Οπτικοποίηση νεφρικής μικροδιάχυσης σε πραγματικό χρόνο με χρήση απεικόνισης αντίθεσης κηλίδων λέιζερ

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Wido Heeman,a,b,c,*,† Hanno Maassen,b,d,† Joost Calon,e Harry van Goor,d Henri Leuvenink,b Gooitzen M. van Dam,b και E. Christiaan Boerma f

Αφηρημένη

Σημασία:Διεγχειρητικές παράμετροι τουνεφρώνΗ μικροδιάχυση του φλοιού (RCM) έχει συσχετιστεί με μετεγχειρητική ισχαιμία/ τραυματισμό επαναιμάτωσης. Η απεικόνιση κηλίδων με αντίθεση με λέιζερ (LSCI) θα μπορούσε να παρέχει πολύτιμες πληροφορίες σχετικά με αυτό το πλεονέκτημα έναντι του τρέχοντος προτύπου φροντίδας ότι είναι μια τεχνική απεικόνισης χωρίς επαφή και πλήρους πεδίου.

Σκοπός:Η μελέτη μας στοχεύει να επικυρώσει τη χρήση του LSCI για την απεικόνιση του RCM σε χοίρους ανθρώπινου μεγέθους που έχουν εγχυθεί ex vivoνεφράσε διάφορα μοντέλα αιμοδυναμικών αλλαγών.

Προσέγγιση: Έγινε σύγκριση μεταξύ τριώννεφρώνμέτρα αιμάτωσης: LSCI, ολική αρτηριακή νεφρική ροή αίματος (RBF) και απεικόνιση σκοτεινού πεδίου πλευρικής ροής (SDF) σε διαφορετικές ρυθμίσεις ισχαιμίας/επαναιμάτωσης.

Αποτελέσματα:Το LSCI έδειξε καλή συσχέτιση με το RBF για το πείραμα επαναιμάτωσης ({{0}}.94 0.02; p < {{10}}.{{="" 15}}0{{20}}1)="" και="" βραχείας="" και="" μακράς="" διάρκειας="" τοπική="" ισχαιμία="" (0.90="" 0.03;="" p="">< 0,0001="" και="" 0.="" 81="" 0,08·="" p="">< 0,0001,="" αντίστοιχα).="" η="" συσχέτιση="" μειώθηκε="" για="" καταστάσεις="" χαμηλής="" ροής="" λόγω="" ανακατανομής="" rbf.="" η="" συσχέτιση="" μεταξύ="" lsci="" και="" sdf="" (0.81="" 0.10;="" p=""><0.0001) έδειξε="" υπεροχή="" έναντι="" του="" rbf="" (0.{24}}.22;="" p=""><>

Συμπεράσματα:Το LSCI είναι ικανό να απεικονίζει RCM με υψηλές χωρικές και χρονικές αναλύσεις. Μπορεί να ανιχνεύσει στιγμιαία τοπικά ελλείμματα αιμάτωσης, κάτι που δεν είναι δυνατό με το τρέχον πρότυπο περίθαλψης. Η περαιτέρω ανάπτυξη του LSCI στη χειρουργική μεταμόσχευσης θα μπορούσε να βοηθήσει στη λήψη κλινικών αποφάσεων.

Λέξεις-κλειδιά:Απεικόνιση αντίθεσης κηλίδων με λέιζερ. μεταφύτευση;νεφρό; πλευρική απεικόνιση σκοτεινού πεδίου.νεφρώνμικροδιάχυση.

Το Cistanche deserticola προλαμβάνεινεφρόασθένεια, κάντε κλικ εδώ για να λάβετε το δείγμα

1. Εισαγωγή

Διεγχειρητικά-εμποδίζεταινεφρώνΗ μικροδιάχυση του φλοιού (RCM) κατά τη διάρκεια, για παράδειγμα, της αναστόμωσης έχει συσχετιστεί με μετεγχειρητικές επιπλοκές που σχετίζονται με ισχαιμία/τραυματισμό επαναιμάτωσης.

Άλλοι έχουν δείξει τη δυνατότητα απεικόνισης αιμάτωσης κοντά στην επιφάνεια για την πρόβλεψη μετεγχειρητικών επιπλοκών, συμπεριλαμβανομένης της μειωμένης κάθαρσης κρεατινίνης, της καθυστερημένης λειτουργίας του μοσχεύματος, ακόμη και της απόρριψης του μοσχεύματος. μπορεί να υποστηρίξει τη λήψη χειρουργικών αποφάσεων, η οποία μπορεί να οδηγήσει σε βελτιωμένη αιμάτωση κατά την επαναιμάτωση οργάνων και ενδεχομένως να συμβάλει στη μείωση των δυσμενών μετεγχειρητικών εκβάσεων.

Η αξία των κοινών τεχνικών, όπως η μετεγχειρητική υπερηχογραφία διπλής όψης ή η αρτηριακήνεφρώνΟ ανιχνευτής ροής αίματος (RBF), για την παρακολούθηση της ολικής RBF περιορίζεται από το γεγονός ότι τέτοιες τεχνικές δεν λαμβάνουν υπόψη τις τοπικές ετερογένειες αιμάτωσης.5 Βασίζεται στην εσφαλμένη αντίληψη ότι η συνολική RBF αντικατοπτρίζει επαρκώς την RCM.6 Επομένως, η χρήση τεχνικών που μπορούν προτιμάται η ανίχνευση της ετερογένειας της ροής του αίματος.7 Η μετεγχειρητική διπλή υπερηχογραφία έχει την ικανότητα να ανιχνεύει τοπικά ελλείμματα αιμάτωσης8 και έχει επικυρωθεί σε αρκετές μελέτες. Ωστόσο, η γενική εφαρμογή του περιορίζεται από την ουσιαστική εξάρτηση από τον χειριστή.5 Άλλοι ανέφεραν τη χρήση μεθόδων απεικόνισης επαφής για την άμεση οπτικοποίηση και ποσοτικοποίηση της κίνησης των ερυθρών αιμοσφαιρίων.2,3 Αυτές οι μέθοδοι απέδωσαν πολλά υποσχόμενα αποτελέσματα σχετικά με ορισμένες τιμές αποκοπής καθυστερημένη λειτουργία μοσχεύματος, μετεγχειρητικά επίπεδα κρεατινίνης ή ακόμη και απόρριψη αλλομοσχεύματος με μετρήσεις RCM που πραγματοποιούνται μόλις 5 λεπτά μετά την επαναιμάτωση.1–4 Ο κύριος περιορισμός αυτών των μεθόδων είναι το μικρό (~ 1 mm2) οπτικό πεδίο (FOV) στο το οποίο μπορεί να οπτικοποιηθεί το RCM. Πρόσφατα, η απεικόνιση φθορισμού πράσινου ινδοκυανίνης (ICG) εισήχθη για να αξιολογήσει το RCM και να το συσχετίσει με το κλινικό αποτέλεσμα τουνεφρόμεταμόσχευση.5,9,10 Ωστόσο, ο φθορισμός ICG είναι δύσκολο να προσδιοριστεί ποσοτικά10 και η παρουσία ενός φθορίζοντος σήματος δεν συνεπάγεται αμέσως ένα όργανο με καλή διάχυση. εμποδίζει επίσης τη χειρουργική επέμβαση.

Μέχρι σήμερα, ένα αντικειμενικό, διεγχειρητικό εργαλείο απεικόνισης που μπορεί να βοηθήσει στην οπτικοποίηση του RCM κατά τη διάρκεια της χειρουργικής επέμβασης εξακολουθεί να λείπει. Σε αυτό το άρθρο, αναφέρουμε τη χρήση της απεικόνισης με κηλίδες με λέιζερ (LSCI), μια τεχνική απεικόνισης σε πραγματικό χρόνο, χωρίς επαφή, πλήρους πεδίου με μεγάλο FOV που μπορεί να απεικονίσει τη ροή του αίματος στους ιστούς χωρίς τη χορήγηση φθορίζουσας χρωστικής ,12 για παρακολούθηση του RCM σε χοίρους μεγέθους ανθρώπουσχετικά με. Στόχος μας είναι να επικυρώσουμε τη χρήση του LSCI ως εργαλείου για τη μέτρηση της επαναιμάτωσης οργάνων κατά τη διάρκεια πολλών μοντέλων αιμοδυναμικών αλλαγών.

σε ποιες περιπτώσεις χρησιμοποιείται το κιστάνι: θεραπεία νεφρικών παθήσεων

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1 Νεφροί Σφαγείου

Έξι νεφρά χοίρων που ανακτήθηκαν από το σφαγείο ελήφθησαν από ένα τοπικό σφαγείο. Χοίροι (θηλυκά χοίροι Dutch Landrace, ηλικίας περίπου 5 μηνών με μέσο βάρος 130 kg) σφάχτηκαν για σκοπούς κατανάλωσης και ο χειρισμός τους έγινε σύμφωνα με τυποποιημένες νομικές διαδικασίες. Τα γουρούνια ζαλίστηκαν από το ρεύμα και πέθαναν από αφαίμαξη. Περίπου 2 λίτρα αίματος συλλέχθηκαν σε ένα ποτήρι ζέσεως με 25,000 IU ηπαρίνης (LEO Pharma A/S, Ballerup, Δανία) κατά την αφαίμαξη. Τα νεφρά αφαιρέθηκαν από το πτώμα en bloc, η νεφρική αρτηρία αφαιρέθηκε ελεύθερη και ο περιβάλλοντας ιστός αφαιρέθηκε. Ο αριστερός νεφρός χρησιμοποιήθηκε για όλα τα πειράματα αφού αυτή η πλευρά εμφάνιζε καλύτερα ορατή αρτηριακή διακλάδωση. Μετά από 30 λεπτά θερμής ισχαιμίας (δηλαδή, ο χρόνος μεταξύ της διακοπής της κυκλοφορίας του αίματος και της έναρξης της κρύας έκπλυσης), οι νεφροί ξεπλύθηκαν με 500 ml ψυχρού ορού 4 βαθμών. Στη συνέχεια, οι νεφροί εγκαταστάθηκαν σε θήκη νεφρού και τοποθετήθηκαν στην υποθερμική μηχανή διάχυσης (HMP) (Kidney Assist Transporter, Organ assist, Groningen, Ολλανδία) στους 4 βαθμούς και εγχύθηκαν για τρεισήμισι ώρες σε μέση πίεση 25 mmHg. Το HMP οξυγονώθηκε (100 τοις εκατό O2) με ρυθμό 100 ml∕min.

2.2 Normothermic Machine Perfusion

Η ρύθμιση της νορμοθερμικής μηχανής διάχυσης (NMP) περιγράφηκε λεπτομερώς αλλού,13 χρησιμοποιώντας μια φυγοκεντρική κεφαλή αντλίας (Deltastream DP3, MEDOS Medizintechnik AG, Heilbronn, Γερμανία) που ελέγχεται από εσωτερικά αναπτυγμένο λογισμικό (Sophisticate, Labview, National Instruments, Austin , Ηνωμένες Πολιτείες).14 Το λογισμικό όχι μόνο επιτρέπει τόσο τη ροή όσο και την κατευθυνόμενη από την πίεση αιμάτωση, αλλά επιτρέπει επίσης την εναλλαγή μεταξύ της παλμικής ημιτονικής και της σταθερής ροής.

Η θερμοκρασία ρυθμίστηκε με σύστημα θέρμανσης νερού Jubalo και ρυθμίστηκε στους 37 βαθμούς. Ένας ενσωματωμένος εναλλάκτης θερμότητας (HILITE 1000®, MEDOS Medizintechnik AG, Heilbronn, Γερμανία) κατασκευάστηκε στον οξυγονωτή. Ο αισθητήρας ροής είναι ένας αισθητήρας ροής με σφιγκτήρα (ME7PXL clamp®, Transonic Systems Inc., Ithaca, Ηνωμένες Πολιτείες). Ο αισθητήρας πίεσης είναι ένας μετατροπέας πίεσης Truewave® μιας χρήσης (Edwards Lifesciences, Irvine, Ηνωμένες Πολιτείες). Ως μέσο έγχυσης, χρησιμοποιήθηκαν 500 ml αυτόλογου αίματος χωρίς λευκοκύτταρα. Το αίμα αραιώθηκε με 300 ml γαλακτικού Ringers (Baxter, Ουτρέχτη, Ολλανδία) και συμπληρώθηκε με 10 ml διττανθρακικού 8,4 τοις εκατό (B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Γερμανία), 10 ml 5 τοις εκατό γλυκόζης (Baxter, Ουτρέχτη, Ολλανδία) , 6 mg μαννιτόλης (Baxter, Ουτρέχτη, Ολλανδία), 0,33 ml δεξαμεθαζόνη (Centrafarm, Etten-Leur, Ολλανδία), 100 mg ∕ 200 mg αμοξικιλλίνη/κλαβουλανικό οξύ (Sandoz BV Almere, The Netherlands (mgcregmanin9), -Aldrich, St. Louis), και 0,1 ml νιτροπρωσσικού νατρίου (Sigma-Aldrich, St. Louis). Προστέθηκε πλάσμα για να φτάσει σε αιματοκρίτη 24 τοις εκατό. Μια σταθερή έγχυση (20 ml∕h) ενός μείγματος 90 ml Aminosol (Aminoplasmal, B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Γερμανία), 1 ml ινσουλίνης (NovoRapid®, Novo Nordisk, Bagsværd, Δανία) και 3 ml διττανθρακικού ήταν διατηρούνται. Ο άνθρακας (95 τοις εκατό O2 και 5 τοις εκατό CO2) τροφοδοτήθηκε μέσω του οξυγονωτή με ρυθμό ροής 500 ml∕min. Η πλήρης ρύθμιση NMP φαίνεται στην Εικ. 1.

2.3 Ρύθμιση απεικόνισης αντίθεσης κηλίδων λέιζερ

Το LSCI βασίζεται στην αρχή του συνεκτικού φωτός λέιζερ που διαχέεται πίσω από τον ιστό, το οποίο σχηματίζει ένα μοτίβο κηλίδων στον ανιχνευτή. Η μετατόπιση φάσης αυτού του οπισθοσκέδασου φωτός έχει ως αποτέλεσμα ένα τυχαίο σχέδιο παρεμβολής, τα λεγόμενα στίγματα. Λόγω της κίνησης στον ιστό, δηλαδή της κίνησης των ερυθρών αιμοσφαιρίων, το μοτίβο παρεμβολής αρχίζει να κυμαίνεται, προκαλώντας ένα δυναμικό μοτίβο κηλίδων, το οποίο θολώνεται από τον πεπερασμένο χρόνο έκθεσης του ανιχνευτή. Η αντίθεση κηλίδων K υπολογίζεται χρησιμοποιώντας την Εξ. (1).

όπου είναι η τυπική απόκλιση της έντασης I έναντι της μέσης έντασης hIi που υπολογίζεται σε ένα παράθυρο συνέλιξης στο χώρο και/ή στο χρόνο. Δημιουργήθηκε μια εγκατάσταση LSCI με βάση το λογισμικό ανάλυσης Lapvas-imaging (LIMIS Development BV, Leeuwarden, The Netherlands) που έχει αποδειχθεί προηγουμένως από την ομάδα μας ότι πιστοποιεί τη μικροαγγειακή ροή αίματος στο έντερο κατά τη διάρκεια πειραμάτων ισχαιμίας/επαναιμάτωσης in vivo.15 Μια μονόχρωμη κάμερα ( Το CM-200GE®, Jai, Κοπεγχάγη, Δανία) τοποθετήθηκε σε μια σταθερή 3D-εκτυπωμένη βάση για να διασφαλιστεί η αμετάβλητη απόσταση και γωνία πρόσπτωσης της κάμερας και του λέιζερ (Εικ. 1). Η απόσταση μεταξύ της κάμερας και του νεφρού ήταν 20 cm με προκύπτον FOV 19 × 14 cm. Ο φακός (LM12JC®, Kowa, Düsseldorf, Γερμανία) ορίστηκε σε αριθμό f 7 με αποτέλεσμα ~2 pixel ανά στίγμα ικανοποιώντας έτσι το κριτήριο Nyquist.16 Προστέθηκε ένα φίλτρο πολωτή για να ελαχιστοποιηθούν οι κατοπτρικές αντανακλάσεις. Οι εικόνες ήταν 1624 × 1236 pixels και καταγράφηκαν με 3.125 καρέ∕s και χρόνο έκθεσης 40 ms. Απαιτείται μεγαλύτερος χρόνος έκθεσης για να ληφθούν επαρκείς εντάσεις pixel ως αποτέλεσμα του συνδυασμού ενός λέιζερ χαμηλής ισχύος και ενός μεγάλου FOV. Οι εικόνες αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας έναν χωρικό αλγόριθμο LSCI με μέσο όρο χρόνου με ένα χωρικό συρόμενο παράθυρο 7 × 7 και ένα χρονικό παράθυρο 7 καρέ. Μια κόκκινη δίοδος λέιζερ συζευγμένης με ίνες (λ ¼ 638 nm, 200 mW, Lionix International, Enschede, Ολλανδία) συζεύχθηκε σε μια οπτική ίνα με έναν φακό ευθυγράμμισης (12 mm ∅, − 12 mm FL-χωρίς διπλό κοίλο φακό, Edmund Optics, New Jersey, Ηνωμένες Πολιτείες) στο απομακρυσμένο άκρο. Το λέιζερ τοποθετήθηκε σε μια σταθερή ράβδο και ρυθμίστηκε σε ισχύ εξόδου 120 mW. Η συνολική ρύθμιση (Εικ. 1) τοποθετήθηκε σε ένα μαυρισμένο κουτί για να μπλοκάρει όλο το φως του περιβάλλοντος. Δισδιάστατοι χάρτες διάχυσης δημιουργήθηκαν και εμφανίστηκαν σε πραγματικό χρόνο κατά τη διάρκεια των πειραμάτων, ενώ οι ακατέργαστες εικόνες κηλίδων αποθηκεύτηκαν για περαιτέρω μεταεπεξεργασία εκτός σύνδεσης.

όφελος cistanche: θεραπεία νεφρικών παθήσεων

2.4 Αιμοδυναμικά πειράματα

Σχεδιάσαμε ένα σύνολο τεσσάρων αιμοδυναμικών πειραμάτων για τη μελέτη του LSCI ως εργαλείου για τη μέτρηση της αιμάτωσης οργάνων (Εικ. 2). Κατά τη διάρκεια όλων των πειραμάτων, μετρήθηκαν η θερμοκρασία, η πίεση, η (αρτηριακή) RBF και η νεφρική αντίσταση. Στη συνέχεια, μετρήσαμε την αιμάτωση του φλοιού χρησιμοποιώντας LSCI. Αυτά τα πειράματα σχεδιάστηκαν για να εξετάσουν τη δυνατότητα διαφοροποίησης μεταξύ ιστών με καλή και κακή διάχυση με την πάροδο του χρόνου (Ενότητες 2.4.1 έως 2.4.3) και να αναλύσουν την ικανότητα των τεχνικών να διακρίνουν μεταξύ των τοπικών ελλειμμάτων αιμάτωσης, π.χ., χωρικής ανάλυσης και ταχύτητα με την οποία ανιχνεύεται αυτό, δηλαδή, χρονική ανάλυση (Ενότητες 2.4.3 και 2.4.4). Αυτά τα πειράματα επαναλήφθηκαν σε πέντε διαφορετικούς νεφρούς. Σε έναν ξεχωριστό επιπλέον νεφρό, πραγματοποιήσαμε ταυτόχρονη απεικόνιση RBF, LSCI και σκοτεινού πεδίου πλευρικής ροής (SDF) ενώ πραγματοποιούσαμε επαναλαμβανόμενη τοπική ισχαιμία και τρεις ενέσεις βλωμού αερίου (Ενότητα 2.5).

2.4.1 Πείραμα επαναιμάτωσης

Η επικύρωση της σχέσης μεταξύ των τιμών RBF και LSCI είναι ζωτικής σημασίας για κλινική χρήση. Εκτός από την ομοιότητα με την επαναιμάτωση κατά τη διάρκεια μιας μεταμόσχευσης νεφρού, αυτό το πείραμα θα μπορούσε να μας δώσει πληροφορίες για τη συσχέτιση μεταξύ των τιμών RBF και LSCI σε τιμές χαμηλής και υψηλής ροής στην αρχή και στο τέλος του πειράματος, αντίστοιχα. Μετά από HMP και κρύο έκπλυση με 500 ml 0,9 τοις εκατό NaCl, ο νεφρός εγκαταστάθηκε στον θάλαμο οργάνων NMP, θερμαινόμενος για 60 λεπτά με πίεση 85 mmHg και ημιτονοειδή ροή με συχνότητα 60 Hz για να μιμηθεί μια φυσιολογική κατάσταση. Κατά τη διάρκεια αυτής της ώρας, ο νεφρός θερμαίνεται από 4 βαθμούς σε 37 βαθμούς.

2.4.2 Πείραμα ροής

Παρόμοια με το πείραμα επαναιμάτωσης (Ενότητα 2.4.1), αυτό το πείραμα θα μπορούσε να μας δώσει μια εικόνα για τη συσχέτιση μεταξύ των τιμών RBF και LSCI με σταδιακά και ελεγχόμενο τρόπο. Για αυτό το πείραμα, η ροή άλλαξε από ημιτονοειδή διάχυση σε σταθερή ροή για να εγγυηθεί μια σταθερή γραμμική ροή χωρίς την παρεμβολή του ημιτονοειδούς σχεδίου. Η ροή ρυθμίστηκε σε ρυθμό 200 ml∕ min. Το πείραμα ξεκίνησε στα 150 ml∕min σε περίπτωση που ο νεφρός δεν έφτανε τη ροή των 200ml∕min μετά τη φάση προθέρμανσης. Η ροή μειώθηκε με βήματα των 50 ml∕min κάθε 4 λεπτά. Η ροή στη συνέχεια αυξήθηκε με βήματα των 50 ml∕min στο αρχικό επίπεδο όταν επιτεύχθηκε ροή 50 ml∕min. Αυτό το πείραμα πραγματοποιήθηκε δύο φορές, διαδοχικά σε κάθε νεφρό.

2.4.3 Τοπική ισχαιμία

Θα μπορούσαμε να αξιολογήσουμε την ικανότητα διάκρισης μεταξύ πηγαδιών και μη αιμωμένων ιστών εντός του FOV προκαλώντας μια τοπική ισχαιμική περιοχή. Η ταχύτητα με την οποία μπορεί να απεικονιστεί η μεγάλη τοπική διαφορά αιμάτωσης δίνει μια ένδειξη της προστιθέμενης κλινικής αξίας σε περίπτωση ανεπιθύμητης τοπικής αιμάτωσης κατά τη διάρκεια μιας μεταμόσχευσης νεφρού. Ένας καθετήρας (4F αρτηριακός καθετήρας εμβολεκτομής, Edward Lifescience, Irvine, Ηνωμένες Πολιτείες) εισήχθη στη νεφρική αρτηρία πριν από το NMP και ράφτηκε στην κάτω διακλάδωση της νεφρικής αρτηρίας. Ο καθετήρας διογκώθηκε προκαλώντας τοπική ισχαιμία σε ένα μέρος του νεφρού. Η ισχαιμία προκλήθηκε δύο φορές. Την πρώτη φορά, μια σύντομη 5-λεπτή θερμή ισχαιμική περίοδος ακολουθήθηκε από 10-λεπτό χρόνο ανάρρωσης. Τη δεύτερη φορά, μια μακρά {{4}λεπτή θερμή ισχαιμική περίοδος ακολουθήθηκε από 40-λεπτό χρόνο ανάρρωσης.

2.4.4 Έγχυση με φυσαλίδες αερίου

Αν και η τοπική ισχαιμία (Ενότητα 2.4.3) προκαλεί μεγάλο έλλειμμα αιμάτωσης, αυτό το πείραμα ελέγχει την ικανότητα διάκρισης μεταξύ αυτών των περιοχών τοπικής επαναιμάτωσης και έγκαιρης παρατήρησής τους. Η έγχυση βλωμού αρτηριακού αερίου προκαλεί σύντομη πλήρη ισχαιμία που ακολουθείται από μικρές περιοχές τοπικής επαναιμάτωσης με τελικά πλήρη επαναιμάτωση του νεφρού. Το αέριο σχηματίζει εμβολή στο αιμοφόρο αγγείο. Αυτά τα έμβολα εμποδίζουν τη διέλευση του αίματος και έτσι εμποδίζουν την αιμάτωση. Όταν το αέριο διαλύεται στο μέσο έγχυσης, η εμβολή εξαφανίζεται και η αιμάτωση επανεμφανίζεται. Η ταχύτητα με την οποία συμβαίνει αυτό εξαρτάται από το εγχυόμενο αέριο και τη σχετική διαλυτότητά του (δηλαδή, το O2 και το CO2 διαλύονται ταχύτερα από το N2). Ως τελευταίο πείραμα, 4 ml των αντίστοιχων αερίων εγχύθηκαν στην αρτηριακή γραμμή. Πρώτα με Ο2, στη συνέχεια ακολουθήθηκε κάθε 10 λεπτά από άνθρακα (95 τοις εκατό Ο2 και 5 τοις εκατό CO2), αέρας δωματίου και Ν2.

2.5 Πειράματα απεικόνισης σκοτεινού πεδίου Sidestream

Η απεικόνιση SDF μπορεί να παρακολουθεί την κίνηση μεμονωμένων ερυθρών αιμοσφαιρίων επιτρέποντας ποσοτικές μετρήσεις ροής αίματος και την ανίχνευση λεπτών μικροαγγειακών αλλαγών.17–19 Η απεικόνιση SDF είναι μια μέθοδος επαφής με σχετικά μικρό FOV ~ 1 mm2. Η συσκευή έχει συνολική μεγέθυνση 750×. Το βάθος διείσδυσης είναι περίπου 750 μm. Το μικρό FOV σε συνδυασμό με ένα ρηχό

Το βάθος διείσδυσης και το γεγονός ότι είναι μέθοδος επαφής καθιστά την απεικόνιση SDF λιγότερο από ιδανική για την οπτικοποίηση ή το RCM. Το πράσινο φως που εκπέμπεται από το σύστημα διασκορπίζεται μέσω του ιστού και απορροφάται από την αιμοσφαιρίνη στα ερυθρά αιμοσφαίρια με αποτέλεσμα τα σκοτεινά ερυθρά αιμοσφαίρια σε αντίθεση με τον ιστό υποβάθρου. Η χρήση της απεικόνισης SDF ως ποσοτικής μέτρησης της ροής του αίματος μας επιτρέπει να συγκρίνουμε το RBF και το LSCI με το SDF. Ωστόσο, πρέπει να σημειωθεί ότι το RBF μετρά τόσο τη φλοιώδη όσο και τη μυελική ροή αίματος, ενώ το LSCI και το SDF μετρούν μόνο το RCM με τη διαφορά ότι είναι πλήρες πεδίο (LSCI) έναντι ενός μικρού FOV (SDF). Το μικροσκόπιο SDF (MicroScan Video Microscope System, MicroScan BV, Άμστερνταμ, Ολλανδία) κρατήθηκε στη θέση του χρησιμοποιώντας ένα τρίποδο συνδεδεμένο με ένα εργαστηριακό τραπέζι για την ελαχιστοποίηση των τεχνουργημάτων κίνησης. Το τρίποδο διαθέτει βίδες ρύθμισης ακριβείας του άξονα Χ και Υ για την τοποθέτηση του μικροσκοπίου κάθετα στον νεφρικό φλοιό χωρίς να προκαλείται τεχνουργήματα πίεσης. Η άκρη του μικροσκοπίου SDF καλύφθηκε με πλαστικό καπάκι. Οι εικόνες καταγράφηκαν σε 10 καρέ∕s με ανάλυση 720 × 576 pixel. Το σήμα βίντεο ψηφιοποιήθηκε χρησιμοποιώντας μια συσκευή λήψης καρέ S-VHS σε USB και αποθηκεύτηκε σε υπολογιστή για περαιτέρω επεξεργασία εκτός σύνδεσης. Το μικροσκόπιο SDF χρησιμοποιεί παλλόμενες διόδους εκπομπής πράσινου φωτός που τοποθετούνται γύρω από τη συσκευή σύζευξης φορτίου στο άκρο του μικροσκοπίου. Τα δεδομένα αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας προσαρμοσμένο λογισμικό (Matlab, Mathworks, Natick, Massachusetts) που υπολόγιζε τη μέση ένταση εικονοστοιχείων (MPI) σε ολόκληρο το πλαίσιο λαμβάνοντας τη μέση ένταση εικονοστοιχείων. Το MPI είναι ένα μέτρο του αριθμού των RBC. Καθώς ο αριθμός των RBC εντός του πλαισίου αυξάνεται, οι εικόνες σκουραίνουν, επομένως το MPI είναι ένα σχετικό μέτρο για τον αριθμό των RBC (Βίντεο 3). Η περιοχή ενδιαφέροντος για τις μονάδες διάχυσης κηλίδων λέιζερ (LSPU) τοποθετήθηκε 1 cm μακριά από την κάμερα SDF.

Η νεφρική κάψουλα έπρεπε να αφαιρεθεί τοπικά στην άκρη του μικροσκοπίου SDF για να μπορέσει να απεικονίσει το RCM κατά τη διάρκεια αυτού του μέρους των πειραμάτων. Απεικόνιση SDF, μετρήσεις RBF και LSCI πραγματοποιήθηκαν ταυτόχρονα μόνο σε έναν νεφρό λόγω της πολύπλοκης φύσης της απεικόνισης του RCM χρησιμοποιώντας απεικόνιση SDF. Πέντε διαδοχικές επαναλήψεις των σύντομων πειραμάτων τοπικής ισχαιμίας εκτελέστηκαν και ακολούθησαν τρεις ενέσεις αερίου με οξυγόνο, μία με αέρα δωματίου και μία με άζωτο, αντίστοιχα.

2.6 Ανάλυση Δεδομένων

Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέση SD εκτός εάν αναφέρεται διαφορετικά. Οι συσχετίσεις μεταξύ LSCI σε LSPU (AU) και RBF (ml/min) και SDF σε MPI (AU) υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας έναν συντελεστή προσδιορισμού, R2. Χρησιμοποιήθηκαν εφαρμόσιμα παραμετρικά ζευγαρωμένα τεστ. Μια τιμή p του<0.05 was="" considered="" statistically="" significant.="" the="" experiments="" described="" in="" sec.="" 2.4="" were="" repeated="" five="" times="" to="" rule="" out="" unique="">

Το εκχύλισμα cistanche tubulosa ωφελεί τα νεφρά

3 Αποτελέσματα

Το μέσο βάρος των έξι νεφρών του σφαγείου ήταν 338.1 24.0 g.

3.1 Πείραμα επαναιμάτωσης

Το πείραμα επαναιμάτωσης πραγματοποιήθηκε πέντε φορές σε πέντε νεφρούς. Κατά τη διάρκεια της ώρας, όλοι οι νεφροί θερμάνθηκαν στους 37 βαθμούς, γεγονός που οδήγησε σε αύξηση του RCM (Εικ. 3.). Αυτό το πείραμα έδειξε ομοιότητα με την επαναιμάτωση κατά τη μεταμόσχευση νεφρού. Η συσχέτιση μεταξύ του κανονικοποιημένου LSPU (AU) και του RBF (ml/min) ήταν R2 ¼ 0.94 0.02 (p < 0,0001).="" η="" καλή="" συσχέτιση="" μπορεί="" να="" εξηγηθεί="" από="" την="" τάση="" ενός="" νεφρού="" να="" κατανέμει="" αίμα="" πρώτα="" στον="" φλοιό,="" η="" οποία="" είναι="" η="" ροή="" που="" μετράμε="" χρησιμοποιώντας="" το="">

3.2 Πείραμα ροής

Το πείραμα ροής πραγματοποιήθηκε 10 φορές σε πέντε νεφρούς. Το R2 του κανονικοποιημένου LSPU (AU) και του RBF (ml/min) ήταν 0.59 0.31 (ρ > 0,05). Μια αλλαγή στο συνολικό RBF δεν ακολουθήθηκε από παρόμοια αλλαγή στον φλοιό (δηλαδή, RCM) με αποτέλεσμα μια μέτρια συσχέτιση. Όπως φαίνεται στο Σχ. 4, φαίνεται να υπάρχει μια αιμοδυναμική απόκριση, που ανακατευθύνει τη ροή προς τον φλοιό. Υπήρχε μια εμφανής αιμοδυναμική απόκριση όταν ο RBF μειώθηκε σε κατάσταση χαμηλής ροής (~ 100 ml∕ min). Όταν η RBF αυξήθηκε, παρατηρήθηκε μια κλασική βραχυπρόθεσμη υπέρβαση επαναιμάτωσης.

3.3 Τοπική ισχαιμία

Το πείραμα τοπικής ισχαιμίας πραγματοποιήθηκε σε πέντε νεφρούς. Το πείραμα απέτυχε για δύο νεφρά. το ένα λόγω δυσλειτουργίας του καθετήρα με μπαλόνι και το άλλο λόγω της εμφάνισης της ισχαιμικής περιοχής στην οπίσθια πλευρά του νεφρού. Τυπικές εικόνες φαίνονται στα Σχ. 5(α) και 5(β). Τα δεδομένα απεικονίζονται σε γραφήματα ράβδων στο Σχήμα 5(c) και ένα τυπικό ίχνος μιας ισχαιμικής περιοχής ενδιαφέροντος εμφανίζεται στο Σχήμα 5(δ). Τα αποτελέσματα της βραχείας (5 min) και της μεγάλης (15 min) ισχαιμικής περιόδου βρίσκονται στον Πίνακα 1. Η σύντομη και η μεγάλη ισχαιμική περίοδος δεν έδειξαν σημαντικές διαφορές. Η βασική γραμμή είναι ο μέσος όρος της χρονικής περιόδου πριν από την πρόκληση της τοπικής ισχαιμίας. Η ισχαιμία είναι ο μέσος όρος της ισχαιμικής περιόδου. Η επαναιμάτωση είναι η μέγιστη τιμή αμέσως μετά την απελευθέρωση της τοπικής ισχαιμίας και η μετά απόφραξη είναι ο μέσος όρος του χρόνου μετά την επαναιμάτωση. Οι τιμές LSPU κανονικοποιούνται σε σύγκριση με τη βασική γραμμή.

3.4 Έγχυση αερίου-φυσαλίδας

Η έγχυση με φυσαλίδα αερίου πραγματοποιήθηκε μία φορά σε πέντε νεφρούς και χαρακτηρίστηκε από μια αργή, τοπική επιστροφή του RCM, όπως απεικονίζεται στο Σχ. 6. Τα δεδομένα βρίσκονται στον Πίνακα 2 όπου η σχετική πτώση στο LSPU υπολογίζεται σε σχέση με το βασικό επίπεδο . Ο χρόνος ανόδου ορίζεται ως ο χρόνος που χρειάζεται για να επιστρέψει το LSPU στο βασικό επίπεδο. Αυτό ήταν μεγαλύτερο από 600 δευτερόλεπτα για το άζωτο και επομένως ο ακριβής χρόνος ανόδου δεν μπορούσε να μετρηθεί. Το R2 υπολογίστηκε με το LSPU (AU) και το RBF (ml/min). Τα δεδομένα απεικονίζονται σε γραφήματα ράβδων στα Σχ. 7(α) και 7(β) για τη μέση πτώση ( ποσοστό ) και χρόνο ανόδου (s), αντίστοιχα. Το Σχήμα 7(c) εμφανίζει τυπικά ίχνη LSCI για αυτό το πείραμα σε έναν νεφρό.

3.5 Σύγκριση απεικόνισης σκοτεινού πεδίου πλευρικής ροής

Τα αποτελέσματα της τοπικής ισχαιμίας, οξυγόνου, αέρα δωματίου και έγχυσης αζώτου φαίνονται στον Πίνακα 3. Όλα τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν στον ίδιο νεφρό. Ένα αντιπροσωπευτικό παράδειγμα των ψευδόχρωμων εικόνων LSCI και των αντίστοιχων εικόνων SDF φαίνονται στο Σχ. 8 και στο βίντεο 3. Το SDF-LSPU έδειξε την καλύτερη συνολική συσχέτιση σε σύγκριση με τις τιμές LSPU-RBF και SDF-RBF R2- .

εκχύλισμα κιστάνι για τη θεραπεία χρόνιων νεφρικών παθήσεων

4. Συζήτηση

Αναφέρουμε την οπτικοποίηση του RCM χρησιμοποιώντας ex vivo έγχυση νεφρών σφαγείου χοίρων σε μέγεθος ανθρώπου σε διάφορα μοντέλα ισχαιμίας/επαναιμάτωσης. Τα πειράματα τοπικής επαναιμάτωσης κατέδειξαν υψηλή συσχέτιση μεταξύ των LSCI και SDF, ανώτερη από τις συσχετίσεις LSCI με RBF. Η καλή συσχέτιση μεταξύ LSCI και SDF τονίζει την υψηλή χρονική και χωρική ανάλυση του LSCI στην ικανότητά του να οπτικοποιεί το RCM. Το LSCI όχι μόνο εμφανίζει μια σαφή διάκριση μεταξύ ιστών με έγχυση και μη, αλλά παρακολουθεί επίσης την παροδική ισχαιμία, που προκαλείται από έγχυση αερίων με διαφορετικά χαρακτηριστικά απορρόφησης, σε πραγματικό χρόνο. Ωστόσο, η επίδραση της παρακολούθησης της μικροδιάχυσης του φλοιού κοντά στην επιφάνεια στη λήψη κλινικών αποφάσεων θα πρέπει να διερευνηθεί περαιτέρω σε μια κλινική δοκιμή.

Το πείραμα επαναιμάτωσης εμφάνισε υψηλή συσχέτιση μεταξύ του RBF και του LSCI υποδεικνύοντας ότι η επαναιμάτωση μετά από ισχαιμία κατά τη διάρκεια της μεταμόσχευσης νεφρού μπορούσε να παρακολουθηθεί χρησιμοποιώντας LSCI. Αυτό έχει το πλεονέκτημα έναντι των συμβατικών ενδονεφρικών ανιχνευτών στο ότι μπορεί να ανιχνεύσει τοπικά ελλείμματα αιμάτωσης σε πρώιμο στάδιο. Η μικρή διαφορά μεταξύ RBF και LSCI θα μπορούσε ενδεχομένως να εξηγηθεί από τον μηχανισμό ανακατανομής του νεφρού20, καθώς η αιμάτωση του μυελού και του φλοιού είναι μια δυναμική διαδικασία και επηρεάζεται από αιμοδυναμικούς παράγοντες. Τα δεδομένα μας έχουν δείξει ότι μια σταθερή RBF ισοδυναμεί με σταθερή αιμάτωση του φλοιού, καθώς η αιμάτωση του φλοιού και του μυελού μπορεί να αλλάξει με την πάροδο του χρόνου και είναι ανεξάρτητα μεταξύ τους (π.χ., όταν ο RBF δεν αλλάζει, το LSCI μπορεί ακόμα να ανιχνεύσει την τοπική ελλείμματα αιμάτωσης).

Κατά τη διάρκεια του πειράματος ροής με μια σταδιακή αλλαγή στο συνολικό RBF, το LSCI εμφάνισε μόνο μια μέτρια συσχέτιση με το συνολικό RBF. Υποθέτουμε ότι ο λειτουργικός ιστός στον φλοιό διατηρείται σε βάρος της μείωσης της ροής προς τον μυελό ως απόκριση σε μια μείωση της RBF. Αυτό θα είχε ως αποτέλεσμα μια ανακατεύθυνση της ροής στον φλοιό (δηλαδή, RCM).20 Στα δεδομένα μας, όταν το RBF μειώθηκε, το RCM αυξανόταν σταδιακά μετά από κάθε πτώση του συνολικού RBF ως αποτέλεσμα της αυτορρύθμισης υπέρ του RCM. Ωστόσο, όταν το RBF αυξήθηκε σε καταστάσεις χαμηλής ροής, παρατηρήθηκε το αντίθετο.

Η τοπική ισχαιμία ήταν αμέσως ορατή στο live feed σε πραγματικό χρόνο. Το πείραμα έχει καλή συσχέτιση τόσο για τη σύντομη όσο και για τη μεγάλη ισχαιμική περίοδο, η οποία είναι συγκρίσιμη με τη συσχέτιση που βρέθηκε κατά τη σύγκριση LSCI-SDF. Αυτό μπορεί να εξηγηθεί από το γεγονός ότι δεν υπάρχει αίμα για ανακατανομή, επομένως η μείωση της ροής είναι ανάλογη με το RBF. Εμφανίζει αμέσως μια διάκριση μεταξύ ιστών με καλά και μη αιμάτωσης, ενώ ο ορατός αποχρωματισμός των ιστών απαιτεί παρατεταμένο χρόνο. Αυτή η γρήγορη και ακριβής αξιολόγηση του RCM από το LSCI έχει δυνητικό κλινικό αντίκτυπο. Για παράδειγμα, οι Hoffman et al.9 ανέφεραν ένα έλλειμμα αιμάτωσης ανεπαίσθητο στο ανθρώπινο μάτι που θα μπορούσε να αποκατασταθεί με την επανατοποθέτηση του οργάνου στον λαγόνιο βόθρο. Η ικανότητα του LSCI να παρακολουθεί παροδικά την έγχυση διαφορετικών αερίων με διαφορετικά χαρακτηριστικά απορρόφησης καταδεικνύει την υψηλή χωρική και χρονική ανάλυση. Αυτό αποδεικνύεται από την καλή συσχέτιση μεταξύ LSCI-SDF και κακή συσχέτιση μεταξύ LSCI-RBF. Κατά τη σχετικά μεγάλη περίοδο πριν από τη διάλυση του αζώτου στο αίμα, η RBF αποκαθίσταται αργά, ενώ ο φλοιός χρειάζεται περισσότερο χρόνο για να αποκατασταθεί στην πλήρη ροή του αίματος. Αυτό έχει ως αποτέλεσμα μια σχετικά φτωχή συσχέτιση, τονίζοντας τη σημασία της χρήσης του LSCI.

Όπως αναφέρθηκε προηγουμένως, η απεικόνιση SDF οπτικοποιεί άμεσα μεμονωμένα ερυθρά αιμοσφαίρια. Η σύγκριση του LSCI τόσο με το SDF όσο και με το RBF μας δίνει πολύτιμες πληροφορίες σχετικά με την αιμάτωση που μετρήθηκε με τη χρήση LSCI. Ωστόσο, η απεικόνιση SDF ενός νεφρού είναι κουραστική και απαιτείται αφαίρεση της νεφρικής κάψουλας καθιστώντας την ακατάλληλη για κλινική πρακτική. Οι καλές συσχετίσεις μεταξύ LSCI και SDF υποδεικνύουν επομένως ότι το LSCI μπορεί να δώσει πολύτιμες πληροφορίες με το πλεονέκτημα ότι είναι μια μέθοδος απεικόνισης χωρίς επαφή και πλήρους πεδίου.

Μια σημαντική κλινική ανάγκη στην οποία μπορεί εύκολα να εφαρμοστεί το LSCI είναι η μεταμόσχευση οργάνων. Δεδομένου ότι ο παρατεταμένος χρόνος αναστόμωσης είναι επιζήμιος για την ποιότητα του οργάνου,21 η γρήγορη και εύκολη απεικόνιση του RCM κοντά στην επιφάνεια θα μπορούσε να βοηθήσει στη βελτίωση του αποτελέσματος της μεταμόσχευσης, ειδικά επειδή υπάρχει σχέση μεταξύ της πρώιμης διεγχειρητικής κατάστασης της μικροδιάχυσης και των μετεγχειρητικών αποτελεσμάτων.1–4 Υποθέτουμε ότι Η απεικόνιση ισχαιμικών περιοχών και αγγειακών αποφράξεων χωρίς καθυστέρηση αμέσως μετά την επαναιμάτωση του οργάνου θα μπορούσε να βοηθήσει τον χειρουργό στη λήψη κλινικών αποφάσεων. Ωστόσο, αυτό πρέπει να διερευνηθεί περαιτέρω σε κλινικές δοκιμές. Αυτή η διεγχειρητική απεικόνιση έχει τη δυνατότητα να μειώσει τα ποσοστά επανεπέμβασης σε σύγκριση με το τρέχον κλινικό πρότυπο με τη μετεγχειρητική απεικόνιση, όπως το υπερηχογράφημα διπλής όψης. Δείχνοντας απευθείας στον χειρουργό εάν και πού υπάρχει έλλειμμα αιμάτωσης, μπορούν να ληφθούν αντιδραστικά μέτρα. Αυτό δεν αφορά μόνο τη χειρουργική επέμβαση μεταμόσχευσης αλλά για κάθε είδους χειρουργική επέμβαση όπου η αιμάτωση ολόκληρου του οργάνου παρουσιάζει ενδιαφέρον.

Η χρήση του LSCI έχει ήδη περιγραφεί σε νεφρούς αρουραίου,22-28 αλλά η βιβλιογραφία σχετικά με τη χρήση του σε νεφρούς μεγέθους ανθρώπου εξακολουθεί να λείπει. Η κλινική εφαρμογή θα ήταν εφικτή αφού το LSCI έχει ήδη χρησιμοποιηθεί σε κλινικό περιβάλλον.15

Μία από τις κύριες προκλήσεις που πρέπει να ξεπεραστούν πριν εφαρμοστεί το LSCI στην κλινική πράξη είναι τα τεχνουργήματα κίνησης.29 Για αυτά τα πειράματα, στερεώσαμε το νεφρό χρησιμοποιώντας άκρες πιπέτας για να εξαλείψουμε την πιθανή επίδραση της κίνησης. Ωστόσο, in vivo, ο νεφρός θα υπόκειται σε κίνηση ως αποτέλεσμα της αναπνευστικής κίνησης και των παλμών της καρδιάς κατά τη μεταμόσχευση. Άλλοι προσπάθησαν να το ξεπεράσουν χρησιμοποιώντας δείκτες πιστότητας.30,31 Αυτή η λύση δεν είναι επιθυμητή για μεταμοσχεύσεις νεφρού λόγω της επεμβατικής πτυχής της προσάρτησης του εμπιστευτικού δείκτη. Ένας άλλος πιθανός περιορισμός είναι το μικρό βάθος διείσδυσης για LSCI περίπου 0,4 έως 1 mm ανάλογα με το μήκος κύματος.32,33 Ωστόσο, αυτό δεν περιορίζει τη χρήση του LSCI, καθώς τα δεδομένα μας δείχνουν ότι η ισχαιμία είναι άμεσα ανιχνεύσιμη στο RCM.

5. Συμπέρασμα

Στη ρύθμιση με νεφρούς χοίρου ανθρώπινου μεγέθους με έγχυση ex vivo μηχανής, το LSCI ήταν ικανό να ανιχνεύει τοπικές αλλαγές στο RCM με υψηλή χωρική και χρονική ανάλυση. Σε διάφορες ρυθμίσεις τοπικής ισχαιμίας, το LSCI συσχετίστηκε καλά με την απεικόνιση SDF. Ωστόσο, το LSCI δεν συσχετίζεται πάντα πλήρως με το συνολικό RBF λόγω της ετερογένειας της ροής του αίματος μεταξύ της μυελικής και του φλοιώδους μικροκυκλοφορίας που υπογραμμίζει την προστιθέμενη αξία σε σχέση με τους συμβατικούς αισθητήρες αρτηριακής ροής. Η εφαρμογή του LSCI κατά τη διάρκεια χειρουργικής επέμβασης μεταμόσχευσης θα μπορούσε να βοηθήσει στην έγκαιρη καθιέρωση ενός κατάλληλου σχεδίου θεραπείας αμέσως μετά την επαναιμάτωση του οργάνου.

Για να αποτρέψετε τη νεφρική ανεπάρκεια με το cistanche, κάντε κλικ εδώ για να λάβετε το δείγμα

Wido Heeman,a,b,c,*,† Hanno Maassen,b,d,† Joost Calon,e

Harry van Goor, d Henri Leuvenink, b Gooitzen M. van Dam, b και

E. Christiaan Boerma aUniversity of Groningen, Faculty Campus Fryslân, Leeuwarden, Ολλανδία

bΠανεπιστημιακό Ιατρικό Κέντρο Groningen, Τμήμα Χειρουργικής, Groningen,

Ολλανδία cLIMIS Development BV, Leeuwarden, Ολλανδικό dUniversity Medical Center Groningen, Τμήμα Παθολογίας και Ιατρικής Βιολογίας,

Groningen, Ολλανδία eZiuZ Visual Intelligence, Gorredijk, Ολλανδία fMedical Center Leeuwarden, Τμήμα Εντατικής Θεραπείας, Leeuwarden, Ολλανδία

Ευχαριστίες

Αυτή η εργασία υποστηρίχθηκε από το ταμείο γνώσης και καινοτομίας του Samenwerkingsverband Noord Nederland (SNN) με τον αριθμό επιχορήγησης KEI18PR004.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. TWL Scheeren et al., "Προγνωστική αξία της διεγχειρητικής μέτρησης οξυγόνωσης νεφρικού ιστού στην πρώιμη λειτουργία νεφρικής μεταμόσχευσης", Transpl. Int. 24(7), 687–696 (2011).

2. V. Schmitz et αϊ., "Ιη νίνο οπτικοποίηση πρώιμων μεταβολών μικροκυκλοφορίας μετά από βλάβη ισχαιμίας/επαναιμάτωσης σε μεταμόσχευση νεφρού ανθρώπου", Eur. Surg. Res. 40(1), 19–25 (2008).

3. R. Hattori et al., "Άμεση οπτικοποίηση του φλοιώδους περισωληνικού τριχοειδούς του μεταμοσχευμένου ανθρώπινου νεφρού με τραυματισμό επαναιμάτωσης με χρήση μεγεθυντικής ενδοσκόπησης," Transplantation 79(9), 1190–1194 (2005).

4. M. Angelescu et al., "Αξιολόγηση της λειτουργίας νεφρικού μοσχεύματος με περιεγχειρητική παρακολούθηση της μικροκυκλοφορίας του φλοιού στη μεταμόσχευση νεφρού," Transplantation 75(8), 1190– 1196 (2003).

5. U. Rother et al., "Dosing of indocyanine green for intraoperative laser fluorescence angiography in νεφρική μεταμόσχευση," Microcirculation 24(8) (2017).

6. CJ Lumsden et al., "Vascular exchange in the νεφρό: περιφερειακός χαρακτηρισμός με τομογραφία πολλαπλών δεικτών", Circ. Res. 72(6), 1172-1180 (1993).

7. NJ Crane et al., "Απόδειξη μιας ετερογενούς οξυγόνωσης ιστών: νεφρική ισχαιμία/ βλάβη επαναιμάτωσης σε ένα μεγάλο ζώο", J. Biomed. Επιλέγω. 18(3), 035001 (2003).

8. R. Król et al., "Δείκτης ενδοεγχειρητικής αντίστασης που μετριέται με διηχητικό ροόμετρο στην αρτηρία νεφρού μοσχεύματος μπορεί να προβλέψει την πρώιμη και μακροπρόθεσμη λειτουργία του μοσχεύματος", Μεταμόσχευση. Proc. 43(8), 2926–2929 (2011).

9. C. Hoffmann et al., "Διεγχειρητική αξιολόγηση της διάχυσης αλλομοσχεύματος νεφρού με βιντεοσκόπηση φθορισμού πράσινου ινδοκυανίνης υποβοηθούμενη με λέιζερ", Μεταμόσχευση. Proc. 42(5), 1526– 1530 (2010).

10. U. Rother et al., "Ποσοτική αξιολόγηση της μικροδιάχυσης με αγγειογραφία πράσινου ινδοκυανίνης στη μεταμόσχευση νεφρού μοιάζει με χρόνιες μορφολογικές αλλαγές σε δείγματα νεφρού," Microcirculation 26(3), e12529 (2019).

11. EL Towle et al., "Σύγκριση αγγειογραφίας πράσινης ινδοκυανίνης και απεικόνισης αντίθεσης κηλίδων λέιζερ για την αξιολόγηση της αιμάτωσης των αγγείων," Neurosurgery 71(5), 1023– 1031 (2012).

12. AF Fercher και JD Briers, "Οπτικοποίηση ροής μέσω φωτογραφίας με κηλίδες μίας έκθεσης", Opt. Commun. 37(5), 326-330 (1981).

13. H. Maassen et al., "Hydrogen sulfide-induced hypometabolism in human-sized porcine νεφρά", PLoS One 14(11), e0225152 (2019).

14. MBF Pool et al., "Normothermic machine perfusion of is chemically κατεστραμμένα νεφρά χοίρου με αυτόλογα, αλλογενή ερυθρά αιμοσφαίρια χοίρου και ανθρώπου," PLoS One 15(3), e0229566 (2020).

15. W. Heeman et al., "Εφαρμογή της απεικόνισης αντίθεσης κηλίδων λέιζερ στη λαπαροσκοπική χειρουργική", Biomed. Επιλέγω. Express 10(4), 2010 (2019).

16. SJ Kirkpatrick, DD Duncan και EM Wells-Gray, "Επιβλαβείς επιδράσεις του ταιριάσματος μεγέθους κηλίδων-pixel στην απεικόνιση αντίθεσης κηλίδων με λέιζερ", Opt. Κάτοικος της Λατβίας. 33(24), 2886 (2008).

17. AFJ de Bruin et al., "Μπορεί η πλευρική απεικόνιση σκοτεινού πεδίου (SDF) να εντοπίσει λεπτές μικροαγγειακές αλλαγές του εντέρου κατά τη διάρκεια της χειρουργικής του παχέος εντέρου;" Τεχν. Coloproctol. 22(10), 793–800 (2018).

18. AFJ de Bruin et al., "Sidestream dark-field imaging of the serosal microcirculation gjatë γαστρεντερικής χειρουργικής", Color. Dis. 18(3), O103–O110 (2016).

19. ALM Tavy et al., "Intestinal mucosal and serosal microcirculation at the planed anastomosis during abdominal χειρουργείο", Eur. Surg. Res. 60 (5–6), 248–256 (2020).

20. RG Evans et al., "Αιμοδυναμικές επιρροές στην οξυγόνωση των νεφρών: κλινικές επιπτώσεις της ολοκληρωμένης φυσιολογίας", Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 40(2), 106– 122 (2013).