Πώς το Cistanche βελτιώνει τη γνώση και μειώνει την κατάθλιψη
Mar 24, 2022
Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Dongfang Wang, 1 Haizhen Wang, 2 και Li Gu2
Πάνω από το δέκα τοις εκατό των ανθρώπων υποφέρουν από τουλάχιστον ένα επεισόδιο κατάθλιψης και σχετικών ψυχικών διαταραχών στη διάρκεια της ζωής τους και η κατάθλιψη και οι σχετικές ψυχικές διαταραχές είναι ένα από τα μεγαλύτερα προβλήματα δημόσιας υγείας στον κόσμο. Μια θεωρία πολλαπλών συστημάτων υποστηρίζει ότι η απορρύθμιση των πολλαπλών συστημάτων αποτελεί τη βάση της παθογένειας της κατάθλιψης και των σχετικών ψυχικών διαταραχών και χρειάζονται επειγόντως νέες θεραπείες που βασίζονται στη θεωρία της δυσρύθμισης πολλαπλών συστημάτων. Σε αυτή τη μελέτη, η αντικαταθλιπτική δράση του αφεψήματος από το βότανο Cistanche deserticola YCMa καιCistancheεξετάστηκε σωληνάριο. ΒότανοCistancheΤο αφέψημα μείωσε σημαντικά την περίοδο ακινησίας στη δοκιμή ανάρτησης ουράς ποντικού. Τα ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με αφέψημα βοτάνων έδειξαν βελτιωμένη ικανότητα χωρικής μάθησης και μνήμης στο τεστ υδάτινου λαβύρινθου Morris. Ομάδες που υποβλήθηκαν σε αγωγή με αφέψημα βοτάνων εμφάνισαν μειωμένη δραστηριότητα μονοαμινοξειδάσης (ΜΑΟ). Η συγκέντρωση της ντοπαμίνης (DA) στον εγκέφαλο ρυθμίστηκε προς τα πάνω, υποδεικνύοντας ότι το αφέψημα του βοτάνου Cistanche βελτίωσε τη διεγερσιμότητα των νεύρων. η συγκέντρωση της κορτικοστερόνης στον ορό (CORT) μειώθηκε, δείχνοντας ότι τα ποντίκια επωφελήθηκαν από μειωμένο επίπεδο στρες. Ως εκ τούτου, η αντικαταθλιπτική αποτελεσματικότητα και ο μηχανισμός του παραδοσιακού κινέζικου βοτάνου Cistanche διερευνήθηκαν σε αυτή τη μελέτη. Το Herb Cistanche έδειξε τη δυνατότητα να αναπτυχθεί ως συμπληρωματική και εναλλακτική θεραπεία για την κατάθλιψη.
Cistanche tubulosaβελτιώνει τη γνωστική λειτουργία και μειώνει την κατάθλιψη.
1. Εισαγωγή
Η κατάθλιψη και οι σχετικές διαταραχές της διάθεσης, με εκτίμηση 12-17 τοις εκατό του πληθυσμού να βιώνει τουλάχιστον ένα επεισόδιο στη ζωή, είναι από τις κύριες αιτίες ψυχικών αναπηριών και θεωρούνται ως ένα από τα σημαντικότερα προβλήματα δημόσιας υγείας παγκοσμίως [1]. Ιδιαίτερα σημαντικό, ένα σημαντικό ποσοστό ασθενών με κατάθλιψη υποφέρει από απώλεια μνήμης, προβλήματα συγκέντρωσης, μειωμένη ενέργεια ή κόπωση, απώλεια ενδιαφέροντος ή ευχαρίστησης για χόμπι και δραστηριότητες, δυσκολία στον ύπνο, νωρίς το πρωινό ξύπνημα ή υπερβολικό ύπνο. Αν και τα νευρικά υποστρώματα για την ανωμαλία στην κατάθλιψη και τα σχετικά σύνδρομα είναι ασαφή, είναι γενικά αποδεκτό ότι η εξασθένηση της νευροπλαστικότητας και της κυτταρικής ανθεκτικότητας προκαλεί την παθοφυσιολογία της κατάθλιψης και η επιτυχής θεραπεία μπορεί να εξαρτάται από την παρέμβαση του επιπέδου νευροδιαβιβαστή [2]. Η προσέγγιση της φαρμακευτικής αγωγής για την κατάθλιψη βασίζεται βασικά στην υπόθεση του κλασικού συστήματος μονοαμινών, η οποία ισχυρίζεται ότι η απορρύθμιση των μονοαμινών, ιδίως της σεροτονίνης (5-HT) και της νορεπινεφρίνης (NE) συμβάλλει στην παθογένεση της κατάθλιψης και στην παρέμβαση του συστήματος νευροδιαβιβαστών με ντοπαμίνη αγωνιστές και ντοπαμινο-νοραδρενεργικοί ρυθμιστές θα ανακούφιζαν τα συμπτώματα της μείζονος κατάθλιψης [3]. Αν και συνταγογραφούνται ευρέως, η θεραπευτική αποτελεσματικότητα των αντικαταθλιπτικών είναι αμφισβητήσιμη και η παρενέργεια δεν μπορεί να αγνοηθεί, επειδή ένα σημαντικό ποσοστό των ασθενών δεν ανταποκρίνεται στον χειρισμό του συστήματος μονοαμίνης [4]. Πρόσφατα, νέες θεωρίες της παθογένεσης της κατάθλιψης υποδεικνύουν ότι πολλαπλά συστήματα, συμπεριλαμβανομένων των φλεγμονωδών μονοπατιών, της οδού οξειδωτικού στρες, του άξονα υποθαλάμου-υπόφυσης-επινεφριδίων (HPA), του μεταβολικού και βιοενεργειακού συστήματος, των νευροτροφικών οδών, του γλουταμινικού συστήματος, του οπιοειδούς συστήματος και το χολινεργικό σύστημα, συνδέονται στενά με την εμφάνιση κατάθλιψης [3]. Τα στοιχεία δείχνουν ότι η παρέμβαση πολλαπλών στόχων παρήγαγε καλύτερη αποτελεσματικότητα από μια μεμονωμένη παρέμβαση στόχο [5]. Απαιτούνται επειγόντως νέες θεραπείες που βασίζονται στη θεωρία της δυσρύθμισης πολλαπλών συστημάτων.
Σύμφωνα με πληροφορίες, τα φυτικά προϊόντα κατανάλωναν περισσότερο από το ήμισυ του πληθυσμού των ΗΠΑ [6]. Το ενδιαφέρον και οι απαιτήσεις για βότανα ή φυτικά προϊόντα ως συμπληρωματικό τρόπο αντιμετώπισης της κατάθλιψης αυξάνονται σε όλο τον κόσμο. Πολλά ιατρικά φυτά έχουν βρεθεί ότι επιδεικνύουν ευεργετική δράση για την ανακούφιση της κατάθλιψης. Τα βότανα που έχουν αναφερθεί ότι έχουν την επίδραση της καταστολής της κατάθλιψης και της βελτίωσης της γνωστικής λειτουργίας περιλαμβάνουν το ιπποφαές [7], το Ginkgo biloba [8], το Piper nigrum [9], το Hypericum perforatum [10], το Griffonia simplicifolia [11]. Μια συνδυασμένη χορήγηση φερουλικού οξέος και πιπερίνης επέδειξε μια συνεργική δράση παρόμοια με αντικαταθλιπτικά σε ποντίκια με χειρισμό του μονοαμινεργικού συστήματος [7]. Η αλμπιφλορίνη χαρακτηρίστηκε από υψηλή εκλεκτική συγγένεια με τους υποδοχείς και τους μεταφορείς νευροδιαβιβαστών και σημαντικά αυξημένες εξωκυτταρικές συγκεντρώσεις 5-HT και NE στον υποθάλαμο των ελεύθερα κινούμενων αρουραίων [12]. Ένα ιατρικό βότανο Melissa officinalis L. ανακούφισε την καταθλιπτική συμπεριφορά των ποντικών ασκώντας επιρροή στο επίπεδο των σεροτονινεργικών νευροδιαβιβαστών [13]. Αυτά τα βότανα ή αφεψήματα, που αναπτύχθηκαν ως εναλλακτικές θεραπείες για την κατάθλιψη, βοηθούν στην ανακούφιση των συμπτωμάτων της κατάθλιψης και παρέχουν μια νέα πηγή για την ανάπτυξη αντικαταθλιπτικών φαρμάκων. ΒότανοCistancheείδη, που διανέμονται σε άνυδρες περιοχές και ερήμους στο βόρειο τμήμα της Κίνας, είναι βότανα παραδοσιακής κινεζικής ιατρικής και χρησιμοποιούνται ευρέως για τη θεραπεία διαφόρων ασθενειών για περισσότερο από 1,000 χρόνια στην Κίνα. Η πολλαπλή αποτελεσματικότητα του βοτάνουCistancheΤο αφέψημα κυμαίνεται μεταξύ των αφροδισιακών [14], των ανοσοπροωθητικών [15], των αντιοξειδωτικών [16] και των ηπατοπροστατευτικών [17] ιδιοτήτων.C. deserticolaΤα αφεψήματα επάγουν τα στεροειδογόνα ένζυμα των όρχεων [18], προάγουν τη στυτική απόκριση του πέους και μειώνουν την περίοδο λανθάνουσας στυτικής αντίδρασης σε ευνουχισμένους αρουραίους [19]. Το Herb Cistanche έχει αναφερθεί ότι αναστέλλει τις δραστηριότητες των ντοπαμινεργικών νευρώνων ρυθμίζοντας τα ανασταλτικά γονίδια απόπτωσης και τους νευροτροφικούς παράγοντες [20]. Τα αφεψήματα του C. tubulosa τροποποίησαν τη γνωστική δυσλειτουργία που προκαλείται από το A𝛽 1-42 μέσω του αποκλεισμού της εναπόθεσης αμυλοειδούς και αναζωογόνησαν τη χολινεργική και ιπποκαμπική ντοπαμινεργική νευρωνική λειτουργία [21]. Η νευροπροστατευτική ιδιότητα του φυτικού Cistanche συνεπάγεται τη θεραπευτική δυνατότητα σε γνωστικές ασθένειες. Η κατάθλιψη είναι ένας κοινός μικτός τρόπος συναισθηματικών αντιδράσεων με κοινά συμπτώματα τη λήθη και τη γνωστική έκπτωση [22]. Το βότανο Cistanche χρησιμοποιήθηκε συνήθως ως παραδοσιακό κινέζικο φάρμακο για τη θεραπεία της λήθης. Επιπλέον, μια πρόσφατη αναφορά δείχνει ότι μια πρώιμη έναρξη χορήγησης καλαμποκάλευρου συμπληρωμένου με C. tubulosa είναι ευεργετική για την προαγωγή της μακροζωίας και τη σχετιζόμενη με την όσφρηση μάθηση και βελτίωση της μνήμης στο μη σπονδυλωτό μοντέλο Drosophila [23]. Αυτά τα γεγονότα δείχνουν τη γνωστική βελτιωτική ιδιότητα του βοτάνουCistanche; Εδώ σε αυτήν την έρευνα, για πρώτη φορά χαρακτηρίσαμε την αντικαταθλιπτική ιδιότητα και τη σχέση της με τις δραστηριότητες γνωστικής βελτίωσης στο μοντέλο των θηλαστικών ρυθμίζοντας το σύστημα μονοαμίνης και τον άξονα HPA. Φωτίζοντας την αντικαταθλιπτική ιδιότητα και τον προκαταρκτικό μηχανισμό του βοτάνου Cistanche θα μπορούσε να επεκτείνει το φάσμα εφαρμογής του βοτάνου Cistanche, το οποίο θα μπορούσε να αναπτυχθεί ως εναλλακτική θεραπεία για την κατάθλιψη.
cistanche wirkung
2. Υλικά και μέθοδοι
2.1. Φυτικό Υλικό και Παρασκευή Αφεψήματος. C. deserticola
Το YCMa ελήφθη από την Αυτόνομη Περιφέρεια Νέι Μογγόλων, Κίνα. Το C. tubulosa ελήφθη από την Αυτόνομη Περιοχή Xinjiang Uygur, Κίνα. Πριν από το αφέψημα, το βότανο (C. deserticola YCMa ή C. tubulosa) επιθεωρήθηκε για την ανίχνευση της περιεκτικότητας σε εχινακοσίδη και βερμπασκοσίδη χρησιμοποιώντας HPLC (υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης) (Milford, MA, Waters, ΗΠΑ) και το επιλέξιμο προϊόν (σύμφωνα με στη Φαρμακοποιία της Λαϊκής Δημοκρατίας της Κίνας) χρησιμοποιήθηκε για τα πειράματα σε ζώα. Το αφέψημα αποκτήθηκε με βάση τη μέθοδο εξάτμισης του νερού που αναπτύχθηκε από το Κέντρο Ερευνών Μηχανικών Τροφίμων και Υγείας του Κρατικού Υπουργείου Παιδείας, Πανεπιστήμιο Sun Yat-sen. ΑποξηραμένοςCistanchedeserticolaΤο YCMa 125 g θρυμματίστηκε και κοσκινίστηκε με 120-πλέγμα και στη συνέχεια η σκόνη διαλύθηκε σε 3 L υπερκαθαρού νερού, θερμάνθηκε στους 100∘C για 2 ώρες και στη συνέχεια ψύχθηκε σε θερμοκρασία δωματίου, και κοσκινισμένο? το υπερκείμενο ανακυκλώθηκε. Το ίζημα στη συνέχεια διαλύθηκε σε 2 L υπερκαθαρού νερού και στη συνέχεια θερμάνθηκε για 1,5 ώρα και ψύχθηκε όπως αναφέρθηκε παραπάνω για να ανακυκλωθεί το υπερκείμενο. το ίζημα στη συνέχεια χρησιμοποιήθηκε για την ανακύκλωση του υπερκειμένου. Το περιεχόμενο όλου του υπερκειμένου εμπλουτίστηκε με περιστροφικούς εξατμιστές κενού στους 60°C. Τέλος, η συγκέντρωση του ακατέργαστου φαρμάκου ορίστηκε ως 0,5 g/ml και το προϊόν αποθηκεύτηκε στους -20∘C.
2.2. Προσδιορισμός εχινακοσίδης και βερμπασκοσίδης με ανάλυση HPLC.
Χρησιμοποιήθηκε HPLC (υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης) για τη μέτρηση της ποιοτικής και ποσοτικής ανάλυσης του εχινακοσίδη και του βερμπασκοσίδη. Η βερμπασκοσίδη (καθαρότητα > 93 τοις εκατό) και η εχινακοσίδη (καθαρότητα > 93 τοις εκατό) αγοράστηκαν από τα Εθνικά Ινστιτούτα Ελέγχου Τροφίμων και Φαρμάκων (Πεκίνο, Κίνα) και χρησιμοποιήθηκαν ως τυπικός έλεγχος.
εχινακοσίδη
2.3. Η φροντίδα των ζώων και η πειραματική συμπεριφορά.
Τα υποκείμενα ήταν αρσενικά ποντίκια Kunming χωρίς SPF (χωρίς ειδικά παθογόνα) βάρους 21~25 γραμμαρίων, τα οποία παρέχονται από το Medical Experimental Animal Center της επαρχίας Guangdong. Τα ζώα στεγάστηκαν σε πλαστικά κλουβιά (δέκα ανά κλουβί). οι συνθήκες περιβάλλοντος ρυθμίστηκαν ως εξής: υγρασία 40~70 τοις εκατό, θερμοκρασία δωματίου 21 ± 1∘C και περίοδος φωτός-σκότους 12 ωρών: 12 ωρών. Όλα τα πειράματα σε ζώα εγκρίθηκαν από την Επιτροπή Δεοντολογίας των Ζώων του Πανεπιστημίου Sun Yat-sen.
2.4. Δοκιμή ανάρτησης ουράς.
Η δοκιμή ανάρτησης ουράς έγινε σύμφωνα με το πρωτόκολλο που περιγράφεται από τους Cryan et al. [24] με μέτριες αλλαγές. Εν συντομία, την ημέρα 21, τα ποντίκια αιωρήθηκαν από την ουρά χρησιμοποιώντας μεταλλική αγχόνη δεμένη με νάιλον καθετήρα, με κεφάλι σε ύψος 50 mm από το πάτωμα. Τα ποντίκια κρεμάστηκαν στο γάντζο σε κολλητικές ταινίες 10-20 mm από το άκρο της ουράς του και απομονώθηκαν ακουστικά και οπτικά με clapboards. Οι κινήσεις του σώματος του ποντικιού καταγράφηκαν και οι αναπνευστικές κινήσεις αγνοήθηκαν. Πριν από την ημέρα του πειράματος, τα ποντίκια αιωρήθηκαν για 8 λεπτά για προσαρμογή.
2.5. Η δοκιμή Morris Water Maze.
Η δοκιμή υδάτινου λαβύρινθου έγινε σύμφωνα με την περιγραφή των Vorhees et al. [25–27] χρησιμοποιώντας
τη συσκευή που αναπτύχθηκε από την Κινεζική Ακαδημία Ιατρικών Επιστημών. Χρησιμοποιήθηκε μια κυκλική πισίνα (διάμετρος 150 cm) γεμάτη με νερό (26 ± 1∘C, ύψος χείλους (απόσταση επιφάνειας νερού από χείλος τοίχου): 10 cm), κυκλική πλατφόρμα διάσωσης (διάμετρος: 11 cm, απόσταση μεταξύ του κεντρικού σημείου της πλατφόρμας και Τοίχωμα πισίνας: 27 cm) βυθίστηκε 1–1,5 cm κάτω από την επιφάνεια του νερού και η περιοχή δοκιμής φωτίστηκε με έμμεσο φωτισμό (50 ± 10 lux) για την αποφυγή αντανακλάσεων. Χρησιμοποιήθηκαν τέσσερις θέσεις έναρξης, Β, Ν, Α και Δ. Για το τεστ χωρικής μάθησης, τα ζώα εκπαιδεύονταν καθημερινά τις ημέρες 9-11 στη σταθερή θέση έναρξης. Η λανθάνουσα περίοδος διαφυγής μετριέται για να εμφανίσει τη χωρική μνήμη και την ικανότητα εκμάθησης των ποντικών. Εάν τα ποντίκια δεν μπορούσαν να βρουν ή να σκαρφαλώσουν στην πλατφόρμα, τα ποντίκια θα οδηγούνταν στην πλατφόρμα και θα έμεναν για 10 δευτερόλεπτα. Μετά από ανάπαυση για 60 δευτερόλεπτα, θα ξεκινούσε η επόμενη προπόνηση. Τα δεδομένα που ελήφθησαν από το τελευταίο τεστ χωρικής μάθησης χρησιμοποιήθηκαν ως βασική τιμή για τη χύτευση. Τις ημέρες 23-28, έγινε δοκιμή πλοήγησης τόπου και χωρική ανίχνευση. Η δοκιμή πλοήγησης στο χώρο διήρκεσε για 6 ημέρες και πραγματοποιήθηκε τη 13:00, τα ζώα τοποθετήθηκαν στο νερό με το κεφάλι τους στραμμένο προς τον τοίχο της πισίνας δεξιόστροφα και η περίοδος λανθάνουσας κατάστασης (εντός 2 λεπτών) καταγράφηκε. Αφού έγινε η δοκιμή πλοήγησης στο μέρος, η πλατφόρμα αφαιρέθηκε. Τα ποντίκια τοποθετήθηκαν στο νερό με το κεφάλι τους στραμμένο προς το τοίχωμα της πισίνας σε μια τυχαία τοποθεσία και καταγράφηκε το ίχνος κίνησης και η συχνότητα που τα ποντίκια κολύμπησαν εκεί που βρισκόταν η πλατφόρμα μέσα σε 2 λεπτά. Το ίχνος κίνησης καταγράφηκε από μια πολυλειτουργική αυτόνομη συσκευή εγγραφής κίνησης ποντικιών (YLS-1A, Yiyan Technology, Jinan, Κίνα).
2.6. Ανίχνευση της Δραστηριότητας ΜΑΟ.
Η δραστηριότητα ΜΑΟ μετρήθηκε χρησιμοποιώντας κιτ ανίχνευσης ΜΑΟ (A034, Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Κίνα) και η ανίχνευση έγινε σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή. Λήφθηκε ομογενοποίηση από εγκεφαλικό ιστό. 500𝜇l αναμίχθηκαν με 300 𝜇l παράγοντα 1 και 300 l παράγοντα 2, επωάστηκαν για 3 ώρες στους 37∘ C και στη συνέχεια προστέθηκαν διαδοχικά με 300 l, παράγοντα 3, 3 ml vorte για 2 λεπτά και 2 λεπτά. Το μίγμα της αντίδρασης φυγοκεντρήθηκε στις 3,000 rpm για 10 λεπτά και η οπτική πυκνότητα του υπερκειμένου προσδιορίστηκε με φασματοφωτόμετρο υπεριώδους και ορατού φάσματος (Lambda 25, PerkinElmer, USA) χρησιμοποιώντας φως διέγερσης 242 nm.
2.7. Ενζυμική Ανοσοροφητική Δοκιμασία Νευροδιαβιβαστών και ACTH και CORT.
Το κιτ ανίχνευσης Ενζυμικής Ανοσοροφητικής Δοκιμασίας (ELISA) για ντοπαμίνη (DA), νορεπινεφρίνη (NE) και 5-υδροξυτρυπταμίνη (5-HT) αγοράστηκαν από την BLUE GENE, Σαγκάη. Τα κιτ ανίχνευσης ELISA αγοράστηκαν από την Qiyun Biotech, Guangzhou.
Οι διαδικασίες είναι οι εξής: το πείραμα διεξήχθη σε θερμοκρασία δωματίου. Επικαλύψτε τα φρεάτια μιας πλάκας μικροτιτλοδότησης PVC με το αντίσωμα σύλληψης σε συγκέντρωση 1–10 g/mL σε ρυθμιστικό διάλυμα ανθρακικών/διττανθρακικών (pH 9,6). Σφραγίστε την πλάκα και επωάστε όλη τη νύχτα στους 4∘C. Πλύνετε την πλάκα με PBS/tween 3 φορές και οι μη ειδικές θέσεις δέσμευσης μπλοκάρονται από το διάλυμα Block. στη συνέχεια πλύνετε την πλάκα με PBS/tween 3 φορές. Τα πρότυπα και τα δείγματα αραιώνονται σε διάλυμα αποκλεισμού και 100 𝜇l προστίθενται στο φρεάτιο της πλάκας και η πλάκα σφραγίζεται και επωάζεται στους 37∘C για 1 ώρα. Προσθέστε 100𝜇l αραιωμένου αντισώματος ανίχνευσης και επωάστε το τρυβλίο στους 37∘C για 1 ώρα. πλύνετε το πιάτο με PBS/Tween 3 φορές. Προσθέστε 50 𝜇l διάλυμα ανάπτυξης χρώματος και κρατήστε το πιάτο μακριά από το φως και επωάστε το σε θερμοκρασία δωματίου για 15 λεπτά. Προστίθενται 50 𝜇l ρυθμιστικό διάλυμα διακοπής για να σταματήσει η αντίδραση. Μετρήστε την οπτική πυκνότητα (OD) για κάθε φρεάτιο με συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών που έχει ρυθμιστεί στα 405 nm σε 30 λεπτά.
Πίνακας 1: Η περιεκτικότητα σε εχινακοσίδη και βερμπασκοσίδη στη σκόνη και το αφέψημα των C. deserticola YCMa και C. tubulosa.
2.8. Στατιστική ανάλυση.
Όλα τα δεδομένα αντιπροσωπεύτηκαν ως μέσος όρος ± SEM (τυπικό σφάλμα του μέσου όρου), η διαφορά σημαντικότητας αναλύθηκε με t-test ή μονόδρομη ANOVA ακολουθούμενη από δοκιμή πολλαπλών εύρους Duncan χρησιμοποιώντας SPSS 16.0 και διαφορές μεταξύ ομάδες με 𝑃 < 0.05 θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές.
3. Αποτελέσματα
3.1. Προσδιορισμός της Περιεκτικότητας των Κύριων Βιοδραστικών Συστατικών στα Δείγματα C. deserticola YCMa και C. tubulosa.
Οι φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες όπως η εχινακοσίδη και η βερμπασκοσίδη θεωρούνται γενικά ως τα κύρια βιοδραστικά συστατικά. Ως εκ τούτου, η περιεκτικότητα σε εχινακοσίδη και βερμπασκοσίδη και στα δύο δείγματα C. deserticola YCMa και C. tubulosa προσδιορίστηκε με HPLC. Τα χρωματογραφήματα HPLC φαίνονται στο Σχήμα 1 και τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η συνολική περιεκτικότητα σε φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες από το C. deserticola YCMa ήταν περίπου διπλάσιο από αυτό του C. tubulosa. Τα βάρη εχινακοσίδης και βερμπασκοσίδης, αντίστοιχα, αντιστοιχούν στο 1,27 ± 0.009 τοις εκατό και 0.52 ± 0.0{101} {19}}3 τοις εκατό της σκόνης που παρασκευάστηκε από C. deserticola YCMa και 19,81 ± 0,66 τοις εκατό και 2,45 ± 0, 12 τοις εκατό της σκόνης που παρασκευάστηκε από C. tubulosa. Τα βάρη εχινακοσίδης και βερμπασκοσίδης, αντίστοιχα, αντιπροσωπεύουν 0,90 ± 0,001 τοις εκατό και 0,20 ± 0,001 τοις εκατό του αφεψήματος C. deserticola YCMa και 5,90 ± 0,12 τοις εκατό και 0,50 ± 0,54 ± ποσοστό σκόνης που παρασκευάστηκε από C. tubulosa (Πίνακας 1).
βότανα κιστανάκια
3.2. Το αφέψημα των C. deserticola YCMa και C. tubulosa ανακούφισε το επίπεδο του στρες και της κατάθλιψης.
Το τεστ αναστολής ουράς (TST) είναι μια γρήγορη και κλασική μέθοδος για την αξιολόγηση της αντικαταθλιπτικής δράσης των φαρμάκων σε ποντίκια [24]. Σε αυτήν την έρευνα, η κατάσταση ακινησίας, που προκαλείται από το βραχυπρόθεσμο και αναπόφευκτο άγχος της ανάρτησης από την ουρά, χρησιμοποιήθηκε ως χαρακτηριστικό για να αντικατοπτρίζει το επίπεδο κατάθλιψης των ποντικών. Ελέγξαμε εάν το αφέψημα των C. deserticola YCMa και C. tubulosa θα μπορούσε να αναστρέψει την ακινησία και να προάγει την εμφάνιση συμπεριφοράς που σχετίζεται με τη διαφυγή. Σε σύγκριση με τις ομάδες ελέγχου, η περίοδος ακινησίας της ομάδας στρες αυξήθηκε κατά 27,4 τοις εκατό. Σε σύγκριση με τις ομάδες στρες, οι ομάδες που έλαβαν μεσαία, υψηλή συγκέντρωση αφέψημα βοτάνου C. deserticola YCMa εμφάνισαν στατιστικά σημαντική μείωση της περιόδου ακινησίας η καθεμία κατά 44,1 τοις εκατό και 56,1 τοις εκατό. οι ομάδες που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με μέτρια, υψηλή συγκέντρωση αφεψήματος βοτάνου C. tubulosa εμφάνισαν στατιστικά σημαντική μείωση της περιόδου ακινησίας η καθεμία κατά 41,9 τοις εκατό και 47,7 τοις εκατό (Εικόνα 2). Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι το αφέψημα των C. deserticola YCMa και C. tubulosa θα μπορούσε να μειώσει το επίπεδο στρες και κατάθλιψης των ποντικών, και το αφέψημα C. deserticola YCMa επέδειξε ελαφρώς υψηλότερη αποτελεσματικότητα από το αφέψημα C. tubulosa.
Σχήμα 1: Το χρωματογραφικό προφίλ HPLC των φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδών από τη σκόνη C. deserticola YCMa και C. tubulosa.
3.3. Το αφέψημα των C. deserticola YCMa και C. tubulosa βελτίωσε τη χωρική μάθηση και τη μνήμη των ποντικών.
Τα άτομα (έφηβοι και ενήλικες) που πάσχουν από κατάθλιψη είναι επιρρεπή σε μαθησιακές δυσκολίες [28]. Το αφέψημα των C. deserticola YCMa και C. tubulosa αποδείχθηκε ότι ανακουφίζει το επίπεδο του στρες και της κατάθλιψης. στη συνέχεια επιλέξαμε να αξιολογήσουμε εάν το αφέψημα των C. deserticola YCMa και C. tubulosa θα μπορούσε να επηρεάσει τη χωρική μάθηση και τη μνήμη χρησιμοποιώντας το μοντέλο υδάτινου λαβύρινθου Morris, το οποίο εφαρμόζεται ευρέως στην αξιολόγηση της λειτουργίας της χωρικής μάθησης και μνήμης της σχετικής περιοχής του εγκεφάλου [29] . Τα ίχνη κίνησης ταξινομούνται σε τέσσερα κατά τη διάρκεια του λανθάνοντος χρόνου αναζήτησης. μια ευθύγραμμη τροχιά έδειξε ότι τα ποντίκια εντόπισαν με ακρίβεια τη θέση της πλατφόρμας διάσωσης, μια τροχιά τάσης έδειξε ότι τα ποντίκια εμφάνιζαν ουσιαστικά σωστό προσανατολισμό και η τροχιά τύπου νευρικού τύπου έδειξε ότι τα ποντίκια είτε ήταν στην πρώιμη περίοδο εκπαίδευσης είτε έπασχαν από άνοια, προσπαθώντας να Εντοπίστε τη θέση-στόχο με βάση το ένστικτο. Η τροχιά τυχαίας αναζήτησης έδειξε ότι τα ποντίκια είχαν χαμηλή ικανότητα τοποθέτησης και έψαχναν άσκοπα τη θέση-στόχο. Τα δεδομένα ελήφθησαν σύμφωνα με τα κριτήρια.
Η επίδραση των αφεψημάτων C. deserticola YCMa και C. tubulosa στην ικανότητα εκμάθησης χώρου και μνήμης των ποντικών με πίεση συγκράτησης φαίνεται στο Σχήμα 3. Μετά τη δοκιμή εναιώρησης ουράς, τα ποντίκια εμφάνισαν μια σημαντικά παρατεταμένη περίοδο λανθάνουσας κατάστασης. Σε σύγκριση με τις ομάδες στρες, τα ποντίκια που έλαβαν μέτρια, υψηλή δόση C. deserticola YCMa και χαμηλή, υψηλή δόση αφέψημα C. tubulosa παρουσίασαν συντομευμένη περίοδο λανθάνουσας κατάστασης. Η συχνότητα που τα ποντίκια κολυμπούσαν στην κρυφή πλατφόρμα αυξήθηκε σημαντικά στις ομάδες που έλαβαν μέτρια, υψηλή δόση αφέψημα C. deserticola YCMa. Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι τα στρεσαρισμένα ποντίκια ωφελήθηκαν από τη χορήγηση αφεψήματος βοτάνου Cistanche και παρουσίασαν βελτίωση στη χωρική μάθηση και στη μνήμη.
Σχήμα 2: Επίδραση των αφεψημάτων C. deserticola YCMa και C. tubulosa στην περίοδο ακινησίας ποντικών με εναιώρημα ουράς σε 5 λεπτά.
3.4. Αφέψημα C. deserticola YCMa και C. tubulosa μείωσε τη δράση της μονοαμινοξειδάσης.
Η ΜΑΟ καταλύει την οξειδωτική απαμίνωση αμινών όπως η τυραμίνη, η κατεχολαμίνη και η 5-υδροξυτρυπταμίνη (5-HT) στον εγκέφαλο και στους περιφερικούς ιστούς. Η αναστολή της δραστηριότητας του ΜΑΟ έχει ως αποτέλεσμα την αντικαταθλιπτική αποτελεσματικότητα [30]. Επιδιώξαμε να εξηγήσουμε την αντικαταθλιπτική δράση των C. deserticola YCMa και C. tubulosa. τότε προσδιορίστηκε η δραστηριότητα ΜΑΟ στον εγκέφαλο. Μετά τη δοκιμή ανάρτησης ουράς, η δραστηριότητα ΜΑΟ αυξήθηκε σημαντικά. Η δραστικότητα ΜΑΟ στις ομάδες που έλαβαν αγωγή με εναιώρημα ουράς και στη συνέχεια ακολουθήθηκε από μέτρια, υψηλή δόση αφέψημα από C. deserticola YCMa έδειξε σημαντική μείωση κατά περίπου 13,9 τοις εκατό ~ 12,3 τοις εκατό. η δραστικότητα ΜΑΟ στις ομάδες που έλαβαν αγωγή με εναιώρημα ουράς και στη συνέχεια αφέψημα υψηλής δόσης από C. tubulosa έδειξε σημαντική μείωση κατά περίπου 13,2 τοις εκατό (Εικόνα 4). Τα δεδομένα έδειξαν ότι το αφέψημα τόσο από το C. deserticola YCMa όσο και από το C. tubulosa θα μπορούσε να αναστείλει τη δράση του ΜΑΟ και μπορεί να συμβάλει στην αντικαταθλιπτική δράση, και το αφέψημα του C. deserticola YCMa έδειξε ισχυρότερη αποτελεσματικότητα από αυτό του C. tubulosa.
3.5. Η χορήγηση του αφεψήματος C. deserticola YCMa και C. tubulosa είχε ως αποτέλεσμα την ανοδική ρύθμιση της κεντρικής συγκέντρωσης ντοπαμίνης και τη μείωση της συγκέντρωσης κορτικοστερόνης ορού.
Το επίπεδο DA και NE στο κεντρικό νευρικό σύστημα μετρήθηκε για να προσδιοριστεί η διεγερσιμότητα του νεύρου. Μετά από 4 εβδομάδες δοκιμής αιωρήματος ουράς, σε σύγκριση με τις ομάδες στρες, το επίπεδο DA των ομάδων που έλαβαν μέτρια δόση C. deserticola YCMa έχει αυξηθεί σημαντικά κατά 43,5 τοις εκατό η καθεμία. το επίπεδο DA των ομάδων που έλαβαν μέτρια δόση C. tubulosa αυξήθηκε σημαντικά επίσης (Εικόνα 5(α)). Το επίπεδο της ΝΕ ήταν ελαφρώς αυξημένο στις ομάδες που έλαβαν αφέψημα και των δύο βοτάνων σε σύγκριση με τις ομάδες στρες και δεν βρέθηκε στατιστική διαφορά (Εικόνα 5(β)). Αυτά τα αποτελέσματα μπορεί να εξηγήσουν τον μοριακό μηχανισμό της αντικαταθλιπτικής δράσης του βοτάνου Cistanche.
Η αδρενοκορτικοτροπική ορμόνη (ACTH), μια πολυπεπτιδική ορμόνη που παράγεται και εκκρίνεται από την πρόσθια υπόφυση, διεγείρει την έκκριση γλυκοκορτικοστεροειδών δρώντας στον φλοιό των επινεφριδίων, ζώνη fasciculata [31]. Η κορτικοστερόνη, μια στεροειδής ορμόνη που παράγεται από τον φλοιό των επινεφριδίων, εμπλέκεται στη ρύθμιση των φυσιολογικών διεργασιών όπως η τόνωση της ενέργειας, η αντίδραση του ανοσοποιητικού και οι αντιδράσεις στο στρες [32], επομένως επιλέξαμε να μελετήσουμε την επίδραση του αφεψήματος βοτάνων στο τον άξονα HPA. Και μετρήθηκε η συγκέντρωση ACTH και κορτικοστερόνης στον ορό. Μετά από 4 εβδομάδες δοκιμής αιωρήματος ουράς, η συγκέντρωση ACTH και κορτικοστερόνης της ομάδας στρες ρυθμίστηκαν σημαντικά προς τα πάνω (Εικόνα 6). Δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές αλλαγές στις ομάδες θεραπείας με αφέψημα με βότανο Cistanche σε σύγκριση με την ομάδα στρες (Εικόνα 6(α)). Σε σύγκριση με την ομάδα του στρες, η συγκέντρωση κορτικοστερόνης στον ορό των ομάδων που έλαβαν μέτρια, υψηλή δόση αφέψημα C. deserticola YCMa μειώθηκε σημαντικά. η συγκέντρωση κορτικοστερόνης των ομάδων που έλαβαν υψηλή δόση C. tubulosa μειώθηκε αλλά όχι σε σημαντική στατιστική διαφορά
(Εικόνα 5(β)). Τα δεδομένα έδειξαν ότι το αφέψημα τόσο από το C. deserticola YCMa όσο και από το C. tubulosa θα μπορούσε να μειώσει τη συγκέντρωση κορτικοστερόνης στον ορό και μπορεί να εμπλέκεται στη ρύθμιση του άξονα HPA, και το αφέψημα του C. deserticola YCMa έδειξε ισχυρότερη αποτελεσματικότητα από αυτό του C. tubulosa.
Σχήμα 3: Η επίδραση των αφεψημάτων C. deserticola YCMa και C. tubulosa στην ικανότητα εκμάθησης χώρου και μνήμης των ποντικών που καταπονήθηκαν με περιορισμό.
4. Συζήτηση
Σε αυτή τη μελέτη, καθορίστηκαν οι αντικαταθλιπτικές δραστηριότητες και η βελτίωση της μνήμης και της εκμάθησης του βοτάνου Cistanche, κάτι που θα μπορούσε να ρίξει νέο φως στη λειτουργία του βοτάνου Cistanche και να δώσει ενδείξεις για την επέκταση του φάσματος θεραπευτικών εφαρμογών. Προηγούμενες μελέτες δείχνουν ότι το βότανο Cistanche είναι ένα πολυλειτουργικό κινέζικο φάρμακο με βιολογικές δράσεις αντιγηραντικής, αντιοξειδωτικής, οιστρογόνου, αντιοστεοπορωτικής, αφροδισιακής και αντιφλεγμονώδους δράσης [33]. Το Herb Cistanche έχει αναγνωριστεί ως θεραπεία για τη νεφρική ανεπάρκεια, τη στειρότητα και τη χρόνια δυσκοιλιότητα (Pharmacopoeia Committee of China, 2010). Το αφέψημα του βότανου Cistanche αποτελείται από πτητικά έλαια, μη πτητικές φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες (PeGs), ιριδοειδή, λιγνάνες, αλδιτόλες, ολιγοσακχαρίτες και πολυσακχαρίτες. Η εχινακοσίδη και η βερμπασκοσίδη θεωρούνται γενικά ως τα κύρια βιοδραστικά συστατικά [34]. Υπάρχουν τέσσερα κύρια είδη Cistanche, συμπεριλαμβανομένων των C. deserticola YCMa, C. tubulosa, Cistanche Sinensis G. Beck και Cistanche salsa var. albiflorashi et al. [35]; επιλέξαμε τα C. deserticola YCMa και C. tubulosa ως το μοντέλο μας για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε PeGs και το C. deserticola YCMa διέθετε υψηλότερη περιεκτικότητα σε PeGs (Εικόνα 1), γεγονός που μπορεί να εξηγήσει την υψηλότερη αποτελεσματικότητα του C. deserticola YCMa. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η περιεκτικότητα των κύριων βιοδραστικών συστατικών καθορίζει την αποτελεσματικότητα του βοτάνου Cistanche.
Προηγούμενες μελέτες υποδεικνύουν ότι τα προϊόντα Cistanche από βότανα είναι ευεργετικά για τη θεραπεία νευροεκφυλιστικών διαταραχών ρυθμίζοντας προς τα πάνω τον νευρικό αυξητικό παράγοντα (NGF) στον ιππόκαμπο των ποντικών [36, 37], αλλά δεν έχει αναφερθεί έρευνα σχετικά με τις αντικαταθλιπτικές και γνωστικές δραστηριότητες μάθησης του βοτάνου Cistanthe στο μοντέλα θηλαστικών. Σε αυτή τη μελέτη, το αφέψημα του βοτάνου Cistanche αποδείχθηκε ότι είναι αποτελεσματικό για την ανακούφιση του επιπέδου στρες και την ουσιαστική αύξηση της συμπεριφοράς επιβίωσης στο τεστ ανάρτησης ουράς (Εικόνα 2) και τη βελτίωση της χωρικής μάθησης και ικανότητας μνήμης στο μοντέλο λαβύρινθου νερού (Εικόνα 3). Οι Lin et al. απέδειξε ότι το βότανο Cistanche βελτίωσε τη μνήμη που σχετίζεται με την όσφρηση στο μοντέλο μύγας φρούτων [23]. Επικεντρώσαμε την έρευνά μας στην αντικαταθλιπτική δράση και υιοθετήσαμε ένα διαφορετικό ζωικό μοντέλο. Το αποτέλεσμα απέδειξε ότι το βότανο Cistanche βελτίωσε έναν διαφορετικό τύπο γνωστικής λειτουργίας, δηλαδή τη χωρική ικανότητα μάθησης στα ποντίκια. Σύμφωνα με τη θεωρία των μονοαμινών, η εμπειρία του στρες και η κατάθλιψη συνδέονται στενά με το επίπεδο του εγκεφάλου των νευροδιαβιβαστών μονοαμίνης, όπως DA, NE, 5-HT και επινεφρίνη [38]. Και ανακαλύψαμε ότι το αφέψημα του βοτάνου Cistanche θα μπορούσε να υπονομεύσει τη δραστηριότητα του ΜΑΟ (Εικόνα 4) και να αυξήσει την κεντρική συγκέντρωση DA (Εικόνα 5(α)). Παραδόξως, η κεντρική 5-συγκέντρωση HT μειώθηκε από τη θεραπεία με αφέψημα με βότανο Cistanche (δεδομένα δεν εμφανίζονται), επειδή προηγούμενη έρευνα έδειξε ότι η μειωμένη κεντρική 5-δραστηριότητα της HT σχετίζεται με την κατάθλιψη [39]. Η δυσρύθμιση του άξονα υποθαλάμου-υπόφυσης-επινεφριδίων συνδέεται συχνά με κατάθλιψη [40], η παρέμβαση με το σύστημα υποδοχέα γλυκοκορτικοειδών (GR) ανέστρεψε επιτυχώς τον κατασταλτικό φαινότυπο σε ποντίκια [41] και βρήκαμε ότι το βότανο Cistanche μείωσε σημαντικά τη συγκέντρωση στον ορό του CORT (Εικόνα 6(β)). Η τροποποίηση του συστήματος μονοαμίνης και του άξονα HPA συμβάλλουν στην αντικαταθλιπτική δράση του βοτάνου Cistanche. Η εχινακοσίδη μπορούσε να διασχίσει ελεύθερα τον αιματοεγκεφαλικό φραγμό και να δράσει στο κεντρικό νευρικό σύστημα [42], γεγονός που μπορεί να εξηγήσει γιατί το αφέψημα του βοτάνου Cistanche είχε αντικαταθλιπτική λειτουργία. Για πρώτη φορά, χαρακτηρίσαμε την αντικαταθλιπτική ιδιότητα και τη σχέση της με τις δραστηριότητες γνωστικής βελτίωσης στο μοντέλο του ποντικιού και διερευνήθηκε ο προκαταρκτικός μηχανισμός. Ακόμα, ο μηχανισμός της αντικαταθλιπτικής ιδιότητας του Cistanche δεν έχει διευκρινιστεί σε μοριακό επίπεδο και απαιτείται περαιτέρω έρευνα για να διαλευκανθεί ο ολοκληρωμένος αντικαταθλιπτικός μηχανισμός του βοτάνου Cistanche.
Για περισσότερες πληροφορίες, παρακαλώ κάντε κλικ εδώ.
Λαμβάνοντας υπόψη ότι το αφέψημα από βότανο Cistanche είναι ένα μείγμα ενώσεων, μπορεί να υπάρχουν πολλοί τρόποι αφέψημα βοτάνου Cistanche που ασκεί την αντικαταθλιπτική δράση και ενισχύει την ικανότητα μάθησης. Το οξειδωτικό στρες επηρεάζει πολλές κυτταρικές λειτουργίες των νευρώνων και η υπερπαραγωγή ενεργών ειδών οξυγόνου (ROS) προκαλεί κυτταρική βλάβη, απόπτωση και θάνατο [43]. Η εχινακοσίδη που εξάγεται από τους μίσχους του C. salsa επιδεικνύει νευροπροστατευτική δράση μειώνοντας την παραγωγή ROS και την απόπτωση που προκαλείται από μιτοχόνδρια [44]. Η ακτεοσίδη, μια εξαιρετικά ισχυρή αντιοξειδωτική ένωση, μπορεί να είναι εν μέρει υπεύθυνη για τη νευροπροστατευτική δράση [45]. Εκτός από την παραδοσιακή μέθοδο αφεψήματος, η εφαρμογή σύγχρονων φαρμακευτικών μεθόδων όπως οι κάψουλες γλυκοσίδης ελεγχόμενης απελευθέρωσης μπορεί να ενισχύσει την επίδραση του αφεψήματος βοτάνων, επειδή τα βιοενεργά συστατικά θα μπορούσαν να αφομοιωθούν και να αποικοδομηθούν από τον γαστρεντερικό σωλήνα [37].
5. Συμπεράσματα
Σε αυτή τη μελέτη, διαπιστώσαμε ότι τα αφεψήματα των C. deserticola YCMa και C. tubulosa εμφάνισαν αντικαταθλιπτική δράση και βελτίωσαν τη χωρική μάθηση και την ικανότητα μνήμης στο μοντέλο ποντικιού και τα αφεψήματα των C. deserticola YCMa και C. tubulosa είχαν σημαντική επίδραση στο τον άξονα HPA· Το C. deserticola YCMa έδειξε ισχυρότερη φαρμακολογική λειτουργία. Το C. deserticola και το C. tubulosa μπορεί να έχουν τη δυνατότητα να αναπτυχθούν ως εναλλακτικό φάρμακο θεραπείας για την κατάθλιψη.
