Επικοινωνία:jerry.he@wecistanche.com

Tarek Benameur1t, Raffaella Soleti2, συν t◎, Maria Antonietta Panaro3, Maria Ester La Torre4, Vincenzo Monda45, Giovanni Messina 4 και Chiara Porro 4,*⑤

1 Τμήμα Βιοϊατρικών Επιστημών, Κολλέγιο Ιατρικής, Πανεπιστήμιο King Faisal,

Al-Ahsa 31982, Σαουδική Αραβία; tbenameur@kfu.edu.sa

2Univ Angers, Universite de Nantes, Inserm, CRCINA, SFR ICAT, F-49800 Angers, France;

raffaella.soleti@univ-angers.fr

3Βιοτεχνολογίες και Βιοφαρμακευτική Τμήμα Βιοεπιστημών, Πανεπιστήμιο του Μπάρι, 70125 Μπάρι, Ιταλία;

mariantonietta.panaro@uniba.it

4 Τμήμα Κλινικής και Πειραματικής Ιατρικής, Πανεπιστήμιο της Φότζια, 71121 Φότζια, Ιταλία;

esterlatorre@unifg.it (ΛΙΩΣΗ); mondavincenzo@gmailcom(VM);Giovanni.messina@unifg it(GM)5 Μονάδα Διαιτολογίας και Αθλητιατρικής, Τομέας Φυσιολογίας του Ανθρώπου, Τμήμα Πειραματικής Ιατρικής,

Luigi Vanvitelli University of Campania, 81100 Naples, Italy Αλληλογραφία: chiara.porro@unifg.it t Αυτοί οι συγγραφείς συνεισέφεραν εξίσου σε αυτό το έργο.

Το Cistanche έχει αντιγηραντική δράση

Αφηρημένη: Τα θρεπτικά συστατικά και τα πιθανά οφέλη τους αποτελούν νέο πεδίο σπουδών στη σύγχρονη ιατρική για τη θετική τους επίδραση στην υγεία. Η κουρκουμίνη, η κίτρινη πολυφαινολική ένωση που εξάγεται από το είδος Curcuma longa, χρησιμοποιείται ευρέως στην παραδοσιακή ιατρική της Αγιουρβέδα για την πρόληψη και την αντίθεση πολλών ασθενειών, λαμβάνοντας υπόψηαντιοξειδωτικό, ανοσοτροποποιητικές, αντιφλεγμονώδεις, αντιμικροβιακές, καρδιοπροστατευτικές, νεφρονοπροστατευτικές, ηπατοπροστατευτικές, αντινεοπλασματικές και αντιρευματικές ιδιότητες. Τα τελευταία χρόνια, οι έρευνες της κουρκουμίνης έχουν επικεντρωθεί στην εφαρμογή της στη γήρανση και στις ασθένειες που σχετίζονται με την ηλικία. Η γήρανση είναι μια φυσιολογική διαδικασία κατά την οποία υπάρχει μείωση της κυτταρικής λειτουργίας λόγω εσωτερικών ή εξωτερικών ερεθισμάτων. Το οξειδωτικό στρες είναι μια από τις πιο σημαντικές αιτίες γήρανσης και ασθενειών που σχετίζονται με την ηλικία. Επιπλέον, πολλές διαταραχές που σχετίζονται με την ηλικία, όπως ο καρκίνος, η νευροφλεγμονή και οι λοιμώξεις οφείλονται σε χρόνια συστηματική φλεγμονή χαμηλού βαθμού. Η κουρκουμίνη που δρα σε διαφορετικές πρωτεΐνες μπορεί να αντιπαραβάλει τόσο το οξειδωτικό στρες όσο και τη φλεγμονή. Στον εγκέφαλο, η κουρκουμίνη μπορεί να ρυθμίσει τη φλεγμονή που προκαλείται από μικρογλοία. Τέλος, στους όγκους του εγκεφάλου, η κουρκουμίνη μπορεί να μειώσει την ανάπτυξη του όγκου αναστέλλοντας τη δραστηριότητα της τελομεράσης. Αυτή η ανασκόπηση τονίζει τοαντι γήρανσηο ρόλος της κουρκουμίνης που εστιάζει στον μηχανισμό της για την εξουδετέρωση της γήρανσης στον εγκέφαλο. Επιπλέον, συζητούνται νέα σκευάσματα για την αύξηση της βιοδιαθεσιμότητας της κουρκουμίνης.

Λέξεις-κλειδιά: κουρκουμίνη; φυσικό φλαβονοειδές? αντι γήρανση; νευροφλεγμονή? Τελομεράσες; αντιοξειδωτικό, αντιφλεγμονώδες

1. Εισαγωγή

Σήμερα, το προσδόκιμο ζωής του ανθρώπου αυξάνεται και οι μελέτες για τη βιολογία της γήρανσης προσπαθούν να αποσαφηνίσουν τις βιοχημικές και γενετικές διεργασίες που οδηγούν στη γήρανση με την πάροδο του χρόνου και να βρουν νέες στρατηγικές για την αντιμετώπιση αυτής της διαδικασίας.

Η γήρανση είναι μια διαδικασία κατά την οποία υπάρχει μια μη αναστρέψιμη και προοδευτική μείωση των φυσιολογικών λειτουργιών. αυτή η απώλεια θα μπορούσε να οδηγήσει στις πιο σημαντικές ασθένειες που σχετίζονται με την ηλικία, όπως καρδιαγγειακές παθήσεις, μυοσκελετικές διαταραχές και αρθρίτιδα, νευροεκφυλιστικές ασθένειες και καρκίνο [1].

Έχουν εντοπιστεί διαφορετικοί μηχανισμοί γήρανσης, συμπεριλαμβανομένης της γονιδιωματικής αστάθειας, της βράχυνσης των τελομερών, των επιγενετικών αλλαγών, της δυσλειτουργίας των μιτοχονδρίων, της κυτταρικής γήρανσης, της εξάντλησης των βλαστοκυττάρων και της αλλοιωμένης ενδοκυτταρικής επικοινωνίας [2].

Πολυάριθμες μελέτες έχουν δημοσιευθεί τα τελευταία χρόνια για τη διατροφή και τις επιπτώσεις της στην υγεία. Αρκετές μελέτες έχουν αναφέρει ότι μια διατροφή πλούσια σεαντιοξειδωτικάκαι τα αντιφλεγμονώδη μπορεί να μειώσουν τη γνωστική έκπτωση που σχετίζεται με την ηλικία και τον κίνδυνο ανάπτυξης διαφόρων νευροεκφυλιστικών ασθενειών.

Η κουρκουμίνη είναι μια φυσική διατροφική πολυφαινόλη που εξάγεται από το Curcuma longa Linn με διαφορετικές βιολογικές και φαρμακολογικές ιδιότητες, όπωςαντιοξειδωτικό, ανοσοτροποποιητικό, αντιφλεγμονώδες, αντιμικροβιακό, καρδιοπροστατευτικό, νευροπροστατευτικό, ηπατοπροστατευτικό, αντινεοπλασματικό, αντιρευματικό καιαντι γήρανση[3]. Η χημική ονομασία της κουρκουμίνης είναι 1,7-δις(4-υδροξυ-3-μεθοξυφαινυλ)-επτα-1,6-διένιο-3,{{{ 9}}διόνη με χημικό τύπο C12H20O6. σχηματίζεται από δύο αρωματικούς δακτυλίους με μια μεθοξυφαινολική ομάδα, στριμωγμένους με μια γραμμική αλυσίδα άνθρακα, με ένα τμήμα -ακόρεστης-δικετόνης [4] (Εικόνα 1).

Εικόνα 1. Χημική δομή της κουρκουμίνης.

Η κουρκουμίνη, όπως και άλλες πολυφαινόλες, έχει πλειοτροπική δράση. Πράγματι, λόγω της ικανότητάς της να αλληλεπιδρά με πολλές πρωτεΐνες, η κουρκουμίνη μπορεί να προκαλέσει μια κυτταρική απόκριση σε εξωτερικά ερεθίσματα. Επιπλέον, η κουρκουμίνη ρυθμίζει προς τα πάνω και προς τα κάτω διαφορετικά miRNA και συμμετέχει σε επιγενετικές αλλαγές στα κύτταρα [5].

Η γήρανση είναι ένας από τους παράγοντες κινδύνου για ορισμένους τύπους όγκων και το ποσοστό καρκίνου είναι υψηλότερο στους ηλικιωμένους σε σύγκριση με τις νεότερες ηλικιακές κατηγορίες.

Διαφορετικοί παράγοντες θα μπορούσαν να εξηγήσουν τη σχέση μεταξύ καρκίνου και γήρανσης: κατά τη διαδικασία της γήρανσης, υπάρχει αύξηση του οξειδωτικού στρες και των βλαβών του DNA και της γήρανσης των κυττάρων. μια προοδευτική αποσύνθεση της ανοσοποιητικής λειτουργίας εμφανίζεται σε ηλικιωμένα άτομα και η ανοσοαπόκριση έναντι των αναπτυσσόμενων όγκων μπορεί να αποτύχει [6].

Σε αυτή την ανασκόπηση, στόχος μας είναι να διευκρινίσουμε τοαντι γήρανσηιδιότητες της κουρκουμίνης στον εγκέφαλο δρώντας σε διαφορετικές πρωτεΐνες-στόχους, επάγονταςαντιοξειδωτικόκαι αντιφλεγμονώδη συμβάντα, ρυθμίζοντας τη νευροπροστασία της μικρογλοίας και τελικά ενεργώντας στην τελομεράση για να σταματήσει την εξέλιξη του καρκίνου. Επιπλέον, θα αναλύσουμε πώς να ξεπεραστούν ορισμένοι περιορισμοί της κλινικής εφαρμογής της κουρκουμίνης που αντιπροσωπεύονται από κακή βιοδιαθεσιμότητα χαμηλή διαλυτότητα και σταθερότητα που σχετίζεται με την υδρόφοβη δομή της με καινοτόμες βιοτεχνολογικές στρατηγικές, όπως οι προσεγγίσεις που βασίζονται στη νανοπαραγωγή.

2. Η βιολογία της διαδικασίας γήρανσης, τα χαρακτηριστικά της και οι βιοδείκτες

Η γήρανση είναι μια πολύπλοκη διαδικασία που προέρχεται από την αλληλεπίδραση διαφορετικών γεγονότων, συμπεριλαμβανομένων τυχαίων, περιβαλλοντικών, γενετικών ή/και επιγενετικών παρεμβολών στις λειτουργίες του σώματος [7,8]. Η γήρανση χαρακτηρίζεται από μια μειωμένη φυσιολογική λειτουργία που επηρεάζει τους περισσότερους ζωντανούς οργανισμούς, η οποία υποστηρίζεται από αλλαγές στα μοριακά μονοπάτια και είναι επίσης ο πιο βαθύς παράγοντας κινδύνου για μεγάλο αριθμό πρόωρων ασθενειών που σχετίζονται με την ηλικία. Επιπλέον, η γήρανση συνδέεται με πολύπλευρες αλλαγές που αφορούν όλα τα επίπεδα της οργάνωσης του ανθρώπινου σώματος. Αυτό περιλαμβάνει νευροεκφυλιστικές, μυοσκελετικές, μεταβολικές, καρδιαγγειακές, διαταραχές του ανοσοποιητικού συστήματος και καρκίνο που μπορεί να αυξήσουν την ευπάθεια στο θάνατο [1,9,10]. Μεταξύ των κοινώς περιγραφόμενων κυτταρικής και μοριακής γήρανσης, τα χαρακτηριστικά γνωρίσματα είναι η γονιδιωματική αστάθεια, η φθορά των τελομερών, οι επιγενετικές αλλοιώσεις, η απώλεια πρωτεόστασης, η απορρυθμισμένη αίσθηση θρεπτικών ουσιών, η μιτοχονδριακή δυσλειτουργία, η κυτταρική γήρανση, η αλλοιωμένη διακυτταρική επικοινωνία και η μείωση της λειτουργίας των βλαστοκυττάρων [3,12]. ]. Πράγματι, το αναγεννητικό και επισκευαστικό δυναμικό πολλών ιστών μειώνεται με την ηλικία λόγω της μειωμένης ικανότητας πολλών βλαστοκυττάρων να επιδιορθώνουν τους ιστούς [14]. Κατά συνέπεια, η μεταμόσχευση ηλικιωμένων αιμοποιητικών βλαστοκυττάρων θα διακυβευόταν. Παρά τα υπάρχοντα δεδομένα, δεν υπάρχουν οριστικά στοιχεία σχετικά με το ποιες μοριακές, κυτταρικές ή φυσιολογικές αλλαγές είναι οι πιο σημαντικοί οδηγοί της διαδικασίας γήρανσης και/ή πώς επηρεάζουν η μία την άλλη [15,16].

Παρά τα υπάρχοντα διατηρημένα χαρακτηριστικά/δείκτες γήρανσης, οι συνέπειες της γήρανσης μπορεί να διαφέρουν όχι μόνο μεταξύ ενός μεμονωμένου ιστού αλλά και μεταξύ των ατόμων. Παρόλο που οι διάφορες μοριακές αιτίες της γήρανσης με εξαιρετικά πολύπλοκες αλληλεπιδράσεις περιγράφονται στη βιβλιογραφία, η κατανόηση των θεμελιωδών μηχανισμών για πολλές οδούς δεν παραμένει πλήρως κατανοητή.

3. Αντιοξειδωτικός Ρόλος της Κουρκουμίνης

Έχει περιγραφεί ευρέως ότι το αυξημένο οξειδωτικό στρες άλλαξε τη δομή και τις λειτουργίες των λιπιδίων, των πρωτεϊνών και των νουκλεϊκών οξέων, συμβάλλοντας έτσι στη συσσώρευση δυσλειτουργικών πρωτεϊνών και στην υπεροξείδωση των λιπιδίων. Το κατεστραμμένο πυρηνικό και μιτοχονδριακό DNA οδηγεί ιδιαίτερα σε μιτοχονδριακή δυσλειτουργία και κυτταρικό θάνατο [17,18]. Με τη σειρά τους, αυτές οι δυσλειτουργίες όχι μόνο επιταχύνουν τη διαδικασία γήρανσης του σώματος, αλλά τελικά συμβάλλουν στην ανάπτυξη μιας μεγάλης ποικιλίας χρόνιων και εκφυλιστικών διαταραχών, όπως νευροεκφυλιστικές ασθένειες (νόσος Alzheimer και Parkinson), άνοια, καρκίνος, αθηροσκλήρωση, παχυσαρκία, διαβήτης. , αγγειακές παθήσεις, οστεοπόρωση, μεταβολικό σύνδρομο και γήρανση [19,20].

Πράγματι, η βλάβη που προκαλείται από το οξειδωτικό στρες είναι ένα σημαντικό χαρακτηριστικό της γήρανσης και θεωρείται ως βασικό συστατικό των οδών παθογένεσης πολλαπλών ασθενειών που σχετίζονται με την ηλικία καθώς και της κατάστασης της νόσου [21]. Επιπλέον, το οξειδωτικό στρες προκαλείται από μια ανισορροπία μεταξύ της παραγωγής αντιδραστικών ειδών οξυγόνου (ROS) σε κύτταρα και ιστούς και την ικανότητα των βιολογικών συστημάτων να αποτοξινώνουν αυτά τα αντιδραστικά προϊόντα [22]. Είναι σημαντικό ότι η διαδικασία γήρανσης μπορεί να διορθωθεί με περιβαλλοντικές, φαρμακολογικές και διατροφικές στρατηγικές [23].

Αξιοσημείωτα, η διερεύνηση του ρόλου των φυσικών ουσιών όπως η κουρκουμίνη ή τα παράγωγα με υψηλήαντιοξειδωτικόΤο ενδεχόμενο που εξουδετερώνει το οξειδωτικό στρες φαίνεται να είναι ένα αποτελεσματικό προληπτικό μέτρο κατά της γήρανσης που συνδέεται με τις ελεύθερες ρίζες [24] (Πίνακας 1). Αυτό θα παρείχε μια προφανή προσέγγιση για πιθανές θεραπείες που μπορούν να προάγουν την υγιή γήρανση.

Ένας μεγάλος αριθμός μελετών υπογράμμισε την προστατευτική δράση της κουρκουμίνης έναντι του οξειδωτικού και νιτροδικού στρες σε πολλαπλά κυτταρικά και ζωικά μοντέλα. Αυτό το αποτέλεσμα επιτυγχάνεται μέσω των μειωμένων επιπέδων μηλονοδιαλδεΰδης (MDA), πρωτεϊνικών καρβονυλίων, θειόλων και νιτροτυροσίνης [25]. Επιπλέον, η κουρκουμίνη διεγείρει τις δραστηριότητες της υπεροξειδικής δισμουτάσης (SOD) και της καταλάσης, το κλειδίαντιοξειδωτικόένζυμα των μηχανισμών άμυνας έναντι των ελεύθερων ριζών που παράγονται κατά τις μεταβολικές αντιδράσεις [26].

Το οξειδωτικό στρες μπορεί να μειωθεί με τρεις κύριες στρατηγικές: (1) μείωση της έκθεσης σε περιβαλλοντικούς παράγοντες. (2) μείωση του οξειδωτικού στρες με τη σταθεροποίηση της παραγωγής και της απόδοσης μιτοχονδριακής ενέργειας. (3) αύξηση των ενδογενών και εξωγενώναντιοξειδωτικάεπίπεδα [27]. Η σωματική δραστηριότητα είναι μία από αυτές τις στρατηγικές που είναι γνωστό ότι εξουδετερώνει τις αρνητικές επιπτώσεις του οξειδωτικού στρες και καθυστερεί τη γήρανση. Πράγματι, η άσκηση σε μέτρια έως έντονη ένταση για τουλάχιστον 5 ημέρες την εβδομάδα, μαζί με έναν σωστό τρόπο ζωής είναι κρίσιμα στοιχεία για την εξουδετέρωση της τοξικότητας και των επιβλαβών επιπτώσεων του οξειδωτικού στρες στην υγεία αυξάνονταςαντιοξειδωτικόεπίπεδα [28]. Επιπλέον, η μέτρια και τακτική σωματική άσκηση έχει αναφερθεί ότι είναι θεραπευτική στη γήρανση και μειώνει τους κινδύνους μεγάλου αριθμού ασθενειών που σχετίζονται με την ηλικία. Παρά αυτές τις επιδράσεις που προάγουν την υγεία, μια και μόνο περίοδος σωματικής άσκησης μπορεί να αυξήσει το μεταβολισμό, το οξειδωτικό στρες, τη φλεγμονή και την κόπωση των μυών αμέσως μετά την άσκηση [29].

Τα διατροφικά σκευάσματα έχει αποδειχθεί ότι έχουν ένααντι γήρανσηρόλο, και η κατανάλωσή τους συνιστάται ιδιαίτερα ως προληπτικήαντιοξειδωτικόεργαλείο, μαζί με μια σταθερή και επαρκή σωματική δραστηριότητα [30,31]. Λόγω της χημικής δομής της, η κουρκουμίνη έχει αποδειχθεί ότι είναι ένας εξαιρετικός σαρωτής των ROS και των αντιδρώντων ειδών αζώτου (RNS) [32] και μπορεί να μετριάσει ή να αποτρέψει το οξειδωτικό στρες και τη φλεγμονή που προκαλείται από την άσκηση, με τη ρύθμιση των ενζύμων GSH, καταλάσης και SOD. και αναστολή ενζύμων που δημιουργούν ROS όπως η λιποξυγενάση/κυκλοοξυγενάση και η υδρογονάση της ξανθίνης/οξειδάση [31]. Αυτό ενίσχυσε την πεποίθησή μας ότι η κουρκουμίνη είναι η χρυσή θρεπτική ουσία με αποδεδειγμένη δυνατότητα στην πρόληψη/καθυστέρηση της εμφάνισης ασθενειών που σχετίζονται με την ηλικία [33,34].

Τυχαιοποιημένες ελεγχόμενες δοκιμές που διεξήχθησαν Περισσότερο από ή ίσο με 4 εβδομάδες που διερεύνησαν τις επιδράσεις της συμπλήρωσης κουρκουμίνης στους βιοδείκτες του οξειδωτικού στρες, συμπεριλαμβανομένης της δραστηριότητας της υπεροξειδάσης της γλουταθειόνης (GPX) στα ερυθροκύτταρα, των συγκεντρώσεων MDA στον ορό και της δραστηριότητας SOD, έδειξαν σημαντική μείωση στο κυκλοφορικό επίπεδο του MDA και μια σημαντική αύξηση της δραστηριότητας SOD. Αυτό το μειωτικό αποτέλεσμα παρατηρήθηκε σε δόσεις κουρκουμίνης μεγαλύτερες ή ίσες με 600 mg/ημέρα [35].

Ένας μεγάλος αριθμός στοιχείων υποδηλώνει ότι το οξειδωτικό στρες προάγει την ανάπτυξη της γήρανσης των ωοθηκών και των διαταραχών που σχετίζονται με τη γήρανση, συμπεριλαμβανομένης της βράχυνσης των τελομερών, της μιτοχονδριακής δυσλειτουργίας, της απόπτωσης και της φλεγμονής. Αυτό έχει ως αποτέλεσμα τη μείωση της γονιμότητας που σχετίζεται με την ηλικία σε ανθρώπους και διαφορετικά ζώα [36]. Η κουρκουμίνη έδειξε προστατευτική δράση στις ωοθήκες με πολλαπλούς μηχανισμούς [37]. Οι ειδικές επιδράσεις και οι μηχανισμοί περιλάμβαναν τους ακόλουθους μηχανισμούς: (1) ανακούφιση οξειδωτικής βλάβης των ωοθηκών, αύξηση του πυρηνικού παράγοντα-σχετιζόμενου με τον ερυθροειδή-2-παράγοντα 2 (Nrf2), οξυγενάση αίμης-1(HO{10}}) , τα επίπεδα SOD και SOD1 μειώνοντας παράλληλα την παραγωγή ROS και τα επίπεδα MDA. (2) μείωση των επιπέδων κασπάσης-3 και -9. και (3) ως αντιφλεγμονώδης παράγοντας, μειώνοντας τα επίπεδα του φλεγμονώδους δείκτη όπως CRP, TNF- και IL-6. Αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν ότι η κουρκουμίνη ως ρυθμιστής του οξειδωτικού στρες μπορεί να αντιπροσωπεύει μια θεραπευτική παρέμβαση για την καθυστέρηση της γήρανσης των ωοθηκών [37-42].

Όπως αναφέρθηκε παραπάνω, η γήρανση συνδέεται με διάφορες αλλαγές στη δομή και τη λειτουργία των οργάνων. Έτσι, η νεφρική γήρανση είναι μια πολυπαραγοντική και πολύπλοκη διαδικασία που χαρακτηρίζεται από πολλές μορφολογικές και λειτουργικές αλλαγές. Οι παράγοντες που εμπλέκονται στη νεφρική γήρανση περιλαμβάνουν τη βράχυνση των τελομερών, τη διακοπή του κυτταρικού κύκλου, τη χρόνια φλεγμονή, την ενεργοποίηση του συστήματος ρενίνης-αγγειοτενσίνης-αλδοστερόνης, μειωμένηαντιοξειδωτικόικανότητα και την ανάπτυξη σπειραματικής ίνωσης. Η κουρκουμίνη εμφανίζει ισχυρές βιολογικές και φαρμακολογικές επιδράσεις στη νεφρική υγεία [43]. Η γήρανση είναι ένας ανεξάρτητος παράγοντας κινδύνου που αυξάνει την πιθανότητα εμφάνισης καρδιαγγειακών παθήσεων που οφείλεται κυρίως στην αναδιαμόρφωση των αρτηριών και στην ανάπτυξη αγγειακής ενδοθηλιακής δυσλειτουργίας [44]. Άλλο ένα πολλά υποσχόμενοαντι γήρανσηΗ δυνατότητα λήψης συμπληρωμάτων κουρκουμίνης φάνηκε σε υγιείς μεσήλικες ηλικιωμένους άνδρες και σε μετεμμηνοπαυσιακές γυναίκες. Πράγματι, 12 εβδομάδες χορήγησης κουρκουμίνης βελτίωσαν την αντίσταση της ενδοθηλιακής λειτουργίας της αρτηρίας αυξάνοντας τη βιοδιαθεσιμότητα του ΝΟ και μειώνοντας το αγγειακό οξειδωτικό στρες. Αυτό υποδηλώνει τον κρίσιμο ρόλο της κουρκουμίνης για τη διατήρηση υγιούς αγγειακού ενδοθηλίου με τη γήρανση, ένα θεμελιώδες στοιχείο για την πρόληψη της αθηροσκλήρωσης και των αρτηριακών παθήσεων [45]. Μια άλλη μελέτη παρέχει πρόσθετη υποστήριξη σχετικά με το ρόλο της κουρκουμίνης που σχετίζεται με τη γήρανση σε ασθενείς με κίνδυνο καρδιαγγειακών παθήσεων μέσω της μείωσης των επιπέδων της LDL-χοληστερόλης και των τριγλυκεριδίων στον ορό [46]. Ο προσδιορισμός των μακροπρόθεσμων οφελών της κουρκουμίνης σε ασθενείς με καρδιαγγειακές παθήσεις ή σε κίνδυνο να αναπτύξουν καρδιαγγειακές διαταραχές φαίνεται σαν μια πολλά υποσχόμενη ερευνητική οδός. Η επιταχυνόμενη γήρανση που προκαλείται από το οξειδωτικό στρες έχει ως αποτέλεσμα διαφορές ανάλογα με το φύλο στη μακροζωία και την ευαισθησία σε νευροεκφυλισμό που σχετίζεται με την ηλικία. Σε προηγούμενη έρευνα, η κουρκουμίνη αποδείχθηκε ότι παρατείνει τη διάρκεια ζωής του μοντέλου μύγας (Drosophila melanogaster) μέσω της ενίσχυσης της δραστηριότητας SOD [47]. Αυτά τα ευρήματα επιβεβαιώθηκαν από άλλα δεδομένα όπου η κουρκουμίνη προκλήθηκε από ειδικές για το φύλο in vivo αποκρίσεις στο οξειδωτικό στρες. Αυτό περιλαμβάνει προστασία από το υπεροξείδιο του υδρογόνου και αλλοιώσεις στη συμπεριφορά του Drosophila melanogaster. Αυτό μπορεί να βασίζεται στη γονιδιακή έκφραση και να υποστηρίζει τον αντιγηραντικό ρόλο της κουρκουμίνης με τρόπο που εξαρτάται από το φύλο [48]. Η κουρκουμίνη ανήκει στην κατηγορία των ορμητικών παραγόντων που σταθεροποιούν το Nrf2 και ενισχύουν την έκφραση του HO-1. Η κουρκουμίνη ενεργοποιεί το μονοπάτι Nrf2, το οποίο έχει κεντρικό ρόλο στην ενεργοποίηση αντιοξειδωτικών ενζύμων, όπως η αναγωγάση της θειορεδοξίνης, η Hsp70, οι sirtuins [49-52]. Επιπλέον, ένα άλλο εύρημα μελέτης ανέφερε ότι η κουρκουμίνη αύξησε τη δραστηριότητα αρκετών αντιοξειδωτικών ενζύμων, συμπεριλαμβανομένης της πρωτεϊνικής θειόλης, της μη πρωτεϊνικής θειόλης, του GPx και του SOD σε σκύλους που τρέφονταν με κουρκουμίνη την ημέρα 30 σε σύγκριση με τους σκύλους ελέγχου. Επιπλέον, η κατανάλωση κουρκουμίνης διέγειρε την αντιοξειδωτική ικανότητα στον ορό των σκύλων και κατά συνέπεια μείωσε τα επίπεδα ROS. Η κουρκουμίνη βελτίωσε την υγεία των ζώων, με ιδιαίτερη έμφαση στη διέγερση του αντιοξειδωτικού συστήματος και ενδείξεις αντιφλεγμονώδους δράσης. Αυτό υποδηλώνει ότι η κουρκουμίνη ασκεί ευεργετική επίδραση τόσο στην ανάπτυξη, όσο και στην υγεία και κατά συνέπεια στην επιβράδυνση της γήρανσης [53].

Η λήψη συμπληρωμάτων κουρκουμίνης σε συνδυασμό με τακτική σωματική άσκηση θα μπορούσε δυνητικά να επιβραδύνει τη γήρανση ή/και να αποτρέψει τις λειτουργικές και δομικές αλλαγές που σχετίζονται με την ηλικία και τις διαταραχές που σχετίζονται με την ηλικία που προκαλούνται από το οξειδωτικό στρες. Συλλογικά, αυτά τα ευρήματα ενισχύουν το αντιοξειδωτικό δυναμικό της κουρκουμίνης στη λειτουργία της υγείας των οργάνων στο πλαίσιο της γήρανσης (βλ. Εικόνα 2). Απαιτούνται περαιτέρω έρευνες για την αποκάλυψη των ακριβών μοριακών στόχων και οδών σηματοδότησης που ευθύνονται για τις αντιοξειδωτικές επιδράσεις της κουρκουμίνης σε διαφορετικούς ανθρώπινους πληθυσμούς.

4. Αντιφλεγμονώδης ρόλος της κουρκουμίνης

Η φλεγμονή είναι μια από τις κύριες αιτίες γήρανσης, η οποία συχνά συνδέεται με μια εξασθενημένη διαδικασία επούλωσης [54]. Ιδιαίτερα, η φλεγμονή χαμηλού βαθμού πιστεύεται ότι συμβάλλει ουσιαστικά στη διαδικασία γήρανσης και οδηγεί σε διάφορες μειώσεις που σχετίζονται με τη γήρανση σε πολλές λειτουργίες των οργάνων [55,56]. Ιδιαίτερο ενδιαφέρον, η γήρανση χαρακτηρίζεται από αυξημένο κυκλοφορικό επίπεδο προφλεγμονωδών μεσολαβητών, ένα φαινόμενο που έχει ονομαστεί «φλεγμονώδες».

Επιπλέον, η μικροχλωρίδα του εντέρου και η διατροφή αποδείχθηκε ότι επηρεάζουν τη φλεγμονή χαμηλού βαθμού. Πρόσφατα ευρήματα προτείνουν διατροφικές παρεμβάσεις, συμπεριλαμβανομένης της συμπλήρωσης κουρκουμίνης, ως στρατηγική για την καταπολέμηση της φλεγμονής. Είναι ενδιαφέρον ότι οι ιδιότητες ρύθμισης της ηλικίας και οι υγιεινές επιδράσεις της κουρκουμίνης έχουν απεικονιστεί σε διαφορετικά κυτταρικά και ζωικά μοντέλα, συμπεριλαμβανομένων των C. elegans, Drosophila και ποντικών. Όπως αναφέρθηκε ξεκάθαρα παραπάνω, βρέθηκε ότι η κουρκουμίνη παρατείνει τόσο τη διάρκεια της υγείας όσο και τη διάρκεια ζωής, εμποδίζοντας κυρίως την πιο σχετική προφλεγμονώδη οδό NF-kB [57] (Πίνακας 1).

Εκτός από τα καλά τεκμηριωμένα στοιχεία που υποστηρίζουν τις πολυάριθμες βιολογικές ιδιότητες της κουρκουμίνης στην αναστολή της φλεγμονής που εξαρτάται από τη σηματοδότηση NF-kB [34,58]. έχει περιγραφεί μια άλλη περαιτέρω επίπτωση στη μείωση της έντασης της φλεγμονής. Πράγματι, η κουρκουμίνη αποδείχθηκε ότι ρυθμίζει τον εκκριτικό φαινότυπο που σχετίζεται με τη γήρανση (SASP), ο οποίος χαρακτηρίζει τα γηρασμένα κύτταρα και συμβάλλει στην τροφοδοσία της φλεγμονής [59,60].

Είναι ενδιαφέρον ότι η βραχυπρόθεσμη θεραπεία κυττάρων με χαμηλές συγκεντρώσεις κουρκουμίνης μείωσε το επίπεδο των εκκρινόμενων προφλεγμονωδών κυτοκινών όπως η IL-8 σε φυσιολογικά νεαρά κύτταρα [61]. Επιπλέον, χαμηλότερες δόσεις κουρκουμίνης έχουν αυξήσει την παραγωγή της σιρτουΐνης, δηλαδή των αποακετυλασών που εξαρτώνται από το NAD, και η σιρτουΐνη 1 μείωσε τη φλεγμονή αναστέλλοντας τη σηματοδότηση NF-kB [62]. Πιστεύεται ότι η κουρκουμίνη ασκεί την επίδρασή της με τρόπο δοσοεξαρτώμενο και κυτταρικό πλαίσιο στη δραστηριότητα πρωτεΐνης που εμπλέκεται στο SASP.

Ιδιαίτερα, αυξανόμενα στοιχεία υποδηλώνουν ότι η επαναλαμβανόμενη διέγερση των έμφυτων ανοσοαποκρίσεων με την πάροδο του χρόνου [63] έχει ως αποτέλεσμα την ανάπτυξη φλεγμονής. Σε αυτές τις ρυθμίσεις, τόσο η αυξημένη επιβάρυνση των γηρασμένων κυττάρων κατά τη διάρκεια της γήρανσης όσο και η υπερδιέγερση των μακροφάγων με την πάροδο του χρόνου μπορούν να παίξουν βασικούς ρόλους στη διαδικασία της φλεγμονής.

Πρόσφατες αναφορές τυχαιοποιημένων ελεγχόμενων δοκιμών που πραγματοποιήθηκαν από το 2008 έως το 2020 έχουν δείξει ότι η κουρκουμίνη ήταν σε θέση όχι μόνο να ρυθμίσει τηναντιοξειδωτικόκατάσταση αλλά και αποκατάσταση της ποσότητας, της ποιότητας και της λειτουργικής-μεταβολικής κατάστασης των κυττάρων του ανοσοποιητικού. Αυτό υποστηρίζει άλλα δεδομένα που δείχνουν μερική αντιφλεγμονώδη, ανοσοτροπική καιαντιοξειδωτικόδραστηριότητα του εκχυλίσματος κουρκουμά in vitro και in vivo. Περαιτέρω επίδραση της κουρκουμίνης στη ρύθμιση της φλεγμονής που σχετίζεται με τη γήρανση μέσω της μείωσης του επιπέδου της CRP με δοσοεξαρτώμενο τρόπο αναφέρθηκε στο μοντέλο των αρουραίων. Επιπλέον, τα επίπεδα MDA και NO αυξήθηκαν σημαντικά σε ζώα που τρέφονταν με κουρκουμίνη [64]. Αυτό ενίσχυσε την πεποίθησή μας ότι η κουρκουμίνη επιβραδύνει τη διαδικασία γήρανσης καταστέλλοντας τους φλεγμονώδεις δείκτες που σχετίζονται με την ηλικία.

Εκτός από το ρόλο του μονοπατιού σηματοδότησης NF-kB στη φλεγμονώδη διαδικασία, τα κυκλοφορούντα επίπεδα του MCP{1}} βρέθηκαν να αυξάνονται με τη γήρανση και θεωρούνται ως ένας πιθανός βιοδείκτης γήρανσης [65-67]. Είναι ενδιαφέρον ότι τα αντιφλεγμονώδη αποτελέσματα της κουρκουμίνης έχουν αποδειχθεί ότι περιλαμβάνουν την αναστολή της MCP-1 [33]. Άλλες αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις περιελάμβαναν τη μείωση της ρύθμισης των φλεγμονωδών μεσολαβητών όπως η δραστηριότητα COX-2, η λιποξυγενάση, iNOS, MAPK, JAK και η αναστολή της παραγωγής TNF, IL{10}}, -2, {{ 12}}, -8 και -12, ανασταλτικός παράγοντας μετανάστευσης μακροφάγων (MIF) [66].

Μια πρόσφατη μελέτη έδειξε ότι η κουρκουμίνη όχι μόνο διεγείρει τηναντιοξειδωτικόσύστημα και μειωμένες οξειδωτικές αντιδράσεις σε σκύλους αλλά και μειωμένος αριθμός λευκοκυττάρων, γεγονός που υποδηλώνει ήπιες αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις που επιτυγχάνονται σε σκύλους που τρέφονται με δόση 30 mg κουρκουμίνης/σκύλος/ημέρα [53]. Αυτά τεκμηριώνουν προηγούμενα ευρήματα [67], όπου παρατηρήθηκε ότι τα θηλάζοντα αρνιά που τρέφονταν με κουρκουμίνη είχαν χαμηλότερα ολικά λευκοκύτταρα, ουδετερόφιλα και λεμφοκύτταρα. Παρόμοιο αποτέλεσμα αναφέρθηκε σε αρουραίους που έλαβαν 50 και 400 mg/kg κουρκουμίνη, υποδεικνύοντας μια αξιοσημείωτη βελτιωτική επίδραση στην υγεία και την ανοσολογική απόκριση [68]. Αυτό δείχνει τη σημασία της κουρκουμίνης στην αναστροφή των φλεγμονωδών αποκρίσεων και στην ενίσχυση της απόδοσης του ανοσοποιητικού συστήματος, παίζοντας κρίσιμο ρόλο στη βελτίωση της υγείας και κατά συνέπεια στην επιβράδυνση της γήρανσης (βλ. Εικόνα 2).

5. Νευροπροστατευτικός ρόλος της κουρκουμίνης

Η προχωρημένη ηλικία θεωρείται σημαντικός παράγοντας κινδύνου γνωστικής δυσλειτουργίας και νευροεκφυλιστικών ασθενειών. Η κυτταρική γήρανση διεγείρει την έκκριση προφλεγμονωδών κυτοκινών που προκαλούν χρόνια φλεγμονή ανεξάρτητα από την ενεργοποίηση του ανοσοποιητικού συστήματος. Αυτό το φαινόμενο της χρόνιας φλεγμονής του συστήματος που συνοδεύει τη γήρανση ονομάζεται «φλεγμονή», με αποτέλεσμα τον θάνατο και τη γνωστική έκπτωση [69-73]. Μεταξύ των πολλαπλών ιδιοτήτων της, η κουρκουμίνη είναι επίσης γνωστή για τις αντι-πρωτεϊνικές και νευροπροστατευτικές της δράσεις που βελτιώνουν την πρόγνωση νευρο-φλεγμονώδεις ασθένειες που έχουμε συζητήσει προηγουμένως [4,74] (Πίνακας 1).

Ωστόσο, το κύριο εμπόδιο για την παροχή κουρκουμίνης στον εγκέφαλο είναι ο αιματοεγκεφαλικός φραγμός (BBB) ​​[75]. Πιθανές κλινικές εφαρμογές της νανοκουρκουμίνης αναδύονται και είναι ικανές να ξεπεράσουν τα θεραπευτικά εμπόδια της ελεύθερης κουρκουμίνης και να βελτιώσουν πολλές κυτταρικές και οργανικές δυσλειτουργίες που σχετίζονται με τη γήρανση [76].

Η γήρανση θα μπορούσε να αλλάξει δραματικά το μικροβίωμα του εντέρου και να οδηγήσει σε επιβλαβείς αλλαγές στον άξονα εντέρου-εγκεφάλου [77] συμπεριλαμβανομένων των ενδοκρινικών, θρεπτικών, ανοσολογικών και νευρικών σημάτων μεταξύ του εντέρου και του εγκεφάλου μέσω του εντερικού νευρικού συστήματος (ENS) και κατά συνέπεια σε πολλαπλό κεντρικό νευρικό σύστημα (ΚΝΣ). διαταραχές όπως η σκλήρυνση κατά πλάκας, η κατάθλιψη, το άγχος [78]. Εκτός από την ανάπτυξη διαφόρων εκφυλιστικών διαταραχών, συμπεριλαμβανομένων της AD, της PD, της πολλαπλής ατροφίας του συστήματος (MSA), της οπτικής νευρομυελίτιδας (NMO) και της αμυοτροφικής πλευρικής σκλήρυνσης (ALS) [79] καθώς γερνάμε, αυτές οι διαταραχές μπορεί επίσης να προκληθούν έμμεσα από την κατάσταση της υγείας, αυξανόμενη ανάγκη για φάρμακα όπως: ΜΣΑΦ, αντιβιοτικά και υποσιτισμός [80,81]. Καθώς ο άξονας εντέρου-εγκεφάλου συνδέεται με νευροεκφυλισμό, η κουρκουμίνη ασκεί νευροπροστατευτική δράση έναντι των νευροεκφυλιστικών διαταραχών αποκαθιστώντας τη λειτουργία του εντερικού φραγμού και ένα υγιές μικροβίωμα του εντέρου [82].

Η διερεύνηση των επιδράσεων της κουρκουμίνης στον εγκέφαλο διαβητικών αρουραίων έδειξε ότι η θεραπεία με κουρκουμίνη ή ανάλογο κουρκουμίνης Α13 μείωσε τη φλεγμονή μέσω της αναστολής της κανονικής οδού NF-kB p65 και της μείωσης του επιπέδου του TNF- και του Cox-2 στον εγκέφαλο σε διαβητικούς αρουραίους φλοιός. Η κουρκουμίνη και η Α13 μείωσαν το οξειδωτικό στρες μέσω της αύξησης της δραστηριότητας του SOD και μείωσαν το επίπεδο MDA της μηλονοδιαλδεΰδης στον εγκέφαλο διαβητικών αρουραίων [83]. Αυτά τα ευρήματα υπογραμμίζουν τη σημασία της νευροπροστατευτικής δράσης της κουρκουμίνης έναντι της εγκεφαλικής βλάβης σε διαβητικούς αρουραίους ρυθμίζοντας τόσο τη φλεγμονή όσο και το οξειδωτικό στρες. Αυτό είναι σύμφωνο με προηγούμενα ευρήματα όπου η κουρκουμίνη αποδείχθηκε ότι μειώνει σημαντικά την έκφραση mRNA του NF-kB και του TLR4 και έδειξε προστατευτικά αποτελέσματα έναντι της νευροτοξικότητας του γλουταμικού στους αρσενικούς αλμπίνους επίμυες [84].

Είναι ενδιαφέρον ότι μια άλλη μελέτη που αναλύει τις νευροπροστατευτικές επιδράσεις που προκαλούνται από την κουρκουμίνη στη γήρανση του εγκεφάλου που προκαλείται από την D-γαλακτόζη σε μοντέλα in vitro και in vivo αποκάλυψεαντι γήρανσηεπίδραση μέσω της ρύθμισης της νευρωνικής απώλειας, της απόπτωσης στη γήρανση του εγκεφάλου που προκαλείται από την D-γαλακτόζη και της έκφρασης αντιοξειδωτικών ενζύμων. [85].

Επιπλέον, η κουρκουμίνη βελτίωσε το μήκος των νευρώνων και την κυτταρική γήρανση μείωσε την έκφραση των p16 και p21 και βελτίωσε την έκφραση τηςαντιοξειδωτικόένζυμα, συμπεριλαμβανομένων των SOD-1, GPX-1 και καταλάσης. Η χορήγηση κουρκουμίνης βελτίωσε τη γνωστική εξασθένηση και κατέστειλε την απόπτωση στον εγκεφαλικό φλοιό μειώνοντας την έκφραση της πολυμεράσης Bax και πολυ (ADP-ριβόζης) και αυξάνοντας την έκφραση Bcl-2 [86]. Σε νευροεκφυλιστικές ασθένειες, όπως AD, PD, ALS, τα μικρογλοία διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο προκαλώντας οξειδωτικό στρες, ανισορροπία οξειδοαναγωγής και νευροφλεγμονή. Τα ενεργοποιημένα μικρογλοία αντιπροσωπεύονται από λειτουργικούς φαινότυπους Μ1 (προφλεγμονώδη) και Μ2 (αντιφλεγμονώδεις) με βάση τα επιφανειακά μόρια και τα προφίλ έκφρασης κυτοκίνης. Διαφορετικά φυσικά προϊόντα παρουσιάζουν θεραπευτικές ιδιότητες στη μικρογλοία και κατά συνέπεια προλαμβάνουν νευροεκφυλιστικές ασθένειες. δρουν με την αναστολή της πόλωσης των μικρογλοίων και την παραγωγή φλεγμονωδών μεσολαβητών. Στη μικρογλοία, η κουρκουμίνη δρα σε διαφορετικούς μοριακούς στόχους. Η κουρκουμίνη ανέστειλε τις επαγόμενες από LPS NF-kB και τις δεσμεύσεις DNA της πρωτεΐνης ενεργοποιητή-1 (AP-1) σε μικρογλοιακά κύτταρα BV2 [87] μειώνοντας τους φλεγμονώδεις μεσολαβητές. Ο υποδοχέας-y που ενεργοποιείται από τον πολλαπλασιασμό υπεροξισωμάτων (PPARy) είναι ένας μεταγραφικός παράγοντας και πρωτεΐνη πυρηνικού υποδοχέα που ρυθμίζει τις φλεγμονώδεις αποκρίσεις σε μικρογλοία, αστροκύτταρα [88] και όταν ενεργοποιείται, το PPARy καταστέλλει την παραγωγή προφλεγμονωδών κυτοκινών και παθολογοαναπνευστικής ανταπόκρισης διοξειδισμού στοιχείο [88]. Η κουρκουμίνη ενεργοποιεί το PPARy που μειώνει την παραγωγή κυτοκίνης NF-kB σε ένα μοντέλο AD σε ποντίκια, σε πρωτογενείς κυτταρικές σειρές ιππόκαμπου αρουραίου και πρωτογενή αστροκύτταρα [89]. Επιπλέον, η ομάδα μας ανακάλυψε ότι η κουρκουμίνη καταστέλλει την επαγόμενη από το LPS φλεγμονώδη απόκριση στα μικρογλοιακά κύτταρα μέσω της μείωσης της ρύθμισης της οδού σηματοδότησης PI3K/Akt [90,91] και JAK/STAT/SOCS [92]. Επιπλέον, η κουρκουμίνη επάγει αντιφλεγμονώδεις μεσολαβητές, όπως το HO{-1/NRF-2, μειώνοντας κατά συνέπεια το οξειδωτικό στρες και τη νευροφλεγμονή [93]. Η θεραπεία με κουρκουμίνη βελτίωσε την απώλεια νευρώνων και τον εκφυλισμό, ενώ επίσης αναστέλλει την κυτταρική γήρανση και το οξειδωτικό στρες ρυθμίζοντας προς τα πάνωαντιοξειδωτικόέκφραση ενζύμου σε κύτταρα SY5Y που προκαλούνται από RA [94]. Σύμφωνα με τα ευρήματα που περιγράφονται παραπάνω, η προστατευτική δράση της κουρκουμίνης έναντι της γνωστικής εξασθένησης έχει αποδειχθεί στο μοντέλο γνωστικού ελλείμματος που προκαλείται από σακχαρώδη διαβήτη/χρόνια εγκεφαλική υπερδιάχυση. Επιπλέον, η θεραπεία με κουρκουμίνη εξασθένησε τον νευρωνικό θάνατο και κατέστειλε τη νευροφλεγμονή που προκλήθηκε από την ενεργοποίηση των μικρογλοίων [95]. Αυτές οι προστατευτικές επιδράσεις περιλάμβαναν τη ρύθμιση των υποδοχέων ενεργοποίησης που εκφράζονται στα μυελοειδή κύτταρα 2 (TREM2)/TLR4/NF-kB μονοπάτι. Η θεραπεία με κουρκουμίνη μείωσε την εξαρτώμενη από τον υποδοχέα πρωτεΐνη 3 (NLRP3) πυρόπτωση. [95]. Εφόσον η εξαρτώμενη από το NLRP{13}πυρόπτωση έχει αναφερθεί ότι εμπλέκεται στην εξέλιξη νευροεκφυλιστικών ασθενειών, αυτό το αποτέλεσμα υποδηλώνει ότι η κουρκουμίνη μπορεί να είναι χρήσιμη ως φαρμακολογική στρατηγική για νευροεκφυλιστικές ασθένειες. Απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για την καλύτερη κατανόηση των πολλά υποσχόμενων επιδράσεων της κουρκουμίνης στην πρόληψη της νευρωνικής απώλειας και της γνωστικής έκπτωσης που σχετίζεται με τη γήρανση [96].

Πίνακας 1. Ιδιότητες κουρκουμίνης.

6. Κουρκουμίνη και Τελομεράση στον Εγκέφαλο

Το ROS προκάλεσε οξειδωτικό στρες, γνωστό ως δυνητικός συντελεστής της διαδικασίας γήρανσης που προκύπτουν ως βλάβες που προκαλούνται από προϊόντα του ενεργειακού μεταβολισμού στα μιτοχόνδρια [97] και με τη σειρά τους οδηγούν σε βράχυνση των τελομερών.

Η τελομεράση είναι παρούσα σε όλους σχεδόν τους ευκαρυωτικούς οργανισμούς και μελετήθηκε αρχικά σε πρωτόζωα από τη βραβευμένη με Νόμπελ Ελίζαμπεθ Μπλάκμπερν, η σημασία της για την ανθρώπινη υγεία κατά την ανάπτυξη, τη γήρανση και τον καρκίνο σύντομα έγινε εμφανής [98].

Τα τελομερή είναι εξαιρετικά διατηρημένες επαναλαμβανόμενες αλληλουχίες DNA που βρίσκονται στο τέλος των χρωμοσωμάτων, οι οποίες ελέγχουν την κυτταρική αντιγραφή και συμβάλλουν στη διατήρηση της χρωμοσωμικής σταθερότητας.

Τα τελομερή μειώνονται κατά 50-200 βάσεις μετά από κάθε γύρο κυτταρικής διαίρεσης. Όταν το τελομερές φτάσει σε ένα κρίσιμο ελάχιστο μήκος, τα κύτταρα γερνούν. Τα διαιρούμενα κύτταρα εκφράζουν την τελομεράση, ένα ένζυμο ριβονουκλεοπρωτεΐνης που συνθέτει και επιμηκύνει το τελομερικό DNA [99].

Η ανθρώπινη τελομεράση περιέχει δύο υπομονάδες: συστατικό RNA ανθρώπινης τελομεράσης (hTR, επίσης γνωστό ως hTERC) και ανάστροφη μεταγραφάση ανθρώπινης τελομεράσης (hTERT). Το hTR αποτελείται από ένα εκμαγείο RNA συμπληρωματικό στο 3/προεξοχή των τελομερών [100]. Το hTERT δρα ως η καταλυτική υπομονάδα που προσθέτει τελομερικό DNA στην προεξοχή 3/101,102.

Το επίπεδο έκφρασης του mRNA του hTERT συσχετίζεται σε μεγάλο βαθμό με τη δραστηριότητα της κυτταρικής τελομεράσης [103], υποδεικνύοντας ότι το hTERT είναι απαραίτητο για τη δραστηριότητα της τελομεράσης. Έτσι, θα είναι χρήσιμο να μελετηθεί ο μηχανισμός που βρίσκεται κάτω από τη ρύθμιση του hTERT προκειμένου να αξιοποιηθεί η τελομεράση για τη διάγνωση και τη θεραπεία του καρκίνου.

Η τελομεράση είναι παρούσα σε ~ 90 τοις εκατό των καρκινικών κυττάρων και των ιστών του όγκου, αποδεικνύοντας ότι συμβάλλουν στον άπειρο πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων [104]. Η κουρκουμίνη αποδείχθηκε ότι έχει ανασταλτικές επιδράσεις στην τελομεράση και επαγόμενη βράχυνση και απόπτωση των τελομερών σε κύτταρα όγκου εγκεφάλου. Η κουρκουμίνη προκάλεσε αναστολή ανάπτυξης και διακοπή του κυτταρικού κύκλου στο G2/M σε κύτταρα μυελοβλαστώματος και γλοιοβλαστώματος [105].

Σε διάφορους τύπους καρκίνων, η κουρκουμίνη αποδείχθηκε ότι στοχεύει επιλεκτικά κύτταρα που εκφράζουν το ένζυμο τελομεράση καθιστώντας αυτά τα κύτταρα πιο ευάλωτα στην επαγόμενη από την κουρκουμίνη κυτταροτοξικότητα των καρκινικών κυττάρων. Είναι σημαντικό ότι η προαναφερθείσα μελέτη αποκάλυψε ότι η πολύπλοκη και ποικιλόμορφη δράση της κουρκουμίνης και η αποτελεσματικότητά της θα μπορούσαν να εξαρτηθούν από τους τύπους κυττάρων που χρησιμοποιούνται. Οι μακροχρόνιες μελέτες σε κύτταρα όγκου στον εγκέφαλο τόνισαν τη χρήση της κουρκουμίνης ως επικουρικού για τη θεραπεία του καρκίνου. Η βράχυνση των τελομερών οδηγεί στη γήρανση των νεφρικών κυττάρων και οδηγεί στη γήρανση των νεφρών.

Ο Khaw και οι συνεργάτες του έχουν δείξει ότι η κουρκουμίνη καταστέλλει τη δραστηριότητα της τελομεράσης στα κύτταρα του όγκου του εγκεφάλου, η οποία σχετίζεται με τη μείωση των επιπέδων hTERT. Η θεραπεία με κουρκουμίνη προκαλεί σημαντική βράχυνση των τελομερών στα κύτταρα του όγκου του εγκεφάλου, υποδηλώνοντας την πιθανή κλινική εφαρμογή της ως αναστολέα της τελομεράσης και τη χρήση της κουρκουμίνης σε επικουρική θεραπεία καρκίνου [105]. Αντίθετα, στα φυσιολογικά κύτταρα η κουρκουμίνη βελτιώνει τη βιωσιμότητα δρώντας στην τελομεράση όταν τα κύτταρα έχουν διεγερθεί με τοξικά μόρια. Μια μελέτη που διεξήχθη σε κύτταρα SK-N-SH που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με A 1–42, κουρκουμίνη και Cur1 βελτίωσε τη βιωσιμότητα των κυττάρων. Κανονικά, το hTERT αναστέλλεται από A 1–42. Τα βραχυπρόθεσμα τελομερή δεν μπορούσαν να αποκαταστήσουν το μήκος, και στη συνέχεια, υπήρχαν πολλά αποπτωτικά κύτταρα. Η θεραπεία με κουρκουμίνη και Cur1 θα μπορούσε να συνδεθεί με το A 1–42 και να ανταγωνιστεί τη νευροτοξικότητα. Έτσι, η έκφραση του hTERT ρυθμίστηκε προς τα πάνω, το μήκος του τελομερούς αποκαταστάθηκε και ο αριθμός των κυττάρων αυξήθηκε. Ανοδική ρύθμιση του hTERT δεν παρατηρήθηκε σε κύτταρα SK-N-SH που έλαβαν θεραπεία με κουρκουμίνη ή Cur1 χωρίς θεραπεία 1–42 που οδηγεί στο συμπέρασμα ότι η κουρκουμίνη και το Cur1 δεν έχουν καμία επίδραση στην ανοδική ρύθμιση του hTERT σε φυσιολογικά κύτταρα [106]. Είναι σημαντικό ότι η δράση της κουρκουμίνης είναι πολύπλοκη και διαφορετική και η αποτελεσματικότητά της μπορεί να εξαρτάται από τους τύπους κυττάρων που χρησιμοποιούνται στη μελέτη. Μακροχρόνιες μελέτες σε κύτταρα όγκου εγκεφάλου υπογραμμίζουν τη χρήση της κουρκουμίνης σε επικουρική θεραπεία του καρκίνου.

7. Νέες στρατηγικές νανοπαραγωγής για την αύξηση των φαρμακολογικών δραστηριοτήτων της κουρκουμίνης

Για να αυξηθεί η διαλυτότητα, η σταθερότητα, η βιοδιαθεσιμότητα και η δραστηριότητα της κουρκουμίνης, έχει βρεθεί μια κοινή στρατηγική σε διάφορες έρευνες: η ενθυλάκωση.

Αρκετές ερευνητικές ομάδες έδειξαν τη βελτίωση της ενθυλακωμένης κουρκουμίνης σε σύγκριση με το ελεύθερο μόριο. Έχουν χρησιμοποιηθεί δύο μεγάλες κατηγορίες νανοφορέων: οι συνθετικοί και οι φυσικοί νανοφορείς.

Έχουν αναπτυχθεί διάφοροι τύποι συνθετικών νανοφορέων για την παροχή κουρκουμίνης: σκευάσματα κουρκουμίνης με βάση τα λιπίδια (λιποσώματα, νανοσωματίδια στερεού-υγρού, νανοδομημένοι φορείς λιπιδίων) και σκευάσματα κουρκουμίνης με βάση πολυμερή (μικκύλια, πολυμερή νανοσωματίδια, πολυμερή βλέπε ανασκόπηση) [96,107]).

Λόγω του πλούτου των εργασιών που επικεντρώνονται σε στρατηγικές που χρησιμοποιούν αυτές τις συνθετικές συνθέσεις κουρκουμίνης, θα συνοψίσουμε παρακάτω μόνο δύο στρατηγικές που χρησιμοποιούνται για τη νανοπαράδοση της (Βλ. Εικόνα 3).

Τα λιποσώματα είναι συστήματα που αποτελούνται από μεμονωμένες ή πολλαπλές διπλές στοιβάδες φτιαγμένα από φωσφολιπίδια που εγκλωβίζουν υδρόφιλα, λιπόφιλα και αμφίφιλα μόρια [108]. Τροποποιήσεις αυτής της συμβατικής δομής έχουν επεξεργασθεί, όπως λιποσώματα που περιέχουν επιφανειακό στρώμα πολυαιθυλενογλυκόλης, θεραπευτικά λιποσώματα που περιέχουν παράγοντα εικόνας και λιποσώματα που περιέχουν συγκεκριμένο συνδέτη στόχο [109]. In vitro, η λιποσωμική κουρκουμίνη είχε ως αποτέλεσμα την εξαρτώμενη από τη συγκέντρωση αναστολή του πολλαπλασιασμού, την πρόκληση απόπτωσης και την καταστολή της κινητικότητας των κυττάρων του καρκινώματος του ενδομητρίου [110]. Επιπλέον, δεν έχει βρεθεί αποδεδειγμένη τοξικότητα στο μοντέλο zebrafish, και οι όγκοι καταστέλλονται μετά από θεραπεία με λιποσώματα ενθυλακωμένα με κουρκουμίνη [110].

Εικόνα 3. Συστήματα ενθυλακωμένα με κουρκουμίνη στον εγκέφαλο.

Επιπλέον, η μείωση των δυσλειτουργιών που παρατηρούνται σε νευροεκφυλιστικές ασθένειες έχει αποδειχθεί χρησιμοποιώντας σωματίδια στερεού λιπιδίου κουρκουμίνης. Η οξεία θεραπεία των στερεών λιπιδικών σωματιδίων κουρκουμίνης παρέχει περισσότερα αντιαμυλοειδή, αντιφλεγμονώδη και νευροπροστατευτικά αποτελέσματα από την ελεύθερη κουρκουμίνη σε ένα μοντέλο ποντικού της νόσου του Alzheimer [111]. Στο ίδιο ζωικό μοντέλο, τα στερεά σωματίδια κουρκουμίνης λιπιδίου μείωσαν τις αμυλοειδείς πλάκες και τον νευρωνικό θάνατο, απέτρεψαν την απώλεια δενδριτικής σπονδυλικής στήλης και διατήρησαν προ- και μετασυναπτικούς δείκτες, μαζί με μερική βελτίωση των συμπεριφορικών αποτελεσμάτων [112].

Τα μικκύλια είναι αυτοσυναρμολογούμενα κολλοειδή σωματίδια νανομεγέθους με υδρόφοβο πυρήνα και υδρόφιλο κέλυφος [113]. Έχει αποδειχθεί ότι τα μικκύλια κουρκουμίνης είναι μια εξαιρετική ενδοφλέβια ενέσιμη υδατική σύνθεση κουρκουμίνης. αυτό το σκεύασμα μπορεί να αναστείλει την ανάπτυξη του καρκινώματος του παχέος εντέρου μέσω της αναστολής της αγγειογένεσης και της άμεσης θανάτωσης των καρκινικών κυττάρων [114].

Επιπλέον, έχει σημειωθεί ότι τα φορτωμένα με κουρκουμίνη νανομικκύλια καταστέλλουν την εξέλιξη της AD μειώνοντας την ινιδοποίηση των πρωτεϊνών και αναστέλλοντας την αμυλοειδογένεση μέσω της διαδικασίας γλυκοζυλίωσης λόγω της απελευθέρωσης κουρκουμίνης, αποτρέποντας έτσι το σχηματισμό και τη συσσώρευση ινιδίων αμυλοειδούς και γλυκοζυλίωση. Αυτό το αποτέλεσμα διατηρείται επίσης από την υψηλότερη αποτελεσματικότητα των μικκυλίων που είναι φορτισμένα με κουρκουμίνη λόγω της αποικοδόμησης ή της υδρόλυσής τους και στη συνέχεια της απελευθέρωσης της κουρκουμίνης ωςαντιοξειδωτικόπράκτορας [115].

Σε μια πρόσφατη μελέτη που αξιολογούσε τη συγκριτική επίδραση της συμβατικής κουρκουμίνης με τα νανοσωματίδια κουρκουμίνης - λιποσωματική κουρκουμίνη (LCC) - σε πειραματικό μοντέλο νεφροτοξικότητας που προκαλείται από γενταμικίνη σε πειραματικό αρουραίο, παρατηρήθηκε ότι το LCC ήταν πιο αποτελεσματικό. Είναι ενδιαφέρον ότι το LCC βελτίωσε όλες τις παραμέτρους του οξειδωτικού στρες: MDA, NO, ολικό οξειδωτικό στρες. Συνολικά, η κουρκουμίνη έδειξε δοσοεξαρτώμενη βελτιωτική επίδραση στις παραμέτρους του οξειδωτικού στρες στο πλάσμα/αντιοξειδωτικόχωρητικότητα, επίπεδο MMP-2 και -9 και παραμέτρους νεφρικής λειτουργίας στο μοντέλο νεφροτοξικότητας που προκαλείται από γενταμικίνη [116].

Μεταξύ των φυσικών νανοφορέων, τα εξωσώματα έχουν χρησιμοποιηθεί ως αποτελεσματικό σύστημα χορήγησης φαρμάκων [117,118]. Τα εξωσώματα ανήκουν στην οικογένεια των εξωκυτταρικών κυστιδίων και απελευθερώνονται από τα κύτταρα με εξωκυττάρωση μετά την ωρίμανση των πολυκυστιδιακών σωμάτων. Η σύνθεση πρωτεϊνών, λιπιδίων και νουκλεϊκών οξέων τους προσδίδει την ικανότητα να μεσολαβούν στην κυτταρική επικοινωνία. Τα εξωσώματα έχουν την εγγενή ιδιότητα να είναι βιοσυμβατά και δεν προκαλούν παρενέργειες. Επιπλέον, το μικρό τους μέγεθος επιτρέπει να περάσουν βιολογικά εμπόδια και να ξεφύγουν από το ανοσοποιητικό σύστημα. Μπορούν να δεσμεύσουν υδρόφοβα μόρια, όπως τα φάρμακα, ευνοώντας τη μεταφορά, τη βιοδιαθεσιμότητα και την πρόσληψή τους [117]. Πράγματι, τα εξωσώματα μπορούν να χειριστούν προκειμένου να δημιουργηθούν ενθυλακωμένα με κουρκουμίνη εξωσώματα. Δύο στρατηγικές παθητικής ενθυλάκωσης είναι δυνατές: (i) κυτταρική επεξεργασία με κουρκουμίνη και απομόνωση απελευθερωμένων εξωσωμάτων (φορτωμένα εξωσώματα) και (ii) φόρτωση κουρκουμίνης στα εξωσώματα (αρχικά εξωσώματα).

Η κουρκουμίνη μπορεί να αυτοσυναρμολογηθεί στη λιπιδική μεμβράνη του εξωσώματος μέσω της αλληλεπίδρασης μεταξύ των υδρόφοβων ουρών και του υδρόφοβου φαρμάκου. Η εισαγωγή στη διπλοστοιβάδα λιπιδίων εξασφάλισε την προστασία της κουρκουμίνης από την αποικοδόμηση [119].

Το θεραπευτικό αποτέλεσμα των εξωσωμάτων με φορτωμένη κουρκουμίνη αποδείχθηκε για πρώτη φορά σε ένα πλαίσιο φλεγμονής [119]. Η ενθυλακωμένη κουρκουμίνη αύξησε τη διαλυτότητα, τη σταθερότητα και τη βιοδιαθεσιμότητα της κουρκουμίνης και ενίσχυσε την παροχή της κουρκουμίνης σε ενεργοποιημένα μονοκύτταρα. Κατά συνέπεια, αυτό το νέο σύστημα χορήγησης φαρμάκων εξασφάλισε την προστασία των ποντικών από το σηπτικό σοκ που προκαλείται από το LPS [119].

Άλλες μελέτες κατέδειξαν την ευεργετική επίδραση των εξωσωμάτων που παράγονται κατά την επεξεργασία διαφορετικών ειδών κυττάρων με κουρκουμίνη. Έχει αποδειχθεί ότι η κουρκουμίνη προώθησε την έκκριση των εξωσωμάτων σε ένα μοντέλο διαταραχής της ενδοκυτταρικής διακίνησης χοληστερόλης [120]. Πράγματι, φορτωμένα εξωσώματα από κύτταρα λευχαιμίας που υποβλήθηκαν σε αγωγή με κουρκουμίνη μείωσαν την ανάπτυξη των λευχαιμικών κυττάρων [121] καθώς και την αγγειογένεση του όγκου μειώνοντας τη μετανάστευση των ενδοθηλιακών κυττάρων, την έκφραση του μορίου προσκόλλησης αγγειακών κυττάρων-1 και τη μείωση των τριχοειδών δομές [122].

Ομοίως, τα εξωσώματα από κύτταρα αδενοκαρκινώματος παγκρέατος και από μη μικροκυτταρικό καρκίνωμα πνεύμονα που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με κουρκουμίνη διέθεταν αντικαρκινικές ιδιότητες [123,124].

Τα εξωσώματα από ενδοθηλιακά κύτταρα εγκεφάλου ποντικού που υποβλήθηκαν σε αγωγή με κουρκουμίνη αύξησαν την έκφραση της πρωτεΐνης σύνδεσης και βελτίωσαν τη διαπερατότητα των ενδοθηλιακών κυττάρων. Τα ευεργετικά αποτελέσματα αυτών των εξωσωμάτων οφείλονται επίσης στην ικανότητά τους να μειώνουν το οξειδωτικό στρες του ενδοθηλίου [125].

Τα φορτωμένα με κουρκουμίνη εξωσώματα χορηγήθηκαν ενδορινικά σε τρία μοντέλα ασθενειών που προκαλούνται από φλεγμονή, ένα μοντέλο εγκεφαλικής φλεγμονής που προκαλείται από LPS, πειραματική αυτοάνοση εγκεφαλίτιδα και ένα μοντέλο όγκου εγκεφάλου GL26 που προστατεύεται από φλεγμονή εγκεφάλου που προκαλείται από LPS. η εξέλιξη του πεπτιδίου γλυκοπρωτεΐνης ολιγοδενδροκυττάρων μυελίνης προκάλεσε πειραματική αυτοάνοση εγκεφαλομυελίτιδα και είχε σημαντικά καθυστερήσει την ανάπτυξη όγκου εγκεφάλου στο μοντέλο όγκου GL26 χωρίς παρατηρήσιμες παρενέργειες [126].

Επιπλέον, έχει σημειωθεί η θεραπευτική δυνατότητα των φορτωμένων με κουρκουμίνη εξωσωμάτων εμβρυϊκών βλαστοκυττάρων στη νευροαγγειακή αποκατάσταση μετά από τραυματισμό ισχαιμίας-επαναιμάτωσης σε ποντίκια. Η θεραπεία με αυτά τα εξωσώματα πυροδότησε μια σειρά από ευεργετικά αποτελέσματα, συμπεριλαμβανομένης της μειωμένης νευρολογικής βαθμολογίας, του όγκου του εμφράγματος, του οιδήματος, της φλεγμονής και της αστρογλοίωσης [127].

Τα εξωσώματα που προέρχονται από κύτταρα κοκκιώδους βουβάλου που είχαν υποστεί αγωγή με κουρκουμίνη ανακούφισαν τη φλεγμονή που προκαλείται από LPS μειώνοντας την έκφραση της προφλεγμονώδους κυτοκίνης και αποκαθιστώντας την παραγωγή 17- οιστραδιόλης [128].

Πρόσφατα, εξωσώματα έχουν κατασκευαστεί για την πνευμονική παροχή θεραπευτικών πεπτιδίων και κουρκουμίνης στους πνεύμονες μέσω εισπνοής [129,130]. Αυτά τα εξωσώματα αύξησαν την παροχή κουρκουμίνης και τις προ-φλεγμονώδεις κυτοκίνες σε κύτταρα που ενεργοποιούνται από LPS. Σε ένα ζωικό μοντέλο ALI, αύξησαν επίσης την αποτελεσματικότητα χορήγησης της κουρκουμίνης, μειώνοντας τη φλεγμονή στους πνεύμονες.

Όλες οι μελέτες υποδεικνύουν ότι η ενθυλακωμένη κουρκουμίνη μπορεί να θεωρηθεί ένα εξαιρετικό εργαλείο για τη θεραπεία διαφορετικών παθολογιών, αυξάνοντας τη βιοδιαθεσιμότητα και την αποτελεσματικότητα της κουρκουμίνης χωρίς να παρατηρηθούν παρενέργειες.

8. Συμπεράσματα

Η ανακάλυψη νέων στρατηγικών για την αντίθεση της γήρανσης και των ασθενειών που σχετίζονται με τη γήρανση είναι ένας σημαντικός στόχος της σύγχρονης έρευνας. Κατά την άποψή μας, η κουρκουμίνη είναι ένας από τους καλύτερους υποψηφίους για την επίτευξη αυτού του στόχου με τις αντιικές, αντιληπτικές, αντιφλεγμονώδεις, αντιπυρετικές και αντικαταθλιπτικές ιδιότητες της. Είναι σημαντικό να τονιστεί ότι η κουρκουμίνη στερείται οποιασδήποτε σημαντικής τοξικότητας στις περισσότερες προκλινικές καθώς και κλινικές έρευνες, και λίγες έρευνες έχουν αναφέρει αρνητικές επιδράσεις της κουρκουμίνης. Επιπλέον, τα φυσικά προϊόντα μπορεί να είναι μια ασφαλής, ασφαλής και αξιόπιστη πηγή για την εύρεση φαρμάκων που είναι υπεύθυνα για τον έλεγχο της τρέχουσας πανδημίας και ακόμη και αν δεν έχουν ακόμη αναφερθεί τα ευεργετικά αποτελέσματα της κουρκουμίνης κατά του SARS-CoV-2. Η κουρκουμίνη έχει ορισμένα χρήσιμα κλινικά αποτελέσματα που θα μπορούσαν να είναι αποτελεσματικά για τη διαχείριση των συμπτωμάτων του μολυσμένου ασθενούς με COVID-19. Στην πραγματικότητα, η κουρκουμίνη μπορεί να ρυθμίσει τα συμβάντα της κυτταρικής εισόδου του SARS-CoV-2, την αντιγραφή τους και τον μοριακό καταρράκτη που εκδηλώνει παθοφυσιολογικές συνέπειες του COVID-19. Λόγω των σημαντικών και υγιεινών ιδιοτήτων της, πιστεύουμε ότι τα συμπληρώματα διατροφής με κουρκουμίνη θα μπορούσαν να είναι μια κατάλληλη προσέγγιση για την πρόληψη μιας μεγάλης ομάδας ασθενειών και τη βελτίωση της ποιότητας ζωής.

Σε αυτήν την ανασκόπηση, περιγράψαμε τοαντι γήρανσηδυνατότητες της κουρκουμίνης όσον αφορά ιδιαίτερα την πρόληψη και τη θεραπεία εγκεφαλικών ασθενειών, με διαφορετικούς τρόπους: (1) δρώντας σε διαφορετικές πρωτεΐνες στόχους, (2) προκαλώνταςαντιοξειδωτικόκαι αντιφλεγμονώδη συμβάντα, (3) ρυθμίζοντας τη νευροπροστασία της μικρογλοίας και (4) δρώντας στις τελομεράσες για να σταματήσει την εξέλιξη του καρκίνου.

Τα νέα σκευάσματα κουρκουμίνης που συζητούνται σε αυτήν την ανασκόπηση μπορεί να βοηθήσουν στη βελτίωση της βιοδιαθεσιμότητας και της σταθερότητας της φυσικής ένωσης, αυξάνοντας τηναντι γήρανσηδυνητικός.

Αυτή η τελευταία πτυχή σχετικά με τοαντι γήρανσηΗ ισχύς της κουρκουμίνης μπορεί να αυξήσει το εύρος των φαρμακολογικών εφαρμογών της κίτρινης πολυφαινόλης και αξίζει περαιτέρω έρευνες σε μοντέλα in vivo, καθώς και σε κλινικές έρευνες.

Συνεισφορές Συγγραφέων: Όλοι οι συγγραφείς που αναφέρονται έχουν κάνει ουσιαστική, άμεση και πνευματική συνεισφορά στο έργο και το έχουν εγκρίνει για δημοσίευση. Ο CP σχεδίασε την κριτική και επέβλεψε και αναθεώρησε κριτικά την τελική έκδοση του χειρογράφου για το πνευματικό του περιεχόμενο. Οι TB, RS, MAP, MELT, VM, GM συνέβαλαν στο σχεδιασμό της ανασκόπησης και συνέταξαν το χειρόγραφο. Όλοι οι συγγραφείς έχουν διαβάσει και έχουν συμφωνήσει με τη δημοσιευμένη έκδοση του χειρογράφου.

Χρηματοδότηση: Αυτή η έρευνα δεν έλαβε εξωτερική χρηματοδότηση.

Δήλωση του Συμβουλίου Θεσμικής Αναθεώρησης: Δεν ισχύει.

Δήλωση συγκατάθεσης μετά από ενημέρωση: Δεν ισχύει.

Δήλωση διαθεσιμότητας δεδομένων: Τα δεδομένα που παρουσιάζονται σε αυτή τη μελέτη είναι διαθέσιμα κατόπιν αιτήματος από τον αντίστοιχο συγγραφέα.

Σύγκρουση συμφερόντων: Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων.

Διαθεσιμότητα δειγμάτων: Δείγματα των ενώσεων δεν είναι διαθέσιμα από τους συγγραφείς.