Μηχανιστική μελέτη για τη βελτίωση της χρόνιας προστατίτιδας από δισκία Cistanche μέσω του άξονα STAT3/HIF-1 /Γλυκόλυσης
Nov 11, 2025
Περίληψη
Αυτή η μελέτη διερευνά τον θεραπευτικό μηχανισμό τουΔισκία Cistanche (CT)στη θεραπεία της χρόνιας προστατίτιδας μέσω τουSTAT3/HIF-1 /άξονας σηματοδότησης γλυκόλυσης. Ένα μοντέλο πειραματικής αυτοάνοσης προστατίτιδας (EAP) σε αρουραίους καθιερώθηκε για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας των Δισκίων Cistanche. Αρσενικοί αρουραίοι Wistar χωρίστηκαν τυχαία σε έξι ομάδες (n=7 ανά ομάδα): ομάδες ελέγχου, μοντέλου, χαμηλής, μέσης και υψηλής δόσης CT (197,2, 591,5 και 1774,4 mg/kg/ημέρα, αντίστοιχα) και μια ομάδα θετικού ελέγχου (Pusitai, 34,2 mg/kg/ημέρα). Μετά την εισαγωγή του μοντέλου, όλες οι θεραπείες χορηγήθηκαν για τέσσερις διαδοχικές εβδομάδες.
Η ιστολογική ανάλυση χρησιμοποιώντας χρώση αιματοξυλίνης και ηωσίνης (ΗΕ) αξιολόγησε τη φλεγμονή του προστάτη και τη βλάβη των αδένων. Τα επίπεδα της ιντερλευκίνης-8 (IL-8), της ιντερλευκίνης-1 (IL-1) και της ανοσοσφαιρίνης G (IgG) στον ορό μετρήθηκαν μέσω ELISA. Η έκφραση πρωτεΐνης φωσφορυλιωμένης STAT3 (ρ-STAT3), HIF-1, πολυφωσφορικής φωσφατάσης 1 ινοσιτόλης (MINPP1) και εξοκινάσης (HK) σε ιστούς προστάτη αξιολογήθηκε μέσω στύπωσης Western και ανοσοϊστοχημείας. Χρησιμοποιήθηκε μη στοχευμένη μεταβολομική για τον εντοπισμό διαφορικών μεταβολιτών και σχετικών μεταβολικών οδών.
Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η αξονική τομογραφία ανακούφισε σημαντικά την παθολογική βλάβη στον προστάτη. Η ELISA αποκάλυψε μειωμένα επίπεδα ορού IL-8, IL-1 και IgG. Το Western blot και η ανοσοϊστοχημεία απέδειξαν ότι η CT μειώθηκε τα p-STAT3, HIF-1 και HK, ενώ ρύθμισε προς τα πάνω το MINPP1. Η Metabolomics εντόπισε 96 διαφορικούς μεταβολίτες και αποκάλυψε ότι η CT μπορεί να ασκήσει τη θεραπευτική της δράση ρυθμίζοντας τη γλυκόλυση και το μεταβολισμό του αραχιδονικού οξέος.
Σύναψη:Τα δισκία Cistanche μπορεί να ανακουφίσουν τη φλεγμονή και να αναστείλουν την εξέλιξη της χρόνιας προστατίτιδας στοχεύοντας το STAT3, καταστέλλοντας τη σηματοδότηση HIF-1 και ρυθμίζοντας τον γλυκολυτικό μεταβολισμό.
Λέξεις-κλειδιά: Ταμπλέτες Cistanche; cχρόνια προστατίτιδα; μεταβολομική; HIF-1 διαδρομή σηματοδότησης. γλυκόλυση
Cistanche Οφέλη για τον προστάτη και τα νεφρά
Προσθέστε τα χάπια cistanche στο καλάθι
Υποστήριξη της Wecistanche-Ο μεγαλύτερος εξαγωγέας κιστάνι στην Κίνα:
Διεύθυνση ηλεκτρονικού ταχυδρομείου:wallence.suen@wecistanche.com
ή
Εισαγωγή
Η χρόνια προστατίτιδα είναι μια κοινή ουρολογική πάθηση στους άνδρες, που χαρακτηρίζεται από δυσλειτουργία του ουροποιητικού συστήματος, επώδυνη ούρηση, επείγουσα ανάγκη και δυσφορία στο περίνεο. Είναι ο πιο διαδεδομένος τύπος προστατίτιδας, που επηρεάζει σημαντικά την ποιότητα ζωής των ασθενών. Μελέτες αναφέρουν επικράτηση 6,0%-32,9% στους Κινέζους άνδρες και 2,0%-16,0% διεθνώς. Οι τρέχουσες θεραπείες Western βασίζονται σε αντιβιοτικά και ΜΣΑΦ, αλλά η μακροχρόνια χρήση συχνά οδηγεί σε γαστρεντερικές παρενέργειες.
Η αιτιολογία και η παθογένεια της χρόνιας προστατίτιδας είναι πολύπλοκες, καθώς περιλαμβάνουν δυσλειτουργία του ανοσοποιητικού συστήματος, νευροενδοκρινική ανισορροπία και παράγοντες τρόπου ζωής. Οι ανοσολογικές ανωμαλίες και η μεταβολική δυσλειτουργία θεωρούνται βασικοί τομείς ανησυχίας.
Από τη σκοπιά της Παραδοσιακής Κινεζικής Ιατρικής (TCM), η χρόνια προστατίτιδα σχετίζεται με ανεπάρκεια qi των νεφρών, συσσώρευση υγρασίας-θερμότητας και στάση αίματος.Ταμπλέτες Cistanche, που προέρχεται από μια παραδοσιακή ενδονοσοκομειακή σύνθεση [Αρ. έγκρισης Z04000524], βασίζονται στον κλασικό τύπο "Cheng's Bi Xie Fen Qing Yin" σε συνδυασμό με "Cuscuta Pill". Αυτή η φόρμουλα περιλαμβάνει δέκα βότανα όπως π.χCistanche deserticola, Διοσκορέα, καιPolyporus umbellatusκαι χρησιμοποιείται παραδοσιακά για την τόνωση του νεφρού, την εξασφάλιση της ουσίας, την προώθηση της ούρησης και την εξάλειψη της θολότητας.
Κλινικές μελέτες έχουν επιβεβαιώσει ότι τα δισκία Cistanche μειώνουν αποτελεσματικά τα συμπτώματα της προστατίτιδας και βελτιώνουν την ποιότητα ζωής με ένα καλό προφίλ ασφάλειας. Ωστόσο, οι περισσότερες υπάρχουσες έρευνες επικεντρώνονται σε κλινικές παρατηρήσεις και οι ακριβείς θεραπευτικοί μηχανισμοί παραμένουν ασαφείς.
Πρόσφατα στοιχεία υποδηλώνουν ότι η χρόνια προστατίτιδα περιλαμβάνει ανώμαλη γλυκόλυση και υπερέκφραση του επαγόμενου από την υποξία παράγοντα 1 (HIF-1), γεγονός που την καθιστά πιθανό στόχο για θεραπεία. Επιπλέον, η ρύθμιση της οδού STAT3 έχει αναδειχθεί ως μια νέα στρατηγική για τον έλεγχο της χρόνιας φλεγμονής και των αυτοάνοσων αποκρίσεων. Αυτή η μελέτη διερευνά τον θεραπευτικό μηχανισμό των δισκίων Cistanche με βάση πειράματα in vivo και μεταβολομική, με στόχο να παράσχει νέα στοιχεία για τη χρήση φυτικών σκευασμάτων στη χρόνια προστατίτιδα.
Υλικά και Μέθοδοι
1. Υλικά
Ζώα:42 αρσενικοί αρουραίοι Wistar βαθμού SPF (190–210 g) αγοράστηκαν από τη Suzhou SPF Biotechnology Co., Ltd. Τα ζώα στεγάστηκαν υπό τυπικές συνθήκες (20±3 βαθμοί, υγρασία 55%±5%, κύκλος φωτός/σκότους 12 ωρών) και τους παρασχέθηκαν τροφή και νερό κατά λίγη ώρα. Η μελέτη εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας των Ιδρυμάτων για τα Ζώα (Αρ. Έγκρισης. 2023112001).
Φάρμακα και αντιδραστήρια:
Ταμπλέτες Cistanche
Δισκία Pusitai (θετικός έλεγχος)
Αλατούχο διάλυμα, ρυθμιστικό PBS, πλήρες ανοσοενισχυτικό Freund
Κιτ ELISA για IL-8, IL-1 και IgG
Αντισώματα: p-STAT3, HIF-1 , MINPP1, HK
Δευτερεύοντα αντισώματα και ανοσοϊστοχημικά αντιδραστήρια
Όργανα:
Συστήματα LC-MS (Triple TOF 6600, Agilent 1290 Infinity LC)
Φυγόκεντρος υψηλής ταχύτητας, ομογενοποιητής, συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών και ζυγοστάθμιση ακριβείας
2. Μέθοδοι
2.1 Μελέτη In Vivo
2.1.1 Μοντέλο Χρόνιας Προστατίτιδας
Ένα πειραματικό μοντέλο αυτοάνοσης προστατίτιδας (EAP) προκλήθηκε χρησιμοποιώντας ομογενοποιημένο προστατικό ιστό γαλακτωματοποιημένο με πλήρες ανοσοενισχυτικό Freund. Οι αρουραίοι έλαβαν υποδόριες ενέσεις τις ημέρες 1 και 28 σε πολλαπλά σημεία (αυχένας, βουβωνική χώρα και πίσω πόδια). Οι αρουραίοι ελέγχου έλαβαν ενέσεις φυσιολογικού ορού. Η επιτυχία του μοντέλου επιβεβαιώθηκε από σημεία συμπεριφοράς και ιστοπαθολογία.
2.1.2 Ομαδοποίηση και θεραπεία
Μετά την επιβεβαίωση του μοντέλου, οι αρουραίοι χωρίστηκαν τυχαία σε έξι ομάδες: έλεγχος, μοντέλο, χαμηλής, μέσης, υψηλής δόσης CT και ομάδα Pusitai. Η μέση δόση CT ορίστηκε σύμφωνα με την κλινική ισοδύναμη δόση. Οι θεραπείες χορηγήθηκαν από το στόμα μία φορά την ημέρα για 28 ημέρες.
2.1.3 Συλλογή δειγμάτων
Την τελευταία ημέρα, καταγράφηκε η 24ωρη πρόσληψη ούρων και νερού. Μετά την ευθανασία, συλλέχθηκαν ιστοί αίματος και προστάτη. Υπολογίστηκε ο δείκτης προστάτη (βάρος προστάτη/σωματικό βάρος). Οι ιστοί είτε σταθεροποιήθηκαν σε φορμαλίνη είτε καταψύχθηκαν σε υγρό άζωτο για περαιτέρω ανάλυση.
2.1.4 Γενικές παρατηρήσεις
Καθ' όλη τη διάρκεια της μοντελοποίησης και της θεραπείας, οι αρουραίοι παρακολουθούνταν για συμπεριφορά, κατάσταση τριχώματος και γενική υγεία.
2.1.5 ELISA για κυτοκίνες ορού
Τα επίπεδα IL-8, IL-1 και IgG στον ορό μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας ELISA ακολουθώντας τις οδηγίες του κατασκευαστή.
2.1.6 Ιστοπαθολογία (Χρώση HE)
Οι ιστοί του προστάτη που είχαν στερεωθεί με φορμαλίνη ενσωματώθηκαν σε παραφίνη και τεμαχίστηκαν για χρώση HE. Η φλεγμονή και η βλάβη των ιστών παρατηρήθηκαν στο μικροσκόπιο.
2.1.7 Ανοσοϊστοχημεία για MINPP1 και HK
Ακολουθήθηκαν τυπικές διαδικασίες IHC, συμπεριλαμβανομένης της αποπαραφίνωσης, της ανάκτησης αντιγόνου, του αποκλεισμού, της πρωτογενούς και δευτερογενούς επώασης αντισωμάτων, της χρώσης DAB και της αντιχρώσης με αιματοξυλίνη. Το λογισμικό ImageJ χρησιμοποιήθηκε για την ποσοτικοποίηση της θετικής χρώσης.
2.1.8 Western Blot για p-STAT3 και HIF-1
Οι κατεψυγμένοι ιστοί του προστάτη υποβλήθηκαν σε λύση και προσδιορίστηκαν οι συγκεντρώσεις πρωτεΐνης. Η μεταφορά μεμβράνης SDS-PAGE και PVDF ακολουθήθηκε από αποκλεισμό, επώαση πρωτογενούς/δευτερογενούς αντισώματος, ανάπτυξη ECL και πυκνομετρία χρησιμοποιώντας ImageJ.
2.1.9 Στατιστική Ανάλυση
Τα δεδομένα αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας GraphPad Prism 9.5.1. Τα αποτελέσματα εκφράστηκαν ως μέσος όρος ± SD. Χρησιμοποιήθηκε μονόδρομη ANOVA ακολουθούμενη από LSD post hoc τεστ. Π<0.05 was considered statistically significant.
2.2 Μεταβολική ορού
2.2.1 Προετοιμασία δείγματος
Ορός από ομάδες ελέγχου, μοντέλου και CT μεσαίας δόσης αποψύχθηκε, αναμίχθηκε με κρύο μεθανόλη-ακετονιτρίλιο-νερό, υποβλήθηκε σε υπερήχους και φυγοκεντρήθηκε. Τα υπερκείμενα ξηράνθηκαν και ανασυστάθηκαν για ανάλυση LC-MS.
2.2.2 Συνθήκες LC-MS
Οι μεταβολίτες διαχωρίστηκαν χρησιμοποιώντας στήλη UPLC BEH Amide, με συγκεκριμένο προφίλ έκλουσης βαθμίδωσης. Τα δεδομένα λήφθηκαν τόσο σε θετικούς όσο και σε αρνητικούς τρόπους ιόντων χρησιμοποιώντας λειτουργία IDA υψηλής ευαισθησίας.
2.2.3 Επεξεργασία Δεδομένων
Raw data were converted to .mzML format, processed using XCMS for peak identification, alignment, and normalization. Metabolites with >50% missing values were removed. PCA and PLS-DA were used for multivariate analysis. Significant metabolites were filtered based on VIP >1.0 και σ<0.05, and KEGG pathway enrichment was performed.
Αποτελέσματα και Συζήτηση
Τα δισκία Cistanche βελτίωσαν σημαντικά τις ιστοπαθολογικές αλλαγές του προστάτη, μείωσαν τις φλεγμονώδεις κυτοκίνες και ρύθμισαν τις εκφράσεις βασικών πρωτεϊνών στον άξονα STAT3/HIF-1 /γλυκόλυση. Η μεταβολομική αποκάλυψε ρύθμιση της γλυκόλυσης και του μεταβολισμού του αραχιδονικού οξέος, υποδηλώνοντας τόσο αντιφλεγμονώδεις όσο και μεταβολικούς ρυθμιστικούς μηχανισμούς.
Αυτά τα ευρήματα υποστηρίζουν την ανάπτυξη τουΣυμπληρώματα βοτάνων με βάση το Cistancheως μια πολλά υποσχόμενη φυσική θεραπεία για τη χρόνια προστατίτιδα, που προσφέρει ρύθμιση πολλαπλών στόχων με καλή ασφάλεια.
