Επίδραση της κατάστασης ABH-Secretor του δότη και του λήπτη στη μεταμόσχευση νεφρού με μη συμβατό με ABO ζώντα δότη

Για περισσότερες πληροφορίες. Επικοινωνίαtina.xiang@wecistanche.com

Εισαγωγή: Τα αντιγόνα της ομάδας αίματος ABO εντός μοσχευμάτων εκτίθενται συνεχώς σε αντισώματα αντι-Α Β στον ορό των ληπτών μετά από μη συμβατό με ABO (ABOi)μεταμόσχευση νεφρούκαι είναι καθοριστικής σημασίας για την απόρριψη που προκαλείται από αντισώματα. Μερικά άτομα εκκρίνουν διαλυτά αντιγόνα ομάδας αίματος στα σωματικά υγρά. Σε αυτή τη μελέτη, διερευνήσαμε την επίδραση της κατάστασης εκκρίτη δότη και λήπτη στα αποτελέσματα της μεταμόσχευσης νεφρού ABOi.

Μέθοδοι: Τα δεδομένα από συνολικά 32 ασθενείς με μεταμόσχευση νεφρού από ζώντα δότη ABOi συλλέχθηκαν αναδρομικά μεταξύ 2014 και 2020 στο Νοσοκομείο Δυτικής Κίνας. Ο γονότυπος και ο φαινότυπος τόσο των δοτών όσο και των ληπτών εξετάστηκαν και αξιολογήθηκαν με αλλαγές τίτλου αντι-Α/Β μετά τη μεταμόσχευση, λειτουργία μοσχεύματος και απόρριψη.

Αποτελέσματα: Από τους 32 λήπτες και τους 32 δότες, 23 (71,9 τοις εκατό ) λήπτες και 27 (84,4 τοις εκατό ) δότες είχαν εκκριτικό γονότυπο, ενώ 9 (28,1 τοις εκατό ) λήπτες και 5 (15,6 τοις εκατό ) δότες δεν είχαν. Οι τίτλοι anti-AB μετά τη μεταμόσχευση νεφρού ABOi δεν επηρεάστηκαν σημαντικά από την κατάσταση εκκρίσεως είτε των δοτών είτε των ληπτών. Τα επίπεδα κρεατινίνης ορού (Scr) μετά τη μεταμόσχευση και ο εκτιμώμενος ρυθμός σπειραματικής διήθησης (eGFR) ήταν καλύτερα σε λήπτες με αδύναμο ή μη εκκριτή την ημέρα 30 (Scr P= 0.047, eGFR P= 0). 008), ημέρα 90 (Scr P= 0.010, eGFR P=0.005) και μήνας 9 (eGFR P=0.008) και οι λήπτες από δότες εκκρίσεων είχαν χαμηλότερο επίπτωση απόρριψης μοσχεύματος τον πρώτο χρόνο μετά τη μεταμόσχευση ABOi (P=0.004).

συμπεράσματα: Ένας αδύναμος φαινότυπος κατάστασης έκκρισης βρέθηκε και στους δύο γονότυπους, δηλαδή στα άτομα που εκκρίνουν διαλυτά αντιγόνα καθώς και σε αυτά που δεν εκκρίνουν. Η κατάσταση έκκρισης ABH του λήπτη μπορεί να έχει επίδραση στην πρώιμη νεφρική λειτουργία μετά τη μεταμόσχευση και η κατάσταση έκκρισης ABH του δότη μπορεί να επηρεάσει τη συχνότητα απόρριψης μοσχεύματος.

Λέξεις-κλειδιά: μεταμόσχευση νεφρού, σύστημα ομάδας αίματος ABO, ασυμβατότητα ομάδας αίματος, λειτουργία μοσχεύματος, προσαρμογή

Κάντε κλικ για να μάθετε τα οφέλη του εκχυλίσματος cistanche tubulosa και το cistanche προς πώληση

Cistanche tubulosaείναι ένα κοινό κινέζικο φαρμακευτικό υλικό στη ζωή μας, γνωστό ως τζίνσενγκ της ερήμου, και έχει πολύ σημαντική τονωτική αξία για τον οργανισμό. Εκτός από τη φαρμακευτική του αξία, το Cistanche είναι επίσης ένα πολύ νόστιμο συστατικό. Η μακροχρόνια χρήση δεν μπορεί μόνο να ενισχύσει αποτελεσματικά την αντίσταση του οργανισμού καιασυλία, ανοσία, αλλά έχει επίσης καλή επίδραση στην αναζωογόνηση των νεφρών και στην ενίσχυση του yang, που μπορεί να βελτιώσει τη σεξουαλική απόδοση. οπολυσακχαρίτεςπου περιέχεται στο Cistanche μπορεί να αυξήσει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, να παρατείνει αποτελεσματικά τη διάρκεια ζωής και να μειώσει την πιθανότητα θανάτου. Επομένως, η λήψη του Cistanche Cistanche μπορεί να βελτιώσει πολύ καλά τη λειτουργία του ανοσοποιητικού συστήματος, να μειώσει την πιθανότητα ασθένειας και επίσης να έχει ως αποτέλεσμα την παράταση της ζωής.

ΕΙΣΑΓΩΓΗ

Η μεταμόσχευση νεφρού από ζώντες δότες έχει λύσει σε κάποιο βαθμό το πρόβλημα της έλλειψης οργάνων(1,2). Ωστόσο, περίπου το ένα τρίτο των πιθανών ζώντων δωρητών και ληπτών δεν είναι συμβατοί με το ABO (ABOi)(3). Η μεταμόσχευση νεφρού ABOi είναι μια εναλλακτική λύση για περιπτώσεις που δεν υπάρχουν διαθέσιμοι δότες συμβατοί με ABO (ABOc). Η αρχική ανάπτυξη της μεταμόσχευσης νεφρού ABOi παρεμποδίστηκε από τα υψηλά ποσοστά απόρριψης που προκαλείται από αντισώματα (AMR) μετά τη μεταμόσχευση (4). Επί του παρόντος, το ABOi δεν θεωρείται πλέον αντένδειξη για μεταμόσχευση νεφρού λόγω των πρωτοκόλλων προετοιμασίας για την απομάκρυνση των αντισωμάτων ABO κατά του δότη(5). Τα μακροπρόθεσμα αποτελέσματα δείχνουν το ίδιο ποσοστό επιβίωσης και τη λειτουργία οργάνων μεταξύ της μεταμόσχευσης νεφρού ABOi και ABOc (6).

Για την πρόληψη της AMR, οι προϋπάρχοντες τίτλοι αντι-Α/Β των ληπτών πρέπει να μειωθούν σε ένα ασφαλές εύρος (π.χ. Λιγότερο ή ίσο με 1:16 στα περισσότερα κέντρα μεταμόσχευσης) πριν από τη μεταμόσχευση ABOi (7-9). Δύο εβδομάδες μετά τη μεταμόσχευση νεφρού ABOi, παρά την παρουσία αντιγόνου A/B στο μόσχευμα και την ύπαρξη αντίστοιχων αντισωμάτων στο αίμα του λήπτη, δεν υπήρξε αντίδραση αντιγόνου ABO-αντισώματος και το αλλομόσχευμα ABOi λειτούργησε κανονικά. Αυτή η ανοχή είναι γνωστή ως κατάλυμα(10). Ωστόσο, όταν οι τίτλοι αντι-Α/Β ήταν σε σχετικά ασφαλές εύρος την ημέρα της μεταμόσχευσης, ορισμένα μοσχεύματα εξακολουθούσαν να αποτυγχάνουν, ενώ άλλα επέζησαν από τη μεταμόσχευση ABOi. Επομένως, ο υποκείμενος μηχανισμός πρέπει να αποσαφηνιστεί (1l).

Στη μεταμόσχευση νεφρού ABOi, τα αντιγόνα Α και Β είναι κυρίως παρόντα στο αγγειακό ενδοθήλιο, στα απομακρυσμένα σπειροειδή σωληνάρια και στους συλλεκτικούς πόρους του νεφρού του δότη. Η -γαλακτοσίδη -1,2-φουκοζυλοτρανσφεράση, που κωδικοποιείται από το γονίδιο FUT2, είναι ένα ένζυμο που απαιτείται για το τελικό στάδιο στην οδό σύνθεσης διαλυτών αντιγόνων Α και Β (12, 13). Τα άτομα με FUT2 είναι ικανά να εκκρίνουν διαλυτά αντιγόνα της ομάδας αίματος ABH στα σωματικά υγρά, συμπεριλαμβανομένου του σάλιου (το πιο άφθονο), των ούρων, των δακρύων, του γαστρικού υγρού, της χολής, του αμνιακού υγρού, του ορού, του σπέρματος, του ιδρώτα και του μητρικού γάλακτος (14). Για τους λήπτες των οποίων οι τύποι αίματος είναι της ομάδας αίματος Ο, τα αντιγόνα Η εκκρίνονται στο σωματικό υγρό αντί για τα αντιγόνα Α ή Β, τα οποία είναι ανιχνεύσιμα στο σωματικό υγρό ατόμων με ομάδες αίματος Α και Β, αντίστοιχα. Μετά τη μεταμόσχευση νεφρού ABOi, τα νεφρικά μοσχεύματα μπορούν να εκκρίνουν διαλυτά αντιγόνα A/B/H στο αίμα των ληπτών σύμφωνα με την κατάσταση έκκρισης του δότη(15). Ωστόσο, η επίδραση της κατάστασης έκκρισης των δοτών/ληπτών στη στέγαση των ληπτών παραμένει αμφιλεγόμενη(16, 17). Σε αυτή τη μελέτη, διερευνήσαμε τη συσχέτιση μεταξύ της κατάστασης έκκρισης των δοτών/ληπτών και της πρόγνωσης της μεταμόσχευσης ABOi.

ΜΕΘΟΔΟΙ

Πληθυσμός Μελέτης

Ασθενείς που υποβλήθηκαν σε μεταμόσχευση νεφρού ABOi μεταξύ Σεπτεμβρίου 2014 και Αυγούστου 2020 στο ίδρυμά μας συμμετείχαν εθελοντικά σε αυτή τη μελέτη. Τόσο οι δότες όσο και οι λήπτες εξετάστηκαν για γονότυπους και φαινότυπους της κατάστασης του εκκρίτη. Συλλέξαμε και αναλύσαμε αναδρομικά τα κλινικά δεδομένα των ζευγών δότη-λήπτη που συμπεριλήφθηκαν. Κάθε διαδικασία μεταμόσχευσης νεφρού εγκρίθηκε από το θεσμικό συμβούλιο αναθεώρησης του Νοσοκομείου Δυτικής Κίνας και την Επιτροπή Υγείας της επαρχίας Σιτσουάν(18). Οι λήπτες με προμεταμοσχευτικά αντισώματα αντι-HLA (DSA) ειδικά για δότη αποκλείστηκαν από τη μελέτη. Το πρωτόκολλο μελέτης εγκρίθηκε από την τοπική επιτροπή δεοντολογίας (Αρ. 2019SHEN418).

Μέτρο για Γονότυπο και Φαινότυπο Κατάσταση Εκκρίτη

Πριν από τη μεταμόσχευση νεφρού λήφθηκε περιφερικό αίμα από κάθε ζευγάρι δότη και λήπτη. Ο ορός στη συνέχεια διαχωρίστηκε και χρησιμοποιήθηκε σε εργαστηριακές δοκιμές για την αξιολόγηση της κατάστασης του εκκρίτη. Οι γονότυποι των δοτών/ληπτών προσδιορίστηκαν με χρήση άμεσης αλληλουχίας που βασίζεται σε PCR. Το δεύτερο εξόνιο του FUT2, το οποίο κωδικοποιεί την πρωτεΐνη, ενισχύθηκε με PCR χρησιμοποιώντας τους εκκινητές ενίσχυσης FUT2-F(5'-AGCGCCCCGGGCCT CCATCTCC-3') και FUT2-R(5' -GGAACCATGTGCTT CTCATGCCCG-3'). Ο τελικός όγκος του μίγματος PCR ήταν 20 ul, το οποίο περιείχε 10 ul GoTaqGreenMasterMix (Promega, ΗΠΑ), 6,8 ul νερό χωρίς νουκλεάση και 2 ul δείγματος DNA (περίπου 50-100 ng ). Η τελική συγκέντρωση των εκκινητών ήταν 0,3 umol/L. Το μίγμα της αντίδρασης υποβλήθηκε σε αρχική μετουσίωση στους 94 βαθμούς για 5 λεπτά, ακολουθούμενη από 32 κύκλους ενίσχυσης (94 βαθμοί για τους 30 δευτ., 59 βαθμούς C για 30 δευτ., 72 βαθμούς για 90 δευτ.). Οι γονότυποι FUT2 στη συνέχεια προσδιορίστηκαν με αμφίδρομη αντίδραση προσδιορισμού αλληλουχίας σε έναν προσδιοριστή αλληλουχίας γονιδίου ABI 3130 με κιτ αλληλουχίας BigDye τερματιστή v3.1 (ABI, ΗΠΑ). Οι εκκινητές προσδιορισμού αλληλουχίας που χρησιμοποιήθηκαν ήταν FUT2-F και FUT2-R, και η μέθοδος αιθανόλης/οξικού νατρίου χρησιμοποιήθηκε για τον καθαρισμό των ενισχυμένων προϊόντων της αντίδρασης προσδιορισμού αλληλουχίας.

Η κατάσταση του εκκρίτη φαινοτύπου προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας τη δοκιμή συγκόλλησης Wiener(19). Συνολικά 5 έως 10 ml σάλιου συλλέχθηκαν από τον δότη/λήπτη και αποθηκεύτηκαν σε έναν αποστειρωμένο δοκιμαστικό σωλήνα. Στη συνέχεια, το σάλιο τοποθετήθηκε σε λουτρό ζέοντος νερού για 10 λεπτά και στη συνέχεια εκχυλίστηκε σε φυγόκεντρο στις 2500 rpm για 10 λεπτά. Τα ακόλουθα δείγματα προστέθηκαν σε τέσσερις διαφορετικούς σωλήνες: μία σταγόνα σάλιου και μία σταγόνα ορού αντι-Α προστέθηκαν στον πρώτο σωλήνα, μία σταγόνα σάλιου και μία σταγόνα ορού αντι-Β προστέθηκαν στον δεύτερο σωλήνα και μία Σταγόνα φυσιολογικού ορού και μία σταγόνα ορού αντι-Α προστέθηκαν στον τρίτο σωλήνα και μία σταγόνα φυσιολογικού ορού και μία σταγόνα ορού αντι-Β στον τέταρτο σωλήνα. Μετά από 20 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (16-20 βαθμός), μια σταγόνα 5 τοις εκατό εναιωρήματος Α ερυθροκύτταρα προστέθηκε στον πρώτο και τρίτο σωλήνα και μια σταγόνα 5 τοις εκατό εναιώρημα Βερυθροκύτταρα προστέθηκε στον δεύτερο και τον τέταρτο σωλήνα. Μετά από επώαση για 20 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (16-20 βαθμός), όλοι οι σωλήνες εξετάστηκαν για παρουσία ή απουσία αιμοσυγκόλλησης. Η απουσία συγκόλλησης στον πρώτο και τον δεύτερο σωλήνα έδειξε τον εκκριτικό φαινότυπο. Η ίδια ισχύς συγκόλλησης μεταξύ των δύο πρώτων σωλήνων και των δύο τελευταίων σωλήνων σημαίνει τον μη εκκριτικό φαινότυπο, ενώ μια σαφώς ασθενέστερη συγκόλληση στους δύο πρώτους σωλήνες θεωρείται ως ο φαινότυπος ασθενούς εκκριτικού.

Αρχές ανοσοκαταστολής και προετοιμασίας

Τριπλή από του στόματος ανοσοκατασταλτική θεραπεία που περιλαμβάνει τακρόλιμους (Tac; 3 mg/ημέρα), μυκοφαινολάτη μοφετίλ (MMF; 1500 mg/ημέρα) ή εντερικά επικαλυμμένο μυκοφαινολικό νάτριο (EC-MPS; 1080 mg/ημέρα),

και πρεδνιζόνη (Pred; 5 mg/ημέρα) ξεκίνησαν 2 έως 4 εβδομάδες πριν από τη μεταμόσχευση ABOi. Σύμφωνα με τον αντιληπτό ανοσολογικό κίνδυνο, ο οποίος εξαρτάται από τα αντιδραστικά αντισώματα (PRA), τη βασιλιξιμάμπη (20 mg τις ημέρες 0 και 4) ή την αντιθυμοκυτταρική σφαιρίνη (ATG; 1 mg/kg τις ημέρες 0 έως 3 ή 0 έως 4) χρησιμοποιήθηκαν. Τα πρωτόκολλα προετοιμασίας που χρησιμοποιήθηκαν για τη μεταμόσχευση νεφρού από ζωντανό δότη ABOi εξατομικεύτηκαν ανάλογα με το αρχικό επίπεδο αντισωμάτων της ομάδας αίματος. Οι λήπτες των οποίων οι αρχικοί τίτλοι αντισωμάτων ομάδας αίματος (IgG και IgM) ήταν μικρότεροι από 1:8 υποβλήθηκαν σε προηγούμενη αγωγή μόνο με ανοσοκατασταλτικούς παράγοντες. Οι λήπτες των οποίων ο αρχικός τίτλος αντισωμάτων ομάδας αίματος ήταν ίσος με 1:16 έλαβαν από του στόματος ανοσοκατασταλτικά και υποβλήθηκαν σε πλασμαφαίρεση ανταλλαγής πλάσματος/διπλής διήθησης (PE/DFPP). Οι λήπτες με αρχικούς τίτλους αντισωμάτων ομάδας αίματος Μεγαλύτεροι ή ίσοι με 1:32 έλαβαν από του στόματος ανοσοκατασταλτικά, ενδοφλέβια ριτουξιμάμπη και PE/DFPP για να διασφαλίσουν ότι ο τίτλος ABOi την ημέρα της επέμβασης ήταν Μικρότερος ή ίσος με 1:8. Το Tac και το Pred από το στόμα διακόπηκαν την ημέρα της μεταμόσχευσης και η δόση του MMF αυξήθηκε στα 2000 mg/ημέρα (MMF) ή στα 1440 mg/ημέρα (EC-MPS). Η ενδοφλέβια μεθυλπρεδνιζολόνη χορηγήθηκε διεγχειρητικά σε δόση 500 mg και 200 ​​mg/ημέρα τις ημέρες 1 έως 3 μετά τη μεταμόσχευση, ακολουθούμενη από από του στόματος Pred (60 mg/ημέρα, μειώθηκε σε 5 mg/ημέρα εντός 2 εβδομάδων). Το Tac ξεκίνησε ξανά την ημέρα 2 μετά τη μεταμόσχευση. Το κατώτερο επίπεδο στόχου του Tac ήταν 5 έως 10 ng/ml για τους πρώτους 3 μήνες, 4 έως 8 ng/ml για τους μήνες 4 έως 12 και 4 έως 6 ng/ml έπειτα.

Ορισμός Κλινικών Παραμέτρων

Τα αρχικά επίπεδα τίτλου αντισωμάτων αντι-Α/Β ορίστηκαν ως ο τίτλος αντισώματος αντι-Α/Β των ληπτών πριν από οποιαδήποτε ανοσοτροποποιητική θεραπεία. Ο προμεταμοσχευτικός τίτλος αντισώματος αντι-Α/Β ορίστηκε ως επίπεδα τίτλου αντισώματος αντι-Α/Β αμέσως πριν από τη μεταμόσχευση νεφρού. Οι τίτλοι μετά τη μεταμόσχευση παρακολουθήθηκαν τις ημέρες 1,3,7, 14, καθώς και τους μήνες 1,3,6,9,12,18 και 24 μετά τη μεταμόσχευση. Χρησιμοποιήσαμε μια τεχνική κάρτας gel καθ' όλη τη διάρκεια της μελέτης για τη μέτρηση του αντι- τίτλους IgM και IgG δότη.

Για να διερευνήσουμε τη διακύμανση των αντισωμάτων της ομάδας αίματος μετά από αλλογενή μεταμόσχευση νεφρού ABOi, εστιάσαμε στο συνεχές επίπεδο και στην πρώτη αλλαγή των τίτλων αντισωμάτων αντι-Α/Β. Ο ορισμός της αύξησης του τίτλου ήταν η πρώτη φορά που ένας ή περισσότεροι τίτλοι ορού log2 των επιπέδων αντισωμάτων ομάδας αίματος προωθήθηκαν μετά τη μεταμόσχευση. Ομοίως, η μείωση του τίτλου ορίστηκε ως η πρώτη φορά που μία ή περισσότερες μειώσεις του τίτλου log2 ορού του επιπέδου αντισωμάτων της ομάδας αίματος. Προσδιορίστηκε επίσης ο χρόνος από την ημέρα της μεταμόσχευσης έως την αύξηση/μείωση του τίτλου.

Η νεφρική λειτουργία μετρήθηκε με τα επίπεδα κρεατινίνης (Scr) ορού και τον εκτιμώμενο ρυθμό σπειραματικής διήθησης (eGFR), σύμφωνα με τον τύπο CKD-EPI (20), ο οποίος μετρήθηκε την ημέρα της μεταμόσχευσης και τις ημέρες 1,3,7,14. και επίσης στους μήνες 1,3,6,9,12,18 και 24 μετά τη μεταμόσχευση. Το προμεταμοσχευτικό Scr και το προμεταμοσχευτικό eGFR ορίστηκαν ως τα επίπεδα Scr και eGFR την ημέρα της μεταμόσχευσης. Η απόρριψη μοσχεύματος ορίστηκε ως η κλινική διάγνωση απόρριψης μοσχεύματος από κλινικά συμπτώματα, όπως ολιγουρία ή οίδημα, ή σημαντική αύξηση του Scr άνω του 50 τοις εκατό εντός 3 ημερών, κάτι που δεν εξηγήθηκε από άλλους λόγους. Στη συνέχεια πραγματοποιήθηκε βιοψία σε όλους τους ασθενείς που είχαν κλινικά διάγνωση απόρριψης μοσχεύματος.

Μέθοδοι Ομαδοποίησης

Λόγω της ποικιλίας των αποτελεσμάτων με γονότυπους και φαινότυπους κατάστασης έκκρισης, οι τίτλοι αντι-Α/Β λήπτες μετά τη μεταμόσχευση καινεφρική λειτουργίασυγκρίθηκαν με βάση τις ακόλουθες μεθόδους ομαδοποίησης με σήμανση I-IV: (α) I, λήπτες από εκκρίτες γονότυπου έναντι λήπτες από μη εκκριτές γονότυπου· (β) I, λήπτες από εκκρίτες φαινοτύπου έναντι λήπτες από φαινοτύπου ασθενούς ή μη εκκρίτες· (γ)ΙΙΙ, λήπτες γονότυπου έναντι ληπτών μη εκκριτών γονότυπου. και (δ) IV, λήπτες φαινοτύπου έναντι ληπτών ασθενούς ή μη-εκκριτή φαινοτύπου. Εφόσον διαπιστώσαμε ότι οι δύο κοόρτες που διαιρούνται με τη μέθοδο III ήταν ακριβώς οι ίδιες με αυτές που διαιρούνται με τη μέθοδο IV, τα αποτελέσματα μεταξύ των δύο μεθόδων ήταν επίσης τα ίδια.

Στατιστική ανάλυση

Όλες οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με χρήση λογισμικού R (έκδοση 3.4.4). Τα αποτελέσματα της έρευνας παρουσιάζονται ως μέση ± τυπική απόκλιση (SD) ή διάμεσος (εύρος). Οι μέσες τιμές των ομάδων των κανονικά κατανεμημένων δεδομένων συγκρίθηκαν με τη χρήση δοκιμών t Student, ενώ οι δοκιμές αθροίσματος κατάταξης Wilcoxon χρησιμοποιήθηκαν για τη σύγκριση μη κανονικά κατανεμημένων δεδομένων. Επιπλέον, χρησιμοποιήθηκαν τεστ chi-square ή ακριβείς δοκιμές Fisher για τη σύγκριση κατηγορικών μεταβλητών. Οι καμπύλες επιβίωσης υπολογίστηκαν με ανάλυση Kaplan-Meier και έγιναν συγκρίσεις μεταξύ των ομάδων χρησιμοποιώντας τη δοκιμασία λογαριθμικής κατάταξης. Η στατιστική σημασία ορίστηκε στο P<>

ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ

Από 98 διαδοχικούς ασθενείς που υποβλήθηκαν σε μεταμόσχευση νεφρού ABOi από ζωντανό δότη στο West China Hospital, στο Πανεπιστήμιο Sichuan, Κίνα, από τον Σεπτέμβριο του 2014 έως τον Αύγουστο του 2020, 32 ασθενείς και οι αντίστοιχοι δότες τους συμμετείχαν σε αυτή τη μελέτη και υποβλήθηκαν σε δοκιμές τόσο για γονότυπους όσο και για φαινότυπους της κατάστασης του εκκρίτη πριν μεταμόσχευση νεφρού. Η κατανομή των εκκριτικών γονότυπων ή φαινοτύπων συνοψίζεται στον Πίνακα 1. Από τους 32 λήπτες και τους 32 δότες που πληρούσαν τα κριτήρια συμπερίληψης, οι 23 (71,9 τοις εκατό ) αποδέκτες ήταν γονότυποι εκκρίματος και το 9 (28,1 τοις εκατό ) όχι, ενώ το 27 (84 τοις εκατό). ) οι δότες ήταν εκκριτικοί γονότυποι και 5 (15,6 τοις εκατό ) όχι. Και οι εννέα λήπτες μη εκκριτικού γονότυπου και οι πέντε δότες μη εκκριτικού γονότυπου εμφάνισαν φαινότυπο ασθενούς ή μη εκκριτικού, ενώ 49/50 άτομα εκκριτικού γονότυπου παρουσίασαν φαινότυπο εκκρίτη (Εικόνα 3). Ωστόσο, ένας δότης με τον εκκριτικό γονότυπο παρουσίασε φαινότυπο ασθενούς έκκρισης.

Τα κλινικά χαρακτηριστικά των 64 ατόμων (32 λήπτες και 32 δότες) παρουσιάζονται στον Πίνακα 2. Οι λήπτες ήταν κυρίως άνδρες (n=23, 71,9%) και οι δότες ήταν κυρίως γυναίκες (n=26 ,81,3 τοις εκατό ).Η διάμεση ηλικία ήταν 50(32-67) για τους δότες και 30,5(20-43) για τους λήπτες. 23 (71,9 τοις εκατό) υποβλήθηκαν σε μετάγγιση πλάσματος. Ο διάμεσος χρόνος παρακολούθησης σε αυτή τη μελέτη ήταν 331,5 (εύρος,53-81l) ημέρες. Κανένας από τους 32 ασθενείς δεν είχε υποβληθεί σε μεταμόσχευση στο παρελθόν. Επιπλέον, 5 από τους 32 ασθενείς είχαν θετικό προμεταμοσχευτικό PRA και έλαβαν θεραπεία με ATG.

Οι συσχετισμοί μεταξύ της διακύμανσης των τίτλων των αντισωμάτων αντι-Α/Β και της κατάστασης εκκρίτη δότη ή λήπτη παρουσιάζονται στον Πίνακα 3 και στο Συμπληρωματικό Υλικό 1, αντίστοιχα. Συνολικά, επτά δότες υποβλήθηκαν σε αύξηση τίτλου αντισωμάτων IgG και 13 δότες υποβλήθηκαν σε αύξηση τίτλου αντισωμάτων IgM μετά τη μεταμόσχευση, ενώ μειώσεις τίτλου αντισωμάτων IgG και IgM μετά τη μεταμόσχευση παρατηρήθηκαν σε 23 και 22 δότες, αντίστοιχα. Ωστόσο, δεν υπήρχε σημαντική διαφορά στις συχνότητες ανύψωσης και μείωσης του τίτλου. Σημαντική διαφορά στον χρόνο που απαιτείται για μία μείωση του τίτλου log2 IgM παρατηρήθηκε στους λήπτες μεταξύ των δύο ομάδων δοτών γονότυπου (από εκκρίνοντες δότες γονότυπου έναντι από δότες μη εκκρινόμενου γονότυπου, P=0.023). Ο αριθμός των ημερών που απαιτούνται για μία μείωση του τίτλου log2 IgM μεταξύ των δύο ομάδων δοτών φαινοτύπου (από δότες θετικού εκκρινόμενου φαινοτύπου έναντι δότες ασθενούς ή αρνητικού εκκρινόμενου φαινοτύπου) παρουσίαζε την ίδια τάση αλλά δεν ήταν στατιστικά διαφορετικός (p=0). 053). Ωστόσο, οι ημέρες που απαιτούνται για μία αύξηση log2 των IgG και IgM ή μείωση της IgG δεν ήταν σημαντικά διαφορετικές μεταξύ των κοορτών που ομαδοποιήθηκαν με τις τέσσερις μεθόδους (Πίνακας 3).

Το Σχήμα 1 δείχνει τις αλλαγές στο eGFR και το Scr μετά από μεταμόσχευση νεφρού και "Συμπληρωματικό υλικό 2 παρουσιάζει τις αντίστοιχες τιμές P του eGFR ή Scr μεταξύ ομάδων σύμφωνα με διαφορετικές μεθόδους ομαδοποίησης. Δεν υπήρχε στατιστική διαφορά στο eGFR και το Scr πριν από τη μεταμόσχευση μεταξύ των διαφόρων μεθόδων ομαδοποίησης . Ωστόσο, οι παραλήπτες με αδύναμη ή μη εκκριτική κατάσταση έτειναν να έχουν καλύτερο eGFR την ημέρα 30(P=0.008), την ημέρα 90(P=0.005) και τον μήνα 9 (P{{{ 10}}.008) σε σύγκριση με εκείνα με κατάσταση εκκρίτη. Επίσης, χαμηλότερη Scr παρατηρήθηκε την ημέρα 30 (P=0.047) και την ημέρα 90 (P{=0.010) στους λήπτες με ασθενή Είναι ενδιαφέρον ότι οι παραλήπτες με μη εκκριτές έτειναν να ξοδεύουν περισσότερο χρόνο (P=0.053) για να φτάσουν σε ένα χαμηλότερο ελάχιστο επίπεδο Scr (P=0.080), αλλά τα αποτελέσματα δεν ήταν στατιστικά διαφορετικό (Συμπληρωματικό υλικό 1). Επιπλέον, οι λήπτες από εκκρίτες φαινοτύπου υποβλήθηκαν σε μικρότερες ημέρες για να φτάσουν στο ελάχιστο επίπεδο Scr σε σύγκριση με λήπτες από αδύναμο ή μη εκκριτικό φαινότυπο (5 da ys έναντι 7 ημερών, P=0.024), όπως εμφανίζεται στον Πίνακα 3.

Πραγματοποιήθηκαν βιοψίες σε 5 λήπτες που διαγνώστηκαν κλινικά με απόρριψη μοσχεύματος και στη συνέχεια 3 λήπτες αποδείχθηκαν με βιοψία. Από αυτούς τους 5 λήπτες που ανέπτυξαν απόρριψη, μόνο 1 λήπτης ήταν με θετικό PRA προμεταμοσχεύματος. Απόρριψη με μεσολάβηση αντισώματος (ABMR) και απόρριψη που προκαλείται από Τ-κύτταρα (TCMR) παρατηρήθηκαν σε 2 και 1 λήπτες, αντίστοιχα. Οι υπόλοιποι 2 ασθενείς είχαν τυπικά κλινικά συμπτώματα και αξιοσημείωτη αύξηση του Scr αλλά τα αποτελέσματα της βιοψίας δεν έδειξαν απόρριψη. Εξακολουθούσαν να θεωρούνται ως λήπτες με κλινική διάγνωση απόρριψης μοσχεύματος, λόγω των τυπικών κλινικών συμπτωμάτων που δεν μπορούν να εξηγηθούν με άλλους λόγους και του γεγονότος ότι έλαβαν θεραπεία για απόρριψη πριν από τη βιοψία. Ο Πίνακας 4 εμφανίζει τον αριθμό των ληπτών με απόρριψη μοσχεύματος σύμφωνα με διαφορετικές μεθόδους ομαδοποίησης και οι διαφορές μεταξύ των ληπτών δοτών εκκριτικών και ληπτών μη εκκριτικών δοτών ήταν στατιστικά σημαντικές (P=0.018 και P=0 .034,

Τεστ Chi-square). Το Σχήμα 2 δείχνει τις καμπύλες επιβίωσης της απόρριψης μοσχεύματος σύμφωνα με τις διαφορετικές καταστάσεις εκκρίσεων δοτών και ληπτών (οι καμπύλες επιβίωσης τριών απορρίψεων μοσχεύματος που έχουν αποδειχθεί με βιοψία παρουσιάζονται στο Συμπληρωματικό 3). Οι λήπτες δοτών γονότυπου και φαινοτύπου έχουν μια στατιστική τάση να υφίστανται καλύτερη επιβίωση χωρίς απόρριψη. Ωστόσο, ο χρόνος παρακολούθησης των 2 ληπτών που δεν είχαν απόρριψη από δότες μη εκκριτικού γονότυπου είναι σχετικά σύντομος και 0 τοις εκατό επιβίωση

ΣΥΖΗΤΗΣΗ

Ο φραγμός της ομάδας αίματος ABO καταλύθηκε επιτυχώς με κατάλληλα πρωτόκολλα απευαισθητοποίησης πριν από τη μεταμόσχευση νεφρού. Προηγούμενες μελέτες από διάφορα κέντρα έχουν αναφέρει συγκρίσιμα ποσοστά συνολικής επιβίωσης και μοσχεύματος μεταξύ μεταμόσχευσης ABOi και ABOc (21-23). Ωστόσο, λίγη προσοχή έχει δοθεί στην επιρροή της κατάστασης του εκκρίτη και τα προηγούμενα αποτελέσματα εξακολουθούν να είναι αμφιλεγόμενα. Σε αυτή τη μελέτη, διερευνήσαμε την επίδραση της κατάστασης του εκκρίτη δότη και λήπτη στα αποτελέσματα της μεταμόσχευσης νεφρού. Η AMR μετά τη μεταμόσχευση προκαλείται όχι μόνο από αντισώματα ABO αλλά και από αντισώματα HLA Κατηγορίας Ι και ΙΙ. Για να μειωθεί ο αντίκτυπος των αντισωμάτων HLA, οι λήπτες με DSA αποκλείστηκαν από τη μελέτη. Είναι ενδιαφέρον ότι ο γονότυπος και ο φαινότυπος των εκκριτών δεν ήταν πλήρως συνεπείς (Εικόνα 3). Ο φαινότυπος των ασθενών εκκρίσεων βρέθηκε τόσο σε εκκρίτες γονότυπου όσο και σε μη εκκριτές, κάτι που είναι κοινό στους ανθρώπινους πληθυσμούς της Νότιας Ασίας(24). Αυτό είναι αποτέλεσμα μιας ασθενώς μεταλλαγμένης μορφής της εκκριτικής τρανσφεράσης.

Τα μοσχεύματα από δότες κατάστασης εκκρίσεως είναι ικανά να εκκρίνουν διαλυτά αντιγόνα της ομάδας αίματος Α/Β στο αίμα των ληπτών. Ως εκ τούτου, υποτίθεται ότι τα διαλυτά αντιγόνα της ομάδας αίματος Α/Β μπορεί να συνδεθούν με τα αντισώματα αντι-Α/Β των ληπτών και να μειώσουν τους τίτλους μετά τη μεταμόσχευση, αποτρέποντας τη συχνότητα εμφάνισης AMR. Εκτός από τα ερυθρά αιμοσφαίρια (ερυθρά αιμοσφαίρια), τα αντιγόνα της ομάδας αίματος ABO κατανέμονται επίσης στα λεμφοκύτταρα, στα αιμοπετάλια και στα περισσότερα επιθηλιακά και ενδοθηλιακά κύτταρα, συμπεριλαμβανομένου του αγγειακού ενδοθηλίου, των περιφερικών σπειροειδών σωληναρίων και των συλλεκτικών αγωγών του νεφρού δότη (25). Οι τίτλοι αντι-Α/Β μετά τη μεταμόσχευση, που αντικατοπτρίζουν την ικανότητα δέσμευσης με αντιγόνα στο νεφρό μοσχεύματος, έχουν θεωρηθεί ότι παίζουν σημαντικό ρόλο στη συχνότητα εμφάνισης AMR(26).

Οι περισσότεροι λήπτες υποβλήθηκαν σε μία ή περισσότερες μειώσεις τίτλου, υποδηλώνοντας καλή πρόοδο μετά τη μεταμόσχευση. Η μείωση των τίτλων μπορεί να οφείλεται στην αραίωση που προκαλείται από την επέκταση του όγκου του αίματος μετά την επέμβαση, την εξουδετέρωση του εκκρινόμενου αντιγόνου ή τη δέσμευση και προσρόφηση του μοσχεύματος (27). Αύξηση τίτλου βρέθηκε επίσης σε ορισμένους λήπτες, η οποία συσχετίστηκε με αυξημένα ποσοστά απώλειας μοσχεύματος(28). Ωστόσο, η ανύψωση ή η μείωση του τίτλου μετά τη μεταμόσχευση δεν συσχετίστηκε σημαντικά με την κατάσταση έκκρισης των δοτών, η οποία ευθυγραμμίστηκε με τα αποτελέσματα προηγούμενων μελετών. Επιπλέον, οι Kim et al. διαπίστωσε ότι οι τίτλοι αντισωμάτων αντι-Α/Β μετά τη μεταμόσχευση δεν επηρεάζονταν επίσης από την κατάσταση εκκρίτη του δότη. Ωστόσο, οι τίτλοι IgM έδειξαν ταχεία μείωση σε λήπτες από δότες με μη εκκριτή (17). Παρατηρήσαμε μια παρόμοια τάση ταχείας μείωσης IgM στη μελέτη μας. Αυτό θα μπορούσε να εξηγηθεί από την έλλειψη απορρόφησης διαλυτού αντιγόνου από το μη εκκριτικό μόσχευμα, και στη συνέχεια, η σύνδεση του αντισώματος και του αντιγόνου στο αλλομόσχευμα ενισχύθηκε. Ωστόσο, αυτό το εύρημα μπορεί να επηρεαστεί από τη συχνότητα των ελέγχων τίτλου IgM στην περίοδο μετά τη μεταμόσχευση και απαιτεί μια άλλη μελέτη με περισσότερες περιπτώσεις και πιο συχνές αξιολογήσεις τίτλου. Επιπλέον, η μείωση της IgG δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ της εκκρίνουσας και της μη εκκρίνουσας ομάδας δότη. Αυτό μπορεί να οφείλεται στον κυρίαρχο τύπο IgM στα αντισώματα αντι-Α/Β και επομένως, το IgM μπορεί να επηρεάζεται περισσότερο από την απορρόφηση της διαλυτής ABH (29).

Σε αυτή τη μελέτη, διαπιστώσαμε ότι οι λήπτες δοτών εκκρίσεων έτειναν να εμφανίζουν καλύτερη νεφρική λειτουργία και χαμηλότερη συχνότητα απόρριψης μοσχεύματος, αλλά τα αποτελέσματα σχετικά με τη βελτίωση της νεφρικής λειτουργίας μεταξύ των δύο ομάδων δεν ήταν στατιστικά σημαντικά. Σε αυτό το σημείο, τα αποτελέσματα προηγούμενων μελετών είναι αντιφατικά. Οι Drexler et al. πίστευαν ότι οι ασθενείς που έλαβαν μεταμόσχευση νεφρού από εκκριτικό δότη υπέστησαν σημαντική βελτίωση στην πρώιμη νεφρική λειτουργία μετά τη μεταμόσχευση, με σημαντικό αντίκτυπο στην χυμική απόρριψη(16). Ωστόσο, οι Kim et al. διαπίστωσε ότι τα διαλυτά αντιγόνα ABH που παράγονται από μοσχεύματα από δότες εκκρίσεων δεν επηρέασαν τη νεφρική λειτουργία και την απόρριψη του μοσχεύματος στους λήπτες(17). Κατά τη γνώμη μας, παρόλο που οι τίτλοι αντι-Α/Β μετά τη μεταμόσχευση δεν επηρεάζονται από την κατάσταση εκκρίσεως του δότη, διαλυτό Τα αντιγόνα που εκκρίνονται από το μόσχευμα του εκκριτικού δότη μπορεί να δεσμεύουν συνεχώς τα αντισώματα της ομάδας αίματος που κυκλοφορούν, έχοντας προστατευτική επίδραση στη νεφρική λειτουργία και αποτρέποντας την απόρριψη του μοσχεύματος.

Εκτός από την κατάσταση έκκρισης των δοτών, διερευνήσαμε τη συσχέτιση μεταξύ της κατάστασης εκκρίτη λήπτη και της πρόγνωσης μετά τη μεταμόσχευση. Από όσο γνωρίζουμε, αυτή είναι η πρώτη μελέτη που αξιολογεί τον αντίκτυπο της κατάστασης του εκκρίτη του λήπτη στα αποτελέσματα της μεταμόσχευσης νεφρού ABOi. Οι τίτλοι αντι-Α/Β μετά τη μεταμόσχευση δεν επηρεάστηκαν από την κατάσταση έκκρισης του λήπτη, παρόμοια με την κατάσταση του εκκρίτη δότη. Ωστόσο, ανακαλύψαμε ότι η νεφρική λειτουργία επηρεάστηκε σημαντικά από την κατάσταση έκκρισης των ληπτών. Αυτοί οι λήπτες με αδύναμο ή μη εκκριτικό παρουσίασαν καλύτερη νεφρική λειτουργία και τάση προς χαμηλότερο ποσοστό απόρριψης μοσχεύματος. Στη συνέχεια υποθέσαμε ότι η κατάσταση έκκρισης των ληπτών μπορεί με κάποιο τρόπο να οδηγήσει σε αλλαγή στα αντισώματα αντι-Α/Β και να επηρεάσει τη λειτουργία του μοσχεύματος. Συνολικά, οι ακριβείς μηχανισμοί με τους οποίους οι λήπτες φαινοτύπου που δεν εκκρίνουν παρουσιάζουν καλύτερη νεφρική λειτουργία παραμένουν άγνωστοι και απαιτούν περαιτέρω έρευνα.

Οι κύριοι περιορισμοί της μελέτης μας περιλαμβάνουν τον αναδρομικό σχεδιασμό και τον σχετικά σύντομο χρόνο παρακολούθησης. Επιπλέον, λόγω της σχετικά πρόσφατης ανάπτυξης της τεχνολογίας μεταμόσχευσης νεφρού ABOi, η μελέτη μας περιορίστηκε από τον αριθμό των δειγμάτων. Τεχνικά ζητήματα μέτρησης τίτλου μπορεί επίσης να επηρεάσουν τα αποτελέσματα. Για να ελαχιστοποιήσουμε αυτή την προκατάληψη, επιλέξαμε μια σχετικά ακριβή τεχνική κάρτας gel αντί της συμβατικής μεθόδου σωλήνα. Οι παρατηρήσεις και τα επακόλουθα συμπεράσματα μπορούν να επηρεαστούν από όλους αυτούς τους παράγοντες. Επομένως, θα πρέπει να συλλέγονται περισσότερα δεδομένα για ασθενείς με μεγαλύτερες περιόδους παρακολούθησης και θα έχουν μεγάλη αξία.

Συμπερασματικά, ο γονότυπος και ο φαινότυπος της προσδιοριζόμενης κατάστασης εκκρίτη δεν αντιστοιχούν πλήρως μεταξύ τους. Οι τίτλοι αντι-Α/Β μετά τη μεταμόσχευση νεφρού ABOi δεν επηρεάστηκαν από την κατάσταση έκκρισης των δοτών και των ληπτών. Ωστόσο, η κατάσταση έκκρισης ABH του λήπτη μπορεί να έχει επίδραση στην πρώιμη νεφρική λειτουργία μετά τη μεταμόσχευση και η κατάσταση έκκρισης ABH του δότη μπορεί να επηρεάσει τη συχνότητα απόρριψης μοσχεύματος.