Αποτελεσματική θεραπεία για τη νεφρική ίνωση: φαρμακολογική αναστολή του STAT6 με AS1517499

Επαφή:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ΜΕΡΟΣ ΙΙ.: Φαρμακολογική αναστολή της ενεργοποίησης των μυελοειδών ινοβλαστών STAT6 και της εναλλακτικής πόλωσης μακροφάγων στη νεφρική ίνωση

Μπαϊχάι Τζιάο, Τσανγκλόνγκ Αν, Μέλανι Τραν, Χάο Ντου, Πενγκχουά Γουάνγκ, Ντονγκ Ζου και Γιανλίν Γουάνγκ

Ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα της χρόνιας νεφρικής νόσου είναιΝεφρικήΊνωση, η οποία μπορεί να οδηγήσει σε προοδευτική απώλεια της νεφρικής λειτουργίας. Επί του παρόντος, δεν υπάρχει αποτελεσματική θεραπεία γιαΝεφρικήΊνωση. Ως εκ τούτου, υπάρχει επείγουσα ανάγκη να προσδιοριστούν πιθανοί στόχοι για τα ναρκωτικά γιαΝεφρικήΊνωση. Σε αυτή τη μελέτη, εξετάσαμε την επίδραση μιας επιλεκτικήςΣΤΑΤ6αναστολέαςAS1517499, σχετικά με την ενεργοποίηση μυελοειδών ινοβλαστών, την πόλωση μακροφάγων και την ανάπτυξηΝεφρικήΊνωσησε δύο πειραματικά μοντέλα ποντικού. Για να διερευνήσετε την επίδραση τηςΣΤΑΤ6αναστολή της ενεργοποίησης των μυελοειδών ινοβλαστών, της πόλωσης μακροφάγων και της ίνωσης των νεφρών, τα ποντίκια άγριου τύπου ήταν

υποβάλλονται σε ετερόπλευρη απόφραξη του ουρητήρα ή σε χορήγηση φολικού οξέος και υποβάλλονται σε θεραπεία μεAS1517499. Τα ποντίκια που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με φορέα χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες. Στο τέλος των πειραμάτων, τα νεφρά συλλέχθηκαν για την ανάλυση της ενεργοποίησης των μυελοειδών ινοβλαστών, της πόλωσης μακροφάγων καιΝεφρικήΊνωσηκαι λειτουργία. Μονομερής απόφραξη του ουρητήρα ή χορήγηση φολικού οξέος που προκαλείται από τη χορήγηση του φολικού οξέοςΣΤΑΤ6ενεργοποίηση σε διάμεσα κύτταρα του νεφρού, η οποία καταργήθηκε σημαντικά από τοAS1517499θεραπεία. Ποντίκια που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία μεAS1517499συσσώρευσε λιγότερους μυελοειδείς ινοβλάστες και μυοϊνοβλάστες στο νεφρό με απόφραξη του ουρητήρα ή νεφροπάθεια φολικού οξέος σε σύγκριση με ποντίκια που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με φορέα. ΕπιπλέονAS1517499κατέστειλε σημαντικά την πόλωση των μακροφάγων Μ2 στον τραυματισμένο νεφρό. Επιπλέον, η AS1517499 μείωσε σημαντικά τα επίπεδα έκφρασης των πρωτεϊνών της εξωκυτταρικής μήτρας και την ανάπτυξη ίνωσης και δυσλειτουργίας των νεφρών. Τα ευρήματα αυτά υποδηλώνουν ότιAS1517499ΑναστέλλειΣΤΑΤ6ενεργοποίηση, καταστέλλει την ενεργοποίηση των μυελοειδών ινοβλαστών, μειώνει την πόλωση των μακροφάγων Μ2, μετριάζει την παραγωγή πρωτεϊνών εξωκυτταρικής μήτρας και διατηρεί τη νεφρική λειτουργία. Επομένως, η στόχευσηΣΤΑΤ6μεAS1517499είναι μια νέα θεραπευτική προσέγγιση για τη χρόνια νεφρική νόσο.

ΠΑΤΗΣΤΕ ΕΔΩ ΣΤΟ ΜΕΡΟΣ Ι.

cistanches herbaγιανεφρός

ΣΥΖΉΤΗΣΗ

ΝεφρικήΊνωσηαποτελεί βασικό παθολογικό χαρακτηριστικό της χρόνιας νεφρικής νόσου. Επί του παρόντος, δεν υπάρχουν αποτελεσματικές θεραπείες ή ειδικά φάρμακα για την πρόληψη ή/και την αναστροφήΝεφρικήΊνωσηπροχώρηση. Μελέτες έχουν δείξει ότι μια σημαντική πηγή μυοϊνοβλαστών προέρχεται από ινοβλάστες που προέρχονται από το μυελό των οστών, οι οποίοι προέρχονται από υποπληθυσμούς μονοκυττάρων μέσω της διαφοροποίησης των μονοκυττάρων σε ινοβλάστες(9, 23,30,31). Ωστόσο, οι μοριακοί μηχανισμοί που διέπουν τη μετάβαση των μονοκυττάρων στους ινοβλάστες στον τραυματισμένο νεφρό δεν είναι πλήρως διασαφηνισμένοι. Στην παρούσα μελέτη, εξετάσαμε την επίδραση μιαςΣΤΑΤ6-ειδικός αναστολέας,AS1517499, σχετικά με τη μετάβαση μονοκυττάρων σε ινοβλάστη, την πόλωση μακροφάγων Μ2 και την ανάπτυξηΝεφρικήΊνωσησε δύο μοντέλα ποντικών χρόνιας νεφρικής νόσου που προκαλείται από απόφραξη του ουρητήρα ή φολικό οξύ. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η θεραπεία μεAS1517499σε ποντίκια με αποφρακτική νεφροπάθεια ή FA νεφροπάθεια καταστέλλει τη συσσώρευση μυελοειδών ινοβλαστών, μειώνει την πόλωση των μακροφάγων Μ2 και τον μετασχηματισμό των μυοϊνοβλαστών, μειώνει την παραγωγή πρωτεϊνών ECM και την εναπόθεση κολλαγόνου στο νεφρό και αποτρέπει τη νεφρική δυσλειτουργία.

Αποδείξαμε ότι το IL4Ro/JAK3/ΣΤΑΤ6η οδός σηματοδότησης παίζει σημαντικό ρόλο στην ενεργοποίηση του μυελοειδούς ινοβλάστη και στην ανάπτυξηΝεφρικήΊνωση(15). Γενετική διαταραχή της IL4Rα, φαρμακολογική αναστολή του JAK3 ή γενετική διαγραφή τουΣΤΑΤ6μειώνει τη συσσώρευση και την ενεργοποίηση των μυελοειδών ινοβλαστών στους νεφρούς ως απάντηση σε αποφρακτικό τραυματισμό ή τραυματισμό του φολικού οξέος(15,16).AS1517499είναι μια ισχυρή και επιλεκτικήΣΤΑΤ6με IC50 21 nM (21). Ο Chiba και οι συνάδελφοί του αναφέρουν ότιAS1517499αναστέλλει την υπεραντιδραστικότητα που προκαλείται από αντιγόνα σε ένα μοντέλο άσθματος ποντικού(22). Στην παρούσα μελέτη, εξετάζουμε την επίδραση της φαρμακολογικής αναστολής τηςΣΤΑΤ6μεAS1517499σχετικά με την ενεργοποίηση των μυελοειδών ινοβλαστών σε πειραματικά μοντέλαΝεφρικήΊνωσηπου προκαλείται από απόφραξη του ουρητήρα ή φολικό οξύ. Τα αποτελέσματά μας αποκαλύπτουν ότιΣΤΑΤ6φωσφορυλιώνεται στους νεφρούς ως απάντηση σε αποφρακτικό τραυματισμό ή τραυματισμό από φολικό οξύ. Το επίπεδο τωνΣΤΑΤ6η φωσφορυλίωση στο νεφρό αναστέλλεται σημαντικά απόAS1517499διαχείριση. Αυτά τα δεδομένα δείχνουν ότιAS1517499ΑναστέλλειΣΤΑΤ6ενεργοποίηση στο νεφρό με τραυματισμό. Σημειωτέον, το σύνολοΣΤΑΤ6τα επίπεδα στο νεφρό αυξάνονται μετά από απόφραξη του ουρητήρα ή χορήγηση φολικού οξέος, η οποία μειώνεται κάπως μετά απόAS1517499θεραπεία. Αυτό μπορεί να σχετίζεται μεΣΤΑΤ6σταθερότητα/αποικοδόμηση των πρωτεϊνών ή μειωμένη έκφραση τηςΣΤΑΤ6ως συνέπεια της ρύθμισης της αρνητικής ανάδρασης που προκαλείται από την απενεργοποίηση τουΣΤΑΤ6Σηματοδότηση. Απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για τη διαλεύκανση των ακριβών μηχανισμών. Παρατηρήσαμε ότιAS1517499αναστέλλει τη συσσώρευση και ενεργοποίηση μυελοειδών ινοβλαστών στο νεφρό με τραυματισμό. Τα αποτελέσματα αυτά υποστηρίζουν σημαντικό ρόλο τωνΣΤΑΤ6στην ενεργοποίηση των μυελοειδών ινοβλαστών στο νεφρό.

cistanche στυτική δυσλειτουργίαπερίπουνεφρός

Οι Th2 κυτοκίνες IL-4 και IL-13 διεγείρουνΣΤΑΤ6φωσφορυλίωση, η οποία εμπλέκεται στην πόλωση των μακροφάγων Μ2(15). Τα μακροφάγα M2 χαρακτηρίζονται από την έκφραση argl, MRCl, Fizzl, CCL17 (32). Τα μακροφάγα Μ2 έχουν αναφερθεί ότι προάγουν την ίνωση των ιστών(33-35). Ωστόσο, πώς τα μακροφάγα Μ2 προάγουν την ίνωση των ιστών δεν είναι σαφώς κατανοητό. Έχουμε δείξει προηγουμένως ότι οι μυελοειδείς ινοβλάστες προέρχονται από μονοκύτταρα μέσω της πόλωσης μακροφάγων Μ2(15,24). Πρόσφατα, η Binnemars-Postma και οι συνεργάτες της αναφέρουν ότι η αναστολή τηςΣΤΑΤ6μεAS1517499μετριάζει τα μακροφάγα που σχετίζονται με τον όγκο σε φαινότυπους Μ2 και μειώνει την ανάπτυξη του όγκου και τη μετάσταση(36). Στην παρούσα μελέτη, δείχνουμε ότι η θεραπεία μεAS1517499αναστέλλει τον αριθμό των CD206 και PDGFR-β διπλών θετικών κυττάρων στον τραυματισμένο νεφρό και μειώνει τα επίπεδα έκφρασης mRNA των δεικτών μακροφάγων M2, Argl, MRCl, Fizzl, CCL17. Αυτά τα δεδομένα δείχνουν ότιΣΤΑΤ6Ο αναστολέας Α1517499 καταστέλλει τη μετάβαση μονοκυττάρων σε ινοβλάστη και την πόλωση μακροφάγων Μ2 στον τραυματισμένο νεφρό κατά την ανάπτυξη τουΝεφρικήΊνωση.

ΝεφρικήΊνωσηχαρακτηρίζεται από την παραγωγή και την εναπόθεση πρωτεϊνών ECM που οδηγούν στην καταστροφή του νεφρικού παρεγχύματος και στην απώλεια της νεφρικής λειτουργίας(2). Στην παρούσα μελέτη, έχουμε δείξει ότι η αναστολή τηςΣΤΑΤ6μεAS1517499μειώνει την παραγωγή πρωτεϊνών ECM -fibronectin και κολλαγόνου I καθώς και την εναπόθεση κολλαγόνου στο νεφρό σε δύο πειραματικά μοντέλα αποφρακτικής νεφροπάθειας και νεφροπάθειας φολικού οξέος. Επιπλέον, η φαρμακολογική αναστολή τηςΣΤΑΤ6μεAS1517499προστατεύει το νεφρό από τη νεφρική δυσλειτουργία που προκαλείται από το φολικό οξύ. Τα αποτελέσματα αυτά δείχνουν ότιAS1517499μπορεί να αναστείλει την ανάπτυξη της ίνωσης των νεφρών και της δυσλειτουργίας.

Εν ολίγοις, από τα πορίσματά μας προκύπτει ότιΣΤΑΤ6ενεργοποιείται σε τραυματισμένα νεφρά, οδηγώντας στη συσσώρευση και ενεργοποίηση μυελοειδών ινοβλαστών, στην πόλωση των μακροφάγων Μ2 και στην ανάπτυξη ίνωσης και δυσλειτουργίας των νεφρών. Φαρμακολογική αναστολή τηςΣΤΑΤ6μεAS1517499καταστέλλει τη συσσώρευση και την ενεργοποίηση μυελοειδών ινοβλαστών, μειώνει την πόλωση των μακροφάγων Μ2, μειώνει την παραγωγή πρωτεϊνών ECM και εξασθενεί την ανάπτυξη ίνωσης και δυσλειτουργίας των νεφρών. Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η στόχευσηΣΤΑΤ6μεAS1517499είναι μια πολλά υποσχόμενη θεραπευτική προσέγγιση για τη θεραπεία της χρόνιας νεφρικής νόσου.

cistamcheγιανεφρός

ΑΝΑΦΟΡΈΣ

1. Levey AS, Atkins R, Coresh J, Cohen EP, Collins AJ, Eckardt KU, κ.ά. Η χρόνια νεφρική νόσος ως παγκόσμιο πρόβλημα δημόσιας υγείας: Προσεγγίσεις και πρωτοβουλίες - Μια δήλωση θέσης από τη νεφρική νόσο που βελτιώνει τα παγκόσμια αποτελέσματα.Kidney Int (2007)72:247-59.doi: 10.1038/SJ.ki.5002343

2. Liu Y.Κυτταρικοί και Μοριακοί ΜηχανισμοίΝεφρικήΊνωση. Nat Rev Νεφρόλη(2011)7:684-96.doi: 10.1038/nrneph.2011.149

3. Νογκουέιρα Α,Πιρές MJ, Ολιβέιρα ΠΑ. Παθοφυσιολογικοί ΜηχανισμοίΝεφρικήΊνωση: Μια ανασκόπηση των ζωικών μοντέλων και των θεραπευτικών στρατηγικών. In Vivo (2017) 31:1-22.DOI: 10.21873/invivo.11019

4. An C, Jia L, Wen J, Wang Y. Στόχευση ινοβλαστών που προέρχονται από το μυελό των οστών για ινοβλάστες που προέρχονται από το μυελό των οστών γιαΝεφρικήΊνωση. AdvExp Med Biol (2019)1165:305-22.doi:10.1007/978-981-13-8871-2_14

5. Xu J, Kisseleva T.Τα ινοκύτταρα που προέρχονται από το μυελό των οστών συμβάλλουν στην ίνωση του ήπατος.Exp Biol Med (Maywood)(2015)240:691-700.doi: 10.1177/1535370215584933

6. Xu J, Cong M, Park TJ, Scholten D, Brenner DA, Kisseleva T. Συμβολή των ινοκυττάρων που προέρχονται από το μυελό των οστών στην ίνωση του ήπατος. Hepatobil Surg Nutr (2015)4:34-47.doi: 10.3978/j.issn.2304-3881.2015.01.01

7. Sakai N, Wada T.T Helper 2 Σηματοδότηση κυτοκινών σε ινοβλάστες που προέρχονται από το μυελό των οστών: Ένας στόχος γιαΝεφρικήΊνωση. J Am Soc Nephrol(2015)26:2896-8. DOI: 10.1681/ASN.2015040469

8. Ράιχ Β, Σμιντμπάουερ Κ, Ροντρίγκεζ Γκόμεζ Μ, Γιοχάνες Χέρμαν Φ, Γκόμπελ Ν, Μπρουλ Χ, κ.ά. Τα ινοκύτταρα αναπτύσσονται έξω από το νεφρό αλλά συμβάλλουν στηνΝεφρικήΊνωσησε ένα μοντέλο ποντικιού. Νεφρό Int (2013)84:78-89.doi:10.1038/ki.2013.84

9. Chen G, Lin SC, Chen J, He L, Dong F, Xu J, et al. Το CXCL16 στρατολογεί πρόδρομους ινοβλαστών που προέρχονται από το BoneMarrow σε πρόδρομους ινοβλαστές που προέρχονται από το BoneMarrowΝεφρικήΊνωση. J Am Soc Nephrol (2011)22:1876-86.doi:10.1681/ASN.2010080881

cistanche και tongkat aliγιανεφρός