Το λυκοπένιο και η Ν-ακετυλοκυστεΐνη παρέχουν προστασία κατά των βλαβών που προκαλούνται από τη σισπλατίνη

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Συνεργικές προστατευτικές επιδράσεις του λυκοπενίου και της Ν-ακετυλοκυστεΐνης έναντι της ηπατονεφρικής τοξικότητας που προκαλείται από τη σισπλατίνη σε αρουραίους

Asmaa Elsayed, Ashraf Elkomy & et al.

Εισαγωγή

σισπλατίνηΤο (CP) είναι ένα από τα πιο συχνά χρησιμοποιούμενα χημειοθεραπευτικά φάρμακα. Παρόλοσισπλατίνηέχει γνωστή αντινεοπλασματική δράση έναντι πολλαπλών κακοηθειών, οι ανεπιθύμητες ενέργειες, κυρίως λόγω των αυξημένων οξειδωτικών και κυτταρικών αποπτωτικών επιδράσεων σε διαφορετικούς ιστούς, περιορίζουν τη χορήγησή του-2. CP (σισπλατίνη) είναι ένας εξαιρετικά δραστικός κυτταροτοξικός παράγοντας στη θεραπεία του καρκίνου. Ωστόσο, η νεφροτοξικότητα περιορίζει τη χρήση του4. CP (σισπλατίνη) η χορήγηση οδηγεί σε ηπατική βλάβη λόγω υπεροξείδωσης και οξείδωσης λιπιδίων που οδηγεί σε αλλαγές στους βιοδείκτες του ήπατος και στα αντιοξειδωτικά ένζυμα³. Πολλές μελέτες έχουν αναφέρει CP (σισπλατίνη)-επαγόμενη ηπατοτοξικότητα- και νεφροτοξικότητα10-14.

Λυκοπένιο (LP)είναι ένα άκυκλο καροτενοειδές (ένα παράγωγο βιταμίνης Α) με ισχυρή και αποτελεσματική δράση δέσμευσης ελεύθερων ριζών και αντιφλεγμονώδη, ανοσοδιεγερτική, αντιβιοτική και αντιμεταλλαξιογόνο δράση15,16, LP (Λυκοπένιο) είναι μια κόκκινη χρωστική ουσία που εμφανίζεται σε μεγάλη αφθονία στις ντομάτες και σε άλλα κόκκινα φρούτα. Η χημική δομή του λυκοπενίου περιέχει πολλούς διπλούς δεσμούς που παίζουν σημαντικό ρόλο στη σάρωση των ενεργών ειδών οξυγόνου (ROS). LP (Λυκοπένιο), ένα φυσικό αντιοξειδωτικό, έχει αντιοξειδωτική δράση έναντι πολλών τραυματισμών ιστών που προκαλούνται από το οξειδωτικό στρες9. Το λυκοπένιο in vitro, η αντιοξειδωτική αποτελεσματικότητα είναι έως και 100 φορές πιο ισχυρή από τη βιταμίνη Ε. Επιπλέον, το LP (Λυκοπένιο) έχει χημειοπροληπτική δράση έναντι ορισμένων μορφών καρκίνου20 Η προστατευτική δράση του LP (Λυκοπένιο) κατά της ηπατονεφρικής βλάβης που προκαλείται από χημειοθεραπευτικά έχει προσελκύσει σημαντική ερευνητική δραστηριότητα τα τελευταία χρόνια.

Ν-ακετυλοκυστεΐνη (NAC)είναι ένα φαρμακευτικό και διατροφικό συμπλήρωμα που χρησιμοποιείται συνήθως ως βλεννολυτικός παράγοντας για την αντιμετώπιση της υπερβολικής δόσης παρακεταμόλης1. NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) είναι ένα προ-φάρμακο της L-κυστεΐνης, ενός προδρόμου της γλουταθειόνης (GSH). Η ισορροπία οξειδωτικού-αντιοξειδωτικού μπορεί να ρυθμιστεί από το NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) ρύθμιση των επιπέδων GSH στα κύτταρα, αναστολή της υπεροξείδωσης των λιπιδίων και σάρωση ROs2,23. Το NAC είναι ικανό να αποκαθιστά την προοξειδωτική/αντιοξειδωτική ισορροπία και έχει χρησιμοποιηθεί συνήθως ως αποτελεσματικό αντιοξειδωτικό κατά του οξειδωτικού στρες τόσο in vivo όσο και in vitro2425. CP (σισπλατίνη) έχει χρησιμοποιηθεί κλινικά για πολλές ασθένειες ως χηλικός παράγοντας βαρέων μετάλλων για την προστασία από το οξειδωτικό στρες και την πρόληψη του κυτταρικού τραυματισμού26. NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) έχει ευεργετικές φαρμακευτικές ιδιότητες, συμπεριλαμβανομένης της αναστολής της καρκινογένεσης, της ογκογένεσης, της μεταλλαξιογένεσης και της ανάπτυξης και των μεταστάσεων του όγκου27.

Ο στόχος αυτού του σχεδιασμού ήταν να προσδιοριστούν οι προστατευτικές επιδράσεις του LP (Λυκοπένιο) και/ή NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) κατά της ηπατικής και νεφρικής τοξικότητας που προκαλείται από CP (σισπλατίνη) σε αρουραίους διερευνώντας τους βιοχημικούς δείκτες, τους δείκτες οξειδωτικού στρες και την έκφραση της κασπάσης-3.

Το Cistanche μπορεί να θεραπεύσει τη μειωμένη νεφρική λειτουργία

Υλικά και μέθοδοι

Χημικά. CP (σισπλατίνη) (Αριθμός CAS:15663-27-1), (50 mg/ml παρεντερική χορήγηση) αγοράστηκε από την EIMC Pharmaceuticals Company (Κάιρο, Αίγυπτος). LP (Λυκοπένιο) (Αριθμός CAS:502-65-8) αγοράστηκε από την Sigma Aldrich Company (Saint Louis, MO, ΗΠΑ).NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) (Αριθμός CAS:616-91-1) αγοράστηκε από την South Egypt Drug Industries Company (SED-ICO) (6 Οκτωβρίου Πόλη, Αίγυπτος). Τα αναλυτικά κιτ αγοράστηκαν από την εταιρεία Bio-diagnostics (Giza, Αίγυπτος).

ΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ ΤΟΥ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΟΣ CISTANCHE: προστατεύει το συκώτι

Αποτελέσματα

σισπλατίνηέκανε επαγωγή για ηπατοτοξικότητα και νεφροτοξικότητα που υποδεικνύεται από τα αυξημένα επίπεδα στον ορό των βιοδεικτών του ήπατος και των νεφρών (Πίνακας 1). Οι δραστηριότητες AST, ALT και ALP και η συγκέντρωση της κρεατινίνης, της ουρίας, της χοληστερόλης, των τριγλυκεριδίων και της χοληστερόλης LDL αυξήθηκαν σημαντικά καθώς αποτέλεσμα της CP (σισπλατίνη) θεραπεία σε σύγκριση με αυτές των αρουραίων ελέγχου. Επίσης, CP (σισπλατίνη) μείωσε τις συγκεντρώσεις της ολικής πρωτεΐνης, της λευκωματίνης και της HDL χοληστερόλης στον ορό. Από την άλλη πλευρά, η περίπτωση είναι διαφορετική όταν αυτές οι παράμετροι μειώθηκαν σημαντικά στους επίμυες που έλαβαν θεραπεία με CP με LP (Λυκοπένιο), NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη), ή θεραπεία συνδυασμού (LP (Λυκοπένιο) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη)) σε σύγκριση με την ομάδα CP. Σημειωτέον, αυτές οι παράμετροι μειώθηκαν σημαντικά όταν οι αρουραίοι που είχαν τοξίξει με CP υποβλήθηκαν σε θεραπεία και με LP(σισπλατίνη) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) σε σχέση με τη θεραπεία με LP (Λυκοπένιο) ή NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) μόνος. Οι τιμές ήταν σημαντικά χαμηλότερες σε σύγκριση με τους ελέγχους. Έτσι, ένας συνδυασμός LP και NAC έδειξε καλύτερη προστασία από ηπατονεφρική βλάβη που προκαλείται από CP παρά μόνος του.

Πίνακας 1. Επιδράσεις των LP, NAC και/ή CP στις βιοχημικές παραμέτρους ορού (n=7). Τα δεδομένα εκφράζονται ως μέσος όρος±SE (n=7).Διαφορετικά γράμματα εκθέτη στην ίδια σειρά υποδεικνύουν στατιστική σημασία στο P Μικρότερο ή ίσο με 0.05.σισπλατίνη(CP) σε εφάπαξ δόση 7,5 mg/kg (IP). λυκοπένιο (LP) σε δόση 10 mg/kg. Ν-ακετυλοκυστεΐνη (NAC) σε δόση 150 mg/kg. ασπαρτική αμινοτρανσφεράση (AST); αμινοτρανσφεράση αλανίνης (ALT); αλκαλική φωσφατάση (ALP); λιποπρωτεΐνη υψηλής πυκνότητας (HDL); λιποπρωτεΐνη χαμηλής πυκνότητας (LDL).

Οι επιπτώσεις της CP (σισπλατίνη) δηλητηρίαση και θεραπεία με LP (Λυκοπένιο), NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη), και ο συνδυασμός τους σε MDA, μειωμένη γλουταθειόνη και αντιοξειδωτικά ένζυμα στους ιστούς του ήπατος και των νεφρών παρουσιάζονται στους Πίνακες 2 και 3, αντίστοιχα. Τα επίπεδα MDA αυξήθηκαν σημαντικά και τα επίπεδα CAT, SOD και GSH στο ήπαρ μειώθηκαν σημαντικά σε επίμυες που είχαν εθιστεί με CP σε σύγκριση με τους αρουραίους ελέγχου. LP (Λυκοπένιο) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) οι θεραπείες άμβλυναν τις επιπτώσεις της CP (σισπλατίνη) σε MDA στον ηπατικό ιστό, CAT, SOD και GSH, αλλά αυτές οι τιμές y εξακολουθούσαν να διαφέρουν σημαντικά από τις τιμές ελέγχου. Συνδυασμένο LP (Λυκοπένιο) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) η θεραπεία βελτίωσε σημαντικά την οξειδωτική βλάβη που προκαλείται από CP σε ηπατικούς και νεφρικούς ιστούς σε σύγκριση με το LP (Λυκοπένιο) ή NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) μόνο θεραπείες. Αυτά τα αποτελέσματα επιβεβαιώθηκαν από το αποτέλεσμα της ιστοπαθολογίας.

Πίνακας 2. Επιδράσεις των LP, NAC και/ή CP σε αντιοξειδωτικές παραμέτρους σε ηπατικούς ιστούς (n=7).Τα δεδομένα εκφράζονται ως μέσος όρος±SE (n{0}}). Διαφορετικά γράμματα εκθέτη στην ίδια σειρά υποδεικνύουν στατιστική σημασία στο P Μικρότερο ή ίσο με 0,05.σισπλατίνη(CP) σε εφάπαξ δόση 7,5 mg/kg (IP). Λυκοπένιο (LP) σε δόση 10 mg/kg. Ν-ακετυλοκυστεΐνη (NAC) σε δόση 150 mg/kg. Μηλονοδιαλδεΰδη (MDA); καταλάση (CAT); υπεροξειδική δισμουτάση (SOD); μειωμένη γλουταθειόνη (GSH).

Πίνακας 3. Επιδράσεις LP NAC, και/ή CP σε αντιοξειδωτικές παραμέτρους στους νεφρικούς ιστούς. Τα δεδομένα εκφράζονται ως η μέση τιμή ±SE (n=7).Διαφορετικά γράμματα εκθέτη στην ίδια σειρά υποδεικνύουν στατιστική σημασία στο P Μικρότερο ή ίσο με 0.05.σισπλατίνη(CP) σε μια εφάπαξ δόση 7,5 mg/kg (IP)· Lvcopene (LP) σε δόση 10 mg/kg:Ν-ακετυλοκυστεΐνη (NAC) σε δόση 150 mg/kg. Μηλονοδιαλδεΰδη (MDA); καταλάση (CAT); υπεροξειδική δισμουτάση (SOD); μειωμένη γλουταθειόνη (GSH).

Τα ιστοπαθολογικά ευρήματα έδειξαν φυσιολογικά οργανωμένα ηπατοκύτταρα που σχηματίζουν ηπατικές χορδές γύρω από την κεντρική φλέβα, με φυσιολογικούς ηπατικούς ιστούς συμπεριλαμβανομένων των ημιτονοειδών αίματος και των πυλαίων δομών που παρατηρήθηκαν σε τομές ιστού από ορό ελέγχου, LP.Λυκοπένιο), και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη)-θεραπευμένοι αρουραίοι. Αντίθετα, παρατηρήσαμε σοβαρές εναλλακτικές αλλαγές στο ηπατικό παρέγχυμα, συμπεριλαμβανομένης της απώλειας της φυσιολογικής διάταξης των ηπατικών χορδών, της συμφόρησης της κεντρικής φλέβας και των ιγμορείων, ενός αφρώδους κενοτοπιώδους κυτταροπλάσματος και αξιοσημείωτες εκφυλιστικές αλλαγές που σχετίζονται με σοβαρή πυρηνική πύκνωση που παρατηρήθηκε σε τομές CP. (σισπλατίνη) αρουραίους που έλαβαν θεραπεία. Είναι ενδιαφέρον, το LP (Λυκοπένιο), NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη), και ο συνδυασμός τους αποκατέστησε σημαντικά τη συνήθη ηπατική αρχιτεκτονική (Εικ. 1).

Από την άλλη πλευρά, το Σχήμα 2 έδειξε τη φυσιολογική αρχιτεκτονική του νεφρικού φλοιού, του νεφρικού σωματίου, του σπειράματος, των εγγύς σπειροειδών σωληναρίων και των άπω περιελιγμένων σωληναρίων των αρουραίων από τον έλεγχο, LP (Λυκοπένιο), και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) ομάδες. Αντίθετα, CP (σισπλατίνη)-μεθυσμένοι αρουραίοι εμφάνισαν σοβαρές νεφρωτικές αλλοιώσεις που σχετίζονται με έντονες εκφυλιστικές αλλαγές στην επιθηλιακή επένδυση των νεφρικών σωληναριακών, συμφορημένα ενδονεφρικά αιμοφόρα αγγεία, υδροπικό εκφυλισμό, πυκνωτικούς πυρήνες στα επιθηλιακά κύτταρα και υλικά υαλώδους χυτού στον αυλό των περισσότερων σωληναρίων. Θεραπεία με LP (Λυκοπένιο), NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη), ή ο συνδυασμός τους απέτρεψε τις ιστοπαθολογικές αλλαγές των νεφρών που προκαλούνται από την CP (σισπλατίνη).

Όσον αφορά τα αποτελέσματα της ανοσοϊστοχημικής, υπήρξε δραματική ανοδική ρύθμιση της κασπάσης-3 είτε κυτταροπλασματικής είτε πυρηνικής έκφρασης στους ηπατικούς και νεφρικούς ιστούς που προκαλείται από CP (σισπλατίνη)(Εικ.3 και 4, αντίστοιχα). Από την άλλη πλευρά, εκφράσεις κασπάσης-3 ελαφρώς προς τα πάνω ρυθμισμένες σε αντίθεση με την ομάδα ελέγχου βρέθηκαν στο LP (Λυκοπένιο) συν CP και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) συν ομάδες CP. Επιπλέον, το CP (σισπλατίνηΗ ρύθμιση προς τα πάνω με τη μεσολάβηση της κασπάσης-3 μειώθηκε απότομα από τη συνδυασμένη θεραπεία της LP (Λυκοπένιο) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη).

ΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΟΣ CISTANCHE: ΑΝΤΙΦΛΕΓΜΟΝΟ

Συζήτηση

CP (σισπλατίνη) προκαλεί αντικαρκινικές επιδράσεις αλληλεπιδρώντας με το DNA και προκαλώντας προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο. Πολλαπλές in vitro μελέτες έχουν δείξει τις κυτταροτοξικές επιδράσεις της CP σε διαφορετικές κυτταρικές σειρές, αλλά μόνο λίγες in vivo μελέτες έχουν πραγματοποιηθεί45,32-36. Τα ευρήματά μας είναι σύμφωνα με τα in vivo αποτελέσματα άλλων μελετών, συμπεριλαμβανομένης της εμπλοκής του οξειδωτικού στρες και των αποπτωτικών μηχανισμών στην επαγόμενη από CP ηπατονεφρική βλάβη και την πιθανή χρήση του LP (Λυκοπένιο) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) ως προστατευτικοί παράγοντες έναντι τραυματισμού που προκαλείται από CP.

Οι αυξημένες δραστηριότητες των ηπατικών ενζύμων υποδηλώνουν κυτταρική διαρροή και απώλεια της λειτουργικής ακεραιότητας των ηπατοκυττάρων. τα ηπατικά ένζυμα απελευθερώνονται στην κυκλοφορία του αίματος όταν οι πλασματικές μεμβράνες των ηπατοκυττάρων είναι εξασθενημένες1, Σε αυτή τη μελέτη, CP (σισπλατίνηΗ επαγόμενη από ) ηπατοτοξικότητα αποδείχθηκε από σημαντικές εναλλαγές στα ηπατικά ένζυμα ορού (AST, ALT και ALP). CP (σισπλατίνη) απορροφάται από το ήπαρ και συσσωρεύεται στα ηπατοκύτταρα, προκαλώντας κυτταρική βλάβη που τελικά οδηγεί σε αύξηση των κυκλοφορούντων ηπατικών ενζύμων*. Επιπλέον, η CP αύξησε τα επίπεδα κρεατινίνης και ουρίας, σε συμφωνία με προηγούμενες μελέτες,17,37. Τα αυξημένα επίπεδα κρεατινίνης και ουρίας προκαλούνται από μειωμένο ρυθμό σπειραματικής διήθησης. Επιπλέον, οι Cayer et al.38 απέδωσαν την τοξικότητα του ήπατος και των νεφρών που προκαλείται από την CP σε ελεύθερες ρίζες που δημιουργούνται στα κύτταρα του ήπατος και των νεφρών, με αποτέλεσμα την υπεροξείδωση του λιπιδίου και κατά συνέπεια να οδηγεί σε οξειδωτικό στρες που καταστρέφει τα κύτταρα.

Η χορήγηση CPV προκάλεσε σημαντικές μειώσεις στη συνολική κυκλοφορούσα πρωτεΐνη και λευκωματίνη. Αυτό το αποτέλεσμα ήταν σε συμφωνία με τους Abuzinadah και Ahmad3. Μετά από ηπατική βλάβη, CP (σισπλατίνη) η δηλητηρίαση μειώνει την πρωτεϊνοσύνθεση και μεταβάλλει τη λειτουργική ακεραιότητα του νεφρού, οδηγώντας σε πρωτεϊνουρία και, τελικά, σε μειωμένα επίπεδα πρωτεΐνης στην κυκλοφορία40.

Διαχείριση CP (σισπλατίνη) είχε ως αποτέλεσμα σημαντικά αυξημένη κυκλοφορούσα χοληστερόλη, τριγλυκερίδια και LDL χοληστερόλη και μειωμένη HDL χοληστερόλη. Το συκώτι παίζει ζωτικό ρόλο στη ρύθμιση των επιπέδων χοληστερόλης στο πλάσμα. Έτσι, όταν η ηπατική δυσλειτουργία προκαλείται από φαρμακευτική αγωγή, τα επίπεδα της ολικής χοληστερόλης (TC) και της LDL-χοληστερόλης ορού είναι αυξημένα41. Η σημαντική αύξηση των επιπέδων της TC, των τριγλυκεριδίων (TG) και της LDL-χοληστερόλης στον ορό μετά από έκθεση αρουραίων σεσισπλατίνηείναι πιθανό να οφείλεται στις ανεπιθύμητες ενέργειες της CP, που οδηγεί σε ηπατοκυτταρική δυσλειτουργία και διαταραχή του μεταβολισμού των λιπιδίων, σε συμφωνία με τα ευρήματα των Akindele et al.42. Το ήπαρ συνθέτει TG και μετατρέπει την TG σε χοληστερόλη λιποπρωτεΐνης πολύ χαμηλής πυκνότητας (VLDL) για μεταφορά στους περιφερειακούς ιστούς και η διαταραχή της σύνθεσης της VLDL-C οδηγεί σε αυξημένα επίπεδα TG3. Μια αξιοσημείωτη ανάκαμψη από βλάβη CP παρατηρήθηκε στο LP (Λυκοπένιο) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη)-θεραπευμένες ομάδες. Επιπλέον, NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) και LP (Λυκοπένιο) έχουν υπολιπιδαιμικές επιδράσεις28,44.

Όσον αφορά τις παραμέτρους οξειδωτικού στρες/αντιοξειδωτικών, τα επίπεδα MDA (αυξημένη υπεροξείδωση λιπιδίων) αυξήθηκαν σημαντικά και τα αντιοξειδωτικά (CAT, SOD και GSH) μειώθηκαν σημαντικά στους ιστούς του ήπατος και των νεφρών μετά από CP (σισπλατίνη) θεραπευτική αγωγή. Αυτά τα αποτελέσματα συμφωνούν με τους Abd El-Kader και Tahal, Abdel-Razek et al.12 και Elkomy et al.!. Η δημιουργία ROS, όπως ανιόντα υπεροξειδίου και ρίζες υδροξυλίου, έχει ως αποτέλεσμα τη μεσολάβηση του οξειδωτικού στρες και την εξάντληση των αντιοξειδωτικών του πλάσματος39.

LP (Λυκοπένιο) αναστέλλει την υπεροξείδωση των λιπιδίων αντιδρώντας απευθείας με διάφορα ROS και αποτρέποντας τη μιτοχονδριακή βλάβη που προκαλείται από την CP (σισπλατίνη). Τα αποτελέσματά μας υποδηλώνουν ότι το LP (Λυκοπένιο) παρεμβαίνει στην οξείδωση των λιπιδίων της μιτοχονδριακής μεμβράνης. LP (Λυκοπένιο) αναστέλλει την υπεροξείδωση των λιπιδίων ως διακόπτης αλυσίδας, σαρωτής ελεύθερων ριζών και αντιοξειδωτικός διαμορφωτής 45.

Τα ευεργετικά αποτελέσματα του NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) αποδίδονται στον ρόλο του ως ισχυρού καθαριστή ελεύθερων ριζών. Η ελεύθερη σουλφυδρυλική ομάδα του NAC μπορεί να αντιδράσει απευθείας με ηλεκτρόφιλες ενώσεις, όπως οι ελεύθερες ρίζες45. Το NAC διεγείρει επίσης τη σύνθεση GSH και, επομένως, διεγείρει την ενδογενή αντιοξειδωτική δραστηριότητα². Η άμεση αντιοξειδωτική δράση και η διέγερση της ενδογενούς αντιοξειδωτικής δράσης εξηγούν την ικανότητα του NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) για την αποκατάσταση της οξειδωτικής ομοιόστασης στο ήπαρ και τα νεφρά στη μελέτη μας. Η σάρωση των ελεύθερων ριζών του NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) μπορεί να αποτρέψει τη διαταραχή της νεφρικής ροής αίματος μετά από απόφραξη της κάτω κοίλης φλέβας και να αποτρέψει τη μειωμένη νεφρική αγγειακή αντίσταση που προκαλείται από CP (σισπλατίνη) 48. Η επίδραση του NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) σχετικά με τη νεφρική ροή αίματος και την αγγειακή αντίσταση σε αρουραίους που έχουν υποστεί τοξίκωση με CP μπορεί να εξηγήσει τη βελτίωση της νεφρικής λειτουργίας που παρατηρήθηκε σε αυτή τη μελέτη.

Εικόνα 1, Ιστοπαθολογικές αλλαγές σε τομές ήπατος.

(α)-(γ) Φυσιολογική οργάνωση των ηπατικών χορδών (παχύ βέλος), του ημιτονοειδούς αίματος (λεπτά βέλη) και της κεντρικής φλέβας (CV) του ήπατος στον έλεγχο (α), LP (Λυκοπένιο)(β) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη)(γ) ομάδες.

CP (σισπλατίνη) οι επαγόμενες από το ήπαρ αλλαγές περιλαμβάνουν σοβαρές εκφυλιστικές αλλαγές, όπως απώλεια της φυσιολογικής διάταξης των ηπατικών χορδών, κενοτοπίαση (λεπτά βέλη), αφρώδης εμφάνιση (παχύ βέλος) και πυκνωτικούς πυρήνες ορισμένων ηπατοκυττάρων (S).

(ε)CP (σισπλατίνη)-προκαλούμενη απώλεια της φυσιολογικής κυτταρικής αρχιτεκτονικής των ηπατικών χορδών με σοβαρή ηπατική κενοτόπιση (παχύ βέλος), διεσταλμένο ημιτονοειδές αίμα (λεπτό βέλος) και πυρήνες ηπατοκυττάρων (κοντό βέλος).

(στ) ιστολογικές αλλαγές στο ήπαρ στο LP (Λυκοπένιο) συν CP (σισπλατίνη) ομάδα. Οι μέτριες επιδράσεις στο ήπαρ περιλαμβάνουν συμφόρηση αιμοφόρων αγγείων (CV), διεσταλμένο ημιτονοειδές αίμα (παχύ βέλος) και συμπύκνωση της πυρηνικής χρωματίνης των ηπατοκυττάρων (λεπτό βέλος).

(ζ) Ιστολογικές αλλαγές στο ήπαρ στο NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) συν CP (σισπλατίνη) ομάδα. Οι μέτριες επιδράσεις στο ήπαρ περιλαμβάνουν συμφόρηση CV, υδροπικό εκφυλισμό (λεπτά βέλη) και αποκοκκισμένο κυτταρόπλασμα ηπατοκυττάρων (παχύ βέλος).

(η) Ιστολογικές αλλαγές στο ήπαρ στο LP (Λυκοπένιο) συν NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) συν CP (σισπλατίνη) ομάδα. Οι ήπιες επιδράσεις στο ήπαρ περιλαμβάνουν διεσταλμένα αιμοφόρα αγγεία (CV) και ημιτονοειδή (βέλη) του αίματος. Γραμμή κλίμακας=50 μm.

Εκτός από τη δραστηριότητα σάρωσης ROS, το LP (Λυκοπένιο) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) αποκατέστησε τις δραστηριότητες του SOD και CAT και τα επίπεδα GSH στο CP (σισπλατίνη)-μεθυσμένοι αρουραίοι. Επομένως, προτείνουμε ανεπιφύλακτα το LP (Λυκοπένιο) και/ή NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη)-προκαλούμενες βελτιώσεις στις βιοχημικές παραμέτρους του ορού που δοκιμάστηκαν σε αυτή τη μελέτη διαμεσολαβήθηκαν από την καταστολή του ROS και την προς τα πάνω ρύθμιση των αντιοξειδωτικών μηχανισμών έναντι της CP (σισπλατίνη)-επαγόμενη οξειδωτική βλάβη.

LP (Λυκοπένιο) αποτελείται από άτομα άνθρακα και υδρογόνου (CHs6) με πολλούς διπλούς δεσμούς που μειώνουν την ενέργεια που απαιτείται για την μετεγκατάσταση ηλεκτρονίων παρέχοντας μια καλή πηγή δωρεάς ατόμου υδρογόνου που απαιτείται για τη σταθεροποίηση των ελεύθερων ριζών. Από το LP (Λυκοπένιο) είναι λιπόφιλο, είναι ενσωματωμένο με τη λιπιδική διπλοστοιβάδα της κυτταρικής μεμβράνης επιτρέποντας την αφαίρεση του ατόμου Η από το LP (Λυκοπένιο) αντί των ακόρεστων λιπαρών οξέων που σταματούν την CP (σισπλατίνη)-επαγόμενη υπεροξείδωση λιπιδίων που παρατηρείται από μια δραστική μείωση του MDA49.

Εικόνα 2. Ιστοπαθολογικές αλλαγές σε τομές νεφρού.

(α)-(γ) Φυσιολογική αρχιτεκτονική του νεφρικού φλοιού, του νεφρικού σωληναρίου (βέλος), του σπειράματος (G), των εγγύς σπειροειδών σωληναρίων (P) και των άπω περιελιγμένων σωληναρίων (D) στον έλεγχο (a), LP (Λυκοπένιο) (1β) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη)(δ) ομάδες.

(δ) CP (σισπλατίνη)-προκάλεσε σοβαρές εκφυλιστικές αλλαγές στην επένδυση του επιθηλίου του νεφρικού σωληνίσκου (f), συμφόρηση των ενδονεφρικών αιμοφόρων αγγείων (Ι), υδροπικό εκφυλισμό (λεπτό βέλος) και πυρήνες πύκνωσης των επιθηλιακών κυττάρων (παχύ βέλος).

(ε) CP (σισπλατίνη)-προκαλούμενη απώλεια της φυσιολογικής αρχιτεκτονικής στα νεφρικά σωληνάρια, με υλικά χυτού υαλοειδούς στον αυλό των περισσότερων σωληναρίων (παχιά βέλη), αποκοκκισμένο κυτταρόπλασμα σε ορισμένα επιθηλιακά κύτταρα (d) και αποκολλημένα κύτταρα (λεπτό βέλος).

(στ) Ιστολογικές αλλαγές στο νεφρό στο LP (Λυκοπένιο) συν CP (σισπλατίνη) ομάδα. Μέτριες επιδράσεις στα νεφρικά σωληνάρια και τα εκφυλισμένα και αποξηραμένα επιθηλιακά κύτταρα (παχύ βέλος).

(ζ) Ιστολογικές αλλαγές στο νεφρό στο NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) συν CP (σισπλατίνη) ομάδα. Οι μέτριες επιδράσεις περιλαμβάνουν συμφόρηση μεταξύ των νεφρικών αιμοφόρων αγγείων (C), υαλώδη χυτά υλικά στον αυλό ορισμένων σωληναρίων (h) και νέκρωση σε ορισμένα επιθηλιακά κύτταρα (e).

(η) Ιστολογικές αλλαγές στο νεφρό στο LP (Λυκοπένιο) συν NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) συν CP (σισπλατίνη) ομάδα. Οι ήπιες επιδράσεις περιλαμβάνουν πρωτεϊνούχα υλικά στον αυλό ορισμένων σωληναρίων (παχιά βέλη). Γραμμή κλίμακας= 50 um.

NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) είναι δότης θειόλης με αντιοξειδωτικές ιδιότητες. Είναι μια εξαιρετική πηγή σουλφυδρυλικών ομάδων και μετατρέπεται in vivo σε μεταβολίτες που διεγείρουν την παραγωγή γλουταθειόνης (GSH), διατηρώντας έτσι τα ενδοκυτταρικά επίπεδα GSH, ενισχύοντας την αποτοξίνωση και δρα απευθείας ως δεσμευτής ελεύθερων ριζών50.

Οι ιστολογικές και ανοσοϊστοχημικές παρατηρήσεις της παρούσας μελέτης ήταν σε αρμονία και επιβεβαίωσαν τις μεταβολές των βιοχημικών και οξειδωτικών/αντιοξειδωτικών παραμέτρων μεταξύ των πειραματικών ομάδων. CP (σισπλατίνη) η θεραπεία έδειξε αξιοσημείωτες νεφροτοξικές επιδράσεις, συμπεριλαμβανομένης της κυτταροπλασματικής κενοτόπισης στα σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα και της απόπτωσης όπως αναφέρθηκε από τους Alhoshani et al.4. Σοβαρές εκφυλιστικές αλλαγές στα νεφρικά σωληνάρια εμφανίστηκαν μετά από CP (σισπλατίνη) θεραπεία, συμπεριλαμβανομένου υδροπικού εκφυλισμού, πυρήνων πυρήνων, αυξημένων κυτταροπλασματικών κυστιδίων, κυτταροπλασματικής κενοτόπισης, νέκρωσης και απόπτωσης σωληνοειδών κυττάρων και απολέπισης νεκρωτικών επιθηλιακών κυττάρων, πλήρωσης των σωληναριακών αυλών και σχηματισμού υαλινοειδών εκμαγείων. Αυτά τα αποτελέσματα συμφωνούν με τα αποτελέσματα των Perse και Veceric-Haler51.

Εικόνα 3. Αλλαγές στην έκφραση ηπατικής κασπάσης-3.

(α)-(γ) έδειξε τις αρνητικές αντιδράσεις ανοσοχρώσης στον έλεγχο(α), LP (Λυκοπένιο)(β) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη)(γ) ομάδες.(δ) και(ε)CP (σισπλατίνη)-επαγόμενες αλλαγές που δείχνουν σοβαρή αντίδραση ανοσοχρώσης.

(στ) Χρώση κασπάσης στο LP (Λυκοπένιο) συν CP (σισπλατίνη) η ομάδα εμφάνισε μέτρια ανοσοχρώση. (ζ) Χρώση κασπάσης στο NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) συν η ομάδα CP έδειξε μέτρια ανοσοχρώση.

(η) Χρώση κασπάσης στο LP (Λυκοπένιο) συν NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) συν CP (σισπλατίνη) η ομάδα εμφάνισε ήπια ανοσοχρώση.

Γραμμή κλίμακας= 50 μm. CP (σισπλατίνη) επαγόμενη από τη θεραπεία έκφραση κασπασών-3, υποδηλώνοντας την εμφάνιση απόπτωσης σωληναριακών επιθηλιακών κυττάρων.

Αυτά τα αποτελέσματα επιβεβαιώνουν τα αποτελέσματα των Liu et al.52 και Miller et al.53, οι οποίοι απέδειξαν ότι η CP (σισπλατίνη) μετατράπηκε μεταβολικά σε μια πιο ισχυρή τοξίνη, η οποία προκάλεσε τραυματισμό του DNA και μιτοχονδριακό DNA και βλάβη στην αναπνοή.

Αυτές οι αλλαγές που προκαλούνται από τις τοξίνες οδηγούν στην ενεργοποίηση των αποπτωτικών οδών και στην έναρξη φλεγμονωδών αποκρίσεων.

Το CP (σισπλατίνηΗ επαγόμενη από ) ηπατοτοξικότητα, που υποδεικνύεται από ημιτονοειδή διαστολή, συμφόρηση αιμοφόρων αγγείων και αποδιοργανωμένη αρχιτεκτονική των ηπατικών λοβών, συνάδει με τις επαγόμενες από την CP επιδράσεις που αναφέρθηκαν από τους Elkomy et al.1.

NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) δεν είχε παρενέργειες στο ήπαρ ή στα νεφρά, όπως εκδηλώνεται από τη φυσιολογική ιστολογία σε αυτούς τους ιστούς. Τα δεδομένα μας επιβεβαίωσαν ότι η θεραπεία με NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) είχε προστατευτική δράση έναντι της νεφροτοξικότητας και της ηπατοτοξικότητας, που υποδεικνύεται από την εξασθένηση της CP (σισπλατίνη)-προκαλούμενες εκφυλιστικές αλλαγές στο ήπαρ και τους νεφρούς. Θεραπεία αρουραίων με LP (Λυκοπένιο) μείωσε τις νεφροτοξικές και ηπατοτοξικές επιδράσεις της CP (σισπλατίνη), όπως υποδεικνύεται από μέτρια ιστοπαθολογικά ευρήματα στο ήπαρ και τους νεφρούς. Ένας συνδυασμός LP (Λυκοπένιο) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) είχε μεγάλη προφυλακτική δράση κατά της CP (σισπλατίνη)-επαγόμενη ηπατοτοξικότητα και νεφροτοξικότητα. Οι αρουραίοι που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με LP (Λυκοπένιο) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) πριν από τη θεραπεία με CP είχε μόνο ήπιες ιστοπαθολογικές αλλοιώσεις του ήπατος και των νεφρών και ήπια έκφραση της κασπάσης 3, υποδεικνύοντας χαμηλότερο επίπεδο απόπτωσης. Αυτά τα αποτελέσματα συνάδουν με τα ευρήματα των Jiang et al.54, οι οποίοι θεώρησαν το LP (Λυκοπένιο) ένα αντιοξειδωτικό φάρμακο που προστατεύει το συκώτι και τα νεφρά από οξειδωτική βλάβη που προκαλείται από CP. Αυτά τα αποτελέσματα συμφωνούν επίσης με τους Abdel-Wahab et al.4, οι οποίοι απέδειξαν ότι το NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) εξασθένησε τη νεφροτοξικότητα που προκλήθηκε από CP και αποκατέστησε τη σωστή λειτουργία των νεφρών και με τον De Vries7, ο οποίος έδειξε ότι το NAC προήγαγε την αποτοξίνωση του ήπατος. Το NAC μπορεί επίσης να μειώσει τη συγκέντρωση της CP στο νεφρό αυξάνοντας τη νεφρική απέκκρισή του και/ή εμποδίζοντας τη συσσώρευσή του στον νεφρικό ιστό, όπως αναφέρουν οι Appenroth. ελεύθερες ρίζες και το Yalcin22 απέδειξαν ότι το NAC μπορεί να δράσει ως αντιοξειδωτικό φάρμακο.

Η προεπεξεργασία με LP και/ή NAC προστατεύει από την επαγόμενη από CP ηπατονεφρική τοξικότητα, όπως φαίνεται από τις βελτιωμένες βιοχημικές παραμέτρους, τους δείκτες οξειδωτικού στρες, την ιστοπαθολογία και την έκφραση κασπάσης-3. Ένας διατροφικός συνδυασμός LP και NAC μπορεί να ενισχύσει την ικανότητα σάρωσης ROS7. Τα δεδομένα μας αποκάλυψαν ότι η συγχορήγηση LP και NAC προκαλεί καλύτερη προστατευτική δράση έναντι της προσβολής της CP από τα μεμονωμένα συμπληρώματά τους.

Also, other natural products protected against hepatorenal toxicity induced by CP as Citrullus colocynthis, garlic oil>, θυμοκινόνη3 και L-καρνιτίνη».

Εικόνα 4, Αλλαγές στην έκφραση νεφρικής κασπάσης-3. (α)-(γ) έδειξε τις αρνητικές αντιδράσεις ανοσοχρώσης.

(ένα). Ομάδα ελέγχου που εμφανίζει πολύ ήπια ανοσοχρώση με κασπάση-3. Χρώση κασπάσης-3 στο LP (Λυκοπένιο)(β) και NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) (C) ομάδες έδειξαν αρνητική αντίδραση ανοσοχρώσης.

(δ) και (ε) ομάδα που έλαβε θεραπεία με CP (σισπλατίνη) έδειξε σοβαρή αντίδραση ανοσοχρώσης. (στ) Χρώση κασπάσης στο LP (Λυκοπένιο) συν η ομάδα CP έδειξε μέτρια ανοσοχρώση.

(ζ) Χρώση κασπάσης στο NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) συν CP (σισπλατίνη) η ομάδα εμφάνισε μέτρια ανοσοχρώση. (η) Χρώση κασπάσης στο LP (Λυκοπένιο) συν NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) συν η ομάδα CP παρουσίασε ήπια ανοσοχρώση.

Γραμμή κλίμακας =50 μm. ο νεφρός αυξάνοντας τη νεφρική του απέκκριση και/ή εμποδίζοντας τη συσσώρευσή του στον νεφρικό ιστό, όπως αναφέρεται από το Appenroth 36. Οι Zhao και Shichi7 έδειξαν ότι η ελεύθερη σουλφυδρυλική ομάδα μπορεί να αντιδράσει άμεσα με ηλεκτροφιλικές ενώσεις, όπως οι ελεύθερες ρίζες, και η Yalcin2 έδειξε ότι το NAC (Ν-ακετυλοκυστεΐνη) μπορεί να δράσει ως αντιοξειδωτικό φάρμακο.

συμπέρασμα

Συνολικά, τα δεδομένα μας υποδηλώνουν ότι η CP προκαλεί σημαντική βλάβη ιστού στο ήπαρ και τους νεφρούς λόγω οξειδωτικού στρες και αποπτωτικών μηχανισμών, όπως αποδεικνύεται από αλλοιωμένες βιοχημικές παραμέτρους και ιστοπαθολογικές βλάβες. Ο συνδυασμός LP και NAC επιδεικνύει προστατευτικά αποτελέσματα έναντι βλάβης που προκαλείται από CP στο ήπαρ και τους νεφρούς.

ΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΟΣ CISTANCHE: ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΟ

βιβλιογραφικές αναφορές

1, Elkomy, Α, et αϊ. Η L-καρνιτίνη μετριάζει το οξειδωτικό στρες και την αποδιοργάνωση των ενδιάμεσων νημάτων του κυτταροσκελετού σεσισπλατίνη-προκαλούμενη ηπατονεφρική τοξικότητα σε αρουραίους. Εμπρός. Pharmacol.11,574441(2020).

2. Sallam, AOet al. Τα βελτιωτικά αποτελέσματα της L-καρνιτίνης κατάσισπλατίνη-προκαλούμενη γοναδική τοξικότητα σε αρουραίους. Pak Vet. 41(1),147-151 (2021).

3. Antunes, LMG, Darin, JDAC & Bianchi, MDLPPΠροστατευτικές επιδράσεις της βιταμίνης C κατάσισπλατίνη-επαγόμενη νεφροτοξικότητα και υπεροξείδωση λιπιδίων σε ενήλικες αρουραίους: μια δοσοεξαρτώμενη μελέτη. Pharmacol.Res.41(4), 405-411(2000).

4. Alhoshani, ARet al. Προστατευτική δράση των συμπληρωμάτων ρουτίνης κατάσισπλατίνη-επαγόμενη νεφροτοξικότητα σε αρουραίους. BMC Nephrol.18(1),194(2017).

5. Karale, S.& Kamath, JVEffect of daidzein onσισπλατίνη-επαγόμενη ηπατοτοξικότητα και ηπατοτοξικότητα σε πειραματικούς αρουραίους. Indian J. Pharacol.49(1), 49-54(2017).

6. Boroja, T.et al. Εκχύλισμα καλοκαιρινού αλμυρού (Satureja hortensis L.) Φυτοχημικό προφίλ και διαμόρφωσησισπλατίνη-επαγόμενο ήπαρ,

νεφρική και τοξικότητα των όρχεων. Food Chem Toxicol. 118, 252-263 (2018).

7. Neamatallah, T., El-Shitany, NA, Abbas, AT, Ali, SS& Eid, BGHoney προστατεύει απόσισπλατίνη-επαγόμενη ηπατική και νεφρική τοξικότητα μέσω της αναστολής της έκφρασης COX-2 που προκαλείται από NF-KB και της αποπτωτικής οδού BAX/Bcl-2/κασπάσης-3 που εξαρτάται από το οξειδωτικό στρες. Food Funct.9(7), 3743-3754(2018).

8. Mohamed, HE& Badawy, MMMMRodulatory effect of zingerone κατάσισπλατίνηή ηπατοτοξικότητα που προκαλείται από ακτινοβολία γ μέσω ρύθμισης μοριακής στόχευσης. Appl Radiat Isot.154,108891(2019).

9. Abdel-Daim, MMet al. Επίδραση του ελαίου σκόρδου (Allium sativum) στοσισπλατίνη-προκαλούμενες ηπατονεφρικές βιοχημικές και ιστοπαθολογικές αλλοιώσεις σε αρουραίους. Total Sci. Environ.710,136338 (2020).

10. El-Kordy, EA Επίδραση της σουραμίνης στη βλάβη των εγγύς νεφρικών σωληναριακών κυττάρων που προκαλείται απόσισπλατίνησε αρουραίους (ιστολογική και ανοσοϊστοχημική μελέτη). J. Microsc.Ultrastruct.7(4),153-164 (2019).

11. Abd El-Kader, M.& Taha,RI Συγκριτικά νεφροπροστατευτικά αποτελέσματα της κουρκουμίνης και της ετορικοξίμπης κατάσισπλατίνη-επαγόμενη οξεία νεφρική βλάβη σε αρουραίους.Acta Histochem.122(4), 151534 (2020).

12. Abdel-Razek, EA, Abo-Youssef, AM& Azouz, AABenzbromarone mitigatesσισπλατίνηνεφροτοξικότητα που περιλαμβάνει ενισχυμένη έκφραση του υποδοχέα-άλφα (PPAR-) που ενεργοποιείται από πολλαπλασιαστή υπεροξισώματος.Life Sci.243,117272 (2020).

13. Barakat,LAA,Barakat,N,Zakaria, MM& Khirallah,SMΠροστατευτικός ρόλος των νανοσωματιδίων οξειδίου του ψευδαργύρου σε νεφρική βλάβη που προκαλείται απόσισπλατίνησε αρουραίους.Life Sci.262,118503 (2020).

14. Sadeghi, Η. et αϊ. Αντιοξειδωτική και προστατευτική δράση του Stachys pilifera Benth έναντι της νεφροτοξικότητας που προκαλείται απόσισπλατίνησε αρουραίους. Food Biochem.44(5), e13190 (2020).

15. Müller, L., Fröhlich, K.& Böhm, V. Συγκριτικές αντιοξειδωτικές δράσεις των καροτενοειδών που μετρώνται με αντιοξειδωτική ισχύ μείωσης του σιδήρου (FRAP), δοκιμασία λεύκανσης ABTS (a TEAC), δοκιμασία DPPH και δοκιμασία σάρωσης ριζών υπεροξυλίου. Food Chem.129,139-148 (2011).