Το IL-38 Αποτρέπει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας μέσω αναστολής της σηματοδότησης MTOR

Αφηρημένη:

Εκπαιδευμένη ανοσία είναι η απόκτηση ενός υπερανταποκρινόμενου φαινοτύπου από έμφυτα ανοσοκύτταρα (όπως μονοκύτταρα και μακροφάγα) μετά από μόλυνση ή εμβολιασμό, μια de facto μη ειδική μνήμη που εξαρτάται από τον επιγενετικό και μεταβολικό επαναπρογραμματισμό αυτών των κυττάρων. Πρόσφατα δείξαμε ότι η επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας εξαρτάται από την IL-1 .

Εδώ, δείχνουμε ότι η ανασυνδυασμένη IL-38, μια αντιφλεγμονώδης κυτοκίνη της οικογένειας IL-1-, ήταν σε θέση να προκαλέσει μακροπρόθεσμες ανασταλτικές αλλαγές και να μειώσει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας από -γλυκάνη in vivo σε Ποντίκια C57BL/6 και ex vivo στα κύτταρα του μυελού των οστών τους. Η IL-38 μπλόκαρε τη σηματοδότηση mTOR και απέτρεψε τις επιγενετικές και μεταβολικές αλλαγές που προκαλούνται από τη -γλυκάνη. Σε υγιή άτομα, ο σχετιζόμενος με την IL1F{10}}πολυμορφισμός ενός νουκλεοτιδίου rs58965312 συσχετίστηκε με υψηλότερες συγκεντρώσεις IL-38 στο πλάσμα και μειωμένη επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας από -γλυκάνη ex vivo. Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι η IL-38 προκαλεί μακροχρόνιες αντιφλεγμονώδεις αλλαγές και επίσης αναστέλλει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας. Ως εκ τούτου, η ανασυνδυασμένη IL-38 θα μπορούσε ενδεχομένως να χρησιμοποιηθεί ως θεραπευτική παρέμβαση για ασθένειες που χαρακτηρίζονται από επιδεινωμένη εκπαιδευμένη ανοσία.

ΛΕΞΕΙΣ ΚΛΕΙΔΙΑ

αιθανόλη, φλεγμονή, έγκαυμα, μικρά RNA

Κάντε κλικ στο προϊόν cistanche tubulosa pdf

1. ΕΙΣΑΓΩΓΗ

Ένας αυξανόμενος αριθμός μελετών έχει δείξει ότι τα μονοκύτταρα και τα μακροφάγα μπορούν να αποκτήσουν μακροπρόθεσμες λειτουργικές προσαρμοστικές αλλαγές, μια de facto έμφυτη μνήμη που έχει ονομαστεί «εκπαιδευμένη ανοσία». 4–7 Η εκπαιδευμένη ανοσία μπορεί να προκληθεί από εμβόλια όπως ο βάκιλος CalmetteGuerin (BCG) που προστατεύει από το Mycobacterium tuberculosis ή ανοσοτροποποιητές όπως η -γλυκάνη, ένα κοινό συστατικό του κυτταρικού τοιχώματος των μυκήτων.8,9 Η επανακαλωδίωση του επιγονιδιώματος των μυελοειδών κυττάρων συχνά οδηγεί σε μακροχρόνιες τροποποιήσεις, όπως αυξημένη άμυνα του ξενιστή έναντι άσχετων λοιμώξεων.1,10 Για παράδειγμα, ο εμβολιασμός BCG νεογνών στη Δυτική Αφρική μείωσε τη θνησιμότητα από λοιμώξεις,11 και ο εμβολιασμός BCG σε υγιείς ενήλικες μείωσε το επακόλουθο κίτρινο εμβόλιο πυρετού, ιαιμία και παρασιταιμία σε ένα μοντέλο πειραματικής ελονοσίας στον άνθρωπο, που συσχετίστηκε με την έκταση των εξαρτώμενων από BCG επιγενετικών αλλαγών στα κυκλοφορούντα μονοκύτταρα. επιτυγχάνεται κατάσταση, η οποία έχει ως αποτέλεσμα μειωμένη θνησιμότητα, για παράδειγμα, από σήψη μυκήτων και Staphylococcus aureus.7,9

Η οικογένεια IL-1 αποτελείται από 11 μέλη13,14. μεταξύ των οποίων η IL-37 και η IL-38 έχουν ευρείες αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες.15,16 Προηγουμένως, έχουμε αναφέρει ότι η IL-1 είναι κεντρική στην επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας12 και ότι η IL{{ 11}} αναστέλλει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας.17 Επιπλέον, η IL-1 βρέθηκε ότι είναι η κυτοκίνη που είναι πιο σημαντικά αυξημένη στον μυελό των οστών ποντικών που έλαβαν θεραπεία με γλυκάνη και προκαλεί την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας. Vitro μοντέλα εκπαιδευμένης ανοσίας, πρωτογενή ανθρώπινα μονοκύτταρα ανταποκρίνονται στην IL-1 με επιγενετικές αλλαγές που αυξάνουν την παραγωγή φλεγμονωδών κυτοκινών όπως TNF και IL-6.12 Επιπλέον, το αλληλόμορφο Α του πολυμορφισμού ενός νουκλεοτιδίου ( SNP) rs16944 στην περιοχή προαγωγέα του γονιδίου IL1B συσχετίστηκε με αυξημένη επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας σε ανθρώπινα μονοκύτταρα.12

Έχουμε αναφέρει προηγουμένως ότι η IL-38 μπορεί να αναστείλει την IL-1 , την IL-6 και την KC σε ένα μοντέλο ουρικής αρθρίτιδας.18 Καθώς η IL-38 μπορεί να αποκλείσει την IL{{5 }} , υποθέτουμε ότι η IL-38 έχει έναν ανασταλτικό ρόλο στην επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας. Σε αυτήν την αναφορά, στοχεύαμε να ορίσουμε τον ρόλο της IL-38 στην προκαλούμενη από τη γλυκάνη εκπαιδευμένη ανοσία. Δείχνουμε ότι το IL-38 αναστέλλει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας σε μοντέλα ποντικών διαταράσσοντας τον καταρράκτη σηματοδότησης mTOR, ο οποίος είναι απαραίτητος για την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας.5 Σε υγιείς ανθρώπους, δείχνουμε ότι το SNP rs58965312 επηρεάζει την IL{{ 12}} επίπεδα πλάσματος και η εκπαιδευμένη απόκριση ανοσίας in vitro.

2. ΥΛΙΚΑ ΚΑΙ ΜΕΘΟΔΟΙ

2.1 Ποντίκια

Αρσενικά ποντίκια C57Bl/6 ηλικίας επτά έως εννέα εβδομάδων ελήφθησαν από την Jackson Laboratories (Bar Harbor, ΜΕ, ΗΠΑ). Τα ποντίκια τράφηκαν με αποστειρωμένη εργαστηριακή τροφή και νερό κατά βούληση. Τα πειράματα εγκρίθηκαν από τις Επιτροπές Ιδρυματικής Φροντίδας και Χρήσης Ζώων του Πανεπιστημίου του Κολοράντο Ντένβερ (Aurora, CO, ΗΠΑ).

2.2 Εκπαιδευμένο μοντέλο ανοσίας

Τα ποντίκια έλαβαν 1 ug βιοενεργού 18,19 ανθρώπινης ανασυνδυασμένης IL-38 (3-152) (Biotechne, Minneapolis, MN, USA) ενδοπεριτοναϊκώς σε στείρο αλατούχο διάλυμα σε όγκο 200 μΙ ή μόνο αλατούχο διάλυμα για τρεις διαδοχικές ημέρες. Την πρώτη ημέρα, 1 ώρα μετά την ένεση της IL-38, τα ποντίκια έλαβαν ενδοφλέβια. Συνολικά 1 mg -γλυκάνης (1,3-(D)-γλυκάνη) παρασχέθηκε ευγενικά από τον καθηγητή David Williams ( College of Medicine, Johnson City, TN, USA) ή 200 ul φυσιολογικού ορού ως έλεγχος οχήματος. Την πέμπτη ημέρα, τα ποντίκια θυσιάστηκαν απευθείας ή προκλήθηκαν για πρώτη φορά με 5 mg/kg LPS (Escherichia coli[055:B5] Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ΗΠΑ) ενδοπεριτοναϊκώς σε 200 μΐ στείρου φυσιολογικού ορού 4 ώρες πριν από τη θανάτωση. Η θερμοκρασία σώματος ποντικιού μετρήθηκε με ένα θερμόμετρο MT4 (RayTek MiniTemp, Wilmington, NC, USA). Μετά την αναισθησία με ισοφλουράνιο, συλλέχθηκε αίμα από το τροχιακό πλέγμα σε EDTA και τα ποντίκια θυσιάστηκαν με εξάρθρωση του τραχήλου της μήτρας. Το αίμα φυγοκεντρήθηκε στα 1000 xg για 10 λεπτά για να προετοιμαστεί το πλάσμα για μετρήσεις κυτοκίνης.

2.3 Παραγωγή κυτοκίνης in vitro

Η παραγωγή κυτοκίνης αξιολογήθηκε ex vivo σε πλήρες αίμα, κύτταρα μυελού των οστών και σπληνοκύτταρα.

Το πλήρες αίμα αραιώθηκε 1:4 φορές σε RPMI 1640. Ένας συνολικός όγκος 200 ul επιστρώθηκε σε 96-πλάκες στρογγυλού πυθμένα φρεατίων και επωάστηκε για 24 ώρες χωρίς ερέθισμα ή 100 ng/ml LPS (±10 μM Nigericin [Invivogen, San Diego, CA, USA] κατά την τελευταία ώρα) στους 37◦C σε 5 τοις εκατό CO2. Μετά από 24 ώρες, συλλέχθηκαν 180 μΙ υπερκειμένου και το κυτταρικό ίζημα αποθηκεύτηκε σε 0,5 τοις εκατό Triton X-100 (Sigma, St. Louis, MO, ΗΠΑ). Ο μυελός του μηριαίου οστού εναιωρήθηκε σε μέσο καλλιέργειας RPMI, μετρήθηκε σε μετρητή κυττάρων HemaTrue (Heska, Loveland, CO, USA) και προσαρμόστηκε σε 1 × 106/ml. Συνολικά 200 ul του κυτταρικού εναιωρήματος επιστρώθηκαν σε 96-πλάκες με στρογγυλό πυθμένα φρεατίου και επωάστηκαν για 24 ώρες σε RPMI (δεν προστέθηκαν αυξητικοί παράγοντες) στις ίδιες συνθήκες όπως περιγράφηκαν προηγουμένως. Οι σπλήνες αφαιρέθηκαν ασηπτικά, ομογενοποιήθηκαν μέσω στραγγιστών κυττάρων 100 μm (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ΗΠΑ) και συλλέχθηκαν σε RPMI. Τα κύτταρα μετρήθηκαν και ρυθμίστηκαν σε 5 χ 106/ml. Συνολικά 200 μΙ του κυτταρικού εναιωρήματος επιστρώθηκαν σε 96-πλάκες με στρογγυλό πυθμένα φρεατίου και επωάστηκαν για 24 ώρες ή 3 ημέρες σε RPMI που περιέχει 10 τοις εκατό FBS στις ίδιες συνθήκες όπως περιγράφηκε προηγουμένως.

2.4 Μέτρηση κυτοκίνης με ELISA και μέτρηση γαλακτικού

Τα υπερκείμενα και το πλάσμα αποθηκεύτηκαν στους -20◦C μέχρι περαιτέρω ανάλυση. Η ELISA διεξήχθη σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή (BioTechne), εκτός από το ότι η IL-38 ELISA σε ανθρώπινο πλάσμα πραγματοποιήθηκε όπως περιγράφεται αλλού.20

Λήφθηκαν πλάσμα ποντικού και μυελός των οστών όπως περιγράφηκε και τα επίπεδα γαλακτικού προσδιορίστηκαν με ένα εμπορικά διαθέσιμο κιτ φθορομετρικής δοκιμασίας Lactate (Biovision, Milpitas, CA, USA).

2,5 Western blot

Ο μυελός των οστών από αφελείς ποντικούς συλλέχθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως. Συνολικά 1 × 106 κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε ένα τρυβλίο με επίπεδο πυθμένα 12-πηγαδιού και επωάστηκαν για 3 ημέρες σε RPMI που περιείχε 10 τοις εκατό ορό. Το υπερκείμενο με μη προσκολλημένα κύτταρα αφαιρέθηκε. Μετά από 4 ώρες επώαση (η οποία ήταν η βέλτιστη για φωσφορυλίωση mTOR) με ή χωρίς 5 ug/ml -γλυκάνη ± 100 ng/ml IL{10}} σε RPMI, τα κύτταρα λύθηκαν σε ρυθμιστικό διάλυμα RIPA που περιείχε αναστολέα πρωτεάσης (Roche, Βασιλεία, Ελβετία ). Η συνολική περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη προσδιορίστηκε με δοκιμασία BCA (Thermo Fisher Scientific) και ίσες ποσότητες πρωτεϊνών υποβλήθηκαν σε SDS-PAGE σε προχυτευμένα πηκτώματα 4-15 τοις εκατό (Biorad, Hercules, CA, USA).

Οι διαχωρισμένες πρωτεΐνες μεταφέρθηκαν σε μια μεμβράνη νιτροκυτταρίνης (Biorad), η οποία μπλοκαρίστηκε σε 5 τοις εκατό BSA (Sigma) και επωάστηκε όλη τη νύχτα στους 4°C με πολυκλωνικά αντισώματα κουνελιού έναντι (φωσφο) mTOR, Akt, 4EBP1 και S6K (Κυτταρική Σηματοδότηση, Danvers, MA, ΗΠΑ) και -ακτίνη (Sigma), τα οποία οπτικοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας ένα πολυκλωνικό δευτερεύον αντίσωμα (Dako, Leuven, Βέλγιο) και SuperSignal West Femto Substrate (Thermo Fisher Scientific) για τις φωσφορυλιωμένες πρωτεΐνες ή υπόστρωμα ECL για τις άλλες πρωτεΐνες (Biorad).

2,6 εκχύλιση mRNA και RT-PCR

Το mRNA από μυελό των οστών ποντικού απομονώθηκε με εκχύλιση χλωροφορμίου (Sigma) Trizol (Life Technologies, Carlsbad, CA, USA), ακολουθούμενη από καταβύθιση ισοπροπανόλης (Sigma) και δύο πλύσεις με 70 τοις εκατό αιθανόλη (Sigma). Το cDNA συντέθηκε χρησιμοποιώντας αντίστροφη μεταγραφάση iScript (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Η σχετική έκφραση προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας τη μέθοδο SYBR Green (Invitrogen) σε μηχανή CFX96 Bio-Rad qPCR (Biorad) και οι τιμές εκφράστηκαν ως πολλαπλάσιες αυξήσεις στα επίπεδα mRNA, σε σχέση με ποντίκια ελέγχου φορέα, με το B2M ως γονίδιο οικιακής φροντίδας. Οι εκκινητές παρατίθενται στον Πίνακας Υποστηρικτικών Πληροφοριών S1.

2.7 Ανοσοκαθίζηση χρωματίνης

Ο μυελός των οστών απομονώθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως. Τα κύτταρα σταθεροποιήθηκαν σε 1 τοις εκατό φορμαλδεΰδη χωρίς μεθανόλη και αποθηκεύτηκαν στους 4°C. Στη συνέχεια, τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε υπερήχους και πραγματοποιήθηκε ανοσοκατακρήμνιση χρησιμοποιώντας αντισώματα κατά H3K4me3 (Diagenode, Seraing, Βέλγιο), όπως περιγράφεται αλλού.6 Το DNA απομονώθηκε με κιτ καθαρισμού MinElute PCR (Qiagen, Germantown, MD, USA) και υποβλήθηκε σε περαιτέρω επεξεργασία για Ανάλυση qPCR χρησιμοποιώντας την πράσινη μέθοδο SYBR σε μηχανή Step-one PLUS qPCR (Applied Biosciences, Foster City, CA, USA). Τα δείγματα αναλύθηκαν με συγκριτική μέθοδο Ct σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Οι επιγενετικοί εκκινητές παρατίθενται στον Πίνακα Υποστηρικτικών Πληροφοριών S1.

2.8 Πειράματα PBMC

Η μελέτη πραγματοποιήθηκε σε μια ομάδα ±200 υγιών ατόμων δυτικοευρωπαϊκής καταγωγής από το Human Functional Genomics Project (κοόρτες 200FG, βλ. www.humanfunctionalgenomics.org). Τα PBMCs απομονώθηκαν από συναινούντες υγιείς δότες όπως περιγράφηκε προηγουμένως.21 Η παρασκευή πλάσματος για IL-38 ELISA και in vitro διεγέρσεις πρωτογενών μονοκυττάρων σε αυτήν την κοόρτη περιγράφηκαν αλλού.22 Τα μονοκύτταρα εκπαιδεύτηκαν με -γλυκάνη για 24 ώρες, πλύθηκε με ζεστό PBS και ξεκουράστηκε σε RPMI για 6 ημέρες.23 Στη συνέχεια, τα κύτταρα διεγέρθηκαν με 10 ng/ml LPS. Μετά από 24 ώρες, τα υπερκείμενα συλλέχθηκαν και αποθηκεύτηκαν στους -20◦C έως ότου η IL-6 και ο TNF μετρήθηκαν με ELISA. Τα επίπεδα IL{13}} στο πλάσμα προσδιορίστηκαν με ELISA. Η κατάσταση του IL-38 SNP rs58965312 αξιολογήθηκε όπως περιγράφεται στις μεθόδους των Li et al.22 από το εμπορικά διαθέσιμο τσιπ SNP, Illumina HumanOmniExpressExome-8 v1.0.

2.9 Στατιστική ανάλυση

Οι διαφορές μεταξύ των διαφόρων συνθηκών αναλύθηκαν με τη δοκιμασία υπογεγραμμένης κατάταξης ταιριασμένων ζευγών Wilcoxon ή τη δοκιμή U Mann-Whitney, ανάλογα με την περίπτωση. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος ± SEM εκτός εάν υποδεικνύεται διαφορετικά. Τα δεδομένα αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας GraphPad Prism 8.0 (GraphPad Software, La Jolla, CA, USA). Μια τιμή P κάτω από το 0.05 θεωρήθηκε σημαντική.

3 ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ

3.1 Η IL-38 αναστέλλει τη φλεγμονή που προκαλείται από το LPS

Αυτές οι μελέτες σχετικά με τον υποτιθέμενο ρόλο της IL-38 στην εκπαιδευμένη ανοσία ξεκίνησαν με μια αξιολόγηση της επίδρασης της ανασυνδυασμένης ανθρώπινης IL-38 στη συστηματική φλεγμονή λόγω ενδοτοξιναιμίας. Τα ποντίκια έλαβαν είτε όχημα είτε 1 ug IL-38 ip τις ημέρες 4, 3 και 2 (Εικ. 1Α). Μετά από 4 ημέρες, LPS (5 mg/kg) χορηγήθηκε ενδοπεριτοναϊκώς σε όλα τα ποντίκια και 4 ώρες αργότερα τα ποντίκια θυσιάστηκαν. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 1Β, τα ποντίκια που έλαβαν IL-38 εμφάνισαν λιγότερη υποθερμία σε σύγκριση με τα ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με όχημα, υποδεικνύοντας μειωμένη φλεγμονή. σε ποντίκια που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με ανασυνδυασμένη IL-38 σε σύγκριση με ποντίκια που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με όχημα (Εικ. 1C), ενώ η συγκέντρωση της IL-1 σε προϊόντα λύσης πλήρους αίματος δεν επηρεάστηκε από την IL-38.

Αντίθετα, δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές αλλαγές που εξαρτώνται από την IL-38-στον αριθμό των κυττάρων στον μυελό των οστών, στα σπληνοκύτταρα και στο πλήρες αίμα, εκτός από μια μικρή μείωση των λεμφοκυττάρων στο πλήρες αίμα (τα δεδομένα δεν εμφανίζονται). Το πλήρες αίμα, ο μυελός των οστών και τα σπληνοκύτταρα επωάστηκαν περαιτέρω in vitro για 24 ώρες χωρίς κανένα επιπλέον ερέθισμα. Παρατηρήσαμε μειωμένη αυθόρμητη απελευθέρωση TNF (μείωση 75 τοις εκατό) και IL-6 (μείωση 25 τοις εκατό) από καλλιέργειες πλήρους αίματος ποντικών που έλαβαν θεραπεία με IL-38 (Εικ. 1D επάνω). Στον καλλιεργημένο μυελό των οστών, παρατηρήθηκε επίσης μειωμένη αυθόρμητη απελευθέρωση TNF (μείωση 55 τοις εκατό) (Εικ. 1Δ μέση). Τα σπληνοκύτταρα δεν εμφάνισαν διαφορές στην παραγωγή IL-6 ή TNF (Εικ. 1D κάτω).

3.2 Η IL-38 αναστέλλει την εκπαιδευμένη ανοσία που προκαλείται από τη γλυκάνη

Στη συνέχεια, αξιολογήσαμε εάν η IL-38 ήταν επίσης σε θέση να αναστείλει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας από τη -γλυκάνη. -επαγόμενη από γλυκάνη εκπαιδευμένη ανοσία οδηγεί σε ενισχυμένη παραγωγή κυτοκίνης σε μια δευτερεύουσα και άσχετη πρόκληση.7,9 Όπως απεικονίζεται στο Σχήμα 2Α, χορηγήσαμε ανασυνδυασμένη IL-38 (1 ug) ή φυσιολογικό ορό σε ποντικούς 1 ώρα πριν από την ip-γλυκάνη (1 mg) την ημέρα -4. Τις ημέρες -3 και -2, τα ποντίκια έλαβαν 1 ug IL-38 την ημέρα. Μετά από 2 ημέρες ανάπαυσης, όλα τα ποντίκια έλαβαν 5 mg LPS. Τέσσερις ώρες μετά τη χορήγηση LPS, η θερμοκρασία του κοιλιακού τοιχώματος των ποντικών που έλαβαν -γλυκάνη μειώθηκε κατά 2°C σε σύγκριση με τα ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με όχημα και κανονικοποιήθηκε με θεραπεία με IL-38 (Εικ. 2Β). Σε ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με -γλυκάνη και στη συνέχεια προκλήθηκαν με LPS, παρατηρήθηκε παρόμοια αντιστροφή των επιδράσεων της -γλυκάνης από την IL-38 σε TNF, IL-6 και IL-1 πλάσματος (Εικ. . 2C). Όπως αναμενόταν in ex vivo καλλιεργημένο πλήρες αίμα (χωρίς επιπλέον ex vivo διέγερση) από ποντίκια που είχαν εκπαιδευτεί με γλυκάνη, βρέθηκε αύξηση στην παραγωγή TNF και IL-6, η οποία καταργήθηκε με την προσθήκη IL-38 ( Εικ. 2D). Αυτό το προφίλ κυτοκίνης αντικατοπτρίστηκε σε καλλιέργειες σπληνοκυττάρων και - αν και όχι στατιστικά σημαντικά - στον μυελό των οστών (Εικ. 2D).

3.3 Η IL-38 αποτρέπει τις επιγενετικές αλλαγές ιστόνης που προκαλούνται από τη -γλυκάνη

Καθώς η αυξημένη επαγωγή φλεγμονωδών κυτοκινών από τη -γλυκάνη είναι αποτέλεσμα επιγενετικών αλλαγών στο επίπεδο των ιστονών, 4,9 στη συνέχεια αξιολογήσαμε την επίδραση της IL-38 στις επιγενετικές τροποποιήσεις σε προαγωγείς καθιερωμένων εκπαιδευμένων γονιδίων που σχετίζονται με την ανοσία. Τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε θεραπεία με -γλυκάνη ± IL-38 και θυσιάστηκαν μετά από 5 ημέρες χωρίς την πρόκληση LPS (Εικ. 3Α).2,6 Όταν το πλήρες αίμα, ο μυελός των οστών και τα σπληνοκύτταρα διεγέρθηκαν ex vivo με LPS με ή χωρίς ενεργοποιητής φλεγμονώδους νιγερικίνης, παρατηρήθηκε αύξηση στην παραγωγή κυτοκίνης σε ποντίκια που είχαν εκπαιδευτεί με γλυκάνη, η οποία καταργήθηκε από την IL-38 (Εικ. 3Β).

Όταν προσδιορίστηκε η έκφραση γονιδίων που σχετίζονται με εκπαιδευμένη ανοσία (Tnfa, Nrlp3, Hk2 και Pfkp) στον μυελό των οστών ποντικών με πρόκληση LPS, παρατηρήθηκε αυξημένη έκφραση όλων των γονιδίων η οποία εμποδίστηκε από την IL-38 (Εικ. 3C). Για να προσδιοριστεί εάν αυτό είναι το αποτέλεσμα επιγενετικών τροποποιήσεων που προκαλούνται από -γλυκάνη και IL-38, ο μυελός των οστών ποντικών που δεν υποβλήθηκαν σε θεραπεία με LPS υποβλήθηκαν σε επεξεργασία για επιγενετική ανάλυση. Η H3K4me3 (ένας σημαντικός δείκτης ιστόνης στην εκπαιδευμένη ανοσία4,9) με σήμα DNA απομονώθηκε και προσδιορίστηκε το ποσοστό των προαγωγέων των εκπαιδευμένων γονιδίων που σχετίζονται με την ανοσία που ήταν θετικοί για αυτό το σημάδι ιστόνης. Το H3K4me3 παρατηρήθηκε σε ποντίκια που είχαν εκπαιδευτεί με γλυκάνη, και αυτό αντιστράφηκε όταν τα ποντίκια έλαβαν επίσης IL38 (Εικ. 3D).

3.4 Η IL-38 εμποδίζει -εξαρτώμενη από γλυκάνη σηματοδότηση Akt/mTOR/S6K

Έχουμε δείξει προηγουμένως ότι η εκπαιδευμένη ανοσία στα μονοκύτταρα εξαρτάται από την ενεργοποίηση της οδού mTOR.5 Καθώς η IL-38 αναστέλλει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας, υποθέσαμε ότι λαμβάνει χώρα αναστολή της οδού mTOR, όπως επίσης και ο μηχανισμός για Αναστολή IL-37 της εκπαιδευμένης ανοσίας.17 Όπως φαίνεται στο Σχήμα 4Α, η επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας στο μυελό των οστών από ποντίκια που δεν έχουν μάθει από -γλυκάνη in vitro επάγει τη φωσφορυλίωση του Akt, mTOR και των κατάντη κινασών του S6K και 4EBP1. Η IL-38 μείωσε αυτή τη φωσφορυλίωση, υποδεικνύοντας ότι η IL38 αναστέλλει την ενεργοποίηση αυτής της οδού.

Καθώς το mTOR είναι ένας κεντρικός ρυθμιστής του κυτταρικού μεταβολισμού, προσδιορίσαμε τη δραστηριότητα της οδού γλυκόλυσης, η οποία προκαλείται σε μεγάλο βαθμό σε μονοκύτταρα και μακροφάγα εκπαιδευμένα με γλυκάνη.5 Ως τελικό προϊόν της αναερόβιας γλυκόλυσης, μετρήθηκαν τα επίπεδα γαλακτικού οξέος. Η θεραπεία με IL-38 απέτρεψε την αύξηση των επιπέδων γαλακτικού στο πλάσμα 4 ώρες μετά τη θεραπεία με LPS και σε υπερκείμενα 72 ωρών καλλιεργημένου μυελού των οστών από ποντικούς που είχαν εκπαιδευτεί με -γλυκάνη και ενέθηκαν με LPS in vivo (Εικ. 4Β, C).

3,5 επίπεδα SNP και IL-38 στο πλάσμα προβλέπουν τη δύναμη της εκπαιδευμένης επαγωγής ανοσίας

Για να επικυρώσουμε την επίδραση του IL-38 στην εκπαιδευμένη ανοσία στον άνθρωπο, διερευνήσαμε την επίδραση 11 SNP που σχετίζονται με το IL-38 (IL1F10) και το γειτονικό IL-1Ra (IL{{6 }}RN) σχετικά με την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας σε ανθρώπινο PBMC από 118 υγιή άτομα της κοόρτης 200FG.25 Μετρήσαμε τις συγκεντρώσεις IL{10}} στο πλάσμα και ποσοτικοποιήσαμε την ικανότητα των μονοκυττάρων τους να αποκτήσουν εκπαιδευμένη ανοσία. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 5Α, η επαγωγή IL-6 και TNF μετά από εκπαίδευση in vitro με -γλυκάνη σχετίζεται με το SNP rs5896312. Επιπλέον, το επίπεδο πλάσματος της IL-38 εξαρτιόταν από αυτό το SNP, καθώς οι φορείς δύο εναλλακτικών αλληλόμορφων είχαν υψηλότερα επίπεδα σε σύγκριση με άτομα που έφεραν δύο αλληλόμορφα αναφοράς (Εικ. 5Β). Δεν βρέθηκε διαφορά στα επίπεδα IL{17}}RA στο πλάσμα αυτών των ατόμων (τα δεδομένα δεν εμφανίζονται). Συνοπτικά, η αναστολή της εκπαιδευμένης ανοσίας σε υγιείς εθελοντές συσχετίστηκε με υψηλότερη συγκέντρωση IL στο πλάσμα-38, η οποία με τη σειρά της εξαρτάται από το SNP rs5896312.

4. ΣΥΖΗΤΗΣΗ

Σε αυτήν την αναφορά, αποδεικνύουμε ότι η IL-38 μειώνει σημαντικά την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας από τη -γλυκάνη. Αυτή η παρατήρηση είναι σύμφωνη με τις αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες της IL-38 ως αναστολέα της έμφυτης και προσαρμοστικής ανοσίας.16,25 Όταν τα ποντίκια εκπαιδεύονται με -γλυκάνη, εμφανίζονται επιγενετικές τροποποιήσεις στα κύτταρα του εγγενούς ανοσοποιητικού συστήματος, με αποτέλεσμα ενισχυμένες προφλεγμονώδεις αποκρίσεις του έμφυτου ανοσοποιητικού συστήματος μετά από μια δεύτερη φλεγμονώδη πρόκληση. Η ενισχυμένη παραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών οδηγεί επίσης σε επιγενετικές τροποποιήσεις στον μυελό των οστών,7 και μειώνει τη θνησιμότητα σε μοντέλα συστηματικών λοιμώξεων από C. albicans ή S. aureus.8,9 Επιπλέον, η IL-1 έχει αποδειχθεί ότι παίζει σημαντικό ρόλο ρόλος στην επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας, 7,12 που τονίζεται επίσης από τους Van der Meer et al., οι οποίοι απέδειξαν ότι η θεραπεία ποντικών με μικρές δόσεις ανασυνδυασμένης ανθρώπινης IL-1 μειώνει τη θνησιμότητα σε ποντικούς με κοκκιοκυττοπενία από επακόλουθη μόλυνση από Pseudomonas, μια έννοια εκείνη την εποχή που ονομαζόταν μη ειδική αντίσταση στη μόλυνση.27 Ένα άλλο μέλος της οικογένειας IL-1, η IL-37, αποδείχθηκε ότι αναστέλλει το φλεγμονώδες NLRP3 και την απελευθέρωση ενεργού IL-1 , και την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας.17 Δεδομένων των αντιφλεγμονωδών ιδιοτήτων της IL{-38,28 όπως η ικανότητά της να εμποδίζει την ανοδική ρύθμιση της IL{-1 σε μοντέλα ποντικών ουρικής αρθρίτιδας,18 ερευνήσαμε εάν η IL{{ 25}} μπορεί να εμποδίσει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας.

Εδώ, δείχνουμε ότι εκτός από την πρόληψη της επαγόμενης από LPS φλεγμονής σε ποντίκια, η 29 IL-38 ακύρωσε την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας και την επακόλουθη απόκριση σε ένα δευτερεύον ερέθισμα με LPS. Η χορήγηση IL-38 ανέστειλε την επαγόμενη από τη γλυκάνη φωσφορυλίωση της οδού σηματοδότησης Akt/mTOR. Ομοίως, η IL-38 απέτρεψε τον εξαρτώμενο από τη γλυκάνη προφλεγμονώδη επιγενετικό επαναπρογραμματισμό, όπως φαίνεται από τη μείωση του H3K4me3 στους προαγωγείς των Tnfa, Nrlp3, Hk2 και Pfkp στον μυελό των οστών ποντικού. Η in vivo θεραπεία με -γλυκάνη και IL-38 και η επακόλουθη χορήγηση LPS είχε ως αποτέλεσμα χαμηλότερες συγκεντρώσεις γαλακτικού στο πλάσμα και in ex vivo καλλιεργημένα υπερκείμενα μυελού των οστών. Οι χαμηλότερες συγκεντρώσεις γαλακτικού υποδεικνύουν ότι η IL-38 εμποδίζει τη γλυκόλυση, πιθανότατα μέσω της αναστολής της οδού mTOR. Αυτές οι παρατηρήσεις επιβεβαιώνονται με ανάλυση μιας κοόρτης υγιών ατόμων στα οποία το SNP rs5896312 δίπλα στο γονίδιο που κωδικοποιεί την IL-38 επηρέασε τόσο τα επίπεδα IL-38 στο πλάσμα όσο και την επαγωγιμότητα της εκπαιδευμένης ανοσίας σε μονοκύτταρα ex vivo. Συνολικά, δείχνουμε ότι ένα μειωμένο επίπεδο IL-38 οδηγεί σε αυξημένη επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας, ενώ η χορήγηση ανασυνδυασμένης IL-38 αναστέλλει αυτή τη βιολογική απόκριση.

Το IL-38 συνδέεται με το IL-36R και το IL-1R9 είναι ο υποτιθέμενος συνυποδοχέας του.16,30 Έχει αναφερθεί ότι η κολοβωμένη στο Ν-τελικό IL-38 εξασθενεί την Οδός JNK/AP1 που οδηγεί σε μειωμένη παραγωγή IL-6 από μακροφάγα.30 Εδώ δείχνουμε ότι η IL-38 αναστέλλει επίσης την οδό Akt/mTOR, η οποία είναι απαραίτητη για την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας.5 Είναι ενδιαφέρον, αναστολή της οδού mTOR έχει επίσης παρατηρηθεί για την IL37,31,32 που υποδηλώνει έναν μερικώς συγκρίσιμο μηχανισμό λειτουργίας αυτών των μελών της οικογένειας της ευρείας αντιφλεγμονώδους IL-1.

Εκτός από τον θετικό ρόλο της εκπαιδευμένης ανοσίας στην προστασία από λοιμώξεις, έχει προταθεί μια επιβλαβής επίδραση σε αυτοάνοσες ασθένειες.3 Επομένως, η IL-38 μπορεί να χρησιμοποιηθεί θεραπευτικά για να μετριάσει την εκπαιδευμένη ανοσία σε αυτές τις ασθένειες. Η εκπαιδευμένη ανοσία προτάθηκε συγκεκριμένα να παίζει παθολογικό ρόλο στον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο (ΣΕΛ), στο σύνδρομο Sjögren και στη ρευματοειδή αρθρίτιδα.3 Προτάθηκε προστατευτικός ρόλος της IL-38 στον ΣΕΛ,26 σε ποντικούς που υποβλήθηκαν σε πειραματική αρθρίτιδα,33 στη νόσο του Sjögren η IL-38 ρυθμίστηκε προς τα πάνω ως αντίβαρο στην εξαρτώμενη από την IL-36-φλεγμονή.34 Ως εκ τούτου, μια νέα υπόθεση είναι ότι η ανασυνδυασμένη IL-38 θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για την αναστολή της φλεγμονής σε αυτοάνοσες ασθένειες αναστέλλοντας την εκπαιδευμένη ανοσία.

Η εκπαιδευμένη ανοσία προτάθηκε επίσης να παίζει ρόλο στις αυτοφλεγμονώδεις νόσους. Έχουμε αναφέρει προηγουμένως ότι σε ασθενείς με σύνδρομο υπερ IgD, η ανεπάρκεια της μεβαλονικής κινάσης έχει ως αποτέλεσμα τη συσσώρευση μεβαλονικού και ένας υπερδραστήριος εκπαιδευμένος φαινότυπος ανοσίας εμφανίζεται ως προσβολές στείρας φλεγμονής. Μέχρι σήμερα, υπάρχουν περιορισμένα δεδομένα σχετικά με τον ρόλο της IL-38 στα αυτοφλεγμονώδη σύνδρομα που σχετίζονται με το IL-1 ή το NLRP3-. Η αναστολή της IL-1 από την IL-38 και η ομολογία με την IL-1Ra δικαιολογεί περαιτέρω έρευνα σχετικά με τις επιδράσεις της IL-38 σε αυτές τις ασθένειες και ειδικότερα στη συναρμολόγηση η επεξεργασία του φλεγμονώδους και της IL-1, ως αντιφλεγμονώδους ρόλου για την IL-38 σε αυτές τις ασθένειες που προκαλούνται από την IL-1 -μπορεί να υποτεθεί. Προς το παρόν, δεν γνωρίζουμε ποια οδός υποδοχέα εμποδίζεται από την IL-38 που οδηγεί σε μείωση της σηματοδότησης της IL-1. Θεωρούμε ότι η IL-38 μπορεί να παρέμβει στη σηματοδότηση IL{-36R, η οποία μπορεί να δεσμεύσει τις κυτοκίνες IL-36 και να επάγει την IL17 και την IL-1 . Επιπλέον, η IL-38 μπορεί να επηρεάσει την IL{-1R9 η οποία εμπλέκεται επίσης στην επαγωγή της IL{-17. Η ίδια η IL-1 μπορεί να επάγει IL-36 κυτοκίνες και IL -17, με αποτέλεσμα έναν αυτοφλεγμονώδη βρόχο που μπορεί να σπάσει από την IL38. Ωστόσο, το πιο σημαντικό, δείχνουμε ότι η IL-38 αναστέλλει την οδό mTOR, διευκρινίζοντας έναν από τους μηχανισμούς που χρησιμοποιεί η IL-38 για την αναστολή της παραγωγής IL{-1.

Αυτή η μελέτη παρουσιάζει στοιχεία ότι η IL-38 αναστέλλει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας παρεμβαίνοντας στην οδό mTOR και στη σηματοδότηση της IL1. Εκτός από την παρέμβαση σε αυτά τα βασικά μονοπάτια σηματοδότησης στην επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας από τη -γλυκάνη, η ίδια η IL-38 προκάλεσε επίσης επιγενετικές αλλαγές, γεγονός που υποδηλώνει ότι η IL-38 μπορεί να έχει μακροχρόνια ανοσοκατασταλτικό αποτέλεσμα. Ο ρόλος της IL-38 σε ανθρώπινες ασθένειες που εξαρτώνται από εκπαιδευμένη ανοσία απαιτεί περαιτέρω χαρακτηρισμό, για παράδειγμα με αξιολόγηση ανθρώπινων δειγμάτων για τον προσδιορισμό της επίδρασης της IL-38 στη φλεγμονή στο πλαίσιο αυτών των ασθενειών. Οι μεταβολικές επιδράσεις της IL-38 και οι επιδράσεις της στην εκπαιδευμένη ανοσία γίνονται ιδιαίτερα σημαντικές στο πλαίσιο της καρδιαγγειακής νόσου. Η εκπαιδευμένη ανοσία θεωρείται ότι συμβάλλει στην επίμονη φλεγμονή που χαρακτηρίζει την αθηροσκλήρωση.36 Ένας δείκτης αυτής της επίμονης φλεγμονής είναι η C-αντιδρώσα πρωτεΐνη (CRP) και σε μια μετα-ανάλυση περισσότερων από 80,{13}} ατόμων, βρέθηκαν πολυμορφισμοί μόνο σε πέντε ανοσογονίδια που συσχετίστηκαν με την κυκλοφορούσα CRP, τα οποία περιελάμβαναν την ίδια τη CRP, το NRLP3, το IL-6R και το εντυπωσιακό IL-1F10 (IL-38).37 Πρόσφατα αναφέραμε ότι Οι συγκεντρώσεις της IL-38 στο πλάσμα συσχετίζονται αντιστρόφως με την IL{-6 και τη CRP σε υπέρβαρα άτομα και είναι περισσότερο μειωμένες σε άτομα με μεταβολικό σύνδρομο.20 Αυτές και οι τρέχουσες παρατηρήσεις μας υποδηλώνουν ότι η IL{-38 μπορεί να είναι βασικός παράγοντας για τον περιορισμό των μεταβολικών οδών και της φλεγμονής που είναι κρίσιμοι οδηγοί καρδιαγγειακών παθήσεων.

Συμπερασματικά, σε αυτή τη μελέτη, δείχνουμε ότι η IL-38 είναι ένας σημαντικός αντιφλεγμονώδης μεσολαβητής που αναστέλλει την επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας. Η IL-38 αναστέλλει την επαγωγή επιγενετικών και μεταβολικών αλλαγών που προκαλούνται από -γλυκάνη και ένα SNP που συσχετίζεται με υψηλότερες συγκεντρώσεις IL-38 σε υγιείς εθελοντές έχει ως αποτέλεσμα μειωμένη επαγωγή εκπαιδευμένης ανοσίας από -γλυκάνη ex vivo. Αυτά τα δεδομένα υποστηρίζουν την υπόθεση ότι η τροποποίηση της IL-38 θα μπορούσε να έχει θεραπευτική χρήση σε ασθένειες στις οποίες η εκπαιδευμένη ανοσία είναι απορυθμισμένη και συμβάλλει στην παθολογία της νόσου και στα κλινικά δείγματα που συνεισφέρουν MGN. Τα LABJ, MGN και CAD συνεισέφεραν αντιδραστήρια/υλικά. Η DMG και η RJWA έγραψαν/συνέταξαν και οριστικοποίησαν την εργασία. Όλοι οι συγγραφείς διάβασαν και ενέκριναν το τελικό χειρόγραφο.

ΕΥΧΑΡΙΣΤΙΕΣ

Το FLV υποστηρίχθηκε από επιχορήγηση VIDI από τον Ολλανδικό Οργανισμό Επιστημονικής Έρευνας. Το MGN υποστηρίχθηκε από μια προηγμένη επιχορήγηση ERC (#833247) και μια επιχορήγηση Spinoza του Ολλανδικού Οργανισμού Επιστημονικής Έρευνας. Το CAD υποστηρίχθηκε από την επιχορήγηση NIH AI 15614. Η RJWA υποστηρίχθηκε από επιχορήγηση VENI από τον Ολλανδικό Οργανισμό Επιστημονικής Έρευνας (#09150161810007)

ΑΠΟΚΑΛΥΨΕΙΣ

Οι συγγραφείς δεν δηλώνουν σύγκρουση συμφερόντων.

ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΚΕΣ ΑΝΑΦΟΡΕΣ

1. Netea MG, Joosten LA, Latz E, et al. Εκπαιδευμένη ανοσία: ένα πρόγραμμα έμφυτης ανοσολογικής μνήμης στην υγεία και τις ασθένειες. Επιστήμη. 2016;352:aaf1098.

2. Arts RJW, Carvalho A, La Rocca C, et al. Ανοσομεταβολικά μονοπάτια σε εκπαιδευμένη ανοσία που προκαλείται από BCG. Αναφορές κελιών. 2016;17:2562- 2571.

3. Arts RJW, Joosten LAB, Netea MG. Ο πιθανός ρόλος της εκπαιδευμένης ανοσίας σε αυτοάνοσες και αυτοφλεγμονώδεις διαταραχές. Front Immunol. 2018; 9:298.

4. Saeed S, Quintin J, Kerstens ΗΗ, et αϊ. Επιγενετικός προγραμματισμός διαφοροποίησης μονοκυττάρων σε μακροφάγο και εκπαιδευμένη έμφυτη ανοσία. Επιστήμη. 2014; 345:1251086.

5. Cheng SC, Quintin J, Cramer RA, et αϊ. Η αερόβια γλυκόλυση με άλφα μεσολάβηση mTOR και HIF-1 ως μεταβολική βάση για εκπαιδευμένη ανοσία. Επιστήμη. 2014; 345:1250684.

6. Arts RJ, Novakovic B, Ter Horst R, et al. Η γλουταμινόλυση και η συσσώρευση φουμαρικών ενσωματώνουν ανοσομεταβολικά και επιγενετικά προγράμματα σε εκπαιδευμένη ανοσία. Cell Metab. 2016;24:807-819.

7. Mitroulis I, Ruppova K, Wang B, et al. Η διαμόρφωση των προγόνων μυελοποίησης είναι αναπόσπαστο συστατικό της εκπαιδευμένης ανοσίας. Κύτταρο. 2018;172:147-161 e12.

8. Kleinnijenhuis J, Quintin J, Preijers F, et αϊ. Το Bacille Calmette-Guerin επάγει την εξαρτώμενη από το NOD2-μη ειδική προστασία από επαναμόλυνση μέσω επιγενετικού επαναπρογραμματισμού των μονοκυττάρων. Proc Natl Acad Sci US A. 2012;109:17537-17542.

9. Quintin J, Saeed S, Martens JHA, et αϊ. Η μόλυνση από Candida albicans παρέχει προστασία έναντι της επαναμόλυνσης μέσω λειτουργικού επαναπρογραμματισμού των μονοκυττάρων. Μικρόβιο ξενιστή κυττάρων. 2012;12:223-232.

10. Novakovic B, Habibi E, Wang SY, et al. Η βήτα-γλυκάνη αντιστρέφει την επιγενετική κατάσταση της επαγόμενης από το LPS ανοσολογικής ανοχής. Κύτταρο. 2016;167:1354-1368 e14.

11. Biering-Sorensen S, Aaby Ρ, Lund Ν, et αϊ. Πρώιμη BCG-Δανία και νεογνική θνησιμότητα μεταξύ βρεφών με βάρος<2500 g: a randomized controlled trial. Clin Infect Dis. 2017;65:1183-1190

12. Arts RJW, Moorlag S, Novakovic B, et al. Ο εμβολιασμός BCG προστατεύει από πειραματική ιογενή μόλυνση στον άνθρωπο μέσω της επαγωγής κυτοκινών που σχετίζονται με εκπαιδευμένη ανοσία. Μικρόβιο ξενιστή κυττάρων. 2018;23:89-100 e5.

13. Dinarello CA. Επισκόπηση της οικογένειας IL-1 στην έμφυτη φλεγμονή και την επίκτητη ανοσία. Immunol Rev. 2018;281:8-27.

14. Dinarello C, Arend W, Sims J, et al. Ονοματολογία οικογένειας IL-1. Nat Immunol. 2010; 11:973.

15. Hahn Μ, Frey S, Hueber AJ. Τα νέα μέλη της οικογένειας κυτοκινών ιντερλευκίνης-1 σε φλεγμονώδεις ασθένειες. Curr Opin Rheumatol. 2017;29:208-213.

16. van de Veerdonk FL, Stoeckman AK, Wu G, et al. Η IL-38 συνδέεται με τον υποδοχέα IL{-36 και έχει βιολογικές επιδράσεις στα κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος παρόμοια με τους ανταγωνιστές του υποδοχέα IL-36. Proc Natl Acad Sci US A. 2012;109:3001- 3005.

17. Cavalli G, Tengesdal IW, Gresnigt MS, Nemkov T, Arts RJW, Domínguez-Andrés J, Molteni R, Stefanoni D, Cantoni E, Cassina L, Giugliano S, Schraa K, Mills TS, Pietras EM, Eisenmesser EZ, L, Boletta A, D'Alessandro A, Joosten LAB, Netea MG, Dinarello CA, et al. Η αντιφλεγμονώδης κυτοκίνη Ιντερλευκίνη 37 είναι ένας αναστολέας της Εκπαιδευμένης Ανοσίας. Αναφορές κελιών. 2021; Σε Τύπο.

18. de Graaf DM, Maas RJA, Smeekens SP, et αϊ. Η ανθρώπινη ανασυνδυασμένη ιντερλευκίνη-38 καταστέλλει τη φλεγμονή σε μοντέλα ποντικών τοπικής και συστηματικής νόσου. Κυτοκίνη. 2020; 137:155334.

19. Towne JE, Renshaw BR, Douangpanya J, et al. Οι συνδέτες ιντερλευκίνης-36 (IL-36) απαιτούν επεξεργασία για πλήρη αγωνιστή (IL-36άλφα, IL36βήτα και IL-36γάμα) ή ανταγωνιστή (IL-36Ra ) δραστηριότητα. J Biol Chem. 2011;286:42594-42602.

20. Graaf Dennis Μ, Jaeger Martin, Munckhof Inge CL, et al. Οι μειωμένες συγκεντρώσεις της ιντερλευκίνης 38 της κυτοκίνης Β κυττάρων σχετίζονται με τον κίνδυνο καρδιαγγειακής νόσου σε υπέρβαρα άτομα. European Journal of Immunology.

21. Oosting Μ, Kerstholt Μ, Ter Horst R, et αϊ. Λειτουργική και γονιδιωματική αρχιτεκτονική των αποκρίσεων κυτοκίνης που προκαλούνται από borrelia burgdorferi σε ανθρώπους. Μικρόβιο ξενιστή κυττάρων. 2016;20:822-833.

22. Li Y, Oosting Μ, Smeekens SP, et αϊ. Μια προσέγγιση λειτουργικής γονιδιωματικής για την κατανόηση της παραλλαγής στην παραγωγή κυτοκίνης στον άνθρωπο. Κύτταρο. 2016;167:1099-1110.

23. Bekkering S, Blok BA, Joosten LA, Riksen NP, van Crevel R, Netea MG. In vitro πειραματικό μοντέλο εκπαιδευμένης έμφυτης ανοσίας σε ανθρώπινα πρωτογενή μονοκύτταρα. Clin Vaccine Immunol. 2016;23:926-933

24. Nold MF, Nold-Petry CA, Zepp JA, Palmer BE, Bufler P, Dinarello CA. Η IL-37 είναι ένας θεμελιώδης αναστολέας της έμφυτης ανοσίας. Nat Immunol. 2010;11:1014-1022.

25. Li Y, Oosting Μ, Deelen Ρ, et αϊ. Μεταβλητότητα μεταξύ ατόμων και γενετικές επιρροές στις αποκρίσεις κυτοκινών σε βακτήρια και μύκητες. Nat Med. 2016; 22:952.

26. Rudloff I, Godsell J, Nold-Petry CA, et al. Σύντομη αναφορά: η ιντερλευκίνη38 ασκεί αντιφλεγμονώδεις λειτουργίες και σχετίζεται με τη δραστηριότητα της νόσου στον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο. Ρευματολική Αρθρίτιδα. 2015;67:3219-3225.

27. Van der Meer JW, Helle M, Aarden L. Σύγκριση των επιδράσεων της ανασυνδυασμένης ιντερλευκίνης 6 και της ανασυνδυασμένης ιντερλευκίνης 1 στη μη ειδική αντίσταση στη μόλυνση. Eur J Immunol. 1989;19:413- 416.

28. van de Veerdonk FL, de Graaf DM, Joosten LA, Dinarello CA. Βιολογία της IL-38 και ο ρόλος της στη νόσο. Immunol Rev. 2018;281:191-196.

29. Xu F, Lin S, Yan X, et al. Η ιντερλευκίνη 38 προστατεύει από τη θανατηφόρα σήψη. Int J Infect Dis. 2018;218:1175-1184.

30. Mora J, Schlemmer Α, Wittig Ι, et al. Η ιντερλευκίνη-38 απελευθερώνεται από τα αποπτωτικά κύτταρα για να περιορίσει τις φλεγμονώδεις αποκρίσεις των μακροφάγων. J ΜοΙ Cell Biol. 2016;8:426-438.

31. Nold-Petry CA, Lo CY, Rudloff I, et al. Η IL-37 απαιτεί από τους υποδοχείς IL-18Ralpha και IL-1R8 (SIGIRR) να πραγματοποιήσουν το πολύπλευρο αντιφλεγμονώδες πρόγραμμα κατά την έμφυτη μεταγωγή σήματος. Nat Immunol. 2015;16:354-365.

32. Li TT, Zhu D, Mou Τ, et al. Η IL-37 προκαλεί αυτοφαγία σε κύτταρα ηπατοκυτταρικού καρκινώματος αναστέλλοντας την οδό PI3K/AKT/mTOR. ΜοΙ Immunol. 2017;87:132-140.

33. Boutet ΜΑ, Najm A, Bart G, et al. Η υπερέκφραση της IL-38 προκαλεί αντιφλεγμονώδη αποτελέσματα σε μοντέλα αρθρίτιδας ποντικών και ανθρώπινα μακροφάγα in vitro. Ann Rheum Dis. 2017;76:1304-1312.

34. Ciccia F, Accardo-Palumbo Α, Alessandro R, et al. Ο άξονας ιντερλευκίνης-36άλφα διαμορφώνεται σε ασθενείς με πρωτοπαθές σύνδρομο Sjogren. Clin Εχρ Immunol. 2015;181:230-238.

35. Han Y, Mora J, Huard Α, et al. Η IL-38 βελτιώνει τη φλεγμονή του δέρματος και περιορίζει την παραγωγή IL-17 από γ-δέλτα Τ κύτταρα. Cell Rep. 2019;27:835-846.

36. Bekkering S, Joosten LA, van der Meer JW, Netea MG, Riksen NP. Εκπαιδευμένη έμφυτη ανοσία και αθηροσκλήρωση. Curr Opin Lipidol. 2013;24:487-492.

37. Dehghan A, Dupuis J, Barbalic M, et al. Meta-analysis of genome-wide association studies in >80 000 υποκείμενα προσδιορίζει πολλαπλούς τόπους για επίπεδα C-αντιδρώσας πρωτεΐνης. Κυκλοφορία. 2011;123:731-738.

ΒΟΗΘΗΤΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

Μπορείτε να βρείτε πρόσθετες υποστηρικτικές πληροφορίες στο διαδίκτυο στην ενότητα Υποστηρικτικές Πληροφορίες στο τέλος του άρθρου.

For more information:1950477648nn@gmail.com