Τεχνολογία προετοιμασίας για κόκκους Wenyang Tongbian

Περίληψη:

ΣκοπόςΓια τον προσδιορισμό και τη βελτιστοποίηση της τεχνολογίας παρασκευής των Wenyang Tongbiangranules.

ΜέθοδοιΕκχυλίστηκε αφέψημα νερού. Ως δείκτες χρησιμοποιήθηκαν η περιεκτικότητα σε γλυκοσίδη εχινάκειας στο μοναρχικό φάρμακο και η ένωση απόδοσης. Η ορθογώνια δοκιμή L9 (34) χρησιμοποιήθηκε για τη βελτιστοποίηση της εκχύλισης των κόκκων Wenyang Tongbian. Η καλύτερη διαδικασία σχηματισμού βελτιστοποιήθηκε με βάση τη δυσκολία κοκκοποίησης, τη δυνατότητα σχηματισμού και την απόδοση σωματιδίων. Αποτελέσματα Η βέλτιστη εκχύλιση περιελάμβανε προσθήκη 10 πτυχών νερού και εκχύλιση 3 φορές, 1 ώρα κάθε φορά. Η καλύτερη διαδικασία σχηματισμού: ο τύπος του βοηθητικού υλικού ήταν δεξτρίνη, η αναλογία εκδόχων ήταν 1∶0,9 και ο καλύτερος παράγοντας διαβροχής ήταν η αιθανόλη 85%. Συμπέρασμα Η διαδικασία εξαγωγής και χύτευσης είναι σταθερή και λογική, απλή και εφικτή, με καλή αναπαραγωγιμότητα, η οποία μπορεί να προσφέρει τη βάση για τη βιομηχανική παραγωγή των κόκκων Wenyang Tongbian.

Λέξεις-κλειδιά: Wenyang Tongbian granlue; ορθογώνια δοκιμή? εξαγωγή; γείσο

ΝΕΟ ΦΥΤΙΚΟ ΣΥΝΘΕΣΗ ΓΙΑ ΤΑ ΝΕΦΡΑΕΛΛΕΙΨΗ YANG

Υποστήριξη της Wecistanche

Διεύθυνση ηλεκτρονικού ταχυδρομείου:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Δυσκοιλιότητα ανεπάρκειας Yangείναι συχνή σε ηλικιωμένους και γυναίκες. Η μέθοδος θεραπείας δεν πρέπει να είναι η απλή κάθαρση. Η μέθοδος Warming Yang μπορεί να επιτύχει καλά αποτελέσματα [1]. Τα Wenyang Tongbian Granules είναι ένα ενδονοσοκομειακό παρασκεύασμα που αναπτύχθηκε με βάση την κλινική εμπειρία του καθηγητή Lin Aizhen του Επαρχιακού Νοσοκομείου Hubei της Παραδοσιακής Κινεζικής Ιατρικής για τη θεραπεία της λειτουργικής δυσκοιλιότητας στους ηλικιωμένους. Αποτελείται από Cistanche deserticola, φλοιό κανέλας, astragalus και Atractylodes macrocephala. Στη φόρμουλα, το Cistanche deserticola έχει τις λειτουργίες του τονωτικού γιανγκ των νεφρών και ωφελεί την ουσία και το αίμα, και είναι το κύριο φάρμακο που θερμαίνει το γιανγκ. Ο φλοιός κανέλας έχει τις λειτουργίες του να θερμαίνει τους μεσημβρινούς και να ξεμπλοκάρει τα αιμοφόρα αγγεία, να αναπληρώνει τη φωτιά και να υποστηρίζει το γιανγκ. Ο αστράγαλος έχει τις λειτουργίες της ανύψωσης του γιανγκ και της αναπλήρωσης του τσι, του στυπώματος των πληγών και της προώθησης της αναγέννησης των ιστών. και το Atractylodes macrocephala έχει τις λειτουργίες της ενίσχυσης της σπλήνας και της αναπλήρωσης του τσι, της ξήρανσης της υγρασίας και της προαγωγής της διούρησης.

Μελέτες έχουν δείξει ότι οι γλυκοσίδες φαινυλαιθανόλης είναι τα κύρια δραστικά συστατικά του Cistanche deserticola [2]. Μεταξύ αυτών, η εχινακοσίδη και η βερμπασκοσίδη είναι τα χαρακτηριστικά συστατικά για τον ποιοτικό έλεγχο του Cistanche deserticola όπως ορίζεται στην Κινεζική Φαρμακοποιία. Οι Liu Xianhong et al. [3] κατέληξε στο συμπέρασμα μέσω δοκιμών in vivo σε ανθρώπους ότι το Cistanche deserticola είναι κατάλληλο για την κλινική θεραπεία της δυσκοιλιότητας και μπορεί να θεραπεύσει τόσο τα συμπτώματα όσο και τη βασική αιτία. Τα κύρια χημικά συστατικά του φλοιού κανέλας περιλαμβάνουν πτητικά έλαια, πολυσακχαρίτες, φλαβονοειδή κ.λπ. Σύγχρονες φαρμακολογικές μελέτες έχουν δείξει ότι ο φλοιός της κανέλας έχει φαρμακολογικές επιδράσεις όπως αγγειοδιαστολή, κατά του γαστρικού έλκους και αντιβακτηριδιακή δράση [4]. Οι πολυσακχαρίτες του Astragalus, τα φλαβονοειδή και η αστραγαλοσίδη IV είναι τα κύρια χημικά συστατικά που ασκούν ανοσοτροποποιητικές επιδράσεις [5]. Το Atractylodes macrocephala έχει τα αποτελέσματα της ενίσχυσης της σπλήνας και της ρύθμισης των διαταραχών της εντερικής χλωρίδας και μπορεί να χρησιμοποιηθεί κλινικά για τη θεραπεία της γαστρεντερικής δυσλειτουργίας [6]. Η αρχική συνταγή χρησιμοποιείται κυρίως σε αφεψήματα κινεζικής ιατρικής, αλλά έχει μειονεκτήματα όπως ταλαιπωρία στο αφέψημα, μεγάλη δόση και ταλαιπωρία στη μεταφορά. Προκειμένου αυτή η συνταγή κλινικής εμπειρίας να χρησιμοποιηθεί ευρέως στην κλινική πράξη, αναπτύχθηκε σε κόκκους. Αυτό το πείραμα χρησιμοποίησε την απόδοση της πάστας και την περιεκτικότητα σε εχινακοσίδη, το κύριο δραστικό συστατικό του κύριου φαρμάκου, ως δείκτες, συνέχισε να χρησιμοποιεί την παραδοσιακή διαδικασία αφεψήματος νερού και χρησιμοποίησε την ορθογώνια μέθοδο δοκιμής L9 (34) για να βελτιστοποιήσει την ποσότητα του νερού που προστέθηκε , χρόνο αφέψημα και χρόνους αφεψήματος στη διαδικασία εκχύλισης για να επιτευχθεί η καλύτερη διαδικασία εκχύλισης. Ταυτόχρονα, η διαδικασία χύτευσης κόκκων διερευνήθηκε για να προσδιοριστεί μια σταθερή και λογική διαδικασία χύτευσης, παρέχοντας μια αναφορά για την πιλοτική παραγωγή, τον ποιοτικό έλεγχο και την κλινική εφαρμογή του παρασκευάσματος [7-8].

1 Όργανα και αντιδραστήρια

1.1 Όργανα

Συμμαχία e2695Υγρός χρωματογράφος υψηλής απόδοσης, 2998 ανιχνευτής συστοιχίας διόδων (Waters, ΗΠΑ), ES225SMDR 1/100,000 αναλυτικός ζυγός (Precisa, Ελβετία), UPT-11-10Μηχανή υπερκαθαρού νερού (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), KQ-500Καθαριστικό υπερήχων CNC διπλής συχνότητας VDE (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Δοκιμαστικά φάρμακα

Φέτες κρασιού Cistanche(αριθμός παρτίδας: 2322050113, που παράγεται στην Εσωτερική Μογγολία), φέτες κανέλας (αριθμός παρτίδας: 2323020103, που παράγεται στο Guangxi), φέτες αστράγαλου (αριθμός παρτίδας: 2323020105, παραγόμενος στο Gansu), Atractylodes 2010batch ang ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., όλες οι φέτες αναγνωρίζονται ως αυθεντικές από τον Chen Shuhe, επικεφαλής φαρμακοποιό του ΙνστιτούτουΠαραδοσιακή Κινέζικη Ιατρικήτου Επαρχιακού Νοσοκομείου Χουμπέι Παραδοσιακής Κινέζικης Ιατρικής και είναι πιστοποιημένοι σύμφωνα με την έκδοση του 2020κινέζικα ΦαρμακοποιίαΜέρος Ι). Ουσία αναφοράς εχινακοσίδης(αριθμός παρτίδας: 111670-201907, καθαρότητα: 91,8%, Έρευνα επιθεώρησης τροφίμων και φαρμάκων στην Κίνα).

δεξτρίνη (αριθμός παρτίδας: 230102), άμυλο αραβοσίτου (αριθμός παρτίδας: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), σακχαρόζη (αριθμός παρτίδας: TF28221205), μικροκρυσταλλική κυτταρίνη (αριθμός παρτίδας: TF4711210), λακτόζη TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 Μέθοδοι και Αποτελέσματα

2.1 Προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε εχινακοσίδη

2.1.1 Χρωματογραφικές συνθήκες: Ως χρωματογραφική στήλη χρησιμοποιήθηκε Agilent 5 TC-C18 (25{10}} nm×4,6 mm, 5 μm). Χρησιμοποιήθηκε μεθανόλη ως κινητή φάση Α, διάλυμα μυρμηκικού οξέος 0,1% χρησιμοποιήθηκε ως κινητή φάση Β, βαθμιδωτή έκλουση (0-17 min, 26,5%A; 17-20 min, 26,5% → 29,5%A; 20-54 λεπτά,

29,5%A, 54-55 min, 29,5% → 26,5%A; 55-60min, 26,5%A); ρυθμός ροής 1.0 mL·min-1; θερμοκρασία στήλης 30 βαθμοί ; Ανιχνευτής συστοιχίας διόδων, μήκος κύματος ανίχνευσης 330 nm. όγκος ένεσης 10μL; Ο θεωρητικός αριθμός πινακίδας που υπολογίζεται με βάση την κορυφή της εχινακοσίδης δεν πρέπει να είναι μικρότερος από 3000[9].

2.1.2 Παρασκευή διαλύματος αναφοράς

Πάρτε την κατάλληλη ποσότητα εχινακοσίδης, ζυγίστε με ακρίβεια 9,65 mg, τοποθετήστε την σε ογκομετρική φιάλη 25 mL, προσθέστε 50%

μεθανόλη για να διαλυθεί και να αραιωθεί μέχρι τη χαραγή ως το μητρικό διάλυμα αναφοράς. Μεταφέρετε με ακρίβεια 1 mL μητρικού διαλύματος εχινακοσίδης σε ογκομετρική φιάλη 25 mL, προσθέστε μεθανόλη 50% για αραίωση μέχρι τη χαραγή, ανακινήστε καλά και παρασκευάστε ένα διάλυμα αναφοράς που περιέχει 14,17 ug ανά 1 mL [9].

2.1.3 Παρασκευή του διαλύματος δοκιμής

Πάρτε περίπου 0.5 g σκόνης ξηρής πάστας, αλέστε το σε σκόνη, ζυγίστε το με ακρίβεια, βάλτε το σε ένα καφέ κωνικό μπουκάλι με πώμα, προσθέστε με ακρίβεια 50 mL μεθανόλης 50%, κλείστε το σφιχτά, ανακινήστε το καλά, ζυγίστε το, επεξεργαστείτε το με υπερήχους για 40 λεπτά (ισχύς 250 W, συχνότητα 45 kHz), αφήστε το να κρυώσει, ζυγίστε το ξανά, προσθέστε 50% μεθανόλη για να αναπληρώσετε το χαμένο βάρος, ανακινήστε το καλά, αφήστε το να σταθεί, πάρτε το υπερκείμενο, διηθήστε το και πάρτε το διήθημα.

2.1.4 Παρασκευή διαλύματος αρνητικού δείγματος

Πάρτε περίπου 0,5 g σκόνης ξηρής πάστας της φόρμουλας χωρίς κρασί φαρμακευτικά υλικά Cistanche και παρασκευάστε το αρνητικό διάλυμα δείγματος σύμφωνα με τη μέθοδο στην ενότητα "2.1.3".

2.1.5 Δοκιμή ειδικότητας

Μεταφέρετε με ακρίβεια το διάλυμα δοκιμής, το διάλυμα αναφοράς και το διάλυμα αρνητικού δείγματος αντίστοιχα και μετρήστε σύμφωνα με τις χρωματογραφικές συνθήκες στο "2.1.1". Καταγράψτε το χρωματογράφημα. Τα αποτελέσματα φαίνονται στο Σχήμα 1. Δεν υπάρχει παρεμβολή στο αρνητικό δείγμα. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η μέθοδος έχει καλή εξειδίκευση.

Σχήμα 1 Ειδικό χρωματογράφημα κοκκίων Wenyang Tongbian

2.1.6 Διερεύνηση γραμμικής σχέσης

Πάρτε μια κατάλληλη ποσότητα εχινακοσίδης, ζυγίστε την με ακρίβεια στα 10,11 mg, βάλτε την σε ογκομετρική φιάλη 25 mL, προσθέστε 50% μεθανόλη για να την αραιώσετε σε μια σειρά συγκεντρώσεων διαλύματος αναφοράς και εγχύστε την σύμφωνα με τις χρωματογραφικές συνθήκες υπό «2.1 .1" για τον προσδιορισμό της τιμής του εμβαδού κορυφής της εχινακοσίδης. Σχεδιάστε μια τυπική καμπύλη, με αναφορά της ποσότητας έγχυσης της εχινακοσίδης ως οριζόντιο άξονα (ug, X) και την ακέραια τιμή της περιοχής κορυφής ως κατακόρυφο άξονα (Y) και εκτελέστε γραμμική παλινδρόμηση.

Η εξίσωση παλινδρόμησης είναι Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η ακέραια τιμή του εμβαδού κορυφής της ποσότητας έγχυσης εχινακοσίδης βρίσκεται σε καλή γραμμική σχέση μεταξύ 1,4850 και 371,2392 ug.

2.1.7 Δοκιμή ακριβείας

Αναρροφήστε με ακρίβεια 10 μL του διαλύματος αναφοράς (συγκέντρωση μάζας 37,12 ug·mL- 1) κάτω από το "2.1.6", εγχύστε 6 φορές, καταγράψτε την τιμή της περιοχής κορυφής της εχινακοσίδης αντίστοιχα και υπολογίστε την τιμή RSD σε 1,1%, υποδεικνύοντας ότι το όργανο έχει καλή ακρίβεια.

2.1.8 Δοκιμή επαναληψιμότητας

Πάρτε την ίδια ξηρή πάστα, αλέστε την σε σκόνη, ζυγίστε με ακρίβεια 6 μερίδες, καθεμία από τις οποίες είναι περίπου 0,5 g, και τοποθετήστε τις σε ένα καφέ κωνικό μπουκάλι με πώμα. Εξαγωγή σύμφωνα με τη μέθοδο στο "2.1.3", προσδιορίστε το περιεχόμενο και υπολογίστε. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η μέση περιεκτικότητα σε εχινακοσίδη στο δείγμα είναι 1,46 mg·g－ 1 και η τιμή RSD είναι 2,7%, υποδεικνύοντας ότι η επαναληψιμότητα αυτής της μεθόδου είναι καλή.

2.1.9 Δοκιμή σταθερότητας

Πάρτε το ίδιο διάλυμα δείγματος, τραβήξτε με ακρίβεια 10 μL και εγχύστε το εντός 0, 2, 4, 8, 12, 18 και 24 ωρών αντίστοιχα. Η τιμή RSD της περιοχής κορυφής είναι 0,71%, υποδεικνύοντας ότι το διάλυμα δείγματος έχει καλή σταθερότητα εντός 24 ωρών.

2.1.10 Δοκιμή ανάκτησης δειγμάτων

Ζυγίστε με ακρίβεια 6 μερίδες της ίδιας παρτίδας δειγμάτων δοκιμής, 0, 24 g το καθένα, και τοποθετήστε τα σε ένα καφέ κωνικό μπουκάλι με πώμα. Σύμφωνα με την αναλογία μάζας 1:1 των συστατικών στο δείγμα δοκιμής, προσθέστε με ακρίβεια 0,9 mL της ουσίας αναφοράς εχινακοσίδης (η συγκέντρωση μάζας είναι 371,24 ug·mL - 1) στο "2.1.6", παρασκευάζεται το διάλυμα δοκιμής σύμφωνα με τη μέθοδο του σημείου «2.1.3», προσδιορίζεται η χρωματογραφική περιοχή κορυφής της εχινακοσίδης και υπολογίζεται η περιεκτικότητα. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι ο μέσος ρυθμός ανάκτησης της εχινακοσίδης είναι 101,09%, και η τιμή RSD είναι 1,6%.

2.2 Πειραματικό σχέδιο και δείκτες αξιολόγησης

Η ποσότητα του νερού που προστέθηκε (Α), ο χρόνος εκχύλισης (Β) και ο αριθμός των εκχυλισμάτων (D) επιλέχθηκαν ως παράγοντες που θα διερευνηθούν. Ορίστηκαν τρία επίπεδα παραγόντων σύμφωνα με τα αποτελέσματα της προηγούμενης έρευνας ενός παράγοντα, βλέπε Πίνακα 1. Ο ορθογώνιος πίνακας δοκιμής L9 (34) χρησιμοποιήθηκε στο πείραμα, βλέπε Πίνακα 2. Η δοκιμή χρησιμοποίησε την απόδοση της πάστας και την περιεκτικότητα σε εχινακοσίδη ως δείκτες αξιολόγησης για τη διερεύνηση της βέλτιστης διαδικασίας άντλησης νερού.

Καρτέλα 1 Συντελεστής και επίπεδο της ορθογώνιας δοκιμής

2.2.1 Ορθογώνια δοκιμή

Σύμφωνα με την αναλογία συνταγογράφησης, ζυγίστε 18 μερίδες από κάθε φαρμακευτική γεύση, 55 g το καθένα, και εκτελέστε εκχύλιση με αφέψημα με νερό σύμφωνα με το σχήμα ορθογωνικής σχεδίασης στον Πίνακα 2. Κάθε ομάδα έχει 2 παράλληλες μερίδες. Το αφέψημα διηθείται μέσω 80-πλέγματος, το διήθημα συνδυάζεται, ψύχεται, μετράται ο όγκος του αφεψήματος, 50 mL διοχετεύονται με ακρίβεια σε ένα δοχείο εξάτμισης που έχει ζυγιστεί σταθερά, έχει εξατμιστεί μέχρι να στεγνώσει , και στέγνωσε υπό μειωμένη πίεση στους 60 βαθμούς για να ληφθεί το ορθογώνιο πειραματικό δείγμα ξηρής πάστας. Υπολογίστε την απόδοση της πάστας (απόδοση πάστας=(βάρος ξηρής πάστας × όγκος φαρμακευτικού υγρού) / (50 × βάρος τεμαχίου αφέψημα) × 100%). Σύμφωνα με τις χρωματογραφικές συνθήκες στο "2.1.1" και τη μέθοδο στο "2.1.3", προσδιορίστηκε η ποσότητα εκχύλισης εχινακοσίδης στις 9 ομάδες ορθογώνιων εκχυλισμάτων δοκιμής αντίστοιχα. Ποσότητα εκχύλισης εχινακοσίδης=βάρος ξηρής πάστας × περιεκτικότητα σε εχινακοσίδη / κρασί βάρος τεμαχίου αφέψημα σιτανσέ. Ολοκληρωμένη βαθμολογία=περιεκτικότητα εχινακοσίδης ÷ μέγιστη περιεκτικότητα × 0,5 × 100% + απόδοση πάστας ÷ μέγιστη απόδοση πάστας × 0,5 × 100% [10]. Τα αποτελέσματα φαίνονται στον Πίνακα 2.

Όπως φαίνεται στον Πίνακα 3, λαμβάνοντας ως δείκτες αξιολόγησης τη συνολική βαθμολογία απόδοσης πάστας και περιεκτικότητας σε εχινακοσίδη, η τιμή του εύρους R στον πίνακα δείχνει ότι οι πρωτεύουσες και δευτερεύουσες επιδράσεις κάθε παράγοντα είναι D > B > A. Τα αποτελέσματα της ανάλυσης διακύμανσης δείχνουν ότι ο παράγοντας D (χρόνοι αφεψήματος) είναι στατιστικά σημαντικός (P < 0.05) και έχει επιλεγεί το επίπεδο D3. ο παράγοντας Α (προσθήκη νερού) και ο παράγοντας Β (χρόνος αφεψήματος) δεν είναι στατιστικά σημαντικοί (P > 0,05). Λαμβάνοντας υπόψη ότι το ποσοστό απορρόφησης νερού των φαρμακευτικών υλικών σε αυτό το παρασκεύασμα είναι σχετικά υψηλό (155%) και σε συνδυασμό με παράγοντες όπως οι πραγματικές ανάγκες παραγωγής, οι βέλτιστες συνθήκες εκχύλισης επιλέγονται ως A2B1D3, δηλαδή προσθήκη 10 φορές νερού, αφέψημα 3 φορές, κάθε φορά για 1 ώρα.