Εξωκυτταρικά κυστίδια στα νεφρά και το κλινικό δυναμικό τους σε νεφρικές παθήσεις

Τα εξωκυτταρικά κυστίδια (EVs), όπως τα εξωσώματα και τα μικροκυστίδια, είναι σωματίδια λιπιδικής διπλής στοιβάδας μεμβράνης που προέρχονται από κύτταρα, τα οποία παρέχουν πληροφορίες από τα κύτταρα-ξενιστές στα κύτταρα-δέκτες. Τα EVs εμπλέκονται σε διάφορες βιολογικές διεργασίες, συμπεριλαμβανομένης της ρύθμισης της ανοσολογικής απόκρισης, των επικοινωνιών κυττάρου σε κύτταρο, της θρόμβωσης και της αναγέννησης ιστών. Διαφορετικοί τύποι νεφρικών κυττάρων είναι γνωστό ότι απελευθερώνουν EVs κάτω από φυσιολογικές καθώς και παθολογικές συνθήκες, και πρόσφατες μελέτες έχουν βρει ότι τα EVs έχουν παθοφυσιολογικό ρόλο σε διαφορετικέςνεφρικές παθήσεις. Δεδομένης της πρόσφατης προόδου στις τεχνικές απομόνωσης και ανάλυσης EV, πολλές μελέτες έχουν δείξει τη διαγνωστική και θεραπευτική δυνατότητα των EV σε διάφορανεφρικές παθήσεις, όπως οξείανεφρική βλάβη, πολυκυστική Νεφρική Νόσος, χρόνια νεφρική νόσος, kμεταμόσχευση νεφρούκαι νεφρικό καρκίνωμα. Αυτή η ανασκόπηση ενημερώνει τα πρόσφατα κλινικά και πειραματικά ευρήματα σχετικά με τον ρόλο των ηλεκτρικών οχημάτων σενεφρικές παθήσειςκαι τονίζει τοπιθανή κλινική εφαρμογή των EVως νέα διαγνωστικά και θεραπευτικά.

Λέξεις-κλειδιά: Βιοδείκτες, Εξωσώματα, Εξωκυτταρικά κυστίδια,Ασυλία, ανοσία, Νεφρικές παθήσεις, Μικροκυσταλίδες

Εισαγωγή

Τα εξωκυτταρικά κυστίδια (EVs) αναφέρονται σε όλα τα ενδογενώς παραγόμενα κυστίδια που συνδέονται με τη μεμβράνη και απελευθερώνονται από τα κύτταρα στον εξωκυτταρικό χώρο. Τα EV περιέχουν διάφορα μόρια, όπως DNA, αγγελιαφόρο RNA (mRNA), πρωτεΐνες, λιπίδια και microRNA (miRNAs). Έχουν περιγραφεί διάφοροι υποτύποι EVs, συμπεριλαμβανομένων των εξωσωμάτων, μικροκυστιδίων ή μικροσωματιδίων, αποπτωτικών σωμάτων, εξωσωμάτων και ενδοσωμάτων με βάση την προέλευση, το μέγεθος, το περιεχόμενο και τη βιογένεσή τους (Πίνακας 1). Με τη στενή έννοια, τα EV συνήθως αναφέρονται σε εξωσώματα ή μικροκυστίδια. Σε αυτήν την ανασκόπηση, θα χρησιμοποιήσουμε τον περιεκτικό όρο «EVs» για να επικεντρωθούμε σε εξωσώματα και μικροκυστίδια λόγω των αλληλεπικαλυπτόμενων χαρακτηριστικών μεταξύ των διαφορετικών υποτύπων. Τα EVs ανακαλύφθηκαν αρχικά πριν από περισσότερα από 30 χρόνια, αλλά θεωρήθηκε ότι ο φυσιολογικός τους ρόλος περιοριζόταν στην απέκκριση ενδοκυτταρικών ή μεμβρανικών συστατικών των κυττάρων. Ωστόσο, οι πρόσφατες εξελίξεις έχουν δείξει ότι τα EVs εμπλέκονται σε πολλαπλές βιολογικές διεργασίες όπως η ανοσορύθμιση, η αιμόσταση και ο πολλαπλασιασμός/αναγέννηση ιστών, οι οποίες μπορούν να επηρεάσουν την ανάπτυξη και την αναγέννηση των οργάνων. Τα EVs βρίσκονται επίσης ευρέως σε παθολογικές καταστάσεις. Η παρουσία τους σε οποιοδήποτε σωματικό υγρό διευρύνει τον διαγνωστικό ρόλο των EV ως βιοδεικτών σε διάφορους τύπους ασθενειών. Τα EVs συμβάλλουν επίσης στην εξέλιξη της νόσου επηρεάζοντας το επίπεδο φλεγμονής, θρόμβωσης και ογκογένεσης. Από την άλλη πλευρά, τα EVs έχουν λάβει πολλή ιατρική φροντίδα ως δυνητικό θεραπευτικό όχημα με βάση την ικανότητά τους να μεταφέρουν πρωτεΐνες και γενετικά υλικά. Σε αυτή την ανασκόπηση, θα επικεντρωθούμε στον ρόλο των EVs στη νεφρική φυσιολογία και στις διαδικασίες της νόσου καθώς και στην πιθανή τους δυνατότητα εφαρμογής ως διαγνωστικά και θεραπευτικά σε πολλαπλέςνεφρικές παθήσεις.

Ο φυσιολογικός ρόλος των εξωκυτταρικών κυστιδίων στα νεφρά

Σε φυσιολογικές συνθήκες, οι κύριες βιολογικές λειτουργίες των EVs είναι να απαλλαγούν από ανεπιθύμητες ουσίες από τα κύτταρα-ξενιστές. Τα EV μπορούν επίσης να μεταφέρουν σημαντικές βιολογικές πληροφορίες στα κύτταρα αποδέκτες τους παρέχοντας γενετικό υλικό, πρωτεΐνες, λιπίδια και υποδοχείς. Η μεταφορά RNA ή miRNAs μπορεί να έχει ουσιαστική επίδραση στα κύτταρα λήπτες επαναπρογραμματίζοντας τα γενετικά τους χαρακτηριστικά. Παρακάτω, θα συζητήσουμε λεπτομερώς τη βιολογική λειτουργία των EVs στη νεφρική φυσιολογία (Εικ. 1Α).

Εικόνα 1. Ο ρόλος των εξωκυτταρικών κυστιδίων (EVs) σε φυσιολογικούς νεφρούς και νεφρική νόσο. (Α) Τα EV μεσολαβούν στις επικοινωνίες κυττάρου σε κύτταρο, ρυθμίζοντας την κυτταρική ομοιόσταση, την ισορροπία ηλεκτρολυτών/νερού, την αναγέννηση των σωληναρίων και τις φλεγμονώδεις αντιδράσεις σε φυσιολογικούς νεφρούς. (Β) Τα EV επηρεάζουν την εξέλιξη της νόσου ενισχύοντας τη φλεγμονή και προκαλώντας σωληναρισιακή διάμεση ίνωση ή σπειραματική επιθηλιακή-μεσεγχυματική μετάβαση (EMT). Τα EVs μπορεί επίσης να εμπλέκονται στην παθογένεση του νεφρικού κυτταρικού καρκινώματος (RCC) και στην απόρριψη νεφρικού αλλομοσχεύματος.

Ag, αντιγόνο; CD, αγωγός συλλογής. DC, δενδριτικό κύτταρο; DT, άπω σωληνάριο; ENaC; επιθηλιακό κανάλι νατρίου; PT, εγγύς σωληνάριο; TEC, σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα.

Τροποποιήθηκε από το άρθρο των Kwon et al. (Korean J Intern Med 2019;34:470-479)με την άδεια Creative Commons.

Ομοιόσταση και κυτταρική επιβίωση

Ένας από τους σημαντικότερους βιολογικούς ρόλους των EVs είναι η απομάκρυνση των ενδοκυτταρικών τοξικών υλικών στους εξωκυτταρικούς χώρους. Καθώς τα κύτταρα περνούν από πολλαπλές βιολογικές διεργασίες, δημιουργούν κατεστραμμένα οργανίδια και κυτταρικά απόβλητα, τα οποία μπορούν να προκαλέσουν κυτταρικό στρες που οδηγεί σε κυτταρικό θάνατο ή φλεγμονή. Τα ευκαρυωτικά κύτταρα έχουν αναπτύξει έναν μηχανισμό αυτοάμυνας για την απομάκρυνση των ενδοκυτταρικών αποβλήτων - την έκκριση των EVs στον εξωκυτταρικό χώρο. Με αυτόν τον τρόπο, τα κύτταρα μπορούν να εξαλείψουν αποτελεσματικά δυνητικά επιβλαβή θραύσματα χρωμοσωμικού DNA μέσω των εξωσωμάτων. Η αναστολή αυτής της διαδικασίας μπορεί να προκαλέσει μια έμφυτη ανοσολογική απόκριση, βλάβη του DNA και απόπτωση σε φυσιολογικά ανθρώπινα κύτταρα.ΝεφρόΤα κύτταρα είναι σχετικά ευαίσθητα στο βιολογικό στρες. Υπό συνθήκες υποξίας, τα νεφρικά σωληναριακά κύτταρα αυξάνουν προληπτικά την ποσότητα της έκκρισης των εξωσωμάτων και αλλάζουν τη σύνθεση των εξωσωμάτων για να καλύψουν συγκεκριμένες βιολογικές ανάγκες. Η πρόσληψη EV από τα κύτταρα αποδέκτες είναι επίσης μια πολύ σημαντική βιολογική διαδικασία στη διακυτταρική επικοινωνία. Ο πιο κοινός μηχανισμός κυτταρικής πρόσληψης είναι η ενδοκυττάρωση όπου τα EVs καταπίνονται από τα κύτταρα-δέκτες. Η ισορροπία μεταξύ της απελευθέρωσης και της πρόσληψης EV εξαρτάται από τη φυσιολογική κατάσταση των κυττάρων γονέα/λήπτη, τον τύπο των κυττάρων γονέα/δέκτη και την αναγνώριση των προσδεμάτων/υποδοχέων στα EVs και τα κύτταρα λήπτες.

Φλεγμονή/ανοσοτροποποίηση 

Τα EVs είναι μια μινιατούρα εκδοχή των γονικών τους κυττάρων, επομένως η ανοσολογική τους λειτουργία εξαρτάται σημαντικά από την προέλευσή τους και το μικροπεριβάλλον που εκτίθενται τα μητρικά τους κύτταρα. Για παράδειγμα, τα EV από δενδριτικά κύτταρα μπορούν να λειτουργήσουν ως κυστίδια που παρουσιάζουν αντιγόνο μέσω της άμεσης παρουσίασης συμπλόκων μείζονος πεπτιδικής ιστοσυμβατότητας (MHC) σε Τ κύτταρα. Αυτά τα σύμπλοκα πεπτιδίου-MHC μπορούν να μεταφερθούν σε άλλα κύτταρα-δέκτες, παρουσιάζοντας έμμεσα αντιγόνα, και στη συνέχεια οδηγώντας σε διέγερση των ανοσοκυττάρων. Από την άλλη πλευρά, τα EVs που εκκρίνονται από καρκινικά κύτταρα μπορούν να μεσολαβήσουν σε μια ανοσοκατασταλτική απόκριση μετατρέποντας μονοκύτταρα και Τ κύτταρα σε ανεκτικούς υποτύπους, αναστέλλοντας τη διαφοροποίηση μονοκυττάρων ή επάγοντας την απόπτωση των παρευρισκομένων Τ κυττάρων, τον λεγόμενο κυτταρικό θάνατο που προκαλείται από την ενεργοποίηση . Η φυσιολογική κατάσταση των μητρικών κυττάρων επηρεάζει σημαντικά το περιεχόμενο των EVs. Για παράδειγμα, τα εξωσώματα που προέρχονται από υποξικά καρκινικά κύτταρα θα μπορούσαν να προκαλέσουν υψηλότερα επίπεδα διαφοροποίησης και την ενεργοποίηση κατασταλτικών κυττάρων που προέρχονται από μυελοειδή σε σύγκριση με τα εξωσώματα που προέρχονται από κύτταρα υπό νορμοξικές συνθήκες.

Αντιμικροβιακή δράση

Το ουροποιητικό σύστημα εκτίθεται συνεχώς σε μικροοργανισμούς από το εξωτερικό περιβάλλον, θέτοντας το σε υψηλό κίνδυνο ουρολοίμωξης. Ωστόσο, το μεγαλύτερο μέρος του ουροποιητικού συστήματος, εκτός από την ουρήθρα, παραμένει γενικά στείρο. Αυτή η αντίσταση στη μόλυνση προκαλείται από διάφορους παράγοντες. Παραδοσιακά, ανατομικοί φραγμοί, όπως η γλυκοπρωτεϊνική πλάκα και ένα στρώμα ενυδατωμένης βλέννας, καθώς και ανοσολογικοί φραγμοί από διάφορα μόνιμα κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος και την επένδυση των επιθηλιακών κυττάρων, θεωρήθηκαν ως κύριοι αμυντικοί μηχανισμοί του ξενιστή. Πρόσφατα, τα EVs βρέθηκαν να διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο κατά της λοίμωξης εντός του ουροποιητικού συστήματος. Μια πρωτεομική μελέτη έδειξε ότι οι εμπλουτισμένες έμφυτες πρωτεΐνες του ανοσοποιητικού, συμπεριλαμβανομένης της καλπροτεκτίνης και της λυσοζύμης C στα ουροποιητικά EVs θα μπορούσαν να έχουν αντιμικροβιακή δράση. Παρόλο που η αυτοφαγία είναι ένας καλά ανεπτυγμένος κυτταρικός αμυντικός μηχανισμός για την εκκαθάριση ξένων παθογόνων, ορισμένα βακτήρια έχουν αναπτύξει αμυντικούς μηχανισμούς για να ξεπεράσουν την αυτοφαγία εξουδετερώνοντας το λυσοσωμικό pH. Μια μελέτη των Miao et al. δείχνει ότι τα επιθηλιακά κύτταρα της ουροδόχου κύστης μπορούν να ξεπεράσουν αυτό το φαινόμενο μέσω των εξωσωμάτων-εκδιώχνοντας τα εγκλωβισμένα σε εξώσωμα βακτήρια από τον ενδοκυτταρικό χώρο.

Αναγέννηση/επισκευή νεφρού

Τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα (MSCs) είναι γνωστά για το αναγεννητικό και επανορθωτικό δυναμικό τους σε διάφορα όργανα, συμπεριλαμβανομένων τωννεφρά.Ωστόσο, η δυνατότητα επανόρθωσης των MSCs διαμεσολαβείται μέσω των EV και όχι της δυνατότητας διαφοροποίησης των ίδιων των MSC. Τα EV που προέρχονται από MSC περιέχουν διαφορετικούς τύπους αντιοξειδωτικών και αυξητικών παραγόντων για να διεγείρουν τη διαφοροποίηση των εγκατεστημένων προγονικών κυττάρων. Η παράδοση γενετικών υλικών όπως το DNA, τα miRNAs ή τα mRNA μέσω των EVs μπορεί επίσης να εισαγάγει την επανορθωτική δυνατότητα των γονικών MSCs στα κύτταρα λήπτες. Σε μια μελέτη των Ranghino et al., τα σπειραματικά προερχόμενα από MSC EVs μεσολάβησαν στην αναγέννηση των σωληναριακών επιθηλιακών κυττάρων και ανακούφισαν την ισχαιμική οξεία νεφρική βλάβη (AKI) μεταφέροντας mRNAs και miRNAs με πιθανά προαναγεννητικά αποτελέσματα.

Κάντε κλικ στο How To Take Cistanche

ΖΗΤΗΣΤΕ ΠΕΡΙΣΣΟΤΕΡΑ:david.deng@wecistanche.com

Αιμόσταση και συσσώρευση αιμοπεταλίων

Ένας άφθονος αριθμός δημοσιεύσεων έχει αναφέρει τις πηκτικές ιδιότητες των EVs πλάσματος σε ανθρώπους. Τα EVs που προέρχονται από αιμοπετάλια, ενδοθηλιακά κύτταρα ή λευκοκύτταρα βρέθηκαν να εμπλέκονται στην πορεία της αιμόστασης. Αυτά τα EV μπορούν να ξεκινήσουν τη διαδικασία πήξης εκθέτοντας φωσφατιδυλοσερίνη (PS) στις επιφάνειές τους για να επιτρέψουν θέσεις δέσμευσης για τους παράγοντες πήξης. Ένας άλλος μηχανισμός είναι μέσω της έκφρασης ιστικών παραγόντων στις επιφάνειές τους, ξεκινώντας την εξωτερική οδό της πήξης και οδηγώντας σε έκρηξη θρομβίνης και σχηματισμό θρόμβων αιμοπεταλίων. Μια μελέτη των Yu et al. έδειξε ότι οι ασθενείς μεδιαβητικό νεφρόΗ νόσος είχε σημαντικά υψηλότερο επίπεδο μικροκυστιδίων που εκφράζουν PS σε σύγκριση με τις ομάδες ελέγχου. Διαπίστωσαν επίσης ότι υψηλότερα επίπεδα θετικών στο PS μικροκυστιδίων συσχετίστηκαν με κατάσταση υπερπηκτικότητας καθώς και χειρότερη νεφρική λειτουργία. Παρόμοιο εύρημα παρουσιάστηκε σε ασθενείς με νεφροπάθεια ανοσοσφαιρίνης Α.

Πρόσφατα, αρκετές μελέτες επανεξέτασαν την ιδιότητα υπέρ της πήξης των EV λόγω των τεχνικών βελτιώσεων στη συλλογή αίματος, στην προετοιμασία του πλάσματος και στην απομόνωση EV. Είναι ενδιαφέρον ότι τα ηλεκτρικά οχήματα πλάσματος που απομονώνονται από υγιή άτομα προάγουν την ινωδόλυση πιο κυρίαρχα από την πήξη. Αυτή η απόκλιση υποδηλώνει έναν αμφίσημο ρόλο των EVs στις διαδικασίες αιμόστασης, ο οποίος εξαρτάται από το μικροπεριβάλλον. Επιπλέον, η κατάλληλη προετοιμασία δειγμάτων EV είναι σημαντική για την καλύτερη κατανόηση του ρόλου τους στο ανθρώπινο σώμα.

Ακεραιότητα αγγείου και επαναγγείωση

Τα EV που προέρχονται από ενδοθηλιακά κύτταρα βοηθούν στη διατήρηση της ακεραιότητας των αγγείων και προάγουν την επιβίωση των αγγειακών ενδοθηλιακών κυττάρων αφαιρώντας τα σήματα κυτταρικού θανάτου και απελευθερώνοντας περίσσεια συμπληρωμάτων από αγγειακά ενδοθηλιακά κύτταρα. Σε κατεστραμμένα αγγεία, τα EV που προέρχονται από αιμοπετάλια προκαλούν την προσκόλληση των ενδοθηλιακών κυττάρων στην εξωκυτταρική μήτρα, η οποία βοηθά στην αναγέννηση του ενδοθηλίου και μειώνει την αγγειακή διαπερατότητα.

Τα EV που προέρχονται από όγκο είναι γνωστά για τις αγγειογενετικές τους ιδιότητες, αλλά τα EVs μπορούν επίσης να προκαλέσουν αγγειογένεση υπό φυσιολογικές συνθήκες. Τα EV που προέρχονται από ενδοθηλιακά κύτταρα ρυθμίζουν την αγγειογένεση προάγοντας την εισβολή των ενδοθηλιακών κυττάρων και το σχηματισμό δομής παρόμοιας με τριχοειδές. Πρόσφατα, η μεταφορά ορισμένων miRNAs, συμπεριλαμβανομένου του miR-126 ή του miR-124, χρησιμοποιώντας EV που προέρχονται από ενδοθηλιακά κύτταρα και ενδοθηλιακά κύτταρα λήπτες έχει βρεθεί ότι έχει σημαντικό ρόλο στην αγγειογένεση. Τα EV που προκαλούνται από MSC προκαλούν επίσης αγγειογένεση μεταφέροντας πρωτεΐνες όπως φωσφορυλιωμένους μετατροπείς σήματος και ενεργοποιητές της μεταγραφής-3 ή πρωτεΐνες που σχετίζονται με το μονοπάτι του πυρηνικού παράγοντα kB, οδηγώντας στη μεταγραφή προαγγειογόνων πρωτεϊνών. Τα EV που προέρχονται από MSC μπορούν επίσης να μεταφέρουν αρκετούς αυξητικούς παράγοντες, συμπεριλαμβανομένου του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα και του αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα σε ενδοθηλιακά κύτταρα που προάγουν την αγγειογένεση. Περισσότερες λεπτομερείς πληροφορίες σχετικά με τον αγγειογενετικό μηχανισμό των EV από πολλαπλές κυτταρικές προελεύσεις μπορούν να βρεθούν σε ένα άρθρο ανασκόπησης των Todorova et al..

Ισορροπία ηλεκτρολυτών και νερού

Η επαναρρόφηση νατρίου/νερού είναι μια από τις κύριες λειτουργίες των νεφρικών σωληναριακών κυττάρων. Τα δύο τρίτα του διηθημένου νατρίου επαναρροφούνται στα εγγύς σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα και ρυθμίζοντας με ακρίβεια το νάτριο, η επαναρρόφηση λαμβάνει χώρα στο περιφερικό σωληνάριο και στους αγωγούς συλλογής. Επομένως, η διαδραστική επικοινωνία μεταξύ των εγγύς και των περιφερικών/συλλεκτικών σωληνοειδών κυττάρων είναι σημαντική για τη σωστή διατήρηση της ισορροπίας των ηλεκτρολυτών και τον έλεγχο του όγκου. Μια μελέτη από τους Jella et al. έδειξε ότι τα εξωσώματα από τα εγγύς σωληναριακά κύτταρα μπορούν να ρυθμίσουν τη δραστηριότητα του επιθηλιακού διαύλου νατρίου στο άπω σωληνάριο και τους αγωγούς συλλογής μέσω της εξωσωματικής παροχής αφυδρογονάσης γλυκεραλδεΰδης 3-φωσφορικής. Κατά την έκθεση στη βαζοπρεσίνη, τα σωληνοειδή κύτταρα του αγωγού συλλογής του φλοιού αυξάνουν την παραγωγή καναλιών νερού ακουαπορίνης μέσα τους καθώς και μέσα στα εξωσώματά τους. Αυτά τα εξωσώματα θα μπορούσαν να μεταφέρουν λειτουργικά κανάλια ακουαπορίνης σε άλλα σωληνοειδή κύτταρα, αυξάνοντας την ικανότητα μεταφοράς νερού τους. Με τη μεσολάβηση της ενδοκυτταρικής και ενδοκυτταρικής επικοινωνίας των νεφρικών επιθηλιακών κυττάρων μεταξύ των διαφορετικών τμημάτων του νεφρώνα, τα εξωσώματα παρέχουν σημαντικό ρόλο στην ισορροπία ηλεκτρολυτών και υγρών στο ανθρώπινο σώμα.

Τα εξωκυτταρικά κυστίδια ως μεσολαβητές της νεφρικής νόσου

Σε παθολογικές καταστάσεις, η παραγωγή των EVs αυξάνεται σημαντικά, συμβάλλοντας στην έναρξη και τη διάδοση της νόσου μέσω ανοσοτροποποίησης, θρομβογένεσης και ογκογένεσης. Ο λεπτομερής ρόλος των νεφρικών EVs σε διαφορετικές πορείες νόσου συζητείται παρακάτω (Εικ. 1Β).

Σπειραματική νόσος 

Σε προχωρημένη σπειραματική νόσο, η σωληναριακή βλάβη και η ίνωση είναι οι κύριοι μηχανισμοί της νεφρικής δυσλειτουργίας. Μια πρόσφατη μελέτη από τους Jeon et al. έδειξε ότι τα miRNAs σε EVs που απελευθερώνονται από τραυματισμένα ποδοκύτταρα μπορούν να προκαλέσουν απόπτωση των σωληναριακών επιθηλιακών κυττάρων, υποδηλώνοντας πιθανή διασταύρωση σπειραματοσωληναρίου. Αυτή η μελέτη έδειξε επίσης ότι το προφίλ miRNA στα EV από τραυματισμένα ποδοκύτταρα είναι διαφορετικό από αυτό των μη τραυματισμένων ποδοκυττάρων και οι μιμήσεις miRNA των τραυματισμένων ποδοκυττάρων θα μπορούσαν να αναπαράγουν μια προαποπτωτική επίδραση στα επιθηλιακά κύτταρα των νεφρικών σωληναρίων. Στη διαβητική νεφροπάθεια, η έκθεση σε υψηλά επίπεδα γλυκόζης μπορεί να προκαλέσει παραγωγή EV από τα ποδοκύτταρα. Τα σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα προσλαμβάνουν αυτά τα EV που προέρχονται από ποδοκύτταρα και δημιουργούν σωληναριακή ίνωση μέσω φωσφορυλίωσης p38.

Οξεία νεφρική βλάβη

Μια πρόσφατη μελέτη αλληλουχίας miRNA έδειξε ότι τα εξωσωματικά miRNA των ούρων έχουν χαρακτηριστικά προφίλ και λειτουργικές ιδιότητες που εξαρτώνται από το στάδιο AKI. Αρκετά εξω-miRNA (miR-16, miR-24 και miR-200c) αυξήθηκαν κατά τη διάρκεια της κατάστασης πρώιμου τραυματισμού και η έκφραση των mRNA-στόχων τους επηρεάστηκε σημαντικά στον νεφρικό μυελό . Κατά τη διάρκεια της πρώιμης φάσης ανάκαμψης, τα exo-miRNA που μοιράζονται το Zeb1/2 ως κοινό στόχο ρυθμίστηκαν σημαντικά προς τα πάνω, υποδηλώνοντας τον ρόλο τους στον μετασχηματισμό της νεφρικής ίνωσης που σχετίζεται με τον αυξητικό παράγοντα (TGF)- 1-. Σε τραυματισμό ισχαιμίας-επαναιμάτωσης, η υποξική βλάβη προκαλεί την αυξημένη παραγωγή EVs σε σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα που περιέχουν TGF- 1 mRNA. Η εξωσωματική παράδοση αυτών των TGF- 1 mRNA στους ινοβλάστες οδηγεί τελικά σε ενεργοποίηση και πολλαπλασιασμό ινοβλαστών. Από την άλλη πλευρά, οι Ranghino et al. έδειξε πρόσφατα ότι τα MSC εντός των σπειραμάτων μπορούν να συμβάλλουν στη μεταισχαιμική νεφρική ανάκαμψη κυρίως μέσω της απελευθέρωσης EVs.

Στο AKI που σχετίζεται με τη σήψη, τα EV που προέρχονται από αιμοπετάλια και τα ουδετερόφιλα επιδεικνύουν προφλεγμονώδη και προπηκτικά αποτελέσματα, τα οποία μπορούν να αποτρέψουν την ανάπτυξη βακτηρίων και τη διάδοσή τους. Ωστόσο, αυτά τα EVs μπορούν συστηματικά να προκαλέσουν οξειδωτικό στρες και να διαδώσουν φλεγμονώδεις αποκρίσεις, οδηγώντας σε χειρότερα κλινικά αποτελέσματα.

Σωληνοενδιάμεση φλεγμονή

Η σωληναρισιακή φλεγμονή είναι κοινό χαρακτηριστικό τόσο της οξείας όσο και τηςχρόνια νεφρική νόσος.Οι Lv et al. βρήκαν σημαντική αύξηση στο εξωσωματικό miRNA που προέρχεται από σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα-19b{-3p τόσο σε ένα μοντέλο AKI που προκαλείται από λιποπολυσακχαρίτες όσο και σε ένα χρόνιο επαγόμενο από αδριαμυκίνηπρωτεϊνουρικό νεφρόμοντέλο ασθένειας. Το εξωσωματικό miRNA-19b{-3p που προέρχεται από σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα προώθησε την ενεργοποίηση των μακροφάγων Μ1 και τη σωληναρισμοδιάμεση φλεγμονή. Αυτή η ομάδα έδειξε επίσης ότι η εξωσωματική παράδοση του CCL2 mRNA από τα σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα στα μακροφάγα θα μπορούσε να μεσολαβήσει σε προκαλούμενη από αλβουμίνη σωληναριδική φλεγμονή. Η υποξία είναι ένας άλλος πολύ γνωστός διεγέρτης της σωληναριδικής φλεγμονής στο νεφρό. Η υποξική διέγερση επάγει την έκφραση του επαγόμενου από την υποξία παράγοντα-1 σε σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα. Αυτό το ερέθισμα οδηγεί σε εξωσωματικό miRNA-23μια μεταφορά από τα σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα στα μακροφάγα, το οποίο πυροδοτεί την ενεργοποίηση των μακροφάγων και προάγει τη σωληναρισιακή φλεγμονή. Έτσι, η τροποποίηση της ενεργοποίησης των μακροφάγων με τον αποκλεισμό της παροχής εξωσωματικού miRNA ή mRNA από σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα μπορεί να είναι μια νέα θεραπευτική προσέγγιση.

Ίνωση

Η ίνωση σε σπειράματα και σωληνάρια είναι μια τελική παθολογική διαδικασίαχρόνιες νεφρικές παθήσειςκαι τελικό στάδιονεφρική νόσοκαι ο παθοφυσιολογικός ρόλος των EVs στην ίνωση έχει διερευνηθεί σε αρκετές μελέτες. Διάφορα ερεθίσματα στα νεφρικά κύτταρα, όπως η υποξία, το οξειδωτικό στρες ή η υψηλή γλυκόζη, μπορεί να οδηγήσουν σε έκκριση EV ή αλλαγές στη σύνθεση του EV. Τα EVs που εκκρίνονται από κατεστραμμένα νεφρικά κύτταρα μπορούν να μεταφερθούν σε άλλα φυσιολογικά νεφρικά κύτταρα, αλλάζοντας τον φαινότυπο τους και ενεργοποιώντας τους ινοβλάστες. Σε υποξικές καταστάσεις, τα κατεστραμμένα σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα μεταφέρουν το mRNA του TGF- 1 στους ινοβλάστες μέσω της έκκρισης των εξωσωμάτων, οδηγώντας τελικά στον πολλαπλασιασμό/ενεργοποίηση των ινοβλαστών και στην εξέλιξη της ίνωσης των νεφρικών σωληναριών. Μια in vitro μελέτη από τους Wu et al. έδειξε ότι τα EVs που εκκρίνονται από σπειραματικά ενδοθηλιακά κύτταρα που έχουν υποστεί αγωγή με υψηλή γλυκόζη μπορούν να πυροδοτήσουν τη μετάβαση του επιθηλίου-μεσεγχυματικού ποδοκυττάρου μεταφέροντας mRNA του TGF- 1 σε σπειραματικά μεσαγγειακά κύτταρα. Αυτή η διαδικασία επάγει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και την υπερπαραγωγή της εξωκυτταρικής μήτρας στα σπειράματα, που αποτελεί βασικό παθολογικό μηχανισμό της διαβητικής νεφροπάθειας. Αρκετά miRNA σε EVs, όπως τα miR-21, miR-192 και miR-34a, επηρεάζουν επίσης τις βιολογικές διεργασίες της σωληναριακής ίνωσης και της σπειραματικής ίνωσης, αντίστοιχα.

Νεφρολιθίαση

Δεδομένου του σημαντικού ρόλου των EV ως διαμεσολαβητών διαφόρωννεφρικές παθήσεις, αρκετές μελέτες έχουν υποθέσει ότι τα EVs έχουν ρόλο στον σχηματισμό λίθων. Για παράδειγμα, μια in vitro μελέτη από τους He et al. έδειξε ότι η έκθεση των νεφρικών σωληναριακών κυττάρων σε διαφορετικές συγκεντρώσεις οξαλικών θα μπορούσε να επηρεάσει το μέγεθος και τη σύνθεση των εξωσωμάτων από τα σωληναριακά κύτταρα. Αυτό το αποτέλεσμα υποδηλώνει ότι ο βιολογικός ρόλος των εξωσωμάτων μπορεί να εξαρτάται από το επίπεδο έκθεσης σε οξαλικά σε ένα δεδομένο μικροπεριβάλλον. Άλλες in vitro μελέτες από Singhto et al. έδειξε ότι τα εξωσώματα που προέρχονται από ανθρώπινα μακροφάγα που εκτέθηκαν σε κρυστάλλους οξαλικού ασβεστίου θα μπορούσαν να προκαλέσουν τη μετανάστευση/ενεργοποίηση μονοκυττάρων/Τ-κυττάρων/ουδετερόφιλων και να ενισχύσουν την παραγωγή προφλεγμονώδους ιντερλευκίνης κυτοκίνης-8. Αυτά τα εξωσώματα είχαν μεγαλύτερη ικανότητα να δεσμεύουν κρυστάλλους οξαλικού ασβεστίου και στη συνέχεια ενίσχυσαν την κρυσταλλική εισβολή μέσω της εξωκυτταρικής μήτρας, υποδηλώνοντας τον πιθανό ρόλο των εξωσωμάτων που προέρχονται από μακροφάγους στην κρυσταλλική εισβολή στο νεφρικό διάμεσο.

Καρκίνος νεφρού

Τα EVs μεσολαβούν στην διακυτταρική επικοινωνία μεταξύ των καρκινικών κυττάρων. Τα EV από καρκινικά κύτταρα περιέχουν προαγγειογενή mRNA και διάφορα miRNA με ιδιότητες διεισδυτικού όγκου. Τα EVs που προέρχονται από καθαρό νεφρικό καρκίνωμα μπορούν να επηρεάσουν αρνητικά τα γειτονικά ανοσοκύτταρα με την ενεργοποίηση της οδού σηματοδότησης TGF-/SMAD. Τα EVs είναι επίσης γνωστό ότι μεσολαβούν στη χημειοανθεκτικότητα σε καρκινικά κύτταρα νεφρού μέσω της παροχής μακροχρόνιου μη κωδικοποιητικού/ανταγωνιστικού ενδογενούς RNA, οδηγώντας τελικά σε υψηλότερη έκφραση των προμεταστατικών υποδοχέων. Περαιτέρω πληροφορίες σχετικά με τον ρόλο των EVs στις ουρολογικές κακοήθειες περιγράφονται καλά σε ένα άρθρο ανασκόπησης των Linxweiler και Junker.

Τα εξωκυτταρικά κυστίδια ως βιοδείκτες σε διάφορες νεφρικές παθήσεις

Οι περισσότερες από τις μελέτες EV σε παθήσεις των νεφρών έχουν επικεντρωθεί σε ανακαλύψεις βιοδεικτών. Τα EVs μπορούν να βρεθούν σε πολλαπλούς τύπους βιολογικών υγρών, όπως ορό, ούρα, μητρικό γάλα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, σάλιο, ασκίτη και βρογχοκυψελιδικό υγρό πλύσης. Υπό φυσιολογικές συνθήκες, σχεδόν όλα τα ουροποιητικά EVs προέρχονται από νεφρικά κύτταρα επειδή τα κυκλοφορούντα EVs γενικά δεν διέρχονται από τη σπειραματική βασική μεμβράνη. Ως εκ τούτου, η ειδική για το όργανο προέλευση των ούρων EVs αποτελεί το κύριο πλεονέκτημα της χρήσης των ουρικών EVs ως βιοδεικτών σενεφρικές παθήσεις. Επίσης, τα ουροποιητικά EVs μπορούν να ληφθούν μη επεμβατικά και επανειλημμένα, παρέχοντας σημαντικές πληροφορίες σχετικά με τη διάγνωση, την πρόγνωση και την ανταπόκριση στη θεραπεία.

Παρόλο που τα κυκλοφορούντα EV μπορεί να προέρχονται από διαφορετικά όργανα, ορό και πλάσμα, μπορούν να παρέχουν σημαντικές πληροφορίες σχετικά με την έκταση και την πρόγνωσηνεφρική νόσοεπειδή το κλινικό αποτέλεσμα καθορίζεται όχι μόνο από την ίδια τη νεφρική βλάβη αλλά και από τη δυσλειτουργία απομακρυσμένων οργάνων, συμπεριλαμβανομένων των πνευμόνων, της καρδιάς, του εγκεφάλου, του ήπατος και του ανοσοποιητικού συστήματος. Η ευκολότερη κλινική προσβασιμότητα είναι επίσης ένα τεράστιο όφελος από τη χρήση των κυκλοφορούντων ηλεκτρικών οχημάτων ως βιοδεικτών στη νεφρική νόσο.

Οι πρόσφατες εξελίξεις στις «ομικές» μελέτες έχουν επισπεύσει την ανακάλυψη νέων βιοδεικτών EV που επιτρέπουν την ανίχνευση παθολογικών διεργασιών ακόμη νωρίτερα από τους παραδοσιακούς βιοδείκτες. Οι Salih et al.συνέκριναν τα ουροποιητικά EVs απόαυτοσωμική επικρατούσα πολυκυστική νόσος των νεφρών (ADPKD)ασθενείς και υγιείς μάρτυρες που χρησιμοποιούν ποσοτική πρωτεϊνική. Μεταξύ των πρωτεϊνών με μεγαλύτερη αφθονία, πέντε πρωτεΐνες συμπεριλαμβανομένων των συμπληρωμάτων και των πλακινών επιλέχθηκαν για περαιτέρω ανάλυση με βάση τη σημασία τους στην ανάλυση οδού. Ειδικά, υψηλότερο επίπεδο συμπληρώματος στα ουρικά EVs βρέθηκε σε νεότερους ασθενείς με ADPKD με διατηρημένη νεφρική λειτουργία, αυξάνοντας τις δυνατότητές του ως βιοδείκτη. Λόγω του τεράστιου όγκου πληροφοριών από διάφορες μελέτες και του περιορισμένου χώρου, ο ρόλος των EV ως βιοδεικτών συνοψίζεται στον Πίνακα 2.

ADPKD, αυτοσωμική επικρατούσα πολυκυστική νόσος των νεφρών. AGS3, ένας ενεργοποιητής της σηματοδότησης της πρωτεΐνης G 3; AKI, οξεία νεφρική βλάβη. ATF3, ενεργοποιώντας τον μεταγραφικό παράγοντα 3. ΧΝΝ, χρόνια νεφρική νόσο; DN, διαβητική νεφροπάθεια; ΣΔ, σακχαρώδης διαβήτης; EV, εξωκυτταρικό κυστίδιο; FSGS, εστιακή τμηματική σπειραματοσκλήρωση; IgA, ανοσοσφαιρίνη Α; LN, νεφρίτιδα λύκου; lncRNA, μακρύ μη κωδικοποιητικό RNA. MCD, ασθένεια ελάχιστης αλλαγής. miRNA και miR, microRNA; mRNA, αγγελιαφόρο RNA; NGAL, λιποκαλίνη που σχετίζεται με ουδετεροφιλική ζελατινάση. PKD, πολυκυστική νεφρική νόσος; RCC, νεφρικό καρκίνωμα; RT-qPCR, αντίστροφη μεταγραφή-ποσοτική αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. RT-PCR, αντίστροφη μεταγραφή-αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. SH2D1B, πρωτεΐνη 1Β που περιέχει περιοχή SH2; TIMP, ιστικός αναστολέας της μεταλλοπρωτεϊνάσης. TNF-, παράγοντας νέκρωσης όγκου άλφα; WT-1, όγκος Wilms 1.

Τα εξωκυτταρικά κυστίδια ως θεραπευτικά σε διάφορες νεφρικές παθήσεις

Τα εξωκυτταρικά κυστίδια ως φορτίο θεραπευτικού υλικού Ο ρόλος των ηλεκτρικών οχημάτων ως φορείς έχουν λάβει μεγάλη προσοχή πρόσφατα. Τα EV έχουν πολλά βιολογικά οφέλη ως φορέας έναντι άλλων μεθόδων, συμπεριλαμβανομένης της σταθερότητας, του μικρού μεγέθους και της χαμηλής ανοσογονικότητας. Συγκεκριμένα μόρια κυτταρικής επιφάνειας στα EV αυξάνουν την ικανότητα στόχευσης με λιγότερα αποτελέσματα εκτός στόχου. Τα νανοηλεκτρικά ηλεκτρικά οχήματα με ορισμένα επιφανειακά μόρια μπορούν ακόμη και να διαπεράσουν φυσικά εμπόδια όπως ο αιματοεγκεφαλικός φραγμός. Επίσης, τα EV χρησιμοποιούν τους εγγενείς μηχανισμούς των κυττάρων-δεκτών κατά τη διάρκεια της εσωτερίκευσης και της ενδοκυτταρικής διακίνησης. Η παράδοση βιομοριακού φορτίου όπως το mRNA, το miRNA και οι πρωτεΐνες μπορεί να τροποποιήσει το γενετικό προφίλ και τη βιολογική απόκριση των κυττάρων-δεκτών, οδηγώντας στη διαμόρφωση των διαδικασιών της νόσου.

Η φόρτωση EV παραδοσιακών φαρμάκων με αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες έχει μελετηθεί για θεραπευτική εφαρμογή. Η δεξαμεθαζόνη, για παράδειγμα, χρησιμοποιείται ευρέως για την καταστολή της φλεγμονής σε διάφορανεφρικές παθήσεις, αλλά η κλινική του χρήση είναι περιορισμένη λόγω σημαντικών ανεπιθύμητων ενεργειών. Με την επώαση των μακροφάγων με δεξαμεθαζόνη, παρήχθη επιτυχώς EV που περιείχε δεξαμεθαζόνη προερχόμενη από μακροφάγους και παραδόθηκε στους φλεγμονώδεις νεφρούς ποντικών, τα οποία έδειξαν σημαντική καταστολή της νεφρικής φλεγμονής και ίνωσης. Συγκεκριμένα, τα EVs που περιέχουν δεξαμεθαζόνη μείωσαν σημαντικά τις ανεπιθύμητες ενέργειες της συστηματικής θεραπείας με στεροειδή, όπως η υπεργλυκαιμία και η καταστολή του άξονα υποθαλάμου-υπόφυσης-επινεφριδίων.

Κατά την τελευταία δεκαετία, υπήρξε μια εκρηκτική πρόοδος στην έρευνα EV. Η διεπιστημονική συνεργασία μεταξύ ιατρικής και βιοϊατρικής μηχανικής έχει αξιοποιήσει τα EVs ως ισχυρά εργαλεία διανομής φαρμάκων μέσω της εφαρμογής της νανοτεχνολογίας. Αρκετές μελέτες έχουν φορτώσει με επιτυχία γενετικό υλικό σε ηλεκτρικά οχήματα και έχουν δείξει αποτελέσματα στην τροποποίηση της πορείας της νόσου. Οι Yim et al. πρόσφατα ανέπτυξαν μια νέα τεχνική για την αποτελεσματική ενδοκυτταρική μεταφορά διαλυτών πρωτεϊνών μέσω εξωσωμάτων χρησιμοποιώντας οπτογενετική μηχανική. Αυτή η τεχνολογία υιοθετήθηκε σε ένα πειραματικό μοντέλο σήψης, δείχνοντας την προστατευτική επίδραση του εξωσωματικού υπερκατασταλτικού αναστολέα της χορήγησης κάπα Β (ΙκΒ) σε ένα σηπτικό μοντέλο AKI ποντικού. Πρόσφατα, η ομάδα μας απέδειξε επίσης την ευεργετική επίδραση της χορήγησης εξωσωματικού υπερκατασταλτή IκB σε ένα μοντέλο ισχαιμικής AKI (υπό εξέταση).

Εξωκυτταρικά κυστίδια για αποκατάσταση νεφρών

Η θεραπεία με βλαστοκύτταρα έχει μεγάλα οφέλη σε πολλαπλά πειραματικάνεφρική βλάβημοντέλα, όχι μέσω της δυνατότητας διαφοροποίησής τους αλλά μέσω των παρακρινών επιδράσεων των ηλεκτρικών τους οχημάτων. Τα EVs που εκκρίνονται από MSCs ή ενδοθηλιακά προγονικά κύτταρα έχει αποδειχθεί ότι παίζουν σημαντικό ρόλο στη βελτίωση της απόπτωσης/ίνωσης των σωληναριακών κυττάρων και στον πολλαπλασιασμό των σωληναριακών και ενδοθηλιακών κυττάρων σε διάφορα μοντέλα AKI. Αυτή η ευεργετική επίδραση βρέθηκε επίσης σε πειραματικά μοντέλα χρόνιας νεφρικής νόσου, βελτιώνοντας τη μετάβαση από το επιθηλιακό σε μεσεγχυματικό και αποτρέποντας τη διήθηση των φλεγμονωδών κυττάρων. Τα MSC που κατασκευάστηκαν για να υπερεκφράζουν το miRNA-let7c θα μπορούσαν επιλεκτικά να παραδώσουν το miRNA-let7c σεκατεστραμμένο νεφρόκύτταρα που χρησιμοποιούν εξωσώματα, τα οποία οδήγησαν σε προστασία από νεφρική βλάβη και μειωμένη ίνωση σε ένα μοντέλο μονόπλευρης απόφραξης ουρητήρα. Οι Nagaishi et al. έδειξαν ότι οι νεφρικοί τροφικοί παράγοντες που προέρχονται από MSC, συμπεριλαμβανομένων των εξωσωμάτων, θα μπορούσαν να ανακουφίσουν τη λευκωματουρία και τη διήθηση των ανοσοκυττάρων στους νεφρούς σε ένα μοντέλο διαβητικής νεφροπάθειας. Τα εξωσώματα που προέρχονται από MSC έδειξαν αντιαποπτωτικό αποτέλεσμα και προστάτευαν τη δομή σφιχτής σύνδεσης σε σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα. Οι ενδοφλέβιες ενέσεις εξωσωμάτων που προέρχονται από βλαστικά κύτταρα ούρων θα μπορούσαν επίσης να μειώσουν την απέκκριση μικρολευκωματίνης στα ούρα και να αποτρέψουν την απόπτωση των ποδοκυττάρων/σωληναρίων επιθηλιακών κυττάρων σε διαβητικούς αρουραίους.

Εκτός από τα MSCs, τα EV από άλλη προέλευση έχουν επιδείξει επαναπροστατευτική δράση σε ζώανεφρική βλάβημοντέλα. Τα εξωσώματα που προέρχονται από ορούς ζώων μετά από απομακρυσμένη ισχαιμική προετοιμασία θα μπορούσαν να μετριάσουν τη νεφρική βλάβη που προκαλείται από σήψη, και αυτό μεσολαβήθηκε από την ανοδική ρύθμιση του εξωσωματικού miRNA-21. Οι Dominguez et al. έδειξαν ότι η ενδοφλέβια χορήγηση EVs από νεφρικά σωληναριακά κύτταρα αρουραίου θα μπορούσε να μειώσει σημαντικά τη νεφρική βλάβη σε λήπτες μετά από ισχαιμική προσβολή. Αυτή η ομάδα έδειξε επίσης ότι τα ανθρώπινα νεφρικά εξωσώματα μπορούν να αποτρέψουν την ισχαιμική νεφρική βλάβη σε γυμνούς αρουραίους. Ωστόσο, οι κλινικές ενδείξεις της νενοπροστατευτικής δράσης της θεραπείας με EV στους ανθρώπους είναι σχετικά σπάνιες. Αρκετά προβλήματα περιορίζουν τη θεραπευτική εφαρμογή των EVs στον άνθρωπο. η χαμηλή απόδοση EV από καλλιεργημένα κύτταρα και η πρόωρη απομόνωση/καθαρισμός EV με κίνδυνο μόλυνσης από άλλα μόρια παρόμοιας πυκνότητας. Αν και αρκετές μελέτες έχουν δείξει πολλά υποσχόμενες προόδους στην απομόνωση και τον καθαρισμό EV, οι οποίες εξετάζονται αλλού, απαιτούνται περαιτέρω προσπάθειες για τη βελτίωση της αποτελεσματικότητας και της καθαρότητας της απομόνωσης. Επίσης, απαιτείται παραγωγή μεγάλης κλίμακας για τη θεραπευτική εφαρμογή των EVs στον άνθρωπο. Οι Yang et al. χρησιμοποίησε πρόσφατα μια μέθοδο κυτταρικής νανο-διάτρησης για την παραγωγή εξωσωμάτων μεγάλης κλίμακας που περιέχουν θεραπευτικά mRNA και πεπτίδια στόχευσης. Χρησιμοποιώντας αυτή τη στρατηγική, θα μπορούσαν να παράγουν σημαντικά υψηλότερο αριθμό εξωσωμάτων και εξωσωματικών μεταγραφών mRNA σε σύγκριση με τη μαζική ηλεκτροδιάτρηση και άλλες στρατηγικές παραγωγής εξωσωμάτων. Τέλος, απαιτούνται προηγμένες τεχνικές στη λεπτή διαμόρφωση του περιεχομένου EV χρησιμοποιώντας επιμόλυνση ή μηχανική κυττάρων για την παράδοση συγκεκριμένων μεταγραφών ή πρωτεϊνικής σύνθεσης στα κύτταρα-στόχους. Αυτό θα οδηγήσει σε καλύτερη κατανόηση του βιολογικού ρόλου συγκεκριμένων ηλεκτρικών οχημάτωννεφρική νόσομοντέλα και θα διευρύνει τη θεραπευτική εφαρμογή των EV σε διάφορανεφρικές παθήσεις.

Τα εξωκυτταρικά κυστίδια ως πιθανοί θεραπευτικοί στόχοι

Όπως έχουμε αναφέρει, τα EVs μπορούν να μεσολαβήσουν στη διάδοση της νεφρικής βλάβης σε σηπτικές, φλεγμονώδεις ή θρομβογόνες καταστάσεις. Επομένως, η προσωρινή παρεμπόδιση της απελευθέρωσης και της πρόσληψης των EVs μπορεί να ανακουφίσει τη βλάβη των ιστών. Διάφοροι φαρμακολογικοί παράγοντες, συμπεριλαμβανομένων αντιαιμοπεταλιακών παραγόντων, στατινών, αναστολέων διαύλων ασβεστίου και abciximab βρέθηκε ότι επηρεάζουν αρνητικά τη διαδικασία απελευθέρωσης και πρόσληψης EV, η οποία εξετάζεται αλλού. Ωστόσο, εάν η παρεμπόδιση της απελευθέρωσης και της πρόσληψης των EVs μπορεί να επηρεάσει άμεσα την πορεία της νόσου δεν έχει διερευνηθεί πλήρως. Μια μελέτη των Mossberg et al. έδειξε ότι ο αναστολέας C1-μπορεί να μειώσει σημαντικά την απελευθέρωση χημειοτακτικής κινίνης Β1-θετικών στον υποδοχέα ενδοθηλιακών μικροκυστιδίων, υποδηλώνοντας ότι έχει θεραπευτικό δυναμικό σε φλεγμονώδεις ασθένειες. Απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για την κατανόηση της κλινικής εφαρμογής του ελέγχου της αλληλεπίδρασης EV με τα κύτταρα λήπτες σε συστηματικές φλεγμονώδεις καταστάσεις.

Συμπεράσματα και προοπτικές

Τα EV εμπλέκονται σε επικοινωνίες από κύτταρο σε κύτταρονεφρά,διαμεσολαβητική διασταύρωση ποδοκυττάρου-σωληναριοενδιάμεσης/εγγύς-απώτερης σωληναριακής/σπειραμάτων-σωληναρίου. Τα EVs μπορούν είτε να παρέχουν φυσιολογικούς ρόλους στην νεφρική επισκευή και ανοσοτροποποίηση είτε να μεσολαβούν σε παθολογικές διεργασίες που προκαλούν θρόμβωση και φλεγμονή. Πρόσφατες μελέτες έχουν βελτιώσει σημαντικά την κατανόησή μας για τους ρόλους των ηλεκτρικών οχημάτωννεφρόφυσιολογία και παθολογία. Ωστόσο, τα περισσότερα από τα αποτελέσματα περιορίζονται στην περιγραφική μεταγραφική/πρωτεομική ανάλυση και στερούνται συνέπειας καθώς και αξιοπιστίας. Απαιτείται αυστηρή επικύρωση μέσω κλινικών δοκιμών και μελετών κοόρτης μεγάλης κλίμακας πριν από την έναρξη της κλινικής εφαρμογής. Περαιτέρω βελτιστοποίηση των τεχνικών απομόνωσης EV και σχολαστικός χειρισμός των γενετικών υλικών ή των πρωτεϊνικών συνθέσεων των EV είναι επίσης απαραίτητη για κλινική εξέταση. Αυτές οι προσπάθειες θα επεκτείνουν τις γνώσεις μας για το ρόλο των EVs στην ανάπτυξη/πρόοδο νεφρικών παθήσεων και θα διευρύνουν την κλινική εφαρμογή των EVs ως νέα διαγνωστικά και θεραπευτικάνεφρικές παθήσεις.

Συγκρούσεις συμφερόντων

Ο Tae-Hyun Yoo είναι μέλος της Επιστημονικής Συμβουλευτικής Επιτροπής της ILIAS Biologics Inc. και ο αρχισυντάκτης τουΈρευνα νεφρώνκαι Κλινική Πρακτική. Ο Chulhee Choi είναι ο ιδρυτής και μέτοχος της ILIAS Biologics Inc. Οι συγγραφείς δεν έχουν επιπλέον οικονομικά συμφέροντα.

Χρηματοδότηση

Αυτή η εργασία υποστηρίχθηκε από επιχορηγήσεις από το Εθνικό Ίδρυμα Ερευνών της Κορέας (NRF-2017R1A2B4005720, NRF-2017R1A2B3002241, NRF-2018M3A9E2022820, NRF-2019R1A2C208453), το οποίο χρηματοδοτείται από την κυβέρνηση της Κορέας (MSIP).

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς ευχαριστούν επίσης το Medical Illustration & Design, μέρος των Υπηρεσιών Υποστήριξης Ιατρικής Έρευνας του Ιατρικού Κολλεγίου του Πανεπιστημίου Yonsei, για όλη την καλλιτεχνική υποστήριξη που σχετίζεται με αυτό το έργο.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Karpman D, Ståhl AL, Arvidsson Ι. Εξωκυτταρικά κυστίδια σε νεφρική νόσο. Nat Rev Nephrol 2017, 13:545–562.

2. Todorova D, Simoncini S, Lacroix R, Sabatier F, Dignat-George F. Extracellular vesicles in angiogenesis. Circ Res 2017; 120:1658– 1673.

3. Lipschutz JH. Ο ρόλος της εξωκύστης στη νεφρική κυλινδρογένεση, κυστογένεση, σωληνογένεση και ανάπτυξη. Kidney Res Clin Pract 2019; 38:260–266.

4. Linxweiler J, Junker K. Extracellular vesicles in urological malignancies: an update. Nat Rev Urol 2020; 17:11–27.

5. Jing H, Tang S, Lin S, Liao M, Chen H, Zhou J. Ο ρόλος των εξωκυτταρικών κυστιδίων στην νεφρική ίνωση. Cell Death Dis 2019; 10:367.

6. Kwon SH. Εξωκυτταρικά κυστίδια στη νεφρική φυσιολογία και κλινικές εφαρμογές για νεφρική νόσο. Korean J Intern Med 2019; 34:470– 479.

7. Takahashi Α, Okada R, Nagao Κ, et al. Τα εξωσώματα διατηρούν την κυτταρική ομοιόσταση αποβάλλοντας επιβλαβές DNA από τα κύτταρα. Nat Commun 2017; 8:15287.

8. Borges FT, Melo SA, Özdemir BC, et al. Το TGF- 1-που περιέχει εξωσώματα από τραυματισμένα επιθηλιακά κύτταρα ενεργοποιεί τους ινοβλάστες για να ξεκινήσουν αναγεννητικές αποκρίσεις ιστού και ίνωση. J Am Soc Nephrol 2013; 24:385–392.

9. Yáñez-Mó M, Siljander PR, Andreu Z, et al. Βιολογικές ιδιότητες εξωκυτταρικών κυστιδίων και φυσιολογικές λειτουργίες τους. J Extracell Vesicles 2015; 4:27066.

10. Ståhl AL, Johansson K, Mossberg M, Kahn R, Karpman D. Εξωσώματα και μικροκυστίδια σε φυσιολογική φυσιολογία, παθοφυσιολογία και νεφρικές παθήσεις. Pediatr Nephrol 2019; 34:11–30.

11. Segura Ε, Nicco C, Lombard Β, et αϊ. Το ICAM-1 σε εξωσώματα από ώριμα δενδριτικά κύτταρα είναι ζωτικής σημασίας για την αποτελεσματική εκκίνηση των απλών Τ-κυττάρων. Blood 2005; 106:216-223.

12. Clayton A, Mitchell JP, Court J, Mason MD, Tabi Z. Εξωσώματα που προέρχονται από ανθρώπινο θύμα επηρεάζουν επιλεκτικά τις αποκρίσεις των λεμφοκυττάρων στην ιντερλευκίνη-2. Cancer Res 2007; 67:7458-7466.

13. Guo X, Qiu W, Liu Q, et αϊ. Ανοσοκατασταλτικά αποτελέσματα εξωσωμάτων γλοιώματος που προκαλούνται από υποξία μέσω κατασταλτικών κυττάρων που προέρχονται από μυελοειδή μέσω των οδών miR-10a/Rora και miR-21/Pten. Γονίδιο Onco 2018; 37:4239-4259.

14. Wu XR, Kong XP, Pellicer A, Kreibich G, Sun TT. Ουροπλακίνες στη βιολογία, λειτουργία και νόσο του ουροθηλίου. Kidney Int 2009;75:1153–1165.

15. Hiemstra TF, Charles PD, Gracia T, et al. Ανθρώπινα εξωσώματα ούρων ως έμφυτοι ανοσοενεργοί. J Am Soc Nephrol 2014; 25:2017–2027.

16. Miao Y, Li G, Zhang X, Xu H, Abraham SN. Ένα κανάλι TRP ανιχνεύει την εξουδετέρωση του λυσοσώματος από παθογόνα για να προκαλέσει την αποβολή τους. Cell 2015; 161:1306-1319.

17. Bochon B, Kozubska M, Surygała G, et al. Μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα-δυνητικές εφαρμογές σε νεφρικές παθήσεις. Int J Mol Sci 2019; 20:2462.

18. Ranghino Α, Bruno S, Bussolati Β, et αϊ. Οι επιδράσεις των σπειραματικών και σωληναριακών νεφρικών προγόνων και των παράγωγων εξωκυτταρικών κυστιδίων στην ανάρρωση από οξεία νεφρική βλάβη. Stem Cell Res Ther 2017; 8:24.

19. Gheldof D, Haguet Η, Dogné JM, et al. Προπηκτική δράση εξωκυτταρικών κυστιδίων ως δυνητικός βιοδείκτης κινδύνου θρόμβωσης και DIC σε ασθενείς με οξεία λευχαιμία. J Thromb Thrombolysis 2017; 43:224-232.

20. Ammollo CT, Semeraro F, Milella RA, Antonacci D, Semeraro N, Colucci M. Η πρόσληψη σταφυλιού μειώνει τη δημιουργία θρομβίνης και ενισχύει την ινωδόλυση του πλάσματος. Πιθανός ρόλος των κυκλοφορούντων προ-ρυθμιστικών μικροσωματιδίων. J Nutr Biochem 2017; 50:66–73.

21. Skotland T, Hessvik NP, Sandvig K, Llorente A. Exosomal lipid complex and the role of ether lipids and phosphoinositides in exosome biology. J Lipid Res 2019; 60:9–18.

22. Del Conde I, Shrimpton CN, Thiagarajan P, López JA. Τα μικροκυστίδια που φέρουν tor-fac ιστού προκύπτουν από λιπιδικές σχεδίες και συντήκονται με ενεργοποιημένα αιμοπετάλια για να ξεκινήσουν την πήξη. Blood 2005; 106:1604- 1611.

23. Yu M, Xie R, Zhang Y, et αϊ. Η φωσφατιδυλοσερίνη στα μικροσωματίδια και τα σχετικά κύτταρα συμβάλλει στην υπερπηκτικότητα της διαβητικής νεφρικής νόσου. Nephrol Dial Transplant 2018; 33:2115– 2127.

24. He Ζ, Zhang Υ, Cao Μ, et αϊ. Αυξημένα μικροσωματίδια που προέρχονται από φωσφατιδυλοσερίνη και τα προερχόμενα κύτταρα τους σχετίζονται με τη διαδικασία πήξης σε ασθενείς με νεφροπάθεια IgA. Nephrol Dial Transplant 2016; 31:747–759.

25. Berckmans RJ, Lacroix R, Hau CM, Sturk A, Nieuwland R. Εξωκυτταρικά κυστίδια και πήξη στο αίμα από υγιείς ανθρώπους που επισκέφθηκαν ξανά. J Extracell Vesicles 2019; 8:1688936.

26. Abid Hussein MN, Böing AN, Sturk A, Hau CM, Nieuwland R. Η αναστολή της απελευθέρωσης μικροσωματιδίων πυροδοτεί την απόπτωση και την αποκόλληση των ενδοθηλιακών κυττάρων. Thromb Haemost 2007;98:1096-1107.

27. Miyazawa B, Trivedi A, Togarrati PP, et al. Ρύθμιση της διαπερατότητας των ενδοθηλιακών κυττάρων από εξωκυτταρικά κυστίδια που προέρχονται από αιμοπετάλια. J Trauma Acute Care Surg 2019;86:931–942.

28. Taraboletti G, D'Ascenzo S, Borsotti P, Giavazzi R, Pavan A, Dolo V. Απόρριψη των μεταλλοπρωτεϊνασών μήτρας MMP-2, MMP-9 και MT1-MMP ως συστατικά που σχετίζονται με κυστίδια μεμβράνης από ενδοθηλιακά κύτταρα. Am J Pathol 2002; 160:673–680.

29. Lombardo G, Dentelli P, Togliatto G, et al. Η ενεργοποιημένη διακίνηση STAT5 μέσω εξωκυτταρικών κυστιδίων που προέρχονται από ενδοθηλιακά κύτταρα ελέγχει την προ-αγγειογενετική παρακρινική δράση της IL-3. Sci Rep 2016; 6:25689.

30. van Balkom BW, de Jong OG, Smits M, et al. Τα ενδοθηλιακά κύτταρα απαιτούν miR-214 για να εκκρίνουν εξωσώματα που καταστέλλουν τη γήρανση και επάγουν αγγειογένεση σε ενδοθηλιακά κύτταρα ανθρώπου και ποντικού. Blood 2013; 121:3997-4006.

31. Anderson JD, Johansson HJ, Graham CS, et al. Η ολοκληρωμένη πρωτεομική ανάλυση εξωσωμάτων μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων αποκαλύπτει τη ρύθμιση της αγγειογένεσης μέσω σηματοδότησης πυρηνικού παράγοντα-kappaB. Stem Cells 2016; 34:601-613.

32. Shabbir A, Cox A, Rodriguez-Menocal L, Salgado M, Van Badiavas E. Τα εξωσώματα μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων προκαλούν πολλαπλασιασμό και μετανάστευση ινοβλαστών φυσιολογικών και χρόνιων τραυμάτων και ενισχύουν την αγγειογένεση in vitro. Stem Cells Dev 2015;24:1635–1647.

33. Jella KK, Yu L, Yue Q, Friedman D, Duke BJ, Alli AA. Η εξωσωματική GAPDH από κύτταρα εγγύς σωληναρίου ρυθμίζει τη δραστηριότητα του ENaC. PLoS One 2016; 11:e0165763.

34. Street JM, Birkhoff W, Menzies RI, Webb DJ, Bailey MA, Dear JW. Εξωσωματική μετάδοση της λειτουργικής ακουαπορίνης 2 σε κύτταρα συλλεκτικού πόρου του φλοιού των νεφρών. J Physiol 2011;589:6119–6127.

35. Jeon JS, Kim E, Bae YU, et αϊ. Το microRNA σε εξωκυτταρικά κυστίδια που απελευθερώνονται από κατεστραμμένα ποδοκύτταρα προάγουν την απόπτωση των νεφρικών σωληναριακών επιθηλιακών κυττάρων. Cells 2020; 9:1409.

36. Munkonda ΜΝ, Akbari S, Landry C, et αϊ. Τα μικροσωματίδια που προέρχονται από ποδοκύτταρα προάγουν την ινωτική σηματοδότηση του εγγύς σωληναρίου μέσω του p38 MAPK και του CD36. J Extracell Vesicles 2018; 7:1432206.

37. Sonoda Η, Lee BR, Park KH, et αϊ. Προφίλ miRNA των εξωσωμάτων ούρων για την αξιολόγηση της εξέλιξης της οξείας νεφρικής βλάβης. Sci Rep 2019; 9:4692.

38. Mortaza S, Martinez MC, Baron-Menguy C, et al. Επιβλαβείς αιμοδυναμικές και φλεγμονώδεις επιδράσεις μικροσωματιδίων που προέρχονται από σηπτικούς αρουραίους. Crit Care Med 2009; 37:2045–2050.

39. Lv LL, Feng Y, Wu Μ, et αϊ. Το εξωσωματικό miRNA-19b-3p των σωληναριακών επιθηλιακών κυττάρων προάγει την ενεργοποίηση των μακροφάγων Μ1 σε νεφρική βλάβη. Cell Death Differ 2020; 27:210–226.

40. Lv LL, Feng Υ, Wen Υ, et αϊ. Το εξωσωματικό CCL2 από σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα είναι κρίσιμο για την επαγόμενη από αλβουμίνη σωληναρισμενική φλεγμονή. J Am Soc Nephrol 2018; 29:919–935.

41. Li ZL, Lv LL, Tang ΤΤ, et αϊ. HIF-1 που προκαλεί εξωσωματική microR NA-23μια έκφραση μεσολαβεί στη διασταυρούμενη συζήτηση μεταξύ των σωληναριακών επιθηλιακών κυττάρων και των μακροφάγων στη σωληναρισιακή φλεγμονή. Kidney Int 2019;95:388–404.

42. Wu XM, Gao YB, Cui FQ, Zhang N. Εξωσώματα από σπειραματικά ενδοθηλιακά κύτταρα που έχουν υποστεί αγωγή με υψηλό glu cose ενεργοποιούν τα μεσαγγειακά κύτταρα για την προώθηση της νεφρικής ίνωσης. Biol Open 2016; 5:484–491. 43. Zhou Υ, Xiong Μ, Fang L, et αϊ. Το miR-21-που περιέχει μικροκυστίδια από τραυματισμένα σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα προάγει τη μετάβαση του σωληναριακού φαινοτύπου στοχεύοντας την πρωτεΐνη PTEN. Am J Pathol 2013; 183:1183– 1196.

44. Jia Y, Zheng Z, Guan Μ, et αϊ. Η εξενδίνη-4 βελτιώνει την ίνωση που προκαλείται από υψηλή glucose αναστέλλοντας την έκκριση miR-192 από τραυματισμένα νεφρικά σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα. Exp Mol Med 2018, 50:1–13.

45. Zhang L, He S, Guo S, et al. Η καθοδική ρύθμιση του miR-34a ανακουφίζει τον μεσαγγειακό πολλαπλασιασμό in vitro και τη σπειραματική υπερτροφία σε πρώιμους ποντικούς με διαβητική νεφροπάθεια στοχεύοντας το GAS1. J Diabetes Complications 2014;28:259–264.

46. ​​He Z, Guan X, Liu Y, et al. Αλλαγή των εξωσωμάτων που εκκρίνονται από νεφρικά σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα που εκτίθενται σε οξαλικό άλας υψηλής συγκέντρωσης. Oncotarget 2017; 8:92635–92642.

47. Singhto N, Kanlaya R, Nilnumkhum A, Thongboonkerd V. Ρόλοι των εξωσωμάτων μακροφάγων στην ανοσοαπόκριση σε κρυστάλλους μονοένυδρου οξαλικού ασβεστίου. Front Immunol 2018; 9:316.

48. Singhto N, Thongboonkerd V. Εξωσώματα που προέρχονται από μακροφάγα που εκτίθενται σε οξαλικό ασβέστιο ενισχύουν την παραγωγή IL-8 από νεφρικά κύτταρα, τη μετανάστευση ουδετερόφιλων και την εισβολή κρυστάλλων μέσω της εξωκυτταρικής μήτρας. J Proteomics 2018; 185:64–76.

49. Grange C, Tapparo Μ, Collino F, et αϊ. Τα μικροκυστίδια που απελευθερώνονται από ανθρώπινα βλαστοκύτταρα καρκίνου του νεφρού διεγείρουν την αγγειογένεση και το σχηματισμό της προμεταστατικής θέσης του πνεύμονα. Cancer Res 2011; 71:5346-5356.

50. Xia Y, Zhang Q, Zhen Q, et αϊ. Αρνητική ρύθμιση των κυττάρων ΝΚ που διεισδύουν σε όγκο σε ασθενείς με καρκίνωμα νεφρικών κυττάρων διαφανών κυττάρων μέσω της εξωσωματικής οδού. Oncotarget 2017; 8:37783–37795.

51. Qu L, Ding J, Chen C, et αϊ. Το lncARSR που μεταδίδεται από το εξώσωμα προάγει την αντίσταση στο sunitinib στον καρκίνο του νεφρού δρώντας ως ανταγωνιστικό ενδογενές RNA. Cancer Cell 2016; 29:653-668.

52. Lee SA, Cozzi M, Bush EL, Rabb H. Δυσλειτουργία απομακρυσμένων οργάνων σε οξεία νεφρική βλάβη: ανασκόπηση. Am J Kidney Dis 2018; 72:846–856.

53. Salih Μ, Demmers JA, Bezstarosti Κ, et al. Η πρωτεομική των κυστιδίων ούρων συνδέει τις πλακίνες και το συμπλήρωμα με την πολυκυστική νόσο των νεφρών. J Am Soc Nephrol 2016; 27:3079–3092.

54. du Cheyron D, Daubin C, Poggioli J, et al. Ουρική μέτρηση της πρωτεΐνης ισομορφής 3 (NHE3) του Na plus /H plus ως ένας νέος δείκτης τραυματισμού των σωληναρίων σε βαρέως πάσχοντες ασθενείς με ARF. Am J Kidney Dis 2003; 42:497–506.

55. Zhou Η, Pisitkun Τ, Aponte Α, et αϊ. Εξωσωματικό Fetuin-A που προσδιορίζεται από την proteomics: ένας νέος βιοδείκτης ούρων για την ανίχνευση οξείας νεφρικής βλάβης. Kidney Int 2006;70:1847–1857.

56. Zhou Η, Cheruvanky Α, Hu X, et αϊ. Εξωσωματικοί παράγοντες μεταγραφής ούρων, μια νέα κατηγορία βιοδεικτών για νεφρική νόσο. Kidney Int 2008;74:613–621.

57. Panich T, Chancharoenthana W, Somparn P, Issara-Amphorn J, Hirankarn N, Leelahavanichkul A. Ουρικός εξωσωματικός ενεργοποιητικός μεταγραφικός παράγοντας 3 ως ο πρώιμος διαγνωστικός βιοδείκτης για οξεία νεφρική βλάβη που προκαλείται από σήψη. BMC Nephrol 2017, 18:10.

58. Li W, Yang S, Qiao R, Zhang J. Η δυνητική τιμή του ουρικού εξωσώματος που προέρχεται από το-7c-5p στη διάγνωση και την εξέλιξη της διαβητικής νεφροπάθειας τύπου II. Clin Lab 2018; 64:709–718.

59. Yamamoto CM, Murakami Τ, Oakes ML, et αϊ. Το mRNA της ουρομοντουλίνης από τα εξωκυτταρικά κυστίδια των ούρων συσχετίζεται με την πτώση της νεφρικής λειτουργίας στον σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2. Am J Nephrol 2018; 47:283–291.

60. Prabu P, Rome S, Sathishkumar C, et al. Τα MicroRNA από εξωκυτταρικά κυστίδια ούρων είναι μη επεμβατικοί πρώιμοι βιοδείκτες της διαβητικής νεφροπάθειας σε ασθενείς με διαβήτη τύπου 2 με «ασιατικό ινδικό φαινότυπο». Diabetes Metab 2019; 45:276–285.

61. Feng Y, Lv LL, Wu WJ, et αϊ. Εξωσώματα ούρων και εξωσωματικό CCL2 mRNA ως βιοδείκτες ενεργού ιστολογικού τραυματισμού στη νεφροπάθεια IgA. Am J Pathol 2018; 188:2542–2552.

62. Fan Q, Lu R, Zhu Μ, et αϊ. Το miR του ορού-192 σχετίζεται με σωληναρισιακές βλάβες και βραχυπρόθεσμη εξέλιξη της νόσου στη νεφροπάθεια IgA. Nephron 2019; 142:195–207.

63. Guo N, Zhou Q, Huang X, et αϊ. Προσδιορισμός διαφορικά εκφραζόμενων κυκλοφορούντων εξωσωματικών lncRNA σε ασθενείς με IgA νεφροπάθεια. BMC Immunol 2020; 21:16.

64. Huang Z, Zhang Y, Zhou J, Zhang Y. Το εξωσωματικό miR ούρων- 193a μπορεί να είναι ένας πιθανός βιοδείκτης για τη διάγνωση της πρωτοπαθούς εστιακής τμηματικής σπειραματοσκλήρωσης σε παιδιά. Biomed Res Int 2017;2017:7298160.

65. Chen Τ, Wang C, Yu Η, et αϊ. Αυξημένα εξωσωματικά microRNA ούρων σε παιδιά με ιδιοπαθές νεφρωσικό σύνδρομο. EBioMedi σινεμά 2019; 39:552–561.

66. Alvarez S, Suazo C, Boltansky Α, et al. Τα εξωσώματα ούρων ως πηγή βιοδείκτη νεφρικής δυσλειτουργίας στη μεταμόσχευση νεφρού. Transplant Proc 2013; 45:3719-3723.

67. Zhang Η, Huang Ε, Kahwaji J, et αϊ. Τα εξωσώματα του πλάσματος από λήπτες μοσχευμάτων νεφρού που έχουν ευαισθητοποιηθεί με HLA περιέχουν μεταγραφές mRNA που προβλέπουν την ανάπτυξη απόρριψης που προκαλείται από αντισώματα. Transplantation 2017;101:2419–2428.

68. Park J, Lin HY, Assaker JP, et al. Ολοκληρωμένη ανάλυση εξωσώματος νεφρού για την ανίχνευση απόρριψης μοσχεύματος νεφρού. ACS Nano 2017; 11:11041–11046.

69. Lim JH, Lee CH, Kim ΚΥ, et αϊ. Νέοι εξωσωματικοί βιοδείκτες ούρων οξείας απόρριψης με μεσολάβηση Τ-λεμφοκυττάρων σε λήπτες μοσχευμάτων νεφρού: μια μελέτη διατομής. PLoS One 2018;13:e0204204.

70. Keri KC, Regner KR, Dall AT, Park F. Ουρική εξωσωματική έκφραση του ενεργοποιητή της πρωτεΐνης G που σηματοδοτεί 3 στην πολυκυστική νεφρική νόσο. BMC Res Notes 2018; 11:359.

71. Solé C, Cortés-Hernández J, Felip ML, Vidal M, Ordi-Ros J. miR- 29c σε εξωσώματα ούρων ως προγνωστικός παράγοντας πρώιμης νεφρικής ίνωσης στη νεφρίτιδα του λύκου. Nephrol Dial Transplant 2015; 30:1488–1496.

72. Tangtanatakul Ρ, Klinchanhom S, Sodsai Ρ, et αϊ. Καθοδική ρύθμιση του let-7a και του miR-21 στα εξωσώματα ούρων από ασθενείς με νεφρίτιδα λύκου κατά τη διάρκεια έξαρσης της νόσου. Asian Pac J Allergy Immunol 2019; 37:189–197.

73. Li Y, Xu X, Tang X, et αϊ. Προφίλ έκφρασης MicroRNA ουρικών εξωσωμάτων σε νεφρίτιδα λύκου Τύπου IV που περιπλέκεται από κυτταρικό μισοφέγγαρο. J Biol Res (Θεσσαλονίκη) 2018;25:16.

74. Chun-Yan L, Zi-Yi Ζ, Tian-Lin Υ, et αϊ. Βιοδείκτες υγρής βιοψίας νεφρικής διάμεσης ίνωσης με βάση το εξώσωμα ούρων. Exp Mol Pathol 2018; 105:223–228.

75. Lange Τ, Artelt Ν, Kindt F, et αϊ. Το MiR-21 ρυθμίζεται προς τα πάνω σε εξωσώματα ούρων ασθενών με χρόνια νεφρική νόσο και μετά από σπειραματική βλάβη. J Cell Mol Med 2019; 23:4839–4843.

76. Khurana R, Ranches G, Schafferer S, et αϊ. Προσδιορισμός εξωσωματικών μη κωδικοποιητικών RNA ούρων ως νέων βιοδεικτών στη χρόνια νεφρική νόσο. RNA 2017; 23:142-152.

77. Dias F, Teixeira AL, Nogueira I, et al. Εξωκυτταρικά κυστίδια εμπλουτισμένα σε δυναμικές has-miR{-3a-3p και has-miR-1293 σε ασθενείς με καρκίνωμα νεφρικών κυττάρων με καθαρά κύτταρα: πιθανοί βιοδείκτες μεταστατικής νόσου. Cancers (Βασιλεία) 2020; 12:1450.

78. Dias F, Teixeira AL, Nogueira I, et αϊ. Το mRNA TIMP-1 που προέρχεται από εξωκυτταρικό κυστίδιο πλάσματος ως προγνωστικός βιοδείκτης σε καρκίνωμα νεφρικών κυττάρων διαυγών κυττάρων: πιλοτική μελέτη. Int J Mol Sci 2020; 21:4624.

79. Jiang XC, Gao JQ. Τα εξωσώματα ως νέοι βιοφορείς για γονιδιακή και φαρμακευτική παράδοση. Int J Pharm 2017;521:167–175.

80. Marcus ME, Leonard JN. FedExosomes: μηχανικά θεραπευτικά βιολογικά νανοσωματίδια που πραγματικά προσφέρουν. Pharmaceuticals (Βασιλεία) 2013; 6:659–680.

81. Κάτω Μ. Μη κωδικοποιητικά RNA ως θεραπευτικοί στόχοι στην διαβητική νεφρική νόσο πρώιμου σταδίου. Kidney Res Clin Pract 2018;37:197–209.

82. Tang TT, Lv LL, Wang Β, et al. Χρήση μικροκυστιδίων που προέρχονται από μακροφάγους για στοχευμένη στους νεφρούς χορήγηση δεξαμεθαζόνης: μια αποτελεσματική θεραπευτική στρατηγική κατά της νεφρικής φλεγμονής και της ίνωσης. Theranostics 2019; 9:4740–4755.

83. Kalinec GM, Gao L, Cohn W, Whitelegge JP, Faull KF, Kalinec F. Εξωκυτταρικά κυστίδια από ακουστικά κύτταρα ως νανοφορείς για αντιφλεγμονώδη φάρμακα και μεσολαβητές υπέρ της επίλυσης. Front Cell Neurosci 2019; 13:530.

84. Yim N, Ryu SW, Choi K, et αϊ. Μηχανική εξωσώματος για αποτελεσματική ενδοκυτταρική παροχή διαλυτών πρωτεϊνών χρησιμοποιώντας οπτικά αναστρέψιμη μονάδα αλληλεπίδρασης πρωτεΐνης-πρωτεΐνης. Nat Commun 2016; 7:12277.

85. Choi Η, Kim Υ, Mirzaaghasi Α, et αϊ. Η χορήγηση του υπερ-κατασταλτικού IκB με βάση το εξώσωμα ανακουφίζει από τη βλάβη οργάνων που σχετίζεται με τη σήψη και τη θνησιμότητα. Sci Adv 2020; 6:eaaz6980.

86. Gatti S, Bruno S, Deregibus MC, et αϊ. Τα μικροκυστίδια που προέρχονται από ανθρώπινα ενήλικα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα προστατεύουν από οξεία και χρόνια νεφρική βλάβη που προκαλείται από ισχαιμία. Nephrol Dial Transplant 2011;26:1474–1483.

87. Choi HY, Moon SJ, Ratliff BB, et al. Μικροσωματίδια από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από νεφρό δρουν ως φορείς προαγγειογενετικών σημάτων και συμβάλλουν στην ανάρρωση από οξεία νεφρική βλάβη. PLoS One 2014;9:e87853.

88. He J, Wang Y, Lu X, et αϊ. Τα μικροκυστίδια που προέρχονται από βλαστοκύτταρα μυελού των οστών προστατεύουν το νεφρό τόσο in vivo όσο και in vitro με επιδιόρθωση που εξαρτάται από το microR NA. Nephrology (Carlton) 2015, 20:591–600.

89. Choi HY, Lee HG, Kim BS, et αϊ. Τα μικροσωματίδια που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα βελτιώνουν την περισωληνιακή τριχοειδική αραίωση μέσω της αναστολής της ενδοθηλιακής-μεσεγχυματικής μετάβασης και μειώνουν τη σωληναρισιακή διάμεση ίνωση σε μονόπλευρη απόφραξη του ουρητήρα. Stem Cell Res Ther 2015; 6:18.

90. Wang Β, Yao K, Huuskes BM, et al. Τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα παρέχουν εξωγενές microRNA-let7c μέσω εξωσωμάτων για την εξασθένιση της νεφρικής ίνωσης. Mol Ther 2016; 24:1290–1301.

91. Nagaishi Κ, Mizue Υ, Chikenji Τ, et αϊ. Η θεραπεία με μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα βελτιώνει τη διαβητική νεφροπάθεια μέσω της παρακρινής επίδρασης των νεφρικών τροφικών παραγόντων, συμπεριλαμβανομένων των εξωσωμάτων. Sci Rep 2016; 6:34842.

92. Jiang ZZ, Liu YM, Niu X, et αϊ. Τα εξωσώματα που εκκρίνονται από βλαστοκύτταρα που προέρχονται από ανθρώπινα ούρα θα μπορούσαν να αποτρέψουν επιπλοκές στα νεφρά από διαβήτη τύπου Ι σε αρουραίους. Stem Cell Res Ther 2016; 7:24.

93. Pan Τ, Jia Ρ, Chen Ν, et αϊ. Η καθυστερημένη απομακρυσμένη ισχαιμική προετοιμασία παρέχει επαναπροστασία έναντι της σηπτικής οξείας νεφρικής βλάβης μέσω του εξωσωματικού miR-21. Theranostics 2019; 9:405–423.

94. Dominguez JH, Liu Y, Gao Η, et αϊ. Τα εξωκυτταρικά κυστίδια που προέρχονται από νεφρικά σωληναριακά κύτταρα επιταχύνουν την αποκατάσταση της εγκατεστημένης βλάβης νεφρικής ισχαιμίας-επαναιμάτωσης. J Am Soc Nephrol 2017; 28:3533– 3544.

95. Dominguez JM 2nd, Dominguez JH, Xie D, Kelly KJ. Ανθρώπινα εξωκυτταρικά μικροκυστίδια από νεφρικά σωληνάρια αντιστρέφουν τον τραυματισμό αναιμίας-επαναιμάτωσης ισχαιμίας νεφρού σε αρουραίους. PLoS One 2018;13:e0202550.

96. Yuan Y, Levels J, Grootemaat A, Sturk A, Nieuwland R. Συν-απομόνωση εξωκυτταρικών κυστιδίων και λιποπρωτεϊνών υψηλής πυκνότητας χρησιμοποιώντας υπερφυγοκέντρηση βαθμίδωσης πυκνότητας. J Extracell Vesicles 2014; 3:10.3402/jev.v3.23262.

97. Baranyai T, Herczeg K, Onódi Z, et al. Απομόνωση εξωσωμάτων από πλάσμα αίματος: ποιοτική και ποσοτική σύγκριση μεθόδων χρωματογραφίας υπερφυγοκέντρησης και αποκλεισμού μεγέθους. PLoS One 2015;10:e0145686.

98. Yang B, Chen Y, Shi J. Exosome biochemistry and advanced nanotechnology for theranostic platforms επόμενης γενιάς. Adv Mater 2019;31:e1802896.

99. Yang Ζ, Shi J, Xie J, et αϊ. Μεγάλης κλίμακας δημιουργία λειτουργικών εξωσωμάτων που ενθυλακώνουν mRNA μέσω κυτταρικού νανοτμήματος. Nat Biomed Eng 2020; 4:69–83.

100. Mossberg Μ, Ståhl AL, Kahn R, et αϊ. Ο αναστολέας C{1} μειώνει την απελευθέρωση χημειοτακτικών ενδοθηλιακών μικροκυστιδίων που μοιάζουν με αγγειίτιδα. J Am Soc Nephrol 2017; 28:2472–2481.

ΖΗΤΗΣΤΕ ΠΕΡΙΣΣΟΤΕΡΑ:david.deng@wecistanche.com