Προσδιορισμός της συνολικής περιεκτικότητας σε σαπωνίνες σε Boschniakia Rossica and Herba Cistanches με φασματοφωτομετρία Ⅰ

Αφηρημένη:

Στόχος Αυτή η ποσοτική μέθοδος καθιερώθηκε για τις ολικές σαπωνίνες σε Boschniakia rossica καιΒότανα κιστάνιακαι το περιεχόμενο τουπροσδιορίζονται οι ολικές σαπωνίνες. Μέθοδοι Το Salidroside επιλέχθηκε ως ουσία αναφοράς, η χρωματική αντίδραση χρησιμοποιήθηκε με βανιλίνη και υπερχλωρικό οξύ. Στη συνέχεια, η περιεκτικότητα σε ολικές σαπωνίνες σε Boschniakia rossica και Herba cistanches προσδιορίστηκε στα 523 nm με φασματοφωτομετρία. Ｒαποτελέσματα Η καμπύλη salidroside ήταν γραμμική στο εύρος των 0. 05133 - 0. 2567mg·ml－ 1με τη συσχέτιση του 0. 9992, και η εξίσωση γραμμικής παλινδρόμησης ήταν Y=1. 611Χ + 0. 0573. Για τη Boschniakia rossica, η μέση ανάκτηση της σαλιδροζίδης ήταν 99. 68% με ＲSD του 1. 68% ( n=6); και για τις αποστάσεις Herba, η μέση ανάκτηση της σαλιδροσίδης ήταν 101. 18% με ＲSD 0. 94% ( n=6)). Συμπέρασμα Η μέθοδος είναι ακριβής, απλή και αξιόπιστη. Έτσι μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε ολικές σαπωνίνες σε Boschniakia rossica και Herba cistanches.

Λέξεις-κλειδιά:Boschniakia rossica;Βότανα κιστάνια; Ολικές σαπωνίνες; Προσδιορισμός; Φασματοφωτομετρία; Salidroside

ΠΟΣΟ ΧΡΕΙΑΖΕΤΑΙ ΓΙΑ ΝΑ ΛΕΙΤΟΥΡΓΗΣΕΙ ΤΟ CISTANCHE;

Cistanche deserticola Y. Τα C. Ma και Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov είναι παρασιτικά φαρμακευτικά φυτά που ανήκουν στην οικογένεια Orobanchiaceae. Το Cistanche deserticola είναι ένα παρασιτικό φυτό που ζει στις ρίζες του Haloxylon ammodendron, ενός δέντρου της ερήμου. Παράγεται κυρίως στο Xinjiang και στο Alxa League, στην Εσωτερική Μογγολία. Είναι γνωστό ως «τζίνσενγκ της ερήμου» λόγω της χαμηλής του απόδοσης και της υψηλής φαρμακευτικής του αξίας. Το Grasshopper [1] παράγεται στα βορειοανατολικά της χώρας μου [2]. Σύμφωνα με τη λαογραφία, έχει την επίδραση της αθανασίας, γι' αυτό ονομάστηκε το Βορειοανατολικό «Αιώνιο Χόρτο». Χρησιμοποιείται για την ανικανότητα λόγω νεφρικής ανεπάρκειας, κρύο πόνο στη μέση και τα γόνατα, ξηρότητα των εντέρων και δυσκοιλιότητα. Μπορεί να θρέψει και να δυναμώσει το σώμα, να καθυστερήσει τη γήρανση και είναι μια αυθεντική ιατρική πηγή στα βορειοανατολικά [3]. Και τα δύο έχουν παρόμοια αποτελέσματα, και τα δύο έχουν ως αποτέλεσμα τονωτικό των νεφρών, την ενίσχυση του γιανγκ, την υγρασία των εντέρων και το καθαρτικό [4]. Σύμφωνα με τα αρχεία για το Cistanche deserticola στο "Compendium of Materia Medica" του Li Shizhen της δυναστείας Μινγκ, "Αυτή η ουσία είναι τονωτική αλλά όχι σκληρή, γι' αυτό ονομάζεται ήρεμη. Είναι σπάνιο να την πάρεις από το Congrong, γι' αυτό είναι γεμάτη με Cistanche deserticola." Δηλαδή, το Cistanche deserticola χρησιμοποιήθηκε κάποτε ως εναλλακτικό φαρμακευτικό υλικό σε σχέση με το Cistanche deserticola. , Σύγχρονη έρευνα έχει δείξει ότι τόσο το Cistanche deserticola όσο και το Estuary deserticola έχουν φαρμακολογικά αποτελέσματα όπως αντιγήρανση [5, 6], κατά της κούρασης [7, 8], βελτίωση της λειτουργίας του ανοσοποιητικού [9, 10] και ενίσχυση της μνήμης [{{ 12}}].

Η περιεκτικότητα σε ολικούς γλυκοσίδες στο Grasshopper and Cistanche deserticola έχει την αξία μιας εις βάθος μελέτης. Και τα δύο περιέχουν σαπωνίνες, πτητικά έλαια, σάκχαρα, αμινοξέα και άλλα συστατικά. Οι μελετητές έχουν αναφέρει συγκριτικές μελέτες σχετικά με τα συστατικά των πτητικών ελαίων, των σακχάρων, των αμινοξέων και άλλων συστατικών των δύο [4, 14, 15], αλλά ο προσδιορισμός της συνολικής περιεκτικότητας σε γλυκοσίδες και των δύο Δεν υπάρχουν αναφορές στη βιβλιογραφία . Τα κύρια συστατικά του Cistanche deserticola είναι οι φαινυλοπροπανοειδείς γλυκοσίδες (σειρά γλυκοσιδών A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16] και το Cistanche deserticola είναι φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες (σειρά Cistanche deserticola )[17,18], οι σαπωνίνες των δύο είναι παρόμοιες και μοιράζονται ένα παρόμοιο συστατικό, τη σαλιδροζίδη. Πιστεύουμε ότι οι γλυκοσίδες είναι σημαντικά ενεργά συστατικά και των δύο και διερευνούμε τη χρήση της φασματοφωτομετρίας για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας των συνολικών γλυκοσιδών. , για να παρέχει μια θεωρητική βάση για την περαιτέρω ανάπτυξη και αξιοποίηση των πόρων Echinacea deserticola και Cistanche deserticola.

1 Υλικά και όργανα

1. 1 Υλικό και αντιδραστήρια: Amaranth officinale, που συλλέχθηκε από γύρω από το όρος Changbai, που αναγνωρίστηκε ως φυτό της οικογένειας Orobanaceae

Το αποξηραμένο ολόκληρο φυτό του Orobanche coerulescens, πλύνετε το δείγμα και στραγγίστε το νερό

Ξεχωρίζουμε, τοποθετούμε σε κουτί στεγνώματος σταθερής θερμοκρασίας στους 40 βαθμούς, στεγνώνουμε σε σταθερό βάρος, θρυμματίζουμε, περνάμε από κόσκινο 40 mesh και ετοιμάζουμε

[19]; Cistanche deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., που προσδιορίζεται ως εισηγμένη

Cistanche deserticola Y. Γ. Αποξηραμένο κρέας του Ma

Στελέχη, πλυμένα, στεγνωμένα στον αέρα, στεγνωμένα σε σταθερό βάρος, θρυμματισμένα, περασμένα από 40-δικτυωτό κόσκινο, αφήνονται στην άκρη. το κόκκινο

Ουσία αναφοράς Crassuside (παρέχεται από το China Institute of Pharmaceutical and Biological Products, αριθμός παρτίδας 110818

- 200404, για προσδιορισμό περιεχομένου). όλα τα πειραματικά αντιδραστήρια που χρησιμοποιούνται είναι εγχώριας αναλυτικής ποιότητας.

1. 2 Instruments 752N φασματοφωτόμετρο ορατό UV (Shanghai Jingke); ζεύγος Tu-1901

Φασματοφωτόμετρο ακτίνων UV (Beijing Puxi General Co., Ltd.); ηλεκτρονικό αναλυτικό ισοζύγιο

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); FW-80

Θραυστήρας γενικής χρήσης υψηλής ταχύτητας (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 μέθοδοι

2. 1 Παρασκευή διαλύματος αναφοράς

Χρησιμοποιήστε αναλυτικό ζυγό για να ζυγίσετε με ακρίβεια τη σαλιδροσίδη 15. 40mg, διαλύστε σε μεταφορά μεθανόλης σε 25-ογκομετρική φιάλη και ρυθμίστε τον όγκο στο σημάδι. Προετοιμάστε να περιέχει 0,0% σαλιδροσίδη ανά ml. Το διάλυμα 616 mg χρησιμοποιείται ως διάλυμα αναφοράς και σφραγίζεται στο ψυγείο για μελλοντική χρήση.

2. 2 Παρασκευή του δοκιμαστικού διαλύματος

Χρησιμοποιήστε αναλυτική ζυγαριά για να ζυγίσετε με ακρίβεια τις φαρμακευτικές σκόνες Grasshopper και Cistanche deserticola. 2. 0g, τοποθετήστε το σε μια φιάλη με στρογγυλό πάτο, προσθέστε 40 ml αιθανόλης 90%, εκχύλιση Grasshopper με θερμότητα και αναρροή μία φορά και θερμάνετε και αναρροή Cistanche deserticola δύο φορές, κάθε χρόνος εκχύλισης είναι 1. 5 ώρες, μετά διήθηση με αναρρόφηση, συνδυάστε το διήθημα, συμπυκνώστε μέχρι να στεγνώσει σε λουτρό νερού, προσθέστε 25 ml νερό για να διαλυθεί, εκχυλίστε 3 φορές με πετρελαϊκό αιθέρα, 25 ml κάθε φορά, απορρίψτε το υγρό πετρελαϊκού αιθέρα στο ανώτερο στρώμα και στη συνέχεια συνεχίστε την εκχύλιση 3 φορές με κορεσμένη σε νερό n-βουτανόλη. 25 ml κάθε φορά, συνδυάστε τρία εκχυλίσματα n-βουτανόλης, εξατμίστε το υγρό n-βουτανόλης σε υδατόλουτρο σε απαγωγέα καπνού, αραιώστε το με μεθανόλη σε ογκομετρική φιάλη των 10 ml, ανακατέψτε καλά, στη συνέχεια μετρήστε με ακρίβεια 1 ml του διαλύματος και αραιώστε το με μεθανόλη σε όγκο 25 ml. μπουκάλι, ανακατέψτε καλά και χρησιμοποιήστε το ως δοκιμαστικό διάλυμα για μελλοντική χρήση.

2. 3. Επιλογή μήκους κύματος μέτρησης

θα 1. Τοποθετήστε 25 ml του διαλύματος αναφοράς και του δοκιμαστικού διαλύματος σε βαθμωτούς δοκιμαστικούς σωλήνες με πώματα, εξατμίστε τον διαλύτη μεθανόλης σε υδατόλουτρο σταθερής θερμοκρασίας στους 60 βαθμούς και προσθέστε 0. 2 ml διαλύματος 5% βανιλίνης-παγόμορφου οξικού οξέος και 0,8 ml διαλύματος υπερχλωρικού οξέος αντέδρασαν σε υδατόλουτρο 60 μοιρών για 15 λεπτά. Βγάλτε τον δοκιμαστικό σωλήνα και ψύξτε τον αμέσως με παγωμένο νερό για 5 λεπτά. Προσθέστε 5 ml παγόμορφου οξικού οξέος και ανακινήστε καλά [20]. Παρασκευάστε το διάλυμα αναφοράς χρησιμοποιώντας μεθανόλη με τον ίδιο τρόπο. Το διάλυμα μετά την ανάπτυξη χρώματος υποβλήθηκε σε σάρωση μήκους κύματος και το μέγιστο μήκος κύματος απορρόφησης των 523 nm μετά τη χρωματική αντίδραση της σαλιδροζίδης επιλέχθηκε μεταξύ 400 και 800 nm ως το μήκος κύματος μέτρησης των συνολικών γλυκοσιδών των Escherichia coli και Cistanche deserticola. Τα μοτίβα σάρωσης της ουσίας ελέγχου και της υπό δοκιμή ουσίας φαίνονται στο σχήμα 1.

2. 4. Διερεύνηση γραμμικής σχέσης: Χρησιμοποιήστε μια πιπέτα για να σχεδιάσετε με ακρίβεια τη λύση αναφοράς 0. 5,1. 0,

1. 5,2. 0,2. 5 ml τοποθετήθηκαν σε πωματισμένους δοκιμαστικούς σωλήνες με αριθμό 1 έως 5, και η χρωματική αντίδραση διεξήχθη σύμφωνα με τα βήματα στο "2. 3". Διεξήχθη ένα τυφλό πείραμα με μεθανόλη υπό παράλληλες συνθήκες και η απορρόφηση μετρήθηκε σε μήκος κύματος 523 nm. Η απορρόφηση A (Y ) είναι η τεταγμένη, συγκέντρωση mg·ml-1

Το (X) είναι η τετμημένη, εκτελείται γραμμική παλινδρόμηση και η εξίσωση παλινδρόμησης είναι Y {{0}}. 611Χ +0. 0573 (r=0. 9992), το αποτέλεσμα δείχνει ότι η συγκέντρωση μάζας του salidroside είναι στο 0. Η γραμμική σχέση είναι καλή εντός του εύρους των 05133-0.2567mg·ml-1. Τα αποτελέσματα φαίνονται στο Σχήμα 2.

2. 5 Δοκιμή σταθερότητας

Μετρήστε με ακρίβεια την κατάλληλη ποσότητα του διαλύματος δοκιμής Grasshopper και Cistanche deserticola, αναπτύξτε το χρώμα σύμφωνα με τη μέθοδο στο «2.3» και μετρήστε την τιμή απορρόφησης ομοιόμορφα σε 6 φορές μέσα σε 30 λεπτά. Αυτό δείχνει ότι μέσα σε 30 λεπτά μετά την ανάπτυξη χρώματος, το Grasshopper και το Cistanche deserticola θα Η σταθερότητα του διαλύματος δοκιμής είναι σχετικά καλή. Τα αποτελέσματα φαίνονται στον Πίνακα 1.

2. 6 Δοκιμή ακριβείας

Μετρήστε με ακρίβεια την κατάλληλη ποσότητα του διαλύματος αναφοράς, αναπτύξτε το χρώμα σύμφωνα με τη μέθοδο στο «2.3» παραπάνω και μετρήστε την απορρόφηση 6 φορές συνεχώς. Τα αποτελέσματα φαίνονται στον Πίνακα 2. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η ακρίβεια αυτού του πειραματικού οργάνου είναι καλή.

Εικόνα 1 Μοτίβα σάρωσης λεπτής στρώσης ουσίας αναφοράς σαλιδροζίτη (A), δοκιμαστικού διαλύματος ακρίδας (Β) και δοκιμαστικού διαλύματος cistanche deserticola (C)

2. 7. Δοκιμή επαναληψιμότητας.

Ζυγίστε με ακρίβεια 6 μερίδες σκόνης ακρίδας και cistanche deserticola, κάθε μερίδα περιέχει 2. 0g, μετά από θέρμανση και εκχύλιση με αναρροή χρησιμοποιώντας τη βέλτιστη διαδικασία εκχύλισης που έχει καθοριστεί, ακολουθήστε τα βήματα στο "2. 3" και μετρήστε το απορρόφηση σε μήκος κύματος 523 nm. Τα αποτελέσματα των μετρήσεων φαίνονται στον Πίνακα 3 και στον Πίνακα 4.

2. 8. Δοκιμή ποσοστού ανάκτησης δείγματος.

Ζυγίστε με ακρίβεια 6 δείγματα Grasshopper και Cistanche deserticola με γνωστό ποσοστό μάζας των συνολικών γλυκοσιδών. Κάθε δείγμα είναι 12 mg. Προσθέστε με ακρίβεια 2 ml διαλύματος αναφοράς σαλιδροζίδης. Ακολουθήστε το "2. 2" Εξάγετε το δείγμα κάτω από το είδος, προσδιορίστε τη συνολική περιεκτικότητα σε γλυκοσίδη μετά την ανάπτυξη χρώματος σύμφωνα με το στοιχείο "2.3" και υπολογίστε το ποσοστό ανάκτησης του δείγματος. Τα αποτελέσματα φαίνονται στον Πίνακα 5 και στον Πίνακα 6.