή ANOVA μονής κατεύθυνσης διεξήχθη για να παρατηρηθούν οι σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων (<0.05) and="" continued="" with="" the="" tukey="">

3. Αποτελέσματα και συζήτηση

3.1. Μακροσκοπικές αλλαγές στον νεφρό που προκαλείται από γενταμυκίνη

Οι αρουραίοι που προκλήθηκαν από γενταμικίνη εμφάνισαν κλινικά συμπτώματα λήθαργου, αδράνειας και η μακροσκοπία ούρων έδειξε ελαφρώς κοκκινωπό χρώμα, αλλά τα κόπρανα ήταν φυσιολογικά, η κατανάλωση τροφής και ποτού ήταν ακόμα φυσιολογική. Μακροσκοπικά, το μέγεθος του νεφρού των αρουραίων ελέγχου και της θεραπείας δεν διέφερε, αλλά υπάρχουν διαφορές εκτός του χρώματος του νεφρικού βλεννογόνου στην ομάδα ελέγχου (εικόνα 1α) και στην ομάδα επαγωγής γενταμυκίνης (εικόνα 1β).

Εικόνα 1. Οι νεφροί σε αρουραίους αρνητικού ελέγχου έχουν σχήμα φασολιού και κοκκινωπό χρώμα όπως οι κανονικοί νεφροί (α), ενώ οι νεφροί στην ομάδα επαγωγής γενταμυκίνης φαίνονται πιο χλωμοί (β)

3.2. Αλλαγή στη νεφρική ιστολογία ζωικών μοντέλων με επαγωγή γενταμυκίνης.

Η μικροσκοπική παρατήρηση με μεγέθυνση 100 φορές και 400 φορές έδειξε ιστοπαθολογική αλλαγή στην ομάδα επαγωγής γενταμυκίνης. Ενώ η ομάδα ελέγχου που δεν προκλήθηκε από γενταμυκίνη δεν έδειξε μικροσκοπικές αλλαγές (Εικόνα 2). Το σφαιρικό σπειράμα αποτελείται από τριχοειδή ενδοθηλιακά κύτταρα απλού, οι κάψουλες του Bowman ήταν στρογγυλού σχήματος με απλοποιημένα πλακώδη κύτταρα, εγγύς σωληνίσκοι με κυβοειδές απλό κυτταρικό με μικρολάχνες και άπω σωληνάρια με στρογγυλεμένο κυβικό κύτταρο χωρίς μικρολάχνες. ενός βρόχου Henle με στρογγυλεμένο απλό πλακώδες κελί(11),

Εικόνα 2. Ιστοπαθολογία νεφρού στην ομάδα αρνητικού ελέγχου (χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης, μεγέθυνση 100x και 400x). Το σπειράμα (βέλος) είναι φυσιολογικό με στρογγυλό σχήμα και συμπαγή δομή, εγγύς σωληνίσκους (κεφαλή βέλους) με κυβοειδές στρογγυλές κυψέλες και βίλες.

Μικροσκοπικές εικόνες νεφρών αρουραίου με ένεση γενταμυκίνης 30 mg/kg σωματικού βάρους (ομάδα I) παρατηρήθηκαν ιστοπαθολογικές αλλαγές σε σύγκριση με την ομάδα αρνητικού ελέγχου (Εικόνα 3). τα σπειραματικά ενδοθηλιακά κύτταρα διαβρώνονται, η κάψουλα του Bowman προκαλεί νέκρωση και ο χώρος του Bowman γίνεται πιο αδύναμος. Η κατάσταση των εγγύς σωληναριακών κυττάρων ήταν νέκρωση, η οποία φαίνεται από την απολέπιση των κυβοειδών απλών επιθηλιακών κυττάρων με κυτταρόπλασμα και κυτταρικούς πυρήνες που εξαφανίζονται. Τα φλεγμονώδη κύτταρα στο εγγύς σωληνάριο βρίσκονται γύρω από τα σωληνοειδή επιθηλιακά κύτταρα που χαρακτηρίζονται από μεγάλα μαυρομωβ στρογγυλά κύτταρα.

Σχήμα 3. Ιστοπαθολογία Νεφρικού Νεφρού στην Θεραπευτική Ομάδα Ι με επαγωγή σωματικού βάρους 30 mg/kg (χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης, μεγέθυνση 100x και 400x). (βέλος) Το σπειράμα εμφάνισε διάβρωση των ενδοθηλιακών κυττάρων, (αιχμή βέλους) οι κάψουλες του Bowman έδειξαν νέκρωση και τέντωμα, * Το σωληνάριο έδειξαν νέκρωση και άφθονα κύτταρα φλεγμονής.

Οι ιστοπαθολογικές εικόνες αρουραίων στους οποίους έγινε ένεση 40 mg/kg σωματικού βάρους στην ομάδα II δείχνουν πιο σοβαρό βαθμό βλάβης σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου και θεραπείας Ι (Εικόνα 4). τα σπειράματα ήταν νέκρωση και διάβρωση των ενδοθηλιακών κυττάρων, ο χώρος του Bowman γίνεται πιο στενός και ο πυρήνας των επιθηλιακών κυττάρων στην κάψουλα του Bowman ήταν λύση. Τα κυβοειδή επιθηλιακά κύτταρα του απλού κύτους στα εγγύς σωληνάρια του κόγχου βλέπουν νέκρωση και η απολέπιση των επιθηλιακών κυττάρων εμφανίζεται τόσο στο κυτταρόπλασμα όσο και στον πυρήνα. Φλεγμονώδη κύτταρα παρατηρούνται συχνά γύρω από κατεστραμμένους νεφρώνες.

Εικόνα 4. Ιστοπαθολογία νεφρού στην ομάδα θεραπείας ΙΙ Επαγωγή 40 mg/kg ΣΒ (χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης, μεγέθυνση 100x και 400x). Το σπειράμα (βέλος) έδειξε απολέπιση των ενδοθηλιακών κυττάρων, η κάψουλα του Bowman (κεφαλή βέλους) βρέθηκε να νέκρωση και ο χώρος του Bowman τεντώθηκε, τα σωληνοειδή Contortus (*) ήταν νέκρωση και ακολουθήθηκαν από φλεγμονώδη κύτταρα (κύκλος).

Καθώς οι δόσεις επαγωγής γενταμικίνης αυξάνονταν, η νεφρική βλάβη φάνηκε να είναι πιο σοβαρή όπως φαίνεται στις μικροσκοπικές εικόνες των αρουραίων στους οποίους έγινε ένεση γενταμικίνης 50 mg/kg σωματικού βάρους στην ομάδα III (Εικόνα 5). Παρουσιάστηκε βλάβη σε όλα τα μέρη του νεφρώνα, π.χ. σπειράματος, κάψουλα Bowman, εγγύς σωληνάριο και άπω σωληνάριο. Στο σπείραμα, η νέκρωση στα ενδοθηλιακά κύτταρα προκαλεί μεγαλύτερο κενό στην περιοχή του χώρου του Bowman, οι κάψουλες του Bowman παρατηρήθηκαν νέκρωση στη δομή του απλού πλακώδους κυτταρικού τοιχώματος, ο εγγύς κόγχος και οι απομακρυσμένοι σωληνίσκοι παρατηρήθηκαν νέκρωση ή σημειώθηκαν από οξεία σωληναριακή νέκρωση (ATN ), η δομή του απλού πλακώδους κυτταρικού τοιχώματος ήταν νέκρωση και φαίνεται αποκολλημένη στην ιστολογική του δομή. Στις σωληναριακές τομές φάνηκαν πολλά μονοπύρηνα φλεγμονώδη κύτταρα σε κύτταρα που υπέστησαν νέκρωση.

Εικόνα 5. Ιστοπαθολογία νεφρού στην Ομάδα III Επαγωγή γενταμικίνη με 50 mg/kg ΣΒ (χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης, μεγέθυνση 100x και 400x). Η απολέπιση των ενδοθηλιακών κυττάρων Σπειράματο (βέλος), η κάψουλα του Bowman (κεφαλή βέλους) έδειξε νέκρωση και οι χώροι του Bowman γίνονται διακριτοί. Εμφανίζεται νέκρωση στο Σωληναριακό Κόγχο (*).

Η χορήγηση υψηλών δόσεων ένεσης γενταμυκίνης μπορεί να προκαλέσει βλάβη στη δομή του νεφρώνα που χαρακτηρίζεται από νέκρωση και απολέπιση των επιθηλιακών κυττάρων στο σπείραμα, την κάψουλα Bowman και το σωληνάριο, γεγονός που θα επηρεάσει τη διαταραχή της νεφρικής λειτουργίας της σπειραματικής διήθησης και της επαναρρόφησης και έκκρισης στο σωληνάριο του νεφρού. Η κύρια πτυχή της νεφροτοξικότητας της γενταμυκίνης είναι η σωληναριακή κυτταροτοξικότητα. Η θεραπεία σε ζώα με γενταμυκίνη μπορεί να σχετίζεται με απόπτωση(12) καθώς και με νέκρωση των σωληναριακών επιθηλιακών κυττάρων(13). Η γενταμικίνη προκαλεί κυτταροτοξικότητα στα κύτταρα όπου μπορεί να συσσωρευτεί. Στο νεφρό, είναι συνήθως εγγύς σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα(14), ενώ τα απομακρυσμένα σωληναριακά κύτταρα και οι αγωγοί συλλογής επηρεάζονται σημαντικά λιγότερο από κυτταροτοξικές επιδράσεις(15). Το φάρμακο στη συνέχεια μεταφέρεται στο λυσόσωμα, στη συσκευή Goldzi και στο ενδοπλασματικό δίκτυο(16). Η γενταμικίνη δεσμεύεται στη μεμβράνη των φωσφολιπιδίων, αλλάζοντας τη λειτουργία της και προκαλώντας μια κατάσταση είναι γνωστή ως φωσφολιπίδωση σε ανθρώπους(17) και πειραματόζωα(18). Η λυσοσωμική φωσφολιπίδωση προκαλείται από διαταραχές της οδού σηματοδότησης της φωσφατιδυλινοσιτόλης(19), μείωση του κύκλου εργασιών των φωσφολιπιδίων και τη συσσώρευσή τους στην πλασματική μεμβράνη.

Η φωσφολιπίδωση σχετίζεται άμεσα με την τοξικότητα της γενταμυκίνης(20). Ωστόσο, παρόμοιες αλλαγές ανιχνεύθηκαν σε άλλους τύπους κυττάρων που εκτέθηκαν στη γενταμυκίνη αλλά χωρίς σημαντική βλάβη και κυτταρικό θάνατο. Όταν οι συγκεντρώσεις της γενταμικίνης στα ενδοσώματα φτάσουν σε ένα ορισμένο επίπεδο, η μεμβράνη διαταράσσεται και το περιεχόμενό της, συμπεριλαμβανομένης της γενταμικίνης, απελευθερώνεται στο κυτταρόπλασμα(21). Στο κυτταρόπλασμα, η γενταμυκίνη δρα στα μιτοχόνδρια τόσο άμεσα όσο και έμμεσα(22) και ενεργοποιεί την ενδογενή αποπτωτική οδό, σπάει την αναπνευστική αλυσίδα, μειώνει τη σύνθεση ATP και προκαλεί οξειδωτικό στρες δημιουργώντας ανιόντα υπεροξειδίου και ρίζες υδροξυλίου(23) με αποτέλεσμα τον κυτταρικό θάνατο. Όταν υπάρχει σε μεγάλους αριθμούς, η καθεψίνη προκαλεί μαζική πρωτεόλυση που οδηγεί σε νέκρωση, ειδικά στην έλλειψη ATP. Στο ενδοπλασματικό δίκτυο, η γενταμυκίνη αναστέλλει την πρωτεϊνική σύνθεση, παρεμποδίζοντας την ακρίβεια της μετάφρασης και την τροποποίηση των μετα-μεταφραστικών πρωτεϊνών(24). Αυτό έχει ως αποτέλεσμα το στρες του ενδοπλασματικού δικτύου και την αποπτωτική ενεργοποίηση από την κασπάση 12 και την καλπαΐνη(25).

Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης είναι παρόμοια με τα αποτελέσματα της έρευνας που διεξήχθη από τον Lintong (2012). Η χορήγηση γενταμυκίνης για εργαστηριακούς αρουραίους σε δόση 10-20 mg/kg σωματικού βάρους έχει προκαλέσει χαρακτηριστικές και έντονες αλλαγές στα λυσοσώματα των εγγύς σωληναριακών επιθηλιακών κυττάρων(6). Αυτές οι αλλαγές είναι σωληναριακή δυσλειτουργία. αποκόλληση του περιγράμματος της βούρτσας και απελευθέρωση λυσοσωμικών ενζύμων. μείωση της επαναρρόφησης πρωτεΐνης, ασβεστίου, μαγνησίου, καλίου και γλυκόζης. φωσφολιπιδουρία και απέκκριση γύψου. Η χορήγηση γενταμικίνης σε δόσεις άνω των 40 mg/kg σωματικού βάρους προκαλεί γρήγορα νέκρωση στον νεφρικό φλοιό που συνοδεύεται από διαταραχή της νεφρικής δυσλειτουργίας.

3.3. Δεν υπάρχουν σημαντικές αλλαγές στο BUN και στην κρεατινίνη στην ομάδα της γενταμυκίνης

One-way ANOVA results showed no significant difference between treatments (p>0.05). Ως εκ τούτου, η δοκιμή Tukey δεν συνεχίστηκε. Τα μέσα επίπεδα BUN και κρεατινίνης στον ορό αίματος φαίνονται στον πίνακα 1.1.

Σύμφωνα με τον Johnson (2014), τα επίπεδα BUN σε αρουραίους κυμαίνονται από 10-21 mg / dL(26). Ενώ η οξεία νεφρική βλάβη παράγει επίπεδα BUN 10 φορές τα κανονικά επίπεδα (27). Υπό κανονικές συνθήκες, το BUN είναι το αποτέλεσμα του μεταβολισμού των πρωτεϊνών που συμβαίνει στο ήπαρ. Αυτή η ουσία θα διοχετεύεται μέσω των αιμοφόρων αγγείων και θα αποβάλλεται μέσω του συστήματος ούρησης στα νεφρά, έτσι ώστε τα επίπεδα BUN στα αιμοφόρα αγγεία να βρίσκονται σε μικρή ποσότητα. Από τη μέση τιμή κάθε ομάδας που έχει ληφθεί, φαίνεται ότι δεν υπάρχει σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων, αλλά υπάρχει μια τάση αύξησης ανάλογα με τις αυξανόμενες δόσεις γενταμυκίνης.

One-way ANOVA test results on creatinine samples showed no difference between treatments (p>{{0}}.05). Η μέση τιμή της ομάδας ελέγχου και της ομάδας θεραπείας I ήταν ακόμα εντός του φυσιολογικού εύρους των επιπέδων κρεατινίνης λευκού αρουραίου, που είναι 0.2 - 0.8(26). Οι τρέχουσες τυπικές δοκιμές για τον προσδιορισμό της κατάστασης της νεφρικής λειτουργίας ήταν με μέτρηση της κρεατινίνης ορού και της παραγωγής ούρων. Ωστόσο, η αρχική μέτρηση της κρεατινίνης ορού μπορεί να μην αντικατοπτρίζει την έκταση του τραυματισμού, καθώς η συσσώρευση κρεατινίνης πάντα υστερεί σε σχέση με τα συμβάντα τραυματισμού (28). Η αύξηση της κρεατινίνης ορού μπορεί να υποδηλώνει βλάβη στα νεφρά, αλλά έχει περιορισμένη ικανότητα προσδιορισμού της βλάβης στα αρχικά στάδια (29). Σύμφωνα με τους Nguyen & Devarajan (2008), τα επίπεδα κρεατινίνης αρχίζουν να αυξάνονται αφού η νεφρική βλάβη φτάσει το 50 τοις εκατό (30), επομένως μπορεί να συναχθεί το συμπέρασμα ότι η βλάβη στο νεφρό που παρατηρήθηκε είναι ακόμα κάτω από το 50 τοις εκατό.

4. Συμπέρασμα

Με βάση τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης μπορεί να συναχθεί το συμπέρασμα ότι οι νεφρικές ιστοπαθολογικές αλλαγές λόγω της ένεσης γενταμυκίνης για 10 ημέρες εμφανίστηκαν σε όλες τις ομάδες γενταμυκίνης, αλλά αυτή η ανωμαλία δεν εμφανίστηκε στον ορό BUN και κρεατινίνης. Λόγω του βιοδείκτη καθυστέρησης σε αυτή τη μελέτη, προτείναμε την προσθήκη μιας άλλης μεταβλητής για την παρατήρηση της οξείας νεφρικής βλάβης.

5. Αναγνώριση

Οφείλουμε ευγνωμοσύνη στο Υπουργείο Έρευνας, Τεχνολογίας και Τριτοβάθμιας Εκπαίδευσης για τη στήριξη της χρηματοδότησης μέσω του προγράμματος PUPT 2017 και για τη συνεργασία στη διεξαγωγή αυτής της έρευνας.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Alfonso AA, Mongan AE, Memah MF. Gambaran kadar kreatinin serum pada pasien penyakit ginjal kronik stadium 5 non dialisis. Περιοδικό e-Biomedik. 2016; 4 (1).

2. Chasani S. Antibiotik Nefrotoksik: Penggunaan pada Gangguan Fungsi Ginjal. J Laporan Penelitian. 2008.

3. Κ ΚΖ. Χρόνια νεφρική νόσος. Λος Άντζελες: Σύστημα Υγείας Henry Ford; 2011.

4. Halim H, Achadiyani A, Tjahjodjati T. Nigella sativa Έγχυση ως αντιοξειδωτικός παράγοντας κατά του νεφρού που προκαλείται από γενταμικίνη που έχει υποστεί βλάβη σε ποντίκια. Althea Medical Journal. 2014;1(2):90-3.

5. Padmini MP, Kumar JV. Μια ιστοπαθολογική μελέτη για τη νεφροτοξικότητα που προκαλείται από γενταμυκίνη σε πειραματικούς αλμπίνους αρουραίους. IOSR J Dent Med Sci. 2012;1(1):14-7.

6. Lintong PM, Kairupan CF, Sondakh PL. Gambaran Mikroskopik Ginjal Tikus Wistar (Rattus norvegicus) Setelah Diinduksi Dengan Gentamisin. Jurnal Biomedik. 2012; 4 (3).

7. ATAMAN Ν, Mert Η, Yildirim S, Mert NJAÜVFD. Η επίδραση της φουκοϊδάνης στις αλλαγές ορισμένων βιοχημικών παραμέτρων στη νεφροτοξικότητα που προκαλείται από τη γενταμυκίνη σε αρουραίους. 2018; 65(1):9-14.

8. Freeman CD, Nicolau D, Belliveau P, Nightingale C. Εφάπαξ ημερήσια δόση αμινογλυκοσιδών: ανασκόπηση και συστάσεις για κλινική πρακτική. Το περιοδικό της αντιμικροβιακής χημειοθεραπείας. 1997;39(6):677-86.

9. Γενταμυκίνη [Διαδίκτυο]. Δημοσιεύσεις φύλλου δεδομένων. 2005.

10. Wulandari S. Ekstraksi Tumor Necrosis Fakcor (TNF-) και Gambaran Histopatologi Ginjal Pada Tikus (Rattus Norvegicus) Νεφρική Ίνωση Pasca Induksi Streptokinase. Malang: Πανεπιστήμιο της Brawijaya; 2012.

11. Handani AR, Salim MN, Harris A, Budiman H. PENGARUH PEMBERIAN KACANG PANJANG (Vigna unguiculatTERHADAP STRUKTUR MIKROSKOPIS GINJAL MENCIT (Mus musculus) YANG DIINDUKSI ALOKSAN.910Ju.

12. Li J, Li Qx, Xie Xf, Ao Y, Tie Cr, Song Rj. Διαφορικοί ρόλοι του ανταγωνιστή ασβεστίου διυδροπυριδίνης νιφεδιπίνης, νιτρενδιπίνης και αμλοδιπίνης στην επαγόμενη από γενταμυκίνη νεφρική σωληναριακή τοξικότητα σε αρουραίους. European Journal of Pharmacology. 2009;620(1-3):97-104.

13. Edwards JR, Diamantakos EA, Peuler JD, Lamar PC, Prozialeck WC. Μια νέα μέθοδος για την αξιολόγηση της εγγύς επιθηλιακής κυτταρικής νέκρωσης των σωληναρίων στον άθικτο νεφρό αρουραίου χρησιμοποιώντας ομοδιμερές αιθίδιο. J BMC φυσιολογία. 2007; 7 (1): 1.

14. Verpooten GA, Giuliano RA, Verbist L, Eestermans G, De Broe ME. Η άπαξ ημερήσια δόση μειώνει τη νεφρική συσσώρευση γενταμυκίνης και νετιλμικίνης. J Clinical Pharmacology Therapeutics. 1989;45(1):22-7.

15. Fujiwara Κ, Shin Μ, Matsunaga Η, Saita Τ, Larsson LI. Φωτομικροσκοπική ανοσοκυτταροχημεία για τη γενταμικίνη και τη χρήση της για τη μελέτη της πρόσληψης του φαρμάκου από τα νεφρά. J Αντιμικροβιακούς Παράγοντες Χημειοθεραπεία. 2009; 53(8):3302-7.

16. Silverblatt F. Παθογένεση της νεφροτοξικότητας των κεφαλοσπορινών και των αμινογλυκοσιδών: μια ανασκόπηση των σημερινών εννοιών. J Ανασκοπήσεις μολυσματικών ασθενειών. 1982;4(Συμπλήρωμα_2):S360-S5.

17. De Broe ME, Paulus GJ, Verpooten GA, Roels F, Buyssens N, Wedeen R, et al. Πρώιμες επιδράσεις της γενταμυκίνης, της τομπραμυκίνης και της αμικασίνης στον ανθρώπινο νεφρό. J Kidney international. 1984;25(4):643-52.

18. Nonclercq D, Wrona S, Toubeau G, Zanen J, Heuson-Stiennon JA, Schaudies RP, et al. Σωληναριακός τραυματισμός και αναγέννηση στο νεφρό αρουραίου μετά από οξεία έκθεση στη γενταμικίνη: μια μελέτη χρονικής πορείας. J Νεφρική Ανεπάρκεια. 1992;14(4):507-21.

19. Ramsammy LS, Josepovitz C, Kaloyanides GJ. Η γενταμικίνη αναστέλλει τη διέγερση των αγωνιστών του καταρράκτη της φωσφατιδυλινοσιτόλης σε πρωτογενείς καλλιέργειες εγγύς σωληναριακών κυττάρων κουνελιού και στον νεφρικό φλοιό αρουραίου. J Journal of Pharmacology Experimental Therapeutics. 1988;247(3):989-96.

20. Kaloyanides G. Αλληλεπιδράσεις φαρμάκου-φωσφολιπιδίου: ρόλος στη νεφροτοξικότητα των αμινογλυκοσιδίων. J Νεφρική Ανεπάρκεια. 1992; 14(3):351-7.

21. Regec AL, Trump BF, Trifilis AL. Επίδραση της γενταμυκίνης στο λυσοσωμικό σύστημα καλλιεργημένων ανθρώπινων εγγύς σωληναριακών κυττάρων: Ενδοκυτωτική δραστηριότητα, λυσοσωμικό pH και ευθραυστότητα της μεμβράνης. J Βιοχημική Φαρμακολογία. 1989;38(15):2527-34.

22. Morales AI, Detaille D, Prieto M, Puente A, Briones E, Arévalo M, et al. Η μετφορμίνη αποτρέπει την πειραματική νεφροπάθεια που προκαλείται από τη γενταμυκίνη μέσω μιας οδού που εξαρτάται από τα μιτοχόνδρια. J Kidney international. 2010;77(10):861-9.

23. Cuzzocrea S, Mazzon E, Dugo L, Serraino Ι, Di Paola R, Britti D, et αϊ. Ένας ρόλος για το υπεροξείδιο στη μεσολαβούμενη από γενταμυκίνη νεφροπάθεια σε αρουραίους. European Journal of Pharmacology. 2002; 450(1):67- 76.

24. Horibe T, Matsui Η, Tanaka Μ, Nagai Η, Yamaguchi Y, Kato K, et al. Η γενταμικίνη δεσμεύεται στη θέση λεκτίνης της καλρετικουλίνης και αναστέλλει τη δράση συνοδού της. J Biochemical Biophysical Research Communications. 2004; 323(1):281-7.

25. Peyrou M, Hanna PE, Cribb AE. Η σισπλατίνη, η γενταμυκίνη και η π-αμινοφαινόλη επάγουν δείκτες στρες στο ενδοπλασματικό δίκτυο στους νεφρούς του αρουραίου. J Τοξικολογικές Επιστήμες. 2007;99(1):346-53.

26. Johnson D. Normal Lab values ​​2014.

27. Fauzi A, Salasia SIO, Titisari N. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) ως πιθανός βιοδείκτης για την έγκαιρη ανίχνευση οξείας νεφρικής ανεπάρκειας. J Συγκριτική Κλινική Παθολογία. 2016;25(2):387-92.

28. Lameire Ν, Hoste EJCoicc. Σκέψεις σχετικά με τον ορισμό, την ταξινόμηση και τη διαγνωστική αξιολόγηση της οξείας νεφρικής ανεπάρκειας. 2004; 10(6):468-75.

29. Devarajan P. Αναδυόμενοι βιοδείκτες οξείας νεφρικής βλάβης. Οξεία νεφρική βλάβη. 156: Karger Publishers; 2007. Σελ. 203-12.

30. Nguyen MT, Devarajan PJPn. Βιοδείκτες για την έγκαιρη ανίχνευση οξείας νεφρικής βλάβης. 2008; 23(12):2151.