Αποπτωτική Επίδραση Πολυσακχαριτών Cistanche στη Λευχαιμία

Συγγραφέας:

LI Yan,ΖΑΝγκ Τζιν,ΖΑΝγκ Τζινγκ-Ναν,et al.

Ενδοχώρα της Μογγολίας, Κίνα

Για τη διερεύνηση της αποπτωτικής επίδρασης τουΠολυσακχαρίτες Cistanche( CDP) στον άνθρωποοξεία λευχαιμίακυτταρική σειρά κύτταρα Jurkat.ΜέθοδοιΟ προσδιορισμός ΜΤΤ εφαρμόστηκε για την ανίχνευση της επίδρασης του CDP στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, Το Western blotting χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση της ενεργοποίησης της κασπάσης-9 και της κασπάσης-3, και τα αποπτωτικά μόρια σήματος δοκιμάστηκαν επίσης.Ｒ αποτελέσματαΟ πολλαπλασιασμός των Τ κυττάρων ανεστάλη κατά 1 mg/ml και 2 mg/ml CDP, Η απόπτωση των Τ κυττάρων προκλήθηκε με 5 mg/ml CDP, καιοι εκφράσεις της προκασπάσης-9 και της προκασπάσης-3 μειώθηκαν σημαντικά. Οι εκφράσεις των υποδοχέων της κυτταρικής επιφάνειας CD45 και CD71 αναστέλλονται σημαντικά από 5 mg/ml CDP, Προκλήθηκε φωσφορυλίωση EＲK, και η φωσφορυλίωση JNK ανεστάλη.

συμπεράσματα

【Λέξεις κλειδιά】Πολυσακχαρίτες Cistanche; Απόπτωση; Ｒυποδοχέας; κασπάση-9; κασπάση-3

Η οξεία λεμφοβλαστική λευχαιμία (ΟΛΛ) είναι μια κακοήθης κλωνική νόσος του λεμφικού συστήματος με υψηλό βαθμό ετερογένειας ανοσοφαινοτύπου. , εύκολο να υποτροπιάσει και ούτω καθεξής. Επί του παρόντος, οι ευρέως χρησιμοποιούμενες μέθοδοι θεραπείας περιλαμβάνουν μεταμόσχευση μυελού των οστών, θεραπεία επαγωγής, ανοσοθεραπεία, συνδυασμένη χημειοθεραπεία κ.λπ. Λόγω της περιορισμένης ικανότητας των περισσότερων φαρμάκων χημειοθεραπείας να στοχεύουν και να σκοτώνουν όγκους, μπορεί να προκαλέσουν σοβαρή βλάβη στο πεπτικό σύστημα, στο σύστημα αίματος. καρδιαγγειακά και εγκεφαλοαγγειακά, κ.λπ. Κατά τη διάρκεια της θεραπείας, συχνά συνοδεύεται από σοβαρές ανεπιθύμητες ενέργειες, μερικές από τις οποίες είναι ακόμη και θανατηφόρες. Καθώς η χημειοθεραπεία προχωρά, το σώμα τείνει να αναπτύσσει ανοχή στα φάρμακα χημειοθεραπείας, αυξάνοντας τον κίνδυνο υποτροπής της νόσου.

Ως εκ τούτου, η αναζήτηση για εξαιρετικά αποτελεσματική, χαμηλής τοξικότητας και εξαιρετικά στοχευμένη θεραπεία λευχαιμίας ή επικουρική θεραπεία έχει γίνει το επίκεντρο της τρέχουσας προσοχής.Cistancheλέγεται Chagangaoya στα μογγολικά. Ανήκει στην οικογένεια Ledangaceae και στο γένος Cistanche. Είναι παρασιτικό στις ρίζες των δέντρων της ερήμου και έχει τη φήμη του «τζίνσενγκ της ερήμου».

Τα κύρια ενεργά συστατικά του Cistanche περιλαμβάνουν φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες, λιγνάνες, βεταϊνες, στερόλες, αμινοξέα και πολυσακχαρίτες. Αντιφλεγμονώδη, αντιικά, αντιοξειδωτικά, ανοσορρυθμιστικά και άλλα αποτελέσματα.

Μελέτες έχουν βρει ότιΠολυσακχαρίτης Cistanche (CDP),ως ένα από τα κύρια ενεργά συστατικά του,έχει αντινεοπλασματική και ανοσοτροποποιητική δράση.Οι ερευνητές διαπίστωσαν ότι το CDP έχει σημαντική θανάτωση στα κύτταρα λευχαιμίας K562 και THP-1 και πρότειναν ότι το CDP έχει έναν ορισμένο ρόλο στηνπρόληψη ή θεραπεία της λευχαιμίας. Επιπλέον, στην παραδοσιακή κινεζική ιατρική ένωση, cistanche, για τη θεραπεία της οξείαςλευχαιμία, Cistancheπαίζει επίσης ρόλο ως ένα από τα σημαντικά συστατικά. Ωστόσο, ο συγκεκριμένος μηχανισμός δράσης τουCistancheδεν είναι γνωστό. Σε αυτή την εργασία, η απομόνωση και ο καθαρισμός τουCistanche CDPΜελετήθηκαν και διερευνήθηκαν το φονικό αποτέλεσμα και ο σχετικός μηχανισμός της CDP στην κυτταρική σειρά ανθρώπινης οξείας λευχαιμίας Jurkat.

1.1 Κύρια αντιδραστήρια και όργανα

Η σκόνη Cistanche αγοράστηκε από το Sichuan WecistancheGroup Co, Ltd., η κυτταρική σειρά ανθρώπινης οξείας λευχαιμίας Jurkat αγοράστηκε από την τράπεζα κυττάρων του Ινστιτούτου Κυτταρικής Βιολογίας της Σαγκάης, το μπλε της θειαζόλης (MTT) και το δωδεκυλοθειικό νάτριο (SDS) αγοράστηκαν από την Beijing Dingguo Changsheng Biotechnology Co., Ltd., ο εμβρυϊκός βόειος ορός (FBS) αγοράστηκε από τη Hangzhou Sijiqing Bioengineering Materials Co., Ltd., περιέχουσα κυστεΐνη κασπάση-3, κασπάση-9, CD71, CD45, φωσφορυλιωμένη αμινοτελική κινάση c-Jun (p -JNK) και φωσφορυλιωμένα εξωκυτταρικά αντισώματα κινάσης ρυθμιζόμενης με σήμα (p-ERK) αγοράστηκαν από την Cell Signaling Technology, ΗΠΑ και τα αντισώματα ακτίνης αγοράστηκαν από την Shanghai Biyuntian Biotechnology Co., Ltd. Electrochemical Το υπόστρωμα φωταύγειας (ECL) αγοράστηκε από τη Ther Scientific Company των Ηνωμένων Πολιτειών, και άλλα αντιδραστήρια ήταν εγχώριας αναλυτικής ποιότητας. Gel-View 6000 plus έξυπνος σταθμός εργασίας εικόνας (προϊόν της Guangzhou Boluteng Biotechnology Co., Ltd.), ανεστραμμένο μικροσκόπιο φθορισμού Revolve FL (προϊόν της Echo Laboratories, ΗΠΑ), συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών EPOCH (προϊόν της Beijing Bo Teng Instrument Co., Ε.Π.Ε.).

1.2 Διαχωρισμός και καθαρισμός CDP Πάρτε 500 gΕκχύλισμα κιστάνσε σε σκόνη, μουλιάζουμε σε αιθανόλη 95 τοις εκατό όλη τη νύχτα, το φιλτράρουμε με γάζα, μαζεύουμε τα υπολείμματα του φίλτρου, το βράζουμε με ζεστό νερό στους 60 βαθμούς για 2 ώρες/χρόνο, συνολικά 3 φορές. Μετά το τέλος, τα διηθήματα συνδυάστηκαν τρεις φορές, συμπυκνώθηκαν υπό ελαττωμένη πίεση στα 2/3 του αρχικού όγκου, προστέθηκαν 3 φορές ο όγκος αιθανόλης 95 τοις εκατό και αφέθηκαν σε ηρεμία στους 4 βαθμούς όλη τη νύχτα. Την επόμενη μέρα, φυγοκεντρήστε με 4 000 r/min για 10 λεπτά, συλλέξτε το ίζημα, αφαιρέστε την πρωτεΐνη με τη μέθοδο Sevag, κατακρημνίστε με απόλυτη αιθανόλη, στεγνώστε με ψύξη για να ληφθεί CDP.

1.3 Κυτταρική καλλιέργεια Η ανθρώπινη κυτταρική σειρά οξείας λευχαιμίας αποθηκεύτηκε σε υγρό άζωτο στο εργαστήριο Jurkat. Όταν χρησιμοποιήθηκαν, τα κύτταρα ανακτήθηκαν ταχέως σε λουτρό νερού 37 μοιρών και καλλιεργήθηκαν σε μέσο RPMI1640 (που περιέχει 100 U/ml πενικιλλίνη και 100 U/ml στρεπτομυκίνες) με 10 τοις εκατό FBS. Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε επωαστήρα κυττάρων 37 μοιρών, 5 τοις εκατό CO2, περνούσαν κάθε 2 έως 3 ημέρες και τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν όταν τα κύτταρα εισήλθαν στη φάση λογαριθμικής ανάπτυξης.

1.4 Πείραμα ΜΤΤ Κύτταρα Jurkat στη φάση λογαριθμικής ανάπτυξης ελήφθησαν, φυγοκεντρήθηκαν για να ληφθεί κυτταρικό ίζημα και μετρήθηκαν σε 5x105 κύτταρα/ml. Πάρτε ένα τρυβλίο κυτταροκαλλιέργειας 96-πηγαδιού, ενοφθαλμίστε 100 ul κύτταρα σε κάθε φρεάτιο και, στη συνέχεια, προσθέστε 100 ul πλήρους μέσου RP-MI1640 ως ομάδα ελέγχου. η πειραματική ομάδα χωρίστηκε σε 3 ομάδες, χρησιμοποιώντας αρχικά το μέσο RPMI1640 για την παρασκευή διαφορετικών συγκεντρώσεων CDP και στη συνέχεια προσθέτοντας 100 μΙ μέσου RP-MI1640 σε κάθε φρεάτιο. Χρησιμοποιήθηκαν κύτταρα ul Jurkat και 100 μΙ διαλύματος CDP για να γίνει η τελική συγκέντρωση CDP στα 1, 2 και 5 mg/ml, αντίστοιχα. Κάθε ομάδα στήθηκε με 5 διπλά φρεάτια και επωάστηκε σε επωαστήρα κυττάρων 37 μοιρών για 48 ώρες. Μετά την επώαση, προσθέστε 20 ul MTT (η συγκέντρωση του μητρικού διαλύματος είναι 5 mg/ml) σε κάθε φρεάτιο, τοποθετήστε το ξανά στον επωαστήρα κυττάρων και συνεχίστε την επώαση για 4 ώρες και τέλος προσθέστε 100 ul 20 τοις εκατό SDS για να διαλύσετε φορμαζάνη στους 37 βαθμούς κατά τη διάρκεια της νύχτας και χρησιμοποιήστε το την επόμενη μέρα. Η απορρόφηση στα 570 nm κάθε ομάδας ανιχνεύθηκε με συσκευή ανάγνωσης μικροπλάκας και ο ρυθμός αναστολής διαφορετικών συγκεντρώσεων CDP στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων Jurkat υπολογίστηκε με τον τύπο.

Ελήφθησαν 1,5 κύτταρα Jurkat με στύπωμα Western στη φάση λογαριθμικής ανάπτυξης και σπάρθηκαν σε μια πλάκα 6-πηγαδιού σε πυκνότητα 2 × 105 κύτταρα/ml, 500 ul/φρεάτιο και 500 ul πλήρους μέσου RPMI1640 προστέθηκαν στον έλεγχο ομάδα. Ρύθμιση 3 πειραματικών ομάδων, 1, 2 και 5 mg/ml θεραπείας με πολυσακχαρίτες, CDP

Διαλυμένα σε πλήρες μέσο RPMI1640 εκ των προτέρων, 500 μΙ κυττάρων και 500 μΙ διαλύματα CDP διαφορετικών συγκεντρώσεων προστέθηκαν στην πλάκα 6-πηγαδιού και επωάστηκαν στους 37 βαθμούς για 48 ώρες. Μετά την καλλιέργεια, τα κυτταρικά εναιωρήματα κάθε ομάδας συλλέχθηκαν, φυγοκεντρήθηκαν σε 1 500 r/min για 5 λεπτά για να ληφθούν κυτταρικά σφαιρίδια και πλύθηκαν δύο φορές με προψυγμένο αλατούχο διάλυμα φωσφορικού ρυθμιστικού διαλύματος (PBS). Μετά το πλύσιμο, προστέθηκαν 20 μΙ ρυθμιστικού διαλύματος κυτταρικής λύσης σε κάθε ομάδα και τα κύτταρα λύθηκαν σε πάγο για 30 λεπτά. Η ολική πρωτεΐνη εκχυλίστηκε και η συγκέντρωση των κυττάρων ρυθμίστηκε χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Bradford. Ελήφθησαν 20 μg πρωτεΐνης από κάθε ομάδα για ηλεκτροφόρηση γέλης SDS-πολυακρυλαμιδίου (PAGE) και η πρωτεΐνη μεταφέρθηκε σε μεμβράνη φθοριούχου πολυβινυλιδενίου (PVDF) με ηλεκτροδιάτρηση. Αποκλείστηκε με άπαχο γάλα σε σκόνη σε θερμοκρασία δωματίου για 1 ώρα, προστιθέμενα αντισώματα κουνελιού κατά της κασπάσης-3 και κασπάσης-9 σε αναλογία αραίωσης 1:1 000, επωάστηκαν σε θερμοκρασία δωματίου για 1 h, ξεπλύθηκε 3 φορές με αναδευτήρα φωσφορικού ρυθμιστικού διαλύματος Tween (PBST) (10 λεπτά/χρόνο), προσθέστε δευτερεύον αντίσωμα σημασμένο με υπεροξειδάση χρένου (HRP) (1:1 000), επωάστε για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου, ξεπλύνετε 3 φορές με PBST, ξεπλύνετε 1 φορά με PBS, προσθέστε υπόστρωμα ECL και χρησιμοποιήστε Ο έξυπνος σταθμός εργασίας εικόνας χρησιμοποιήθηκε για απεικόνιση και οι αλλαγές ζώνης κάθε ομάδας συγκρίθηκαν για τη μελέτη της απόπτωσης των κυττάρων Jurkat που προκαλείται από CDP. Για την ανίχνευση πρωτεϊνών που σχετίζονται με την οδό απόπτωσης, οι συνθήκες κυτταροκαλλιέργειας και θεραπείας με CDP ήταν οι ίδιες όπως παραπάνω. Μετά την αντίδραση, τα κύτταρα λύθηκαν για ποσοτικοποίηση πρωτεΐνης. Η πρωτεΐνη μεταφέρθηκε σε μεμβράνη PVDF με SDS-PAGE και ηλεκτροδιάτρηση. Μετά από αποκλεισμό με αποβουτυρωμένο γάλα σε σκόνη για 1 ώρα, προστέθηκαν αντισώματα αντι-CD71, CD45, p-JNK και p-ERK (1:1 000) και επωάστηκαν σε θερμοκρασία δωματίου για 1 ώρα. Το επισημασμένο με HRP δευτερεύον αντίσωμα (1:1 000) επωάστηκε για 1 ώρα και τελικά, ο έξυπνος σταθμός εργασίας απεικόνισης χρησιμοποιήθηκε για απεικόνιση για τη μελέτη των σχετικών μορίων σηματοδότησης της απόπτωσης των κυττάρων Jurkat που προκαλείται από CDP. Οι προκύπτουσες πειραματικές ζώνες κλιμακώθηκαν με γκρι με Image J (1.8.0).

Κάντε κλικ εδώ για να μάθετε την επίδραση Cistanche στην αντικαρκινική και αντικαρκινική δράση

1.6 Στατιστική ανάλυση Το λογισμικό SPSS21.{3}} χρησιμοποιήθηκε για t-test και ανάλυση διακύμανσης

2 αποτελέσματα της συνάρτησης Cistanche ενεργοποιημένηλευχαιμία

2.1 Επίπεδο πολλαπλασιασμού κυττάρων

Το CDP απομονώθηκε επιτυχώς, με περισσότερο από 9{{2{0}} τοις εκατό περιεκτικότητα σε ζάχαρη και λιγότερο από 5 τοις εκατό περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη. Ο ρυθμός αναστολής του κυτταρικού πολλαπλασιασμού στην ομάδα CDP του 1 mg/ml ήταν (19, 1 ± 2, 1) τοις εκατό, ενώ αυτός στις ομάδες CDP των 2 mg/ml και 5 mg/ml ήταν (44, 2 ± 5, 2 ) ) τοις εκατό και (47. 8 ± 4. 4) τοις εκατό, υποδεικνύοντας ότι το CDP μπορεί να αναστείλει σημαντικά τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων Jurkat με δοσοεξαρτώμενο τρόπο. 2.2 Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (0.62±0.04, 0.56±{{40}}.0. }}7), το επίπεδο απόπτωσης σε κύτταρα Jurkat που υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με 5 mg/ml CDP είχε ως αποτέλεσμα τα ένζυμα της κασπάσης-9 και της κασπάσης{{30}}. Pro-form pro-caspase-9 ( 0. 09 ± {0. 02) και pro-caspase-3 ( {{ 63}}. 12 ± 0. 01) μειώθηκαν σημαντικά και οι ομάδες CDP 1 mg/ml και 2 mg/ml ήταν σημαντικά λιγότερο αποτελεσματικές για την προκασπάση-3 στα κύτταρα. Η περιεκτικότητα σε κασπάση-9 (0,58±0,04, 0,51±0,01) και προκασπάση-3 (0,48±0,04, 0,44±0,05) δεν είχαν σημαντική επίδραση, δηλαδή χαμηλή. Η συγκέντρωση της CDP δεν προκάλεσε απόπτωση των κυττάρων Jurkat, αλλά κυρίως ανέστειλε τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό, όπως φαίνεται στο Σχήμα 1.

1-4: ομάδα αναφοράς,

Ομάδα CDP 1 mg/ml, ομάδα CDP 2 mg/ml, ομάδα CDP 5 mg/ml. ίδιο με το παρακάτω σχήμα

Εικόνα 1 Η επίδραση του CDP στην κασπάση-9 και την κασπάση-3 στα κύτταρα Jurkat

Επίδραση πολυσακχαριτών Cistanche Επίδραση στη λευχαιμία

2.3 Τα σχετικά επίπεδα έκφρασης των CD71 και CD45 στην ομάδα ελέγχου υποδοχέα απόπτωσης ήταν 1.00±0.04, {{10}}.54±. 0.{{2{0}}2. Η ομάδα CDP των 5 mg/ml θα μπορούσε να αναστείλει σημαντικά το CD71 (0.05±0.02). 01) και CD45 ( 0. 13 ± {{40}}. 03); Ομάδες CDP 1 mg/ml και 2 mg/ml θα μπορούσαν να αναστείλουν την έκφραση του CD71 (0, 52 ± 0, 06, 0, 43 ± 0, 07) σε κάποιο βαθμό Δεν υπήρχε σημαντική επίδραση στην έκφραση του CD45 (0,51 ±0,01, 0,48±0,02). Δείτε την Εικόνα 2.

Σχήμα 2 Η επίδραση του CDP στην έκφραση των υποδοχέων στην επιφάνεια της κυτταρικής μεμβράνης

2.4 Οδοί που σχετίζονται με την απόπτωση

Τα σχετικά επίπεδα έκφρασης του p-JNK και του p-ERK στην ομάδα αναφοράς ήταν 1,20±0.08 και 0.21±0 .03, αντίστοιχα. Η ομάδα CDP των 5 mg/ml προκάλεσε απόπτωση και μείωσε σημαντικά το επίπεδο φωσφορυλίωσης της JNK. ( 0. 32 ± 0. 04), αύξησε σημαντικά το επίπεδο φωσφορυλίωσης του ERK (1. 13 ± 0. 05); 1 mg/ml, 2 mg/ml CDP αύξησαν το επίπεδο φωσφορυλίωσης του JNK (1. 12 ± 0. 06, 1. 06 ± 0. 06) δεν είχαν σημαντική επίδραση, αλλά αύξησαν ακόμα το επίπεδο φωσφορυλίωσης του ERK (0. 54 ± 0. 04, 0. 63 ± 0. 02). Δείτε την Εικόνα 3.

Σχήμα 3 Η επίδραση του CDP στη φωσφορυλίωση των JNK και ERK

3 Συζήτηση

Τα τελευταία χρόνια, μελέτες έχουν βρει ότι το CDP έχει μια ορισμένη ανασταλτική επίδραση στις κυτταρικές σειρές λευχαιμίας, αλλά ο συγκεκριμένος μηχανισμός δράσης δεν είναι ακόμη γνωστός.

Στη διαδικασία της απόπτωσης, η κασπάση-9 είναι ένα από τα ανοδικά σηματοδοτικά μόρια στην εξαρτώμενη από κασπάση διαδικασία απόπτωσης. Μετά τη διέγερση του σήματος, η προκασπάση-9 υδρολύεται μαζικά για να παραχθεί μια ενεργοποιημένη μορφή διασπασμένης-κασπάσης-9, η οποία συνεχίζει να μεταδίδει αποπτωτικά σήματα προς τα κάτω για να προωθήσει τη διαδικασία της απόπτωσης. Η κασπάση-3 είναι ένα μόριο κασπάσης τύπου τελεστή και είναι ένα βασικό μόριο σηματοδότησης στη διαδικασία της κυτταρικής απόπτωσης που εξαρτάται από την κασπάση. Υπάρχει επίσης με τη μορφή προ-ενζύμου (προ-κασπάση-3) υπό κανονικές συνθήκες. Μόλις ενεργοποιηθεί με υδρόλυση, παράγεται μεγάλη ποσότητα διασπασμένης κασπάσης. -3, θα λύσει μια ποικιλία βασικών πρωτεϊνικών μορίων στα κύτταρα και τελικά θα προκαλέσει απόπτωση. Το CDP ανήκει στους ενεργούς πολυσακχαρίτες των βιολογικών μακρομορίων και δεν μπορεί να εισέλθει ελεύθερα στα κύτταρα μέσω της κυτταρικής μεμβράνης. Επομένως, η CDP προκαλεί απόπτωση επηρεάζοντας την έκφραση και την κατανομή των υποδοχέων στην επιφάνεια των κυτταρικών μεμβρανών Jurkat, μεταδίδοντας έτσι σήματα στο εσωτερικό των κυττάρων και τελικά ενεργοποιώντας την οικογένεια των κασπασών. πρωτεΐνη, που οδηγεί σε κυτταρική απόπτωση. Αυτή η μελέτη δείχνει ότι η χαμηλή συγκέντρωση CDP δεν προκαλεί απόπτωση των κυττάρων Jurkat, αλλά κυρίως αναστέλλει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό. Το CD71, γνωστό και ως υποδοχέας τρανσφερίνης, είναι ένας διαμεμβρανικός υποδοχέας γλυκοπρωτεϊνών τύπου ΙΙ που εμπλέκεται στην απορρόφηση του σιδήρου και στη ρύθμιση της κυτταρικής ανάπτυξης και ανάπτυξης. Το CD71 εκφράζεται σε μεγάλο βαθμό σε ασθενείς με οξεία λευχαιμία και σχετίζεται με την πρωτογενή φαρμακευτική αντοχή, δηλαδή την έκφραση του CD71. Όσο υψηλότερη είναι η τιμή, τόσο χειρότερο είναι το αποτέλεσμα της πρώτης χημειοθεραπείας. Επομένως, το CD71 είναι ένας από τους δείκτες για επικουρική διάγνωση. Το CD45 εκφράζεται στην επιφάνεια όλων των τύπων λευκοκυττάρων, γνωστό και ως κοινό αντιγόνο λευκοκυττάρων. Ανήκει στη διαμεμβρανική γλυκοπρωτεΐνη τύπου Ι και σχετίζεται στενά με την ανάπτυξη και διαφοροποίηση των Τ κυττάρων. Το CD45 έχει διαφορετικά επίπεδα έκφρασης και αλλοστερικούς τύπους σε διαφορετικούς τύπους λευχαιμίας, επομένως μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως ένας από τους δείκτες για τη διαφορική διάγνωση και τον ανοσοφαινοτυπικό προσδιορισμό της λευχαιμίας. Το μονοκλωνικό αντίσωμα CD45 έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως στη θεραπεία της λευχαιμίας, ιδιαίτερα της ανθεκτικής στα φάρμακα λευχαιμίας. Οι Friesen et al. διαπίστωσε ότι τα ραδιονουκλεΐδια

Το mAb με ετικέτα CD45 μπορεί να προκαλέσει απόπτωση σε ανθεκτικές στα φάρμακα κυτταρικές σειρές λευχαιμίας ενεργοποιώντας πρωτεΐνες της οικογένειας κασπασών (συμπεριλαμβανομένων των κασπάσης-3, της κασπάσης-8 και της κασπάσης-9). Το CDP προκαλεί απόπτωση των κυττάρων Jurkat, πρώτα δρώντας στους υποδοχείς CD45 και CD71 της επιφάνειας της κυτταρικής μεμβράνης, επηρεάζοντας την έκφραση και την κατανομή των δύο, μεταδίδοντας σήματα απόπτωσης στα κύτταρα και, τέλος, ενεργοποιώντας την κασπάση-9 και την κασπάση{{8 }}, που προκαλεί απόπτωση. Ωστόσο, τόσο η κασπάση-9 όσο και η κασπάση-3 βρίσκονται κατάντη της αποπτωτικής οδού και τα ανάντη μόρια σηματοδότησης πρέπει να διερευνηθούν περαιτέρω. Σε αυτή τη μελέτη, η CDP σε συγκέντρωση 5 mg/ml προκάλεσε απόπτωση των κυττάρων Jurkat ενώ ανέστειλε την έκφραση του CD45, η οποία ήταν παρόμοια με εκείνη του μονοκλωνικού αντισώματος CD45 που περιγράφηκε παραπάνω. Επομένως, από την οπτική γωνία των υποδοχέων CD45 και CD71 που σχετίζονται με την απόπτωση,Cistancheέχει ορισμένες δυνατότητες για τη θεραπεία ή την επικουρική θεραπεία της λευχαιμίας.Τα συστήματα πρωτεϊνικών κινασών που ενεργοποιούνται από μιτογόνο (MAPKs) εκφράζονται σε όλα τα ευκαρυωτικά κύτταρα.

Ταμπλέτες Cistanche για τη βελτίωση του ανοσοποιητικού συστήματος της θεραπείας της λευχαιμίας

Είναι ένα πολύ σημαντικό μονοπάτι μετάδοσης πληροφοριών που διεξάγει μεταγωγή σήματος εξωκυτταρικής διέγερσης στο ενδοκυτταρικό και αποτελείται από κινάσες πρωτεΐνης σερίνης/θρεονίνης, συμπεριλαμβανομένων των ERK, JNK και p38MAPK. Η φωσφορυλίωση και η αποφωσφορυλίωση του είναι διακόπτες των δραστηριοτήτων της κυτταρικής ζωής και εμπλέκονται και ρυθμίζουν τη διαδικασία της κυτταρικής ανάπτυξης, πολλαπλασιασμού, διαφοροποίησης, ενεργοποίησης και απόπτωσης. Αυτή η μελέτη υποδηλώνει ότι η αποφωσφορυλίωση της JNK εμπλέκεται στην απόπτωση των Τ κυττάρων που προκαλείται από CDP, ενώ η φωσφορυλίωση ERK εμπλέκεται στις δύο διαδικασίες στο ότι η CDP αναστέλλει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και επάγει την απόπτωση.

Συμπερασματικά,Cistanche CDPέχει κυτταροτοξική επίδραση στην κυτταρική σειρά της Τ-λεμφοκυτταρικής λευχαιμίας Jurkat, δείχνοντας ότι οι χαμηλές συγκεντρώσεις (κάτω από 2 mg/ml) αναστέλλουν τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό, ενώ οι υψηλές συγκεντρώσεις (5 mg/ml) προκαλούν απόπτωση.Cistanche CDPπροκαλεί απόπτωση στα κύτταρα Jurkat κυρίως επηρεάζοντας και αλλάζοντας τα κύτταρα.

Η έκφραση των υποδοχέων CD71 και CD45 που σχετίζονται με την απόπτωση στην επιφάνεια της μεμβράνης μεταδίδει σήματα στο εσωτερικό των κυττάρων, προκαλώντας περαιτέρω φωσφορυλίωση ERK και αποφωσφορυλίωση JNK και τελικά ενεργοποίηση της κασπάσης-9, η οποία με τη σειρά της ενεργοποιεί την κασπάση{{4} } για πρόκληση απόπτωσης.