Μέρος Ι.: Νανοσωματίδια οξειδίου του ψευδαργύρου Βελιορικός διμεθυλονιτροζαμίνης-επαγόμενη νεφρική τοξικότητα σε αρουραίους

Επικοινωνία: Τίνα Xiang Ηλεκτρονικό ταχυδρομείο:tina.xiang@wecistanche.com

Αφηρημένος

Διμεθυλνιτροζαμίνη(DMN) είναι καθιερωμένος καρκινογόνος παράγοντας. Είναι τοξικό για πολλά όργανα, δηλαδή, τοσυκώτι,νεφρός, τους πνεύμονες και το ανοσοποιητικό σύστημα. Αρκετά φάρμακα έχουν χρησιμοποιηθεί στο παρελθόν για να διαμορφώσουν την τοξικότητά του χρησιμοποιώντας μοντέλα πειραματόζωων. Η παρούσα μελέτη σχεδιάστηκε για να διερευνήσει την επίδραση των νανοσωματιδίων οξειδίου του ψευδαργύρου (ZnONPs) στη νεφρική τοξικότητα που προκαλείται από το DMN σε εργαστηριακούς αρουραίους. Δεδομένου ότι οι οξειδωτικοί μηχανισμοί εμπλέκονται κυρίως στην τοξικότητά του, η προτεινόμενη μελέτη επικεντρώνεται στη βελτίωση τηςοξειδωτικό στρεςαπάντηση από ZnONPs, εάν υπάρχει. Τα παρόντα αποτελέσματα δείχνουν ότι η χορήγηση ZnONPs (50 mg/kg σωματικού βάρους/αρουραίου) σε DMN(2 ul/100 g σωματικού βάρους/αρουραίου)-επεξεργασμένων αρουραίων μειώνει τη συγκέντρωση της μαλονοαλδεΰδης, H, O και NO στους νεφρούς. Ωστόσο, η μειωμένη συγκέντρωση γλουταθειόνης (GSH) αυξήθηκε μετά τη θεραπεία με ZnONP. Τα αποτελέσματα σχετικά με τη γλουταθειόνη S-τρανσφεράση και υπεροξειδάση γλουταθειόνης ευνόησαν τα αντιοξειδωτικά της αποτελέσματα. Αυτά τα αποτελέσματα υποστηρίζονται από την ανάκτηση της οξειδωτικής βλάβης του DNA και των λιγότερο έντονων ιστοπαθολογικών αλλαγών στο νεφρό. Υποτίθεται ότι τα ZnONPs μπορεί να είναι τοξικά για τον νεφρικό ιστό. Ωστόσο, το ισχυρό θεραπευτικό/αντιοξειδωτικό δυναμικό τους βοηθά στη βελτίωση του DMN που προκαλείται από DMNνεφρική τοξικότητασε αρουραίους.

Λέξεις κλειδιά:Διμεθυλνιτροζαμίνη. Νεφρός. Νανοσωματίδια οξειδίου του ψευδαργύρου· Οξειδωτικό στρες. Ιστοπαθολογία

Συντομογραφίες

DMN: Διμεθυλνιτροζαμίνη

ZnONPs: Νανοσωματίδια οξειδίου του ψευδαργύρου

ΝΕΔΑ: Διυδροχλωρική Ν-(1-ναφθυλο)αιθυλενοδιαμίνη

IP: Ενδοπεριτοναϊκά

Zn-MT: Μεταλλοθειονεΐνη ψευδαργύρου

Η2Ο2: Υπεροξείδιο του υδρογόνου

ΟΧΙ: Μονοξείδιο του αζώτου

MDA: Μαλονδαδιαλδεΰδη

GSH: Μειωμένη γλουταθειόνη

ROS: Αντιδραστικά είδη οξυγόνου

CDNB: 1-χλωρο-2,4-δινιτροβενζόλιο

8-OHdG: 8-υδροξυ-2'-δεοξυγουανοσίνη

Μ.Χ.: Αδενοκαρκίνωμα

CO: Φλοιός

ΝΔ: Πυρηνικός εκφυλισμός

BR: Περίγραμμα πινέλου

ΕΔ: Επιθηλιακή βλάβη/εκφυλισμός

GL: Σπειράμα

MA: Μιτωτική δραστηριότητα

ΜΕΔ: Νεόπλασμα

NPR: Διάδοση των πυρηνικών όπλων

π.Χ.: Διπύρηνα κύτταρα

EP: Επιθηλιακή επένδυση

PCT: Εγγύς σπειροειδές σωληνάριο

GL: Σπειράματα

ΤΕΜ: Ηλεκτρονικό μικροσκόπιο μετάδοσης

SEM: Ηλεκτρονικό μικροσκόπιο σάρωσης

XRD: Περίθλαση ακτίνων Χ

JSPDS: Η μεικτή επιτροπή για τα πρότυπα περίθλασης σε σκόνη

EDAX: Ακτίνες Χ που διασκορπίζουν την ενέργεια

Κάντε κλικ εδώ για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα εφέ cistanche

Εισαγωγή

Η διμεθυλνιτροζαμίνη (DMN) είναι ένα καθιερωμένο καρκινογόνο [2]. Έχει επιβεβαιωθεί ότι η προνομιακή θέση του βιομετασχηματισμού του είναι το ήπαρ. Ωστόσο, τα όργανα, δηλαδή, τονεφρός, και οι πνεύμονες, συμμετέχουν επίσης στο μεταβολισμό του, αν και σε μικρό βαθμό [25]. Οι Magee και Barnes [29] για πρώτη φορά έδειξαν ότι μία εφάπαξ δόση DMN θα μπορούσε να προκαλέσει νεφρικούς όγκους. Μεταγενέστερες μελέτες απέδωσαν καρκίνο του νεφρού που προκαλείται από DMN σε αντιδραστικά είδη οξυγόνου (ROS) καιοξειδωτικό στρες[3, 32].

Ορισμένες μελέτες έγιναν για τη διαμόρφωση της τοξικότητας του DMN σε κατάλληλα ζωικά μοντέλα χρησιμοποιώντας διάφορα φάρμακα και αντιοξειδωτικά. Οι Hamza et al. [20] μελέτησαν τα θεραπευτικά αποτελέσματα του α-λιποϊκού οξέος (ALA) έναντι του DMN που προκαλείται από DMNνεφρική τοξικότητασε αρουραίους. Οι Rana και Kumar [40] ανέφεραν ότι το κάδμιο και η μεταλλοθειονεΐνη ψευδαργύρου ανέστειλαν και οι δύο την υπεροξείδωση των λιπιδίων (LPO) στα παιδιά των αρουραίων που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με DMN. Ήταν γνωστό νωρίτερα ότι ο μεταλλικός ψευδάργυρος παίζει σημαντικό ρόλο ως μεταγραφικός παράγοντας και αντιοξειδωτική άμυνα στην πρόληψη της τοξικότητας του DMN. Τα κανάλια ψευδαργύρου δημιουργούν μια ισορροπία μεταξύ της επιβίωσης των κυττάρων και του κυτταρικού θανάτου μέσω του ελέγχου των ελεύθερων και ενδοκυτταρικών κινήσεων ψευδαργύρου [8]. Ως εκ τούτου, ο ψευδάργυρος στο παρελθόν θεωρήθηκε ως κατάλληλος παράγοντας για την πρόληψη της τοξικότητας αρκετών ξενοβιοτικών, δηλαδή τετραχλωράνθρακα |41, αιθυλικής αλκοόλης [62] και διχλωροδιφαινυλτριχλωροαιθανίου [12].

Οι πρόσφατες εξελίξεις στη νανοϊατρική έχουν χρησιμοποιήσει νανοσωματίδια στη θεραπεία και τη διάγνωση αρκετών ασθενειών. Σε αυτό το πλαίσιο, αρκετά νανοσωματίδια συντίθενται και δοκιμάζονται για την τοξικότητά τους [22]. Τα νανοσωματίδια οξειδίου του ψευδαργύρου (ZnONPs) έχουν θεωρηθεί ισχυροί θεραπευτικοί παράγοντες λόγω της βιοδιαθεσιμότητας, της βιοσυμβατότητας και της υψηλής διαλυτότητας Διαθέτει την ικανότητα να ρυθμίζει τον κυτταρικό κύκλο και την κυτταρική ομοιόσταση [56]. Η Υπηρεσία Τροφίμων και Φαρμάκων (FDA) έχει επίσης εγκρίνει νανοσωματίδια οξειδίου του ψευδαργύρου για αντικαρκινική θεραπεία[47. Μπορεί να προκαλέσει επιλεκτική τοξικότητα προς τα καρκινικά κύτταρα με ανισορροπία της εξαρτώμενης από ψευδάργυρο πρωτεϊνικής δραστηριότητας (Vinderall and Mitjans, 2015). Οι Rasmussen et al. [44] υπέθεσαν ότι τα ZnONPs μπορούν να σκοτώσουν τα καρκινικά κύτταρα μέσω της επαγωγής τουοξειδωτικό στρες. Έτσι, τα ZnONPs έχουν αναδειχθεί ως πλατφόρμες νανοθηροστασίας έναντι αρκετών ασθενειών, ιδίως εκείνων που προκαλούνται από το οξειδωτικό στρες. Ωστόσο, αρκετά εργαστήρια έχουν δημοσιεύσει εκθέσεις που δείχνουν την τοξικότητά τους σε συγκεκριμένα όργανα και κυτταρικές σειρές [11,26].

Ως εκ τούτου, φαίνεται να υπάρχει επαρκής λόγος για την περαιτέρω εξέταση των αντιοξειδωτικών επιδράσεων των ZnONPs που εκδηλώνονται στην κατάλληλη πειραματική διάταξη. Με αυτή την προοπτική, μια μελέτη σχετικά με τις προστατευτικές επιδράσεις των ZnONPs έναντι της ηπατοτοξικότητας που προκαλείται από DMN σε αρσενικούς αρουραίους Wistar έγινε πρόσφατα στο εργαστήριό μας |43]. Για να επεκταθεί αυτή η μελέτη, καταβλήθηκε προσπάθεια να εκτιμηθούν οι προστατευτικές επιδράσεις των ZnONPs, εάν υπάρχουν, στη νεφρική τοξικότητα που προκαλείται από DMN σε αρουραίους. Περαιτέρω, η νεφρική τοξικότητα των ZnONPs έχει επίσης μελετηθεί ταυτόχρονα.

Υλικά και Μέθοδοι

Χημικές ουσίες και αντιδραστήρια

Τα νανοσωματίδια οξειδίου του ψευδαργύρου προμηθεύτηκαν από τη Sigma Chemical Co. Missouri (ΗΠΑ). Σύμφωνα με τον κατασκευαστή, τα νανοσωματίδια περιείχαν περίπου 80% βάση ψευδαργύρου, 100% καθαρότητα και<100 nm="" size="" with="" a="" surface="" area="" of="" 15-25="">

Διμεθυλνιτροζαμίνη, θειοβαρβιτουρικό οξύ, 5'-5'-διθειοβισ-2-νιτροβενζοϊκό οξύ,1-χλωρο-2,4-δινιτροβενζόλιο, αναγωγάση γλουταθειόνης, γλουταθειόνη και διυδροχλωρική Ν-(1-ναφθυλο)αιθυλενοδιαμίνη (NEDA) αγοράστηκαν επίσης από την Sigma Chemical Co. (ΗΠΑ). Όλα τα άλλα αντιδραστήρια της υψηλότερης καθαρότητας ελήφθησαν από την High Media (Βομβάη).

Χαρακτηρισμός νανοσωματιδίων οξειδίου του ψευδαργύρου

Τα ZnONPs χαρακτηρίστηκαν χρησιμοποιώντας μια σειρά μεθόδων όπως περιγράφηκε προηγουμένως [43]. Εν συντομία, το μέγεθος και το σχήμα των ZnONPs παρατηρήθηκαν μέσω ενός ηλεκτρονικού μικροσκοπίου μετάδοσης στο Εξελιγμένο Αναλυτικό Κέντρο Οργάνων, Πανεπιστήμιο Punjab, Chandigarh (Ινδία). Η σάρωση ηλεκτρονικών μικροσκοπικών παρατηρήσεων και η ανάλυση ακτίνων Χ διασποράς ενέργειας (EDAX) έγιναν στο Τμήμα Φυσικής του Πανεπιστημίου Choudhary Charan Singh, Meerut (Ινδία). Αναλύσεις μεγέθους, κατανομής και δυναμικού ζήτα και ανάλυση XRD των ZnONPs πραγματοποιήθηκαν στο Ινδικό Ινστιτούτο Τεχνολογίας, Roorkee (Ινδία).

Διατήρηση των ζώων και πειραματικό πρωτόκολλο

Ζητήθηκε η προηγούμενη έγκριση της Θεσμικής Επιτροπής Δεοντολογίας των Ζώων για τη διεξαγωγή των τρεχουσών ερευνών. Πραγματοποιήθηκαν πειράματα σε αρσενικούς αρουραίους Wistar (150±25 g), που προμηθεύτηκαν από τις εγκαταστάσεις ζώων jamia Hamdard του Δελχί. Οι αρουραίοι διατηρήθηκαν υπό κανονικές εργαστηριακές συνθήκες (θερμοκρασία δωματίου,25±5°C, σχετική υγρασία,50+10%, και κύκλος σκοτεινού/φωτός 12 ωρών). Κάθε αρουραίος στεγαζόταν ξεχωριστά σε ένα κλουβί πολυπροπυλενίου και προσέφερε εμπορικά τρόφιμα (Golden Feeds, Delhi) και νερό βρύσης ad libitum.

Μετά τον εγκλιματισμό σε εργαστηριακές συνθήκες για 2 εβδομάδες, οι αρουραίοι χωρίστηκαν τυχαία σε τέσσερις ομάδες, καθεμία από τις οποίες περιείχε πέντε αρουραίους. Σε αρουραίους της ομάδας Α χορηγήθηκε DMN (2μL/100 g σωματικού βάρους) σε αλατούχο ενδοσπεριτοναϊκά(ip) σε κάθε εναλλακτική ημέρα για 15 ημέρες, όπως περιγράφηκε προηγουμένως[43]. Οι αρουραίοι της ομάδας Β έλαβαν θεραπεία ως αρουραίοι της ομάδας Α και στη συνέχεια τους χορηγήθηκε προκαθορισμένο NOEL ZnONPs(50 mg/kg) κάθε εναλλακτική ημέρα για 30 ημέρες. Οι αρουραίοι της ομάδας C έλαβαν θεραπεία με ZnONPs μόνο από τους αρουραίους της ομάδας Β.Οι αρουραίοι της ομάδας Β.Οι αρουραίοι της ομάδας D έλαβαν ένεση (ip)φυσιολογικού ορού (2 μl/100 g σωματικού βάρους) μόνο σε κάθε εναλλακτική ημέρα για 45 ημέρες και υποβλήθηκαν σε θεραπεία ως μάρτυρες.

Μετά από 45 ημέρες, οι αρουραίοι λιμοκτονούσαν όλη τη νύχτα και τα δείγματα ούρων τους συλλέχθηκαν το επόμενο πρωί μέσω μεταβολικών κλωβών. Στη συνέχεια, οι αρουραίοι θυσιάστηκαν με αναισθησία ελαφρού αιθέρα. ΟΝεφράαφαιρέθηκαν προσεκτικά και υποβλήθηκαν σε επεξεργασία για την εκτίμηση των αντιδραστικών ειδών, δηλαδή της μηλονδιαλδεΰδης, του μονοξειδίου του αζώτου και του υπεροξειδίου του υδρογόνου. Το οξειδωτικό στρες προσδιορίστηκε μέσω τυπικών παραμέτρων. δηλαδή, μειωμένη γλουταθειόνη (GSH), γλουταθειόνη S-τρανσφεράση και υπεροξειδάση γλουταθειόνης όπως περιγράφεται παρακάτω.

Κρεατινίνης

Η κρεατινίνη στα δείγματα ούρων προσδιορίστηκε σύμφωνα με τη μέθοδο των Toro και Acker-man(1975), χρησιμοποιώντας ένα εμπορικό κιτ που προμηθεύτηκε από την M/S Span Diagnostics, Surat (Γκουτζαράτ, Ινδία)

Οξειδωτικό Στρες

Μαλλονδιαλδεΰδη (MDA)

Η ΜΔΠ στον νεφρικό ιστό προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας θειοβαρβιτουρικό οξύ ακολουθώντας τη μέθοδο των Jordan και Schenkman, [24]. Η απορρόφηση καταγράφηκε στα 532 nm χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο (Systronics, Ινδία).1,1,3,3-Τετραμεθοξυπροπάνιο(Sigma) χρησιμοποιήθηκε ως πρότυπο. Η πρωτεΐνη προσδιορίστηκε ακολουθώντας τη μέθοδο των Lowry et al.[27]. Η λευκωματίνη ορού βοοειδών (Sigma) χρησιμοποιήθηκε ως πρότυπο.

Υπεροξείδιο του υδρογόνου (H202)

Τα ομογενοποιημένα του νεφρού παρασκευάστηκαν σε σακχαρόζη 0,25 M. Το H2O2 μετρήθηκε χρησιμοποιώντας τη μέθοδο θειοκυανικού σιδήρου όπως περιγράφεται από τους Thurman et al. [52]. Η απορρόφηση καταγράφηκε στα 480 nm χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο (Systronics, Ινδία).

Μονοξείδιο του αζώτου (NO)

Το ΝΟ στα δείγματα νεφρού υπολογίστηκε μέσω του αντιδραστηρίου Griess σύμφωνα με τη μέθοδο που πρότειναν οι Cortas και Wakid [6]. Η απορρόφηση καταγράφηκε στα 550 nm χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο (Systronics, Ινδία).

GSH/Μη πρωτεϊνικά σουλφυδρίλια (NPSH)

Το αντιδραστήριο του Ellman χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό της μειωμένης γλουταθειόνης σε δείγματα νεφρών [10]. Η απορρόφηση καταγράφηκε στα 412 nm χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο (Systronics, Ινδία).

Γλουταθειόνη S-τρανσφεράση

Η S-τρανσφεράση της γλουταθειόνης δοκιμάστηκε χρησιμοποιώντας 1-χλωρο-2,4-δινιτροβενζόλιο (CDNB) που ήταν συζευγμένη με γλουταθειόνη. Η απορρόφηση καταγράφηκε στα 340 nm [19].

Υπεροξειδάση γλουταθειόνης

Το ένζυμο δοκιμάστηκε σύμφωνα με τη μέθοδο paglia και valentine [37]. Η δισουλφιδική γλουταθειόνη (GSSG) που παράγεται ως αποτέλεσμα της υπεροξειδάσης της γλουταθειόνης μειώνεται από μια περίσσεια αναγωγάσης της γλουταθειόνης. Η μετατροπή του GSSG σε GSH παρακολουθήθηκε στα 340 nm χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο (Systronics, Ινδία).

Μεταλλοθειονεΐνη

Η μεταλλοθειονεΐνη σε δείγματα νεφρών αναλύθηκε σύμφωνα με τη μέθοδο κορεσμού καδμίου [36], χρησιμοποιώντας φασματοφωτόμετρο ατομικής απορρόφησης (EC, Hyderabad, Ινδία).

8-υδροξυ-2'-δεοξυγουανοσίνη (8-OHdG)

Το δείγμα ούρων κάθε αρουραίου συλλέχθηκε σε αποστειρωμένο φιαλίδιο μέσω ενός μεταβολικού κλωβού. Τα δείγματα αυτά αποθηκεύτηκαν στους 80°C μέχρι περαιτέρω αναλύσεις. Η ανταγωνιστική τεχνική ELISA χρησιμοποιήθηκε για την εκτίμηση του 8-OHdG χρησιμοποιώντας ένα εμπορικό κιτ που προμηθεύτηκε από το Εργαστήριο Τεχνολογίας Βιοανάλυσης (Κίνα). Η απορρόφηση καταγράφηκε στα 450 nm χρησιμοποιώντας έναν αναγνώστη μικροπλάκας (EC, Hyderabad, Ινδία).

Ιστοπαθολογία

Μικρά κομμάτια νεφρού σταθεροποιήθηκαν σε 10% ουδέτερη φορμαλδεΰδη, αφυδατώθηκαν, καθαρίστηκαν και ενσωματώθηκαν σε κερί παραφίνης. Τμήματα πάχους πέντε μm χρωματίστηκαν με αιματοξυλίνη και ηωσίνη και εξετάστηκαν στο πλαίσιο ερευνητικού μικροσκοπίου (Nikon, Ιαπωνία).

Στατιστική ανάλυση

Το t-test του μαθητή χρησιμοποιήθηκε για να κάνει συγκρίσεις μεταξύ ομάδων μεταξύ διαφορετικών ομάδων. Διαφορές μεταξύ ομάδων με τιμή p<0.05 were="" considered="" significant.="" spss="" software="" version="" 2.0="" was="" used="" for="" inter-group="">

Αποτελέσματα

Χαρακτηρισμός ZnONPs

Το σχήμα, το μέγεθος, η δομή και η ηλεκτρική σύνθεση των ZnONPs προσδιορίστηκαν με την εφαρμογή τυποποιημένων μεθόδων. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η μέση διάμετρος των ZnONPs ήταν<100 nm="" (fig.1a).="" sem="" observations="" showed="" agglomeration="" of="" nps="" (fig.1b).="" the="" electrical="" components="" of="" the="" znonps="" were="" determined="" through="" edax.="" the="" xrd="" pattern="" of="" znonps="" showed="" a="" hexagonal="" structure="" when="" compared="" with="" the="" standard="" data="" (jspds,="" 00-001-1136)="" published="" elsewhere="" [43].="" the="" zeta="" potential="" of="" the="" nanoparticles="" was="" recorded="" to="" be="" 18.9mv(fig.2).="" the="" intensity-weighed="" particle="" size="" distribution="" of="" znonps="" has="" been="" shown="" in="">

Νεφρική λειτουργία

Μια υψηλότερη συγκέντρωση κρεατινίνης ούρων έδειξε νεφρική δυσλειτουργία σε αρουραίους που έλαβαν DMN. Η επακόλουθη θεραπεία των αρουραίων που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με DMN με ZnONPs μείωσε τις τιμές κρεατινίνης. Οι αρουραίοι που έλαβαν μόνο ZnONPs έδειξαν επίσης υψηλότερες τιμές για την κρεατινίνη από τους αρουραίους-μάρτυρες (Πίνακας 1).

MDA, H2O2 και ΟΧΙ

Η μαλονδαδιαλδεΰδη (MDA), είναι το προϊόν της LPO. αυξημένη στο νεφρό των αρουραίων που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία με DMN. Η χορήγηση του ZnONPs σε αρουραίους που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία με DMN μειώνει τη συγκέντρωσή του στον νεφρικό ιστό. Ωστόσο, η συγκέντρωση MDA ήταν υψηλότερη στους νεφρούς των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με ZnONP από τους αρουραίους-μάρτυρες (Πίνακας 1).

Υψηλότερες τιμές για το ΝΟ στον νεφρικό ιστό των αρουραίων που έλαβαν DMN υποστήριξαν τα αποτελέσματα της μηλονδιαλδεΰδης. Η θεραπεία ZnONP που προσφέρθηκε σε αρουραίους που έλαβαν θεραπεία με DMN μείωσε τη συγκέντρωση NO στο νεφρό. Η σύγκριση των τιμών NO που ελήφθησαν στο νεφρό των ZnONPs και των αρουραίων μαρτύρων έδειξε υψηλότερες τιμές αν και ασήμαντες στο νεφρό των αρουραίων που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με ZnONP (Πίνακας 1).

Τα αποτελέσματα για το υπεροξείδιο του υδρογόνου έδειξαν επίσης υψηλότερες τιμές στο νεφρό των αρουραίων που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με DMN. Οι μέσες τιμές H, O, στο νεφρό των αρουραίων που έλαβαν DMN-+ZnONP ήταν χαμηλότερες από τους αρουραίους που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με DMN (Πίνακας 1). Συνολικά, όλα αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν έναν αντιεξοξειδωτικό και αντι-νιτροδωτικό ρόλο των ZnONPs.

GSH

Στους νεφρούς των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με DMN, παρατηρήθηκε σημαντική μείωση των τιμών GSH. Η κατάστασή του βελτιώθηκε μετά τη χορήγηση των ZnONPs σε αρουραίους που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με DMN. Αυτές οι παρατηρήσεις δείχνουν ότι τα ZnONPs προσφέρουν αντιοξειδωτική προστασία έναντι της νεφρικής τοξικότητας που προκαλείται από DMN. Η θεραπεία των αρουραίων με ZnONPs βελτίωσε τη νεφρική συγκέντρωση της GSH (Πίνακας 1).

S-τρανσφεράση της γλουταθειόνης και υπεροξειδάση της γλουταθειόνης

Τα αποτελέσματα σχετικά με την GSH υποστηρίχθηκαν από τις παρατηρήσεις σχετικά με τη γλουταθειόνη S-τρανσφεράση. Η ενζυμική δραστηριότητα μειώθηκε στο νεφρό των αρουραίων που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με DMN, Η συμπλήρωση των ZnONPs σε αρουραίους που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με DMN αποκατέστησε τη δραστηριότητά του κοντά στις τιμές ελέγχου (Πίνακας 1). Η δραστικότητα της υπεροξειδάσης της γλουταθειόνης μειώθηκε επίσης στο νεφρό των αρουραίων που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία με DMN. Ωστόσο, αυξήθηκε στους νεφρούς των αρουραίων που έλαβαν DMN και ZnONP (Πίνακας 1).

8-OHdG

Τα παρόντα αποτελέσματα για τον 8-OHdG έδειξαν μεγαλύτερη οξειδωτική βλάβη του DNA στους νεφρούς των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με DMN. Τα συμπληρώματα ZnONP σε αρουραίους που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία με DMN ανέστειλαν σημαντικά αυτή τη βλάβη σε κάποιο βαθμό. Ωστόσο, η θεραπεία μόνο με ZnONPs θα μπορούσε επίσης να προκαλέσει βλάβη του DNA στους νεφρούς των αρουραίων (Εικ.4).

Μεταλλοθειονεΐνη

Τα αποτελέσματα σχετικά με τη συγκέντρωση της νεφρικής μεταλλοθειονεΐνης (MT) έδειξαν ότι η επαγωγή της MT μειώθηκε στο νεφρό των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με DMN. Ωστόσο, μια αύξηση 16% στην MT καταγράφηκε στους νεφρούς των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με DMN και ZnONP. Τα ZnONPs, από μόνα τους, βρέθηκαν επίσης να είναι ένας ισχυρός επαγωγέας της ΜΤ στους νεφρούς αρουραίων (Πίνακας 1).

Ιστοπαθολογία

Εκτός από τη σπειραματονεφρίτιδα και την εγγύς σωληναριακή νέκρωση, το αδενοκαρκίνωμα στον υποκάψινιο φλοιό καταγράφηκε στο νεφρό των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με DMN. Ο επιθηλιακός εκφυλισμός ήταν εμφανής στα εγγύς καθώς και στα περιφερικά σωληνάρια, πυρήνες διαφορετικών σχημάτων και μεγεθών παρατηρήθηκαν σε όλο τον φλοιό και το μυελό (Εικ. 5Α, Β, Γ).

Οι ιστοπαθολογικές παρατηρήσεις στο νεφρό των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με DMN και ZnONP έδειξαν λιγότερο σοβαρή σπειραματονεφρίτιδα και μειωμένη σωληναριακή νέκρωση. Το αδενοκαρκίνωμα ήταν επιθυμητό. Ωστόσο, νεοπλασματικός σχηματισμός ιστού παρατηρήθηκε σε μερικές θέσεις στον εγγύς φλοιό. Το σωληνοειδές επιθήλιο βρέθηκε να είναι άθικτο. Οι πυρηνικές αλλαγές ήταν ασήμαντες (Εικ.5D, 6Α).

Οι ιστοπαθολογικές παρατηρήσεις στο νεφρό των αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με ZnONP δεν έδειξαν νεφρίτιδα. Τα εγγύς και περιφερικά σωληνάρια ήταν καλά σχηματισμένα χωρίς να δείχνουν κανένα σημάδι επιθηλιακής εκφύλισης. Το περίγραμμα του Πινέλου βρέθηκε να είναι άθικτο. Ωστόσο, παρατηρήθηκε αυξημένη μιτωτική δραστηριότητα στον περιφερικό φλοιό. (Εικ. 6Β, Γ).

Όλες οι παθολογικές αλλαγές που περιγράφηκαν παραπάνω ήθελαν στο νεφρό των αρουραίων ελέγχου. Ο φλοιός των νεφρικών σωληναρίων και ο μυελός δεν παρουσίασαν κανένα σημάδι τραυματισμού. Οι φυσιολογικοί πυρήνες στον φλοιό, καθώς και ο μυελός, παρατηρήθηκαν (Εικ. 6D).

Κάντε κλικ στο σύνδεσμο για να λάβετε μέροςΙΙ. https://www.xjcistanche.com/news/part-zinc-oxide-nanoparticles-ameliorate-di-54495077.html