Επίδραση του υδατικού εκχυλίσματος Cistanches Herba στην οστική απώλεια σε αρουραίους με ωοθηκεκτομή

Επικοινωνία: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

Haidong Liang 1,*, Fang Yu 2, Zhihong Tong 1 και Zaiguo Huang 3

1 Hands and feet microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: tongzhih37@sina.cn

2 School of Medicine, Dalian University, Dalian 116033, China; E-Mail: yufangk7@sina.cn

3 Orthopedics Department, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: huangzg41@sina.com

Αφηρημένη:Για να αξιολογηθεί η ικανότητα του εκχυλίσματος Cistanches Herba (CHE) της παραδοσιακής κινεζικής ιατρικής να αποτρέπει την απώλεια οστικής μάζας στον αρουραίο που έχει υποβληθεί σε ωοθηκεκτομή (OVX), το εκχύλισμα Cistanches Herba (CHE) χορηγήθηκε ενδογαστρικά στους αρουραίους. Οι θηλυκοί αρουραίοι αναισθητοποιήθηκαν με πεντοβαρβιτάλη νάτριο (40 mg kg−1, ενδοπεριτοναϊκώς) και οι ωοθήκες τους αφαιρέθηκαν αμφίπλευρα. Οι αρουραίοι στην ομάδα που υποβλήθηκε σε ψευδή επέμβαση αναισθητοποιήθηκαν, υποβλήθηκαν σε λαπαροτομές και συρράφθηκαν χωρίς να αφαιρεθούν οι ωοθήκες τους. Μετά από 1 εβδομάδα ανάκαμψης από τη χειρουργική επέμβαση, οι αρουραίοι OVX χωρίστηκαν τυχαία σε τρεις ομάδες και έλαβαν από του στόματος θεραπεία με H2O (ομάδα OVX) ή CHE (100 ή 200 mg kg−1 ημερησίως) για 3 μήνες. Η ψευδοχειρουργημένη ομάδα (n=8) υποβλήθηκε σε από του στόματος θεραπεία με H2O. Μετά από 3 μήνες, η συνολική οστική πυκνότητα του σώματος (BMD), η περιεκτικότητα σε ανόργανα άλατα (BMC), ο εμβιομηχανικός δείκτης οστών, τα επίπεδα ορυκτών στο αίμα και οι δραστηριότητες αντιοξειδωτικών ενζύμων στο αίμα εξετάστηκαν σε επίμυες που υποβλήθηκαν σε εικονική επέμβαση, υποβλήθηκαν σε ωοθηκεκτομή και έλαβαν εκχύλισμα Cistanches Herba. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η θεραπεία με εκχύλισμα Cistanches Herba αύξησε σημαντικά δοσοεξαρτώμενα την οστική πυκνότητα (BMD), την περιεκτικότητα σε ορυκτά οστών (BMC), το μέγιστο φορτίο, τη μετατόπιση στο μέγιστο φορτίο, την καταπόνηση στο μέγιστο φορτίο, το φορτίο στο αυτόματο σπάσιμο, τη μετατόπιση στο αυτόματο σπάσιμο , και το στρες στο αυτόματο διάλειμμα και οι δραστηριότητες των αντιοξειδωτικών ενζύμων του αίματος, μείωσαν τα επίπεδα Ca, Zn και Cu στο αίμα σε σύγκριση με την ομάδα OVX. Αυτό το πείραμα καταδεικνύει ότι η χορήγηση εκχυλίσματος Cistanches Herba σε αρουραίους που έχουν υποβληθεί σε ωοθηκεκτομή αναστρέφει την απώλεια οστού και αποτρέπει την οστεοπόρωση.

Λέξεις-κλειδιά:ωοθηκεκτομή; αρουραίος; οστό; αντιοξειδωτικό; Cistanches Herba

Cistanches Herba

1. Εισαγωγή

Η οστεοπόρωση είναι μια ασθένεια γήρανσης που σχετίζεται με απώλεια οστικής μάζας που συχνά εμφανίζεται χωρίς συμπτώματα έως ότου η μικροαρχιτεκτονική επιδείνωση γίνει τόσο σημαντική που το κάταγμα των οστών εμφανίζεται πάντα στο σημείο όπου η μείωση της οστικής μάζας είναι κάτω από αυτή που απαιτείται για την ακεραιότητα των οστών. Η οστεοπόρωση έχει μεγάλη σημασία στην υγειονομική περίθαλψη. Αν και μειωμένα σε μάζα, τα οστά είναι φυσιολογικά όσον αφορά την ανοργανοποίηση, αλλά ιστολογικά, υπάρχει μείωση στο πάχος του φλοιού και στον αριθμό και το μέγεθος των δοκίδων του χονδροειδούς σπογγώδους οστού [1-3].

Τα τελευταία χρόνια έχουν διεξαχθεί πολλές μελέτες σχετικά με αυτή την ασθένεια. Τα συσσωρευμένα δεδομένα έχουν δείξει ότι η απώλεια οιστρογόνων κατά την εμμηνόπαυση συμβάλλει σημαντικά στην παθογένεση της νόσου, επειδή αυτή η ορμόνη είναι ο κύριος αρνητικός ρυθμιστής της δραστηριότητας των οστεοκλαστών [4-6] και οι οστεοκλάστες είναι τα κύρια κύτταρα που είναι υπεύθυνα για την αναδιαμόρφωση των οστών στην οστεοπόρωση. [7].

Η μετεμμηνοπαυσιακή οστεοπόρωση είναι η πιο συχνή μεταβολική νόσος των οστών, χαρακτηρίζεται από ταχεία απώλεια ανοργανοποιημένου οστικού ιστού, διαταραχή της δοκιδωτής αρχιτεκτονικής του οστού και αλλαγές στις κρυσταλλικές ιδιότητες των εναποθέσεων ορυκτών, που έχουν ως αποτέλεσμα τη δομική αστοχία (κάταγμα) του θέσεις πλούσιες σε σπογγώδες οστό, όπως οι σπόνδυλοι, το ισχίο και το περιφερικό αντιβράχιο [8-11]. Η ανεπάρκεια οιστρογόνων θεωρείται ο κύριος καθοριστικός παράγοντας της οστικής απώλειας σε μετεμμηνοπαυσιακές γυναίκες. Οι αρουραίοι και οι σκύλοι με ωοθηκεκτομή έχουν χρησιμοποιηθεί εκτενώς σε μοντέλα οστεοπόρωσης. Το 1996, αναφέρθηκαν οι επιδράσεις της ιβανδρονάτης σε σκύλους με ωοθηκεκτομή [12].

Το Cistanches Herba (CH), ολοπαρασιτικό φυτό του Cistanche deserticola YC Ma, ταξινομείται ως τονωτικό παράγοντα στην ανατολική παραδοσιακή ιατρική και χρησιμοποιείται συνήθως για τη θεραπεία της λήθης, της απώλειας ακοής, της στειρότητας και της χρόνιας δυσκοιλιότητας. Η CH έχει διάφορες φαρμακολογικές δράσεις, συμπεριλαμβανομένων των επιδράσεων κατά του πόνου, αντιφλεγμονώδεις και ανοσοενισχυτικές [13,14]. Μια προηγούμενη μελέτη ανέφερε ότι το Cistanches Herba μπορεί να καθοδηγήσει τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα των οστών (BMSCs) να διαφοροποιηθούν σε οστεοβλάστες, γεγονός που υπόσχεται μια ευνοϊκή προοπτική για τη θεραπεία της οστεοπόρωσης και της διάσπασης των καταγμάτων των οστών [15]. Οι Chen et al. [16] ανέφερε ότι οι πολυσακχαρίτες Cistanches Herba μπορεί να προάγουν τη μετάβαση στον κυτταρικό κύκλο του μυελού των οστών και την ανάκτηση της αιμοποιητικής λειτουργίας σε αναιμικά ποντίκια με καταστολή του μυελού των οστών, να επιταχύνουν την αιματογένεση σε στέλεχος rubrum και στέλεχος μακροπύρηνα.

Σε αυτή τη μελέτη, η οστική πυκνότητα (BMD), η περιεκτικότητα σε ορυκτά οστών (BMC), ο εμβιομηχανικός δείκτης οστών, τα επίπεδα ορυκτών στο αίμα και οι δραστηριότητες αντιοξειδωτικών ενζύμων στο αίμα εξετάστηκαν σε επίμυες που υποβλήθηκαν σε εικονική επέμβαση, σε ωοθηκεκτομή και σε αρουραίους που έλαβαν Cistanches Herba για να μελετηθούν τα αποτελέσματα της θεραπείας με εκχύλισμα Cistanches Herba για την ποιότητα των οστών.

Παραδοσιακή κινέζικη ιατρική εκχύλισμα Cistanches Herba (CHE)

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1. Παρασκευή υδατικών εκχυλισμάτων Cistanches Herba

Το Cistanches Herba συλλέχτηκε από την έρημο στο alxa league της αυτόνομης περιοχής Nei Monggol (Εσωτερική Μογγολία) το 2010.

Ο αποξηραμένος μίσχος του Cistanches Herba εκχυλίστηκε με απεσταγμένο νερό στους 100 βαθμούς για 2 ώρες. Το διάλυμα φυγοκεντρήθηκε σε 4000 r/min για 10 λεπτά. Τα υπολείμματα απομακρύνθηκαν με διήθηση και το συνδυασμένο διήθημα εξατμίστηκε με θέρμανση για να ληφθεί μια επιθυμητή συγκέντρωση (2,1 g ξηρού φυτικού ισοδύναμου εκχυλίσματος/mL). Η απόδοση εκχύλισης ήταν 13,7 τοις εκατό (β/β). Το υδατικό εκχύλισμα αποθηκεύτηκε στους 2-8 βαθμούς.

2.2. Των ζώων

Τριάντα δύο θηλυκοί αρουραίοι Wistar ηλικίας 3 μηνών, με βάρος μεταξύ 240 και 270 g στην αρχή του πειράματος χρησιμοποιήθηκαν για τη μελέτη. Διατηρήθηκαν υπό τυπικές εργαστηριακές συνθήκες με κύκλο φωτός και σκότους 12 ωρών, με ελεύθερη πρόσβαση σε τυπική εργαστηριακή τροφή για αρουραίους και νερό βρύσης.

2.3. Πειράματα σε ζώα.

Οι θηλυκοί αρουραίοι αναισθητοποιήθηκαν με πεντοβαρβιτάλη νάτριο (40 mg kg−1, ενδοπεριτοναϊκώς) και οι ωοθήκες τους αφαιρέθηκαν αμφίπλευρα. Οι αρουραίοι στην ομάδα που υποβλήθηκε σε ψευδή επέμβαση αναισθητοποιήθηκαν, υποβλήθηκαν σε λαπαροτομές και συρράφθηκαν χωρίς να αφαιρεθούν οι ωοθήκες τους. Μετά από 1 εβδομάδα ανάρρωσης από τη χειρουργική επέμβαση, οι αρουραίοι OVX χωρίστηκαν τυχαία σε τρεις ομάδες (n=8 σε κάθε ομάδα) και έλαβαν ενδογαστρική θεραπεία με H2O (ομάδα OVX), εκχύλισμα Cistanches Herba (CHE) (100 ή 200 mg kg −1 ημερησίως) για 3 μήνες. Η εικονική ομάδα (n=8) υποβλήθηκε σε από του στόματος θεραπεία με H2O.

Την τελευταία ημέρα της μελέτης, τα ζώα ζυγίστηκαν και θυσιάστηκαν και συλλέχθηκαν δείγματα αίματος ταυτόχρονα. Τα μηριαία οστά αφαιρέθηκαν και αφαιρέθηκαν από μαλακό ιστό για τη μέτρηση της εμβιομηχανικής δοκιμής.

Όλα τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν σύμφωνα με τα ερευνητικά πρωτόκολλα που καθορίστηκαν από την επιτροπή φροντίδας ζώων της Κίνας.

2.4. Πυκνομετρία Οστών

Η περιεκτικότητα σε μεταλλικά οστά του μηριαίου οστού (BMC) και η οστική πυκνότητα (BMD) προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας ένα Hologic QDR{{0}}W DXA. Το όργανο προσαρμόστηκε για λειτουργία υπερυψηλής ανάλυσης με απόσταση γραμμών 0.0254 cm, ανάλυση 0,0127 cm και ρυθμιστής διαμέτρου 0,9 cm. Τα οστά τοποθετήθηκαν σε ένα τρυβλίο Petri. Για την προσομοίωση της πυκνότητας των μαλακών ιστών που περιβάλλουν τα οστά, χύθηκε νερό της βρύσης γύρω από τα οστά για να επιτευχθεί βάθος 1 cm. Τα αποτελέσματα δίνονται για το BMC και για την περιοχή που μετρήθηκε. Το BMD αυτής της περιοχής υπολογίζεται ως BMC διαιρούμενο με το εμβαδόν. Εκτός από τα αποτελέσματα για το συνολικό μηριαίο οστό, η περιφερική και η μεσαία περιοχή του μηριαίου οστού αναλύθηκαν ως υποπεριοχές [17].

2.5. Εμβιομηχανικός έλεγχος οστών

Τα οστά του μηριαίου οστού διατηρήθηκαν στις 4 μοίρες μέχρι τον προσδιορισμό της αντοχής σε θραύση χρησιμοποιώντας ένα 5-kN Flexure Fixture, διαμορφωμένο για δοκιμές κάμψης τριών σημείων και προσαρτημένο σε μια Instron Universal Testing Machine Model 4502 εξοπλισμένη με 10- Κυψέλη φορτίου kN (Instron, Canton, MA, ΗΠΑ), όπως περιγράφηκε προηγουμένως [18]. Η ταχύτητα σταυρού ήταν 50 mm/min και ο ρυθμός δειγματοληψίας δεδομένων ήταν 10 δείγματα/s. Το μέγιστο φορτίο, η καταπόνηση στο μέγιστο φορτίο, το φορτίο στην αστοχία και η καταπόνηση στην αστοχία προσδιορίστηκαν στα μηριαία οστά χρησιμοποιώντας το λογισμικό Series IX, v 8.08.00 (Instron).

2.6. Βιοχημική Ανάλυση

Τα επίπεδα Ca, Zn και Cu στο αίμα μετρήθηκαν με φασματοφωτομετρία ατομικής απορρόφησης.

Με βάση τη μέθοδο των King και Armstrong [19], η δραστηριότητα της αλκαλικής φωσφατάσης (ALP) προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας φαινυλοφωσφορικό δινάτριο ως υπόστρωμα. Το χρώμα που αναπτύχθηκε διαβάστηκε στα 510 nm σε φασματοφωτόμετρο UV-vis μετά από 10 λεπτά. Οι δραστηριότητες της ALP εκφράστηκαν ως IU/L.

Η συγκέντρωση malondialchehyche (MDA) στο αίμα προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας τη μέθοδο που περιγράφεται από Jain et al. [20], με βάση την αντιδραστικότητα TBA. Εν συντομία, 0.2 mL σφαιρίδια ερυθροκυττάρων ή υπερκείμενο υγρό που λαμβάνεται από ιστούς, 0.8 mL ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών (pH 7,4), 0.025 mL BHT και 0. {19}}.5 mL 30 τοις εκατό TCA προστέθηκαν στους σωλήνες και αναμίχθηκαν. Μετά από 2 ώρες επώασης στους -20 βαθμούς, το μείγμα φυγοκεντρήθηκε (4000 × g) για 15 λεπτά. Μετά από αυτό, λήφθηκε 1 mL υπερκείμενου και προστέθηκε σε κάθε σωληνάριο, και στη συνέχεια 0,075 mL 0,1 M EDTA και

0.25 mL 1 τοις εκατό TBA προστέθηκαν. Αυτοί οι σωλήνες με βιδωτά πώματα επενδυμένα με τεφλόν επωάστηκαν στους 90 βαθμούς σε υδατόλουτρο για 15 λεπτά και ψύχθηκαν σε θερμοκρασία δωματίου. Η οπτική πυκνότητα μετρήθηκε σε 532 για συγκέντρωση MDA στο αίμα.

Η δραστικότητα της υπεροξειδάσης της γλουταθειόνης (GSH-Px) προσδιορίστηκε σύμφωνα με τη μέθοδο των Lawrence και Burk [21]. Το μίγμα της δοκιμασίας αποτελούνταν από 2.0 mL ρυθμιστικού διαλύματος φωσφορικών 75 mM (pH 7.0), 50 μL 60 mM γλουταθειόνης, {{15} },1 mL 30 μονάδων/mL αναγωγάσης γλουταθειόνης, 0,1 mL 15 mM EDTA, 0,1 mL 3 mM NADPH και η κατάλληλη ποσότητα υπερκειμένου ιστού σε τελικό όγκο 3,0 mL . Η αντίδραση ξεκίνησε με την προσθήκη 0,1 mL 7,5 mM H2O2. Ο ρυθμός μεταβολής της απορρόφησης κατά τη διάρκεια της μετατροπής του NADPH σε NADP συν καταγράφηκε φασματοφωτομετρικά στα 340 nm για 3 λεπτά. Η δραστηριότητα GSH-Px για ιστούς εκφράστηκε ως μmoles NADPH που οξειδώθηκε σε NADP συν min−1 mg−1 πρωτεΐνη.

Η δραστικότητα της υπεροξειδικής δισμουτάσης (SOD) προσδιορίστηκε στο αίμα σύμφωνα με τη μέθοδο των Sun et al. [22]. Η αρχή της μεθόδου βασίζεται στην αναστολή της αναγωγής του νιτρομπλε τετραζολίου (NBT) χρησιμοποιώντας το σύστημα οξειδάσης ξανθίνης-ξανθίνης ως γεννήτρια υπεροξειδίου. Η δραστικότητα εκτιμήθηκε στα υπερκείμενα 10000 g εκχυλισμάτων μεθανόλης/χλωροφορμίου (5/3, ν/ν) ομογενοποιημένων ιστών (10 τοις εκατό). Μία μονάδα SOD ορίστηκε ως η ποσότητα ενζύμου που προκαλεί 50 τοις εκατό αναστολή στον ρυθμό μείωσης του NBT.

Η δραστηριότητα της καταλάσης (CAT) μετρήθηκε χρησιμοποιώντας τη μέθοδο του Abei [23]. Προστέθηκε ορός σε μια κυψελίδα που περιείχε 2,89 mL ενός ρυθμιστικού διαλύματος φωσφορικών 50 mmol/L (ρΗ 7.0). Η αντίδραση ξεκίνησε με την προσθήκη 0.1 mL προσφάτως παρασκευασθέντος 30 mmol/L H2O2 για να σχηματιστεί ένας τελικός όγκος 3,0 mL στους 25 βαθμούς. Ο ρυθμός αποσύνθεσης του H2O2 μετρήθηκε στα 240 nm για 5 λεπτά σε φασματοφωτόμετρο. Μία μονάδα (U) CAT ορίστηκε ως η ποσότητα ενζύμου που απαιτείται για την αποσύνθεση 1 nmol H2O2 ανά λεπτό, στους 25 βαθμούς και pH 7,8.

2.7. Στατιστική ανάλυση

Τα πειραματικά αποτελέσματα εκφράστηκαν ως Μέσος όρος ± SD για οκτώ ζώα σε κάθε ομάδα. Οι βιοχημικές παράμετροι αναλύθηκαν στατιστικά χρησιμοποιώντας μια μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης ANOVA, ακολουθούμενη από δοκιμή πολλαπλής σύγκρισης Dunnett (DMCT). P-τιμή του<0.05 was="" considered="" statistically="">

3. Αποτελέσματα

Δύο ζώα εξέπνευσαν κατά τη διάρκεια της μελέτης. Συνεπώς, οι αριθμοί για τις ομάδες στο συμπέρασμα της μελέτης ήταν: 8 στον εικονικό έλεγχο. 7 στην ομάδα OVX. 7 στην ομάδα θεραπείας CHE (100 mg kg−1 ημερησίως) και 8 στην ομάδα θεραπείας CHE (200 mg kg−1 ημερησίως). Δύο ημέρες μετά την επέμβαση, η πρόσληψη τροφής και νερού από τους αρουραίους ήταν ελαφρώς χαμηλότερη από εκείνη πριν από την επέμβαση. Κανένα ζώο δεν έπασχε από μόλυνση και αναβίωση. Δεν παρατηρήθηκαν κλινικά εμφανείς ανεπιθύμητες ενέργειες σε αρουραίους.

Πριν από την επέμβαση, δεν υπήρχε σημαντική (p > {{0}}.01) διαφορά στο σωματικό βάρος των αρουραίων μεταξύ των ομάδων. Το σωματικό βάρος της ομάδας OVX ήταν σημαντικά (p < {0.01)="" χαμηλότερο="" από="" αυτό="" της="" εικονικής="" ομάδας="" (πίνακας="" 1).="" η="" χορήγηση="" εκχυλίσματος="" cistanches="" herba="" σε="" δόση="" 100="" και="" 200="" ​​mg/kg="" ημερησίως="" αύξησε="" σημαντικά="" (p="">< 0,05)="" το="" σωματικό="" βάρος="" των="" αρουραίων="" στην="" ομάδα="" που="" έλαβε="" che="" (100="" και="" 200="" ​​mg/kg="" ημερησίως).="" τα="" δεδομένα="" που="" ελήφθησαν="" από="" ζώα="" έδειξαν="" ότι="" υπήρχαν="" στατιστικά="" σημαντικές="" διαφορές="" μεταξύ="" του="" bmd="" και="" του="" bmc="" της="" ομάδας="" ovx="" και="" του="" εικονικού="" ελέγχου="" (p="">< 0,01).="" όπως="" αναμενόταν,="" η="" χορήγηση="" εκχυλίσματος="" cistanches="" herba="" σε="" δόση="" 200="" mg/kg="" οδήγησε="" σε="" σημαντική="" αύξηση="" της="" bmd="" και="" του="" bmc="" της="" ομάδας="" που="" έλαβε="" che="" (p="">< 0,05,="" p=""><>

4. Συζήτηση

Η οστεοπόρωση είναι μια από τις πιο κοινές διαταραχές που σχετίζονται με την ανεπάρκεια οιστρογόνων και τη γήρανση. Η εμμηνόπαυση έχει ως αποτέλεσμα αυξημένο οστικό μεταβολισμό, ανισορροπία μεταξύ σχηματισμού οστού και οστικής απορρόφησης και καθαρή οστική απώλεια. Η οστική απώλεια που προκαλείται από ανεπάρκεια οιστρογόνων οφείλεται κυρίως στην αύξηση της οστεοκλαστικής οστικής απορρόφησης τόσο σε ανθρώπους όσο και σε πειραματόζωα [24].

Αν και η οστεοπόρωση επηρεάζει τόσο τους ηλικιωμένους όσο και τις γυναίκες, οι μετεμμηνοπαυσιακές γυναίκες αποτελούν το κύριο επίκεντρο της οστεοπόρωσης [25,26]. Μια δραματική ανεπάρκεια γυναικείων ορμονών είναι ο πιο σημαντικός παράγοντας για την οστεοπόρωση των μετεμμηνοπαυσιακών γυναικών. Το μοντέλο αρουραίου OVX χρησιμοποιείται πιο συχνά στην έρευνα για την μετεμμηνοπαυσιακή οστεοπόρωση [27,28], στην οποία η ωοθηκεκτομή οδηγεί σε υπερβολική οστική απορρόφηση έναντι του σχηματισμού οστού αρχικά και προκαλεί απώλεια οστού. Η λειτουργία OVX προκαλεί σημαντική αύξηση του σωματικού βάρους που θα μπορούσε να αποτελέσει οδηγό για την αξιολόγηση της επιτυχίας της επέμβασης [29]. Στο τέλος της παρούσας μελέτης, τα σωματικά βάρη της ομάδας OVX μειώθηκαν σημαντικά σε σύγκριση με αυτά της ψευδούς ομάδας και η θεραπεία με εκχύλισμα Cistanches Herba απέτρεψε πλήρως αυτές τις μειώσεις. Υποθέτουμε ότι το OVX προκάλεσε σοβαρή φυσιολογική δυσφορία που επηρέασε την πρόσληψη τροφής των αρουραίων. Στη συνέχεια, το σωματικό βάρος της ομάδας OVX μειώθηκε σημαντικά.

Η οστική πυκνότητα έχει περιγραφεί ως απλώς ένα υποκατάστατο μέτρο της οστικής αντοχής [30]. Ωστόσο, οι μικροαρχιτεκτονικές ιδιότητες είναι ένας νέος δείκτης για την αξιολόγηση της πραγματικής επίδρασης της θεραπείας στην ποιότητα του δοκιδωτού οστού. Αν και η χαμηλή οστική μάζα είναι ένας σημαντικός παράγοντας κινδύνου για κάταγμα [31], η διατήρηση της αρχιτεκτονικής των δοκιδωτών οστών συμβάλλει σημαντικά στην αντοχή των οστών και μπορεί να μειώσει τον κίνδυνο κατάγματος πέρα ​​από την BMD και την BMC, όπως καταδεικνύεται από μια σειρά μελετών που έχουν αναφέρει στενές συσχετίσεις μεταξύ της μικροδομικής ιδιότητες και την εμβιομηχανική αντοχή των οστών [32,33]. Σε αυτή την εργασία, η BMD και η BMC βρέθηκαν να διαφέρουν σημαντικά μεταξύ των εικονικών ομάδων και των ομάδων με ωοθηκεκτομή. Η θεραπεία με εκχύλισμα Cistanches Herba ενίσχυσε σημαντικά την BMD και την BMC σε αρουραίους OVX. Επιπλέον, η χορήγηση εκχυλισμάτων Cistanches Herba εξακολουθεί να αυξάνει σημαντικά εξαρτώμενα από τη δόση το μέγιστο φορτίο, τη μετατόπιση στο μέγιστο φορτίο, την καταπόνηση στο μέγιστο φορτίο, το φορτίο στο αυτόματο διάλειμμα, τη μετατόπιση στο αυτόματο διάλειμμα και την καταπόνηση σε ομάδες που έλαβαν θεραπεία με CHE. σε σύγκριση με την ομάδα OVX. Αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα οστά του μηριαίου οστού από αρουραίους που τρέφονταν με εκχύλισμα Cistanches Herba είχαν υψηλότερο φορτίο στην αποτυχία και ως εκ τούτου θα μπορούσαν να είναι πιο ανθεκτικά σε κατάγματα λόγω στρες. Επιπλέον, οι αρουραίοι στην ομάδα OVX είχαν υψηλότερα επίπεδα Ca, Zn και Cu στο αίμα από εκείνους στην ψευδή ομάδα. Η χορήγηση εκχυλίσματος Cistanches Herba είχε μειωμένα επίπεδα Ca, Zn και Cu στο αίμα σε αρουραίους OVX.

Η αντίληψη ότι η οξειδωτική κατάσταση είναι σημαντική στην οστεοπόρωση είναι σύμφωνη με την ισχυρή επιδημιολογική συσχέτιση μεταξύ της οστεοπόρωσης και της αθηροσκλήρωσης, μιας ασθένειας στην οποία το οξειδωτικό στρες παίζει σημαντικό ρόλο. Επιπλέον, πρόσφατα παρατηρήθηκε ότι υπάρχει συσχέτιση στις γυναίκες μεταξύ του οξειδωτικού στρες (μετρούμενο με έναν βιοδείκτη του οξειδωτικού στρες, 8-iso-PGF2- ) [34], των επιπέδων αντιοξειδωτικών [35] και μεταλλική πυκνότητα οστών. Κλινικές μελέτες που εξέτασαν τη σχέση μεταξύ του διατροφικού ή/και συμπληρωματικού ασκορβικού και της οστικής μάζας στον άνθρωπο υποδηλώνουν επίσης συσχέτιση με αυξημένη οστική μάζα [36].

Δεδομένου ότι το MDA έχει υψηλή αντιδραστικότητα προς τις αμινομάδες, αναστέλλει τη σύνθεση νουκλεϊκών οξέων και πρωτεϊνών και επίσης απενεργοποιεί τα ένζυμα [37,38]. Έτσι, η μείωση των αντιοξειδωτικών ενζύμων του μηριαίου οστού που παρατηρείται μετά το OVX μπορεί να οφείλεται σε αυξημένη υπεροξείδωση λιπιδίων. Τα αντιοξειδωτικά ένζυμα εμπλέκονται στο αμυντικό σύστημα κατά της βλάβης των ιστών ή των κυτταρικών βλαβών που προκαλούνται από ελεύθερες ρίζες. Μεταβολίζουν είτε ελεύθερες ρίζες είτε ενεργά ενδιάμεσα οξυγόνου σε μη ριζικά προϊόντα. Αυτά τα ένζυμα περιλαμβάνουν μια οικογένεια ενζύμων που εξαρτώνται από τη γλουταθειόνη [39]. Σε αυτή τη μελέτη, αναφέρουμε μια σημαντική μείωση στα επίπεδα των αντιοξειδωτικών ενζύμων, δηλαδή. SOD, GSH-Px, CAT στο αίμα αρουραίων με ωοθηκεκτομή. Αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν ότι η ανεπάρκεια στις ορμόνες των ωοθηκών συσχετίζεται με την αποτυχία καταπολέμησης του οξειδωτικού στρες. Η χορήγηση εκχυλισμάτων Cistanches Herba αύξησε σημαντικά τις δοσοεξαρτώμενες δραστηριότητες SOD, GSH-Px και CAT στο αίμα σε αρουραίους OVX. Αυτά τα αποτελέσματα φαίνεται να υποδεικνύουν καλύτερη προστατευτική δράση του εκχυλίσματος Cistanches Herba έναντι του οξειδωτικού στρες που προκαλείται κατά τη διάρκεια του OVX.

Συνοπτικά, το εκχύλισμα Cistanches Herba είναι αποτελεσματικό στην πρόληψη της οστικής απώλειας που προκαλείται από ανεπάρκεια ορμονών των ωοθηκών, όπως φαίνεται από την BMD του μηριαίου οστού, τις τιμές BMC και τα επίπεδα Ca, Zn και Cu στο αίμα. Καθώς η οστεοπόρωση συνδέεται με το οξειδωτικό στρες, μελέτες αυτού του είδους πιστοποιούν τη σημασία των θεραπευτικών αξιών των αντιοξειδωτικών. Υποθέτουμε ότι το εκχύλισμα Cistanches Herba βελτιώνει την ποιότητα των οστών πιθανώς εν μέρει μέσω της ενίσχυσης των αντιοξειδωτικών ενζύμων των αρουραίων OVX και της μείωσης των μεταλλικών στοιχείων των οστών.

Εκχύλισμα Cistanches Herba: πρόληψη της οστικής απώλειας

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Canalis, Ε.; Giustina, Α.; Bilezikian, JP Μηχανισμοί αναβολικών θεραπειών για την οστεοπόρωση. N. Engl. J. Med. 2007, 357, 905–916.

2. Heaney, RP; Recker, RR; Saville, PD Εμμηνοπαυσιακές αλλαγές στην αναδόμηση των οστών. J. Lab. Clin. Med. 1978, 92, 964–970.

3. McNamara, LM; Ederveen, AGH; Λυών, CG; Τιμή, C.; Schaffer, MB; Weinans, Η.; Prendergast, PJ Ισχύς σπογγώδους οστικού δοκιδωτού ιστού από φυσιολογικούς, ωοθηκοποιημένους και θεραπευμένους με φάρμακο αρουραίους κατά τη διάρκεια της γήρανσης. Bone 2006, 39, 392-400.

4. Compston, JE Θεραπεία ορμονικής υποκατάστασης. Clin. Rheumatol. 1997, 11, 583-596.

5. Meiner, SE Ένα επεκτεινόμενο τοπίο οστεοπόρωσης: Επιλογές θεραπείας σήμερα. Adv. Nurse Pract.1999, 7, 26–31.

6. Aubin, JE; Bonnelye, E. Osteoprotegerin, and its ligand: Ένα νέο παράδειγμα για τη ρύθμιση της οστεοκλαστογένεσης και της οστικής απορρόφησης. Οστεοπόρος. Int. 2000, 11, 905–913.

7. Roodman, GD Advances in bone biology: The osteoclast. Ενδοκρ. Rev. 1996, 17, 308–332.

8. Chestnut, CH, III. Φαρμακευτική θεραπεία: Καλσιτονίνη, διφωσφονικά και αναβολικά στεροειδή. Στην Οστεοπόρωση: Αιτιολογία, Διάγνωση και Διαχείριση. Riggs, BL, Melton, LJ, III, Eds.; Lippincott-Raven: Φιλαδέλφεια, PA, ΗΠΑ, 1995.

9. Quan, Q.-M.; Wu, W.; Li, Υ.-Χ.; Cai, Q.-R. Παραλλαγή στην περιεκτικότητα σε ικαριίνη και φλαβονοειδή των ειδών Barrenwort. J. Med. Plants Res. 2010, 4, 1176–1181.

10. Du, XG; Pan, HZ; Zhang, CY; Zhang, HY; Liu, HM; Chen, ZY; Το εκχύλισμα Zeng, XY Zingiber officinale ρυθμίζει την ανοσοκαταστολή που προκαλείται από τις ακτίνες g σε ποντίκια. J. Med. Plants Res. 2010, 4, 1647–1655.

11. Πασχάλης, Ε.Π. Betts, F.; DiCarlo, Ε.; Mendelsohn, R.; Boskey, AL FTIR μικροφασματοσκοπική ανάλυση βιοψιών ανθρώπινης λαγόνιας ακρολοφίας από το μη θεραπευμένο οστεοπορωτικό οστό. Calcif. Tissue Int. 1997, 61, 487-492.

12. Motoie, Η.; Kanoh, Η.; Ogata, S.; Kawamuki, Κ.; Shikama, Η.; Fujikura, Τ. Πρόληψη της οστικής απώλειας από διφωσφονικό YM175 σε σκύλους με ωοθηκεκτομή με διαιτητικό περιορισμό ασβεστίου. Jpn. J. Pharmacol. 1996, 71, 239-246.

13. Lin, LW; Hsieh, MT; Tsai, FH; Wang, WH; Wu, CR Αντιαισθηματική και αντιφλεγμονώδης δράση που προκαλείται από το Cistanche deserticola σε τρωκτικά. J. Ethnopharmacol. 2002, 83, 177–182.

14. Wu, XM; Gao, XM; Tsim, KW; Tu, PF Μια αραβινογαλακτάνη που απομονώθηκε από τους μίσχους του Cistanche deserticola επάγει τον πολλαπλασιασμό καλλιεργημένων λεμφοκυττάρων. Int. J. Biol. Macromol. 2005, 37, 278-282.

15. Zeng, JC; Fan, YG; Liu, JR; Zeng YR; Yi, CZ; Liang Y. Πειραματική μελέτη της κατευθυντικής διαφοροποίησης των οστικών μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων (BMSCs) σε οστεοβλάστες καθοδηγούμενη από cistanche deserticola που περιέχει ορό. Zhongguo Gu Shang 2010, 23, 606–608.

16. Chen, Z.-W.; Zhu, B.-D.; Xu H.-Y. Πειραματική μελέτη πολυσακχαριτών της ερημικής κιστάνας σε ρυθμιζόμενη αιματογένεση σε ποντίκια με καταθλιπτική αναιμία μυελού των οστών. Πηγούνι. Αψίδα. Παράδοση. Πηγούνι. Med. 2007, 25, 1473–1474.

17. Prakasam, G.; Ναι, JK; Chen, Μ.-Μ.; Castro-Magana, Μ.; Liang, CT; Aloia, JF Επιδράσεις της αυξητικής ορμόνης και της τεστοστερόνης στον σχηματισμό του φλοιώδους οστού και την οστική πυκνότητα σε ηλικιωμένους αρουραίους με ωοθηκεκτομή. Bone 1999, 24, 491-497.

18. McClung, JP; Stahl, CH; Marchitelli, LJ; Morales-Martinez, Ν.; Makin, KM; Young, AJ; Scrimgeour, AG Επιδράσεις της διαιτητικής φυτάσης στην αύξηση του σωματικού βάρους, στη σύνθεση του σώματος και στην εμβιομηχανική των οστών σε αναπτυσσόμενους αρουραίους που τρέφονταν με δίαιτα χαμηλής περιεκτικότητας σε ψευδάργυρο. J. Nutr. Biochem. 2006, 170, 190–196.

19. King, EJ; Armstrong, AR Μια βολική μέθοδος για τον προσδιορισμό της δραστηριότητας της φωσφατάσης ορού και χολής. Μπορώ. Med. Αναπλ. J. 1934, 31, 376–381.

20. Jain, SK; McVie, R.; Duett, J.; Herbst, JJ Ερυθροκυτταρική μεμβράνη υπεροξείδωση λιπιδίων και γλυκοζυλιωμένη αιμοσφαιρίνη στον διαβήτη. Diabetes 1989, 38, 1539-1543.

21. Lawrence, RA; Burk, Δραστηριότητα υπεροξειδάσης γλουταθειόνης RF σε ήπαρ αρουραίου με έλλειψη σεληνίου. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1976, 71, 952–958.

22. Sun, Υ.; Oberley, LW; Ying, L. Μια απλή μέθοδος για κλινική δοκιμασία υπεροξειδικής δισμουτάσης. Clin. Chem. 1988, 34, 497-500.

23. Abei, Η. Catalase in vitro. Μέθοδοι Enzymol. 1988, 10, 121-126.

24. Mozaffari, Z.; Azarnia, Μ.; Abdolhamid Angaji, S. Αξιολόγηση των τοξικών επιδράσεων του υδατικού εκχυλίσματος φύλλων Trigonella foenum-graecum στην ανάπτυξη μακρού οστικού ιστού στο έμβρυο αρουραίου. J. Med. Plants Res. 2010, 4, 1148–1155.

25. Buencamino, MCA; Sikon, AL; Jain, Α.; Thacker, HL Μια μελέτη παρατήρησης σχετικά με την τήρηση των κατευθυντήριων οδηγιών θεραπείας της οστεοπενίας. J. Women's Health 2009, 18, 873–881.

26. Schmitt, MN; Schmitt, J.; Dören, M. Ο ρόλος της φυσικής δραστηριότητας στην πρόληψη της οστεοπόρωσης σε μετεμμηνοπαυσιακές γυναίκες - μια ενημέρωση. Maturitas 2009, 63, 34–38.

27. Lelovas, PP; Xanthos, TT; Thoma, SE; Στίχοι, GP; Dontasi, IA Ο εργαστηριακός αρουραίος ως ζωικό μοντέλο για την έρευνα της οστεοπόρωσης. Comp. Med. 2008, 58, 424–430.

28. Ncango, DM; Pohl, CH; van Wyk, PWJ; Kock, JLF Τα μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα (ΜΣΑΦ) αναστέλλουν την ανάπτυξη παθογόνων ζυμομυκήτων. Αφρ. J. Microbiol. Res. 2011, 5, 1123–1125.

29. Fazliana, Μ.; Nazaimoon, WMW; Gu, HF; Το εκχύλισμα Ostenson, CG Labisia pumila ρυθμίζει το σωματικό βάρος και τις λιποκίνες σε αρουραίους με ωοθηκεκτομή. Maturitas 2009, 62, 91–97.

30. Bourrin, S.; Ammann, Ρ.; Bonjour, JP; Rizzoli, R. Ανάκτηση της πυκνότητας και της αντοχής των οστών της εγγύς κνήμης, αλλά όχι της αρχιτεκτονικής σπογγώδους οστού, μετά από μακροχρόνια θεραπεία με διφωσφονικά ή εκλεκτικούς ρυθμιστές υποδοχέων οιστρογόνου σε ηλικιωμένους αρουραίους. Bone 2002, 30, 195–200.

31. Borah, Β.; Dufresne, TE; Chmielewski, ΡΑ; Ακαθάριστο, GJ; Prenger, MC; Το Phipps, RJ Risedronate διατηρεί την δοκιδωτή αρχιτεκτονική και αυξάνει την αντοχή των οστών στον σπόνδυλο των mini χοιριδίων που έχουν υποβληθεί σε ωοθηκεκτομή, όπως μετράται με τρισδιάστατη μικροϋπολογιστική τομογραφία. J. Bone Miner. Res. 2002, 17, 1139–1147.

32. Müller, R.; Hannan, Μ.; Smith, SY; Bauss, F. Η διαλείπουσα ιβανδρονάτη διατηρεί την ποιότητα των οστών και την αντοχή των οστών στην οσφυϊκή μοίρα της σπονδυλικής στήλης μετά από 16 μήνες θεραπείας στον πίθηκο cynomolgus που υποβλήθηκε σε εκτομή ωοθηκών. J. Bone Miner. Res. 2004, 19, 1787–1796.

33. Lane, NE; Kumer, JL; Majumdar, S.; Khan, Μ.; Lotz, J.; Stevens, RE; Klein, R.; Phelps, KV Οι επιδράσεις των συνθετικών συζευγμένων οιστρογόνων, a (Cenestin) στη δομή και τη δύναμη του δοκιδωτού οστού στο μοντέλο αρουραίου με ωοθηκεκτομή. Osteoporosis Int. 2002, 13, 816-823.

34. Basu, S.; Michaelsson, Κ.; Olofsson, Η.; Johansson, S.; Melhus, H. Συσχέτιση μεταξύ οξειδωτικού στρες και οστικής πυκνότητας. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001, 288, 275-279.

35. Maggio, D.; Barabani, Μ.; Pierandrei, Μ.; Cristina Polidori, M.; Catani, Μ.; Mecocci, Ρ.; Senin, U.; Pacifici, R.; Cherubini, A. Σημαντική μείωση των αντιοξειδωτικών του πλάσματος σε ηλικιωμένες οστεοπορωτικές γυναίκες: Αποτελέσματα συγχρονικής μελέτης. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2003, 88, 1523–1527.

36. Morton, DJ; Barrett-Connor, EL; Χρήση συμπληρώματος Schneider, DL βιταμίνης C και οστική πυκνότητα σε μετεμμηνοπαυσιακές γυναίκες. J. Bone Miner. Res. 2001, 16, 135–140.

37. Bird, RP; Draper, HH Επίδραση μηλοναλδεΰδης και ακεταλδεΰδης σε καλλιεργημένα κύτταρα θηλαστικών: Μορφολογία ανάπτυξης και σύνθεση μακρομορίων. J. Environ. Health 1980, 6, 811-823.

38. Abdelhalim, MAK Η πιθανή επίδραση του οξειδωτικού στρες που προκαλείται από τη δίαιτα υψηλής χοληστερόλης στη σύνθεση και τις ιδιότητες των ερυθρών αιμοσφαιρίων σε κουνέλια. Αφρ. J. Microbiol. Res. 2010, 4, 836–843.

39. Chaudiere, J.; Ferrari-Illiou, R. Ενδοκυτταρικά αντιοξειδωτικά από τους χημικούς στους βιοχημικούς μηχανισμούς. Food Chem. Toxicol. 1999, 37, 949–962.