Επιδράσεις των ειδικών υποδοχέων ανδρογόνων με τη μεσολάβηση γενικών κιστανοσίδων στις συναπτικές πρωτεΐνες και τη γνωστική λειτουργία σε ποντικούς SAMP8 Ⅱ

2 αποτελέσματα

2. 1 Επίδραση των GC στη μάθηση και τη μνήμη σε ποντίκια

Μετά από 30 ημέρες χορήγησης GC, η καθυστέρηση διαφυγής του πειράματος τοποθέτησης και πλοήγησης μειώθηκε σταδιακά με την αύξηση των πειραματικών ημερών και η πτωτική τάση ήταν η πιο σημαντική. Σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλων, η καθυστέρηση διαφυγής της ομάδας GC μειώθηκε σημαντικά την 4η και την 5η ημέρα (P ＜ 0. 05). σε σύγκριση με την ομάδα GCs, η καθυστέρηση διαφυγής της ομάδας GCs + F αυξήθηκε την 4η και την 5η ημέρα. , η καθυστέρηση διαφυγής της ομάδας GCs + ICI μειώθηκε σημαντικά την 4η και 5η ημέρα (P ＜ 0. 05), αλλά δεν υπήρχε σημαντική διαφορά από 1 έως 3 ημέρες (P ＞ 0. 05). δείτε την εικόνα 1.

Σχήμα 1 Διαφυγή καθυστέρησης κάθε ομάδας στο πείραμα πλοήγησης θέσης

Σημείωση: Σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλων, * P < {{0}}. 05; Σε σύγκριση με την ομάδα GCs, # P < 0. 05

Σχήμα 2 Αριθμός διασταυρώσεων πλατφόρμας για κάθε ομάδα στο πείραμα εξερεύνησης του διαστήματος

Σημείωση: Σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλων, * P < {{0}}. 05; Σε σύγκριση με την ομάδα GCs, # P < 0. 05

Συμπλήρωμα Cistanche Βελτίωση γνωστικής λειτουργίας Συμπλήρωμα διατροφής PhGs75% Ech 30% Act 12%

Στο πείραμα εξερεύνησης του διαστήματος, σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλο, ο αριθμός των διασταυρώσεων πλατφόρμας στην ομάδα GC αυξήθηκε σημαντικά (P ＜ {{0}}. 05). σε σύγκριση με την ομάδα GCs, η ομάδα GCs + F μειώθηκε στον αριθμό των διασταυρώσεων πλατφόρμας (P ＜ 0. 05) , η ομάδα GCs +ICI αυξήθηκε (P ＜ 0 . 05). Βλέπε Εικόνα 2. Το διάγραμμα τροχιών κολύμβησης έδειξε ότι η τροχιά κολύμβησης των ποντικών στην ομάδα Μοντέλων ήταν ανοργάνωτη και ακανόνιστη και το ποσοστό του χρόνου που αφιερώθηκε στο τεταρτημόριο στόχο ήταν το χαμηλότερο (P <0. 05). Σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλων, οι τροχιές κολύμβησης των ποντικών στην ομάδα GCs ήταν πιο συγκεντρωμένες, με τα περισσότερα από αυτά να βρίσκονται στο τεταρτημόριο της πλατφόρμας και τα ζώα περνούσαν το μεγαλύτερο ποσοστό χρόνου παραμένοντας στο τεταρτημόριο-στόχο (P ＜ 0. 05); σε σύγκριση με την ομάδα GCs, η διέλευση της ομάδας GCs + F Ο αριθμός των πλατφορμών μειώθηκε (P ＜ 0. 05), αλλά αυξήθηκε στην ομάδα GCs + ICI (P ＜ 0. 05). Δείτε την Εικόνα 3.

2. 2. Η επίδραση των GCs στην έκφραση πρωτεΐνης των SYN, PSD-95 και BDNF στον ιππόκαμπο ποντικού.

Σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλο, η έκφραση πρωτεΐνης των SYN, PSD{{0}} και BDNF στην ομάδα GCs αυξήθηκε σημαντικά (P ＜ 0. 05). Σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλο, Σε σύγκριση με την ομάδα, η έκφραση της πρωτεΐνης PSD-95 στην ομάδα GCs + F και την ομάδα GCs + ICI ήταν σημαντικά μειωμένη (P ＜ 0. 05). η έκφραση της πρωτεΐνης SYN στην ομάδα GCs + F αυξήθηκε σημαντικά (P ＜ 0. 05). Η έκφραση πρωτεΐνης του BDNF στην ομάδα GCs + F και την ομάδα GCs + ICI μειώθηκε σημαντικά (P ＜0. 05). Δείτε την Εικόνα 4.

Εικόνα 3 Τροχιές κολύμβησης κάθε ομάδας στο πείραμα εξερεύνησης του διαστήματος

Σημείωση: A: Ομάδα μοντέλων, B: ομάδα GCs, C: ομάδα GCs + F, D: ομάδα GCs + ICI, E: ομάδα F, F: ομάδα ICI

Εικόνα 4 Ανίχνευση Western blot έκφρασης πρωτεΐνης PSD-95, SYN και BDNF στον ιππόκαμπο κάθε ομάδας

Σημείωση: Α: έκφραση πρωτεΐνης SYN, Β: έκφραση πρωτεΐνης BDNF, Γ: έκφραση πρωτεΐνης PSD-95.

Σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλων, * P < {{0}}. 05; Σε σύγκριση με την ομάδα GCs, # P < 0. 05

2. 3 GC σε ιστό ιππόκαμπου ποντικού

Επιδράσεις στην έκφραση SYN, PSD{{0}} και BDNF mＲNA Σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλο, η ομάδα GCs είχε σημαντικά υψηλότερα επίπεδα έκφρασης SYN, PSD-95 και BDNF mＲNA (P＜{ {7}} {{10}}5). Σε σύγκριση με την ομάδα GCs, την ομάδα GCs + F, το επίπεδο έκφρασης mRNA του PSD-95 στην ομάδα GCs + ICI ήταν σημαντικά μειωμένο (P ＜ 0. 05). η έκφραση mRNA του SYN στην ομάδα GCs + F αυξήθηκε σημαντικά (P ＜ 0. 05). η ομάδα GCs + F, GCs + Η έκφραση mRNA του BDNF στην ομάδα ICI μειώθηκε σημαντικά (P ＜ 0. 05). Δείτε την Εικόνα 5.

Εικόνα 5 Ανίχνευση RT-PCR έκφρασης PSD-95, SYN και BDNF mＲNA στον ιππόκαμπο κάθε ομάδας Σημείωση: A: έκφραση SYN mＲNA, B: έκφραση PSD-95 mＲNA, C: έκφραση BDNF mＲNA . Σε σύγκριση με την ομάδα Μοντέλων, * P < 0. 05; Σε σύγκριση με την ομάδα GCs, # P < 0. 05

3 Συζήτηση

Δεν υπάρχει πρωτοπλασματική σύνδεση μεταξύ των νευρώνων στη δομή, και βασίζονται μόνο στη συναπτική επαφή για τη μετάδοση πληροφοριών. Οι μη φυσιολογικές αλλαγές στη συναπτική δομή και λειτουργία θα επηρεάσουν την αποτελεσματική μετάδοση πληροφοριών μεταξύ των νευρώνων, επομένως πιστεύεται γενικά ότι η γνωστική δυσλειτουργία AD σχετίζεται στενά με παθολογικές αλλαγές στις συνάψεις [6]. Η συναπτική πλαστικότητα αναφέρεται κυρίως στη δομική και λειτουργική τροποποίηση των συναπτικών συνδέσεων, συμπεριλαμβανομένης της αύξησης ή της μείωσης του αριθμού των συνάψεων και των αλλαγών στις φυσιολογικές λειτουργίες. Η συναπτική πλαστικότητα είναι η βάση της μάθησης και της μνήμης και η μείωσή της είναι ένας από τους κύριους παθογόνους παράγοντεςΓνωστική δυσλειτουργία AD. Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι τα GC μπορούν να ρυθμίσουν τη συναπτική πλαστικότητα μέσω πολλαπλών μηχανισμών για τη βελτίωση της γνωστικής λειτουργίας. Αξίζει να σημειωθεί ότι τα GCs μπορούν επίσης να αυξήσουν τα επίπεδα ανδρογόνων στα ζώα και η τεστοστερόνη μπορεί να βελτιώσει τη γνωστική δυσλειτουργία της AD [7]. Ως εκ τούτου, εικάζεται ότι τα GCs μπορεί να βελτιώσουν τη γνωστική λειτουργία ασκώντας επιδράσεις που μοιάζουν με ανδρογόνα.

Αυτή η μελέτη διαπίστωσε ότι τα GC μπορούν να μειώσουν σημαντικά τον λανθάνοντα χρόνο διαφυγής των ποντικών SAMP8 και να αυξήσουν τον αριθμό των διασταυρώσεων πλατφόρμας, υποδηλώνοντας ότι τα GC μπορούν να βελτιώσουν τη γνωστική δυσλειτουργία των ποντικών SAMP8. και η χορήγηση στα ζώα φλουταμίδης (ανταγωνιστής AR) μπορεί να εμποδίσει την επίδραση των GC σε ποντικούς SAMP8. Η επίδραση στη γνωστική λειτουργία σε ποντίκια υποδηλώνει ότι μετά τη χορήγηση φλουταμίδης, ο πλήρης συνδυασμός των GCs και ARＲ μπορεί να αποκλειστεί και το αποτέλεσμα δεν μπορεί να ασκηθεί, δηλαδή, τα GCs μπορεί να ασκήσουν τα αποτελέσματά τους με ειδική μεσολάβηση ARＲ.

Υπό φυσιολογικές συνθήκες, η τεστοστερόνη μπορεί να αρωματιστεί σε διυδροτεστοστερόνη (DHT) και οιστραδιόλη (Ε2) στο σώμα. Σε αυτό το πείραμα, η χορήγηση fulvestrant (ανταγωνιστής ER) σε ζώα μπορεί να βελτιώσει σημαντικά τη γνωστική δυσλειτουργία των ποντικών SAMP8. Ο λόγος μπορεί να είναι ότι το fulvestrant μπλοκάρει την ειδική δέσμευση του E2 και του ER στο σώμα, με αποτέλεσμα τη διάσταση του E2 στο σώμα. Τα επίπεδα Ε2 αυξάνονται και συσσωρεύονται, αναστέλλοντας τον μεταβολισμό της τεστοστερόνης σε Ε2. Αντίθετα, η αρωματοποίηση της τεστοστερόνης σε αντισταθμιστική DHT αυξάνεται και ο συνδυασμός με ARＲ αυξάνεται, βελτιώνοντας έτσι σημαντικά τη γνωστική δυσλειτουργία των ποντικών SAMP8. Αυτό το αποτέλεσμα επαληθεύει περαιτέρω ότι τα GC μπορούν να ενεργούν με τη μεσολάβηση συγκεκριμένων ARＲ.

Είναι ευρέως γνωστό ότι η γνωστική δυσλειτουργία σε ασθενείς με AD σχετίζεται στενά με τη συναπτική πλαστικότητα. Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι η έκφραση των πρωτεϊνών που σχετίζονται με τις συνάψεις SYN, PSD-95 και BDNF σε ζώα-μοντέλα AD είναι σημαντικά μειωμένη [8].

Τα αποτελέσματα αυτού του πειράματος έδειξαν ότι μετά τη χορήγηση GC, η έκφραση των πρωτεϊνών SYN, PSD-95 και BDNF που σχετίζονται με τη σύναψη αυξήθηκε, υποδηλώνοντας ότι τα GC μπορούν να βελτιώσουν τη συναπτική πλαστικότητα. Μελέτες έχουν δείξει ότι το BDNF μπορεί να αλληλεπιδράσει με τους υποδοχείς νευροτροφίνης, επηρεάζοντας την απελευθέρωση κυστιδίων και νευροδιαβιβαστών, επηρεάζοντας έτσι τη μάθηση καιγνωστικές λειτουργίες[9]. Τα αποτελέσματα αυτού του πειράματος βρήκαν ότι σε σύγκριση με την ομάδα GCs, η έκφραση του BDNF μειώθηκε στην ομάδα GCs+F και στην ομάδα GCs+ICI, υποδηλώνοντας ότι τα GCs μπορεί να μεσολαβούν στη συμμετοχή του ARＲ στην παραπάνω διαδικασία για να επηρεάσουν τις μαθησιακές και γνωστικές λειτουργίες. Η συναπτοφυσίνη (SYN) είναι μια πρωτεΐνη που δεσμεύει το ασβέστιο που βρίσκεται στη μεμβράνη των συναπτικών κυστιδίων.

Υπάρχει στα κεντρικά και περιφερικά νευρικά άκρα σχεδόν όλων των ζώων και μπορεί να συμμετέχει στο σχηματισμό καναλιών ειδικών για τα συναπτικά κυστίδια και σχετίζεται επίσης με τη μεταφορά κυστιδίων και την απελευθέρωση νευροδιαβιβαστών [10]. Η πρωτεΐνη μετασυναπτικής πυκνότητας (PSD-95) βρίσκεται στη μετασυναπτική μεμβράνη και είναι υπεύθυνη για τη λήψη νευροδιαβιβαστών που απελευθερώνονται από το προσυναπτικό και συμμετέχουν στη ρύθμιση της μετάδοσης συναπτικού σήματος και της συναπτικής πλαστικότητας. Επομένως, το SYN και το PSD-95 θεωρούνται ότι είναι δείκτης για την αξιολόγηση της συναπτικής δραστηριότητας και της λειτουργικής πλαστικότητας [11]. Τα αποτελέσματα αυτού του πειράματος βρήκαν ότι σε σύγκριση με την ομάδα GCs, η έκφραση του SYN αυξήθηκε και η έκφραση του PSD-95 μειώθηκε μετά τη χορήγηση φλουταμίδης στα ζώα, υποδηλώνοντας ότι τα GCs μπορεί να μεσολαβούν ειδικά στην AR για τη ρύθμιση της μετασυναπτικής μεμβράνης, αλλά όχι την προσυναπτική μεμβράνη. Το αποτέλεσμα δεν μεσολαβεί ειδικά στο ARＲ. Σε σύγκριση με την ομάδα GCs, τα επίπεδα έκφρασης του BDNF και του PSD-95 μειώθηκαν μετά τη χορήγηση στα ζώα fulvestrant και η μείωση ήταν πιο σημαντική από εκείνη της ομάδας GCs + F, η οποία επαλήθευσε περαιτέρω ότι τα GCs μπορεί να διαδραματίσουν κάποιο ρόλο με τη μεσολάβηση συγκεκριμένου ARＲ.

Συνοπτικά, τα GC μπορεί να μεσολαβούν σε συγκεκριμένο ARＲ για τη ρύθμιση της συναπτικής πλαστικότητας, βελτιώνοντας έτσι τη γνωστική δυσλειτουργία της AD, η οποία θα παρέχει νέες ιδέες για τη χρήση των GC στην πρόληψη καιθεραπεία της AD.

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] Soria Lopez JA, González HM, Léger GC. Αλτσχάιμερ

ασθένεια［M］/ /Εγχειρίδιο Κλινικής Νευρολογίας. Άμστερνταμ: Elsevier, 2019: 231-255.

[2] Lašaitè L, Cˇeponis J, Preikša RT, et al. Επιπτώσεις δύο -

έτος θεραπείας υποκατάστασης τεστοστερόνης για τη γνώση, τα συναισθήματα και την ποιότητα ζωής σε νέους και μεσήλικες υπογοναδικούς άνδρες. Ανδρολογία, 2017, 49(3): e12633.

[3] Jia JX, Yan XS, Song W, et al. Ο προστατευτικός μηχανισμός που διέπει τις δράσεις των φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδών (PHG) στη συναπτική πλαστικότητα στο μοντέλο της νόσου Alzheimer επίμυος που προκαλείται από το βήτα-αμυλοειδές 1 - 42［J］． J Toxicol EnvironHealth A, 2018, 81(21): 1098-1107.

[4] Liu Xinlang, Zhou Lili, Yang Zhanjun, κ.λπ. Επιδράσεις των ολικών γλυκοσιδών Cistanche deserticola στη μάθηση και την ικανότητα μνήμης και τη συναπτική πλαστικότητα των ποντικών SAMP8［J］. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2022, 40(1): 110-115, 276-277.

[5] Song Wei, Bai Yumeng, Li Xiaoyu, κ.λπ. Επιδράσεις της τεστοστερόνης στην έκφραση της συναπτοφυσίνης στον ιππόκαμπο ευνουχισμένων αρουραίων σε συνδυασμό με -αμυλοειδές 1-42 ολιγομερή［J］. Journal of Anatomy, 2019, 42(6): 547-550.

[6] Chen L, Huang ZL, Du YH, et al. Η καψαϊκίνη εξασθενείπροκληθείσα από αμυλοειδές- -απώλεια συνάψεων και γνωστικές διαταραχές σε ποντίκια［J］. J Alzheimers Dis, 2017, 59(2): 683-694.

[7] Kische H, Gross S, Wallaschofski H, et al. Σωματείατων ανδρογόνων με καταθλιπτικά συμπτώματα και γνωστική κατάσταση στο γενικό πληθυσμό. PLoS One, 2017, 12(5): e0177272.

[8] Wang Lu, Bai Yumeng, Li Xiaoyu, κ.λπ. Επιδράσεις των ολικών γλυκοσιδίων Cistanche deserticola στη μάθηση, τη γνωστική λειτουργία και το οξειδωτικό στρες σε αρουραίους μοντέλου της νόσου Αλτσχάιμερ (J］). Journal of Anatomy, 2020, 43(3): 194-199, 275.

[9] Nguyen VT, Hill B, Sims N, et al. Πολυμορφισμός μονονουκλεοτιδίου του νευροτροφικού παράγοντα rs6265 (Val66Met) που προέρχεται από τον εγκέφαλο ως κύριος τροποποιητής της ανθρώπινης παθοφυσιολογίας. Neural Ｒgen Ｒs, 2023, 18(1): 102-106.

[10] Cousin MA. Διακίνηση εξαρτώμενης από συναπτοφυσίνη συναπτομπρεβίνης -2 στην προσύναψη - μηχανισμός και λειτουργία［J］． J Neurochem, 2021, 159(1): 78-89.

[11] Liang HZ, Wang HQ, Wang SS, et al. τρισδιάστατη απεικόνιση του PSD-95 στον εγκέφαλο του ποντικιού χρησιμοποιώντας την προηγμένη μέθοδο CUBIC［J］. Mol Brain, 2018, 11(1): 50.