Διαφορές λόγω φύλου στα αυτοαντισώματα πλάσματος έναντι των πρωτεϊνών του κεντρικού νευρικού συστήματος σε βετεράνους του πολέμου του Κόλπου έναντι υγιών και συμπτωματικών ελέγχων

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Mohamed B. Abou-Donia 1,*, Maxine H. Krengel 2, Elizabeth S. Lapadula 1, Clara G. Zundel 2, Jessica LeClair 3, Joseph Massaro 3, Emily Quinn 3, Lisa A. Conboy 4, Efi Kokkotou 4, Daniel D. Nguyen 5, Maria Abreu 6,7, Nancy G. Klimas 6,7 και Kimberly Sullivan 5,*

1 Department of Pharmacology and Cancer Biology, Duke University Medical Center, Durham, NC 27710, USA;

2 Department of Neurology, Boston University School of Medicine, Boston, MA 02118, USA;

3 Τμήμα Βιοστατιστικής, Boston University School of Public Health, Boston, MA 02118, USA;

4 Department of Medicine, Harvard Medical School, Boston, MA 02115, USA;

5 Department of Environmental Health, Boston University School of Public Health, Boston, MA 02118, USA;

6 Dr. Kiran C. Patel College of Osteopathic Medicine, Institute for Neuroimmune Medicine, Nova Southeastern University, Fort Lauderdale, FL 33314, Η.Π.Α.

7 Department of Immunology, Miami VA Medical Center, Miami, FL 33125, USA

Αφηρημένη:

Οι βετεράνοι από τον Πόλεμο του Κόλπου του 1991 (GW) υπέφεραν από ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου (GWI) για σχεδόν 30 χρόνια. Αυτή η ασθένεια περιλαμβάνει πολλαπλά συστήματα του σώματος, συμπεριλαμβανομένου του κεντρικού νευρικού συστήματος (ΚΝΣ). Η διάγνωση και η θεραπεία του GWI είναι δύσκολη επειδή δεν υπάρχει αντικειμενικός διαγνωστικός βιοδείκτης. Πρόσφατα, αναφέραμε έναν πρόσφατα αναπτυγμένο βιοδείκτη αίματος που διακρίνει το GWI από τους υγιείς μάρτυρες GW και τους συμπτωματικούς ελέγχους με σύνδρομο ευερέθιστου εντέρου (IBS) και μυαλγική εγκεφαλομυελίτιδα/σύνδρομο χρόνιας κόπωσης (ME/CFS). Η παρούσα μελέτη σχεδιάστηκε για να συγκρίνει τα επίπεδα αυτών των βιοδεικτών μεταξύ ανδρών και γυναικών με GWI, καθώς και επιδράσεις ειδικά για το φύλο σε σύγκριση με υγιείς βετεράνους GW και συμπτωματικούς ελέγχους (IBS, ME/CFS). Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι οι άνδρες και οι γυναίκες με GWI διαφέρουν σε 2 από τα 10 αυτοαντισώματα στο πλάσμα, με τους άνδρες να παρουσιάζουν σημαντικά αυξημένα επίπεδα. Άνδρες και γυναίκες με GWI έδειξαν σημαντικά διαφορετικά επίπεδα αυτοαντισωμάτων σε 8 από τους 10 βιοδείκτες σε νευρωνικές και νευρογλοιακές πρωτεΐνες στο πλάσμα σε σχέση με τους ελέγχους. Συνοπτικά, η παρούσα μελέτη ασχολήθηκε με τη χρησιμότητα της χρήσης αυτοαντισωμάτων πλάσματος για πρωτεΐνες του ΚΝΣ για τη διάκριση μεταξύ ανδρών και γυναικών βετεράνων με GWI και άλλων υγιών και συμπτωματικών ομάδων ελέγχου.

Λέξεις-κλειδιά: αυτοαντίσωμα ΚΝΣ; ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου; γένος; βιοδείκτες; πρωτεΐνες; μυαλγική εγκεφαλομυελίτιδα/σύνδρομο χρόνιας κόπωσης. Σύνδρομο Ευερέθιστου Εντέρου

εκχύλισμα cistanche tubulosa

1. Εισαγωγή

Οι βετεράνοι του Πολέμου του Κόλπου (GW) υπέφεραν από μια κατάσταση γνωστή ως ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου (GWI), η οποία περιλαμβάνει πολλαπλά σωματικά συστήματα, συμπεριλαμβανομένου του κεντρικού νευρικού συστήματος (ΚΝΣ) [1-3]. Αυτή η χρόνια πάθηση επηρεάζει περίπου 250,000 βετεράνους του GW, συμπεριλαμβανομένου ενός μεγάλου ποσοστού των 40,000 γυναικών που αναπτύχθηκαν στον πόλεμο. Το GWI έχει επικαλυπτόμενα, αλλά διαφορετικά συμπτώματα από άλλες διαταραχές που επηρεάζουν επίσης τις γυναίκες, όπως το Σύνδρομο Μυαλγικής Εγκεφαλομυελίτιδας/Χρόνιας Κόπωσης (ME/CFS) και το Σύνδρομο Ευερέθιστου Εντέρου (IBS). Η έλλειψη αντικειμενικών διαγνωστικών δεικτών έχει ελαχιστοποιήσει την ικανότητα συνεκτικής διάγνωσης και θεραπείας του πλήθους των συμπτωμάτων του GWI. Πρόσφατα, αξιολογήσαμε έναν υποψήφιο βιοδείκτη πλάσματος για GWI και δείξαμε διαφορές σε άτομα που πληρούν τα κριτήρια για GWI έναντι υγιών GW και μη βετεράνων μαρτύρων με IBS και CFS. Δεδομένων των διαφορετικών συμπτωμάτων του GWI που εμφανίστηκαν μεταξύ ανδρών και γυναικών, ήταν ο επόμενος στόχος μας να αξιολογήσουμε πιθανές διαφορές σε αυτούς τους βιοδείκτες πλάσματος μεταξύ των φύλων [4-8]. Ο προσδιορισμός του εάν τα αυτοαντισώματα του ΚΝΣ διαφέρουν μεταξύ ανδρών και γυναικών με GWI και των αντίστοιχων ελέγχων τους θα βοηθήσει στην περαιτέρω βελτίωση της διαγνωστικής χρησιμότητας αυτών των βιοδεικτών πλάσματος. Οι γυναίκες που υπηρέτησαν στο GW του 1991 έχουν αναφέρει πολυάριθμα προβλήματα υγείας, πολλά από τα οποία σχετίζονται με το φύλο. Ορισμένες μελέτες έχουν προτείνει αυξημένα ποσοστά προβλημάτων υγείας και λοιμώξεων της ουροδόχου κύστης σε σχέση με τους ελέγχους βετεράνων της εποχής GW [9]. Στο Ft. Η κοόρτη Devens (FDC) βετεράνων GW, γυναίκες GW σε σχέση με μη βετεράνους ελέγχους έχει βρεθεί ότι έχουν υψηλότερο κίνδυνο για διαβήτη αλλά χαμηλότερο κίνδυνο υπέρτασης σε σύγκριση με την ηλικία και το φύλο της Εθνικής Έρευνας Εξέτασης Υγείας και Διατροφής (NHANES). αντιστοιχισμένη κοόρτη [8].

Αντίθετα, οι άνδρες που χρησιμοποιούν GW ανέφεραν αυξημένα ποσοστά επτά χρόνιων καταστάσεων υγείας σε σχέση με τους άνδρες NHANES, συμπεριλαμβανομένων σημαντικά υψηλότερων πιθανοτήτων αναφοράς υπέρτασης, υψηλής χοληστερόλης, καρδιακής προσβολής, διαβήτη, εγκεφαλικού, αρθρίτιδας και χρόνιας βρογχίτιδας [8]. Επειδή αυτή η μελέτη έδειξε ότι οι άνδρες GW διέτρεχαν αυξημένο κίνδυνο για ιατρικές καταστάσεις που είναι γνωστοί παράγοντες κινδύνου για μετέπειτα καρδιαγγειακή και εγκεφαλοαγγειακή νόσο (π.χ. υπέρταση, υψηλή χοληστερόλη, διαβήτης), οι άνδρες GW μπορεί να εμφανίσουν αυξημένα ποσοστά βιοδεικτών ΚΝΣ σε σχέση με τις γυναίκες βετεράνες τους. ομόλογοί. Ωστόσο, σε μια πρόσφατη μελέτη που χρησιμοποιούσε τη μεγάλη κοόρτη βιοαποθετηρίου της εποχής GW (GWEBC), οι γυναίκες που είχαν αναπτυχθεί στο GW ήταν σημαντικά πιο πιθανό να αναφέρουν συμπτώματα που σχετίζονται με γνωστικά, νευρολογικά και προβλήματα διάθεσης από τις γυναίκες της εποχής GW [4]. Ως εκ τούτου, οι γυναίκες με GW μπορεί επίσης να εμφανίσουν αυξημένους βιοδείκτες που σχετίζονται με το ΚΝΣ σε σύγκριση με άλλες κοόρτες γυναικών. Επιπλέον, όταν συγκρίνουμε άντρες βετεράνους GW που έχουν αναπτυχθεί με γυναίκες, οι γυναίκες βετεράνοι GW έχουν βρεθεί ότι χρησιμοποιούν περισσότερη υγειονομική περίθαλψη σε εξωτερικούς και εσωτερικούς ασθενείς 5 χρόνια μετά την ανάπτυξη [10]. Οι γυναίκες GW έχουν επίσης βρεθεί ότι έχουν υψηλότερα ποσοστά σοβαρών και μέτριων περιπτώσεων GWI σε σχέση με τους άνδρες ομολόγους τους [5,11-13]. Διάφοροι παράγοντες μπορεί να ευθύνονται για τις παρατηρούμενες διαφορές φύλου στο GWI και μεμονωμένα συμπτώματα, συμπεριλαμβανομένων των διαφορών φύλου στην ευαισθησία σε νευροτοξικές εκθέσεις στο θέατρο και/ή υψηλότερες εκθέσεις μεταξύ του ανδρικού προσωπικού. Ήδη από το 1996, εικάσαμε ότι οι χημικές εκθέσεις την εποχή του GW ήταν ένας παράγοντας καθίζησης στο GWI [14,15].

αποτελέσματα τουεκχύλισμα cistanche tubulosa

Δείξαμε σε πειραματικές μελέτες ότι η συνδυασμένη έκθεση σε φυτοφάρμακα και βρωμιούχο πυριδοστιγμίνη (PB) προκάλεσε νευροτοξικές επιδράσεις που παρεμβαίνουν στη λειτουργία των νευρωνικών και νευρογλοιακών κυττάρων, οδηγώντας σε μακροχρόνιες και δυνητικά νευροεκφυλιστικές επιδράσεις [14-16]. Ο νευροεκφυλισμός περιλαμβάνει τον θάνατο των νευρωνικών και νευρογλοιακών κυττάρων και την απελευθέρωση των περιεχομένων τους στην κυκλοφορία μέσω του παραβιασμένου αιματοεγκεφαλικού φραγμού (BBB), ο οποίος μπορεί στη συνέχεια να ανιχνευθεί μέσω των αυτοαντισωμάτων του ΚΝΣ στο πλάσμα [17]. Έχουμε δείξει προηγουμένως αλλαγές BBB στα ζωικά μας μοντέλα έκθεσης σε GWI [18]. Έχουμε επίσης δείξει προηγουμένως ότι αυτοί οι δείκτες πλάσματος μπορούν να ανιχνευθούν σε χαμηλά επίπεδα σε άτομα χωρίς σημαντική ασθένεια αλλά αυξάνονται σε άτομα με μεγαλύτερη συμπτωματολογία [16,19]. Το ΚΝΣ έχει δύο τύπους κυττάρων: νευρώνες και υποστηρικτικά νευρογλοιακά κύτταρα. Τα νευρωνικά κύτταρα περιέχουν αρκετές κυτταροσκελετικές πρωτεΐνες, συμπεριλαμβανομένων των ταυ και των νευροινιδίων [20,21]. Μαζί με τους μικροσωληνίσκους που κατασκευάζονται από τουμπουλίνη, σχηματίζουν τη ραχοκοκαλιά του αξονικού κυτταροσκελετού. Αυτές οι πρωτεΐνες εμπλέκονται στην αξονική μεταφορά βασικών θρεπτικών ουσιών, αμινοξέων και οργανιδίων κάτω από τον άξονα [22]. Οι πρωτεΐνες που σχετίζονται με μικροσωληνίσκους, (MAP)-2 και tau, προάγουν τον πολυμερισμό και τη σταθεροποίηση των μικροσωληνίσκων στους άξονες, στα νευρονημάτια διασταυρούμενης γέφυρας και στους μικροσωληνίσκους που συνδέονται μεταξύ τους. Αυτό βοηθά στη διατήρηση του κυτταροσκελετού για αξονική μεταφορά [23]. Οι πρωτεΐνες Tau εντοπίζονται κυρίως στον άξονα σε νευρωνικά κύτταρα. Τα υποστηρικτικά νευρογλοιακά κύτταρα, τα ολιγοδενδροκύτταρα στο ΚΝΣ και τα κύτταρα Schwann στο περιφερικό νευρικό σύστημα (PNS), παράγουν βασική πρωτεΐνη μυελίνης (MBP) και γλυκοπρωτεΐνη που σχετίζεται με τη μυελίνη (MAG) που είναι πρωτεολιπίδια μεμβράνης [24]. Οι γλοιακές αστροκυτταρικές πρωτεΐνες παράγουν γλοιακή ινιδιακή όξινη πρωτεΐνη (GFAP), ένα συστατικό του κυτταροσκελετού της αστρογλοίας, η οποία είναι ιδιαίτερα ειδική για το ΚΝΣ και απελευθερώνεται από το αστροκύτταρο στον εξωκυτταρικό χώρο μετά από τραυματισμό του ΚΝΣ [25]. Η πρωτεΐνη S100B που δεσμεύει το ασβέστιο απελευθερώνεται επίσης από τα αστρογλοιακά κύτταρα (Εικόνα 1).

Πολλές από αυτές τις νευρωνικές κυτταροσκελετικές και ειδικά τις νευρογλοιακές πρωτεΐνες βρίσκονται μόνο στο ΚΝΣ και τα αυτοαντισώματά τους βρίσκονται στο περιφερικό αίμα εάν αυτές οι πρωτεΐνες έχουν κάποια στιγμή διαρρεύσει μέσω του BBB και το ανοσοποιητικό σύστημα δημιουργήσει μια απάντηση αυτοαντισώματος σε αυτές [18,26] . Η χρονική πορεία αυτής της παραβίασης BBB θα μπορούσε να έχει συμβεί κάποια στιγμή στο παρελθόν σε αυτά τα άτομα, με αποτέλεσμα τη διαρροή αυτών των πρωτεϊνών από νευρώνες και/ή γλοία. Έτσι, παρόλο που το S100B, ένας δείκτης του τρέχοντος συμβιβασμού της BBB, δεν διέφερε στην προηγούμενη μελέτη μας σε βετεράνους με GWI, αυτό δεν σημαίνει ότι κάποια παραβίαση BBB δεν συνέβη κάποια στιγμή στο παρελθόν προκαλώντας διαρκή ανιχνεύσιμα αυτοαντισώματα σε αυτές τις πρωτεΐνες του ΚΝΣ στο αίμα . Brain Sci. 2020, 10, x FOR PEAER REVIEW 3 από 16 που είναι ιδιαίτερα ειδικό για το ΚΝΣ και απελευθερώνεται από το αστροκύτταρο στον εξωκυττάριο χώρο μετά από τραυματισμό του ΚΝΣ [25]. Η πρωτεΐνη S100B που δεσμεύει το ασβέστιο απελευθερώνεται επίσης από τα αστρογλοιακά κύτταρα (Εικόνα 1). Πολλές από αυτές τις νευρωνικές κυτταροσκελετικές και ειδικά τις νευρογλοιακές πρωτεΐνες βρίσκονται μόνο στο ΚΝΣ και τα αυτοαντισώματά τους βρίσκονται στο περιφερικό αίμα εάν αυτές οι πρωτεΐνες έχουν κάποια στιγμή διαρρεύσει μέσω του BBB και το ανοσοποιητικό σύστημα δημιουργήσει μια απάντηση αυτοαντισώματος σε αυτές [18,26] . Η χρονική πορεία αυτής της παραβίασης BBB θα μπορούσε να έχει συμβεί κάποια στιγμή στο παρελθόν σε αυτά τα άτομα, με αποτέλεσμα τη διαρροή αυτών των πρωτεϊνών από νευρώνες και/ή γλοία. Έτσι, παρόλο που το S100B, ένας δείκτης του τρέχοντος συμβιβασμού της BBB, δεν διέφερε στην προηγούμενη μελέτη μας σε βετεράνους με GWI, αυτό δεν σημαίνει ότι κάποια παραβίαση BBB δεν συνέβη κάποια στιγμή στο παρελθόν προκαλώντας διαρκή ανιχνεύσιμα αυτοαντισώματα σε αυτές τις πρωτεΐνες του ΚΝΣ στο αίμα .

Η παρούσα μελέτη διερευνά τις επιδράσεις του φύλου στην παρουσία κυκλοφορούντων αυτοαντισωμάτων της κατηγορίας ανοσοσφαιρίνης G (IgG) έναντι νευρωνικών και νευρογλοιακών πρωτεϊνών ειδικών για το ΚΝΣ στο πλάσμα βετεράνων GW με και χωρίς GWI καθώς και σε συμπτωματικούς μη βετεράνους ελέγχους (IBS, και ME/CFS). Συγκεκριμένα, υποθέσαμε ότι οι άνδρες και οι γυναίκες βετεράνοι με GWI θα διέφεραν μεταξύ τους ως προς την κατανομή των πρωτεϊνών αυτοαντισώματος του ΚΝΣ και ότι οι άνδρες και οι γυναίκες GW θα είχαν υψηλότερα επίπεδα πρωτεϊνών αυτοαντισωμάτων του ΚΝΣ από άλλες συμπτωματικές ομάδες με χρόνιες ασθένειες, συμπεριλαμβανομένων των IBS και ME/CFS. . Λόγω της έκθεσης κατά τη διάρκεια του πολέμου, όλοι οι βετεράνοι του GW θα μπορούσαν να είχαν κάποιο επίπεδο συμβιβασμού στο BBB, όπως αποδεικνύεται από τα αυτοαντισώματα του ΚΝΣ στο πλάσμα, αλλά υποθέσαμε ότι εκείνοι με GWI θα είχαν υψηλότερα επίπεδα αυτών των δεικτών αίματος

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1. Πληθυσμός Μελέτης

Οι μέθοδοι είναι οι ίδιες με τη μελέτη μας που δημοσιεύτηκε πρόσφατα [19]. Εν συντομία, πλάσμα από βετεράνους GW παρασχέθηκε από το Gulf War Illness Research Consortium (GWIC), τη μελέτη Dynamic Modeling of GWI από το Nova Southeastern University, τη μελέτη που χρηματοδοτήθηκε από το Congressionally Directed Medical Research Program (CDMRP) στο South Florida Veterans Affairs Foundation for Research and Education, Inc., η δοκιμή θεραπείας με βελονισμό και η βιοαποθήκη μελέτης ευερέθιστου εντέρου στο Harvard/BIDMC. Η έγκριση της Επιτροπής Θεσμικής Αναθεώρησης (IRB) λήφθηκε από το Πανεπιστήμιο της Βοστώνης, το Πανεπιστήμιο Nova Southeastern, το Miami VAMC και το Πανεπιστήμιο του Χάρβαρντ. Οι ίδιες τυπικές διαδικασίες λειτουργίας χρησιμοποιήθηκαν για κάθε θέση μελέτης για φλεβοτομή, διαχωρισμό πλάσματος και υποπολλαπλασιασμό. Ελήφθησαν δείγματα πλάσματος από άτομα που νηστεύουν και αποθηκεύτηκαν στους -80 ◦C. Παρέμειναν παγωμένα μέχρι τις αναλύσεις. Οι συμμετέχοντες συμφώνησαν στις αντίστοιχες μελέτες τους χρησιμοποιώντας τις κατευθυντήριες γραμμές της Διεθνούς Διάσκεψης Εναρμόνισης Καλής Κλινικής Πρακτικής (ICH GCP). Τα κριτήρια GWI του Κάνσας χρησιμοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό των περιπτώσεων GWI και των ελέγχων [27]. Τα κριτήρια GWI του Κάνσας απαιτούν από τους βετεράνους του GW να εγκρίνουν συμπτώματα σε τουλάχιστον 3 από τους 6 τομείς συμπτωμάτων (κόπωση, πόνος, γνωστικός/νευρολογικός/διάθεση, γαστρεντερικός, αναπνευστικός και δέρμα). Οι έλεγχοι βετεράνων περιελάμβαναν στρατευμένους βετεράνους από το GW του 1991 που δεν πληρούσαν το GWI του Κάνσας ή τα κριτήρια αποκλεισμού. Τα κριτήρια αποκλεισμού του Kansas GWI αποκλείουν άτομα που αναφέρουν ότι έχουν διαγνωστεί με άλλη ιατρική πάθηση που θα μπορούσε να εξηγήσει τα χρόνια ιατρικά συμπτώματά τους, συμπεριλαμβανομένων βετεράνων με ιστορικό προηγούμενου κεντρικού νευρικού συστήματος ή σοβαρών ψυχιατρικών διαταραχών που μπορεί να επηρεάσουν τη γνωστική λειτουργία (π.χ. επιληψία, εγκεφαλικό, εγκέφαλος όγκος, σκλήρυνση κατά πλάκας, νόσος του Πάρκινσον, νόσος Αλτσχάιμερ, σχιζοφρένεια). Δείγματα πλάσματος από συμπτωματικούς ελέγχους προήλθαν από προηγούμενες μελέτες ατόμων με ME/CFS και IBS [28,29]. Οι περιπτώσεις ME/CFS προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας κριτήρια του 1994 των Κέντρων Ελέγχου και Πρόληψης Νοσημάτων (CDC) [28]. Οι συμμετέχοντες στο IBS πληρούσαν τα κριτήρια Rome III [29]. Οι πλήρεις κοόρτες έχουν περιγραφεί σε προηγούμενες εργασίες (υποδείγμα GWIC, CFS, IBS, GWIC [16,30-33]).

2.2. Υλικά

Οι πηγές πρωτεΐνης περιγράφηκαν επίσης προηγουμένως [19]: Τομπουλίνη (ανθρώπινο ανασυνδυασμένο, Prospec Cat. # PRO{1}}), Πρωτεΐνη 2 που σχετίζεται με μικροσωληνίσκο (MAP-2, ανθρώπινη ανασυνδυασμένη, Origene, Κατ. #). TP316775, ανθρώπινος ανασυνδυασμένος), Tau-381 (ανθρώπινος ανασυνδυασμένος, Millipore Cat. #AG952), Πρωτεΐνη νευροϊνιδίων (NFP, Prospec, Cat #PRO-523), Calmodulin Kinase II (ανθρώπινος ανασυνδυασμένος, CaMKII, Novus Biologicals, Cat #H000000H15-P01), Alphasynuclein (human recombinant, AnaSpec Cat. #AS-55555), Myelin Basic Protein (MBP, human, Fitzgerald Cat. #30R- AM030), γλυκοπρωτεΐνη σχετιζόμενη με μυελίνη (MAG, ανθρώπινη ανασυνδυασμένη, Sinobiological Cat. 131-86 H02H), Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP, άνθρωπος, CalBiochem Cat. #345996), S100B Protein (human #30R Cat. -AS002). Αντιανθρώπινη IgG κατσίκας συζευγμένη με υπεροξειδάση χρένου και το βελτιωμένο αντιδραστήριο χημειοφωταύγειας ελήφθη από την Amersham Pharmacia Biotech (Piscataway, NJ, USA). Πήγματα δωδεκυλοθειικού νατρίου (SDS), βαθμίδωσης 2-20 τοις εκατό (8 × 8) και 15 mM τρις-γλυκίνης ελήφθησαν από την Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Όλα τα άλλα υλικά αγοράστηκαν από την Amersham.

όφελος από το εκχύλισμα σωληνίσκου cistanche

2.3. Δήλωση Δεοντολογίας

Έγκριση για τη χρήση αποθηκευμένων δειγμάτων αίματος από όλες τις τοποθεσίες μελέτης για αυτήν τη μελέτη λήφθηκε από την Επιτροπή Ιδρυματικής Αναθεώρησης του Συστήματος Υγείας του Πανεπιστημίου Duke για Κλινικές Έρευνες στις 10/9/2017 και από την Επιτροπή Ιδρυματικής Αναθεώρησης του Πανεπιστημίου Ιατρικής Πανεπιστημιούπολης της Βοστώνης στις 19/1/ 2018. Τα συγκεκριμένα συστατικά του πρωτοκόλλου για το Πανεπιστήμιο Duke ήταν: Αναγνωριστικό Πρωτοκόλλου: Pro00003202, Αναγνωριστικό Αναφοράς: 335940, Κύριος Ερευνητής: Mohamed Abou Donia, Τίτλος Πρωτοκόλλου: «Τραυματισμός νευρικού συστήματος». Τα συγκεκριμένα συστατικά του πρωτοκόλλου για το Πανεπιστήμιο της Βοστώνης ήταν αναγνωριστικό πρωτοκόλλου: H-34334, Αναγνωριστικό αναφοράς: 1288716, Κύριος ερευνητής: Kimberly Sullivan, Τίτλος πρωτοκόλλου: 'Νέοι αυτοαντισώματα ορός και εγκεφαλονωτιαίοι βιοδείκτες σε βετεράνους με ασθένεια του πολέμου του Κόλπου.' Δείγματα πλάσματος κοινοποιήθηκαν από αποθετήρια εγκεκριμένα από το IRB από μελέτες στο Πανεπιστήμιο της Βοστώνης (IRB # H-32768), στο NOVA Southeastern University/Miami VA Medical Center (IRB # 4987.76 and IRB # 4987.75), στο Beth Israel Hospital/Harvard University ( IRB # 2011P-000124), και το New England School of Acupuncture (IRB # 09-204).

2.4. Διαδικασίες

2.4.1. Διαδικασίες πλάσματος

Όλες οι τοποθεσίες ακολούθησαν το ίδιο πρωτόκολλο: για φλεβοκέντηση, χειρισμό αίματος, διαχωρισμό πλάσματος, κλασματοποίηση και αποθήκευση στους -80 ◦C. Το ίδιο πρωτόκολλο φλεβοτομής και δείγματος διανεμήθηκαν γραπτώς σε όλα τα σημεία και περιελάμβαναν νηστεία πριν την αιμοληψία το πρωί. Όλα τα δείγματα που αναλύθηκαν ήταν δείγματα αίματος που συλλέχθηκαν πριν από την παρέμβαση. Τα δείγματα που χρησιμοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη δεν είχαν αποψυχθεί προηγουμένως και δεν είχαν αιμόλυση με οπτική επιθεώρηση.

2.4.2. Western Blot Assay

Σε αυτή τη μελέτη, χρησιμοποιήθηκε ανάλυση Western blot για τον προσδιορισμό των αυτοαντισωμάτων έναντι συγκεκριμένων πρωτεϊνών στο δείγμα πλάσματος των περιπτώσεων GWI και των υγιών και συμπτωματικών μαρτύρων ανά φύλο. Αυτή η δοκιμασία επέτρεψε τον προσδιορισμό των αυτοαντισωμάτων και των σχετικών ισομορφών του αντιγόνου. Όπως περιγράφηκε προηγουμένως, κάθε δείγμα πλάσματος αναλύθηκε εις τριπλούν [19]. Όλες οι πρωτεΐνες φορτώθηκαν σε 10 ng/λωρίδα εκτός από την IgG, η οποία φορτώθηκε ως 100 ng/λωρίδα. Οι πρωτεΐνες μετουσιώθηκαν και ηλεκτροφορήθηκαν σε SDS-PAGE (βαθμίδωση 4 τοις εκατό έως 20 τοις εκατό) που αγοράστηκε από την Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Χρησιμοποιήθηκε ένα πήκτωμα για κάθε δείγμα ορού. Οι πρωτεΐνες μεταφέρθηκαν σε μεμβράνες φθοριούχου πολυβινυλιδενίου (PVDF) (Amersham). Οι μη ειδικές θέσεις δέσμευσης αποκλείστηκαν με ρυθμισμένο με Tris SalineTween (TBST) (40 mM Tris (ρΗ 7,6), 300 mM NaCl και 0,1 τοις εκατό Tween 20) που περιείχε 5 τοις εκατό σκόνη γάλακτος χωρίς λιπαρά για 1 ώρα στους 22 ◦C. Οι μεμβράνες επωάστηκαν με δείγματα ορού σε αραιώσεις 1:100 σε TBST με 3 τοις εκατό σκόνη γάλακτος χωρίς λιπαρά όλη τη νύχτα στους 4 ◦C. Μετά από πέντε πλύσεις σε TBST, οι μεμβράνες επωάστηκαν με αραίωση 1:2000 κατσίκας αντι-ανθρώπινης IgG συζευγμένης με υπεροξειδάση χρένου (Amersham). Οι μεμβράνες αναπτύχθηκαν με ενισχυμένη χημειοφωταύγεια χρησιμοποιώντας το πρωτόκολλο του κατασκευαστή (Amersham) και έναν καταγραφέα μεταβλητού μοντέλου Typhoon 8600 (GE Lifesciences, Marlborough, MA, ΗΠΑ). Η ένταση του σήματος ποσοτικοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το λογισμικό ανάλυσης εικόνας Bio-Rad έκδοση 4.5 (Hercules, CA, USA). Όλες οι δοκιμές πραγματοποιήθηκαν με τους ερευνητές τυφλούς ως προς τον έλεγχο περιπτώσεων και την κατάσταση του φύλου των δειγμάτων.

2.4.3. Ειδικότητα Αυτοαντισωμάτων Πλάσματος

Προηγουμένως, έχουμε ελέγξει την εξειδίκευση του πλάσματος και του αυτοαντισώματος του ορού πραγματοποιώντας μια δοκιμασία ανταγωνισμού πεπτιδίου/αντιγόνου, στην οποία ο ορός και το πλάσμα είχαν κολλήσει με την πρωτεΐνη ή το πεπτίδιο στόχο [34]. Ο ορός από τυχαίους υγιείς μάρτυρες αναμίχθηκε με ή χωρίς tau, MAP2 ή MBP. Το μίγμα πρωτεϊνών φυγοκεντρήθηκε στις 15,000 rpm για να εξαντληθούν τυχόν ανοσοσυμπλέγματα. Τα υπερκείμενα στη συνέχεια αφαιρέθηκαν προσεκτικά και χρησιμοποιήθηκαν σε στύπωμα Western. Οι ειδικότητες των αυτοαντισωμάτων έναντι όλων των ελεγχόμενων πρωτεϊνών επιβεβαιώθηκαν σε μια μελέτη παρακολούθησης [35].

2.5. Στατιστική

Τα συγκεντρωτικά δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος ± SD για συνεχείς μεταβλητές και ο αριθμός και το ποσοστό των συμμετεχόντων σε κάθε κατηγορία για τις κατηγορικές μεταβλητές. Οι δημογραφικές τιμές των υποκειμένων συγκρίθηκαν με τις ομάδες ελέγχου χρησιμοποιώντας Students t-test συνεχές και chi-square για τις κατηγορικές μεταβλητές. Οι μέσες τιμές των αυτοαντισωμάτων των ανδρών και γυναικών του GWI συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας ανάλυση συνδιακύμανσης (ANCOVA), προσαρμοζόμενη για την ηλικία και τη φυλή. Η φυλή χρησιμοποιήθηκε διχοτομικά (καυκάσια ή μη). Στη συνέχεια, οι μέσες τιμές των γυναικών GWI συγκρίθηκαν με τις υγιείς γυναίκες GW και στη συνέχεια επαναλήφθηκαν για τους άνδρες GWI και τους υγιείς άνδρες GW. Τέλος, οι μέσες τιμές των γυναικών GWI συγκρίθηκαν με τις συνδυασμένες 3 ομάδες ελέγχου (μάρτυρες GW, IBS, ME/CFS) χρησιμοποιώντας ANCOVA, προσαρμοζόμενη για την ηλικία και τη φυλή. Αυτή η ανάλυση στη συνέχεια επαναλήφθηκε για τους άνδρες. Μια αμφίπλευρη τιμή p < 0.05="" έγινε="" αποδεκτή="" ως="" στατιστικά="" σημαντική="" για="" όλες="" τις="" αναλύσεις="" και="" οι="" αναλύσεις="" δεν="" προσαρμόστηκαν="" για="" πολλαπλές="" συγκρίσεις.="" οι="" αναλύσεις="" πραγματοποιήθηκαν="" χρησιμοποιώντας="" sas="" έκδοση="" 9.4="" (sas="" institute="" inc.="" 2013.="" cary,="" nc,="">

όφελος από το εκχύλισμα cistanche tubulosa

2.6. Υπολογισμοί

Η μέτρηση οπτικής πυκνότητας για περιπτώσεις και μάρτυρες διαιρέθηκε με τη συγκέντρωση IgG ορού. Αυτή η τιμή για κάθε υποκείμενο κανονικοποιήθηκε σε μάρτυρες και εκφράστηκε ως αλλαγή από υγιείς μάρτυρες. Επομένως, τα αποτελέσματα εκφράζονται ως μέσες τιμές τριπλής δοκιμασίας αυθαίρετων μονάδων οπτικής πυκνότητας κανονικοποιημένες στην οπτική πυκνότητα IgG σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες.

2.7. Δείκτης αυτοαντισώματος CNS (CAI)

Αυτός ο δείκτης καθορίζει τη συνολική νευροεκφυλιστική κατάσταση ενός ατόμου με βάση το επίπεδο των αυτοαντισωμάτων στο πλάσμα. Υπολογίζεται προσθέτοντας όλες τις τιμές των αυτοαντισωμάτων για κάθε νευρική πρωτεΐνη και στη συνέχεια διαιρώντας το άθροισμα με τον αριθμό των αυτοαντισωμάτων που χρησιμοποιούνται. Τέλος, η τιμή πολλαπλασιάζεται επί 10 για να παραχθεί μια εύκολη βαθμολογία CAI όπως αναφέρθηκε προηγουμένως κάτω από τον προηγούμενο δείκτη νευροεκφυλισμού [19].

3. Αποτελέσματα

3.1. Δημογραφικά στοιχεία συμμετεχόντων

Το δείγμα της μελέτης περιελάμβανε συνολικά 171 βετεράνους με GWI (137 άνδρες, 34 γυναίκες), συνολικά 56 GW άνδρες υγιείς ελέγχους και 4 GW γυναίκες βετεράνους υγιείς ελέγχους, συνολικά 3 άνδρες και 32 γυναίκες ελέγχους IBS και συνολικά 5 άνδρες και 45 γυναίκες συμπτωματικοί μάρτυρες CFS (Πίνακας 1). Ορισμένες από τις ομάδες (Άνδρες GWI έναντι Γυναικών GWI και GWI έναντι όλων των συνδυασμένων μαρτύρων) ήταν σημαντικά διαφορετικές ως προς την ηλικία και τη φυλή (καυκάσιος ή όχι), επομένως όλες οι περαιτέρω αναλύσεις ελέγχονταν για αυτές τις δημογραφικές μεταβλητές.

Αυτή η μελέτη αναφέρει τα αποτελέσματα της χρήσης των πρόσφατα αναπτυγμένων νευροεκφυλιστικών βιοδεικτών πλάσματος για τη διαφοροποίηση του προσωπικού εξυπηρέτησης ανδρών από γυναίκες που υπηρέτησαν στο GW 1990/1991 και ανέπτυξαν συμπτώματα GWI ή παρέμειναν υγιείς. Επιπλέον, διεξήχθησαν αναλύσεις για την ανίχνευση διαφορών μεταξύ των γυναικών με GWI έναντι των γυναικών GW και, στη συνέχεια, της συνδυασμένης ομάδας ελέγχου γυναικών (υγιείς βετεράνοι GW, IBS, ME/CFS) και μεταξύ ανδρών με GWI έναντι υγιών ανδρών GW και στη συνέχεια με τους συνδυασμούς ομάδα ελέγχου ανδρών. Τα επίπεδα 10 κυκλοφορούντων αυτοαντισωμάτων κατά των νευρικών πρωτεϊνών αναλύθηκαν στο πλάσμα ανδρών και γυναικών βετεράνων με GWI, με υγιείς άνδρες και γυναίκες GW και με συμπτωματικούς άνδρες και γυναίκες με CFS και IBS, που χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες.

3.2. Επιδράσεις του φύλου στα επίπεδα αυτοαντισωμάτων κατά των νευρικών πρωτεϊνών του πλάσματος

3.2.1. Αποτελέσματα αυτοαντισωμάτων που αναλύθηκαν ανά φύλο για περιπτώσεις GWI και GW Healthy Only

Αυτή η μελέτη περιελάμβανε 171 δείγματα πλάσματος από βετεράνους με GWI, συμπεριλαμβανομένων 137 (80,2 τοις εκατό ) ανδρών (μέση ηλικία 49.{5}}έτη) και 34 γυναικών (19,9 τοις εκατό ) (με μέση ηλικία 46,9 ετών) (Πίνακας 1 ). Διαφορές μεταξύ ανδρών και γυναικών σε σχέση με τα αυτοαντισώματα στο πλάσμα εντός των ομάδων GWI βρέθηκαν τέτοιες που οι άνδρες με GWI εμφάνισαν σημαντικά υψηλότερα επίπεδα τουμπουλίνης και MAG σε σύγκριση με γυναίκες βετεράνες με GWI (Πίνακας 2, Εικόνα 2). Δεν υπήρχαν αντισώματα όπου οι γυναίκες είχαν υψηλότερο μέσο όρο από τους άνδρες. Συγκρίναμε επίσης 56 GW υγιείς άνδρες (μέση ηλικία 50,5 έτη) με 4 GW υγιείς γυναίκες (μέση ηλικία 56,5 έτη). Παρόλο που δεν είχαμε στατιστική ισχύ, δεν βρέθηκαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ανδρών και γυναικών υγιών μαρτύρων GW σε κανένα από τα αυτοαντισώματα (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

3.2.2. Αποτελέσματα αυτοαντισώματος στο πλάσμα ανδρών βετεράνων με GWI έναντι υγιών ανδρών βετεράνων και στη συνέχεια γυναικών με GWI έναντι υγιών βετεράνων γυναικών

Η δεύτερη ανάλυση συνέκρινε άνδρες βετεράνους με GWI (N=137) με GW υγιείς άνδρες (N=56) και γυναίκες GWI (N=34) με GW υγιείς γυναίκες (N=4 ). Σε σύγκριση με τους υγιείς άνδρες, οι άνδρες GWI είχαν σημαντικά υψηλότερες τιμές αυτοαντισωμάτων για 9 από τα 10 αυτοαντισώματα με εξαίρεση το S100B. Σε σύγκριση με υγιείς γυναίκες, οι γυναίκες με GWI είχαν σημαντικά υψηλότερες τιμές αυτοαντισωμάτων για 2 από τα 10 αυτοαντισώματα, συμπεριλαμβανομένων των GFAP και τουμπουλίνης (Πίνακας 3).

3.2.3. Αποτελέσματα αυτοαντισώματος στο πλάσμα ανδρών βετεράνων GWI έναντι όλων των ανδρών ελέγχου και γυναικών βετεράνων GWI έναντι όλων των γυναικών ελέγχου

Η τρίτη ανάλυση συνέκρινε άνδρες βετεράνους με GWI (n {{0}}) και συνδυασμένο IBS, ME/CFS και υγιείς μάρτυρες GW βετεράνους άνδρες (n=64) και γυναίκες βετεράνους με GWI (n=34) και συνδυασμένα IBS, ME/CFS και γυναίκες βετεράνες GW ελέγχου υγείας (n=81) (Πίνακας 4). Σε σύγκριση με όλους τους άνδρες ελέγχους, οι άνδρες με GWI εμφάνισαν σημαντικά υψηλότερα (p < 0.01)="" μέσα="" επίπεδα="" 9="" στα="" 10="" αυτοαντισώματα="" κατά="" των="" νευρικών="" πρωτεϊνών="" (τουμπουλίνη,="" tau,="" map-2,="" mbp,="" nfp,="" mag,="" camkii,="" -syn="" και="" gfap).="" δεν="" παρατηρήθηκε="" σημαντική="" διαφορά="" για="" το="" s100b.="" οι="" γυναίκες="" βετεράνες="" με="" gwi="" εμφάνισαν="" σημαντικά="" αυξημένα="" (p="">< 0,01)="" μέσα="" επίπεδα="" 8="" στα="" 10="" αυτοαντισώματα="" σε="" σύγκριση="" με="" τη="" συνδυασμένη="" ομάδα="" γυναικών="" ελέγχου="" (ibs,="" me/cfs,="" υγιείς="" μάρτυρες="" gw="" βετεράνοι)="" συμπεριλαμβανομένων="" τουμπουλίνης,="" tau,="" map{{17}="" },="" mbp,="" mag,="" nfp,="" camkii="" και="" -syn="" (πίνακας="">

3.2.4. Τιμές CAI ανά φύλο σε άνδρες και γυναίκες Περιπτώσεις GWI έναντι ανδρών και γυναικών ελέγχου

Όταν όλα τα αυτοαντισώματα συνδυάστηκαν στη βαθμολογία CAI, οι άνδρες με GWI είχαν τις υψηλότερες τιμές των συνολικών συνδυασμένων αυτοαντισωμάτων, όπως υποδεικνύεται από μια βαθμολογία CAI 41,1 και οι γυναίκες με GWI έδειξαν βαθμολογία CAI 32,4. Αυτές οι τιμές ήταν στατιστικά σημαντικά διαφορετικές κατά ANCOVA, προσαρμοσμένες για την ηλικία και τη φυλή (ρ=0.007). Η βαθμολογία CAI των ανδρών ελέγχου GW είχε μέσο όρο 21,4, που ήταν στατιστικά χαμηλότερος από τους άνδρες GWI (p < 0.0001)="" (εικόνα="" 3).="" η="" βαθμολογία="" cai="" των="" γυναικών="" ελέγχου="" gw="" είχε="" μέση="" βαθμολογία="" 12,0,="" η="" οποία="" ήταν="" στατιστικά="" χαμηλότερη="" από="" τις="" γυναίκες="" gwi="" (p="">< 0,021).="" η="" συνδυασμένη="" ομάδα="" ανδρών="" ελέγχου="" είχε="" μέση="" τιμή="" cai="" 21,5,="" η="" οποία="" ήταν="" στατιστικά="" σημαντικά="" χαμηλότερη="" από="" την="" ομάδα="" ανδρών="" gwi="" (p="">< 0,0001).="" επιπλέον,="" η="" συνδυασμένη="" ομάδα="" ελέγχου="" γυναικών="" είχε="" μέση="" τιμή="" cai="" 18,7,="" η="" οποία="" ήταν="" επίσης="" σημαντικά="" χαμηλότερη="" από="" την="" ομάδα="" γυναικών="" gwi="" (p="">< 0,0001).="" σε="" αυτή="" τη="" μελέτη,="" τα="" αποτελέσματά="" μας="" τόσο="" για="" άνδρες="" όσο="" και="" για="" γυναίκες="" με="" gwi="" έδειξαν="" ότι="" οι="" τιμές="" cai="" τους="" ήταν="" υψηλότερες="" από="" το="" 90="" τοις="" εκατό="" των="">

4. Συζήτηση

Αυτή η μελέτη, χρησιμοποιώντας προηγουμένως επικυρωμένους βιοδείκτες αυτοαντισώματος του ΚΝΣ πλάσματος, δείχνει ότι υπήρχε διαφορά μεταξύ ανδρών και γυναικών βετεράνων με GWI, με τους άνδρες βετεράνους να έχουν σημαντικά υψηλότερα επίπεδα για 2 από τα 10 αυτοαντισώματα (τουμπουλίνη, MAG) που σχετίζονται με την νευραξονική και λειτουργίες ολιγοδενδροκυττάρων (Εικόνα 2). Όταν συνδυάζονται όλα τα αυτοαντισώματα στον νευροεκφυλιστικό δείκτη αυτοαντισωμάτων του ΚΝΣ (CAI), μια σημαντική

Παρατηρήθηκε διαφορά μεταξύ των ανδρών με GWI και των γυναικών με GWI, έτσι ώστε οι άνδρες με GWI είχαν μεγαλύτερο συνολικό φορτίο πρωτεϊνών αυτοαντισωμάτων και σημαντικά υψηλότερη τιμή CAI. Το δεύτερο σύνολο αναλύσεών μας συνέκρινε άνδρες βετεράνους με GWI με άνδρες υγιείς μάρτυρες GW και στη συνέχεια επανέλαβαν τις αναλύσεις για γυναίκες βετεράνους με GWI σε σύγκριση με υγιείς γυναίκες GW. Οι επόμενες αναλύσεις μας συνέκριναν τους άνδρες βετεράνους με GWI με όλους τους άνδρες ελέγχους από την προηγούμενη μελέτη μας (υγιείς βετεράνοι GW, μη βετεράνοι με IBS ή ME/CFS) [19]. Στη συνέχεια, πραγματοποιήσαμε τις ίδιες αναλύσεις συγκρίνοντας γυναίκες βετεράνους με GWI με τη συνδυασμένη ομάδα ελέγχου αποκλειστικά για γυναίκες (μη βετεράνους με IBS και ME/CFS). Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι οι άνδρες με GWI είχαν σημαντικά υψηλότερα επίπεδα αυτοαντισωμάτων για 9 από τα 10 αυτοαντισώματα σε σύγκριση με άνδρες υγιείς βετεράνους GW ή με τη συνδυασμένη ομάδα ανδρών ελέγχου.

Οι γυναίκες με GWI έδειξαν σημαντικά υψηλότερες τιμές για 2 από τα 10 αυτοαντισώματα σε σύγκριση με γυναίκες υγιείς βετεράνους GW και με 8 στα 10 αυτοαντισώματα σε σύγκριση με την αντίστοιχη συνδυασμένη ομάδα γυναικών ελέγχου (μη βετεράνοι με IBS και ME/CFS). Οι αναλύσεις CAI που συγκρίνουν τους άνδρες GWI με την ομάδα ανδρών ελέγχου και τις γυναίκες GWI με την αντίστοιχη ομάδα ελέγχου τους έδειξαν επίσης σημαντικά υψηλότερες τιμές για τους άνδρες και τις γυναίκες GWI, με διπλάσιες τιμές σε σύγκριση με τους αντίστοιχους μάρτυρες. Αυτά τα αποτελέσματα προστίθενται στα προηγούμενα ευρήματά μας, σύμφωνα με τα οποία η χρήση αποκοπής 30 ή περισσότερο στη βαθμολογία CAI θα μπορούσε να διακρίνει μεταξύ του GWI και άλλων χρόνιων διαταραχών. Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι αυτή η αποκοπή αντιστοιχεί τόσο σε άνδρες όσο και σε γυναίκες βετεράνους με GWI. Αν και οι άνδρες και οι γυναίκες βετεράνοι με GWI είχαν υψηλότερα επίπεδα αυτοαντισωμάτων από τις αντίστοιχες ομάδες ελέγχου τους, διέφεραν μεταξύ τους μόνο σε δύο πρωτεΐνες αυτοαντισώματος του ΚΝΣ. Ωστόσο, η συνολική συνδυασμένη βαθμολογία CAI ήταν σημαντικά υψηλότερη τιμή για τους άνδρες με GWI. Οι δύο σημαντικά διαφορετικές πρωτεΐνες περιελάμβαναν τουμπουλίνη και MAG, που σχετίζονται με τη λειτουργία των νευραξόνων και των ολιγοδενδροκυττάρων, τα οποία έχουν συσχετιστεί με το ιστορικό ήπιων τραυματικών τραυματισμών του εγκεφάλου (mTBI) και την έκθεση σε χημικά όπλα. Αυτά τα αποτελέσματα αντιστοιχούν με προηγούμενες μελέτες μας που έδειξαν αυξημένα ποσοστά έκθεσης σε mTBI και χημικά όπλα κατά τη διάρκεια του πολέμου, ιδιαίτερα σε άνδρες βετεράνους με GWI [30,36,37].

Στην πραγματικότητα, αυτή η υπόθεση πολλαπλών χτυπημάτων πρότεινε ότι όσοι είχαν έκθεση τόσο σε mTBI όσο και σε χημικά όπλα θα ανέφεραν περισσότερα χρόνια συμπτώματα υγείας που μπορεί να σχετίζονται με αυτούς τους αξονικούς και σχετιζόμενους με τη μυελίνη παθοβιολογικούς δείκτες. Αντίστοιχα, οι Carney et al. συνέκρινε εμπειρίες μάχης, επαγγελματικές και άλλες εκθέσεις που σχετίζονται με υπηρεσίες και χρήση υγειονομικής περίθαλψης ανδρών και γυναικών βετεράνων GW και ανέφεραν παρόμοιες στρατιωτικές εμπειρίες αλλά με άνδρες βετεράνους που συμμετέχουν συχνότερα σε δραστηριότητες που σχετίζονται με τη μάχη. Ωστόσο, δεν βρέθηκαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των φύλων στην έκθεση σε διαλύτες/πετροχημικές ουσίες, μολυσματικές ασθένειες, νευροτοξίνες, θερμικό στρες, τραύμα ή ακτινοβολία [38]. Επιπλέον, οι γυναίκες βετεράνες με GWI διέφεραν από τις υγιείς γυναίκες ελέγχου GW σε δύο δείκτες, συμπεριλαμβανομένου ενός νευρογλοιακού δείκτη (GFAP) και ενός νευρωνικού κυτταροσκελετικού δείκτη (Tubulin). Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι οι γυναίκες με GWI φαίνεται να εμφανίζουν περισσότερες νευρωνικές κυτταροσκελετικές και νευροφλεγμονώδεις αλλαγές σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες GW ή γυναίκες με IBS ή ME/CFS. Οι άρρενες βετεράνοι με GWI διέφεραν από τους υγιείς άνδρες GW με υψηλότερες τιμές σε όλα τα αυτοαντισώματα εκτός από τον δείκτη οξείας γλοιακής BBB S100B και την τιμή CAI, η οποία ήταν διπλάσια από αυτή των μαρτύρων.

Όταν οι γυναίκες με GWI συγκρίθηκαν με τη συνδυασμένη ομάδα ελέγχου, έδειξαν υψηλότερα επίπεδα αυτοαντισωμάτων σε όλους τους δείκτες εκτός από τους νευρογλοιακούς δείκτες GFAP και S100B. Και πάλι, η τιμή CAI τους ήταν σχεδόν διπλάσια από αυτή των συνδυασμένων ελέγχων. Παρόμοια με την προηγούμενη ανάλυση, οι άνδρες βετεράνοι με GWI δεν διέφεραν από τους αντίστοιχους μάρτυρες για την ενεργοποίηση των γλοιακών αγγείων και τον οξύ δείκτη BBB S100B. Αυτό υποδηλώνει ότι οι άρρενες βετεράνοι του GWI μπορεί να εμφανίζουν περισσότερο χρόνια νευρογλοιακή ενεργοποίηση, νευρωνική βλάβη και νευροφλεγμονή από τους υγιείς και συμπτωματικούς ομολόγους τους άνδρες ελέγχου με IBS και ME/CFS, επειδή το S100B είναι δείκτης της τρέχουσας διαταραχής του BBB και το GFAP είναι δείκτης τρέχουσας νευροφλεγμονής [39,40]. Αυτό συμβαίνει επειδή το GFAP εκκρίνεται από ενεργοποιημένα αστροκύτταρα, γεγονός που οδηγεί σε νευροφλεγμονή [41-43]. Όσον αφορά την ενσωμάτωση των ευρημάτων μας στο ευρύτερο πεδίο της έρευνας GWI σχετικά με τις διαφορές φύλου, έχει αποδειχθεί ότι υπάρχουν διαφορές στους ανοσοφλεγμονώδεις δείκτες και στα συνολικά ποσοστά συμπτωμάτων υγείας μεταξύ ανδρών και γυναικών βετεράνων GW [5,8,13 ,44–46]. Η τρέχουσα μελέτη προσθέτει στη βιβλιογραφία ότι οι άνδρες βετεράνοι GW έχουν υψηλότερες συνολικές τιμές αυτοαντισωμάτων (όπως εκτιμάται από την αναλογία CAI) και ότι τα ευρήματα είναι συνεπή με τους άνδρες και τις γυναίκες που ενδέχεται να εμφανίζουν αυξημένα αυτοαντισώματα σε παρόμοιο βαθμό, αλλά με μικρότερο αύξηση των αυτοαντισωμάτων σε γυναίκες που σχετίζεται με μεγαλύτερη επιβάρυνση των συμπτωμάτων. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι δικαιολογείται περαιτέρω μελέτη της ευαισθησίας της αποκοπής CAI των 30 τόσο για άνδρες όσο και για γυναίκες βετεράνους με GWI. Τα αυτοαντισώματα έναντι των νευρικών πρωτεϊνών εκτός από το ότι είναι βιοδείκτες του αίματος είναι επίσης ενδείξεις νευροεκφυλισμού και μπορεί να εξηγήσουν τους μηχανισμούς των εγκεφαλικών ασθενειών και τις επιπτώσεις της γήρανσης [26,47].

Οφέλη εκχυλίσματος cistanche tubulosa

Επί του παρόντος, οι μόνοι σταθεροί παράγοντες κινδύνου για το GWI είναι οι χημικές εκθέσεις και το ιστορικό mTBI [30,36,37,48-51]. Αυτές οι χημικές ουσίες περιλαμβάνουν βρωμιούχο πυριδοστιγμίνη, φυτοφάρμακα, συμπεριλαμβανομένων των εντομοκτόνων permethrin και lindane, καθώς και το εντομοαπωθητικό, DEET (N, N-diethyl-m-toluamide), ένα οργανοφωσφορικό (OP) εντομοκτόνα και νευρικά αέρια, σαρίνη και κυκλοσαρίνη, τα οποία είναι τώρα γνωστό ότι επηρεάζει δυσμενώς το ΚΝΣ ασήμαντες ή συνδυασμένες δόσεις [3,14,15,48,51-58]. Οι έρευνες στους μηχανισμούς με τους οποίους οι ενώσεις OP προκαλούν νευροεκφυλισμό έχουν αποδείξει ότι τα OP αυξάνουν τη δραστηριότητα και την έκφραση της κινάσης II ασβεστίου-καλμοδουλίνης (CaMKII) που προκαλεί υπερφωσφορυλίωση νευρικών πρωτεϊνών, οδηγώντας στη συσσώρευσή τους και επιβράδυνση της αξονικής μεταφοράς, με αποτέλεσμα τον θάνατο των νευρωνικών κυττάρων [51,59-62]. Σε συμφωνία με αυτό είναι η προηγούμενη ανακάλυψή μας ότι τα πληρώματα των αεροπορικών εταιρειών που εκτέθηκαν σε OP ανέπτυξαν αυτοάνοσα αντισώματα στις νευρικές πρωτεΐνες [34]. Τα αυξημένα αυτοαντισώματα έναντι νευρωνικών πρωτεϊνών όπως τα Tau, NFP, MAG, MBP και GFAP είναι σύμφωνα με τη μελέτη απεικόνισης εγκεφάλου σε άλλη ομάδα πληρωμάτων αεροπορικών εταιρειών που έδειξε μειωμένη μικροδομή λευκής ουσίας του εγκεφάλου και εγκεφαλική αιμάτωση, που μπορεί να είναι πιθανές αιτίες γνωστικών διαταραχών και ελλείμματα διάθεσης που αναφέρθηκαν από τα πληρώματα [63]. Η σημασία αυτού του ευρήματος είναι ότι το GFAP είναι ένας δείκτης της ενεργοποίησης των αστροκυττάρων και τα αστροκύτταρα μπορούν να αλληλεπιδράσουν άμεσα και να περιορίσουν τα αγγεία του εγκεφάλου, συμπεριλαμβανομένων των τριχοειδών αγγείων που εμπλέκονται στην εγκεφαλική αιμάτωση και τη νευροφλεγμονή. Τα παράπονα συμπτωμάτων υγείας που αναφέρθηκαν από βετεράνους GW συνάδουν με τα επακόλουθα μετά από έκθεση σε φυτοφάρμακα όπως οργανοφωσφορικά, πυρεθροειδή και DEET [51,64,65].

Αυξημένα αυτοαντισώματα κατά των βασικών πρωτεϊνών νευρονήματος, ταυ, τουμπουλίνης και μυελίνης, που είναι βιοδείκτες για διαταραχές της μυελίνης και των νευρωνικών κυτταροσκελετικών διαταραχών, συμπεριλαμβανομένης της αστάθειας των μικροσωληνίσκων, του εκφυλισμού των νευραξόνων και της αλλοιωμένης αξονικής μεταφοράς, έχουν βρεθεί σε πολλές μελέτες κυττάρων και ζώων μοντέλων που προκαλούνται από τοξικές ουσίες. GWI [66-74]. Τα αποτελέσματά μας είναι συνεπή με προηγούμενες αναφορές που έδειχναν αυξημένα διάφορα αυτοαντισώματα σε μια μικρότερη και στη συνέχεια μεγαλύτερη μελέτη δειγμάτων αίματος βετεράνων GW [16,19,75-78]. Από όσο γνωρίζουμε, αυτή είναι η πρώτη μελέτη που αξιολογεί τις επιδράσεις αυτών των αυτοαντισωμάτων στο φύλο σε βετεράνους με GWI σε σύγκριση με υγιείς και συμπτωματικές ομάδες σύγκρισης. Συνοπτικά, τα αποτελέσματα της παρούσας έρευνας σχετικά με την επίδραση του φύλου στους βιοδείκτες αίματος έδειξαν ότι τα επίπεδα των αυτοαντισωμάτων ήταν σημαντικά υψηλότερα τόσο για τους άνδρες όσο και για τις γυναίκες βετεράνους GW σε σύγκριση με τους ελέγχους [19]. Όταν υπήρχε διαφορά φύλου, οι άνδρες βετεράνοι με GWI εμφάνισαν υψηλότερα επίπεδα αυτοαντισωμάτων καθώς και τη συνολική βαθμολογία CAI από τις γυναίκες βετεράνους με GWI. Αυτό είναι σύμφωνο με την κατάσταση στο πολεμικό θέατρο, ότι αν και άνδρες και γυναίκες είχαν παρόμοιες στρατιωτικές εμπειρίες, οι άνδρες συμμετείχαν συχνότερα σε μάχες και είχαν υψηλότερα ποσοστά mTBI [30,36-38]. Αυτό δεν σημαίνει ότι οι γυναίκες βετεράνοι δεν έχουν αυξημένα επίπεδα άλλων συμπτωμάτων αυτής της πολυπαραγοντικής διαταραχής, αλλά μάλλον ότι οι άνδρες βετεράνοι φαίνεται να εμφανίζουν περισσότερες διαφορές αυτοαντισωμάτων στο ΚΝΣ από τις γυναίκες βετεράνες, όπως υποδεικνύεται από υψηλότερες συνολικές τιμές CAI.

Περιορισμοί

Όπως οι περισσότερες μελέτες, η μελέτη μας είχε περιορισμούς. Είχαμε μικρά μεγέθη ομάδων σε ορισμένες αναλύσεις που μείωσαν τη δύναμή μας να δούμε διαφορές μεταξύ των ομάδων. Αυτό ίσχυε ιδιαίτερα για τις συγκρίσεις των γυναικών. Επειδή ο κύριος στόχος αυτής της μελέτης ήταν η αξιολόγηση των ομάδων GWI έναντι των συμπτωματικών μαρτύρων, δεν είχαμε μια υγιή ομάδα ελέγχου μη βετεράνων για σύγκριση, η οποία μπορεί να παρείχε μεγαλύτερη σαφήνεια στα αποτελέσματα αν είχε συμπεριληφθεί αυτή η ομάδα. Σε αυτή τη μελέτη, χρησιμοποιήσαμε τα κριτήρια του Κάνσας για το GWI που θα έπρεπε να είχαν αποκλείσει γνωστές περιπτώσεις διαταραχών, συμπεριλαμβανομένης της νόσου του Alzheimer (AD), της νόσου του Parkinson (PD) και άλλων χρόνιων παθήσεων που θα μπορούσαν να ευθύνονται για τα χρόνια συμπτώματά τους [27]. Σε αυτή τη μελέτη, δείξαμε συσχετίσεις μεταξύ αυτοαντισωμάτων, ιδιαίτερα σε βετεράνους GWI, σε σύγκριση με υγιείς και συμπτωματικούς ελέγχους που διαστρωματώνονται κατά φύλο. Ωστόσο, η χρονική σχέση παραμένει ασαφής μεταξύ αυτών των καταστάσεων και της παραγωγής αυτοαντισωμάτων. Απαιτείται περισσότερη έρευνα για να προσδιοριστεί εάν πρόκειται για πρωτεΐνες του ΚΝΣ με βάση το αίμα από εκθέσεις πριν από 30 χρόνια ή εάν υπάρχουν συνεχείς αλλαγές στο ΚΝΣ που προκαλούν αυτές τις πρωτεΐνες αυτοαντισώματος. Άλλες μεγαλύτερες μελέτες με γυναίκες βετεράνους θα βοηθούσαν επίσης στην περαιτέρω επικύρωση του παθοβιολογικού αντίκτυπου του GWI στις γυναίκες βετεράνους. Ένα σημαντικό πλεονέκτημα της μελέτης μας είναι ότι αντιπροσωπεύει τόσο υγιείς όσο και συμπτωματικές ομάδες βετεράνων GW καθώς και συμπτωματικούς μη βετεράνους ελέγχους με ME/CFS ή IBS. Αυτό υποδηλώνει ότι τόσο οι άνδρες όσο και οι γυναίκες βετεράνοι με GWI διαφέρουν όχι μόνο από τους υγιείς μάρτυρες βετεράνων GW αλλά έχουν επίσης περισσότερες διαφορές στο ΚΝΣ από άλλες ομάδες ανδρών και γυναικών με χρόνιες ασθένειες πολλαπλών συμπτωμάτων. Επιπλέον, οι αναλύσεις αυτοαντισωμάτων του ΚΝΣ πραγματοποιήθηκαν με το εργαστηριακό προσωπικό τυφλό ως προς την κατάσταση του κρούσματος όλων των συμμετεχόντων.

5. Συμπεράσματα

Φέτος συμπληρώνονται 30 χρόνια από τον πόλεμο του Κόλπου 1990/1991. Σε όλο αυτό το διάστημα, υπήρξε έλλειψη διαγνωστικών εργαλείων για την ακριβή διάγνωση της διαταραχής, γεγονός που εμπόδισε τόσο τις ακριβείς διαγνώσεις όσο και τις πολύ απαραίτητες θεραπείες για τους βετεράνους. Το εργαστήριό μας ήταν ένα από τα πρώτα που πρότεινε και τεκμηρίωσε ότι το GWI σχετίζεται με χημικές εκθέσεις κατά τη διάρκεια του πολέμου και ότι αυτές οι εκθέσεις επηρέασαν αρνητικά το ΚΝΣ. Επιπλέον, έχουμε τεκμηριώσει διαφορές στα αυτοαντισώματα μεταξύ GWI και GWhealthy και συμπτωματικών μαρτύρων. Αυτή η μελέτη τεκμηριώνει ότι υπάρχει μια επίδραση του φύλου για αυτές τις ομάδες με άνδρες και γυναίκες με GWI να παρουσιάζουν υψηλότερα επίπεδα αυτοαντισωμάτων από τις αντίστοιχες ομάδες ελέγχου και με άνδρες βετεράνους με GWI να παρουσιάζουν τη μεγαλύτερη επιβάρυνση αυτοαντισωμάτων. Μετά από περαιτέρω επικύρωση, ελπίζουμε ότι η σύνοψη του δείκτη νευροεκφυλισμού αυτοαντισώματος CNS (CAI) που αναπτύχθηκε πρόσφατα, μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανάπτυξη αντικειμενικών διαγνωστικών δεικτών του GWI και για τη σύγκριση της αποτελεσματικότητας της δοκιμής θεραπείας για άνδρες και γυναίκες βετεράνους GW.

Αυτό είναι το προϊόν μας κατά της κούρασης! Κάντε κλικ στην εικόνα για περισσότερες πληροφορίες!

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Racgwi, R. Gulf War Illness and the Health of Gulf War Veterans: Research Recommendations; Κυβερνητικό Τυπογραφείο των ΗΠΑ: Ουάσιγκτον, DC, ΗΠΑ, 2008.

2. Racgwi, R. Gulf War Illness and the Health of Gulf War Veterans: Research Update and Recommendations, 2009–2013; Κυβερνητικό Τυπογραφείο των ΗΠΑ: Ουάσιγκτον, DC, ΗΠΑ, 2014.

3. Λευκό, RF; Steele, L.; O'Callaghan, JP; Sullivan, Κ.; Binns, JH; Golomb, BA; Bloom, FE; Bunker, JA; Crawford, F.; Graves, JC; et al. Πρόσφατη έρευνα σχετικά με την ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου και άλλα προβλήματα υγείας σε βετεράνους του Πολέμου του Κόλπου του 1991: Επιδράσεις της έκθεσης σε τοξικές ουσίες κατά την ανάπτυξη. Cortex 2016, 74, 449–475. [CrossRef] [PubMed]

4. Sullivan, Κ.; Krengel, Μ.; Heboyan, V.; Schildroth, S.; Wilson, CC; Iobst, S.; Κλήμας, Ν.; Coughlin, Επικράτηση SS και μοτίβα συμπτωμάτων μεταξύ γυναικών βετεράνων της εποχής του πολέμου του Κόλπου του 1991: 25 χρόνια αργότερα. J. Women's Health 2020, 29, 819–826. [CrossRef] [PubMed]

5. Heboyan, V.; Krengel, Μ.; Sullivan, Κ.; Iobst, S.; Κλήμας, Ν.; Wilson, CC; Coughlin, SS Διαφορές φύλου στην ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου: Επανανάλυση δεδομένων από τη μελέτη της Πολεμικής Αεροπορίας του CDC με χρήση ορισμών του CDC και των τροποποιημένων περιπτώσεων του Κάνσας. J. Κατάληψη. Περιβάλλω. Med. 2019, 61, 610–616. [CrossRef] [PubMed]

6. Coughlin, SS; Heboyan, V.; Sullivan, Κ.; Krengel, Μ.; Wilson, CC; Iobst, S.; Klimas, N. Cardiovascular Disease between Female Veterans of the 1991 Gulf War Era. J. Environ. Health Sci. 2019, 5, 24–25. [CrossRef] [PubMed]

7. Coughlin, SS; Krengel, Μ.; Sullivan, Κ.; Pierce, PF; Heboyan, V.; Wilson, CC Μια ανασκόπηση των επιδημιολογικών μελετών για την υγεία των γυναικών βετεράνων του πολέμου του Κόλπου. J. Environ. Health Sci. 2017, 3. [CrossRef] [PubMed]

8. Zundel, CG; Krengel, ΜΗ; Heeren, Τ.; Ναι, MK; Grasso, CM; Janulewicz Lloyd, PA; Coughlin, SS; Sullivan, K. Ποσοστά Χρόνιων Ιατρικών Καταστάσεων σε Βετεράνους του Πολέμου του Κόλπου το 1991 σε σύγκριση με τον γενικό πληθυσμό. Int. J. Environ. Res. Δημόσια Υγεία 2019, 16, 949. [CrossRef] [PubMed]

9. Pierce, PF Παρακολούθηση της υγείας των γυναικών βετεράνων του Περσικού Κόλπου. Βραβείο Ομοσπονδιακής Νοσηλευτικής Υπηρεσίας. Χιλιοστό της ίντσας. Med. 2005, 170, 349–354. [CrossRef]

10. Pierce, PF; Αντωνάκος, Γ.; Deroba, BA Χρήση και ικανοποίηση της υγειονομικής περίθαλψης σχετικά με προβλήματα υγείας που σχετίζονται με το φύλο μεταξύ στρατιωτικών γυναικών. Χιλιοστό της ίντσας. Med. 1999, 164, 98–102. [CrossRef]

11. Wolfe, J.; Proctor, SP; Erickson, DJ; Hu, H. Παράγοντες κινδύνου για πολυσυμπτωματική ασθένεια σε βετεράνους του αμερικανικού στρατού του Πολέμου του Κόλπου. J. Κατάληψη. Περιβάλλω. Med. 2002, 44, 271-281. [CrossRef]

12. Steele, L.; Sastre, Α.; Jurkovich, MM; Cook, MR Σύνθετοι παράγοντες στην αιτιολογία της ασθένειας του Πολέμου του Κόλπου: Εκθέσεις εν καιρώ πολέμου και παράγοντες κινδύνου σε υποομάδες βετεράνων. Περιβάλλω. Προοπτική Υγείας. 2012, 120, 112–118. [CrossRef]

13. Dursa, EK; Barth, SK; Porter, BW; Schneiderman, AI Health Status of Female and Male Gulf War and Gulf Era Veterans: A Population-Based Study. Θέματα Υγείας Γυναικών 2019, 29, S39–S46. [CrossRef] [PubMed]

14. Abou-Donia, MB; Wilmarth, KR; Abdel-Rahman, AA; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Αυξημένη νευροτοξικότητα μετά από ταυτόχρονη έκθεση σε βρωμιούχο πυριδοστιγμίνη, DEET και chlorpyrifos. Fundam. Appl. Toxicol. 1996, 34, 201–222. [CrossRef] [PubMed]

15. Abou-Donia, MB; Wilmarth, KR; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Νευροτοξικότητα που προκύπτει από συνέκθεση σε βρωμιούχο πυριδοστιγμίνη, deet και περμεθρίνη: Επιπτώσεις της έκθεσης σε χημικά του Πολέμου του Κόλπου. J. Toxicol. Περιβάλλω. Health 1996, 48, 35–56. [CrossRef] [PubMed]

16. Abou-Donia, MB; Conboy, LA; Κοκκώτου, Ε.; Jacobson, Ε.; Elmasry, EM; Elkafrawy, Ρ.; Neely, M.; Μπάσο, CRD; Sullivan, K. Έλεγχος για νέους βιοδείκτες του κεντρικού νευρικού συστήματος σε βετεράνους με ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου. Neurotoxicol. Teratol. 2017, 61, 36–46. [CrossRef]

17. Bowyer, JF; Sarkar, S.; Burks, SM; Hess, JN; Tolani, S.; O'Callaghan, JP; Hanig, JP Μικρογλοιακή ενεργοποίηση και αποκρίσεις στην αγγείωση που προκύπτουν από οξεία έκθεση σε LPS. Neurotoxicology 2020, 77, 181-192. [CrossRef]

18. Abdel-Rahman, Α.; Shetty, AK; Abou-Donia, MB Διαταραχή του αιματοεγκεφαλικού φραγμού και νευρωνικού κυτταρικού θανάτου στον φλοιό, την οδοντωτή έλικα, τον θάλαμο και τον υποθάλαμο σε ένα μοντέλο αρουραίου με σύνδρομο του Πολέμου του Κόλπου. Neurobiol. Dis. 2002, 10, 306–326. [CrossRef]

19. Abou-Donia, MB; Lapadula, ES; Krengel, ΜΗ; Quinn, Ε.; LeClair, J.; Massaro, J.; Conboy, LA; Κοκκώτου, Ε.; Abreu, Μ.; Klimas, NG; et al. Χρήση αυτοαντισωμάτων πλάσματος πρωτεϊνών του κεντρικού νευρικού συστήματος για τη διάκριση βετεράνων με ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου από Υγιείς και Συμπτωματικούς ελέγχους. Brain Sci. 2020, 10, 610. [CrossRef]

20. Lee, G.; Cowan, Ν.; Kirschner, M. Η πρωτογενής δομή και η ετερογένεια της πρωτεΐνης tau από τον εγκέφαλο ποντικού. Science 1988, 239, 285–288. [CrossRef]

21. Tagliaferro, Ρ.; Ramos, AJ; Onaivi, ES; Evrard, SG; Lujilde, J.; Brusco, A. Ο νευρωνικός κυτταροσκελετός και οι συναπτικές πυκνότητες μεταβάλλονται μετά από χρόνια θεραπεία με τον αγωνιστή υποδοχέα κανναβινοειδών WIN 55,212-2. Brain Res. 2006, 1085, 163–176. [CrossRef]

22. Laferrière, NB; MacRae, ΤΗ; Brown, DL Tubulin σύνθεση και συναρμολόγηση σε διαφοροποιητικούς νευρώνες. Biochem. Cell Biol. 1997, 75, 103–117. [CrossRef]

23. Hoshi, Μ.; Akiyama, Τ.; Shinohara, Υ.; Miyata, Υ.; Ogawara, Η.; Nishida, Ε.; Sakai, Η. Η φωσφορυλίωση που καταλύεται από πρωτεΐνες-κινάς-C της περιοχής δέσμευσης μικροσωληνίσκων της πρωτεΐνης 2 που σχετίζεται με μικροσωληνίσκους αναστέλλει την ικανότητά της να προκαλεί πολυμερισμό τουμπουλίνης. Ευρώ. J. Biochem. 1988, 174, 225–230. [CrossRef] [PubMed]

24. Jauch, EC; Lindsell, C.; Broderick, J.; Fagan, SC; Tilley, π.Χ. Levine, SR Σύλλογος σειριακών βιοχημικών δεικτών με οξύ ισχαιμικό εγκεφαλικό επεισόδιο: Μελέτη εγκεφαλικού επεισοδίου του Εθνικού Ινστιτούτου Νευρολογικών Διαταραχών και Ανασυνδυασμένου ιστού ενεργοποιητή πλασμινογόνου ιστού. Stroke 2006, 37, 2508–2513. [CrossRef] [PubMed]

25. Kövesdi, Ε.; Lückl, J.; Bukovics, Ρ.; Φάρκας, Ο.; Pál, J.; Czeiter, Ε.; Szellár, D.; Dóczi, Τ.; Komoly, S.; Büki, A. Ενημέρωση σχετικά με τους βιοδείκτες πρωτεΐνης σε τραυματική εγκεφαλική βλάβη με έμφαση στην κλινική χρήση σε ενήλικες και παιδιατρική. Acta Neurochir. 2010, 152, 1–17. [CrossRef] [PubMed]

26. Mayne, Κ.; White, JA; McMurran, CE; Rivera, FJ; de la Fuente, AG Γήρανση και Νευροεκφυλιστική Νόσος: Είναι το Προσαρμοστικό Ανοσοποιητικό Σύστημα φίλος ή εχθρός; Εμπρός. Γηράσκοντα Νευροσκί. 2020, 12, 572090. [CrossRef] [PubMed]

27. Steele, L. Επικράτηση και μοτίβα της ασθένειας του Πολέμου του Κόλπου στους βετεράνους του Κάνσας: συσχέτιση συμπτωμάτων με χαρακτηριστικά του ατόμου, του τόπου και του χρόνου της στρατιωτικής θητείας. Είμαι. J. Epidemiol. 2000, 152, 992-1002. [CrossRef] [PubMed]

28. Fukuda, Κ.; Straus, SE; Hickie, I.; Sharpe, MC; Dobbins, JG; Komaroff, A. Το σύνδρομο χρόνιας κόπωσης: Μια ολοκληρωμένη προσέγγιση στον ορισμό και τη μελέτη του. Διεθνής Ομάδα Μελέτης για το Σύνδρομο Χρόνιας Κόπωσης. Αννα. Κρατώ. Med. 1994, 121, 953–959. [CrossRef]

29. Longstreth, GF; Thompson, WG; Chey, WD; Houghton, LA; Mearin, F.; Spiller, RC Λειτουργικές διαταραχές του εντέρου. Γαστρεντερολογία 2006, 130, 1480–1491. [CrossRef]

30. Janulewicz, Ρ.; Krengel, Μ.; Quinn, Ε.; Heeren, Τ.; Toomey, R.; Killiany, R.; Zundel, C.; Ajama, J.; O'Callaghan, J.; Steele, L.; et al. Η υπόθεση πολλαπλών χτυπημάτων για την ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου: Έκθεση σε χημικά/βιολογικά όπλα από αυτοαναφερόμενη έκθεση και ήπιος τραυματικός εγκεφαλικός τραυματισμός. Brain Sci. 2018, 8, 198. [CrossRef]

31. Janulewicz, PA; Seth, RK; Carlson, JM; Ajama, J.; Quinn, Ε.; Heeren, Τ.; Κλήμας, Ν.; Lasley, SM; Horner, RD; Sullivan, Κ.; et al. Το μικροβίωμα του εντέρου στους βετεράνους του πολέμου του Κόλπου: Μια προκαταρκτική αναφορά. Int. J. Environ. Res. Δημόσια Υγεία 2019, 16, 751. [CrossRef]

32. Conboy, L.; St John, Μ.; Schnyer, R. Η αποτελεσματικότητα του βελονισμού στη θεραπεία της ασθένειας του Πολέμου του Κόλπου. Contemp Clin. Δοκιμές 2012, 33, 557–562. [CrossRef]

33. Conboy, L.; Gerke, Τ.; Hsu, KY; St John, Μ.; Goldstein, Μ.; Schnyer, R. The Effectiveness of Individualized Acupuncture Protocols in the Treatment of Gulf War Illness: A Pragmatic Randomized Clinical Trial. PLoS ONE 2016, 11, e0149161. [CrossRef]

34. Abou-Donia, MB; Abou-Donia, MM; Elmasry, EM; Monro, JA; Mulder, MFA Τα αυτοαντισώματα σε πρωτεΐνες ειδικές για το νευρικό σύστημα είναι αυξημένα σε ορούς μελών του πληρώματος πτήσης: Βιοδείκτες για τραυματισμό του νευρικού συστήματος. J. Toxicol. Περιβάλλω. Health A 2013, 76, 363–380. [CrossRef] [PubMed]

35. Abou-Donia, MB; Suliman, HB; Siniscalco, D.; Antonucci, Ν.; ElKafrawy, P. De novo Blood Biomarkers in Autism: Autoantibodies against Neuronal and Glial Proteins. Συμπεριφορά. Sci. 2019, 9, 47. [CrossRef] [PubMed]

36. Yee, MK; Seichepine, DR; Janulewicz, PA; Sullivan, KA; Proctor, SP; Krengel, MH Αυτοαναφερόμενος Τραυματικός Εγκεφαλικός Τραυματισμός, Υγεία και Ποσοστό Χρόνιας Πολυσυμπτωματικής Ασθένειας σε Βετεράνους από τον Πόλεμο του Κόλπου 1990-1991. J. Head Trauma Rehabil. 2016, 31, 320–328. [CrossRef]

37. Yee, MK; Janulewicz, PA; Seichepine, DR; Sullivan, KA; Proctor, SP; Οι πολλαπλοί ήπιοι τραυματικοί εγκεφαλικοί τραυματισμοί του Krengel, MH σχετίζονται με αυξημένα ποσοστά συμπτωμάτων υγείας και ασθένειας του Πολέμου του Κόλπου σε μια ομάδα 1990-1991 βετεράνων του Πολέμου του Κόλπου. Brain Sci. 2017, 7, 79. [CrossRef]

38. Carney, CP; Sampson, TR; Voelker, Μ.; Woolson, R.; Thorne, Ρ.; Doebbeling, BN Women in the Gulf War: Combat εμπειρία, εκθέσεις και μετέπειτα υγειονομική περίθαλψη μας. Χιλιοστό της ίντσας. Med. 2003, 168, 654–661. [CrossRef]

39. Kapural, Μ.; Krizanac-Bengez, L.; Barnett, G.; Perl, J.; Masaryk, Τ.; Apollo, d.; Rasmussen, Ρ.; Mayberg, MR; Janigro, D. S-100βήτα ορού ως πιθανός δείκτης διαταραχής του αιματοεγκεφαλικού φραγμού. Brain Res. 2002, 940, 102–104. [CrossRef]

40. Siracusa, R.; Fusco, R.; Cuzzocrea, S. Astrocytes: Role and Functions in Brain Pathologies. Εμπρός. Pharm. 2019, 10, 1114. [CrossRef]

41. O'Callaghan, JP; Jensen, KF; Miller, DB Ποσοτικές πτυχές της αστρογλοίωσης που προκαλείται από φάρμακα και τοξικές ουσίες. Neurochem. Int. 1995, 26, 115–124. [CrossRef]

42. Eng, LF; Ghirnikar, RS GFAP και αστρογλίωση. Brain Pathol. 1994, 4, 229-237. [CrossRef]

43. Aurell, Α.; Rosengren, LE; Karlsson, Β.; Olsson, JE; Zbornikova, V.; Haglid, KG Προσδιορισμός συγκεντρώσεων όξινης πρωτεΐνης S-100 και γλοιακής ινιδιακής πρωτεΐνης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό μετά από έμφραγμα εγκεφάλου. Stroke 1991, 22, 1254–1258. [CrossRef] [PubMed]

44. Brown, MC; Sims, KJ; Gifford, EJ; Goldstein, KM; Johnson, MR; Williams, CD; Provenzale, D. Διαφορές με βάση το φύλο μεταξύ βετεράνων της εποχής του Πολέμου του Κόλπου 1990–1991: Δημογραφικά στοιχεία, Συμπεριφορές Τρόπου Ζωής και Συνθήκες Υγείας. Θέματα για την υγεία των γυναικών 2019, 29 (Παράρτημα 1), S47–S55. [CrossRef] [PubMed]

45. Craddock, TJ; Fritsch, Ρ.; Rice, MA, Jr.; del Rosario, RM; Miller, DB; Fletcher, MA; Klimas, NG; Broderick, G. Ένας ρόλος για μια ομοιοστατική κίνηση στη διαιώνιση σύνθετων χρόνιων ασθενειών: Ασθένεια του πολέμου του Κόλπου και σύνδρομο χρόνιας κόπωσης. PLoS ONE 2014, 9, e84839. [CrossRef]

46. ​​Smylie, AL; Broderick, G.; Fernandes, Η.; Razdan, S.; Barnes, Ζ.; Collado, F.; Sol, C.; Fletcher, MA; Κλήμας, Ν. Σύγκριση ειδικών για το φύλο ανοσογραφικές υπογραφές στην ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου και στο σύνδρομο χρόνιας κόπωσης. BMC Immunol. 2013, 14, 1–14. [CrossRef] [PubMed]

47. Lobo, PI Role of Natural IgM Autoantibodies (IgM-NAA) and IgM Anti-Leukocyte Antibodies (IgM-ALA) in Regulating Inflammation. Curr. Μπλουζα. Microbiol. Immunol. 2017, 408, 89–117.

48. Sullivan, Κ.; Krengel, Μ.; Bradford, W.; Stone, C.; Thompson, TA; Heeren, Τ.; White, RF Νευροψυχολογική λειτουργία σε στρατιωτικούς εφαρμοστές φυτοφαρμάκων από τον πόλεμο του Κόλπου: Επιδράσεις στην ταχύτητα επεξεργασίας πληροφοριών, την προσοχή και την οπτική μνήμη. Neurotoxicol. Teratol. 2018, 65, 1–13. [CrossRef]

49. Chao, LL; Rothlind, JC; Cardenas, VA; Meyerhoff, DJ; Weiner, MW Επιδράσεις της έκθεσης χαμηλού επιπέδου σε σαρίνη και κυκλοσαρίνη κατά τη διάρκεια του Πολέμου του Κόλπου του 1991 στη λειτουργία του εγκεφάλου και στη δομή του εγκεφάλου σε βετεράνους των ΗΠΑ. Neurotoxicology 2010, 31, 493-501. [CrossRef]

50. Chao, LL; Abadjian, L.; Hlavin, J.; Meyerhoff, DJ; Weiner, MW Επιδράσεις της έκθεσης σε χαμηλό επίπεδο σαρίνης και κυκλοσαρίνης και της ασθένειας του Πολέμου του Κόλπου στη δομή και τη λειτουργία του εγκεφάλου: Μια μελέτη στο 4T. Neurotoxicology 2011, 32, 814-822. [CrossRef]

51. Golomb, BA αναστολείς ακετυλοχολινεστεράσης και ασθένειες του πολέμου του Κόλπου. Proc. Natl. Ακαδ. Sci. ΗΠΑ 2008, 105, 4295–4300. [CrossRef]

52. Michalovicz, LT; Kelly, KA; Sullivan, Κ.; O'Callaghan, JP Εκθέσεις σε αναστολέα ακετυλοχολινεστεράσης ως παράγοντας έναρξης στην ανάπτυξη της ασθένειας του Πολέμου του Κόλπου, μιας χρόνιας νευροάνοσης διαταραχής σε βετεράνους που έχουν αναπτυχθεί. Neuropharmacology 2020, 171, 108073. [CrossRef]

53. O'Callaghan, JP; Kelly, KA; Locker, AR; Miller, DB; Lasley, SM Η κορτικοστερόνη ξεκινά τη νευροφλεγμονώδη απόκριση στο DFP σε ποντίκια: Πιθανό ζωικό μοντέλο ασθένειας του Πολέμου του Κόλπου. J. Neurochem. 2015, 133, 708–721. [CrossRef] [PubMed]

54. Winkenwerder, W. Έκθεση Περιβαλλοντικής Έκθεσης: Τελική Έκθεση για τα φυτοφάρμακα Υπουργείο Άμυνας των ΗΠΑ, Γραφείο Ειδικού Βοηθού του Υφυπουργού Άμυνας (Προσωπικό και ετοιμότητα) από Ασθένειες του Πολέμου του Κόλπου, Ιατρική ετοιμότητα και Στρατιωτικές Αποστολές. Κυβερνητικό Τυπογραφείο των ΗΠΑ: Ουάσιγκτον, DC, ΗΠΑ, 2003.

55. Cherry, Ν.; Creed, F.; Silman, Α.; Dunn, G.; Baxter, D.; Smedley, J.; Taylor, S.; Macfarlane, GJ Υγεία και εκθέσεις βετεράνων του πολέμου του Κόλπου του Ηνωμένου Βασιλείου. Μέρος II: Η σχέση της υγείας με την έκθεση. Κατάληψη. Περιβάλλω. Med. 2001, 58, 299-306. [CrossRef] [PubMed]

56. Haley, RW; Kurt, TL Αυτοαναφέρθηκε έκθεση σε νευροτοξικούς χημικούς συνδυασμούς στον Πόλεμο του Κόλπου. Μια συγχρονική επιδημιολογική μελέτη. JAMA 1997, 277, 231–237. [CrossRef] [PubMed]

57. Nisenbaum, R.; Barrett, DH; Reyes, Μ.; Reeves, στρεσογόνοι παράγοντες ανάπτυξης του WC και μια χρόνια πολυσυμπτωματική ασθένεια μεταξύ βετεράνων του Πολέμου του Κόλπου. J. Nerv. Ment. Dis. 2000, 188, 259-266. [CrossRef]

58. Sullivan, Κ.; Krengel, Μ.; Proctor, SP; Devine, S.; Heeren, Τ.; Λευκή, γνωστική λειτουργία RF σε βετεράνους του πολέμου του Κόλπου που αναζητούν θεραπεία: Χρήση βρωμιούχου πυριδοστιγμίνης και PTSD. J. Psychopathol. Συμπεριφορά. Εκτιμώ. 2003, 25, 95–103. [CrossRef] 59. Patton, SE; O'Callaghan, JP; Miller, DB; Abou-Donia, MB Επίδραση της στοματικής χορήγησης φωσφορικού τρι-ο-κρεζυλεστέρα στην in vitro φωσφορυλίωση μεμβρανικών και κυτταροπλασματικών πρωτεϊνών από τον εγκέφαλο του κοτόπουλου. J. Neurochem. 1983, 41, 897–901. [CrossRef]

60. Lapadula, ES; Lapadula, DM; Abou-Donia, MB Βιοχημικές αλλαγές στο ισχιακό νεύρο όρνιθες που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με φωσφορικό τρι-ο-κρεζυλεστέρα: Αυξημένη φωσφορυλίωση κυτταροσκελετικών πρωτεϊνών. Neurochem. Int. 1992, 20, 247-255. [CrossRef]

61. Abou-Donia, MB Συμμετοχή κυτταροσκελετικών πρωτεϊνών στους μηχανισμούς καθυστερημένης νευροτοξικότητας που προκαλείται από οργανοφωσφορικούς εστέρες. Clin. Exp. Pharm. Physiol. 1995, 22, 358-359. [CrossRef]

62. Torres-Altoro, MI; Mathur, BN; Drerup, JM; Thomas, R.; Lovinger, DM; O'Callaghan, JP; Τα οργανοφωσφορικά Bibb, JA απορυθμίζουν τη σηματοδότηση της ντοπαμίνης, τη γλουταμινεργική νευροδιαβίβαση και προκαλούν δείκτες νευρωνικής βλάβης στο ραβδωτό σώμα. J. Neurochem. 2011, 119, 303–313. [CrossRef]

63. Reneman, L.; Schagen, SB; Mulder, Μ.; Mutsaerts, HJ; Hageman, G.; de Ruiter, MB Γνωστική εξασθένηση και η σχετική απώλεια στη μικροδομή του λευκού εγκεφάλου σε μέλη του πληρώματος αεροσκάφους που εκτίθενται σε αναθυμιάσεις λαδιού κινητήρα. Συμπεριφορά απεικόνισης εγκεφάλου. 2016, 10, 437–444. [CrossRef]

64. Petras, JM Soman neurotoxicity. Fundam. Appl. Toxicol. 1981, 1, 242. [CrossRef]

65. Abdel-Rahman, AA; Shetty, AK; Abou-Donia, MB Η οξεία έκθεση στη σαρίνη αυξάνει τη διαπερατότητα του αιματοεγκεφαλικού φραγμού και προκαλεί νευροπαθολογικές αλλαγές στον εγκέφαλο του αρουραίου: Σχέσεις δόσης-απόκρισης. Neuroscience 2002, 113, 721-741. [CrossRef]

66. Belgrad, J.; De Pace, R.; Fields, RD Autophagy in Myelinating Glia. J. Neurosci. 2020, 40, 256–266. [CrossRef] [PubMed]

67. Naughton, SX; Beck, WD; Wei, Ζ.; Qu, G.; Terry, AV, Jr. Οι πολυλειτουργικές ενώσεις χλωριούχο λίθιο και μπλε του μεθυλενίου εξασθενούν τις αρνητικές επιδράσεις του διισοπροπυλοφθοροφωσφορικού στην αξονική μεταφορά σε νευρώνες του φλοιού αρουραίου. Toxicology 2020, 431, 152379. [CrossRef]

68. Naughton, SX; Terry, AV, Jr. Νευροτοξικότητα σε οξεία και επαναλαμβανόμενη έκθεση σε οργανοφωσφορικά. Τοξικολογία 2018, 408, 101–112. [CrossRef]

69. Naughton, SX; Hernandez, CM; Beck, WD; Poddar, Ι.; Yanasak, Ν.; Lin, P.-C.; Terry, AV, Jr. Οι επανειλημμένες εκθέσεις σε διισοπροπυλοφθοροφωσφορικό έχουν ως αποτέλεσμα δομικές διαταραχές των μυελινωμένων αξόνων και επίμονες βλάβες της αξονικής μεταφοράς στον εγκέφαλο των αρουραίων. Τοξικολογία 2018, 406, 92–103. [CrossRef]

70. Gao, J.; Naughton, SX; Beck, WD; Hernandez, CM; Wu, G.; Wei, Ζ.; Yang, Χ.; Bartlett, MG; Οι Terry, AV, Jr. Chlorpyrifos και chlorpyrifos oxon επηρεάζουν τη μεταφορά των οργανιδίων που συνδέονται με τη μεμβράνη στους άξονες του φλοιού αρουραίου. Neurotoxicology 2017, 62, 111-123. [CrossRef]

71. Qiang, L.; Rao, ΑΝ; Mostoslavsky, G.; James, MF; Comfort, N.; Sullivan, Κ.; Baas, PW Επαναπρογραμματισμός κυττάρων από βετεράνους του Πολέμου του Κόλπου σε νευρώνες για τη μελέτη της ασθένειας του Πολέμου του Κόλπου. Neurology 2017, 88, 1968–1975. [CrossRef]

72. Hernandez, CM; Beck, WD; Naughton, SX; Poddar, Ι.; Adam, B.-L.; Yanasak, Ν.; Middleton, C.; Terry, AV, Jr. Η επανειλημμένη έκθεση στο chlorpyrifos οδηγεί σε παρατεταμένες βλάβες της αξονικής μεταφοράς στον εγκέφαλο των ζωντανών τρωκτικών. Neurotoxicology 2015, 47, 17-26. [CrossRef]

73. Rao, AN; Patil, Α.; Brodnik, ZD; Qiang, L.; Espana, RA; Sullivan, KA; Μαύρο, MM; Baas, PW Η φαρμακολογικά αυξανόμενη ακετυλίωση μικροσωληνίσκων διορθώνει τις επιδεινούμενες από το στρες επιδράσεις των οργανοφωσφορικών στους νευρώνες. Κυκλοφορία 2017, 18, 433–441. [CrossRef]

74. Terry, AV, Jr. Λειτουργικές συνέπειες επαναλαμβανόμενης έκθεσης σε οργανοφωσφορικά: Πιθανοί μη χολινεργικοί μηχανισμοί. Pharmacol. Εκεί. 2012, 134, 355–365. [CrossRef] [PubMed]

75. Joshi, U.; Pearson, Α.; Evans, JE; Langlois, Η.; Saltiel, Ν.; Ojo, J.; Κλήμας, Ν.; Sullivan, Κ.; Keegan, AP; Oberlin, S.; et al. Ένας μεταβολίτης περμεθρίνης σχετίζεται με προσαρμοστικές ανοσολογικές αποκρίσεις στην ασθένεια του Πολέμου του Κόλπου. Εγκεφαλική Συμπεριφορά. Immun. 2019, 81, 545–559. [CrossRef] [PubMed]

76. Vojdani, Α.; Thrasher, JD Κυτταρικές και χυμικές ανοσολογικές ανωμαλίες σε βετεράνους του Πολέμου του Κόλπου. Περιβάλλω. Προοπτική Υγείας. 2004, 112, 840–846. [CrossRef] [PubMed]

77. Skowera, Α.; Stewart, Ε.; Davis, ET; Cleare, AJ; Unwin, C.; Hull, L.; Ismail, Κ.; Hossain, G.; Wessely, SC; Peakman, M. Αντιπυρηνικά αυτοαντισώματα (ANA) σε ασθενείς με νόσο που σχετίζεται με τον πόλεμο του Κόλπου και σύνδρομο χρόνιας κόπωσης (CFS). Clin. Exp. Immunol. 2002, 129, 354–358. [CrossRef] [PubMed]

78. Hokama, Υ.; Empey-Campora, C.; Hara, C.; Higa, Ν.; Siu, Ν.; Lau, R.; Kuribayashi, Τ.; Yabusaki, K. Φωσφολιπίδια οξείας φάσης που σχετίζονται με την καρδιολιπίνη των μιτοχονδρίων στους ορούς ασθενών με σύνδρομο χρόνιας κόπωσης (CFS), χρόνια δηλητηρίαση ψαριών Ciguatera (CCFP) και άλλες ασθένειες που αποδίδονται σε χημικές ουσίες, τον πόλεμο του Κόλπου και τις θαλάσσιες τοξίνες. J. Clin. Εργαστήριο. Πρωκτικός. 2008, 22, 99–105.