Τα εκχυλίσματα αιθανολικών φύλλων Lantana Camara παρουσιάζουν αντιγηραντικές ιδιότητες στο Drosophila Melanogaster: Μελέτες επιβίωσης και διάρκειας ζωής

Παρακαλώ επικοινώνησεoscar.xiao@wecistanche.comΓια περισσότερες πληροφορίες

Αφηρημένη

Σε αυτό το άρθρο, στόχος μας ήταν να διερευνήσουμε την αντιγηραντική δράση του εκχυλίσματος αιθανολικών φύλλων Lantana camara στο Drosophila melanogaster: επιβίωση και μακροζωία (διάρκεια ζωής). Τα φύλλα L.camara συλλέχθηκαν και πλύθηκαν επιμελώς από σωματίδια άμμου, ξηράνθηκαν στον αέρα, αλέστηκαν και εκχυλίστηκε με τη μέθοδο διαβροχής χρησιμοποιώντας αιθανόλη ως διαλύτη. Πραγματοποιήθηκε φυτοχημικός έλεγχος. Η ώρα LCso προσδιορίστηκε εκθέτοντας μύγες σε συγκεντρώσεις που κυμαίνονταν από 5 έως 5000 mg/10 g δίαιτας για 7-ημέρες. Πραγματοποιήθηκαν μελέτες επιβίωσης και μακροζωίας είκοσι οκτώ ημερών με τη χορήγηση εκχυλίσματος αιθανολικών φύλλων L.camara σε δίαιτα 5,10 και 20 mg/10 g σε μύγες φρούτων 1-3 ημερών. Κάθε συγκέντρωση επαναλήφθηκε τέσσερις φορές με 50 μύγες η καθεμία. Διεξήχθη επίσης ο ρυθμός εμφάνισης νεαρών μυγών από αυγά που γεννήθηκαν από μύγες φρούτων που χορηγήθηκαν εκχυλίσματα φύλλων L.camara. Η συνολική απόδοση της εκχύλισης προσδιορίστηκε σε 18 τοις εκατό. Η φυτοχημική ανάλυση αποκάλυψε την παρουσία αλκαλοειδών, φλαβονοειδών, φαινόλης, στεροειδών, καρδιακών γλυκοσιδίων και υδατανθράκων.168-ώρα LCso του L. camara προσδιορίστηκε επίσης ότι ήταν 1135 mg/10 g δίαιτα. Η L.camara ήταν σημαντικά παρατεταμένη (P<0.05)survival rate="" and="" extended=""><0.05)d.melanogaster life="" span="" compared="" with="" control.l.camara="" significantly="" increased=""><().05) emergence="" rate="" of="" young="" fruit="" flies="" from="" eggs="" laid="" by="" fruit="" flies="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="" leaves="" extracts.="" from="" the="" experimental="" results,it="" can="" be="" concluded="" that="" the="" ethanol="" extract="" of="" l.camara="" leaves="" extended="" the="" life="" span="" of="" d.melanogaster="" at="" these="" concentrations.="" due="" to="" similarities="" of="" conserved="" genes="" between="" humans="" and="" fruit="" flies,="" the="" use="" of="" l.camara="" ethanolic="" leaves="" extract="" at="" these="" concentrations="" is="" safe="" and="" may="" be="" recommended="" as="" herbal="" medicine="" in="">

Λέξεις κλειδιά:ποσοστό επιβίωσης, διάρκεια ζωής,168-ώρα LCso, anti-aging, L.camara

Εισαγωγή

Η γήρανση είναι μια φυσική διαδικασία σε όλα τα έμβια όντα, αλλά ο ρυθμός της επηρεάζεται από επικίνδυνους περιβαλλοντικούς παράγοντες, την πρόσληψη και την αφομοίωση επικίνδυνων ουσιών και ασθενειών [1]. Το δέρμα είναι ο ιστός που επηρεάζεται περισσότερο από τη γήρανση στον άνθρωπο. η ρυτίδα του δέρματος είναι ορατή στη φυσική γήρανση[1]. Οι ελεύθερες ρίζες είναι ένας από τους παράγοντες εργαλεία και το προσιτό κόστος και η συντήρησή του στο εργαστήριο [3].Δ. Το melanogaster ήταν χρήσιμο ως μοντέλο στη μελέτη της γήρανσης [1,2]. Η μελέτη διάρκειας ζωής είναι το ζωτικό μέτρο του ρυθμού γήρανσης στη δροσόφιλα λόγω του γρήγορου χρόνου παραγωγής και των μεταμιτωτικών κυττάρων που έχουν κάνει αυτό το είδος καλό μοντέλο για έρευνα για τη γήρανση [4].

Κάντε κλικ εδώ για να μάθετε περισσότερα

Η Λαντάνα Καμάρα αναφέρεται επίσης ως "ισπανική σημαία ή ΔυτικοΙνδική Λαντάνα". και μερικές φορές είναι γνωστό ως "Red Sage." L. Η Καμάρα είναι ένα «καλλωπιστικό ζιζάνιο» με αρωματικά φύλλα, λουλούδια, μπλε, κόκκινα, κίτρινα και έντονα κόκκινα άνθη και σκούρο μπλε και μαύρους καρπούς (ντρούπες)[5]. Το L. Camara ειδικά τα φύλλα έχουν χρησιμοποιηθεί ως αντικαρκινικό, αντιβακτηριακό, αντιυπερτασικό, τονωτικό και αποχρεμπτικό, ενώ οι ρίζες είναι γνωστές για τη θεραπεία των ρευματισμών, των δερματικών εξανθημάτων και της ελονοσίας [5-7]. Η μέθοδος έγχυσης της εκχύλισης των φύλλων και άλλων τμημάτων είναι γνωστή για τις αντιφλεγμονώδεις ιδιότητές της και προστίθεται στο μπάνιο ως αντιρευματικός παράγοντας [6]. Το αφέψημα που παρασκευάζεται από φύλλα L. camara χρησιμοποιείται κυρίως στη βοτανοθεραπεία για επούλωση πληγών, θεραπεία πυρετού, θεραπεία βήχα, θεραπεία γρίπης, στομαχόπονο, ελονοσία κ.λπ. [8].οφέλη σάλσα cistancheΈχει επίσης καταγραφεί ότι μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη θεραπεία καρκίνων, ανεμοβλογιάς, ρευματισμών ιλαράς και έλκους [9]L. Το camara εμφανίζει επίσης τις ακόλουθες δραστηριότητες όπως αντιοξειδωτικές, αντιμυκητιακές, αντιδιαβητικές, αναλγητικές και αντιφλεγμονώδεις [8].

Υπάρχουν λίγες ή καθόλου πληροφορίες για τις αντιγηραντικές δραστηριότητες του L.ανάπτυξη του πέους cistancheΚαμάρα. Αυτή η εργασία στοχεύει στη δημιουργία επιστημονικών δεδομένων για τις αντιγηραντικές επιδράσεις αυτού του φυτού στο μοντέλο D. melanogaster. Ερευνήσαμε την επίδραση του αιθανολικού εκχυλίσματος των φύλλων του L. camara στο ποσοστό επιβίωσης και τη διάρκεια ζωής των μυγών.

Υλικά και Μέθοδοι Συλλογή και Εκχύλιση Φυτών

Τα φύλλα του L. Camara συλλέχθηκαν από τα ανώτερα στελέχη του Πανεπιστημίου του Jos τον Αύγουστο του 2019 και ξεπλύθηκαν για να αφαιρέσουν την άμμο και άλλα σωματίδια κάτω από τρεχούμενο νερό της βρύσης. Τα φύλλα ξηράνθηκαν στον αέρα σε θερμοκρασία δωματίου για 7 ημέρες και στη συνέχεια μετατράπηκαν σε σκόνη χρησιμοποιώντας γουδί και γουδοχέρι. Περίπου 110 g κονιοποιημένων φύλλων του L. Camara εκχυλίστηκαν σε αιθανόλη για 72 ώρες με μέθοδο διαβροχής και συμπυκνώθηκαν περαιτέρω μέχρι ξηρού χρησιμοποιώντας υδατόλουτρο (50 μοίρες) όπως περιγράφεται από τους Alexander et al.[10]. Το ποσοστό της συνολικής απόδοσης ήταν υπολογίζεται χρησιμοποιώντας τον παρακάτω τύπο [11].

όπου Wo=το βάρος του αρχικού αποξηραμένου δείγματος, Wi=μόνο το βάρος του δοχείου και Wz=το βάρος του εκχυλίσματος και του δοχείου.

Το Cistanche μπορεί να αντιγηρανθεί

Τα στελέχη Fly Strain D. melanogaster Harwich από το Africa Center of Excellence αναπαράχθηκαν και διατηρήθηκαν σε μια απλή δίαιτα που παρασκευάστηκε χρησιμοποιώντας 100 g αλεύρι καλαμποκιού, 20 g μαγιά αρτοποιίας, 12 g άγαρ-άγαρ, 1 g μεθυλ-παραμπέν σε 5 ml αιθανόλης και 1700 ml νερού. Η θερμοκρασία του εργαστηρίου Fly διατηρήθηκε σταθερή στους 25 βαθμούς.

168-Ώρες οξεία τοξικότητα εκχυλίσματος αιθανολικών φύλλων L. Camara

Ο προσδιορισμός της οξείας τοξικότητας του L.camara πραγματοποιήθηκε ακολουθώντας τη μέθοδο που περιγράφεται από τους Alexander et al. [10]. Μύγες φρούτων ηλικίας 1 έως 3 ημερών αναισθητοποιήθηκαν, μετρήθηκαν και εκτέθηκαν σε δίαιτα 5,10,20, 50,100,250,500 και 5000 mg/10 g σε 2 επαναλήψεις η καθεμία, με κάθε αντίγραφο να έχει 30 ενήλικες μύγες. Οι μύγες αφέθηκαν να εγκλιματιστούν για 24 ώρες. Το ποσοστό θνησιμότητας βαθμολογήθηκε κάθε 24 ώρες για 7 συνεχόμενες ημέρες.

28-ημερήσιες μελέτες επιβίωσης και διάρκειας ζωής

Διεξήχθησαν μελέτες επιβίωσης και μακροζωίας ακολουθώντας τη μέθοδο που περιγράφεται από τους Abolaji et al. [12].cistanche tubulosa δοσολογία redditΟι μύγες φρούτων ηλικίας 1 έως 3 ημερών αναισθητοποιήθηκαν σε ήπιο κομματάκι πάγου, μετρήθηκαν και εκτέθηκαν σε δίαιτα 5,10 και 20 mg/10 g εις τετραπλούν με 50 μύγες η καθεμία. Οι μύγες των φρούτων που υποβλήθηκαν σε επεξεργασία μεταφέρθηκαν σε πρόσφατα παρασκευασμένη συγκέντρωση (διατροφή αναμεμειγμένη με εκχύλισμα) σε μεσοδιαστήματα 3- ημερών. Το ποσοστό θνησιμότητας βαθμολογήθηκε κάθε 24 ώρες για 28 ημέρες όπως στο ποσοστό επιβίωσης και για μια ζωή όπως στη μελέτη μακροζωίας.

Ποσοστό Εμφάνισης

Σε ενήλικες φρουτόμυγες χορηγήθηκαν 5,10 και 20 mg/10 g δίαιτα L.camara εις τριπλούν με κάθε φιαλίδιο να περιέχει 50 μύγες για 7 ημέρες. Αρσενικές και θηλυκές μύγες φρούτων, πέντε η καθεμία ταξινομήθηκαν για να ζευγαρώσουν και να γεννήσουν αυγά σε μια φρεσκοπαρασκευασμένη δίαιτα χωρίς εκχύλισμα (φύλλα κάμερας L.) για 24 ώρες. Μετά την πάροδο των 24 ωρών, οι ενήλικες μύγες (γονείς) μεταφέρθηκαν και θυσιάστηκαν ενώ τα Φιαλίδια (που περιείχαν πρόσφατα γεννημένα αυγά) διατηρήθηκαν σε σταθερή θερμοκρασία στους 25 βαθμούς και παρατηρήθηκαν για την εμφάνιση νεαρών μυγών (απόγονοι)[10].

Phytochemical Screening L. Camara Ethanolic Leaf Extracts. Ο ποιοτικός φυτοχημικός έλεγχος πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας μια τυπική διαδικασία όπως περιγράφεται από το Software [13]. Το αιθανολικό εκχύλισμα φύλλων του L. camara ελέγχθηκε για την παρουσία Αλκαλοειδών, Φαινολικών οξέων, Ταννίνης, Φλαβονοειδών, Σαπωνινών, Υδατάνθρακες, Καρδιακές γλυκοσίδες, Τερπενοειδή, Ανθροκινόνη και στεροειδών.

Στατιστική ανάλυση

Τα δεδομένα εκφράστηκαν και παρουσιάστηκαν ως Μέσος όρος ± SEM (τυπικό σφάλμα του μέσου όρου), πραγματοποιήθηκε μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης στο ποσοστό εμφάνισης που ακολουθήθηκε από το posthoc τεστ της Τουρκίας. Οι καμπύλες επιβίωσης και το LCso αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το Log-rank (Mentel-Cox) και τη μη γραμμική παλινδρόμηση. Το Dose-response-X είναι log (δόση), αντίστοιχα (statistical software version 7.04 Graphpad Prism). Τα αποτελέσματα θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικά στο P<>

Αποτελέσματα

Συνολική Ποσοστιαία Απόδοση και Φυτοχημικά Αιθανολικού Εκχυλίσματος Φύλλων L. Camara

Το αρχικό βάρος των υλικών των φύλλων καμαρών ήταν 110 ενώ το βάρος του εκχυλίσματος μετά την απομάκρυνση του διαλύτη (αιθανόλης) της εκχύλισης ήταν 20 g. Η εκατοστιαία απόδοση υπολογίστηκε ότι είναι 18 τοις εκατό β/β. Ο φυτοχημικός έλεγχος του αποτελέσματος του αιθανολικού εκχυλίσματος φύλλων L.camara παρουσιάζεται στον Πίνακα 1.

168-hours LCso of L. camara Ethanolic Leaf Extract in D. melanogaster

Το αποτέλεσμα αποκάλυψε ότι το L.camara δεν είναι θανατηφόρο μέχρι τα 1000 mg/10g, αλλά μεταξύ 100 και 500 mg/g, η θνησιμότητα έγινε σημαντική (P<0.05) compared="" with="" the="" negative="" control.="" the="" mortality="" rate="" 28-day="" survival="" rate="" of="" d.="" melanogaster="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="">

The survival rate of fruit flies administered L. Camara ethanolic leaf extract ranged from 50 to 59%. The highest survival rate was recorded in 10 mg/10 g diet while the lowest survival rate was recorded in the negative control.L. camara increased non-significantly (P>0.05) το ποσοστό επιβίωσης των φρουτόμυγων στα 5,10 και 20 mg/10 g σε σύγκριση με τον αρνητικό μάρτυρα όπως φαίνεται στο Σχ.2. Αυτό το αποτέλεσμα συνεπάγεται ότι L. Τα αιθανολικά εκχυλίσματα φύλλων Camara μπορεί να έχουν κάποιες προστατευτικές δράσεις στο D. melanogaster.

Μακροζωία (διάρκεια ζωής) μυγών φρούτων που χορηγούνται Αιθανολικά εκχυλίσματα φύλλων L. Camara

Η διάρκεια ζωής των φρουτόμυγων στα οποία χορηγήθηκαν αιθανολικά εκχυλίσματα φύλλων L. Camara ξεπέρασε σημαντικά (Ρ<0.05) the="" negatively="" controlled="" flies.l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts-treated="" flies="" lived="" up="" to="" 50days="" with33.5,33.6,and44.5%percentage="" increase="" at="" 5,10,and="" 20="" mg/10="" g="" diet="" respectively="" whereas="" the="" negatively="" controlled="" flies="" lived="" up="" to="" 39="" days="" as="" shown="" in="" fig.3.this="" result="" implies="" that="" l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts="" may="" have="" some="" anti-aging="" properties="" or="" activities="" in="" d.="">

Ποσοστό εμφάνισης νεαρών μυγών από αυγά

του D. melanogaster Χορηγήθηκαν Αιθανολικά Εκχυλίσματα Φύλλων L. camara Το ποσοστό εμφάνισης νεαρών μυγών φρούτων από αυγά ενήλικων μυγών φρούτων στα οποία χορηγήθηκαν αιθανολικά εκχυλίσματα φύλλων L. camara κυμαινόταν από 91 έως 100 τοις εκατό. Το υψηλότερο ποσοστό εμφάνισης καταγράφηκε στη δίαιτα 20 mg/10 g ενώ το χαμηλότερο ποσοστό εμφάνισης καταγράφηκε στον αρνητικό έλεγχο.cistanche แอ ม เว ย์The extracts,at 5,10,and 20mg/10 g diet increased emergence rate non-significantly (P>0.05) σε σύγκριση

Συζήτηση

Οι φαινολικές ενώσεις είναι δευτερογενείς μεταβολίτες που παράγονται μέσω του φαινυλοπροπανοειδούς μεταβολισμού της φωσφορικής Penrose. Παράγονται επίσης στο σικιμικό οξύ των φυτών [14]. Οι φαινολικές ενώσεις (φλαβονοειδή, φαινολικό οξύ, τανίνες, καρδιακός γλυκοσίδης, στεροειδή, σαπωνίνες και αλκαλοειδή) έχουν επιδείξει αντιγηραντικές, αντιφλεγμονώδεις, αντι-πολλαπλασιαστικές ιδιότητες, αντιοξειδωτική α-γλυκοσιδάση και ανασταλτική δράση της α-αμυλάσης [{{6 }}]. Η καρδιακή γλυκοσίδη έχει αναφερθεί ότι αναστέλλει τα τέσσερα γονίδια υπερεκφρασμένων καρκινικών κυττάρων του προστάτη συμπεριλαμβανομένων των αναστολέων του αναστολέα της απόπτωσης survivin και των παραγόντων μεταγραφής [17]. Οι φαινολικές ενώσεις αναγνωρίζονται ιδιαίτερα για τις θεραπευτικές και προληπτικές τους δυνατότητες σε ορισμένες ασθένειες. Καρκίνος, διαβήτης, καρδιαγγειακές παθήσεις, παχυσαρκία, βακτήρια και μύκητες [14-18].πόση στάμπα να πάρειςΗ ποιοτική φυτοχημική εξέταση του αιθανολικού εκχυλίσματος φύλλων του L. Camara αποκάλυψε την παρουσία αλκαλοειδών, φαινολικού οξέος, φλαβονοειδών, καρδιακών γλυκοσιδίων, υδατανθράκων και στεροειδών που συμφωνούν με [19]. Αυτές οι ενώσεις μπορεί να οδηγήσουν στο φαινόμενο αντιγήρανσης στο Drosophila είτε μεμονωμένα είτε σε συνέργεια.

D. melanogaster as a model is mostly appreciable in drug screening and toxicity studies due to the conserved genes and biochemical pathways between the species and humans. European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECVAM) has approved this species as an alternative model having met the standard for validation of the alternative model known as 3Rs: Reduction, Refinement, and Replacement of laboratory animal [20]. Our 168-hour also revealed that this plant leaves extract is safe for use since its LCso is 1135 mg/10 g diet in D. melanogaster which agrees with Pour and Sasidharan [21], who reported a high value for LCso of L. Camara in the Artemia salina model and no obvious acute toxicity in adult mice. It has been recorded that plants with a high value of LCso are less or non-toxic while plants with a low value of LCso are considered to be very toxic and shorten or reduce life expectancy [22]. The survival rate result further supported the claim that L. Camara ethanolic leaves extract is safe to use in folk medicine as it increased through the non-significantly (P>0.05) το ποσοστό επιβίωσης των φρουτόμυγων χορηγήθηκαν τα εκχυλίσματα. Αυτό το αποτέλεσμα συμφωνεί με τους Pour και Sasidharan [21], οι οποίοι ανέφεραν πολύ χαμηλή in vivo τοξικότητα του εκχυλίσματος φύλλων L. Camara στο μοντέλο Artemia salina.

Η επίδραση του L. Camara στη γήρανση διερευνήθηκε χρησιμοποιώντας μια δοκιμασία μακροζωίας. Η ομάδα των φρουτόμυγων στην οποία χορηγήθηκε εκχύλισμα αιθανολικών φύλλων L. Camara έζησε σημαντικά περισσότερο (P < 0.05)="" από="" τις="" αρνητικά="" ελεγχόμενες="" μύγες.="" αυτό="" σημαίνει="" ότι="" το="" αιθανολικό="" εκχύλισμα="" φύλλων="" l.="" camara="" δεν="" είναι="" μόνο="" ασφαλές="" για="" χρήση="" στη="" λαϊκή="" ιατρική,="" αλλά="" παρατείνει="" την="" επιβίωση="" και="" παρατείνει="" τη="" διάρκεια="" ζωής="" λειτουργώντας="" με="" αντιγηραντικό="">

The emergence rate revealed that L. Camara ethanolic leaf extracts had no toxic effect on the emergence rate at the concentration tested in D.melanogaster as it increased the emergence rate of young flies with no significance(P>0.05) σε σύγκριση με τον αρνητικό έλεγχο.

Αυτό το άρθρο εξάγεται από το doi: 10.1093/toxres/tfaa098 Advance Access Ημερομηνία δημοσίευσης: 12 Ιανουαρίου 2021 Paper