Μελέτη σχετικά με τα μικροβιακά ένζυμα που παράγονται κατά τη διάρκεια συνδυασμένης βακτηριακής ζύμωσης και των βιολογικών τους δραστηριοτήτων ⅲ

Κεφάλαιο 3 Μελέτη σχετικά με την αντιοξειδωτική δραστικότητα των ενζύμων

 

Πολλές ανθρώπινες ασθένειες έχουν αποδειχθεί ότι σχετίζονται μεενεργές οξυγόνου και ελεύθερες ρίζες, όπωςφλεγμονή, αρτηριοσκλήρωση,γηράσκων, διαβήτης, Καρκίνος, κ.λπ.Υπερβολικές ελεύθερες ρίζεςΣτο σώμα μπορεί να προκαλέσει μετουσίωση πρωτεΐνης, βλάβη των κυττάρων και θανάτου, ακόμη και παθολογικές αλλαγές στο σώμα. Ως εκ τούτου, πολλές μελέτες στο εσωτερικό και στο εξωτερικό αναζητούν τρόφιμα πλούσια σε φυσικά αντιοξειδωτικά συστατικά για την πρόληψη και τη ρύθμιση των ασθενειών που προκαλούνται από τις ελεύθερες ρίζες μέσω της διατροφής. Σήμερα, με το αυξανόμενο βιοτικό επίπεδο, οι άνθρωποι μετατοπίζουν σταδιακά την εστίασή τους στο δικό τους σώμα, έτσι όλο και περισσότερα προϊόντα υγείας εμφανίζονται σε ένα ατελείωτο ρεύμα. Ωστόσο, δεν είναι εύκολο να είσαι πραγματικά χρήσιμος. Τα ένζυμα είναι ένα είδος φαγητού που μπορεί να γίνει μόνος σας στη ζωή των ανθρώπων. Το κόστος δεν είναι πολύ υψηλό και υπάρχουν πολλά οφέλη.
Τα μικροβιακά ένζυμα έχουν ποικίλες λειτουργίες υγείας, όπως αντιβακτηριακά και αντιφλεγμονώδη, προαγωγή του μεταβολισμού, βελτίωση της ανοσίας, λεύκανσης και αντι-γήρανσης, αποτοξίνωσης και αντικαρκινικού καρκίνου. Επί του παρόντος, υπάρχουν σχετικά λίγες μελέτες σχετικά με τις αντιοξειδωτικές ιδιότητες των μικροβιακών ενζύμων στο εσωτερικό και στο εξωτερικό, οπότε σχεδιάζουμε να διεξάγουμε εμπεριστατωμένη έρευνα σε αυτά. Το παρόν έγγραφο παίρνει το ένζυμο της Apple ως το αντικείμενο της έρευνας και χρησιμοποιεί συνολική περιεκτικότητα σε φαινόλη, μείωση της ισχύος, DPPH · Ελεύθερων ριζών, · ΟΗ ελευθέρων ριζών, ελεύθερων ριζών υπεροξειδίου και ικανότητας καθαρισμού ελεύθερων ριζών ABTS ως ευρετήριο προσδιορισμού για τη διεξαγωγή συνολικής και συστηματικής διερεύνησης του ενζύμου Apple μετά από ζύμωση για 3 μήνες. Μελετήθηκε η σύνθεση και η περιεκτικότητα σε αντιοξειδωτικά δραστικά συστατικά και η αντιοξειδωτική του δραστικότητα έγινε κατανοητή.

Νέα βότανα Cistanche με πολύ περισσότερη ισχύ κατά της οξείδωσης από τη ζύμωση των βακτηρίων

Υποστηρικτική υπηρεσία του WECistanche-ο μεγαλύτερος εξαγωγέας Cistanche στην Κίνα:
Email: wallence.suen@wecistanche.com
WhatsApp/Tel: +86 15292862950

 

 

 

 

3.1 Υλικά και Μέθοδοι

3.1.1 Υλικά

(1) Πειραματικά υλικά
Πλύνετε φρέσκα μήλα με αποστειρωμένο νερό υπό αποστειρωμένες συνθήκες, στεγνώστε φυσικά σε ένα αποστειρωμένο τραπέζι λειτουργίας, ξεφλουδίστε τα και κόψτε τα για μεταγενέστερη χρήση. Προσθέστε λευκή ζάχαρη και μήλα σε ένα αποστειρωμένο γυάλινο βάζο σε αναλογία μάζας 1: 1. Ενεργοποιήστε τα βακτηρίδια που απαιτούνται για το πείραμα και εμβολιάστε τα στο ένζυμο σύμφωνα με το βέλτιστο σχήμα (αυτό το βήμα λειτουργίας παραλείπεται στην ομάδα ελέγχου), σφραγίστε το και τοποθετήστε το σε δροσερό και ξηρό μέρος. Μετά από 3 μήνες ζύμωσης θερμοκρασίας δωματίου, πάρτε ένα δείγμα για να αποκτήσετε ολόκληρο το υγρό ενζύμου που περιέχει τον πολτό και φιλτράρετε το. Πάρτε το υπερκείμενο ως το πειραματικό δείγμα και φυγοκεντρίστε το δείγμα στις 10000rpm για 15 λεπτά σε φυγόκεντρο υψηλής ταχύτητας πριν προσδιορίσετε τα σχετικά δεδομένα. Αξίζει να σημειωθεί ότι κατά τη διαδικασία κατασκευής ενζύμων, προκειμένου να αποφευχθεί η περιττή μόλυνση, όλες οι λειτουργίες μας διεξάγονται υπό αποστειρωμένες συνθήκες.

(2) Κύρια όργανα
Φασματοφωτόμετρο: V -1100, Shanghai Anting Scientific Instrument Factory;
Σταθερό λουτρό νερού: HH -2, Wuhan Litian Technology Instrument Co., Ltd. Άλλα όργανα είναι τα ίδια με το 2.1.3.

3.1.2 Μέθοδοι

(1) Προσδιορισμός της συνολικής περιεκτικότητας σε φαινόλη [53]
① Προετοιμασία τυπικής καμπύλης:
Ζυγίστε με ακρίβεια {{0}. Πάρτε 8 Clean 1 {{1 0}} ml ογκομετρικές φιάλες, προσθέστε 0, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 1,0, 1,2 και 1,4 ml χάλκινο οξύ πρότυπο διάλυμα, αντίστοιχα, αραιώστε στο σήμα με το απεσταλμένο νερό, προσθέστε 1 ml για το folin και 2 ml του 20% nac. min, δροσερό και αραιωμένο στα 20 ml, και τοποθετήστε σε θερμοκρασία δωματίου για 30 λεπτά. Χρησιμοποιήστε ένα φασματοφωτόμετρο για να μετρήσετε την απορρόφηση Α σε μήκος κύματος 650 nm και σχεδιάστε μια τυπική καμπύλη με απορρόφηση Α ως οριζόντιο άξονα και συγκέντρωση δείγματος ως κάθετος άξονας. ② Ανίχνευση
Προσθέστε διαλύματα απεσταγμένου νερού σε 100 μΐ, 200 μΐ, 300 μΐ, 400 μΐ και 500 μΐ σε 46ml, στη συνέχεια προσθέστε 1mL αντιδραστηρίου φλον-φαινόλης, ανακατέψτε ομοιόμορφα, αντιδρούν για 3min, στη συνέχεια, προσθέστε 3ml από 20% NACO3, ανακινήστε ένα λουτρό σταθερής θερμοκρασίας 25 βαθμών για 2h, χρησιμοποιήστε το νερό ως κενό και μετρήστε το Conspance At At Atedled Lendle του 760 φασματοφωτόμετρο. Η συνολική περιεκτικότητα σε φαινόλη εκφράζεται ως ισοδύναμα γαλλικού οξέος και η συνολική περιεκτικότητα σε φαινόλη υπολογίζεται σύμφωνα με την τυπική εξίσωση καμπύλης.

(2) Δοκιμασία μείωσης [54]
Προσθέστε 1 0 0 μL, 2 0 0μL, 300μL, 400μL και 500 μΐ δείγματος σε 2,5 ml ρυθμιστικού φωσφορικού άλας με συγκέντρωση 0,2mol/L και τιμή ρΗ 6,6, στη συνέχεια προσθέτουμε 2,5ml με άξονα σε μάζα με μάζα 1%. 50 βαθμός για 30 λεπτά. Στη συνέχεια, προσθέστε 2,5ml τριχλωροοξικού οξέος (β/ο) με συγκέντρωση μάζας 10%και φυγοκεντρητή στις 3000 σ.α.λ. για 10 λεπτά σε φυγόκεντρο υψηλής ταχύτητας. Αμέσως μετά τη λήψη, πάρτε 2,5ml υπερκείμενου σε ογκομετρική φιάλη, προσθέστε 2,5ml απεσταγμένου νερού και 0,5ml χλωριούχου σιδήρου (β/ο) με συγκέντρωση μάζας 0,1%. Χρησιμοποιήστε αποσταγμένο νερό ως κενό έλεγχο και μετρήστε την απορρόφηση Α σε μήκος κύματος 700nm χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο. Η δύναμη της μείωσης της ισχύος μπορεί να κριθεί από την τιμή απορρόφησης. Όσο υψηλότερη είναι η τιμή απορρόφησης, τόσο ισχυρότερη είναι η μειωτική ισχύς.

 

(3) Προσδιορισμός του εφέ καθαρισμού ανιόντων υπεροξειδίου [55]

Πάρτε 4,5 ml 0. Προσθέστε 1 ml διαλύματος δείγματος ενζύμου με συγκεντρώσεις 10%, 20%, 30%, 40%και 50%και 0,4 ml διαλύματος 25 mmol/L πυρόλολος αντίστοιχα. Ανακατέψτε καλά και αντιδράτε σε υδατόλουτρο 25 μοιρών για 5 λεπτά. Προσθέστε 1,0 ml 8 mol/L HCl για να τερματίσετε την αντίδραση. Χρησιμοποιήστε το buffer Tris-HCL ως αναφορά και χρησιμοποιήστε ένα φασματοφωτόμετρο για να μετρήσετε την απορρόφηση Α σε μήκος κύματος 299 nm για να υπολογίσετε το ποσοστό καθαρισμού. Για την κενή ομάδα ελέγχου χρησιμοποιήθηκε 1 ml διαλύτη αντί για δείγμα. Ο ρυθμός καθαρισμού O 2- υπολογίστηκε σύμφωνα με τον Formula 3.1: o 2- ρυθμό καθαρισμού (%)=(a {{31} a2)/a1 × 100 (3.1) όπου: a1 είναι η απορρόφηση του κενού σωλήνα. Το A2 είναι η απορρόφηση του δείγματος.

(4) Προσδιορισμός της επίδρασης καθαρισμού στις ρίζες υδροξυλίου [56]

100μL, 200μL, 300μL, 400μL, 500μL sample solution was added with water to 2mL, then added to 1.4mL of hydrogen peroxide with a molar mass concentration of 6mmol/L, then added with 0.6mL of sodium salicylate with a molar mass concentration of 20mmol/L and 2mL of ferrous sulfate with a molar mass concentration of 1,5mmol/L και θερμαίνεται σε ένα λουτρό σταθερής θερμοκρασίας σε 37 μοίρες για 1h. Ρυθμίστε το μηδέν με αποσταγμένο νερό και μετρήστε την απορρόφηση Α σε μήκος κύματος 562m χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο. Εκτελέστε 3 επαναλήψεις για κάθε θεραπεία. Υπολογίστε τον ρυθμό καθαρισμού ριζών υδροξυλίου σύμφωνα με τον τύπο 3.2: ρυθμός καθαρισμού ριζών υδροξυλίου (%)=[(a 1- a2)/a1] × 100 (3.2) όπου: a1 είναι η μέση απορρόφηση του κενού. Το A2 είναι η μέση απορρόφηση του διαλύματος δείγματος. (5) Προσδιορισμός του εφέ καθαρισμού ελεύθερων ριζών DPPH [57]

Νέα βότανα Cistanche με πολύ περισσότερη ισχύ κατά της οξείδωσης από τη ζύμωση των βακτηρίων

 

Ακριβώς πιπέτα 2 ml διαλύματος δείγματος ενζύμου με συγκεντρώσεις 1 0%, 20%, 30%, 40%και 50%σε ογκομετρική φιάλη 10 ml, στη συνέχεια προσθέτουμε 2 ml υδατικού διαλύματος DPPH αιθανόλης στην ογκομετρική φιάλη. Η μοριακή συγκέντρωση μάζας είναι 2 × 10-4 mol/L. Μετά την ανάμειξη, αφήστε το να σταθεί σε θερμοκρασία δωματίου για 30 λεπτά. Χρησιμοποιώντας διάλυμα αιθανόλης 80% ως αναφορά, μετρήστε την απορρόφηση του δείγματος σε μήκος κύματος 517 nm, το οποίο καταγράφεται ως Α1. Ανακατέψτε 2 ml διαλύματος DPPH και 2 mL διαλύματος αιθανόλης με συγκέντρωση μάζας 80% και μετρήστε την απορρόφησή τους στο ίδιο μήκος κύματος, το οποίο καταγράφεται ως Α0. Αναμείξτε 2 ml διαλύματος ενζύμου και 2 ml διαλύματος αιθανόλης με συγκέντρωση μάζας 80% και μετρήστε την απορρόφησή τους στο ίδιο μήκος κύματος, το οποίο καταγράφεται ως Α2. Υπολογίστε το ποσοστό καθαρισμού ελεύθερων ριζών DPPH σύμφωνα με τον Formula 3.3:
Ο ρυθμός καθαρισμού ελεύθερων ριζών DPPH (%) {0}} [1- (a {2}} a2)/a 0] × 100 (3,3) όπου: a1 είναι η απορρόφηση 2 ml dpph 80% ethanol aque and enlzym enlzym; Το Α2 είναι η απορρόφηση ενός μικτού διαλύματος διαλύματος ενζύμου 2 mL και 2 mL 80% αιθανόλης με συγκέντρωση μάζας. Το Α0 είναι η απορρόφηση ενός μικτού διαλύματος διαλύματος 2 mL DPPH και 2 mL 80% αιθανόλης με συγκέντρωση μάζας.

(6) ικανότητα καθαρισμού ελεύθερων ριζών ABTS [58]
Προσθέστε μια ορισμένη ποσότητα θειικού καλίου σε διάλυμα 7 mmol/L ABTS έως ότου η τελική συγκέντρωση του μικτού διαλύματος είναι 2,45 mmol/L. Τοποθετήστε το μικτό διάλυμα σε δροσερό και ξηρό μέρος σε θερμοκρασία δωματίου για 12 έως 16 ώρες. 1 μΐ, 3 μΐ, 5 μΐ, 7 μΐ και 9 μΐ διαλύματος δείγματος συμπληρώθηκαν σε 10 μΐ με ρυθμιστικό διάλυμα 5mmol/L ph7,4 και στη συνέχεια αναμιγνύονται ομοιόμορφα με 10mL του παραπάνω καλίου θειικού και Abts μεικτό διάλυμα και αφέθηκαν να αντιδράσουν σε θερμοκρασία αντίδρασης 30 μοιρών και σε χρόνο αντίδρασης 5 λεπτών. Μηδέν με αποσταγμένο νερό και μετρήστε την απορρόφηση Α σε μήκος κύματος 734nm χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο. Υπολογίστε το ποσοστό καθαρισμού ελεύθερων ριζών ABTS σύμφωνα με τον Formula 3.4:
Ο ρυθμός καθαρισμού των ελεύθερων ριζών ABTS (%)=[(a 1- a2)/a1] × 100 (3,4) όπου: a1 είναι η απορρόφηση της ομάδας ελέγχου. Το A2 είναι η απορρόφηση της πειραματικής ομάδας

 

3.2 Αποτελέσματα και ανάλυση

3.2.1 Συνολική περιεκτικότητα σε φαινόλη

(1) Τυπική καμπύλη
Η τυπική καμπύλη της συνολικής περιεκτικότητας σε φαινόλη τραβήχτηκε με τη συγκέντρωση γαλλικού οξέος ως οριζόντιο άξονα και την τιμή απορρόφησης Α ως κατακόρυφο άξονα, όπως φαίνεται στο σχήμα 3.1.

 

Εικ.3.1 Η τυπική καμπύλη της συνολικής περιεκτικότητας σε φαινόλη

Από το Σχ.3.1, μπορούμε να δούμε ότι η συνηθισμένη εξίσωση καμπύλης είναι y =11. 375x +0.

(2) Προσδιορισμός δειγμάτων

Τα αποτελέσματα του συνολικού προσδιορισμού της περιεκτικότητας σε φαινόλη των ενζύμων της Apple στην ομάδα ελέγχου και της πειραματικής ομάδας σε διαφορετικές συγκεντρώσεις παρουσιάζονται στο Σχ .3.2.

 

 

 

Εικ.3.2 Η καμπύλη του συνολικού φαινολικού περιεχομένου

Όπως φαίνεται στο Σχ.3.2, τα ένζυμα της Apple τόσο στην ομάδα ελέγχου όσο και στην πειραματική ομάδα έχουν υψηλό συνολικό φαινολικό περιεχόμενο και οι δύο αυξάνονται με την αύξηση της προστιθέμενης ποσότητας διαλύματος δείγματος. Στην ίδια κλίση συγκέντρωσης, η συνολική φαινολική περιεκτικότητα του ενζύμου της Apple στην ομάδα ελέγχου αυξήθηκε από 0. Το συνολικό φαινολικό περιεχόμενο της πειραματικής ομάδας είναι πολύ υψηλότερο από αυτό της ομάδας ελέγχου και η ανοδική τάση είναι πιο προφανής. Σύμφωνα με το συνολικό φαινολικό περιεχόμενο, η συνολική αντιοξειδωτική δράση της πειραματικής ομάδας είναι μεγαλύτερη από αυτή της ομάδας ελέγχου.

 

3.2.2 Μείωση ισχύος

Τα αποτελέσματα του προσδιορισμού της ισχύος των ενζύμων της Apple στην ομάδα ελέγχου και στην πειραματική ομάδα σε διαφορετικές συγκεντρώσεις παρουσιάζονται στο Σχήμα 3.3.

 

Όπως φαίνεται στο σχήμα 3.3, η μεταβαλλόμενη τάση μείωσης της ισχύος των ενζύμων της Apple είναι παρόμοια με την μεταβαλλόμενη τάση της συνολικής περιεκτικότητας σε φαινόλη. Η αναγωγική ισχύς της πειραματικής ομάδας είναι υψηλότερη από αυτή της ομάδας ελέγχου και εάν πρόκειται για την πειραματική ομάδα ή την ομάδα ελέγχου, εντός της περιοχής συγκεντρώσεων που παρουσιάζεται στο πείραμα, η αναγωγική ισχύς δείχνει μια αυξανόμενη τάση με την αύξηση της προστιθέμενης ποσότητας του δείγματος διαλύματος. Τα πειραματικά δεδομένα επιβεβαίωσαν επίσης ότι όσον αφορά τη μείωση της ισχύος, η αντιοξειδωτική δράση της πειραματικής ομάδας είναι μεγαλύτερη από αυτή της ομάδας ελέγχου.

 

 

3.2.3 Δυνατότητα καθαρισμού ελεύθερων ριζών υπεροξειδίου

Τα αποτελέσματα της ικανότητας καθαρισμού ελεύθερων ριζών υπεροξειδίου των ενζύμων μήλου στην ομάδα ελέγχου και η πειραματική ομάδα σε διαφορετικές συγκεντρώσεις παρουσιάζονται στο Σχήμα 3.4.

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 3.4, υπάρχει μεγάλη διαφορά στο υπεροξειδικό ανιόν ελεύθερων ριζών ικανότητας καθαρισμού μεταξύ της πειραματικής ομάδας και της ομάδας ελέγχου. Μέσα στο εύρος συγκέντρωσης που παρουσιάζεται στο πείραμα, η ικανότητα καθαρισμού των υπεροξειδίων ανιόντων της πειραματικής ομάδας μεταβάλλεται πιο σημαντικά όταν η συγκέντρωση του δείγματος είναι 10%έως 20%και η αλλαγή δεν είναι προφανής αφού η συγκέντρωση είναι μεγαλύτερη από 20%. Όταν η συγκέντρωση είναι 50%, η ικανότητα καθαρισμού ελεύθερων ριζών υπεροξειδίου είναι τόσο υψηλή όσο 85,4%. Η ικανότητα καθαρισμού ελεύθερων ριζών υπεροξειδίου που φαίνεται από την ομάδα ελέγχου μπορεί να φανεί σαφώς από το διάγραμμα τάσης. Καθώς αυξάνεται η συγκέντρωση του ενζύμου, αυτή η ικανότητα καθαρισμού ελεύθερων ριζών αυξάνεται επίσης, αλλάζει αργά και σταδιακά τείνει σε σταθερή κατάσταση. Η ικανότητα καθαρισμού φθάνει το μέγιστο 42,6%. Η πειραματική ομάδα είναι σχεδόν διπλάσια από την ομάδα ελέγχου.

 

 

3.2.4 Δυνατότητα καθαρισμού ελεύθερης ρίζας υδροξυλίου

Οι μεταβολές στην ικανότητα καθαρισμού ελεύθερης ρίζας υδροξυλίου των ενζύμων της Apple στην ομάδα ελέγχου και στην πειραματική ομάδα σε διαφορετικές συγκεντρώσεις παρουσιάζονται στο σχήμα 3.5.

 

 

Εικ.3.5 Η καμπύλη της ελεύθερης ριζικής υδροξυλίου καθαρισμού

 

Μπορεί να φανεί από το Σχήμα 3.5 ότι εντός της περιοχής συγκεντρώσεων που παρουσιάζεται στο πείραμα, η ικανότητα καθαρισμού των ενζύμων της ελεύθερης ρίζας υδροξυλίου των ενζύμων στην πειραματική ομάδα και η ομάδα ελέγχου αυξήθηκαν με την αύξηση της προστιθέμενης ποσότητας. Η ικανότητα καθαρισμού των ελεύθερων ριζών υδροξυλίου της πειραματικής ομάδας ήταν χαμηλότερη από εκείνη της ομάδας ελέγχου και εκτελούσε πολύ άσχημα σε χαμηλές συγκεντρώσεις. Σε υψηλές συγκεντρώσεις, η ικανότητα καθαρισμού ελεύθερης ρίζας υδροξυλίου αυξήθηκε σημαντικά. Ο λόγος μπορεί να είναι ότι κατά τη διάρκεια της διαδικασίας ζύμωσης, οι τύποι και τα περιεχόμενα των μικροοργανισμών στα ένζυμα της Apple στην πειραματική ομάδα και στην ομάδα ελέγχου ήταν διαφορετικά και τα περιεχόμενα των δευτερογενών μεταβολιτών και των συστατικών κάθε προϊόντος που παράγονται από τη ζύμωση ήταν διαφορετικά, έτσι η αντιοξειδωτική ικανότητα ήταν διαφορετική.

 

3.2.5 DPPH · Δυνατότητα καθαρισμού ελεύθερων ριζών

Σε σύγκριση με άλλες μεθόδους ανίχνευσης, η ικανότητα καθαρισμού DPPH · ελεύθερων ριζών χρησιμοποιείται ευρέως για την αξιολόγηση της αντιοξειδωτικής δραστικότητας σε σύντομο χρονικό διάστημα [59]. Η ικανότητα καθαρισμού DPPH · ελεύθερων ριζών σε διαφορετικές συγκεντρώσεις απεικονίστηκε σύμφωνα με τα αποτελέσματα της ομάδας ελέγχου και των πειραματικών ενζύμων Apple, όπως φαίνεται στο σχήμα 3.6.

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 3.6, όταν η συγκέντρωση του ενζύμου της ομάδας ελέγχου Apple ήταν χαμηλότερη από 30%, η ικανότητα καθαρισμού DPPH · ελεύθερων ριζών ήταν μικρότερη από 50%, αλλά το πειραματικό ένζυμο της Apple της ομάδας έδειξε επίσης υψηλότερη ικανότητα καθαρισμού DPPH · ελεύθερων ριζών σε χαμηλές συγκεντρώσεις. Τα πειραματικά αποτελέσματα δείχνουν ότι η προσθήκη Aspergillus oryzae, ζύμης, θερμοφιλικού στρεπτόκοκκου και βουλγαρικού λακτοβακίλλου είναι επωφελής για την ικανότητα καθαρισμού ελεύθερων ριζών του ενζύμου. Όταν η συγκέντρωση ενζύμου είναι 50%, αυτή η ικανότητα είναι τόσο υψηλή όσο 91,4%, η οποία είναι πολύ υψηλότερη από το 69,8%της ομάδας ελέγχου στην ίδια συγκέντρωση.

 

3.2.6 ABTS Ριζική ικανότητα καθαρισμού

Τα αποτελέσματα της ικανότητας καθαρισμού ριζών ABTS των ενζύμων της Apple στην ομάδα ελέγχου και της πειραματικής ομάδας σε διαφορετικές συγκεντρώσεις παρουσιάζονται στο σχήμα 3.7.

Εικ.3.7 Η καμπύλη της ικανότητας σάρωσης ριζών ABTS
Μπορεί να φανεί από το Σχήμα 3.7 ότι ο ρυθμός καθαρισμού των ενζύμων της Apple στην πειραματική ομάδα είναι υψηλότερος όταν η ποσότητα προσθήκης ενζύμου είναι μεγαλύτερη από 5 μΐ. Η μελέτη από τους Erel et αϊ. έδειξε ότι η ικανότητα καθαρισμού των ριζών ABTS εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από την υψηλότερη συγκέντρωση φαινολικών ουσιών [60]. Τα αποτελέσματα του συνολικού προσδιορισμού της περιεκτικότητας σε φαινόλη έδειξαν ότι η συνολική περιεκτικότητα σε φαινόλη της πειραματικής ομάδας ήταν υψηλότερη από αυτή της ομάδας ελέγχου. Τα πειραματικά αποτελέσματα στο Σχήμα 3.7 απλώς επαληθεύτηκαν ότι η ικανότητα καθαρισμού των ριζοσπαστών ABTS είναι μεγαλύτερη από αυτή της ομάδας ελέγχου.

 

3.3 Περίληψη αυτού του κεφαλαίου

Αυτό το κεφάλαιο μελετά τη σχέση μεταξύ της αντιοξειδωτικής δραστικότητας των ενζύμων της Apple που παράγονται με ζύμωση με τέσσερα επιλεγμένα στελέχη των μήλων, τη συγκέντρωση δειγμάτων ενζύμων και τη σύγκριση των αντιοξειδωτικών δραστικών συστατικών και την ικανότητα καθαρισμού των ελεύθερων ριζών μεταξύ της πειραματικής ομάδας και της ομάδας ελέγχου. Τα πειραματικά αποτελέσματα δείχνουν ότι η συνολική περιεκτικότητα σε φαινόλη του ενζύμου της Apple στην ομάδα ελέγχου είναι χαμηλότερη από εκείνη της πειραματικής ομάδας και η μειωμένη ισχύς της, η ελεύθερη ρίζα υπεροξειδίου, η ελεύθερη ρίζα DPPH και η ικανότητα καθαρισμού των ελεύθερων ριζών ABTS. Το ένζυμο στην ομάδα ελέγχου έχει μια ιδιαίτερα καλή ικανότητα καθαρισμού για τις ελεύθερες ρίζες υδροξυλίου.
Γενικά, η πειραματική ομάδα έδειξε υψηλότερη αντιοξειδωτική δραστικότητα, η οποία επιβεβαίωσε περαιτέρω τη σκοπιμότητα της τεχνητής προσθήκης στελεχών για την παραγωγή μικροβιακών ενζύμων. Με αυτόν τον τρόπο, τα μικροβιακά ενζυμικά τρόφιμα έχουν περισσότερες ουσίες ευεργετικές για την ανθρώπινη υγεία με βάση την αρχική φυσική ζύμωση και μπορούν να αναπτυχθούν καλύτερα προς την κατεύθυνση που αναμένεται από τους ανθρώπους.