Μέρος 2 Ανίχνευση φαρμάκων Cistanches Herba (Rou Cong Rong) με χρήση ειδικών ειδών νουκλεοτιδικών υπογραφών

Αναζητώντας τις υπογραφές νουκλεοτιδίων που αναπτύχθηκαν σε αυτή τη μελέτη, βρήκαμε ότι 15 από τα 31 κινεζικά φάρμακα με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας που φέρουν ετικέτα ότι περιέχουνCistanches HerbaΑντίθετα, περιείχε νοθεύματα, συμπεριλαμβανομένων οκτώ πλαστών συστατικών και επτά νοθευτών (Πίνακας 2). Για παράδειγμα, έξι παρτίδες αντικαταστάθηκαν με Cy. songaricum, συμπεριλαμβανομένων τριών παρτίδων χαπιών Shihu Yeguang, μίας παρτίδας χαπιών Kangguzhi Zengsheng, μίας παρτίδας καψουλών Sanbao και μίας παρτίδας σωματιδίων Wenweishu.

Επιπλέον, διαφορετικές παρτίδες από τον ίδιο κατασκευαστή παρήγαγαν κάπως διαφορετικά αποτελέσματα. Για παράδειγμα, μεταξύ τριών παρτίδων από έναν κατασκευαστή (ZCY16, ZCY69 και ZCY71), μία παρτίδα περιείχε ένα μείγμα Ci.deserticolaκαι Cy. songaricum, μία παρτίδα περιελάμβανε ένα μείγμα απόCi. deserticolaκαιCi. σωληνοειδήςκαι περιείχε μόνο μία παρτίδαCi. σωληνοειδής. Δύο παρτίδες από άλλο κατασκευαστή (ZCY44 και ZCY70) διέφεραν επίσης: μία παρτίδα περιείχε Cy. songaricum, ενώ η άλλη παρτίδα περιείχεCi. deserticolaκαιCi. σωληνοειδής.

Cistanches Herbaανιχνεύθηκε σε 23 από τα 31 φάρμακα με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας της Κίνας που δοκιμάστηκαν (Πίνακας 2) και μόνο 16 δείγματα ήταν αυθεντικά, π.χ. χωρίς νοθευτές ή πλαστά συστατικά.Ci. σωληνοειδήςανιχνεύθηκε σε 16 παρτίδες κινεζικών φαρμάκων με διπλώματα ευρεσιτεχνίας και ο Ci. deserticola ανιχνεύθηκε σε 10 παρτίδες. Το O. coerulescens δεν ανιχνεύθηκε σε κανένα από τα προϊόντα (Πίνακας 2).

Το Cistanche deserticola έχει πολλά αποτελέσματα, κάντε κλικ εδώ για να μάθετε περισσότερα

ΣΥΖΗΤΗΣΗ

Η αναγκαιότητα ανάπτυξης μιας νέας μεθόδου για την παρακολούθηση των εμπορικά διαθέσιμων φαρμακευτικών προϊόντων που περιέχουνΚιστανάκιαHerba

Cistanches Herbaείναι ένα τονωτικό που χρησιμοποιείται ευρέως σε επανορθωτικά κινεζικά διπλώματα ευρεσιτεχνίας και άλλα φαρμακευτικά προϊόντα. Ωστόσο, ο ποιοτικός έλεγχος των κινεζικών φαρμάκων με διπλώματα ευρεσιτεχνίας αποτελεί μεγάλη πρόκληση λόγω της ποικιλομορφίας και της πολυπλοκότητας των συστατικών. Λόγω της έλλειψης ρυθμιστικής εποπτείας, υπάρχουν σημαντικές ευκαιρίες για νοθεία ή παραποίηση προϊόντων. Επιπλέον, όλα τα προϊόντα θα πρέπει να υποβάλλονται σε επεξεργασία σύμφωνα με τη Φαρμακοποιία ή άλλα πρότυπα. Η νοθεία ή η παραποίηση δεν επιτρέπεται κατά τη διάρκεια της επεξεργασίας. Έτσι, έχουν καθιερωθεί ποικιλίες μεθόδων ποιοτικού ελέγχου, όπως η πολυδιάστατη υγρή χρωματογραφία δύο διαστάσεων (Yao et al., 2015), η φασματοσκοπία ανάκλασης κοντά στο υπέρυθρο (Zhang and Su, 2014; Zhang et al., 2015 ), και υγρή χρωματογραφία-φασματομετρία μάζας (Wang et al., 2016b). Ωστόσο, οι μέθοδοι αναλυτικής χημείας που βρίσκονται επί του παρόντος στην Επιτροπή Κινεζικής Φαρμακοποιίας (2015) δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον έλεγχο γνησιότητας όλων των συστατικών στα κινεζικά φάρμακα με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας ή για την ανίχνευση της παρουσίας νοθευτικών συστατικών. Επιπλέον, μελέτες έχουν δείξει ότι οι στοχευμένοι μεταβολίτες στα φυτά μεταβάλλονται κατά την επεξεργασία του προϊόντος, με αποτέλεσμα σημαντική μεταβλητότητα στα αποτελέσματα των δοκιμών ή πλήρη αποτυχία των μεθόδων δοκιμής (Ananingsih et al., 2013). Έτσι, μοριακά εργαλεία, όπως οι υπογραφές νουκλεοτιδίων για συγκεκριμένα είδη, είναι έτοιμα να ενισχύσουν τα συστήματα ποιοτικού ελέγχου έναντι του κινδύνου δόλιας υποκατάστασης και νοθείας προϊόντος και συμπερίληψης μη επισημασμένων συστατικών.

Αν και το ITS/ITS2 θεωρείται εργαλείο υψηλής απόδοσης για την αναγνώριση φυτικών φαρμάκων, αυτές οι αλληλουχίες δεν μπορούν να ενισχυθούν από δείγματα υψηλής επεξεργασίας (Newmaster et al., 2013; de Boer et al., 2015). Οι Wang et al. ανέφερε ότι το ITS2 δεν μπορούσε να ενισχυθεί από εκχύλισμα Angelicae Sinensis Radix ή αφεψήματα βρασμένα για περισσότερο από 120 λεπτά (Wang et al., 2016a). Σύμφωνα με τις παραδοσιακές τεχνολογίες και την Επιτροπή Κινεζικής Φαρμακοποιίας (2015), το Cistanches Herba υφίσταται πάντα υψηλή επεξεργασία για να αυξηθεί η φαρμακευτική του αποτελεσματικότητα. Αυτές οι διαδικασίες περιλαμβάνουν το στέγνωμα σε φούρνο, το αλάτισμα και τον ατμό με κρασί (Zou et al., 2017), οι οποίες οδηγούν σε υποβάθμιση του DNA. Επιπλέον, κατά την επεξεργασία προστίθενται διάφορα έκδοχα, όπως μέλι, άμυλο και δεξτρίνη. Εάν αυτά τα έκδοχα δεν αφαιρεθούν εντελώς, η καθαρότητα του DNA θα επηρεαστεί. Για παράδειγμα, η ακόλουθη διαδικασία παρασκευής χρησιμοποιείται για τη δημιουργία καψουλών Sanbao που περιέχουν Cistanches Herba: "Βράσε τις φαρμακευτικές φέτες για 1,5 ώρα δύο φορές, συνδυάστε τα αφεψήματα και διηθήστε το μείγμα. Συμπυκνώστε το διήθημα σε σχετική πυκνότητα 1,20~1,25 (στους 80°C ◦C).Προσθέστε άλλες αλεσμένες σκόνες και ανακατέψτε τες για να αποκτήσετε ένα ομοιογενές μείγμα.Στη συνέχεια στεγνώστε το μείγμα στους 60◦C και στη συνέχεια αλέστε το σε ένα λεπτόκοκκο μείγμα.

σκόνη." Ωστόσο, μετά τη διαδικασία παραγωγής που περιγράφηκε παραπάνω, θα μπορούσαν να υπάρξουν δυσκολίες κατά την εξαγωγή του DNA φαρμάκων με κινεζικά διπλώματα ευρεσιτεχνίας και τα μακρά θραύσματα ενδέχεται να μην πολλαπλασιαστούν από το υποβαθμισμένο DNA, γεγονός που θα εμπόδιζε την ταυτοποίηση των νοθευτών. Έτσι, για να εξασφαλιστεί η ποιότητα και καθαρότητα του DNA, προσθέσαμε επιπλέον βήματα πριν από την εκχύλιση του γονιδιωματικού DNA, συμπεριλαμβανομένης της πλύσης με ρυθμιστικό διάλυμα πρόπλυσης και της έκλουσης δέκα παράλληλων σωλήνων σε έναν σωλήνα για κάθε παρτίδα.

Παρόλο που όλα τα κινεζικά φάρμακα με διπλώματα ευρεσιτεχνίας που χρησιμοποιήθηκαν στην παρούσα μελέτη περιείχαν 6-25 συστατικά, τα ζεύγη εκκινητών που αναπτύχθηκαν θα μπορούσαν να ενισχύσουν ειδικά τις αλληλουχίες των νοθευτών σε αυτά τα κινεζικά φάρμακα ευρεσιτεχνίας. Η άμεση αλληλουχία των προϊόντων PCR έδειξε καθαρά αρχεία ιχνών. Έτσι, αυτή η μέθοδος υπογραφής νουκλεοτιδίων είναι ικανή να προσδιορίζει τόσο τα αυθεντικά συστατικά των ειδών όσο και τους νοθευτές και θα πρέπει να διευρύνει την εφαρμογή μοριακών διαγνωστικών εργαλείων που βασίζονται σε DNA για την εποπτεία της αγοράς.

Ο τραυματισμός και η ασθένεια των νεφρών μπορούν να αντιμετωπιστούν με την κιστάνος

Υπογραφές νουκλεοτιδίων για την αποτελεσματική ταυτοποίηση των προϊόντων της Herba Cistanches

Τα μοριακά εργαλεία που χρησιμοποιούν την τεχνολογία PCR είναι πολλά υποσχόμενα για τον έλεγχο ταυτότητας των φαρμακευτικών προϊόντων στα συστήματα ποιοτικού ελέγχου. Η επιτυχής εφαρμογή των εκκινητών για τον εντοπισμό μολυσματικών ουσιών που έχουν αποικοδομηθεί από το DNA από την Cistanches Herba υποδηλώνει ότι μια μέθοδος ανίχνευσης που βασίζεται σε PCR θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ευρέως. Στην κινεζική αγορά φυτικών φαρμάκων, η τιμή των αυθεντικών συστατικών του είδους Cistanches Herba είναι περισσότερο από πέντε φορές υψηλότερη από τις τιμές των νοθευτών του. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι ο Cy. Το songaricum είναι το πιο κοινό μοιχαλικό του Cistanches Herba στην αγορά, ακολουθούμενο από το Ci. Sinensis. Cy. Το songaricum προστέθηκε επειδή αυτά τα φάρμακα έχουν παρόμοια μορφολογικά χαρακτηριστικά. Επιπλέον, η χημική σύνθεση του Ci. Το sinensis είναι παρόμοιο με αυτό του Cistanches Herba. Ως δείκτες ποιοτικού ελέγχου γιαCistanches Herbaεκχυλίσματα, εχινακοσίδη και ακτεοσίδη μπορούν να εξαχθούν φθηνά από το Ci. sinensis. Έτσι, ορισμένα φαρμακευτικά εργοστάσια χρησιμοποιούν Ci. sinensis ως υποκατάστατο στην παραγωγή εκχυλισμάτων Cistanches Herba. Συνολικά, τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης δείχνουν ότι υπάρχει σημαντική απάτη στην αγορά φαρμακευτικών προϊόντων.

Η νοθεία στην κινεζική ιατρική διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας είναι παρόμοια με αυτή που παρατηρείται σε άλλες χώρες. Παρόμοια επίπεδα νοθείας έχουν καταγραφεί στη Βόρεια Αμερική (Newmaster et al., 2013), την Ευρώπη (Raclariu et al., 2017) και την Ασία (Cheng et al., 2014· Shanmughanandhan et al., 2016· Gao et al. , 2017). Σε αυτή τη μελέτη, το ποσοστό νοθευμένων φαρμάκων με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας της Κίνας ήταν περίπου 48,4 τοις εκατό, με μόνο 16 από τα 31 δείγματα να είναι αυθεντικά Cistanches Herba. Επιπλέον, υποθέσαμε ότι τα διαφορετικά αποτελέσματα που παράγονται σε προϊόντα του ίδιου κατασκευαστή θα μπορούσαν να αποδοθούν σε διαφορές στην ποιότητα των διαφορετικών παρτίδων κινεζικών φαρμακευτικών υλικών. Ως εκ τούτου, για τον έλεγχο της ποιότητας των φαρμάκων με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας της Κίνας, οι πρώτες ύλες θα πρέπει να επικυρώνονται πριν μεταποιηθούν σε προϊόντα.

Νόθεια τωνCistanches Herbaέχει παραδοσιακά συνδεθεί με ζητήματα προσφοράς και ζήτησης πρώτων υλών.Ci. deserticolaκαιCi. σωληνοειδήςείναι τα δύο πρωτότυπα φυτά που χρησιμοποιούνται επί του παρόντος για τη σύνθεσηCistanches Herba. Ωστόσο, ο Ci. Το deserticola είναι το μόνο πρωτότυπο είδος στα παραδοσιακά αυθεντικά Cistanches Herba που καταγράφονται στην Επιτροπή Φαρμακοποιίας της Κίνας (2000), στην οποία ο Ci. Το tubulosa αναγνωρίζεται ως μοιχός. Λόγω της έλλειψης Ci. πόροι deserticola,Ci. σωληνοειδήςέχει καταχωρηθεί ως συμπλήρωμα στην Κινεζική Φαρμακοποιία από το 2005 (Jiang and Tu, 2009). Μέχρι πρόσφατα, οι τιμές αυτών των βοτάνων διέφεραν σημαντικά. Ci. Το tubulosa ήταν πολύ λιγότερο ακριβό από το Ci. deserticola γιατί υπάρχει πολύ μεγαλύτερη προσφορά του πρώτου. Εδώ, τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι ο Ci. Το tubulosa χρησιμοποιείται ευρύτερα στα εμπορικά διαθέσιμα προϊόντα Cistanches Herba.

Συμπερασματικά, οι υπογραφές νουκλεοτιδίων και με βάση την PCR

οι μέθοδοι που αναπτύχθηκαν σε αυτή τη μελέτη μπορούν να χρησιμεύσουν ως χρήσιμα εργαλεία για τη βιομηχανία φαρμάκων για τον έλεγχο της ταυτότητας των συστατικών και τον εντοπισμό νοθευτών σεΚιστανάκιαΠροϊόντα Herba. Σύμφωνα με το αποτέλεσμα της ευαισθησίας, ακόμα κι αν η αναλογία του νοθεύοντος ήταν ένα στις δέκα χιλιάδες, μπορεί να ανιχνευθεί μέσω qRT-PCR. Σημαίνει ότι μόλις ανιχνευθεί μια υπογραφή νουκλεοτιδίου σεΚιστανάκιαΛειτουργικά προϊόντα που περιέχουν βότανα, θα μπορούσε να αναγνωριστεί ως πλαστό ή πλαστό συστατικό. Μια νέα λύση για τον εντοπισμό πλαστών συστατικών ή νοθευμένων Cistanches Herba παρασχέθηκε που δεν ήταν προηγουμένως διαθέσιμη μέσω μεθόδων χημικής ανίχνευσης στην Κινεζική Φαρμακοποιία. Επιπλέον, αυτή η μέθοδος θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για την επικύρωση αυξανόμενων τύπων φαρμάκων και για τη διεύρυνση των εφαρμογών μοριακών διαγνωστικών εργαλείων που βασίζονται σε DNA για την εποπτεία της αγοράς.

Για την ανακούφιση τουχρόνιοςνεφρόνόσοςμεκιστανάκι

ΣΥΝΕΙΣΦΟΡΕΣ ΣΥΓΓΡΑΦΕΩΝ

Ο JH συνέλαβε τη μελέτη και συμμετείχε στο σχεδιασμό της. Οι XW, RX και JC συνεισέφεραν δείγματα και πραγματοποίησαν τα πειράματα. Η XW ανέλυσε τα δεδομένα. Οι XW, JH, ZZ, S-GN, JS και SC συνέταξαν το χειρόγραφο. Όλοι οι συγγραφείς έχουν διαβάσει και εγκρίνει το τελικό χειρόγραφο.

ΧΡΗΜΑΤΟΔΟΤΗΣΗ

Αυτή η εργασία υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας [αριθμός επιχορήγησης 81673552], το CAMS Innovation

Fund for Medical Sciences [αριθμός επιχορήγησης 2016-I2 M- 3-016] και το United Fund Key Project του Εθνικού Ιδρύματος Φυσικών Επιστημών της Κίνας [αριθμός επιχορήγησης U1403224].

ΕΥΧΑΡΙΣΤΙΕΣ

Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε τους συναδέλφους μας που βοήθησαν στη συλλογή δειγμάτων, την ταυτοποίηση, την εργαστηριακή εργασία και την προετοιμασία χειρογράφων, συμπεριλαμβανομένων των Chaokui Sun, Dianyun Hou και Piao Zhang.

ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΙΚΟ ΥΛΙΚΟ

Το συμπληρωματικό υλικό για αυτό το άρθρο βρίσκεται στο διαδίκτυο στη διεύθυνση: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpls.2018. 01643/πλήρες#συμπληρωματικό υλικό

Συμπληρωματικό Σχήμα S1|Το αποτέλεσμα ευθυγράμμισης της αλληλουχίας ITS2 από έξι είδη.

Συμπληρωματικό Σχήμα S2|Ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης όλων των δειγμάτων.

Συμπληρωματικός Πίνακας S1|Δειγματοληπτικές πληροφορίες του Cistanches Herba και των νοθευτών του.

Συμπληρωματικός πίνακας S2|Πληροφορίες αλληλουχίας σχετικών ειδών που λήφθηκαν από την GenBank.

Συμπληρωματικός πίνακας S3|Οι δηλωμένες συνθέσεις διαφορετικών δειγμάτων κινεζικών διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας.

Συμπληρωματικό Φύλλο Δεδομένων S1|Όλες οι αλληλουχίες που ελήφθησαν σε αυτή τη μελέτη.

CistancheΤο deserticola έχει πολλά αποτελέσματα

ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΚΕΣ ΑΝΑΦΟΡΕΣ

Ananingsih, VK, Sharma, A., and Zhou, W. (2013). Κατεχίνες πράσινου τσαγιού κατά την επεξεργασία και αποθήκευση τροφίμων: μια ανασκόπηση για τη σταθερότητα και την ανίχνευση. Food Res. Int. 50, 469–479. DOI: 10.1016/j.foodres.2011.03.004

Chen, H., Jing, FC, Li, CL, Tu, PF, Zheng, QS και Wang, ZH (2007). Η εχινακοσίδη αποτρέπει τα εξωκυτταρικά επίπεδα μονοαμίνης στο ραβδωτό σώμα

νευροδιαβιβαστές από τη μείωση σε αρουραίους με βλάβη 6-υδροξυντοπαμίνης. J. Ethnopharmacol. 114, 285–289. DOI: 10.1016/j.jep.2007.07.035

Chen, S., Yao, Η., Han, J., Liu, C., Song, J., Shi, L., et αϊ. (2010). Επικύρωση της περιοχής ITS2 ως νέος γραμμωτός κώδικας DNA για την αναγνώριση ειδών φαρμακευτικών φυτών. PLoS ONE 5:e8613. DOI: 10.1371/journal.pone.0008613

Cheng, Χ., Su, Χ., Chen, Χ., Zhao, Η., Bo, C., Xu, J., et αϊ. (2014). Ανάλυση βιολογικών συστατικών του παρασκευάσματος παραδοσιακής κινεζικής ιατρικής με βάση την αλληλουχία υψηλής απόδοσης: η ιστορία για τον Liuwei Dihuang Wan. Sci. Απ. 4:5147. DOI: 10.1038/srep05147

Επιτροπή Κινεζικής Φαρμακοποιίας. (2000). Φαρμακοποιία της Λαϊκής Δημοκρατίας της Κίνας. Μέρος Ι. Πεκίνο: China Medical Science Press.

Επιτροπή Κινεζικής Φαρμακοποιίας. (2015). Φαρμακοποιία της Λαϊκής Δημοκρατίας της Κίνας. Μέρος Ι. Πεκίνο: China Medical Science Press.

de Boer, HJ, Ichim, MC και Newmaster, SG (2015). Barcoding DNA και φαρμακοεπαγρύπνηση φυτικών φαρμάκων. Drug Saf. 38, 611–620. DOI: 10.1007/s40264-015-0306-8

Dubey, B., Meganathan, PR, and Haque, I. (2011). Μίνι-γραμμωτό κώδικα DNA: μια προσέγγιση για την ιατροδικαστική ταυτοποίηση ορισμένων απειλούμενων ειδών ινδικών φιδιών. Δικανικός. Sci. Int. Genet. 5, 181–184. DOI: 10.1016/j.fsigen.2010.03.001

Edgar, RC (2004). MUSCLE: ευθυγράμμιση πολλαπλών ακολουθιών με υψηλή ακρίβεια και υψηλή απόδοση. Nucleic Acids Res. 32, 1792–1797. DOI: 10.1093/var/gkh340

Fu, L. (1991). Κόκκινο βιβλίο των φυτών της Κίνας. Μέρος Ι. Πεκίνο: Science Press, 502.

Gao, Ζ., Liu, Υ., Wang, Χ., Song, J., Chen, S., Ragupathy, S., et αϊ. (2017). Η παράγωγη τεχνολογία της γραμμικής κωδικοποίησης του DNA (μέθοδοι υπογραφής νουκλεοτιδίων και διπλής αιχμής SNP) ανιχνεύει τους νοθευτές και την υποκατάσταση στα κινεζικά φάρμακα με διπλώματα ευρεσιτεχνίας. Sci. Απ. 7:5858. DOI: 10,1038/s41598-017-05892-y

Gu, CM, Yang, XY και Huang, LF (2016). Cistanches Herba: μια ανασκόπηση νευροφαρμακολογίας. Εμπρός. Pharmacol. 7:289. DOI: 10.3389/fphar.2016.00289

Hajibabaei, M., Smith, MA, Janzen, DH, Rodriguez, JJ, Whitfield,

JB και Hebert, PDN (2006). Ένας μινιμαλιστικός γραμμωτός κώδικας μπορεί να αναγνωρίσει ένα δείγμα του οποίου το DNA έχει υποβαθμιστεί. ΜοΙ. Ecol. Σημειώσεις 6, 959–964. DOI: 10.1111/j.1471-8286.2006.01470.x

Φαρμακευτική Σύμβαση της Ιαπωνίας. (2016). The Japanese Pharmacopoeia, 17th Edn. Τόκιο: Υπουργείο Υγείας, Εργασίας και Πρόνοιας της Ιαπωνίας, 1831–1832.

Jiang, Y., and Tu, PF (2009). Ανάλυση χημικών συστατικών στα είδη Cistanche. J. Chromatogr. 1216, 1970–1979. DOI: 10.1016/j.chroma.2008.07.031

Keller, A., Schleicher, T., Schultz, J., Müller, T., Dandekar, T., and Wolf, M. (2009). 5.8S-28Αλληλεπίδραση S rRNA και σχολιασμός ITS2 που βασίζεται σε HMM. Gene 430, 50-57. doi: 10.1016/j.gene.2008.10.012

Lei, L., Yang, F., Zhang, T., Tu, P., Wu, L., and Ito, Y. (2001). Προπαρασκευαστική απομόνωση και καθαρισμός ακτεοζίτη και 2'-ακετυλ ακτεοζίτη από Cistanches salsa (CA Mey.) G. Beck με χρωματογραφία αντίθετου ρεύματος υψηλής ταχύτητας. J. Chromatogr. A 912, 181–185. DOI: 10.1016/S0021-9673(01)00583-0

Li, Z., Lin, H., Gu, L., Gao, J., and Tzeng, CM (2016). Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): ένα από τα καλύτερα φαρμακευτικά δώρα της παραδοσιακής κινεζικής ιατρικής. Εμπρός. Pharmacol. 7:41. DOI: 10.3389/fphar.2016.00041

Liu, XM, Li, J., Jiang, Y., Zhao, MB και Tu, PF (2013). Χημικά συστατικά από το Cistanche Sinensis (Orobanchaceae). Biochem. Συστ. Ecol. 47, 21–24. DOI: 10.1016/j.bse.2012.09.003

Liu, Y., Wang, X., Wang, L., Chen, X., Pang, X., and Han, J. (2016). Μια νουκλεοτιδική υπογραφή για την αναγνώριση του αμερικανικού ginseng και των προϊόντων του. Εμπρός. Plant Sci. 7:319. DOI: 10.3389/fpls.2016.00319

Lo, YT, Li, M. και Shaw, PC (2015). Αναγνώριση των συστατικών βοτάνων σε αφεψήματα ginseng με δείκτες DNA. Πηγούνι. Med. 10:1. DOI: 10,1186/s13020-015-0029-x

Meusnier, I., Singer, GA, Landry, JF, Hickey, DA, Hebert, PD και Hajibabaei, M. (2008). Ένας καθολικός mini-barcode DNA για ανάλυση βιοποικιλότητας. BMC Genomics 9:214. DOI: 10.1186/1471-2164-9-214

Newmaster, SG, Grguric, M., Shanmughanandhan, D., Ramalingam, S., and Ragupathy, S. (2013). Το barcoding DNA ανιχνεύει μόλυνση και υποκατάσταση σε φυτικά προϊόντα της Βόρειας Αμερικής. BMC. Med. 11:222. DOI: 10.1186/1741-7015-11-222

Raclariu, AC, Mocan, Α., Popa, ΜΟ, Vlase, L., Ichim, MC, Crisan, G., et al. (2017). Ο έλεγχος ταυτότητας προϊόντος Veronica officinalis χρησιμοποιώντας μεταγραμμικό κώδικα DNA και HPLC-MS αποκαλύπτει εκτεταμένη νοθεία με το Veronica chamaedrys. Εμπρός. Pharmacol. 8:378. DOI: 10.3389/fphar.2017.00378

Shanmughanandhan, D., Ragupathy, S., Newmaster, SG, Mohanasundaram, S. και Sathishkumar, R. (2016). Εκτίμηση του ελέγχου ταυτότητας και της νοθείας φυτικών προϊόντων στην Ινδία χρησιμοποιώντας μια βιβλιοθήκη βιολογικού υλικού αναφοράς με κουπόνια που βασίζεται σε DNA. Drug Saf. 39, 1211–1227. DOI: 10.1007/s40264-016- 0459-0

Sun, ZY, Song, JY, Yao, H. και Han, JP (2012). Μοριακή ταυτοποίηση του Cistanches Herba και των νοθευτών του με βάση την ακολουθία nrITS2. J. Med. Plants Res. 6, 1041–1045. DOI: 10.5897/JMPR11.1115

Tamura, K., Peterson, D., Peterson, N., Stecher, G., Nei, M., and Kumar, S. (2011). MEGA5: ανάλυση μοριακής εξελικτικής γενετικής χρησιμοποιώντας μεθόδους μέγιστης πιθανότητας, εξελικτικής απόστασης και μέγιστης φειδωλότητας. ΜοΙ. Biol. Evol. 28, 2731–2739. DOI: 10.1093/molbev/msr121

Wang, Q., Song, W., Qiao, X., Ji, S., Kuang, Y., Zhang, ZX, et al. (2016β). Ταυτόχρονη ποσοτικοποίηση 50 βιοδραστικών ενώσεων της παραδοσιακής κινεζικής ιατρικής φόρμουλας αφέψημα Gegen-Qinlian χρησιμοποιώντας υγρή χρωματογραφία εξαιρετικά υψηλής απόδοσης σε συνδυασμό με φασματομετρία μάζας σε σειρά. J. Chromatogr. 1454, 15–25. DOI: 10.1016/j.chroma.2016. 05.056

Wang, T., Zhang, XY και Xie, WY (2012). Cistanche deserticola

YC Ma, "Desert ginseng": μια κριτική. Είμαι. J. Chin. Med. 40, 1123–1141. DOI: 10.1142/S0192415X12500838

Wang, X., Liu, Y., Wang, L., Han, J., and Chen, S. (2016a). Μια νουκλεοτιδική υπογραφή για την αναγνώριση του Angelicae Sinensis Radix (Danggui) και των προϊόντων του. Sci. Απ. 6:34940. DOI: 10.1038/srep34940

Yao, CL, Yang, WZ, Wu, WY, Dai, J., Hou, JJ, Zhang, JX,

et al. (2015). Ταυτόχρονη ποσοτικοποίηση πέντε σαπωνινών Panax notoginseng με διδιάστατη υγρή χρωματογραφία πολλαπλών καρδιών: ανάπτυξη μεθόδου και εφαρμογή στον ποιοτικό έλεγχο οκτώ Notoginseng φαρμάκων που περιέχουν κινεζικά διπλώματα ευρεσιτεχνίας. J. Chromatogr. 1402, 71–81. DOI: 10.1016/j.chroma.2015.05.015

Zhang, C., and Su, J. (2014). Εφαρμογή της φασματοσκοπίας εγγύς υπέρυθρης ακτινοβολίας στην ανάλυση και γρήγορη αξιολόγηση ποιότητας παραδοσιακών κινεζικών φαρμακευτικών προϊόντων. Acta. Pharm. Αμαρτία. Β 4, 182–192. DOI: 10.1016/j.apsb.2014.04.001

Zhang, W., Qu, Ζ., Wang, Υ., Yao, C., Bai, Χ., Bian, S., et αϊ. (2015). Φασματοσκοπία ανάκλασης εγγύς υπέρυθρης ακτινοβολίας (NIRS) για γρήγορο προσδιορισμό της ginsenoside Rg1 και Re στην κινεζική ιατρική ευρεσιτεχνίας χάπι Naosaitong. Spectrochim. Acta. Ένα ΜοΙ. Biomol. Spectrosc. 139, 184–188. DOI: 10.1016/j.saa.2014.11.111

Zou, P., Song, Y., Lei, W., Li, J., Tu, P., and Jiang, Y. (2017). Εφαρμογή μεταβολομικής με βάση το 1H NMR για διάκριση διαφορετικών τμημάτων και ανάπτυξη νέας ροής εργασιών επεξεργασίας για το Cistanche deserticola. Acta. Pharm. Αμαρτία. Β 7, 647–656. DOI: 10.1016/j.apsb.2017.07.003

Δήλωση Σύγκρουσης Συμφερόντων: Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι η έρευνα διεξήχθη απουσία εμπορικών ή οικονομικών σχέσεων που θα μπορούσαν να ερμηνευθούν ως πιθανή σύγκρουση συμφερόντων.

Πνευματικά δικαιώματα © 2018 Wang, Xu, Chen, Song, Newmaster, Han, Zhang και Chen. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοιχτής πρόσβασης που διανέμεται σύμφωνα με τους όρους της άδειας αναφοράς Creative Commons (CC BY). Επιτρέπεται η χρήση, η διανομή ή η αναπαραγωγή σε άλλα φόρουμ, υπό την προϋπόθεση ότι ο αρχικός συγγραφέας και ο κάτοχος των πνευματικών δικαιωμάτων αναφέρονται και αναφέρεται η αρχική δημοσίευση σε αυτό το περιοδικό, σύμφωνα με την αποδεκτή ακαδημαϊκή πρακτική. Δεν επιτρέπεται καμία χρήση, διανομή ή αναπαραγωγή που δεν συμμορφώνεται με αυτούς τους όρους.