Λειτουργική ανταπόκριση των κυττάρων Τ μνήμης από ασθενείς με COVID-19

για περισσότερες πληροφορίες:ali.ma@wecistanche.com

Ece Tavukcuoglua,, Utku Horzum1 a,, Ahmet Cagkan Inkaya1, Serhat Unal, bb Gunes Esendaglia, *

Τμήμα Βασικής Ογκολογίας, Πανεπιστημιακό Ινστιτούτο Καρκίνου Hacettepe, Άγκυρα, Τουρκία

β Τμήμα Λοιμωδών Νοσημάτων, Ιατρική Σχολή, Πανεπιστήμιο Hacettepe, Άγκυρα, Τουρκία

Λέξεις-κλειδιά: SARS-CoV-2 ΚεντρικόμνήμηΤ κύτταρα, EffectorμνήμηΤ κύτταρα, γλυκοπρωτεΐνη Spike S1 Δενδριτικά κύτταρα Βοηθητικά Τ κύτταρα Κυτταροτοξικά Τ λεμφοκύτταρα

ΑΦΗΡΗΜΕΝΗ: Η παρουσία τουμνήμηΤα Τ κύτταρα σε ασθενείς με COVID-19 έχουν αναγνωριστεί, ωστόσο η λειτουργική ισχύς τουμνήμηοι απαντήσεις είναι κρίσιμες για την προστασία. Σε αυτή τη μελέτη, αφελής, τελεστής, τελεστής μνήμης και κεντρικήςμνήμηΤα CD4 plus και CD8 plus T κύτταρα που λήφθηκαν από τους επιζώντες του COVID-19 εκτέθηκαν εκ νέου σε αυτόλογα μονοκύτταρα DC που ήταν φορτωμένα με SARS-CoV-2 ακίδα γλυκοπρωτεΐνης S1. Ικανότητα πολλαπλασιασμού, CD25, 4-1BB και PD-1

έκφραση και έκκριση IFN-, IL-6, granzyme, granulysin και FasL ενισχύθηκαν σε CD4 plus και CD8 plusμνήμηκαι κεντρικήμνήμηΤ κύτταρα. Αν και βρίσκεται σε ετερογενή επίπεδα, τομνήμηΤα Τ κύτταρα από τα άτομα με ιστορικό COVID-19 διαθέτουν λειτουργικές ικανότητες να αναζωογονούν την αντι-ιική ανοσία έναντι του SARS-CoV-2.

Κάντε κλικ στοCistanche deserticola ma για τη βελτίωση της μνήμης

1. Εισαγωγή

Παρά τα αναδυόμενα δεδομένα για τη νόσο του κοροναϊού 2019 (COVID-19), η ανοσολογική απόκριση στο σοβαρό οξύ αναπνευστικό σύνδρομο κοροναϊός 2 (SARS-CoV-2) παραμένει να καθοριστεί καλύτερα. Η ισχύς και η διάρκεια των χυμικών και κυτταρικών αποκρίσεων κατά του SARS-CoV-2 έχουν συσχετιστεί με εξουδετερωτικά αντισώματα καιμνήμηΤ κύτταρα [1,2]. Ειδικά, η ακίδα γλυκοπρωτεΐνη-S1 φέρει σημαντική ανοσοκυριαρχία αφού τα εξουδετερωτικά αντισώματα εμποδίζουν την προσκόλλησή της στο ένζυμο μετατροπής της αγγειοτενσίνης 2 (ACE2) και εμποδίζουν την είσοδο του ιού [3]. Εκτός αυτού, περίπου το 50 τοις εκατό των ασθενών εμφάνισαν ειδικές αποκρίσεις S1- Τ κυττάρων [4,5].

Ωστόσο, η ετερογένεια που παρατηρείται μεταξύ των περιπτώσεων COVID-19 έχει σύγχυση. Ενώ η πλειονότητα των ασθενών αναπτύσσει αντι-ιική ανοσία, ακόμη και τα άτομα που αναρρώνουν μπορεί να μην προστατεύονται από την επαναμόλυνση που πιθανώς οφείλεται στο ανεπαρκές μέγεθος ή/και σταθερότητα της παραγωγής Τ κυττάρων και αντισωμάτων [6-8]. Περιέργως, σε σοβαρές λοιμώξεις SARS-CoV-2, η αλληλεπίδραση μεταξύ των CD4 συν βοηθητικών Τ (Th) κυττάρων και των Β κυττάρων αμβλύνεται στο βλαστικό κέντρο, γεγονός που δυνητικά μειώνει τη μακροζωία των αποκρίσεων αντισωμάτων [9]. Μαζί με τις δραστηριότητες Th, η ευρωστία των CD8 συν κυτταροτοξικών Τ κυττάρων είναι επίσης καθοριστικής σημασίας για μια επιτυχημένη αντι-ιική ανοσία [10]. Προηγουμένως, η παρουσία CD4 plus ή CD8 plusμνήμηΤα Τ κύτταρα αναφέρθηκαν στον COVID-19, ωστόσο, οι λειτουργικές ικανότητες αυτών των κυττάρων πρέπει να αντιμετωπιστούν διεξοδικά [11–13]. Σε αυτή τη μελέτη, η λειτουργική ανταπόκριση του αφελούς, τελεστή, κεντρικήμνήμη, και τελεστής μνήμης CD4 plus ή CD8 plus Τ κύτταρα, που ελήφθησαν από ασθενείς με ιστορικό COVID-19, έναντι δενδριτικών κυττάρων (DCs) που προέρχονται από μονοκύτταρα που φέρουν αντιγόνο SARS-CoV-2 S1 επιβεβαιώνεται.

2. Υλικό και μέθοδοι

2.1. Ασθενείς και συλλογή δειγμάτων

Σε δύο διαφορετικά χρονικά σημεία, συλλέχθηκαν πρόσφατα δείγματα περιφερικού αίματος από τους ασθενείς που αναρρώθηκαν από τον COVID-19 (Πίνακας 1) και τα μονοπύρηνα κύτταρα περιφερικού αίματος διαχωρίστηκαν με 1,077 g/mL διαβάθμισης πυκνότητας Ficoll (Sigma-Aldrich). Όλα τα πρωτόκολλα εγκρίθηκαν από τις τοπικές επιτροπές δεοντολογίας και το Υπουργείο Υγείας της Δημοκρατίας της Τουρκίας. ελήφθη ενημερωμένη συγκατάθεση από τους ασθενείς. Στη μελέτη εντάχθηκαν ασθενείς με θετικό τεστ RT-PCR και/ή οροθετικότητα. Τα κλινικά συμπτώματα κατηγοριοποιήθηκαν σε ήπια (οι μη νοσηλευόμενοι ασθενείς), μέτρια (οι ασθενείς που είχαν μέτρια πνευμονία) και σοβαρά (οι ασθενείς που είχαν σοβαρή πνευμονία και νοσηλεύτηκαν για περισσότερες από 5 ημέρες). Ως μάρτυρες χρησιμοποιήθηκαν δείγματα αίματος από υγιείς δότες [n=10 (6 γυναίκες, 4 άνδρες), διάμεση ηλικία 33 (ελάχ. 28–μέγιστο 55)] χωρίς ιστορικό SARS-CoV-2 και οροθετικότητα.

2.2. Εγκατάσταση συνκαλλιεργειών DC και Τ κυττάρων προερχόμενων από μονοκύτταρα

Τα DC δημιουργήθηκαν από τα μονοκύτταρα (CD14 MACS, Miltenyi) σύμφωνα με ένα προηγουμένως δημοσιευμένο πρωτόκολλο [14]. Φόρτωση αντιγόνου με την ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη S1 (S1, 10 μg/mL, Abcam) ή αντιγόνο HIV Gag (10 μg/mL, Ερευνητικό Κέντρο TUBITAK Marmara) [15] ή την ανατοξίνη τετάνου (TT, 10 μg/mL, Turk Ilac ) ξεκίνησε ταυτόχρονα με την ωρίμανση DC που προέρχονται από μονοκύτταρα με LPS (1 μg/mL, Sigma-Aldrich). Ώριμα DC προερχόμενα από μονοκύτταρα που δημιουργούνται απουσία α

ειδικό αντιγόνο χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες. Στο τέλος της επώασης διάρκειας 7-ημέρας, τα DC που προέρχονται από μονοκύτταρα χαρακτηρίστηκαν ως πληθυσμός CD11bhiCD14loCD1a συν CD83 συν.

Από τον ίδιο ασθενή με COVID-19, αυτόλογο παρελθοντικό Τ (TN), τελικώς διαφοροποιημένο τελεστή Τ (TEMRA), κεντρικόμνήμηΤ (TCM) και τελεστήςμνήμηΤα κύτταρα T (TEM) καθαρίστηκαν ( Πάνω από ή ίσα με 96 τοις εκατό ) με FACS (FACSria II, Becton Dickinson) ως CD3-άθικτα, CD19- και CD56- αρνητικά λεμφοκύτταρα σύμφωνα στη διαφορική έκφραση των δεικτών CD45RA, CD45RO και CCR7 (Εικ. 1Α).

Τα προερχόμενα από μονοκύτταρα DCs (5x104) συγκαλλιεργήθηκαν με τους καθαρισμένους υποτύπους των Τ κυττάρων (10)5 για 96 ώρες σε φρεάτιο τρυβλίου με στρογγυλό πυθμένα που περιέχει 200 ​​μL RPMI 1640 μέσα συμπληρωμένα με 10 τοις εκατό FBS , 1 τοις εκατό πενικιλλίνη/στρεπτομυκίνη (Βιολογικές βιομηχανίες), 5 ng/mL IL-2 (Βιο-

Θρύλος). Πριν από τη συνκαλλιέργεια, οι υπότυποι των Τ κυττάρων σημάνθηκαν με 5 μΜ CFSE (BioLegend). Ως θετικός έλεγχος, ένα αντίσωμα αντι-CD3 (HIT3a, 25 ng/mL, BioLegend) προστέθηκε στις συνκαλλιέργειες. Η πειραματική διάταξη συνοψίζεται στο Σχ. 1Α.

2.3. Ανοσοφαινοτυποποίηση και σχετιζόμενες με τη λειτουργία δοκιμασίες με κυτταρομετρία ροής

Ο ανοσοφαινοτυπισμός πραγματοποιήθηκε με μονοκλωνικά αντισώματα κατά του ανθρώπου-CD4 (OKT4), -CD8 (RPA-T8), -CD56 (MEM-188), -CD19 (SJ25C1), -CD45RA (HI100), -CD45RO (UCHL1 ), -CCR7 (G043H7), -CD25 (M-A251), -CD38 (HIT2), -4-1BB (4B{4-1), -PD-1 (NAT105), -CD14 (M5E2), -CD11b (ICRF44) (BioLegend); -CD1a (REA736), -CD83 (REA714) (Miltenyi). Οι τιμές μέσης έντασης φθορισμού (MFI) προσδιορίστηκαν σε CD4 plus και CD8 plus Τ κύτταρα, και σύμφωνα με την αραίωση CFSE.

Η αλλαγή στο MFI υπολογίστηκε συγκρίνοντας τα δεδομένα από τις συνκαλλιέργειες με τα φορτωμένα με αντιγόνο DCs και τα DCs ελέγχου.

Το ποσοστό των Τ κυττάρων με αραίωση CFSE αξιολογήθηκε για πολλαπλασιασμό. Η ειδική για αντιγόνο ικανότητα πολλαπλασιασμού των Τ κυττάρων υπολογίστηκε ως η αλλαγή στον πολλαπλασιασμό όπου τα δεδομένα από τις συγκαλλιέργειες με DC που προέρχονται από μονοκύτταρα ελέγχου χρησιμοποιήθηκαν ως κανονικοποιητές. Τα υπερκείμενα που συλλέχθηκαν χρησιμοποιήθηκαν σε πολυπλεξία ELISA (LEGEND-plex, BioLegend). Όλες οι κυτταρομετρικές αναλύσεις ροής πραγματοποιήθηκαν σε διαλογέα FACSAria II.

2.4. Στατιστική ανάλυση

Τα αποτελέσματα παρουσιάζονται ως διάμεσος ± SEM. Για τις στατιστικές αναλύσεις χρησιμοποιήθηκαν το τεστ Kruskal-Wallis και η διόρθωση Bonferroni. Τιμή AP<0.05 was="" considered="" statistically="">

3. Αποτελέσματα

Μετά την επώαση με το S{0}}DC, εντοπίστηκε ένα μικρό ποσοστό πολλαπλασιαζόμενων Τ κυττάρων (ποσοστό εύρους , CD4 συν, TN {{{{0}}}.49–6,8, TEMRA 3,29–7,7, TCM 0,38–20,2, TEM 0,2– 16,7, ποσοστό εύρους , CD8 plus , TN 0,64–5,6, TEMRA 2,16– 10,3, TCM0,8– 15, TEM 1,6– 19,4). Τόσο τα CD4 plus όσο και τα CD8 plus TCM και TEM κύτταρα εμφάνισαν μια σημαντικά αυξημένη συχνότητα πολλαπλασιασμού από τους πληθυσμούς των πρωτογενών ή ενεργών Τ κυττάρων (Εικ. 1Β). Τα κύτταρα CD4 συν TCM και τα κύτταρα CD8 συν ΤΕΜ παρουσίασαν την υψηλότερη πολλαπλασιαστική δραστηριότητα. Το CD4 plusμνήμηΟ πολλαπλασιασμός των Τ κυττάρων θα μπορούσε να προκληθεί σε ~90 τοις εκατό των ασθενών με COVID-19, ωστόσο, το CD8 plusμνήμηΟ πολλαπλασιασμός των Τ κυττάρων παρατηρήθηκε μόνο στο ~ 60 τοις εκατό των ασθενών (Εικ. 1Β). Τα προερχόμενα από μονοκύτταρα DC φορτώθηκαν επίσης με ένα άσχετο ιικό αντιγόνο, το HIV Gag. αναμενόμενα, δεν ελήφθη σημαντική ανταπόκριση στα Τ κύτταρα από επιζώντες του COVID-19 (Εικ. 1C). Ομοίως, τα Τ κύτταρα από τα υγιή άτομα δεν ανταποκρίθηκαν στο S1-DC. Από την άλλη πλευρά, το DC που προέρχεται από μονοκύτταρα που παρουσιάζει το αντιγόνο ΤΤ χρησίμευσε ως θετικός έλεγχος για τα Τ κύτταραμνήμηαποκρίσεις (Εικ. 1Γ). Επιπλέον, η επιφανειακή έκφραση ορισμένων δεικτών που σχετίζονται με την ενεργοποίηση, ειδικά CD25, PD-1 και 4-1BB, ρυθμίστηκε σημαντικά προς τα πάνω σε S1-αποκρινόμενα Τ κύτταρα (Εικ. 1D). Τα διεγερμένα από S{7}DC κύτταρα TEM εκκρίνουν τα υψηλότερα επίπεδα IFN- και IL-6, η οποία παράγεται σε μεγάλο βαθμό από κύτταρα CD4 συν Τ τύπου 1 και CD8 συν κυτταροτοξικά Τ κύτταρα. Οι δείκτες κυτταροτοξικής απόκρισης, το γρανζύμη Α, η γκρανουλυσίνη, ο συνδέτης Fas (FasL) και ιδιαίτερα το γρανζύμου Β ήταν επίσης αυξημένοι στις συνκαλλιέργειες που φιλοξενούν κύτταρα TEM από ασθενείς με COVID-19 (Εικ. 1Ε). Τα υπερκείμενα συν-καλλιέργειας από τα οποία μετρήθηκαν οι διαλυτοί παράγοντες περιείχαν τους μεσολαβητές που εκκρίνονται από Τ κύτταρα και DCs. Έτσι, όπως αναφέρεται στη βιβλιογραφία, μέτριες ποσότητες κυτοκινών όπως TNF-, IL-6, IL-4 και IFN- μπορεί επίσης να παράγονται από το DC [16,17]. Σε ορισμένες περιπτώσεις, τα μη-μνηστικά Τ κύτταρα ανταποκρίθηκαν στο S1-DC, ρύθμισαν προς τα πάνω την έκφραση CD38 και 4-1BB και την έκκριση IL-4 και TNF- (Εικ. 1) . Σημειώθηκε επίσης ετερογένεια μεταξύ των παραμέτρων των Τ κυττάρων που μελετήθηκαν και του χρόνου δειγματοληψίας αίματος μετά την ανάκτηση, της σοβαρότητας των κλινικών συμπτωμάτων ή του επιπέδου των αντισωμάτων αντι-S1 (δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

4. Συζήτηση

Στους επιζώντες του COVID-19, τα κυκλοφορούντα S1-ειδικά TEM και TCM κύτταρα διατήρησαν λειτουργική ανταπόκριση και εμφάνισαν αυξημένες ικανότητες τελεστών όπως ενεργοποίηση, πολλαπλασιασμός και έκκριση ανοσολογικών μεσολαβητών. Παρόλο που η πολλαπλασιαστική απάντηση στομνήμηΤα CD8 συν Τ κύτταρα δεν ήταν τόσο ισχυρά όσο στο CD4 plusμνήμηΤα Τ κύτταρα, τα δεδομένα μας υποδηλώνουν ότι αυτά τα κύτταρα μπορούν γρήγορα να προχωρήσουν σε κατάσταση τελεστή όταν εκτεθούν στο αντιγόνο SARS-CoV-2 S1. Τα κύτταρα TEM είναι κρίσιμοι φύλακες, καθώς τείνουν να εντοπίζονται στους ιστούς που είναι επιρρεπείς σε εισβολή από τον παθογόνο μικροοργανισμό, ενώ τα κύτταρα TCM στρατολογούνται στα δευτερεύοντα λεμφοειδή όργανα για την επιτάχυνση των ανοσολογικών αντιδράσεων που εγκαινιάζονται από τα αντιγονοπαρουσιαστικά DCs [18]. Αν και κάλυπτε έναν περιορισμένο αριθμό περιπτώσεων COVID-19, στη μελέτη μας, η πλειονότητα των ασθενών περιείχε κύτταρα TEM και TCM που ανταποκρίθηκαν λειτουργικά στην πρωτεΐνη S1 όσον αφορά τουλάχιστον μία δοκιμασμένη παράμετρο. Αυτά τα προκαταρκτικά ευρήματα μπορεί να υποδεικνύουν μια πιθανή διαφορά μεταξύ της λειτουργικής ικανότητας των Τ κυττάρων και της σοβαρότητας του COVID-19. Μια προηγούμενη μελέτη ανέφερε υψηλότερη συχνότητα S1-ειδικών Τ-λεμφοκυττάρων από τα Τ κύτταρα που είναι ειδικά για τις πρωτεΐνες Ν και Μ [8]. Αντίστοιχα, η λειτουργική ανταπόκριση των Τ κυττάρων σε άλλα αντιγόνα SARS-CoV-2 παραμένει να διευκρινιστεί καλύτερα. Πρόσφατα δημοσιευμένες θεμελιώδεις εργασίες κατέδειξαν την παρουσία μακροπρόθεσμωνμνήμηστα Τ κύτταρα από ασθενείς με COVID-19 [19,20]. Χρησιμοποιώντας μια ξεχωριστή πειραματική προσέγγιση όπου τα αυτόλογα μονοκύτταρα προερχόμενα από DC χρησιμοποιήθηκαν ως εφικτό στοιχείο για τον έλεγχο της απόκρισης των Τ κυττάρων, η μελέτη μας επιβεβαίωσε τη λειτουργία και τον χαρακτήρα των Τ κυττάρων που αναφέρθηκαν προηγουμένως στα άτομα με ιστορικό COVID-19. Η συσσώρευση στοιχείων σχετικά με την ανοσία που έχει δημιουργηθεί στους επιζώντες του COVID-19 θα παρείχε καλύτερη κατανόηση της παθογένειας της νόσου, των θεραπευτικών προσεγγίσεων και της ανάπτυξης εμβολίων.

Εικ. 1. Εκτίμηση λειτουργικών αποκρίσεων σε Τ κύτταρα από επιζώντες από COVID-19. Α) Εμφανίζεται γραφικό περίγραμμα της πειραματικής ρύθμισης. Δενδριτικά κύτταρα που προέρχονται από μονοκύτταρα δημιουργήθηκαν από τα άτομα με ιστορικό COVID-19 και φορτώθηκαν με SARS-CoV-2 Spike Glycoprotein-S1 (S1-DC). στη συνέχεια, αυτόλογος αφελής Τ (TN), τερματικά διαφοροποιημένος τελεστής Τ (TEMRA), κεντρικόςμνήμηΤ (TCM) και τελεστήςμνήμηΤα κύτταρα Τ (ΤΕΜ) καθαρίστηκαν και συγκαλλιεργήθηκαν με αυτά τα DC. Ο πολλαπλασιασμός των Τ κυττάρων, η έκφραση των δεικτών ενεργοποίησης και η έκκριση κυτοκίνης μετρήθηκαν μετά από 96 ώρες επώασης. Β) Η αλλαγή στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων CD4 plus και CD8 συν Τ κυττάρου σχεδιάστηκε για κάθε ασθενή σε σύγκριση με αυτόν που ελήφθη με συγκαλλιέργειες ελέγχου με DC που προέρχονται από μονοκύτταρα χωρίς ειδική φόρτωση αντιγόνου. Στη δεξιά πλευρά δίνονται αντιπροσωπευτικά ιστογράμματα κυτταρομετρίας ροής. Οι συνκαλλιέργειες που διεγείρονται με ένα μονοκλωνικό αντίσωμα αντι-CD3 χρησίμευσαν ως τεχνικός θετικός έλεγχος για τον πολλαπλασιασμό των Τ κυττάρων. Γ) Η προερχόμενη από τον ασθενή απόκριση πολλαπλασιασμού των κυττάρων TCM και TEM έναντι του S{{1{2{0}}}}DC συγκρίθηκε με αυτές που ελήφθησαν με το HIV Gag ή με το αντιγόνο του τοξοειδούς τετάνου (TT) -φορτωμένα DC. Τα Τ κύτταρα και τα S{12}}DC που ελήφθησαν από υγιή άτομα (S1(hd)) χρησιμοποιήθηκαν επίσης ως μάρτυρες. Δ) Αλλαγές στα επίπεδα δεικτών ενεργοποίησης κυττάρων CD4 plus και CD8 συν Τ κυττάρου παρουσιάστηκαν σε σύγκριση με εκείνα που ελήφθησαν με συγκαλλιέργειες ελέγχου με DC που προέρχονται από μονοκύτταρα χωρίς ειδική φόρτωση αντιγόνου. Ε) Εκτιμήθηκε η ποσότητα κυτοκινών που σχετίζονται με Τ κύτταρα που εκκρίνονται στα υπερκείμενα συγκαλλιέργειας. (*p < 0,05,="" **p=""><>

Δήλωση συνεισφοράς συγγραφής CRediT

Ece Tavukcuoglu: Έρευνα, Οπτικοποίηση, Τυπική ανάλυση, Συγγραφή - κριτική & επιμέλεια. Utku Horzum: Έρευνα, Οπτικοποίηση, Τυπική ανάλυση, Συγγραφή - κριτική & επιμέλεια. Ahmet Cagkan Inkaya: Conceptualization, Resources. Serhat Unal: Conceptualization, Resources. Gunes Esendagli: Εννοιολόγηση, Συγγραφή - κριτική & επιμέλεια, Επίβλεψη.

Δήλωση Ανταγωνιστικών Συμφερόντων

Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν έχουν γνωστά ανταγωνιστικά οικονομικά συμφέροντα ή προσωπικές σχέσεις που θα μπορούσαν να έχουν φανεί ότι επηρεάζουν την εργασία που αναφέρεται σε αυτό το άρθρο.

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] A. Mazzoni, L. Maggi, M. Capone, M. Spinicci, L. Salvati, MG Colao, A. Vanni, ST Kiros, J. Mencarini, L. Zammarchi, E. Mantengoli, L. Menicacci, E. Caldini, S. Romagnani, F. Liotta, A. Morettini, GM Rossolini, A. Bartoloni, L. Cosmi, F. Annunziato, κυτταρομεσολαβούμενες και χυμικές προσαρμοστικές ανοσοαποκρίσεις στον SARS-CoV-2 είναι χαμηλότερες σε ασυμπτωματικοί από τους συμπτωματικούς ασθενείς με COVID-19, Eur. J. Immunol. 50 (2020) 2013–2024.

[2] Y. Tan, F. Liu, X. Xu, Y. Ling, W. Huang, Z. Zhu, M. Guo, Y. Lin, Z. Fu, D. Liang, Τ. Zhang, J. Fan, M. Xu, H. Lu, S. Chen, Durability of neutralizing antibodies and T-cell response post-SARS-CoV-2 μόλυνση, Front. Med. 14 (2020) 746–751.

[3] C. Conte, F. Sogni, P. Affanni, L. Veronesi, A. Argentiero, S. Esposito, Vaccines against coronaviruses: The State of the Art, Vaccines (Basel) 8 (2020).

[4] CK Li, H. Wu, H. Yan, S. Ma, L. Wang, M. Zhang, X. Tang, NJ Temperton, RA Weiss, JM Brenchley, DC Douek, J. Mongkolsapaya, BH Tran, CL Lin, GR Screaton, JL Hou, AJ McMichael, XN Xu, αποκρίσεις κυττάρων Τ σε ολόκληρο τον κορονοϊό SARS σε ανθρώπους, J. Immunol. 181 (2008) 5490–5500.

[5] M. Koblischke, MT Traugott, I. Medits, FS Spitzer, A. Zoufaly, L. Weseslindtner,C. Simonitsch, T. Seitz, W. Hoepler, E. Puchhammer-Stockl, SW Aberle, M. Fodinger, A. Bergthaler, M. Kundi, FX Heinz, K. Stiasny, JH Aberle, Dynamics of CD4 T cell and antibody responses in Ασθενείς με COVID-19 με διαφορετική βαρύτητα νόσου, Εμπρός. Med. (Λωζάνη) 7 (2020), 592629.

[6] GA Poland, IG Ovsyannikova, RB Kennedy, ανοσία SARS-CoV-2: ανασκόπηση και εφαρμογές σε υποψήφια εμβόλια φάσης 3, Lancet 396 (2020) 1595–1606.

[7] R. Zhou, KK To, YC Wong, L. Liu, B. Zhou, X. Li, H. Huang, Y. Mo, TY Luk, TT Lau, P. Yeung, WM Chan, AK Wu, KC Lung, OT Tsang, WS Leung, IF Hung, KY Yuen, Z. Chen, Οξεία λοίμωξη SARS-CoV-2 επηρεάζει τις αποκρίσεις των δενδριτικών κυττάρων και των Τ κυττάρων, Ανοσία 53 (2020) 864–877 e{ {7}}.

[8] A. Grifoni, D. Weiskopf, SI Ramirez, J. Mateus, JM Dan, CR Moderbacher, SARawlings, A. Sutherland, L. Premkumar, RS Jadi, D. Marrama, AM de Silva, A. Frazier, AF Carlin, JA Greenbaum, B. Peters, F. Krammer, DM Smith, S. Crotty, A. Sette, Targets of T Cell Responses to SARS-CoV-2 Coronavirus in Humans with COVID-19 Disease και Unexposed Individuals, Cell, 181 (2020) 1489-1501 e1415.

[9] PF Canete, CG Vinuesa, COVID-19 κάνει τα Β κύτταρα να ξεχνούν, αλλά τα Τ κύτταρα θυμούνται,Κύτταρο 183 (2020) 13–15.

[10] I. Schulien, J. Kemming, V. Oberhardt, K. Wild, LM Seidel, S. Killmer, F. Sagar, MS Daul, A. Lago, H. Decker, B. Luxenburger, D. Binder, Ο Bettinger, S. Sogukpinar, M. Rieg, D. Panning, M. Huzly, G. Schwemmle, CF Kochs, A. Waller, D. Nieters, F. Duerschmied, HE Emmerich, AR Mei, S. Schulz, DA Llewellyn -Lacey, T. Price, B. Boetteler, R. Bengsch, M. Thimme, C.-H. Hofmann, Χαρακτηρισμός προϋπαρχόντων και επαγόμενων από SARS-CoV-2-ειδικών CD8( συν ) Τ κυττάρων, Nat. Med. 27 (2021) 78–85.

[11] I. Odak, J. Barros-Martins, B. Bosnjak, K. Stahl, S. David, O. Wiesner, M. Busch, M.

M. Hoeper, I. Pink, T. Welte, M. Cornberg, M. Stoll, L. Goudeva, R. Blasczyk, A. Ganser, I. Prinz, R. Forster, C. Koenecke, CR Schultze-Florey, Reappearance των τελεστών Τ κυττάρων σχετίζεται με την ανάκτηση από COVID-19, EBioMedicine 57 (2020), 102885.

[12] AE Oja, A. Saris, CA Ghandour, NAM Kragten, BM Hogema, EJ Nossent, LMA Heunks, S. Cuvalay, E. Slot, F. Linty, FH Swaneveld, H. Vrielink, G. Vidarsson, T. Rispens, E. van der Schoot, RAW van Lier, A. Ten Brinke, P. Hombrink, Divergent SARS-CoV-2-ειδικές αποκρίσεις Τ και Β κυττάρων σε σοβαρούς αλλά όχι ήπιους ασθενείς με COVID-19 , Ευρώ. J. Immunol. 50 (2020) 1998–2012.

[13] B. Kratzer, D. Trapin, P. Ettel, U. Kormoczi, A. Rottal, F. Tuppy, M. Feichter,P. Gattinger, K. Borochova, Y. Dorofeeva, I. Tulaeva, M. Weber, K. Grabmeier- Pfistershammer, PA Tauber, M. Gerdov, B. Muhl, T. Perkmann, I. Fae, S. Wenda, H. Fuhrer , R. Henning, R. Valenta, WF Pickl, Ανοσολογική αποτύπωση του COVID-19 σε πληθυσμούς λευκοκυττάρων ανθρώπινου περιφερικού αίματος, Αλλεργία (2020).

[14] AM Bruger, C. Vanhaver, K. Bruderek, G. Amodio, E. Tavukcuoglu, G. Esendagli,S. Gregori, S. Brandau, P. van der Bruggen, Πρωτόκολλο για την αξιολόγηση της καταστολής του πολλαπλασιασμού των Τ-κυττάρων από ανθρώπινο MDSC, Μέθοδοι Enzymol. 632 (2020) 155–192.

[15] SA Younes, B. Yassine-Diab, AR Dumont, MR Boulassel, Z. Grossman, JP Routy, RP Sekaly, HIV-1 η ιαιμία αποτρέπει την εγκατάσταση ιντερλευκίνης 2- που παράγει ειδική για τον ιό HIVμνήμηCD4 συν Τ κύτταρα προικισμένα με πολλαπλασιαστική ικανότητα, J. Εχρ. Med. 198 (2003) 1909–1922.

[16] DM Frucht, T. Fukao, C. Bogdan, H. Schindler, JJ O'Shea, S. Koyasu, Παραγωγή IFN-γάμα από κύτταρα που παρουσιάζουν αντιγόνο: μηχανισμοί αναδύονται, Trends Immunol. 22 (2001) 556–560.

[17] EO Gubernatorova, EA Gorshkova, OA Namakanova, RV Zvartsev, J. Hidalgo, MS Drutskaya, AV Tumanov, SA Nedospasov, Μη πλεονάζουσες λειτουργίες της IL-6 που παράγονται από μακροφάγα και δενδριτικά κύτταρα σε αλλεργική φλεγμονή των αεραγωγών, Εμπρός. Immunol. 9 (2018) 2718.

[18] YD Mahnke, TM Brodie, F. Sallusto, M. Roederer, E. Lugli, The who's who of T-cell differentiation: humanμνήμηΥποσύνολα Τ-κυττάρων, Eur. J. Immunol. 43 (2013) 2797–2809.

[19] JM Dan, J. Mateus, Y. Kato, KM Hastie, ED Yu, CE Faliti, A. Grifoni, SI Ramirez, S. Haupt, A. Frazier, C. Nakao, V. Rayaprolu, SA Rawlings, B Peters, F. Krammer, V. Simon, EO Saphire, DM Smith, D. Weiskopf, A. Sette, S. Crotty, Immunologicalμνήμηστον SARS-CoV-2 που αξιολογήθηκε για έως και 8 μήνες μετά τη μόλυνση, Science 371 (2021).

[20] LB Rodda, J. Netland, L. Shehata, KB Pruner, PA Morawski, CD Thouvenel, KK Takehara, J. Eggenberger, EA Hemann, HR Waterman, ML Fahning, Y. Chen, M. Hale, J. Rathe, C. Stokes, S. Wrenn, B. Fiala, L. Carter, JA Hamerman, NP King, M. Gale, Jr., DJ Campbell, DJ Rawlings, M. Pepper, Functional SARS-CoV{ {2}}ειδικό ανοσοποιητικόμνήμηεπιμένει μετά από ήπιο COVID-19, Cell, 184 (2021) 169-183 e117.