Νευροπροστατευτική επίδραση του κορεατικού κόκκινου τζίνσενγκ κατά μεμονωμένων παρατεταμένων βλαβών μνήμης και φλεγμονής που προκαλούνται από το στρες στον εγκέφαλο του αρουραίου που σχετίζεται με την έκφραση BDNF

Για περισσότερες πληροφορίες:ali.ma@wecistanche.com

Αφηρημένη

Ιστορικό: Η διαταραχή μετατραυματικού στρες (PTSD) είναι μια ψυχιατρική νόσος που αναπτύσσεται μετά από έκθεση σε ένα τραυματικό γεγονός και είναι μια ψυχική διαταραχή που σχετίζεται με το στρες και χαρακτηρίζεται από ανισορροπία νευροφλεγμονής. Το κορεατικό κόκκινο ginseng (KRG) είναι ένα φυτικό συμπλήρωμα που είναι γνωστό ότι εμπλέκεται σε μια ποικιλία φαρμακολογικών δραστηριοτήτων. Στόχος μας ήταν να διερευνήσουμε τις επιδράσεις του KRG στη νευροφλεγμονή ως δυνητικό μηχανισμό που εμπλέκεται στο μεμονωμένο παρατεταμένο στρες (SPS) που επηρεάζει αρνητικάσχηματισμός μνήμηςκαι ενοποίηση και οδηγεί σε γνωστική και χωρική εξασθένηση ρυθμίζοντας τη σηματοδότηση BDNF, τις συναπτικές πρωτεΐνες και την ενεργοποίηση του NF-kB. Μέθοδοι: Αναλύσαμε το γνωστικό καιχωρική μνήμηκαι επίπεδα φλεγμονωδών κυτοκινών κατά τη διάρκεια της διαδικασίας SPS. Σε αρουραίους μοντέλου SPS εγχύθηκαν ενδοπεριτοναϊκά 20, 50 ή 100 mg/kg/ημέρα KRG για 14 ημέρες. Αποτελέσματα: Η χορήγηση KRG εξασθένησε σημαντικά τη γνωστική καιχωρική μνήμηελλείμματα, καθώς και η φλεγμονώδης αντίδραση στον ιππόκαμπο που σχετίζεται με την ενεργοποίηση του NF-kB στον ιππόκαμπο που προκαλείται από το SPS. Επιπλέον, οι επιδράσεις του KRG ήταν ισοδύναμες με αυτές που ασκούσε η παροξετίνη. Επιπλέον, το KRG βελτίωσε την έκφραση του BDNF mRNA και της συναπτικής πρωτεΐνης PSD-95 στον ιππόκαμπο. Συνολικά, αυτά τα ευρήματα δείχνουν ότι η KRG ασκείβελτίωση της μνήμηςδράσεις με τη ρύθμιση των αντιφλεγμονωδών δραστηριοτήτων και του NF-kB και της νευροτροφικής οδού. Συμπέρασμα: Τα ευρήματά μας υποδηλώνουν ότι το KRG είναι ένα πιθανό λειτουργικό συστατικό για προστασία απόμνήμηελλείμματα σε ψυχικές ασθένειες, όπως το PTSD.

Bombi Lee, Bongjun Sur, Seikwan Oh

Acupuncture and Meridian Science Research Center, College of Korean Medicine, Kyung Hee University, 02447, Seoul, Republic of Korea

Center for Converging Humanities, Kyung Hee University, 02447, Seoul, Republic of Korea c Department of Molecular Medicine and TIDRC, School of Medicine, Ewha Womans University, 07985, Seoul, Republic of Korea

1. Εισαγωγή

Η διαταραχή μετατραυματικού στρες (PTSD) είναι η εμφάνιση παρεμβατικών επαναεμπειριών, αποφυγής υπενθυμίσεων, αρνητικής γνώσης και διάθεσης μετά από έκθεση σε ένα σοβαρό τραυματικό γεγονός [1]. Περίπου το 50 τοις εκατό του πληθυσμού εκτίθεται σε ένα ή περισσότερα σοβαρά τραυματικά συμβάντα κατά τη διάρκεια της ζωής του και περίπου το 7 τοις εκατό αναπτύσσει PTSD [2]. Το PTSD διαγιγνώσκεται όταν τα κύρια συμπτώματα του PTSD επιμένουν για περισσότερο από 1 μήνα ή εμφανίζεται σοβαρή ψυχολογική ασθένεια ή αναπηρία, η οποία παρεμβαίνει στις κανονικές κοινωνικές και επαγγελματικές δραστηριότητες [2]. Λόγω των μεγάλης κλίμακας φυσικών καταστροφών που προκαλούνται από την κλιματική αλλαγή, την παγκόσμια προσφυγική κρίση, το υψηλής έντασης εργασιακό άγχος, τα τροχαία ατυχήματα, τις τρομοκρατικές επιθέσεις, τη σεξουαλική βία και την κακοποίηση παιδιών, το ποσοστό επίπτωσης του PTSD αυξάνεται ετησίως [3]. Συγκεκριμένα, τα συμπτώματα του PTSD συνοδεύονται κυρίως από παθολογικά συμπτώματα, όπως έντονο άγχος, κατάθλιψη και μειωμένη γνωστική ικανότηταμνήμηλειτουργία,που προκαλεί νευρολογικές αλλαγές, συμπεριλαμβανομένων γνωστικών-συμπεριφορικών και εγκεφαλικών λειτουργικών αλλαγών [4].

Οι εκλεκτικοί αναστολείς επαναπρόσληψης σεροτονίνης, συμπεριλαμβανομένων αντικαταθλιπτικών, αντιαγχολυτικών και αντισπασμωδικών φαρμάκων έχουν συνταγογραφηθεί για την ανακούφιση συμπτωμάτων, όπως άγχος ή γνωστική εξασθένηση, που προκαλούνται από PTSD, αλλά αυτά τα φάρμακα είναι προληπτικά λόγω σοβαρών ανεπιθύμητων ενεργειών και μακροχρόνιας εξάρτησης από τα φάρμακα [5,6 ]. Επιπλέον, αυτά τα φάρμακα προορίζονται μόνο για την ανακούφιση των συμπτωμάτων και δεν αποτελούν θεμελιώδη θεραπεία.

Οφέλη και παρενέργειες Click to cistanche και Cistanche για μνήμη

Το τραυματικό στρες που βασίζεται στο φόβο και το άγχος, όπως το PTSD, προκαλεί νευροφλεγμονή λόγω της νευροβιολογικής απόκρισης που προκαλείται από χρόνια στρες και διαμεσολαβείται κυρίως από προφλεγμονώδεις κυτοκίνες [7,8]. Πράγματι, υψηλές συγκεντρώσεις φλεγμονωδών σημάτων, συμπεριλαμβανομένων των προφλεγμονωδών κυτοκινών, συσσωρεύονται στον ιππόκαμπο ζώων με PTSD[9]. Η πλειοτροπική και πολυλειτουργική φύση των κυτοκινών μεσολαβεί σε κρίσιμες φλεγμονώδεις διεργασίες σε τρωκτικά και ανθρώπους και εμπλέκονται κρίσιμα στη ρύθμιση της PTSD. Η νευροφλεγμονή προκαλεί δυσμενείς επιπτώσεις στα γνωστικά καιλειτουργίες μνήμης[10]. Επομένως, η επίλυση της νευροφλεγμονής επιβραδύνει την εξέλιξη τηςεξασθένηση της μνήμηςκαι προστατεύει από αλλαγές στη λειτουργία του εγκεφάλου σε ασθενείς με PTSD [11,12]. Ως εκ τούτου, πρόσφατες μελέτες έχουν αναγνωρίσει τη νευροφλεγμονή ως σημαντικό παράγοντα που υποκρύπτει τη PTSD, καθιστώντας τη νευροφλεγμονή σημαντικό θεραπευτικό στόχο για τη θεραπεία της PTSD[13). Ως εκ τούτου, μια μείωση στον όγκο του ιππόκαμπου και στους πυκνά τοποθετημένους υποδοχείς κυτοκίνης παρατηρούνται συνήθως σε ασθενείς με PTSD [14,15].

Επιπλέον, ορισμένες μελέτες έχουν δείξει ότι το PTSD προκαλεί απώλεια συναπτικής λειτουργίας και μεταβάλλει τη συναπτική πλαστικότητα [16]. Επίσης, το PTSD μπορεί να επηρεάσει περαιτέρω τη σηματοδότηση που προκαλείται από νευροτροφίνες [17] Ο νευροτροφικός παράγοντας που προέρχεται από τον εγκέφαλο (BDNF) υποστηρίζει την επιβίωση των κυττάρων και αυξάνει τη συναπτική πλαστικότητα ρυθμίζοντας φλεγμονώδεις ουσίες όπως οι προφλεγμονώδεις κυτοκίνες και ενεργοποιώντας τον καταρράκτη του πυρηνικού παράγοντα κάπα B(NF-xB). σηματοδότηση [18]. Επομένως, η σηματοδότηση BDNF στον ιππόκαμπο παίζει σημαντικό ρόλο στη νευροπαθολογία της PTSD [17].

Το κορεατικό κόκκινο ginseng (KRG, Ginseng, Radix rubra) είναι ένα από τα πιο ευρέως χρησιμοποιούμενα φυτικά φάρμακα που προάγουν την υγεία με διάφορα αποτελέσματα, όπως προστασία του μυοκαρδίου, αγγειακή ανακούφιση και κατά του στρες [19] Συγκεκριμένα, το KRG έχει αναγνωριστεί για Η ποικιλία των φυσιολογικών και φαρμακολογικών δραστηριοτήτων του, συμπεριλαμβανομένης της αποκατάστασης από την κόπωση, της ενισχυμένης ανοσίας και της βελτιωμένης ροής του αίματος, καθώς και των αντιφλεγμονωδών, αντιοξειδωτικών και βελτιωμένων δραστηριοτήτων μνήμης [20-22]. Το κλάσμα σαπωνίνης του KRG είναι αποτελεσματικό για τη βελτίωση των ελλειμμάτων μνήμης που προκαλούνται από τη σκοπολαμίνη σε αρουραίους και προλαμβάνει νευροεκφυλιστικές διαταραχές, όπως η νόσος του Alzheimer (AD)[23].

Αν και πολλές μελέτες έχουν προσπαθήσει να αποσαφηνίσουν τους νευρικούς μηχανισμούς που υποστηρίζουν την επίδραση ενίσχυσης της μνήμης του KRG, η επίδραση του KRG στις συμπεριφορικές και νευροφλεγμονώδεις αποκρίσεις που προκαλούνται από τη διαταραχή της μνήμης που προκαλείται από το παρατεταμένο στρες (SPS) παραμένει ελάχιστα κατανοητή. Συγκεκριμένα, εάν η αντιφλεγμονώδης δράση του KRG σχετίζεται με τις φλεγμονώδεις κυτοκίνες που προκαλούνται από NF-xB, η ρύθμιση του BDNF ή της συναπτικής πλαστικότητας δεν έχει επιβεβαιωθεί. Επομένως, σε αυτή τη μελέτη, διερευνήσαμε τις προστατευτικές επιδράσεις του KRG στη γνωστική και χωρική εξασθένηση σε ένα ψυχιατρικό μοντέλο που μοιάζει με PTSD εκθέτοντας αρουραίους σε SPS.

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1. Διαχείριση ζώων και KRG

Αρσενικοί Sprague-Dawley (6-8 εβδομάδων, 220-250 g) αρουραίοι αγοράστηκαν από το Samtako (Σεούλ, Κορέα). Τα πειράματα σε ζώα διεξήχθησαν για τη διαχείριση πειραματόζωων από την Επιτροπή Φροντίδας και Χρήσης Ζώων του Πανεπιστημίου Kyung Hee [KHUASP(SE)-21-268]. Οι αρουραίοι χωρίστηκαν σε έξι ομάδες: μια ομάδα ελέγχου, μια ομάδα μόνο με SPS, τις ομάδες θεραπείας με KRG και μια ομάδα θετικού ελέγχου. Στις ομάδες θεραπείας KRG χορηγήθηκε KRG σε συγκεντρώσεις 20,50 ή 100 mg/kg για 14 ημέρες με ενδοπεριτοναϊκή ένεση (IP.) και το φάρμακο θετικού ελέγχου υδροχλωρική παροξετίνη (15 mg/kg, PAX, Sigma-Aldrich Chemical Co. St. Louis, MO, USA) χορηγήθηκε. Το KRG προμηθεύτηκε από την Korean Ginseng Corp. (KT&G, Daejeon, Κορέα). Σε αυτή τη μελέτη, επιλέξαμε την ενδοπεριτοναϊκή χορήγηση, η οποία μπορεί να επιβεβαιώσει άμεσα και γρήγορα τη φαρμακολογική δράση, αντί της από του στόματος χορήγησης στην οποία εμφανίστηκε ατελή απορρόφηση στο έντερο παρόμοια με την προηγούμενη μελέτη [19]. Το πειραματικό πρόγραμμα για όλη τη χορήγηση φαρμάκων, τις δοκιμές συμπεριφοράς και τη δειγματοληψία παρουσιάζεται στο Σχήμα 1.

2.2. Μεμονωμένο παρατεταμένο στρες

Όπως είναι ήδη γνωστό, το SPS είναι ένα από τα πιο αξιόπιστα μοντέλα PTSD και είναι γνωστό ότι αναπαράγει τα κύρια συμπτώματα της PTSD [24]. Οι αρουραίοι υποβλήθηκαν σε καταπόνηση περιορισμού για 2 ώρες και αναγκάστηκαν να κολυμπήσουν σε δεξαμενή νερού για 20 λεπτά. Παρασχέθηκε μια περίοδος ανάπαυσης για να επιτραπεί στους αρουραίους να αναρρώσουν για 15 λεπτά, και στη συνέχεια οι αρουραίοι εκτέθηκαν σε ισοφλουράνιο μέχρι να χάσουν τις αισθήσεις τους. Αυτές οι διαδικασίες ονομάστηκαν SPS. Οι αρουραίοι έμειναν μόνοι για 7 ημέρες για να ενισχύσουν περαιτέρω μια κατάσταση που μοιάζει με PTSD.

2.3. Δοκιμή υδάτινου λαβύρινθου Morris (MWM).

Η δοκιμή MWM αποτελείται από μια κυκλική δεξαμενή νερού, μια πλατφόρμα διαφυγής και ένα ηλεκτρονικό σύστημα παρακολούθησης βίντεο (έκδοση 2.5; PanLab Co. Barcelona, ​​Ισπανία). Η δεξαμενή ήταν κατασκευασμένη από κυλινδρικό πλαστικό με διάμετρο 200 cm και ύψος 35 cm και οι τοίχοι και το δάπεδο βάφτηκαν λευκά. Δεν τοποθετήθηκαν σημάδια στο εσωτερικό τοίχωμα της δεξαμενής. Η δεξαμενή γεμίστηκε με νερό σε ύψος 25 cm και η θερμοκρασία του νερού διατηρήθηκε στους 23-25 βαθμούς C. Το νερό έγινε αδιαφανές με λευκή υδατική βαφή έτσι ώστε η πλατφόρμα διαφυγής να μην ήταν ορατή με γυμνό μάτι . Η πλατφόρμα διαφυγής ήταν ένας διαφανής ακρυλικός κύλινδρος με διάμετρο 15 cm και ύψος 20 cm και η πάνω επιφάνεια ήταν 1,5 cm κάτω από την επιφάνεια του νερού. Ο ιχνηλάτης βίντεο αποτελούνταν από μια κάμερα CCD εγκατεστημένη 2,5 μέτρα πάνω από τη δεξαμενή νερού και έναν υπολογιστή, και το πρόγραμμα SMART (έκδοση 2.5; PanLab) χρησιμοποιήθηκε για την παρακολούθηση και ανάλυση της συμπεριφοράς των πειραματόζωων. Γύρω από τη δεξαμενή εγκαταστάθηκαν οπτικές ενδείξεις διαφόρων μοντέλων και το εργαστηριακό περιβάλλον και η θέση του πειραματιστή διατηρήθηκαν σταθερά κατά τη διάρκεια της πειραματικής περιόδου, όπως το πειραματικό τραπέζι, ο υπολογιστής και η καρέκλα. Κατά τη διάρκεια του πειράματος, ο πειραματιστής παρέμεινε σε ένα μέρος για να διατηρήσει σταθερές τις χωρικές ενδείξεις έξω από τον λαβύρινθο. Ο λαβύρινθος χωρίστηκε σε τεταρτημόρια βορειοανατολικού, βορειοδυτικού, νοτιοανατολικού και νοτιοδυτικού, και μια πλατφόρμα διαφυγής εγκαταστάθηκε στο κέντρο του νοτιοδυτικού τεταρτημορίου. Η αρχική θέση του ζώου ήταν σταθερή και αυτό το σημείο σημειώθηκε στην εξωτερική επιφάνεια της δεξαμενής.

Οι αρουραίοι είχαν τη δυνατότητα να κολυμπούν ελεύθερα στη δεξαμενή κατά τη διάρκεια της εκπαίδευσης και να σκαρφαλώνουν προς τα πάνω αναζητώντας κρυφό καταφύγιο μόνοι τους. Οι αρουραίοι που βρήκαν την πλατφόρμα διαφυγής είχαν τη δυνατότητα να παρατηρήσουν ελεύθερα το περιβάλλον τους ενώ έμεναν στο καταφύγιο για 10 δευτερόλεπτα και καταγράφηκε ο χρόνος που έφτασαν στην πλατφόρμα διαφυγής. Οι αρουραίοι που δεν μπορούσαν να βρουν την πλατφόρμα διαφυγής εντός 180 δευτερολέπτων οδηγήθηκαν στην πλατφόρμα διαφυγής από τον πειραματιστή και στη συνέχεια παρέμειναν στην πλατφόρμα διαφυγής για 10 δευτερόλεπτα για να παρατηρήσουν ελεύθερα το περιβάλλον και ο χρόνος για να φτάσουν στην πλατφόρμα διαφυγής καταγράφηκε ως 180 δευτερόλεπτα . Μια δοκιμή διατήρησης χωρικής μνήμης διεξήχθη την 6η ημέρα του πειράματος MWM. Οι αρουραίοι σε κάθε ομάδα αφέθηκαν να κολυμπήσουν ελεύθερα για 60 δευτερόλεπτα μία φορά στην ίδια δεξαμενή από την οποία αφαιρέθηκε η πλατφόρμα διαφυγής, για να βρουν την πλατφόρμα διαφυγής. και η διαδρομή κολύμβησης παρακολουθήθηκε με τον ιχνηλάτη βίντεο και αποθηκεύτηκε στο σύστημα ανάλυσης υπολογιστή.

2.4. Τεστ παθητικής αποφυγής (PAT)

Το κουτί αποφυγής είναι ένα σκούρο μαύρο ακρυλικό κουτί (30*30*30 cm) με δικτυωτό δάπεδο και ράβδους από ανοξείδωτο χάλυβα (διάμετρος 1 cm) τοποθετημένες σε τακτά χρονικά διαστήματα στο πάτωμα, μέσω των οποίων μπορεί να προκληθεί ηλεκτροπληξία εφαρμόζεται στα πέλματα των ποδιών. Στο εξωτερικό τοίχωμα της μπροστινής όψης του κουτιού τοποθετήθηκε ένα κιγκλίδωμα (5×15 cm) που μόλις χωράει έναν αρουραίο και τοποθετήθηκε μια μικρή συρόμενη πόρτα (5×5 cm) μεταξύ του κιγκλιδώματος και του κουτιού αποφυγής. Ένα φως 50 W φώτισε τον αρουραίο και τοποθετήθηκε 45 cm πάνω από το κιγκλίδωμα. Οι αρουραίοι εγκλιματίστηκαν για 1 λεπτό στο bax αποφυγής πριν από το πείραμα (προσαρμογή). Στη συνέχεια, ο αρουραίος αφαιρέθηκε, τοποθετήθηκε στο κιγκλίδωμα και το φως των 50 W φώτισε τον αρουραίο. Η δοκιμή προσαρμογής τελείωσε όταν ο αρουραίος μπήκε στο κουτί αποφυγής (δοκιμή απόκτησης). Ο αρουραίος τοποθετήθηκε ξανά στο κιγκλίδωμα και ο αρουραίος μπήκε στο κουτί αποφυγής. Εφαρμόστηκε ηλεκτροπληξία 0,5 mA για 3 s ταυτόχρονα στα πέλματα (εκμάθηση). Ο αρουραίος τοποθετήθηκε αμέσως πίσω στο κιγκλίδωμα και μετρήθηκε ο χρόνος έως ότου ο αρουραίος μπήκε στο κουτί αποφυγής (προ-δοκιμή). Ο αρουραίος θυμάται την ηλεκτροπληξία και προσπαθεί να μπει στο σκοτεινό κουτί του διαμερίσματος. Μετά από 24 ώρες χωρίς ηλεκτροπληξία, ο αρουραίος τοποθετήθηκε στο κιγκλίδωμα και μετρήθηκε ο χρόνος μέχρι να εισέλθει στο κουτί αποφυγής (δοκιμή συγκράτησης). Τόσο στις δοκιμές απόκτησης όσο και στις δοκιμές συγκράτησης, καταγράφηκε ο χρόνος παραμονής στο κιγκλίδωμα από το κιγκλίδωμα υψηλού κινδύνου του αρουραίου έως την είσοδο στο σκοτεινό κουτί του διαμερίσματος.

2.5. Δοκιμή ανοιχτού πεδίου (OFT)

Τα συναισθηματικά πρότυπα συμπεριφοράς των πειραματόζωων παρατηρήθηκαν στο OFT. Αυτή η δοκιμή πραγματοποιήθηκε την ημέρα πριν από τη δοκιμή MWM και οι ακόλουθες συσκευές κατασκευάστηκαν για το OFT. Το OFT χρησιμοποίησε ένα μαύρο ξύλινο κουτί διαστάσεων 60×60×30 cm. Ένας λαμπτήρας πυρακτώσεως (60 W) εγκαταστάθηκε περίπου 2,5 μέτρα πάνω από το κέντρο του γηπέδου και το κέντρο ήταν πιο φωτεινό από το περιβάλλον, ειδοποιώντας έτσι τους αρουραίους. Όλες οι δοκιμές πραγματοποιήθηκαν εντός 3 ωρών κατά τη διάρκεια του νυχτερινού cwcle, που είναι ο κύκλος δραστηριότητας των αρουραίων, και ο χρόνος έκθεσης ήταν 5 λεπτά. Οι μεταβλητές που μετρήθηκαν κατά τη διάρκεια των 5 λεπτών της έκθεσης είναι οι εξής. Μετρήθηκε η απόσταση που πέρασε από το χωράφι για 5 λεπτά.

2.6. Συνθήκη φόβου με βάση τα συμφραζόμενα (CFC)

Το CFC πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας μια ξεχωριστή ομάδα αρουραίων που δεν υποβλήθηκαν στη δοκιμή MWM (n {0}} για κάθε ομάδα). Η δοκιμή CFC διεξήχθη ως μέθοδος για την αξιολόγηση της απόκρισης φόβου σε αρουραίους. Οι αρουραίοι εγκλιματίστηκαν σε έναν κλιματιζόμενο θάλαμο (CS, ηχητικός συναγερμός) για 5 λεπτά, στη συνέχεια εκτέθηκαν ξανά στον ίδιο θάλαμο και υποβλήθηκαν σε ένα μόνο ηλεκτροσόκ στο πόδι (το ΗΠΑ, 0,5 mA). Μετά από 24 ώρες, οι αρουραίοι επανεκτέθηκαν για λίγο (5 λεπτά) σε CS. Οι αρουραίοι εκτέθηκαν ξανά σε ενεργοποίηση τόνου (CS) στον ίδιο θάλαμο χωρίς ηλεκτροπληξία στα πόδια για να τονωθεί η μνήμη φόβου. Όταν οι αρουραίοι εκτίθενται ξανά στον ίδιο θάλαμο, οι αρουραίοι θυμούνται, ανακτώνται και παγιώνουν τις μνήμες φόβου, με αποτέλεσμα μια απόκριση παγώματος.

2.7. Ενζυμική ανάλυση ανοσοδοκιμασίας του φλεγμονώδους μεσολαβητή και των επιπέδων πρωτεΐνης NF-xB

Οι αρουραίοι υποβλήθηκαν σε ευθανασία αμέσως μετά το τεστ συμπεριφοράς και τα επίπεδα φλεγμονώδους κυτοκίνης μετρήθηκαν στον ιππόκαμπο χρησιμοποιώντας ενζυμικές ανοσοπροσροφητικές δοκιμασίες (ELISAs). Για να αποφευχθεί η αποσύνθεση ασταθών φλεγμονωδών δεικτών, ο ιππόκαμπος διαχωρίστηκε και αποθηκεύτηκε σε -80 βαθμό C μέχρι την ανάλυση. Ο εγκεφαλικός ιστός του ιππόκαμπου ομογενοποιήθηκε σε πάγο χρησιμοποιώντας ομογενοποιητή Polytron σε 1 χ PBS, ρΗ 7,4 που περιείχε ένα κοκτέιλ αναστολέα πρωτεάσης. Το προϊόν λύσης συλλέχθηκε και φυγοκεντρήθηκε στις 10,000 rpm για 10-15 λεπτά, και το υπερκείμενο συλλέχθηκε και προσδιορίστηκε ποσοτικά για κυτοκίνες. Οι φλεγμονώδεις κυτοκίνες(ⅡL-1 .L-4. Τα επίπεδα IL-6.IL-8.IL-12. και TNF-z) και NF-xB στον ιππόκαμπο ποσοτικοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας κιτ ELISA που διατίθενται στο εμπόριο σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή (Abcam, Cambridge , MA, ΗΠΑ, και Cell Signaling Technology, Danvers, MA, ΗΠΑ). Όλα τα δείγματα αξιολογήθηκαν εις τριπλούν. Ένα κλάσμα 50 μΙ του διαλύματος υποστρώματος προστέθηκε σε κάθε φρεάτιο για 20 λεπτά για να προκληθεί ανάπτυξη χρώματος, και στη συνέχεια οι ποσότητες των προφλεγμονωδών κυτοκινών και της πρωτεΐνης NF-xB μετρήθηκαν στα 450 nm χρησιμοποιώντας έναν αναγνώστη ELISA.

2.8. Απομόνωση ολικού RNA και ανάλυση RT-PCR

Η δοκιμασία αλυσιδωτής αντίδρασης ανάστροφης μεταγραφής-πολυμεράσης (RT-PCR) πραγματοποιήθηκε για να επιβεβαιωθούν οι αλλαγές στο BDNF και τη σχετιζόμενη με την τροπομυοσίνη κινάση Β (TrkB)mRNA. Το Trizol (Sigma-Aldrich) χρησιμοποιήθηκε για την απομόνωση του συνολικού RNA του εγκεφάλου. Το ολικό RNA συντέθηκε σε cDNA χρησιμοποιώντας την αντίδραση αντίστροφης μεταγραφάσης (Takara Bio, Otsu, Japan). Να αναλύσει τα επίπεδα έκφρασης του BDNF και του TrkB στο cDNA. Πειράματα PCR πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας κάθε εκκινητή. Ο εκκινητής γλυκεραλδεΰδης 3-φωσφορικής αφυδρογονάσης (GAPDH) χρησιμοποιήθηκε με τον ίδιο τρόπο όπως ένα εσωτερικό πρότυπο.

2.9. Western blot

Η ολική πρωτεΐνη εκχυλίστηκε από τον εγκέφαλο για να εξεταστεί η πρωτεΐνη p-PSD95 που υπάρχει στον ιππόκαμπο. Ο ιππόκαμπος ομογενοποιήθηκε σε ένα ρυθμιστικό διάλυμα λύσης που περιείχε έναν αναστολέα φωσφατάσης και έναν αναστολέα πρωτεάσης (CyQUANT; Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Η συγκέντρωση πρωτεΐνης μετρήθηκε χρησιμοποιώντας κιτ χρωματομετρικής δοκιμασίας πρωτεΐνης Bio-Rad (Bio-Rad Laboratories, Inc, Hercules, CA, USA). Μετά από αντίδραση με αντίσωμα p-PSD95 ποντικού (1:500, Cell Signaling Technology) προστέθηκε ένα δευτερεύον αντίσωμα συζευγμένο με υπεροξειδάση (συζευγμένο με HRP κατσίκας αντι-ποντικού IgG· Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Ένα κιτ χημειοφωταύγειας (Super Signal West Pico, Pierce, Rockford, IL, USA) χρησιμοποιήθηκε για την επιβεβαίωση της πρωτεΐνης που υποβλήθηκε σε επεξεργασία στη μεμβράνη. Η περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη αναλύθηκε χρησιμοποιώντας ένα ενισχυμένο σύστημα ανίχνευσης χημειοφωταύγειας (Santa Cruz Biotechnology) και μια μέθοδο μέτρησης πυκνότητας.

2.10. Στατιστική ανάλυση

Τα δεδομένα εκφράζονται ως μέσος όρος και ± τυπικό σφάλμα. Η ανάλυση των δεδομένων πραγματοποιήθηκε με λογισμικό SPSS 13.{1}}(SPSS Inc, Σικάγο, ΗΠΑ). Το Student's t-test εφαρμόστηκε για την αξιολόγηση της αλλαγής στο σωματικό βάρος και έγιναν μεμονωμένες συγκρίσεις χρησιμοποιώντας μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης (ANOVA) και το post-hoc τεστ Tukey για να αξιολογηθούν οι αλλαγές στις μετρήσεις συμπεριφοράς και το προφίλ κυτοκίνης. Μια τιμή p<0.05 was="" considered="">

3. Αποτελέσματα

3.1. Η μείωση του σωματικού βάρους σε μεμονωμένους αρουραίους που προκαλούνται από παρατεταμένο στρες

Μετρήσαμε τα σωματικά βάρη όλων των αρουραίων για 14 ημέρες και οι φυσιολογικοί αρουραίοι κέρδισαν σωματικό βάρος με την πάροδο του χρόνου (Εικ.2). Ωστόσο, το σωματικό βάρος μειώθηκε με την πάροδο του χρόνου στην ομάδα τραυματικού στρες που προκλήθηκε από SPS (SPSgroup, p<><0.01, and=""><0.001). however,="" in="" the="" krg-administered="" group,="" there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" body="" weight="" compared="" to="" the="" sps="" group="" for="" 14="" days.="" however,="" the="" differences="" in="" the="" body="" weights="" were="" not="" related="" to="" sps-induced="" memory="" impairment.="" nevertheless,="" as="" body="" weight="" is="" an="" important="" indicator="" of="" physiological="" health,="" and="" bodyweight="" deceased="" in="" the="" sps-induced="" rats,="" the="" rats="" were="" judged="" to="" have="" received="" sufficient="" traumatic="">

3.2. Το κορεατικό κόκκινο ginseng βελτιώνει τις βλάβες της γνωστικής και χωρικής μνήμης σε μεμονωμένους αρουραίους που προκαλούνται από παρατεταμένο στρες

Το Σχήμα 3 δείχνει τα αποτελέσματα του MWM που διεξήχθη για να προσδιοριστεί πώς το KRG επηρέασε τη γνωστική λειτουργία και τις ικανότητες μάθησης και μνήμης στο ζωικό μοντέλο SPS. Η διαφορά μεταξύ των ομάδων ήταν σημαντική την 5η ημέρα της προπόνησης [F(5,33)= 4.124, p<0.01(fig. 3a).="" the="" ability="" of="" the="" normal="" rats="" to="" find="" the="" hidden="" platform="" improved="" daily="" during="" the="" 5-day="" training="" phase="" (acquisition="" phase).="" however,="" the="" sps="" group="" spent="" more="" time="" looking="" for="" the="" hidden="" platform="" during="" the="" training="" phase="" than="" the="" saline-treated="" normal="" (sal)group="">< 0.05="" on="" day="" 5).="" as="" a="" result="" of="" analyzing="" the="" main="" effect="" of="" this="" difference="" by="" tukey's="" post="" hottest,="" the="" escape="" latency="" of="" the="" 100="" mg/kg="" krg-administered="" dose="" group="" was="" significantly="" shorter="" than="" that="" of="" the="" sps="" group=""><0.05 on="" day="" 5).="" the="" mwm="" results="" showed="" that="" the="" sps="" group="" delayed="" learning="" early="" in="" the="" training="" phase,="" particularly="" from="" the="" first="" day="" of="" the="" learning="" session,="" and="" that="" the="" learning="" delay="" caused="" by="" this="" sps="" procedure="" was="" suppressed="" by="" krg.="" the="" average="" swimming="" speed="" was="" not="" different="" between="" the="" groups(fig.="">

Η δοκιμή κατακράτησης έδειξε σημαντικές αλλαγές στην απόδοση όλων των αρουραίων. Συγκεκριμένα, οι κανονικοί αρουραίοι ήταν εξαιρετικά αποτελεσματικοί σε όλες τις πτυχές του τεστ χωρικής μνήμης. Ωστόσο, οι αρουραίοι που εκτέθηκαν σε SPS εμφάνισαν εξασθενημένη χωρική μνήμη (Εικ. 3C-F). Ωστόσο, η ομάδα που έλαβε 100 mg/kg KRG πέρασε σημαντικά αυξημένο χρόνο στην περιοχή στόχο σε σύγκριση με την ομάδα SPS (σ.<0.05). in="" addition,="" the="" number="" of="" entries="" into="" the="" target="" area="" increased="" significantly="" (p="" <="" 0.05).="" impairments="" in="" learning="" and="" memory="" were="" observed="" in="" the="" sps="" group="" during="" the="" mwm="" experiment,="" and="" these="" learning="" and="" memory="" impairments="" were="" pre-vented="" by="" administrating="" krg="" for="" 2="">

Για να επιβεβαιωθεί εάν το KRG ανακτά την εξασθένηση της μνήμης, το KRG χορηγήθηκε σε αρουραίους με ελλείμματα μνήμης που προκλήθηκαν από SPS και η λειτουργία μνήμης τους διερευνήθηκε από το PAT (Εικ. 4Α και Β). Ως αποτέλεσμα, η απόδοση της μνήμης δεν ήταν διαφορετική μεταξύ των ομάδων. Με άλλα λόγια, κανένας από τους αρουραίους δεν είχε γνωστικά προβλήματα κατά τη διάρκεια των δοκιμών απόκτησης χωρίς ηλεκτρική διέγερση. Ωστόσο, μετά από 24 ώρες, η δοκιμή κατακράτησης έδειξε ότι η ομάδα SAL είχε καλύτερη μάθηση παθητικής αποφυγής από την ομάδα SPS (σ.<0.05). the="" rats="" in="" the="" sps+="" krg100="" group="" showed="" an="" increased="" latency="" to="" enter="" the="" dark="" compartment="" for="" retention="" compared="" to="" the="" sps="" group,="" although="" this="" result="" was="" only="" marginally="" significant="" (p="" ¼="" 0.061).="" as="" the="" effect="" of="" the="" sps="" procedure="" or="" drug="" administration="" may="" be="" delayed="" by="" changing="" the="" locomotor="" activity="" of="" the="" animal,="" we="" examined="" the="" locomotor="" activity="" of="" animals="" in="" an="" environment="" similar="" to="" the="" breeding="" conditions="" as="" several="" behavior="" types.="" as="" a="" result="" of="" behavioral="" analysis,="" all="" other="" observed="" behaviors="" were="" not="" affected="" by="" traumatic="" stress="" or="" krg="" administration="" (fig.="">

3.3. Το κορεατικό κόκκινο ginseng βελτιώνει την εξασθενημένη μνήμη φόβου σε μεμονωμένους αρουραίους που προκαλούνται από παρατεταμένο στρες

Η συμπεριφορά κατάψυξης μέσω της εκπαίδευσης προετοιμασίας αυξάνεται σε αρουραίους με PTSD λόγω SPS. Η συμπεριφορά κατάψυξης των αρουραίων μετρήθηκε με την εκ νέου έκθεσή τους στο πλαίσιο όταν προκλήθηκε CFC για να αξιολογηθεί η επίδραση του KRG. Η συμπεριφορά κατάψυξης μετρήθηκε με έκθεση για 5 λεπτά κατά τη διάρκεια του CFC (Εικ. 4D και E). Η εκ των υστέρων δοκιμή έδειξε ότι ο χρόνος παγώματος ήταν σημαντικά μεγαλύτερος στην ομάδα SPS από ό,τι στην ομάδα SAL (p < 0.{10}}1="" στις="" ημέρες="" 7="" και="" 14,="" αντίστοιχα).="" ωστόσο,="" η="" χορήγηση="" 100="" mg/kg="" krg="" την="" ημέρα="" 14="" μείωσε="" σημαντικά="" τον="" χρόνο="" κατάψυξης="" σε="" σύγκριση="" με="" την="" ομάδα="" sps="" (ρ=""><>

3.4. Το κορεατικό κόκκινο ginseng μειώνει τις προφλεγμονώδεις κυτοκίνες και αυξάνει τις αντιφλεγμονώδεις κυτοκίνες στον ιππόκαμπο αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με παρατεταμένο στρες

Το Σχ. 5~ AF δείχνει τα αποτελέσματα της χορήγησης KRG στην έκφραση φλεγμονωδών κυτοκινών στον ιστό του ιππόκαμπου με ELISA. Οι προφλεγμονώδεις κυτοκίνες (IL-1b, IL-6 και IL-8) αυξήθηκαν στην ομάδα SPS (p < 0.05="" και="" p.="">< 0.001),="" ενώ="" και="" οι="" αντιφλεγμονώδεις="" κυτοκίνες="" (il-12)="" μειώθηκαν="" (p="">< 0,01).="" ωστόσο,="" η="" χορήγηση="" krg="" (100="" mg/kg)="" μείωσε="" σημαντικά="" την="" αύξηση="" των="" επιπέδων="" των="" προφλεγμονωδών="" δεικτών="" il-6="" και="" il-8="" στον="" ιππόκαμπο="" που="" προκαλείται="" από="" sps="" (p="">< 0,05,="" αντίστοιχα).="" επιπλέον,="" η="" χορήγηση="" krg="" (100="" mg/kg)="" μείωσε="" σημαντικά="" τη="" μείωση="" του="" αντιφλεγμονώδους="" δείκτη="" il-12="" στον="" ιππόκαμπο="" από="" το="" sps="" (ρ=""><>

3.5. Το κορεατικό κόκκινο ginseng μειώνει την ενεργοποίηση του NF-kB στον ιππόκαμπο αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με ένα παρατεταμένο στρες

Το Σχ. 5G δείχνει τα αποτελέσματα της χορήγησης KRG στο επίπεδο NF-kB σε ιστό ιππόκαμπου με ELISA. Σημαντική αύξηση στο επίπεδο NF-kB παρατηρήθηκε στον ιππόκαμπο της ομάδας SPS σε σύγκριση με την ομάδα SAL (p < 0.01).="" ωστόσο,="" το="" krg="" (100="" mg/kg)="" μείωσε="" σημαντικά="" την="" αύξηση="" των="" επιπέδων="" nf-kb="" στον="" ιππόκαμπο="" που="" προκλήθηκε="" από="" το="" sps="" (p=""><>

3.6. Το κορεατικό κόκκινο ginseng αυξάνει την έκφραση των mRNAs BDNF στον ιππόκαμπο αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με παρατεταμένο στρες

Τα επίπεδα BDNF και TrkB mRNA διερευνήθηκαν μετά από χορήγηση SPS και KRG χρησιμοποιώντας ανάλυση PCR (Εικ. 6Α). Το mRNA του BDNF μειώθηκε σημαντικά στην ομάδα SPS σε σύγκριση με την ομάδα SAL (p < 0.05).="" ωστόσο,="" στην="" ομάδα="" που="" υποβλήθηκε="" στην="" επαναλαμβανόμενη="" προεπεξεργασία="" krg,="" το="" mrna="" του="" bdnf="" αυξήθηκε="" σημαντικά="" σε="" σύγκριση="" με="" την="" ομάδα="" sps="" (252,51="" τοις="" εκατό,=""><0.05). also,="" trkb="" mrna="" level="" in="" the="" sps="" group="" decreased="" compared="" to="" the="" sal="" group,="" although="" this="" result="" was="" only="" marginally="" significant(p="0.062)." unfortunately,="" there="" was="" no="" difference="" in="" trkb="" mrna="" in="" all="">

3.7. Το κορεατικό κόκκινο τζίνσενγκ προάγει τη σύνθεση της συναπτικής πρωτεΐνης PSD-95 στον ιππόκαμπο αρουραίων που έλαβαν θεραπεία με παρατεταμένο στρες

Μετρήσαμε τον δείκτη μετασυναπτικής κύστης PSD-95, ο οποίος εμπλέκεται στη βελτίωση της χωρικής και γνωστικής μνήμης βελτιώνοντας τη συναπτική πλαστικότητα. Ως αποτέλεσμα, το επίπεδο πρωτεΐνης PSD-95 μειώθηκε στην ομάδα SPS σε σύγκριση με την ομάδα SAL, αν και αυτό το αποτέλεσμα ήταν μόνο οριακά σημαντικό (ρ= 0.482). Επίσης, η θεραπεία με KRG αύξησε το επίπεδο πρωτεΐνης PSD-95 σε σύγκριση με την ομάδα SPS, αν και αυτό το αποτέλεσμα ήταν μόνο οριακά σημαντικό (ρ =0.094).

4. Συζήτηση

Η μελέτη μας έδειξε ότι το SPS επηρεάζει τη γνωστική λειτουργία, συμπεριλαμβανομένης της μάθησης και της μνήμης, και ότι το SPS αύξησε τις φλεγμονώδεις κυτοκίνες με τη μεσολάβηση NF-xB και μείωσε τη ρύθμιση του BDNF και της πρωτεΐνης συναπτικής πλαστικότητας, PSD-95 στον ιππόκαμπο. Ωστόσο, η χορήγηση KRG μείωσε τη μνήμη υπό όρους φόβου, βελτίωσε τη μάθηση και τις διαταραχές της μνήμης, ανέστειλε την παραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών και αύξησε την παραγωγή αντιφλεγμονωδών κυτοκινών σε αρουραίους που προκλήθηκαν από SPS. Επιπλέον, η θεραπεία με KRG προώθησε τα επίπεδα BDNF και αποκατέστησε την έκφραση PSD-95, μια συναπτική πρωτεΐνη που εντοπίζεται στον ιππόκαμπο. και θα μπορούσε να χρησιμεύσει ως αποτελεσματικός αντιφλεγμονώδης και πιθανός νευροπροστατευτικός παράγοντας.

Ερευνήσαμε τη δοσοεξαρτώμενη επίδραση του KRG για να επιβεβαιώσουμε τη βέλτιστη αποτελεσματικότητα. Επιλέξαμε δόση 100 mg/kg. Αυτή η δόση έχει ήδη αποδειχθεί αποτελεσματική σε πολλές μελέτες [21]. Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι το KRG ενισχύει τη μνήμη σε ασθενείς με νευροεκφυλιστικές διαταραχές μνήμης, όπως η AD [25], η επαγόμενη από τη D-γαλακτόζη γήρανση [26] και το μοντέλο LPS [27] Επιπλέον, το KRG μειώνει την αύξηση στον ορό επίπεδα κορτικοστερόνης που προκαλούνται από το στρες [19]. Ως εκ τούτου, τα αποτελέσματά μας επιβεβαιώνουν ότι το KRG απέτρεψε τις αλλαγές συμπεριφοράς μετά από διαταραχή μνήμης που προκαλείται από PTSD και γνωστική δυσλειτουργία, παρόμοια με μια προηγούμενη μελέτη [19].

Σε αυτή τη μελέτη, πραγματοποιήσαμε τις δοκιμές PAT και MWM, οι οποίες είναι δύο διαφορετικοί τύποι δοκιμών μνήμης. Η μελέτη μας έδειξε ότι το SPS μείωσε σημαντικά τη διατήρηση της μνήμης μειώνοντας σημαντικά τον λανθάνοντα χρόνο κατά τη διάρκεια της δοκιμής διατήρησης του PAT. Ωστόσο, η χορήγηση KRG αποκατέστησε σημαντικά τη διατήρηση της μνήμης και την ικανότητα ανάκτησης μνήμης, παρατείνοντας τον λανθάνοντα χρόνο. Επιπλέον, οι αρουραίοι που προκλήθηκαν από το SPS έδειξαν σημαντικά μεγαλύτερες καθυστερήσεις διαφυγής για να φτάσουν στην πλατφόρμα και εμφάνισαν κακή απόδοση χωρικής μάθησης [28). Το SPS οδήγησε σε εξασθενημένη ενοποίηση και ανάκτηση μνήμης στο τεστ διατήρησης [28]. Ωστόσο, η χορήγηση του KRG μείωσε τον λανθάνοντα χρόνο διαφυγής, γεγονός που είχε ως αποτέλεσμα μικρές αποστάσεις διαφυγής στο τεστ χωρικής μάθησης. Επιπλέον, η χορήγηση KRG βελτίωσε την ταχύτητα εκμάθησης και την ικανότητα ενοποίησης της μνήμης βελτιώνοντας τους χρόνους διέλευσης και τις αποστάσεις στόχου γύρω από το τεταρτημόριο στόχου στη δοκιμή χωρικής ανίχνευσης. Τα αποτελέσματά μας υποδηλώνουν ότι το KRG βελτίωσε σημαντικά τις σοβαρές δυσκολίες ανάκλησης και ανάκτησης μνήμης που προκαλούνται από τη διαδικασία SPS. Καθώς δεν παρατηρήθηκε διαφορά μεταξύ των ομάδων στο OFT, το οποίο μετρά την ποσότητα της κινητικής δραστηριότητας, το KRG δεν επηρέασε τις ανωμαλίες της κινητικής λειτουργίας ή τη βελτίωση της κινητικής απόδοσης. Η συντόμευση του χρόνου που χρειάστηκε για να φτάσει στην πλατφόρμα μετά τη χορήγηση του KRG προέκυψε από βελτιωμένη εξασθένηση της μνήμης και όχι από βελτίωση της κινητικής δραστηριότητας των αρουραίων. Επίσης, η χορήγηση KRG ανακούφισε τη μνήμη φόβου που προκλήθηκε από το SPS.

Οι φλεγμονώδεις καταιγίδες είναι ένας σημαντικός παράγοντας που οδηγεί σε εξασθένηση της γνωστικής και χωρικής μνήμης [29]. Πολλές μελέτες έχουν δείξει ότι μια ταχεία και επίμονη φλεγμονώδης απόκριση καταστρέφει το δίκτυο μνήμης, αυξάνει την παραγωγή φλεγμονωδών κυτοκινών και αλλάζει την έκφραση της πρωτεΐνης, οδηγώντας σε νευροεκφυλιστικές ασθένειες, όπως η AD και η νόσος του Πάρκινσον [13,30]. Επομένως, η φλεγμονώδης καταιγίδα που προκαλείται από το ζωικό μοντέλο SPS βλάπτει τις γνωστικές και μνημονικές λειτουργίες και η καταστολή της φλεγμονώδους καταιγίδας καταστέλλει την έκπτωση της λειτουργίας της μνήμης [31]. Στη μελέτη μας, η έκκριση των προφλεγμονωδών κυτοκινών (IL-1b, IL-6 και IL-8) ​​αυξήθηκε και η έκκριση των αντιφλεγμονωδών κυτοκινών (IL{{10 }}) μειώθηκε στον ιππόκαμπο σε ένα ζωικό μοντέλο που προκλήθηκε από SPS, με αποτέλεσμα σοβαρά γνωστικά ελλείμματα. Ωστόσο, η χορήγηση KRG μείωσε την υπερπαραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών και κατέστειλε τη μείωση των αντιφλεγμονωδών κυτοκινών στον ιππόκαμπο που προκαλείται από το SPS. Αυτές οι αντιφλεγμονώδεις αντιδράσεις βελτιώνουν τη νευροφλεγμονή αναστέλλοντας την ενεργοποίηση της οδού NF-kB στον ιππόκαμπο. Το KRG προστατεύει από τη βλάβη της μνήμης και τη νευροφλεγμονή που προκαλείται από το SPS, ενεργοποιώντας την οδό NF-kB. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι το KRG αποδυνάμωσε σημαντικά τις αλλαγές συμπεριφοράς από τις επαγόμενες από το SPS γνωστικές διαταραχές αναστέλλοντας τη νευροφλεγμονή και ενεργοποιώντας τις προ-και αντιφλεγμονώδεις κυτοκίνες και την οδό NF-kB.

Το BDNF είναι μια ευρέως κατανεμημένη πρωτεΐνη σηματοδότησης στο κεντρικό νευρικό σύστημα [32]. Το BDNF προάγει την επιβίωση, την ανάπτυξη, τη διαφοροποίηση και την ανάπτυξη των νευρώνων και παίζει σημαντικό ρόλο στη νευρωνική δομή και τη συναπτική πλαστικότητα [32]. Το BDNF ενεργοποιεί τον καταρράκτη σηματοδότησης NF-kB για τη ρύθμιση φλεγμονωδών ουσιών, όπως οι φλεγμονώδεις κυτοκίνες, για την πρόκληση επιβίωσης των κυττάρων και για την αύξηση της συναπτικής πλαστικότητας ενεργοποιώντας την οδό mTOR μέσω της ρύθμισης των σημάτων Akt και ERK [33]. Επομένως, η σηματοδότηση BDNF στον ιππόκαμπο παίζει σημαντικό ρόλο στον νευροπαθολογικό μηχανισμό της PTSD [34]. Το BDNF είναι ένας σημαντικός μεσολαβητής μεταξύ της γνωστικής έκπτωσης και της νευροφλεγμονής και η ρύθμιση της σηματοδότησης του BDNF μπορεί να είναι ένας σημαντικός τρόπος ρύθμισης της νευροφλεγμονής και της γνωστικής λειτουργίας σε αρουραίους που έχουν υποστεί βλάβη από το στρες [35]. Πολλές μελέτες έχουν δείξει ότι η νευροφλεγμονή μειώνει το επίπεδο BDNF στον ιππόκαμπο [36]. Η νευροφλεγμονή που προκαλείται από το SPS αλλάζει τη συναπτική πλαστικότητα ρυθμίζοντας προς τα κάτω την οδό BDNF-TrkB [37]. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι το SPS μείωσε την έκφραση του mRNA του BDNF που σχετίζεται με την εξασθένηση της μνήμης και μείωσε την έκφραση του PSD-95 στους αρουραίους. Ωστόσο, το KRG ανέστειλε τη μείωση της έκφρασης mRNA του BDNF και ρύθμισε προς τα πάνω το επίπεδο έκφρασης του PSD-95 στον ιππόκαμπο που προκαλείται από το SPS.

Ως εκ τούτου, η χορήγηση KRG βελτίωσε τις γνωστικές λειτουργίες και ικανότητες, όπως η απόκτηση μάθησης, η εδραίωση μνήμης και η εξαφάνιση της μνήμης φόβου στο ζωικό μοντέλο με εξασθένηση μνήμης που προκαλείται από SPS, ρυθμίζοντας τη σηματοδότηση BDNF, τις συναπτικές πρωτεΐνες και την ενεργοποίηση NF-kB. Τα ευρήματά μας υποδηλώνουν ότι το KRG είναι μια χρήσιμη εναλλακτική θεραπεία για γνωστικές δυσλειτουργίες που σχετίζονται με τραυματικό στρες, όπως αυτή που εμφανίζεται κατά τη διάρκεια του PTSD. Επιπλέον, υπάρχει ανάγκη να διερευνηθούν περαιτέρω οι προληπτικές επιδράσεις του KRG στη βελτίωση της μνήμης και των βασικών μηχανισμών της στο μέλλον.

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] Ceremuga TE, Shellabarger P, Persson T, Fanning M, Galey P, Robinson D, Bertsch S, Ceremuga GA, Bentley M. Επιδράσεις της τετραϋδροπαλματίνης στις αλλαγές που προκαλούνται από μετατραυματικό στρες στην έκφραση γονιδίου του εγκεφάλου αρουραίου. J Integr Neurosci 2013; 12:513e28.

[2] Kessler RC. Διαταραχή μετατραυματικού στρες: η επιβάρυνση του ατόμου και της κοινωνίας. J Clin Psychiatr 2000;61:4e12.

[3] Hopper JW, Frewen PA, van der Kolk BA, Lanius RA. Νευρικές συσχετίσεις της επανεμπειρίας, της αποφυγής και της διάστασης στο PTSD: διαστάσεις συμπτωμάτων και δυσρύθμιση συναισθήματος σε απαντήσεις σε εικόνες τραύματος που οδηγούνται από το σενάριο. J Trauma Stress 2007;20:713e25.

[4] Leskin LP, White PM. Τα δίκτυα προσοχής αποκαλύπτουν ελλείμματα εκτελεστικών λειτουργιών στη διαταραχή μετατραυματικού στρες. Neuropsychology 007;21:275-284.

[5] Han F, Xiao B, Wen L, Shi Y. Επιδράσεις της φλουοξετίνης στην αμυγδαλή και τον ιππόκαμπο μετά από χορήγηση μεμονωμένου παρατεταμένου στρες σε αρσενικούς αρουραίους Wistar: in vivo ευρήματα φασματοσκοπίας μαγνητικού συντονισμού πρωτονίων. Psychiatr Res 2015;232:154e61.

[6] Takahashi T, Morinobu S, Iwamoto Y, Yamawaki S. Επίδραση της παροξετίνης στον ενισχυμένο φόβο που προκαλείται από το παρατεταμένο άγχος σε αρουραίους. Psychopharmacology 2006;189:165e73.

[7] Ebenezer PJ, Wilson CB, Wilson LD, Nair AR, Francis J. The Anti-flammatory Effects of Blueberries in an Animal Model of Post-Traumatic Stress Disorder (PTSD). PLoS One 2016; 11:e0160923.

[8] Wang SC, Lin CC, Chen CC, Tzeng NS, Liu YP. Επιδράσεις της ωκυτοκίνης στη μνήμη του φόβου και τη νευροφλεγμονή σε ένα τρωκτικό μοντέλο διαταραχής μετατραυματικού στρες. Int J Mol Sci 2018; 19:3848 [Κριτική].

[9] Ebenezer PJ, Wilson CB, Wilson LD, Nair AR. Οι αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις των βατόμουρων σε ένα ζωικό μοντέλο διαταραχής μετατραυματικού στρες (PTSD). PloS One 2016;11:e0160923.

[10] Wang SC, Lin CC, Chen CC, Tzeng NS, Liu YP. Επιδράσεις της ωκυτοκίνης στη μνήμη του φόβου και τη νευροφλεγμονή σε ένα μοντέλο τρωκτικών διαταραχής μετατραυματικού στρες. Int J Mol Sci 2018a;19:3848e58.

[11] Lai S, Wu G, Jiang Z. Η θεραπεία με γλυκυρριζίνη διευκολύνει την εξάλειψη των εξαρτημένων αντιδράσεων φόβου μετά από μία παρατεταμένη έκθεση σε στρες σε αρουραίους. Cell Physiol Biochem 2018;45:2529e39.

[12] Liu M, Xie J, Sun Y. TLR4/MyD88/NF-kappaB-μεσολαβούμενη φλεγμονή συμβάλλει στην καρδιακή δυσλειτουργία σε αρουραίους με PTSD. Cell Mol Neurobiol 2020;40: 1029e35.

[13] Cunningham C, Hennessy E. Συννοσηρότητα και συστημική φλεγμονή ως οδηγοί γνωστικής έκπτωσης: νέα πειραματικά μοντέλα που υιοθετούν ένα ευρύτερο παράδειγμα στην έρευνα για την άνοια. Alzheimer's Res Ther 2015; 7:33e40.

[14] Li XM, Han F, Liu DJ, Shi YX. Μοναδική παρατεταμένη από το στρες εξαρτώμενη από μιτοχονδριακή απόπτωση στον ιππόκαμπο στο μοντέλο αρουραίου της διαταραχής μετατραυματικού στρες. J Chem Neuroanat 2010; 40:248e55.

[15] Wang W, Wang R, Xu J, Qin X, Jiang H, Khalid A, Liu D, Pan F, Ho CSH, Ho RCM. Η μινοκυκλίνη εξασθενεί τις αλλαγές συμπεριφοράς που προκαλούνται από το στρες μέσω των αντιφλεγμονωδών επιδράσεών της σε ένα ζωικό μοντέλο διαταραχής μετατραυματικού στρες. Front Psychiatr 2018b;9:558e68.

[16] Oh JY, Kim YK, Kim SN, Lee B, Jang JH, Kwon S, Park HJ. Ο βελονισμός ρυθμίζει την απόκριση στο στρες μέσω της οδού σηματοδότησης mTOR σε ένα μοντέλο διαταραχής μετατραυματικού στρες αρουραίου. Sci Rep 2018; 8:11864e74.

[17] Li M, Xie Y, Niu K, Li K. Ο ηλεκτροβελονισμός βελτιώνει τη διαταραχή μετατραυματικού στρες σε αρουραίους μέσω ενός μηχανισμού που περιλαμβάνει το μονοπάτι σηματοδότησης BDNF-TrkB. Cell Mol Biol 2020; 66:165e70.

[18] Dias L, Lopes CR, Gonçalves FQ, Nunes A, Pochmann D, Machado NJ, Tom e AR, Agostinho P, Cunha RA. Διαφωνία μεταξύ ATP-P 2X7 και υποδοχέων αδενοσίνης A 2A που ελέγχουν τη νευροφλεγμονή σε αρουραίους που υπόκεινται σε επαναλαμβανόμενο στρες περιορισμού. Front Cell Neurosci 2021; 1:639322e63932.

[19] Lee B, Sur B, Lee H, Oh S. Το κορεατικό κόκκινο τζίνσενγκ αποτρέπει συμπεριφορές κατάθλιψης που προκαλούνται από μετατραυματικό στρες σε αρουραίους μέσω της ενεργοποίησης του σεροτονινεργικού συστήματος. J Ginseng Res 2020; 44:644e54.

[20] Kim S, Lee Y, Cho J. Το κορεατικό κόκκινο εκχύλισμα ginseng παρουσιάζει νευροπροστατευτικά αποτελέσματα μέσω της αναστολής του αποπτωτικού κυτταρικού θανάτου. Biol Pharm Bull 2014; 37: 938e46.

[21] Lee J, Cho JY, Kim WK. Αντιφλεγμονώδες αποτέλεσμα της άσκησης και του κορεατικού κόκκινου τζίνσενγκ σε γερασμένους αρουραίους με αθηροσκλήρωση που προκαλείται από δίαιτα. Nutr Res Pract 2014; 8:284e91.

[22] Park JK, Shim JY, Cho AR, Cho MR, Lee YJ. Το κορεατικό κόκκινο τζίνσενγκ προστατεύει από τη μιτοχονδριακή βλάβη και την ενδοκυτταρική φλεγμονή σε ένα ζωικό μοντέλο με σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2. J Med Food 2018; 21:544e50.

[23] Jin SH, Park JK, Nam KY, Park SN, Jung NP. Οι κορεατικές σαπωνίνες κόκκινου ginseng με χαμηλές αναλογίες πρωτοπαναξαδιόλης και σαπωνίνης πρωτοπαναξατριόλης βελτιώνουν τη μαθησιακή δυσκολία που προκαλείται από τη σκοπολαμίνη και τη χωρική μνήμη εργασίας σε ποντίκια. J Ethnopharmacol 1999, 66:123e9.

[24] Serova LI, Laukova M, Alaluf LG, Pucillo L, Sabban EL. Το ενδορινικό νευροπεπτίδιο Υ αναστρέφει το άγχος και την καταθλιπτική συμπεριφορά που επηρεάζεται από το μοντέλο PTSD με παρατεταμένο στρες. Eur Neuropsychopharmacol 2014; 24:142e7.

[25] Lee S, Youn K, Jun M. Οι κύριες ενώσεις του ελαίου κόκκινου ginseng εξασθενούν την απόπτωση και τη φλεγμονή των νευρώνων που προκαλείται από Abeta(25- 35) διαμορφώνοντας το μονοπάτι MAPK/NF kappaB. Food Func 2018; 9:4122e34.

[26] Park S, Kim CS, Min J, Lee SH, Jung YS. Μια δίαιτα υψηλής περιεκτικότητας σε λιπαρά αυξάνει την οξειδωτική νεφρική βλάβη και τη γλυκοζυλίωση των πρωτεϊνών σε γηρασμένους αρουραίους που προκαλούνται από D-γαλακτόζη και προλαμβάνει το κόκκινο τζίνσενγκ της Κορέας. J Nutr Sci Vitaminol 2014;60:159e66.

[27] Sun K, Wang CS, Guo J, Horie Y, Fang SP, Wang F, Liu YY, Liu LY, Yang JY, Fan JY, Han JY. Προστατευτικές επιδράσεις της ginsenoside Rb1, της ginsenoside Rg1 και της notoginsenoside R1 στην μικροκυκλοφορική διαταραχή του μεσεντερίου αρουραίου που προκαλείται από λιποπολυσακχαρίτες. Life Sci 2007; 81:509e18.

[28] Lee B, Hong R, Lim P, Cho D, Yeom M, Lee S, Kang KS, Lee SC, Shim I, Lee H, Hahm DH. Το αιθανολικό εκχύλισμα Aralia continental βελτιώνει τα γνωστικά ελλείμματα μέσω τροποποιήσεων της έκφρασης του BDNF και των αντιφλεγμονωδών επιδράσεων σε ένα μοντέλο αρουραίου με διαταραχή μετατραυματικού στρες. BMC Compl Alternative Med 2019; 19:11e20.

[29] Hajipour S, Farbood Y, Gharib-Naseri MK, Goudarzi G, Rashno M, Maleki H, Bakhtiari N, Ansari A, Khoshnam SE, Dianat M, Sarkaki B, Sarkaki A. Η έκθεση σε σωματίδια με σκόνη του περιβάλλοντος βλάπτει τη χωρική μνήμη και LTP του ιππόκαμπου αυξάνοντας τη φλεγμονή του εγκεφάλου και το οξειδωτικό στρες σε αρουραίους. Life Sci 2020;242:117210e20.

[30] Olsson A, Csajbok L, Ost M, H€ Hoglund K, Nylen K, Rosengren L, Nellgård B, Blennow K. Σημαντική αύξηση του βήτα-αμυλοειδούς(1-42) και της πρόδρομης πρωτεΐνης του αμυλοειδούς στο κοιλιακό εγκεφαλονωτιαίο υγρό μετά από σοβαρή εγκεφαλική βλάβη. J Neurol 2004; 251:870e6.

[31] Gong QH, Pan LL, Liu XH, Wang Q, Huang H, Zhu YZ. Η S-προπαργυλ-κυστεΐνη (ZYZ-802), ένα αμινοξύ που περιέχει θείο, εξασθενεί τα γνωστικά ελλείμματα που προκαλούνται από βήτα-αμυλοειδές και την προφλεγμονώδη απόκριση: εμπλοκή της οδού ERK1/2 και NF-kB σε αρουραίους. Amino Acids 2011; 40:601e10. [32] Yamada K, Mizuno M, Nabeshima T. Ρόλος για τον νευροτροφικό παράγοντα που προέρχεται από τον εγκέφαλο στη μάθηση και τη μνήμη. Life Sci 2002; 70:735e44.

[33] Multi A, Ma S, Zhang H, Ren B, Zhao B, Wang L, Liu X, Zhao T, Kamanova S, Sair AT, Liu Z, Liu X. Τα φλαβονοειδή του ιπποφαούς ανακουφίζουν την υψηλή περιεκτικότητα σε λιπαρά και τη φρουκτόζη γνωστική εξασθένηση που προκαλείται από τη διατροφή με την αναστολή της αντίστασης στην ινσουλίνη και της νευροφλεγμονής. J Agric Food Chem 2020; 68:5835e46.

[34] Ni L, Xu Y, Dong S, Kong Y, Wang H, Lu G, Wang Y, Li Q, Li C, Du Z, Sun H, Sun L. Ο πιθανός ρόλος του καναλιού ιόντων HCN1 και του BDNF- Μονοπάτια σηματοδότησης mTOR και συναπτική μετάδοση στην ανακούφιση του PTSD. Transl Psychiatry 2020;10:101e10.

[35] Barrientos RM, Sprunger DB, Campeau S, Watkins LR, Rudy JW, Maier SF. Η έκφραση του mRNA του BDNF στον ιππόκαμπο αρουραίου μετά από μάθηση με βάση τα συμφραζόμενα αποκλείεται από τη χορήγηση βήτα ενδοιπποκαμπικής IL-1. J Neuroimmunol 2004;155:119e26.

[36] Guan Z, Fang J. Η περιφερειακή ανοσολογική ενεργοποίηση από λιποπολυσακχαρίτη μειώνει τις νευροτροφίνες στον φλοιό και στον ιππόκαμπο σε αρουραίους. Brain Behav Immun 2006;20:64e71.

[37] Ji LL, Peng JB, Fu CH, Cao D, Li D, Tong L, Wang ZY. Η ενεργοποίηση του υποδοχέα Sigma-1 βελτιώνει τη συμπεριφορά που μοιάζει με άγχος και τις γνωστικές βλάβες σε ένα μοντέλο αρουραίου διαταραχής μετατραυματικού στρες. Behav Brain Res 2016;311: 408e15.