Πώς η δραστικότητα της ξανθινοοξειδαγωγάσης επηρεάζει τη νεφροπάθεια του αριστολοχικού οξέος

Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Takeo Ishii, Tomohiro Kumagae, Hiromichi Wakui, Shingo Urate, Shohei Tanaka & et al.

Εισαγωγή

Η χρόνια νεφρική νόσος (ΧΝΝ) είναι διαδεδομένη παγκοσμίως και διάφορες σχετικές ασθένειες συμπεριλαμβανομένων των ινωτικών διαταραχών αποτελούν πρόκληση στους ιστούς των νεφρών [1]. Η αύξηση της ΧΝΝ έχει οδηγήσει σε αυξημένο αριθμό ασθενών που υποβάλλονται σε αιμοκάθαρση και σε αυξημένη οικονομική επιβάρυνση, λόγω του κόστους αιμοκάθαρσης [2]. Επομένως, υπάρχει επείγουσα ανάγκη μείωσης και πρόληψης της νεφρικής δυσλειτουργίας, η οποία οδηγεί σε νεφρική ανεπάρκεια τελικού σταδίου. Για να μελετήσουμε τη ΧΝΝ, επικεντρωθήκαμε σε ένα ζωικό μοντέλο τουαριστολοχικό οξύ(ΑΑ) επαγόμενη νεφροπάθεια, η οποία χαρακτηρίζεται από προοδευτική ίνωση. ΑΑ (αριστολοχικό οξύ) η νεφροπάθεια είναι ένα πρόβλημα στη Βαλκανική Χερσόνησο[3,4] και στην Κίνα όπου η νεφρική διαταραχή Mu Tong [5] είναι ενδημική, που οδηγεί σε ίνωση και μη αναστρέψιμη νεφρική ανεπάρκεια τελικού σταδίου [6]. Επιπλέον, ο σύγχρονος τρόπος ζωής οδηγεί σε υπέρταση, διαβήτη, υπερουριχαιμία και ουρική αρθρίτιδα, που δημιουργούν προβλήματα παγκοσμίως. Εκτός από την πρόκληση ουρικής αρθρίτιδας, η υπερουριχαιμία αναφέρθηκε πρόσφατα ως παράγοντας κινδύνου για την ανάπτυξη νεφροσκλήρωσης και υπέρτασης [7-9].

Το ουρικό οξύ προκαλεί το σχηματισμό δικτύων ασθενειών που σχετίζονται με κρυστάλλους μέσω της εναπόθεσης κρυστάλλων ουρικού μονονάτριου [10], που προκύπτουν από το μεταβολισμό των πουρινών. Αυτό προκαλεί βλάβη των ιστών που σχετίζεται με το οξειδωτικό στρες και φλεγμονή των ιστών λόγω της παραγωγής υπεροξειδίων απόοξειδορεδουκτάση ξανθίνης(XOR)[11,12]. XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης) ανακαλύφθηκε πριν από περίπου 100 χρόνια και η μετατροπή της αφυδρογονάσης της ξανθίνης (XDH) και της οξειδάσης της ξανθίνης (XO) ανακαλύφθηκε πριν από περίπου 30 χρόνια [13]. Υπό φυσιολογικές συνθήκες, το XO υπάρχει στο γάλα και παίζει ρόλο στη φυσιολογική αποστείρωση [14,15]. In vivo, το XDH αντιδρά κατά προτίμηση με το NAD, ενώ το XO δεν μπορεί, αλλά παράγει το ανιόν υπεροξειδίου (O2) και το υπεροξείδιο του υδρογόνου (H2O2)[16-19]. Είναι καλά τεκμηριωμένο ότι το O2 και το H2O2 προκαλούν βλάβη στους ιστούς [1]. XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)Η έκφραση ρυθμίζεται προς τα πάνω από την υποβάθμιση του ATP που προκαλείται από ορισμένες παθολογικές καταστάσεις όπως η ισχαιμία, η υποξία και το οξειδωτικό στρες, που προκαλούνται από το κυτταρικό στρες. Κάτω από αυτές τις παθολογικές καταστάσεις, το ATP μεταβολίζεται σε υποξανθίνη, ξανθίνη και ουρικό οξύ μέσω αντιδράσεων που καταλύονται από το XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)[12]. XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)παράγει αντιδραστικά είδη οξυγόνου (ROS) όπως υπεροξείδια, ρίζες υδροξυλίου, υπεροξείδιο του υδρογόνου και υπεροξυνιτρώδη [20]. XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)επάγει επίσης το σύστημα ρενίνης-αγγειοτενσίνης στους ιστούς, το οποίο προάγει τη βλάβη των οργάνων και τη νεφρική σκλήρυνση μέσω της ενεργοποίησης ενός βρόχου θετικής ανάδρασης [12].

ΠΡΟΜΗΘΕΙΑ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΟΣ CISTANCHE

Προηγουμένως αναφέραμε ότι η θεραπεία με XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)Οι αναστολείς μπορούν να βελτιώσουν την επιβίωση των ασθενών που υποβάλλονται σε αιμοκάθαρση [21]. XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)Η αναστολή μπορεί δυνητικά να μειώσει το οξειδωτικό στρες που σχετίζεται με βλάβες οργάνων λόγω νεφρικής ανεπάρκειας. Σε αυτή τη μελέτη, αναλύσαμε το XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)δραστηριότητα στα νεφρά, το πλάσμα, την καρδιά, το ήπαρ και τους μυς σε αυτό το ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)-επαγόμενη νεφροπάθεια.ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)εισέρχεται στα νεφρικά σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα μέσω του καναλιού OAT1 στη βασική μεμβράνη. Σταματά τον κυτταρικό κύκλο και αναγκάζει το κύτταρο να υποστεί απόπτωση, προκαλώντας μη αναστρέψιμη ίνωση. AA(αριστολοχικό οξύ)μπορεί να το κάνει αυτό στα νεφρά χωρίς βλάβη σε άλλα όργανα. Επιλέξαμε ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)επειδή δείχνει τον ινωτικό μηχανισμό στην νεφρική ανεπάρκεια τελικού σταδίου, λειτουργώντας ως μοντέλο οξείας νεφρικής βλάβης που μπορεί να εξελιχθεί σε χρόνια νεφρική νόσο. Ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να διερευνήσει τη συνάφεια του XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)δραστηριότητα όσον αφορά τη βλάβη των ιστών. Το ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)μοντέλο είναι ένα μοντέλο οξείας νεφρικής βλάβης με δυνατότητα εξέλιξης προς χρόνια νεφρική νόσο. Ερευνήσαμε τη βλάβη των ιστών σε αυτό το μοντέλο με βάση το χρονοεξαρτώμενο XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)δραστηριότητα.

Υλικά και μέθοδοι

Των ζώων

Αρσενικά ποντίκια C57BL/6 ηλικίας 12 εβδομάδων (που αγοράστηκαν από τα εργαστήρια Charles River Laboratories) ανατέθηκαν είτε σε AA(αριστολοχικό οξύ)ομάδα θεραπείας ή την ομάδα ελέγχου οχήματος. Κάθε ομάδα χωρίστηκε σε τρεις υποομάδες ανάλογα με το αν θυσιάστηκαν στις 0, 2 ή 4 εβδομάδες μετά την τέταρτη ένεση. AA(αριστολοχικό οξύ)(2,5 mg·kgl) χορηγήθηκε μέσω ενδοπεριτοναϊκής ένεσης μία φορά την εβδομάδα για τέσσερις διαδοχικές εβδομάδες όπως περιγράφηκε προηγουμένως [22]. Αυτό το δοσολογικό σχήμα χρησιμοποιήθηκε για να προκληθεί χρόνια ίνωση με χαμηλό ποσοστό θανάτου. XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)Η δραστηριότητα αξιολογήθηκε μετά από ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)χορήγηση και οι ιστοί εξετάστηκαν για XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)σχετική ζημία. Πριν από τη θυσία (24 ώρες), τα ούρα συλλέχθηκαν σε μεταβολικούς κλωβούς όπως περιγράφηκε προηγουμένως [23](0 ομάδα εβδομάδων n=4, ομάδα 2 εβδομάδων n=3, ομάδα 4 εβδομάδων n{{ 7}},control n=4)(Εικ. 1). Τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε κύκλο φωτός 12 ωρών/12 ωρών στο σκοτάδι στους 25°C και τους χορηγήθηκε μια τυπική δίαιτα (0,3 τοις εκατό NaCl, 3,6 kcal gl, 13,3 τοις εκατό ενέργεια ως λίπος (Oriental MF; Oriental Yeast Co., Ltd, Και πάνω, MA, ΗΠΑ)) με δωρεάν πρόσβαση στο νερό. Αυτή η μελέτη εγκρίθηκε από την Επιτροπή Εργαστηριακών Ζώων του Πανεπιστημίου της Γιοκοχάμα και διεξήχθη σύμφωνα με τις κατευθυντήριες οδηγίες του Υπουργείου Υγείας, Εργασίας και Πρόνοιας για τα ζώα. Η λευκωματίνη ορού μετρήθηκε χρησιμοποιώντας πράσινο βρωμοκρεσόλη (BCG). Η αλβουμίνη ούρων μετρήθηκε χρησιμοποιώντας μια θολωσιμετρική ανοσοδοκιμασία. και η κρεατινίνη ορού και ούρων (Cr) μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας ενζυματικές μεθόδους.

Ανάλυση μεταβολικού κλουβιού

Η ανάλυση του μεταβολικού κλωβού πραγματοποιήθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως (Techniplast, Paola, Μάλτα)[23,24]. Μετρήθηκε η ημερήσια πρόσληψη τροφής και νερού.

Ιστολογική ανάλυση

Η ιστολογική ανάλυση πραγματοποιήθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [25,26]. Ο νεφρός στερεώθηκε με 4 τοις εκατό PFA και ενσωματώθηκε σε παραφίνη. Οι τομές (4 Im πάχος) χρωματίστηκαν με τρίχρωμο Masson. Για ανάλυση των δομών των νεφρών, οι νεφρικές ινωτικές περιοχές μετρήθηκαν ψηφιακά χρησιμοποιώντας μικροσκόπιο φθορισμού (BZ-9000· Keyence, Οσάκα, Ιαπωνία). Η εικόνα που λήφθηκε χρωματίστηκε με κόκκινο/μπλε και εξήχθη το μπλε. Μετά τη δυαδοποίηση λαμβάνοντας υπόψη τη συνολική ισορροπία, το σωληνοειδές επιθήλιο και το μπλε χρωματισμένο τμήμα του αυλού βρέθηκαν να μην είναι ινωτικά και κόπηκαν και εξαιρέθηκαν προκειμένου να ποσοτικοποιηθεί η ινωτική περιοχή.Η περιαγγειακή ίνωση συμπεριλήφθηκε στον ποσοτικό προσδιορισμό. Η σωληναριακή διάμεση βλάβη ορίστηκε ως η αναλογία μεταξύ της λεκιασμένης περιοχής και της περιοχής ολόκληρου του δείγματος. Περαιτέρω, υπολογίσαμε την απλή παλινδρόμηση μεταξύ του XOR ιστού(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)δραστηριότητα και σωληναριακή διάμεση βλάβη (%).

Εικ.1Πειραματική διαδικασία και χρονοδιάγραμμα για το μοντέλο του ποντικιού. Αρσενικά ποντίκια C57BL/6 εκχωρήθηκαν είτε σε μια ομάδα θεραπείας με αριστολοχικό οξύ I(AA) είτε στην ομάδα ελέγχου φορέα. Κάθε ομάδα χωρίστηκε σε τρεις υποομάδες ανάλογα με το αν θυσιάστηκαν στις 0, 2 ή 4 εβδομάδες μετά η τέταρτη ένεση τους.ΑΑ (2,5 mg.kg-1) χορηγήθηκε ενδοπεριτοναϊκά (IP) μία φορά την εβδομάδα για τέσσερις διαδοχικές εβδομάδες. Για 24 ώρες πριν από τη θυσία (Sx), τα ούρα συλλέχθηκαν σε μεταβολικούς κλωβούς όπως περιγράφηκε προηγουμένως. Για την 0-ομάδα AA της εβδομάδας n=4, 2-ομάδα εβδομάδων n= 3,4-ομάδα εβδομάδων n=4 και τον έλεγχο n{{ 15}}. Τα επίπεδα κάθαρσης κρεατινίνης ορού (Ccr) μετρήθηκαν αμέσως μετά την τελευταία ένεση ΑΑ.

Ποσοτική αλυσιδωτή αντίδραση αντίστροφης μεταγραφής-πολυμεράσης σε πραγματικό χρόνο (RT-qPCR)

Το ολικό RNA εκχυλίστηκε από νεφρικούς ιστούς χρησιμοποιώντας ISOGEN (Nippon Gene, Τόκιο, Ιαπωνία) και το cDNA συντέθηκε χρησιμοποιώντας το σύστημα σύνθεσης πρώτου κλώνου SuperScript III (Invitrogen). Η RT-qPCR πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας ένα κύριο μείγμα TaqMan PCR και έναν σχεδιασμένο ανιχνευτή TaqMan (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) σε ένα σύστημα ανίχνευσης ακολουθιών ABIPRISM 7000. Τα επίπεδα έκφρασης των mRNA στόχων κανονικοποιήθηκαν στο 18S rRNA. Οι ανιχνευτές TaqMan που χρησιμοποιήθηκαν για την PCR ήταν οι εξής: μετασχηματιστικός αυξητικός παράγοντας βήτα 1 (TGF βήτα 1), MM01178820_ml;collagenla, Mm00801666_gl; αναστολέας άλφα υπομονάδας παράγοντα 1 που επάγεται από υποξία (HIF{{{ 8}}a), Mm01198376_ml; και αγγειοτενσινογόνο (AGT), Mm00599662_m1;υπόστρωμα αλλαντοτοξίνης C3 σχετικό με RAS 1(RAC 1)Mm01201656_ml;NADPH οξειδάση 1 (NOX 1)Mm00549170_m1; Πρωτεΐνη σύνδεσης CCAAT/ενισχυτή, άλφα C/EBPa Mm00514283_sl; Γάμμα υποδοχέα ενεργοποιημένου με πολλαπλασιαστή υπεροξισώματος (PPARy) Mm00440940_ml;και παράγοντα μεταγραφής δέσμευσης ρυθμιστικού στοιχείου στερόλης 1 (SREBF1), Mm{00550338_m1.

XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)μέτρηση δραστηριότητας

Η δραστηριότητα της οξειδορεδουκτάσης της ξανθίνης μετρήθηκε τρεις φορές (0 εβδομάδα, 2 εβδομάδες, 4 εβδομάδες μετά την ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)χορήγηση)(n=4 σε κάθε ομάδα) στην καρδιά, το ήπαρ, τους νεφρούς και τους μυϊκούς ιστούς σύμφωνα με μια μέθοδο που περιγράφηκε προηγουμένως [27]. Εν συντομία, τα ομογενοποιήματα νεφρού, ήπατος, καρδιάς ή μυός ή πλάσμα προστέθηκαν σε ένα μίγμα [1C2.15N2] ξανθίνης, NAD συν και οξονικού σε ρυθμιστικό διάλυμα Tris (ρΗ 8,5) και επωάστηκαν στους 37°C για 30 λεπτά. Στη συνέχεια, προστέθηκε μεθανόλη που περιέχει [1C2,15N2jUA, και το μίγμα φυγοκεντρήθηκε στα 3000xg στους 4°C για 15 λεπτά. Η ποσότητα [13C2,15N]UA που παρήχθη στο υπερκείμενο μετρήθηκε χρησιμοποιώντας LC/TQMS (Nexera/QTRAP4500, SHIMADZU/SCIEX).XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)Η δραστηριότητα εκφράστηκε ως [1C2,1NJUA nmol/min/mg πρωτεΐνης [27].

Στατιστική ανάλυση

Τα αποτελέσματα της Α.Α(αριστολοχικό οξύ)και οι ομάδες ελέγχου συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας ένα μη ζευγαρωμένο t-test. P-τιμές<0.05 were="" considered="" statistically="" significant.="" all="" analyses="" were="" performed="" using="" prism="" 8="" ver.8.3.1(yokohama,="">

ΦΑΡΜΑΚΕΥΤΙΚΟ ΒΟΤΑΝΟ CISTANCHE ΓΙΑ ΑΣΘΕΝΕΙΣ ΜΕ ΝΕΦΡΕΣ ΠΑΘΗΣΕΙΣ

Αποτελέσματα

Για τα ποντίκια που θυσιάστηκαν 4 εβδομάδες μετά την τέταρτη ένεση, τα σωματικά βάρη στο όχημα και το ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)Οι ομάδες ήταν 31,1 g±0,4 g και 31,1 g±0,4 g, αντίστοιχα, στην πρώτη ένεση. Δύο εβδομάδες αργότερα (μετά την τέταρτη ένεση και κατά τη διάρκεια της περιόδου παρατήρησης), το σωματικό βάρος ήταν 31,9 g±{{10}},4 g στην ομάδα του οχήματος, ενώ έφτασε το ελάχιστο 27,8 g±0,7 g (Π<0.05)in the="">(αριστολοχικό οξύ)ομάδα (Εικ.2). Τα επίπεδα Cr στον ορό μετρήθηκαν αμέσως μετά την τελευταία ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)ένεση. Το επίπεδο Cr ήταν {{0}}.11lg±0.02 mg·dL-1 στην ομάδα του οχήματος και ήταν σημαντικά υψηλότερο στην ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)ομάδες (Π<0.05). the="" levels="" continued="" to="" increase="" in="" the="" experimental="" group="" at="" 2="" and="" 4="" weeks="" after="" the="" end="" of="">(αριστολοχικό οξύ)χορήγηση.Μετά την τελική Α.Α(αριστολοχικό οξύ)χορήγηση, το άζωτο ουρίας αίματος στον ορό (BUN) ήταν 25,7 mg.dL-1±0.2 mg·dL-1 και 53,8 mg·dL-1±5,1 mg·dL -l στο όχημα και Α.Α(αριστολοχικό οξύ)ομάδες, αντίστοιχα (Π<0.05). bun="" continued="" to="" increase="" in="" the="">(αριστολοχικό οξύ)ομάδα κατά τη διάρκεια της περιόδου παρακολούθησης. Πρώτη κάθαρση Cr (Ccr), η οποία μετρήθηκε στο τέλος του AA(αριστολοχικό οξύ)χορήγηση, ήταν 690,1 μLmin-1± 71,4 μLmin-1 στην ομάδα του οχήματος και 183,8 μLmin-'± 12,9 μLmin l στην ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)ομάδες. Τα επίπεδα CCR σε ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)οι ομάδες παρέμειναν χαμηλές στις 2 εβδομάδες και 4 εβδομάδες μετά την ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)διοίκηση (Π<0.05;table 1="" and="">

Εικ.2Το σωματικό βάρος αλλάζει κατά την περίοδο παρατήρησης. Τα ποντίκια παρακολουθήθηκαν 4 εβδομάδες μετά την τελική ένεση ΑΑ. Τα σωματικά βάρη στην ομάδα του φορέα και του αριστολοχικού οξέος Ι(ΑΑ) ήταν 31,1±0,4 g και 31,1 g±0,4, αντίστοιχα, στην πρώτη ένεση. Την εβδομάδα 4, τα σωματικά βάρη της ομάδας ελέγχου ήταν 31,2 ± 0,6 g, αλλά τα σωματικά βάρη της ομάδας ΑΑ ήταν 29,3± 1,4 g. Δύο εβδομάδες αργότερα (κατά τη διάρκεια της περιόδου παρατήρησης), τα σωματικά βάρη ήταν 31,9± {{2{0}}},4 g στην ομάδα οχημάτων, ενώ αυτά στην ομάδα ΑΑ έφτασαν σε ελάχιστο 27,8±0,7 g (P<0.05).0-week group="" n="4,2-week" group="" n="3,4-week" group="" n="4,control" n="4." error="" bars="" represent="">

Αλλαγές στην απέκκριση λευκωματίνης στα ούρα

Η απέκκριση λευκωματίνης στα ούρα μετρήθηκε αμέσως μετά από τέσσερα ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)ενέσεις. Οι τιμές ήταν Cr σε 26.0±0.9 ug·mg1 και 240.8±100.0 ug·mg1 το όχημα και AA(αριστολοχικό οξύ)ομάδες, αντίστοιχα. Στις 4 εβδομάδες, η απέκκριση λευκωματίνης στα ούρα ήταν 18,3±0,6 ug mg1 και 194,3± 59,8 ug·mg1Cr στο όχημα και AA(αριστολοχικό οξύ)ομάδες, αντίστοιχα (Π<0.05;>

Τραπέζι 1.Δραστηριότητες της οξειδορεδουκτάσης της ξανθίνης (XOR) στο μοντέλο νεφροπάθειας με αριστολοχικό οξύ (AA)

XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)δραστηριότητα στο πλάσμα και στους ιστούς

Το XOR πλάσματος(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)Η δραστηριότητα ήταν 73,3± 8.0 pmol·min'mg1 και 77,8±4,2 pmol·min mg στο όχημα και ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)ομάδες, αντίστοιχα, στο τέλος της ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)διαχείριση. Δεν παρατηρήθηκε σημαντική διαφορά στο XOR πλάσματος(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)δραστηριότητες μεταξύ των δύο ομάδων ανά πάσα στιγμή (Εικ. 4Α).

Εικ.3.Αλλαγές στην κρεατινίνη ορού (Cr), την κάθαρση του Cr (Ccr) και την απέκκριση λευκωματίνης στα ούρα. (Α) Τα επίπεδα Cr στον ορό μετρήθηκαν αμέσως μετά την τελευταία ένεση αριστολοχικού οξέος Ι(ΑΑ). Το επίπεδο Cr ήταν {{0}},11 ± 0.02 mg-dL-' στην ομάδα του φορέα και ήταν σημαντικά υψηλότερο στην ομάδα ΑΑ (0,30±0,02 mg .dL-1;Σ<0.05). the="" levels="" continued="" to="" increase="" in="" the="" experimental="" group,="" at="" 2="" weeks="" and="" 4="" weeks="" after="" the="" end="" of="" aa="" administration.(b)="" first="" ccr,="" which="" was="" measured="" at="" the="" end="" of="" the="" aa="" administration,="" was="" 690.1="" ±="" 71.4="" ul-min-'in="" the="" vehicle="" group="" and="" 183.8±="" 12.9="" μl·min-1="" in="" the="" aa="" groups.="" the="" levels="" in="" the="" aa="" groups="" remained="" low="" at="" 2="" weeks="" and="" 4="" weeks="" after="" aa="" administration=""><0.05; table="" 1="" and="" fig.3a,="" 3b).(c)="" urinary="" albumin="" excretion="" was="" measured="" immediately="" after="" four="" aa="" injections.="" the="" values="" were="" 26.0="" ±="" 0.9="" and="" 240.8±="" 100="" ug-mg-1="" cr="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively.="" two="" weeks="" later,="" the="" urinary="" albumin="" excretion="" was="" 18.8±="" 1.7="" ug-mg-1="" and="" 78.3±="" 10.6="" ug.mg-1="" cr="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,=""><0.05).at 4="" weeks,="" the="" urinary="" albumin="" excretion="" was="" 18.3±="" 0.6="" ug·mg-'and="" 194.3±="" 59.8="" ug·mg-'="" cr="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively=""><0.05;fig.3c).0-week group="" n="4," 2-week="" group="" n="3," 4-week="" group="" n="4," control="" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" t-test="" in="" each="" week.="" *represents="">< 0.05,="" and="" **="" represents=""><>

Εκτός από το νεφρό, XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης) οι δραστηριότητες στους εξεταζόμενους ιστούς δεν διέφεραν μεταξύ των ομάδων. Το ΑΑ(αριστολοχικό οξύ) οι ομάδες δεν εμφάνισαν διαφορές στο XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης) δραστηριότητα στην καρδιά, το ήπαρ και τους μυς σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου σε οποιοδήποτε χρονικό σημείο (Εικ.4BD). Ωστόσο, στον νεφρικό ιστό, το XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης) δραστηριότητες στην ΑΑ(αριστολοχικό οξύ) οι ομάδες ήταν αυξημένες κατά την περίοδο παρατήρησης. Την εβδομάδα 0, XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης) οι δραστηριότητες ήταν 254,3± 19,9 pmolmin 1,mg1 και 556,8±52,9 pmol·min1mg1 ΤΡ στο όχημα και ΑΑ(αριστολοχικό οξύ) ομάδες, αντίστοιχα (Π<0.0001).two weeks="" later,="" the="">οξειδορεδουκτάση ξανθίνης) η δραστηριότητα ήταν 231,5±20,4 pmolmin 一mg1 και 430±55,6 pmolmin'mg1TP στο όχημα και ΑΑ(αριστολοχικό οξύ) ομάδες, αντίστοιχα (Π<0.05).at week="" 4,="" the="" activities="" were="" 237.5±9.9="" pmolmin1mg1a="" and="" 410.5="" ±="" 30.5="" pmol:min1mg="" g1="" tp="" in="" the="" vehicle="" and="">αριστολοχικό οξύ) ομάδες, αντίστοιχα (Π<0.05;fig. 4e).="">

Έκφραση δεικτών ίνωσης στον νεφρικό ιστό

Εξετάστηκαν τα επίπεδα έκφρασης mRNA των γονιδίων που σχετίζονται με τη νεφρική ίνωση. Η νεφρική έκφραση του κολλαγόνου 1 (Col1) ήταν αυξημένη στο ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)ομάδες σε σύγκριση με αυτήν στην ομάδα οχημάτων σε όλα τα χρονικά σημεία (Σ<0.05; fig.="" 5a).="" additionally,="" the="" renal="" expression="" of="" transforming="" growth="" factor="" β(tgf-β)="" was="" increased="" in="" the="">(αριστολοχικό οξύ)ομάδες σε σύγκριση με εκείνη στην ομάδα οχημάτων στο τέλος της ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)χορήγηση και μετά από 2 εβδομάδες (Π<0.05), and="" showed="" a="" tendency="" to="" increase="" after="" 4="" weeks="" (fig.="">

Εικ.4.Δραστικότητα οξειδορεδουκτάσης ξανθίνης στο πλάσμα και τους ιστούς. (Α) Η δραστικότητα της ξανθινοξειδορεδουκτάσης (XOR) στο πλάσμα ήταν 73,3± 8.0 pmol·min-1.mg-1και 77,8± 4,2 pmol- min-1.mg-1 στην ομάδα του φορέα και του αριστολοχικού οξέος I(AA), αντίστοιχα, στο τέλος της χορήγησης ΑΑ. Δεν παρατηρήθηκε σημαντική διαφορά στις δραστηριότητες XOR πλάσματος μεταξύ των δύο ομάδων σε οποιοδήποτε χρονικό σημείο. (BD) Εκτός από το νεφρό, οι δραστηριότητες XOR στους εξεταζόμενους ιστούς δεν διέφεραν μεταξύ των ομάδων. Οι ομάδες ΑΑ δεν παρουσίασαν διαφορές στη δραστηριότητα XOR στην καρδιά, το ήπαρ και τους μυς σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου σε οποιοδήποτε χρονικό σημείο. (Ε) Ωστόσο, στον νεφρικό ιστό, οι δραστηριότητες XOR στις ομάδες ΑΑ ήταν αυξημένες κατά τη διάρκεια της παρατήρησης περίοδος. Την εβδομάδα 0, οι δραστηριότητες XOR ήταν 254,3± 19,9 pmol.min-1.mg-1 και 556,8± 52,9 pmol·min-1.mg-1 TP στις ομάδες οχήματος και ΑΑ, αντίστοιχα (Π<0.0001). two="" weeks="" later,="" xor="" activity="" was="" 231.5±="" 20.4="" pmol-min-1.mg-1="" and="" 430±="" 55.6="" pmol-min-1.mg-1="" tp="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively=""><0.05). at="" week="" 4,="" the="" activity="" was="" 237.5±="" 9.9="" pmol.min-1.mg-1="" and="" 410.5="" ±="" 30.5="" pmol-min-1.mg-1="" tp="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="">< 0.05).="" o-week="" group="" n="4," 2-week="" group="" n="3," 4-week="" group="" n="4," control="" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" t-test="" in="" each="" week.="" *represents="">< 0.05,="" and="" **represents=""><>

Έκφραση του επαγόμενου από την υποξία παράγοντα (HIF-1a) στον νεφρικό ιστό

Εξετάστηκαν επίσης τα επίπεδα έκφρασης mRNA του HIF-1a. Η νεφρική έκφραση του HIF-1o ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)ομάδες σε σύγκριση με εκείνη στην ομάδα οχημάτων (Σ<0.001) at="" the="" end="" of="">(αριστολοχικό οξύ)χορήγηση, στις 2 εβδομάδες και 4 εβδομάδες (Π<>

Έκφραση των συστατικών NADPH στον νεφρικό ιστό

Έκφραση γονιδίων RACI και NOXI στο ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)η ομάδα ήταν συνεχώς ανυψωμένη σε σύγκριση με την ομάδα του οχήματος (P<>

Έκφραση δεικτών λιπογένεσης στον νεφρικό ιστό

Δείκτες λιπογένεσης έκφραση γονιδίου C/EBP και PPAR και γονιδιακή έκφραση δείκτη λιπογένεσης SREBF1 στο ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)η ομάδα ήταν συνεχώς ανυψωμένη σε σύγκριση με την ομάδα του οχήματος (Π<0.05;fig. 5f,="">

Εικ.5.Γονιδιακή έκφραση στον νεφρικό ιστό. (Α) Εξετάστηκαν τα επίπεδα mRNA των γονιδίων που σχετίζονται με τη νεφρική ίνωση. Η νεφρική έκφραση του κολλαγόνου-1 (Col-1) ήταν αυξημένη στις ομάδες του αριστολοχικού οξέος I(AA) σε σύγκριση με την ομάδα φορέα σε όλα τα χρονικά σημεία (P<0.05).(b)additionally, renal="" expression="" of="" transforming="" growth="" factor-β(tgf-b)was="" increased="" in="" the="" aa="" groups="" compared="" to="" the="" vehicle="" group="" at="" the="" end="" of="" aa="" administration="" and="" 2="" weeks="" later=""><0.05), and="" showed="" a="" tendency="" to="" increase="" after="" 4="" weeks.="" (c)="" the="" mrna="" levels="" of="" hypoxia-inducible="" factor-1="" alpha="" (hif-1α)="" were="" examined.="" renal="" expression="" of="" hif-1a="" was="" significantly="" higher="" in="" the="" aa="" groups="" compared="" with="" the="" vehicle="" group="">< 0.001)="" at="" the="" end="" of="" aa="" administration,at="" 2="" weeks,="" and="" 4="">< 0.05).(d,="" e)the="" mrna="" levels="" of="" nadph="" components="" were="" examined.="" renal="" expression="" of="" (rac1)="" and="" (nox1)was="" elevated="" in="" the="" aristolochic="" acid="" i(aa)="" groups="" compared="" to="" the="" vehicle="" group=""><0.05).(f-h) the="" mrna="" levels="" of="" adipogenesis="" and="" lipogenesis="" markers="" were="" examined.="" renal="" expression="" of="" (c/ebpa),="" (ppary),="" and="" (srebf1)was="" elevated="" in="" the="" aristolochic="" acid="" i(aa)="" aroups="" compared="" to="" the="" vehicle=""><0.05). 0-week="" groun="" n="4" 2-week="" group="" n="3," 4-week="" group="" n="4," control="" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" ttest="" in="" each="" week.*="" represents="" p="" <="" 0.05,="" and="" **represents=""><>

Ίνωση νεφρικού ιστού

Οι περιοχές διάμεσης νεφρικής ίνωσης ήταν 1,8±0,7 τοις εκατό και 9,1± 1,9 τοις εκατό (Ρ<0.05)in the="" vehicle="" and="">(αριστολοχικό οξύ)ομάδες, αντίστοιχα, στο τέλος της Α.Α(αριστολοχικό οξύ)διαχείριση. Ένα ευρύ φάσμα σωληναριακών επιθηλιακών κυττάρων χάθηκε μέσω απόπτωσης. Δύο εβδομάδες αργότερα, οι ινωτικές περιοχές ήταν 2,1 ±0,4 τοις εκατό και 8,1±4,7 τοις εκατό στο όχημα και την ΑΑ(αριστολοχικό οξύ)ομάδες, αντίστοιχα. Στις 4 εβδομάδες, οι περιοχές διάμεσης νεφρικής ίνωσης ήταν 3,6±1,1 τοις εκατό και 15,3±2,6 τοις εκατό (Ρ<0.05)in the="" vehicle="" and="">(αριστολοχικό οξύ)ομάδες, αντίστοιχα. Η σωληναριακή αποπτωτική περιοχή στις Ο εβδομάδες αντικαταστάθηκε με την ινωτική περιοχή μέσω αναδιαμόρφωσης ιστού (Εικ.6Α, Β). Η μικροσκοπική αξιολόγηση της χρώσης τριχρωμίου Masson έδειξε ότι ο ιστός του νεφρού XOR(οξειδορεδουκτάση ξανθίνης)Η δραστηριότητα συσχετίστηκε σημαντικά με τη διάμεση ινωτική περιοχή (%) (Σ<0.0012,r²=>

Εικ.6.Ίνωση νεφρικού ιστού.(Α, Β) Οι περιοχές διάμεσης νεφρικής ίνωσης ήταν 1,8± 0,7 τοις εκατό και 9,1 ± 1,9 τοις εκατό (Ρ<0.05) in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively,at="" the="" end="" of="" aa="" administration.="" two="" weeks="" later,="" the="" areas="" were="" 2.1+0.4%="" and="" 8.1="" +="" 4.7%="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively.="" at="" 4="" weeks,="" the="" interstitial="" renal="" fibrosis="" areas="" were="" 3.6±="" 1.1="" and="" 15.3=""><0.05) in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively,="" scale="" bar="" indicated="" 200="" um,(c)="" kidney="" tissue="" xor="" activity="" was="" significantly="" correlated="" with="" interstitial="" fibrotic="" area(%)using="" microscopic="" evaluation="" of="" masson="" trichrome="" stain="" （p="0.0012" 产="0.40）." this="" suggests="" that="" xor="" activity="" contributed="" to="" tissue="" damage="" leading="" to="" end-stage="" renal="" disease.="" 0-week="" group="" n="4," 2-week="" group="" n="3,4-week" group="" n="4,control" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" t-test="" in="" each="" week.*represents="">< 0.05,="" and="" **="" represents=""><>

CISTANCHE

Σημείωση: Το παραδοσιακό κινέζικο φαρμακευτικό βότανο cistanche (γνωστό και ως «βότανο δράκου» και «τζίνσενγκ της ερήμου»), αναπτύσσεται μόνο στις άνυδρες και ζεστές ερήμους. Ως ένα από τα εννέα αθάνατα βότανα, το Cistanche (cistanche tubulosa/cistanche deserticola/desertliving cistanche/cistanche salsa) περιέχει πλούσια αποτελεσματικά συστατικά όπως εχινακοσίδη, ακτεοσίδη, ολικές φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες, φλαβονοειδή, πολυσακχαρίτες κ.λπ. Θρεπτικό βότανο και υλικό διατροφής για την ανοσία των ανθρώπων, τα εσωτερικά όργανα, τα εγκεφαλικά κύτταρα και τους νευρώνες κ.λπ. βελτίωση της σεξουαλικής λειτουργίας και της νεφρικής λειτουργίας. κατά της κούρασης? αντι γήρανση; βελτίωση της μνήμης? κατά της νόσου του Πάρκινσον? κατά της νόσου του Alzheimer? αντιοξείδωση? ευκολία-δυσκοιλιότητα? αντιφλεγμονώδη? προώθηση της ανάπτυξης των οστών, λεύκανση του δέρματος. προστατεύει το συκώτι? και τα λοιπά.

ΚΑΝΤΕ ΚΛΙΚ ΕΔΩ ΓΙΑ ΜΕΡΟΣ Ⅱ

εχινακοσίδη