Επιδράσεις του σακχαρώδους διαβήτη στη σεξουαλική λειτουργία, την ιστομορφολογία και την έκφραση ακτίνης μυών -μυών στο σπηλαιώδες σώμα του πέους σε αρουραίους
Mar 05, 2025
Περίληψη:
Σκοπός:Για να παρατηρήσετε τοσεξουαλική λειτουργία του διαβήτημοντέλους αρουραίους και διερευνήστε τον πιθανό μηχανισμό δευτερογενούς σεξουαλικής δυσλειτουργίας που προκαλείται από υπεργλυκαιμία.
ΜέθοδοςΟι πειραματικοί αρουραίοι χωρίστηκαν τυχαία στην κενή ομάδα (n =5) και τοομάδα διαβήτη(n =15). Αφού κατασκευάστηκε με επιτυχία το ζωικό μοντέλο του διαβήτη, αξιολογήθηκε η σεξουαλική λειτουργία δύο ομάδων. Τα ιστολογικά χαρακτηριστικά των όρχεων σε δύο ομάδες παρατηρήθηκαν. Η έκφραση της ακτίνης -μυών μυών (-SMA) στον ιστό του πέους των δύο ομάδων μετρήθηκε. Αποτελέσματα Τα επίπεδα των ορμονών του σεξουαλικού ορού μειώθηκαν σημαντικά (σ.<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).
ΣύναψηΤα μειωμένα επίπεδα των σεξουαλικών ορμονών, ο μειωμένος αριθμός κυττάρων των λείων μυών στο σπηλαιώδες σώμα του πέους, η μειωμένη έκφραση του -sma σε σπηλαιώδη σώμα του πέους, η διαταραγμένη δομή του διάμεσο ιστό των όρχεων Η διερεύνηση της διάγνωσης και της θεραπείας αυτής της νόσου με αυτά τα φαινοτυπικά χαρακτηριστικά θα έχει μεγάλη σημασία.
Λέξεις -κλειδιά:σακχαρώδης διαβήτης.στυτική δυσλειτουργία; σεξουαλική λειτουργία; σεξουαλόνη; - Έκφραση ακτίνης λείου μυός
Συμπληρώματα φυτικών cistanche για στυτική δυσλειτουργία που προκαλείται από διαβήτη
Σακχαρώδης διαβήτης (DM)είναι από καιρό ένα επίκεντρο της προσοχής τόσο σε εγχώριο όσο και σε διεθνές επίπεδο λόγω της υψηλής επίπτωσης και επικράτησης του [1]. Οι διάφορες επιπλοκές που προκαλούνται από το DM επηρεάζουν σημαντικά την ποιότητα ζωής των ασθενών. Μεταξύ αυτών, η επίπτωση τουστυτική δυσλειτουργία (ed)σε αρσενικόΑσθενείς με DMείναι αξιοσημείωτα ανυψωμένο. Επί του παρόντος, η DM έχει γίνει ομάδα υψηλού κινδύνου για την ED [2-3]. Επομένως, διεξάγοντας σε βάθος μελέτεςED που προκαλείται από DM (DMED)έχει μεγάλη σημασία. Αυτή η μελέτη στοχεύει να παρατηρηθεί οι επιδράσεις του DM στη στυτική λειτουργία, στις ορμόνες του φύλου, στα επίπεδα έκφρασης της ακτίνης -μυών μυών (-SMA) στο σπηλαιώδες σώμα του πέους και στη μορφολογία των όρχεων ενδιάμεσων καιΠένελο σπηλαιώδες λείο μυόςΟι ιστοί σε αρουραίους, διερευνώντας προκαταρκτικά την πιθανή παθολογική βάση του ED που προκαλείται από το DM.
1 Υλικά και Μέθοδοι
1.1 Πειραματόζωα και αντιδραστήρια
Είκοσι ενήλικες αρσενικοί αρουραίοι SD με ομοιόμορφο σωματικό βάρος επιλέχθηκαν. Τα κύρια πειραματικά αντιδραστήρια περιελάμβαναν στρεπτοζοτοκίνη (STZ) και απομορφίνη (APO), καθώς και αντισώματα που απαιτούνται για την ανίχνευση της έκφρασης -SMA. Η μελέτη αυτή εγκρίθηκε από την Επιτροπή Ευημερίας και Δεοντολογίας των Ζώων του Νοσοκομείου Dongzhimen, Πανεπιστήμιο της Κινεζικής Ιατρικής του Πεκίνου (Νο. 17-04).
1.2 Πειραματικές μεθόδους
1.2.1 Δημιουργία μοντέλου διαβητικού αρουραίου
Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >16,7 mmol/L ανά πάσα στιγμή μετά από 5 ημέρες της ενδοπεριτοναϊκής ένεσης STZ θεωρήθηκε το πρότυπο για την επιτυχή εγκατάσταση μοντέλου DM [4].
1.2.2 Δοκιμή στυτικής λειτουργίας σε αρουραίους
Μετά την επιβεβαίωση της επιτυχούς μοντελοποίησης DM, οι αρουραίοι ζυγίστηκαν και τοποθετήθηκαν σε ένα διαφανές γυάλινο κιβώτιο. Ο διαλύτης APO (100 μ.Γ./kg) εγχύθηκε υποδόρια στο πίσω μέρος του λαιμού με βάση το σωματικό βάρος. Το περιβάλλον περιβάλλον διατηρήθηκε ήσυχο και ο εσωτερικός φωτισμός προσαρμόστηκε σε ένα επίπεδο μόνο επαρκή για την παρατήρηση της στύσης του πέους σε αρουραίους. Ο αριθμός των στύσεων του πέους εντός 30 λεπτών μετά την παρατηρήθηκε και καταγράφηκε η υποδόρια ένεση. Κριτήρια για την ανέγερση του πέους: διεύρυνση του πέους, απόσυρση της ακροποσθίας, έκθεση των Glans που συνοδεύεται από υπεραιμία και ερυθρότητα και ορατότητα των μεσαίας και κατώτερης τμημάτων του πέους.
1.2.3 Μέτρηση των ορμονών του φύλου σε αρουραίους
Τα επίπεδα των ορμονών του σεξουαλικού ορού των δύο ομάδων μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας τη μέθοδο ραδιοανοσοπροσδιορισμού, ακολουθώντας τις συγκεκριμένες διαδικασίες που περιγράφονται στις οδηγίες του κιτ ραδιοανοσολογίας.
1.2.4 Ιστοπαθολογική παρατήρηση του ενδιάμεσης ιστού των όρχεων
Μετά τη συλλογή του αίματος από την κοιλιακή αορτή των αρουραίων, ο σωστός όρχι εξήχθη ομοιόμορφα. Ο όρχι πλύθηκε με ρυθμιστικό διάλυμα PBS και σταθεροποιήθηκε πλήρως σε παραφορμαλδεΰδη για 72 ώρες. Ο ιστός ενσωματώθηκε σε παραφίνη, διαχωρίστηκε, χρωματίστηκε με αιματοξυλίνη-ηωσίνη (Η & Ε) και παρατηρήθηκε για ιστολογικά χαρακτηριστικά.
1.2.5 Παρατήρηση της σπηλαιώδους ίνωσης του πέους σε αρουραίους
Μετά τη συλλογή αίματος από την κοιλιακή αορτή, ο ιστός του πέους αποκόπηκε και πλύθηκε με ρυθμιστικό διάλυμα PBS. Ο ιστός ήταν πλήρως σταθερός στην παραφορμαλδεΰδη για 72 ώρες, ενσωματωμένο σε παραφίνη, διαχωρίστηκε και χρωματίστηκε με το τριχρωματικό του Masson. Το σχετικό περιεχόμενο των ινών λείων μυών/κολλαγόνου στον σπηλαιώδη ιστό του πέους κάθε ομάδας παρατηρήθηκε υπό μικροσκόπιο.
1.2.6 Μέτρηση των επιπέδων έκφρασης -SMA στον σπηλαιώδη ιστό του πέους
Ο σπηλαιώδης ιστός του πέους υποβλήθηκε σε ρουτίνα αποπαραφινοποίησης σε νερό, πλύθηκε με ρυθμιστικό διάλυμα PBS για 5 λεπτά και υποβλήθηκε σε επισκευή θερμότητας μικροκυμάτων σε ρυθμιστικό κιτρικού (ρΗ 6 0) για 20 λεπτά. Μετά την ψύξη σε θερμοκρασία δωματίου, ο ιστός πλύθηκε τρεις φορές με PBS, 3 λεπτά κάθε φορά. Ένα διάλυμα υπεροξειδίου 3% υδρογόνου εφαρμόστηκε σε ένα σκοτεινό δωμάτιο σε θερμοκρασία δωματίου για 15 λεπτά, ακολουθούμενη από πλύσιμο PBS. Στη συνέχεια προστέθηκε αντίσωμα SMA και ο ιστός επωάστηκε όλη τη νύχτα σε 4 μοίρες. Αφού επέστρεψε σε θερμοκρασία δωματίου, ο ιστός πλύθηκε με PBS, επωάστηκε με δευτερογενές αντίσωμα σε 37 μοίρες για 30 λεπτά και πλύθηκε και πάλι με PBS. Το DAB εφαρμόστηκε για ανάπτυξη χρωμάτων στο σκοτάδι και η αντίδραση τερματίστηκε με νερό. Το PBS χρησιμοποιήθηκε ως αντικαταστάτης για το πρωτογενές αντίσωμα ως αρνητικό έλεγχο και διεξήχθη ποσοτική ανάλυση με έναν αναλυτή εικόνων.
1.3 στατιστικές μεθόδους
Τα δεδομένα που συλλέχθηκαν σε αυτή τη μελέτη οργανώθηκαν χρησιμοποιώντας το Microsoft Excel και στη συνέχεια αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας SPSS 25. 0 για στατιστικές δοκιμές. Τα δεδομένα κάθε ομάδας εκφράζονται ως μέση ± τυπική απόκλιση (x̄ ± s). Μια τιμή p μικρότερη από 0. 0 5 (p <0,05) θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική.
2 Αποτελέσματα
2.1 Σύγκριση του σωματικού βάρους και των αλλαγών γλυκόζης στο αίμα μεταξύ των δύο ομάδων
Ανατρέξτε στον Πίνακα 1.
2.2 Σύγκριση των ποσοστών ανέγερσης πέους μεταξύ των δύο ομάδων
Ανατρέξτε στον Πίνακα 2.
2.3 Σύγκριση των επιπέδων ορμονών του σεξουαλικού ορού μεταξύ των δύο ομάδων
Ανατρέξτε στον Πίνακα 3.
2.4 Παθολογική παρατήρηση του ενδιάμεσου ιστού των όρχεων μεταξύ των δύο ομάδων
Ο ενδιάμεσος ιστός των όρχεων της ομάδας ελέγχου εμφανίστηκε φυσιολογικός. Τα ενδιάμεσα κύτταρα ήταν στρογγυλά ή οβάλ σε σχήμα, με τακτική μορφολογία, φυσιολογική ενδοκυτταρική απόσταση, ομαλή διάταξη και καμία σημαντική μείωση του αριθμού των κυττάρων. Αντίθετα, η διαβητική ομάδα έδειξε το ενδιάμεσο οίδημα των όρχεων, τη μορφολογία των ακανόνιστων κυττάρων, τους χαλαρούς ενδοκυτταρικούς χώρους, τη διαταραγμένη διάταξη, τις διαταραγμένες ενδοκυτταρικές δομές και τα σημάδια της αποδιαφοροποίησης σε ορισμένα κύτταρα, χάνοντας δομικά χαρακτηριστικά. Ανατρέξτε στο σχήμα 1.
| Ομάδα | Μέγεθος δείγματος (n) | Βάση βάσης σωματικού βάρους (g) | Σωματικό βάρος 5 ημέρες μετά τη μοντελοποίηση (g) | Γλυκόζη αίματος 5 ημέρες μετά τη μοντελοποίηση (MMOL/L) | Βάρος σώματος πριν από τη θυσία (g) | Γλυκόζη αίματος πριν από τη θυσία (MMOL/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Ομάδα διαβήτη | 15 | 220.4 ± 5.5 | 264.2 ± 10.8** | 24.3 ± 5.0** | 316.7 ± 16.4** | 25.2 ± 5.1** |
| Ομάδα ελέγχου | 5 | 220.0 ± 5.2 | 286.2 ± 10.1 | 4.9 ± 1.3 | 319.1 ± 13.9 | 6.8 ± 1.2 |
Σημείωμα: Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου,P <{0}}. 01.
Πίνακας 2: Σύγκριση των ποσοστών ανέγερσης πέους μεταξύ δύο ομάδων
| Ομάδα | Μέγεθος δείγματος (n) | Θετικές περιπτώσεις στη δοκιμή ανέγερσης (n) | Ποσοστό στύσης (%) |
|---|---|---|---|
| Ομάδα διαβήτη | 15 | 5 | 33.3** |
| Ομάδα ελέγχου | 5 | 4 | 80.0 |
Σημείωμα: Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου,P <{0}}. 01.
Πίνακας 3: Σύγκριση των επιπέδων ορμονών του σεξουαλικού ορού μεταξύ δύο ομάδων (x̄ ± s)
| Ομάδα | Μέγεθος δείγματος (n) | T (nmol·l⁻⁻) | FSH (iu · l⁻⁻) | LH (ng · l⁻⁻) |
|---|---|---|---|---|
| Ομάδα διαβήτη | 15 | 3.38 ± 0.87** | 8.49 ± 3.06** | 489 ± 50.12** |
| Ομάδα ελέγχου | 5 | 6.04 ± 1.26 | 5.98 ± 1.03 | 386 ± 40.73 |
Σημείωμα: Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου,P <{0}}. 01.
2.4 Παθολογική παρατήρηση του ενδιάμεσου ιστού των όρχεων μεταξύ δύο ομάδων
Στην ομάδα ελέγχου, ο ενδιάμεσος ιστός των όρχεων εμφανίστηκε φυσιολογική, με τα διάμεσο κύτταρα να είναι στρογγυλά ή οβάλ σε σχήμα, να δείχνουν τακτική μορφολογία, φυσιολογικούς διακυτταρικούς χώρους και ομαλή διάταξη. Ο αριθμός των κυττάρων δεν έδειξε σημαντική μείωση. Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, η διαβητική ομάδα παρουσίασε οίδημα των όρχεων, τα ακανόνιστα διαμορφωμένα κύτταρα, οι χαλαροί ενδοκυτταρικοί χώροι, η διαταραγμένη διάταξη, οι διαταραγμένες ενδοκυτταρικές δομές και τα σημάδια της αποδιαφοροποίησης σε ορισμένα κύτταρα, χάνοντας τα δομικά τους χαρακτηριστικά. Ανατρέξτε στο σχήμα 1.
2.5 Παρατήρηση της σπηλαιώδους ίνωσης του πέους μεταξύ δύο ομάδων
Η χρώση του Masson χρησιμοποιήθηκε για να παρατηρηθεί οι διαφορές στο βαθμό της ίνωσης στον σπηλαιώδη ιστό του πέους μεταξύ των δύο ομάδων. Στη διαβητική ομάδα, το ποσοστό των ινών κολλαγόνου ήταν σημαντικά υψηλότερη, με αύξηση του σχετικού περιεχομένου, ενώ η αναλογία των κυττάρων των λείων μυών ήταν μικρότερη, με μείωση του σχετικού περιεχομένου. Ανατρέξτε στο σχήμα 2.
Εικόνα 1 Η χρώση των αποτελεσμάτων των όρχεων σε δύο ομάδες (× 10, n=3)
Εικόνα 2 Masson Βασίνοντας αποτελέσματα της Corpora Cavernosa σε δύο ομάδες (× 4, n=3)
2.6 Έκφραση του -SMA σε κύτταρα λείου μυός Corpus cavernosum σε δύο ομάδες
Η ανοσοϊστοχημεία χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση της έκφρασης του -SMA στις δύο ομάδες. Σε σύγκριση με την κενή ομάδα, το καφέ -κίτρινο χρωματισμένο μέρος στην διαβητική ομάδα μειώθηκε σημαντικά, δηλαδή η θετική κυτταρική έκφραση του -SMA στην διαβητική ομάδα μειώθηκε σημαντικά. Δείτε το σχήμα 3.
Εικ. 3 Αποτελέσματα ανοσοϊστοχημείας του corpus cavernosum σε δύο ομάδες (× 10, n=3)
