Χημικά συστατικά των φύλλων του Cistanche Ⅱ

3. Συζήτηση

Οι φυτοχημικές έρευνες για τον εντοπισμό βιολογικά ενεργών ενώσεων στα φύλλα λωτού έχουν διεξαχθεί ευρέως. Μέχρι στιγμής, ένας σημαντικός αριθμός τριτερπενοειδών και φλαβονοειδών, συμπεριλαμβανομένης της καμπφερόλης και των παραγώγων κερκετίνης, έχει αναφερθεί απόΔ. κακή[1]. Σε αυτή τη μελέτη, λάβαμε 27 ενώσεις, συμπεριλαμβανομένων δεκαέξιφλαβονοειδή, μία ιονόνη, δύο κουμαρίνες, επτά τριτερπενοειδή και μία ακετοφαινόνη. Από αυτά, σύνθετο1 βρέθηκε ότι είναι ένα νέο φφλλαβονοειδές και ένωση2 απομονώθηκε αρχικά απόΔ. κακή. Επιπλέον, καμπφερόλη-3-O- -200 -φερουλοϋλ γλυκοζίτη (3) αναφέρθηκε μόνο ως υδρολυμένο προϊόν του 3-O- -(2-O-φερουλοϋλ)-γλυκοζυλ-7,40 -δι-Ο- -γλυκοζυλοκαεμπφερόλη (3), απομονωμένο απόAllium tuberosum[35]. Χημική ένωση3 όχι μόνο ελήφθη απευθείας από φυσική πηγή για πρώτη φορά, αλλά επίσης δεν έχει αναφερθεί σεΔ. κακήπροηγουμένως. Επιπλέον, καμπφερόλη-3-O- -200 -γαλοϋλ γαλακτοσίδη (11) έχει αναφερθεί στο παρελθόν σε πολλές πηγές, μεταξύ των οποίωνΔ. κακή, αλλά μόνο το1H NMR και MS έχουν αναφερθεί λόγω έλλειψης λεπτομερούς έρευνας. Ως εκ τούτου, το13Τα δεδομένα C NMR αναφέρθηκαν για πρώτη φορά εδώ.

Μέχρι τώρα, υπήρξαν λίγες μελέτες που απέδειξαν τις αντιοξειδωτικές ικανότητες εκχυλισμάτων ή κλασμάτων φύλλων λωτός.37,38]. Οι περισσότερες μελέτες χρησιμοποίησαν μεθόδους ταχείας ανάλυσης, όπως προσδιορισμούς DPPH ή ABTS. Ειδικότερα, στην προηγούμενη εργασία, 200µg/mL κλάσματος πλούσιου σε φλαβονοειδή εμφάνισε 68,73 τοις εκατό αναστολή της ρίζας DPPH. Εκτός από αυτό το αποτέλεσμα, ωστόσο, αυτό το κλάσμα έδειξε επίσης ανιόν υπεροξειδίουριζική σάρωση, δέσμευση ριζών υδροξυλίου και δραστηριότητες χηλοποίησης μετάλλων [38]. Αν και δεν αξιολογήσαμε αυτούς τους προσδιορισμούς, πραγματοποιήθηκε απομόνωση με καθοδηγούμενη από βιοδοκιμασία επειδή το εκχύλισμα αιθανόλης και το κλάσμα οξικού αιθυλεστέρα στην παρούσα μελέτη έδειξαν συγκρίσιμη δράση σάρωσης ριζών DPPH. Επιπλέον, παρά τα προηγούμενα αποτελέσματα, έχουν πραγματοποιηθεί μόνο λίγες μελέτες για τον εντοπισμό βιολογικά ενεργών ενώσεων. Μερικά σεκοιριδοειδή και λιγνάνες εμφάνισαν δραστικές δραστηριότητες καθαρισμού ριζών [39]. Στην περίπτωση των φλαβονοειδών, έχουν υπάρξει αρκετές αναφορές ότι η κερσετίνη, η κεμπφερόλη και οι γλυκοσίδες τους έχουν αντιοξειδωτικές ιδιότητες [40]. Έχουν αναφερθεί αντιοξειδωτικές ιδιότητες του εκχωρημένου γλυκοσιδίου της καμπφερόλης και του εκχωρημένου γλυκοσιδίου κερσετίνης που λαμβάνεται από άλλες πηγές [41]. Μέχρι στιγμής, δεν έχουν υπάρξει αναφορές ότι καθεμία από αυτές τις ενώσειςπου προέρχεται από τα φύλλα λωτός έχει αντιοξειδωτική δράση, εκτός από το ότι ένα μείγμα αυτών των ενώσεων επέδειξε αντιοξειδωτική δράση [21]. 

Επιπρόσθετα, μέχρι στιγμής, ο ταυτόχρονος προσδιορισμός μόνο μερικών τριτερπενοειδών ή φλαβονοειδών έχει πραγματοποιηθεί για την ποσοτική ανάλυση αυτών των ενώσεων.42,43]. Ωστόσο, η παρούσα μελέτη προτείνει μια μέθοδο για τον ταυτόχρονο προσδιορισμό των περισσότερων συστατικών στα φύλλα λωτού.

Κάντε κλικ εδώ για να λάβετε περισσότερες γνώσεις σχετικά με τον τρόπο αντιγήρανσης του Cistanche

4.1. Φυτική ύλη

Τα φύλλα τουΔιόσπυρος κακήThunb. (Ebenaceae) αγοράστηκαν σε εγχώριο Κορεάτικοαγορά βοτάνων στο Yeongcheon τον Μάρτιο του 2018. Τα φύλλα συγκομίστηκαν στην περιοχή της λεκάνης που περιβάλλεται από βουνά σε υψόμετρο 800–1200 m στο Gyeongsangbuk-do τον Αύγουστο του 2017. Η μέση ποσότητα της ετήσιας βροχόπτωσης σε αυτήν την περιοχή ήταν 1050 mm,εκ των οποίων, το ήμισυ έπεσε μεταξύ Ιουνίου και Αυγούστου. Η μέση ετήσια θερμοκρασία ήταν περίπου12.5 ◦C και η μέση σχετική υγρασία ήταν 69 τοις εκατό. Η θερμοκρασία την εποχή της συγκομιδής ήτανπερίπου 37–40◦Γ. Τα ληφθέντα φύλλα ξηράνθηκαν στους 45°C περίπου◦Γ σε φυτόστεγνωτήριο. Δείγμα κουπονιού (ΔΙΚΑ1-2018) κατατέθηκε στο Εργαστήριο ΦυσικώνProduct Medicine, College of Pharmacy, Kyung Hee University, Δημοκρατία της Κορέας.

4.2. Γενικές Πειραματικές Διαδικασίες

σιλικαζέλ (ODS-A 12 nm S-150µm, YMC, Τόκιο, Ιαπωνία). Η χρωματογραφία φλας ήταν ανάσχηματίζεται με χρήση CombiFlash (Teledyne Isco, Lincoln, NE, ΗΠΑ) με προσυσκευασμένα φυσίγγια,RediSep-silica (12 g, 24 g και 40 g) και RediSep-C18 (13 g, 26 g, 43 g και 130 g). ΠροετοιμασίαΗ tive HPLC πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το σύστημα καθαρισμού Gilson (Gilson, Middleton, WI,ΗΠΑ) με στήλη YMC Pack ODS-A (250× 20.0 χιλ., 5,0µm, YMC, Τόκιο, Ιαπωνία), μια σφαίραΣτήλη ODS-M80 (250× 20.0 χιλ., 4,0µm, YMC, Τόκιο, Ιαπωνία) και ένα Luna C18(2)στήλη (250× 21,2 mm, 10,0µm, Phenomenex, Torrance, CA, ΗΠΑ). Η ανάλυση HPLC ήτανεκτελείται σε σύστημα HPLC Youngin YL9100 που περιλαμβάνει σκέδαση εξατμιστικού φωτόςανιχνευτής (Youngin, Anyang, Κορέα) με στήλη Luna C18(2) (150× 4,6 mm, 5.0µm, Phenomenex, Torrance, CA, ΗΠΑ). Ο διαδικτυακός έλεγχος HPLC-ABTS πραγματοποιήθηκε στιςένα σύστημα Agilent 1200 HPLC με στήλη YMC Pack ODS-A (150× 4,6 mm, 5.0µm). Όλοι οι διαλύτες που χρησιμοποιήθηκαν για τους χρωματογραφικούς διαχωρισμούς αποστάχθηκαν.

4.3. Εξαγωγή και απομόνωση

Το αποξηραμένο φυτικό υλικό (15.0 kg) εκχυλίστηκε με 216 L αιθανόλης (EtOH) σευδατόλουτρο στους 60◦C για 4 ώρες και ο διαλύτης εξατμίστηκε για να ληφθεί εκχύλισμα EtOH (1,2 kg,απόδοση 8 τοις εκατό). Το εκχύλισμα εναιωρήθηκε σε Η2Ο (2,1 L) και κατανεμήθηκε με οξικό αιθυλεστέρα(EtOAc, 4,9 L× 3) για να δώσει EtOAc- (321,9 g, απόδοση 2,15 τοις εκατό) και Η2Ο-διαλυτές στιβάδες (748.0 g,απόδοση 4,99 τοις εκατό ), αντίστοιχα. Το διαλυτό σε EtOAc στρώμα (321,9 g) υποβλήθηκε σε πυριτική πηκτήστήλη (φ 10.5 × 35.0 cm) μεn- Μείγματα εξάνιο:EtOAc:μεθανόλη (MeOH) (από 8:1.8:0.2έως {{0}}:0:1v/v/v) για να δώσει εννέα κλάσματα (Ε1~Ε9).

Το κλάσμα Ε5 (14,2 g) χρωματογραφήθηκε σε στήλη Diaion HP-20 (φ 5.0 × 29.0 cm) με ακετόνη: H2O κλίση (7:3 έως 1:0) για να δώσει επτά κλάσματα (E5-1~E5-7). Το κλάσμα Ε5-1 ήτανυποβάλλεται σε στήλη πυριτικής πηκτής μεn-εξάνιο:EtOAc: MeOH=7:2.7:0.3 έως 0:0:1 για να δώσει 4 κλάσματα(Ε{{0}}~E5-1-4). Ε5-1-1 (13,2 mg) και Ε5-1-2 (7,0 mg) συνδυάστηκαν και καθαρίστηκαν με παρασκευαστική(prep)-HPLC χρησιμοποιώντας στήλη YMC Pack ODS-A (H2O: MeOH=27:23,7 mL/min) αποκτώενώσεις19 (8,3 mg, tR 26.0 λεπτά) και20 (2,5 mg, tR 24.0 λεπτά).

Το κλάσμα Ε8 (75,19 g) κλασματώθηκε σε διαλυτό σε ακετόνη (AS) και αδιάλυτο σε ακετόνη(AIS) κλάσματα. Το κλάσμα AS (44,07 g) χρωματογραφήθηκε σε στήλη Diaion HP-20(φ 6.5 × 12,5 cm) με ακετόνη: H2Μείγματα Ο (3:7 έως 1:0) για να δώσουν 12 κλάσματα (AS1~AS12).Το κλάσμα AS2 (2,5 g) διαχωρίστηκε με στήλη Sephadex LH-20 (φ 4.7 × 51.0 cm) μεMeOH για να δώσει εννέα κλάσματα (AS2-1~AS2-9). Το κλάσμα AS2-2 (196,3 mg) διαχωρίστηκε μεflash χρωματογραφία (FC) χρησιμοποιώντας φυσίγγιο RediSep-C18 (26 g, ακετονιτρίλιο: H2O, 0:1 έως7:1) για να δώσει ένωση17 (28,6 mg). Το κλάσμα AS3 (3,1 g) διαχωρίστηκε σε 11 κλάσματαχρησιμοποιώντας μια στήλη Sephadex LH-20 (φ 4.7 × 51.0 cm) με MeOH (AS3-1~AS3-11).

ΚλάσμαAS{{0}} (0,7 g) διαχωρίστηκε με FC με RediSep-C18 (130 g, MeOH:H2O, 1:9 έως 3:2) για να δώσειενώσεις4 (51,8 mg),5 (21,7 mg, tR 42,5 λεπτά) και6 (20,2 mg, tR 47.0 λεπτά). Το κλάσμα AS4 (8,8 g) υποβλήθηκε σε στήλη πυριτικής πηκτής (φ 5.2 × 21.0 cm) με MC:MeOH:H2Μείγματα O (από 8:1.8:0.2 έως 7:2.7:0.3) για την απομόνωση ενώσεων7 (5.0 mg),8 (5,1 mg),9 (20,0 mg), 10 (306.6 mg), και12 (20,1 mg). Το κλάσμα AS5 υποβλήθηκε σε στήλη πυριτικής πηκτής (φ 5.2 × 24,5 cm)με Χ.Θ2Cl2:MeOH:H2Μείγματα O (8:1.8:0.2 έως 7:2.7:0.3) για τη δημιουργία έξι κλασμάτων (AS5-1~AS5-6) για την απόδοση ενώσεων11 (3.0 mg) και13 (7,4 mg). Το κλάσμα AS10 διαχωρίστηκεσε επτά κλάσματα χρησιμοποιώντας στήλη Sephadex LH-20 (φ 3.5 × 50,5 cm) με MeOH (AS{2}}1~AS10-7). Το κλάσμα AS10-4 διαχωρίστηκε με FC με ένα RediSep-C18 (43 g, MeOH:H2O,

0:1 έως 3:2) φυσίγγιο για τον καθαρισμό των ενώσεων1 (5,3 mg),2 (21,4 mg),14 (15,9 mg), και15 (40.4 mg). Το κλάσμα AS12 διαχωρίστηκε σε πέντε κλάσματα χρησιμοποιώντας στήλη Sephadex LH-20 (φ 3.5 × 50,5 cm) με MeOH (AS12-1~AS12-5). Χημική ένωση16 (20,1 mg) ελήφθη απόανακρυστάλλωση με MeOH από το κλάσμα AS12-5.

Το κλάσμα Als (31,1 g) χρωματογραφήθηκε στήλη σιλικαζέλ με μίγματα h εξανίου EtOAc: MeOH (8:1,8:0.2 έως 0:0:1) ως κινητή φάση σε παρέχουν 20 κλάσματα (AIS1-AIS2{{2{0}}) Το κλάσμα AlS5 υποβλήθηκε σε στήλη πυριτικής πηκτής με μίγματα η-εξανίου:EtOAc:MeOH (8:1,8: {{30}}.2 έως 0:0:1) για να δώσει την ένωση 23 (224,7 g). Το κλάσμα AIS6 διαχωρίστηκε με FC με φυσίγγιο RediSep-C18 (43 g, MeOH:HO, 0:1 έως 9:1) για να δώσει την ένωση 25 (25,6 mg) Το κλάσμα AIS7 υποβλήθηκε σε στήλη πυριτικής πηκτής με n -εξάνιο:EtOAc: μίγματα MeOH(8:1.8:0.2 έως {{{0}}:0:1) για να δώσει ενώσεις 24 (10 0.0 mg) και 27 (214,1 mg). Το κλάσμα AIS10 υποβλήθηκε σε στήλη πυριτικής πηκτής με μίγματα η-εξάνιο:EtOAc:MeOH (7:2.7:0.3 έως 0:0:1) για να απομονωθούν οι ενώσεις 18 (5.0 mg) και 23 (16.7 mg). Το κλάσμα AIS11 διαχωρίστηκε σε 11 υποκλάσματα (AIS{11-1-AIS11-11) από FC με ένα φυσίγγιο RediSep-C18 (130 g, MeOH:HO, 1:1 έως 4:1). Η ένωση 22 (37,8 mg) ελήφθη από το κλάσμα AS11-4 με prep-HPLC με στήλη σφαίρας. Το κλάσμα AIS12 υποβλήθηκε σε στήλη πυριτικής πηκτής (ο 5,2 χ 28,0 cm) με μίγματα ΗΟΙ:ακετόνης (από 4:1 έως 3:2) για να δώσει την ένωση 21 (188,0 mg). Τέλος, το κλάσμα AIS16 διαχωρίστηκε χρησιμοποιώντας στήλη Lichroprep RP-18 (1,99 g, MeOH: H2O, 3:2 έως 13:7) για να ληφθεί η ένωση 3 (2,3 mg).

4.3.1. καεμπφερόλη-3-O- -D-200 -κουμαροϋλγαλακτοσίδη (1

) Κιτρινωπή σκόνη. mp 244,5◦C; [ ] 22 D -59.1◦ (c 0.1, MeOH); UV (MeOH)λΜέγιστη(κούτσουροε) 207 nm (3,98), 315 nm (3,92); IR (ATR)νΜέγιστη3458, 2922, 1650, 1588, 1364, 1260, 1175, 1076, 834 cm−1 ; 1Χέρι13Δεδομένα C NMR, βλέπε Πίνακα1; HRMS (θετική λειτουργία)m/z 595,1447 [M συν H]συν(υπολογισμός για C30H27O13, 595.1452). 

4.3.2. καεμπφερόλη-3-O- -D-200 -φερουλοϋλογλυκοσίδη (3) 

Κιτρινωπή σκόνη. mp 225,2◦C; [ ] 22 D -119.6◦ (c 0.1, MeOH); UV (MeOH)λΜέγιστη(κούτσουροε) 210 nm (4,17), 327 nm (3,94); IR (ATR)νΜέγιστη3369, 1652, 1599, 1512, 1360, 1264, 1177, 1076, 841 cm−1 ; 1Χέρι13Δεδομένα C NMR, βλέπε Πίνακα1; HRMS (αρνητική λειτουργία)m/z 623.1375 [M − H]− (υπολογισμός για C31H27O14, 623.1401).

4.3.3. καεμπφερόλη-3-0--D-2-γαλοϋλγαλακτοσίδη (11)

Κίτρινη σκόνη; HNMR (500 MHZ, DMSO-) 6 H NMR 8.06 (2H, d, J= 9.0 Hz, H{ {8}}H-6'), 7.02 (2H, S, H-3, H-'), 6,87 (2H, d, I=9 .5 Η, Η-, Η{-5, 6.39 (1Η, S, Η-8), 6.16 (1Η s, Η-6), 5.78 (1Η, d, {{33 }}.0 Hz, H-1 τοις εκατό),5.27 (1H, t, =9.5 Hz H-2" 13C NMR (125 MHzDMSO-6) {{45 }}.1 (C-4), 165.4 (C-7), 165.4 (C-1), 161.2 (C-5), 160.1 (C{{59} }, 156.3 (C{-2), 156.3 (C{-9), 145.5 (C{-4"), 145.5 (C-6", 138.4 (C{{74} }/), 132,5 (C-3), 131,0 (C-2'), 131,0 (C-6), 120,7 (C1), 119,8 (C-2') , 115.2 (C-3'), 115.2 (C-5, 108.9 (C-3), 108.9 (C-7), 103.8 (C-10) , 98,8 (C-6)98,8 (C-1 τοις εκατό ), 93,7 (C{-8), 76,0 (C{-5), 72,7 (C{-3) , 71.1 (C-2 τοις εκατό), 68.2 (C-4"), 60.1 (C-6").

4.4. Ouantitative Analsis ofNine Compounds in the Persimmon Lenves

Η ανάλυση HPLC πραγματοποιήθηκε σε ένα σύστημα Waters HPLC που περιλαμβάνει 1525 αντλίες και 2996 ανιχνευτές συστοιχίας φωτοδιόδου (Waters, Milford, ΜΑ, ΗΠΑ). Το μήκος κύματος UV ορίστηκε στα 260 nm. Χρησιμοποιήθηκε στήλη PhenomenexLuna C18(2) (150 x 4,6 mm, 5.0 um, Phenomenex, Torrance, ΗΠΑ) και ο όγκος έγχυσης ήταν 10 uL. Η θερμοκρασία της στήλης ορίστηκε στους 25 βαθμούς. Η κινητή φάση αποτελούνταν από 0,02 τοις εκατό τριφθοροξικό οξύ (TFA, Sigma-AldrichSt. Louis, ΜΟ, USA) σε νερό (Α) και ακετονιτρίλιο (Β) με ρυθμό ροής 0,7 mL/min. Οι συνθήκες κλίσης ήταν οι εξής: 0-30 min, 15-20 τοις εκατό B; 30-45 min, 20-35 % B: 45-70 min35-100 % ; 70-80 λεπτά, 100 τοις εκατό . Το εκχύλισμα EtOH (10 mg) διαλύθηκε σε 10 ug/mL διάλυμα εσωτερικού προτύπου (1 mL). Πραγματοποιήθηκε επικύρωση απλής μεθόδου για να διασφαλιστεί η συνάφεια της αναπτυγμένης μεθόδου και των ποιοτικών αποτελεσμάτων. Πέντε διαφορετικά διαλύματα κάθε ένωσης αναλύθηκαν για να σχηματιστεί κάθε καμπύλη βαθμονόμησης. Η ακρίβεια και η ακρίβεια εντός και εντός της ημέρας επιβεβαιώθηκαν μέσω τριών επαναλήψεων μέσα σε μία ημέρα και τρεις συνεχόμενες ημέρες. Όλα τα δείγματα διηθήθηκαν μέσω φίλτρων μεμβράνης 0,2 um.

4.5. DPPH και Διαδικτυακή Ανάλυση HPLC-ABTS

Η ικανότητα των δειγμάτων να καθαρίζουν τις ρίζες DPPH αξιολογήθηκε με βάση μια προηγούμενη εργασία. Εν συντομία, DPPH ({{0}}.1 mM) σε μεθανόλη (100 uL) αναμίχθηκε με διάφορες συγκεντρώσεις δειγμάτων (100 uL) για 1 ώρα στο σκοτάδι. Η απορρόφηση καταγράφηκε στα 517 nm. Η ηλεκτρονική ανάλυση HPLC-ABTS πραγματοποιήθηκε με βάση την προηγούμενη αναφορά με τροποποιήσεις. Ένα μικτό διάλυμα που περιέχει ABTS (0,08 mM) με υπερθειικό κάλιο (0,12 mM) κατασκευάστηκε σε ένα αντιδραστήριο ABTS. Το αντιδραστήριο αποθηκεύτηκε στους 4 C για 12 ώρες για να σταθεροποιηθούν οι ρίζες. Όλα τα δείγματα αναλύθηκαν με σύστημα Agilent HPLC. Οι συνθήκες κλίσης ήταν οι ίδιες με αυτές που χρησιμοποιήθηκαν για την ποσοτική ανάλυση. Το έκλουσμα στάλθηκε σε α-λειτουργία και αντέδρασε με αντιδραστήριο ABTS σε πηνίο αντίδρασης στους 40 βαθμούς. Το χρωματογράφημα απεικονίστηκε στα 254 nm (θετική κορυφή), καθώς και στα 734 nm (αρνητική κορυφή), για να καταγραφεί μια μείωση στις ρίζες aBIS

5. ΣυμπεράσματαΣε συμπέρασμα, αυτή η μελέτη παρουσιάζει μια φυτοχημική έρευνα που βασίζεται σε απομόνωση καθοδηγούμενη από βιοδοκιμασία. Ως αποτέλεσμα, ένα νέο φλαβονοειδές, η καεμπφερόλη-3-0-BD-2"-κουμαροϋλγαλακτοσίδη(1) και μια νέα φυσική ένωση, η καεμπφερόλη-3-0--D-2"-φερουλοϋλογλυκοσίδη (2 ), απομονώθηκαν μαζί με 25 προηγουμένως γνωστές ενώσεις, μεταξύ των οποίων δεκατέσσερα φλαβονοειδή, μία ιονόνη, δύο κουμαρίνες, επτά τριτερπενοειδή και μία ακετοφαινόνη. Όλες οι ενώσεις αξιολογήθηκαν αντιοξειδωτικές επιδράσεις, και από αυτές, εννέα φλαβονοειδή βρέθηκαν να έχουν δράση. Πραγματοποιήθηκε ταυτόχρονη ποσοτική ανάλυση για να επιβεβαιωθεί ότι τα φύλλα λωτός έχουν αντιοξειδωτική δράση λόγω αυτών των ενώσεων.

Συμπληρωματικά Υλικά:Τα παρακάτω είναι διαθέσιμα στο διαδίκτυο στη διεύθυνσηhttps://www.mdpi.com/article/10 .3390/plants10102032/s1, Εικόνες S1–S9: Τα φάσματα 1H, 13C, COSY, HSQC, HMBC, και ROESY NMR, UV, IR και HRMS της ένωσης 1, Εικόνες S10–S18: The 1H, 13C, COSY, HSQC, HMBCMRO, . , Φάσματα UV, IR και HRMS της ένωσης 3, Σχήματα S19–S20: Τα φάσματα 1Η και 13C NMR της ένωσης 11, Πίνακας S1: Η ποσοτική ανάλυση των άλλων 18 ενώσεων.

Συνεισφορές συγγραφέα:Οι JK και J.-EP συνεισέφεραν ισότιμα ​​σε αυτή τη μελέτη. conceptualization, H.-CK and D.-SJ; μεθοδολογία και επικύρωση, JK, J.-EP, J.-SL, J.-HL και HH; λογισμικό,JK και J.-SL; επικύρωση, JK και HH; επίσημη ανάλυση, JK and J.-EP; έρευνα, JK, J.-EP,J.-SL, J.-HL, HH, S.-HJ, H.-CK και D.-SJ; πηγές, H.-CK και D.-SJ; επιμέλεια δεδομένων, JK, J.-EP και J.-SL; σύνταξη — προετοιμασία πρωτότυπου σχεδίου, JK, J.-EP και J.-SL. συγγραφή-κριτική και επεξεργασία, H.-CK και D.-SJ; οπτικοποίηση, JK και J.-SL; εποπτεία, H.-CK και D.-SJ; έργοχορήγηση, H.-CK και D.-SJ; εξαγορά χρηματοδότησης, S.-HJ, H.-CK και D.-SJ Όλοι οι συγγραφείς έχουνδιάβασε και συμφώνησε με τη δημοσιευμένη έκδοση του χειρογράφου.

Σύγκρουση συμφερόντων:Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Xie, C.; Xie, Ζ.; Xu, Χ.; Yang, D. Persimmon (Διόσπυρος κακήL.) φύλλα: Ανασκόπηση σχετικά με τις παραδοσιακές χρήσεις, τη φυτοχημεία και τις φαρμακολογικές ιδιότητες.J. Ethnopharmacol.2015, 163, 229–240. [CrossRef]

2. Bei, W.; Zang, L.; Guo, J.; Peng, W.; Xu, Α.; Καλά, DA? Hu, Υ.; Wu, W.; Hu, D.; Zhu, X. Νευροπροστατευτικά αποτελέσματα ενός τυποποιημένου εκχυλίσματος φφλλαβονοειδούς απόΔιόσπυρος κακήφύλλα.J. Ethnopharmacol.2009, 126, 134–142. [CrossRef] [PubMed]

3. Sakanaka, S.; Tachibana, Υ.; Okada, Y. Παρασκευή και αντιοξειδωτικές ιδιότητες εκχυλισμάτων τσαγιού από φύλλα Ιαπωνικής λωτού (kakinoha-cha).Food Chem.2005, 89, 569–575. [CrossRef] 4. Sa, YS; Kim, S.-J.; Choi, H.-S. Το αντιπηκτικό κλάσμα από τα φύλλα τουΔιόσπυρος κακήΤο L. έχει αντιθρομβωτική δράση.Αψίδα. Pharmacal Res.2005, 28, 667–67

4. [CrossRef] [PubMed] 

5. Zhang, Κ.; Zhang, Υ.; Zhang, Μ.; Gu, L.; Liu, Ζ.; Jia, J.; Chen, X. Effects of phospholipid complex of total flavonoids from Persimmon (Διόσπυρος κακήL.) φύλλα σε πειραματικούς αρουραίους αθηροσκλήρωσης.J. Ethnopharmacol.2016, 191, 245–253. [CrossRef] 

6. Κοτάνη, Μ.; Matsumoto, Μ.; Fujita, Α.; Higa, S.; Wang, W.; Suemura, Μ.; Kishimoto, Τ.; Tanaka, T. Το εκχύλισμα φύλλων λωτός και η αστραγαλίνη αναστέλλουν την ανάπτυξη δερματίτιδας και την αύξηση της IgE σε ποντικούς NC/Nga.J. Allergy Clin. Immunol.2000, 106, 159–166. [CrossRef] 7. Thuong, PT; Lee, CH; Dao, TT; Nguyen, PH; Kim, WG; Lee, SJ; Ω, WK Triterpenoids από τα φύλλα τουΔιόσπυρος κακή(λωτός) και τα ανασταλτικά τους αποτελέσματα στην πρωτεϊνική φωσφατάση τυροσίνης 1Β.J. Nat. Κέντρο.2008, 71, 1775–1778. [CrossRef] 8. Matsuo, Τ.; Ito, S. Η χημική δομή της κακί-ταννίνης από τον ανώριμο καρπό του λωτού (Διόσπυρος κακήL.). Αγρ. Biol. Chem.1978, 42, 1637–1643. [CrossRef] 9. Bawazeer, S.; Rauf, A. In vivo αντιφλεγμονώδεις, αναλγητικές και ηρεμιστικές μελέτες του εκχυλίσματος και της ναφθοκινόνης που απομονώθηκαν απόΔιόσπυρος κακή(διόσπυπος).ACS Omega2021, 6, 9852–9856. [CrossRef] 10. Yoshimura, Μ.; Mochizuki, Α.; Amakura, Y. Ταυτοποίηση φαινολικών συστατικών και ανασταλτική δράση του κάλυκα της λωτός και του shiteito κατά του πολλαπλασιασμού των καρκινικών κυττάρων.Chem. Pharm. Ταύρος.2021, 69, 32–39. [CrossRef] 11. Wang, L.; Xu, ML; Rasmussen, SK; Wang, M.-H. Vomifoliol 9-O- -αραβινοφουρανοσύλιο (1→ 6)- -D-γλυκοπυρανοσίδη από τα φύλλα τουΔιόσπυρος Κάκηδιεγείρει την πρόσληψη γλυκόζης στα κύτταρα HepG2 και 3T3-L1.Υδατάνθρακες. Res.2011, 346, 1212–1216. [CrossRef] [PubMed] 12. Hitaka, Υ.; Nakano, Α.; Tsukigawa, Κ.; Manabe, Η.; Nakamura, Η.; Nakano, D.; Kinjo, J.; Nohara, Τ.; Maeda, H. Χαρακτηρισμός εστέρων καροτενοειδών λιπαρών οξέων από τις φλούδες του λωτούΔιόσπυρος κακή. Chem. Pharm. Ταύρος.2013, 61, 666–669. [CrossRef] 13. Simpson, DS; Γενιά Oliver, PL ROS στη μικρογλοία: Κατανόηση του οξειδωτικού στρες και της φλεγμονής στη νευροεκφυλιστική νόσο.Αντιοξειδωτικά2020, 9, 743. [CrossRef] [PubMed] 14. Liu, Ζ.; Ren, Ζ.; Zhang, J.; Chuang, C.-C.; Kandaswamy, Ε.; Zhou, Τ.; Zuo, L. Ο ρόλος των ROS και των θρεπτικών αντιοξειδωτικών στις ανθρώπινες ασθένειες.Εμπρός. Physiol.2018, 9, 477. [CrossRef] [PubMed] 15. Kwon, J.; Hwang, Η.; Selvaraj, Β.; Lee, JH; Park, W.; Ryu, SM; Lee, D.; Park, J.-S.; Kim, HS; Lee, JW Phenolic συστατικά που απομονώθηκαν απόSenna toraβλαστάρια και τα νευροπροστατευτικά τους αποτελέσματα έναντι του οξειδωτικού στρες που προκαλείται από γλουταμικό στα κύτταρα HT22 και R28.Bioorganic Chem.2021, 114, 105112. [CrossRef] [PubMed] 16. Romussi, G.; Bignardi, G.; Pizza, C.; De Tommasi, N. Constituents of cupuliferae, XIII: New and revised structures of acylated flflavonoids fromQuercus SuberL. Αψίδα. Der Pharm.1991, 324, 519–524. [CrossRef] 17. Li, Η.-Ζ.; Song, H.-J.; Li, Η.-Μ.; Pan, Υ.-Υ.; Li, R.-T. Χαρακτηρισμός φαινολικών ενώσεων απόRhododendron alutaceum. Αψίδα. Pharmacal Res.2012, 35, 1887–1893. [CrossRef] [PubMed] 18. Jung, Μ.; Choi, J.; Chae, H.-S.; Cho, JY; Kim, Y.-D.; Htwe, KM; Lee, W.-S.; Chin, Y.-W.; Kim, J.; Yoon, KD Φλαβονοειδή απόSymplocos racemosa. Μόρια2015, 20, 358–365. [CrossRef] 19. Xu, J.; Wang, X.; Yue, J.; Sun, Υ.; Zhang, Χ.; Zhao, Y. Πολυφαινόλες από φύλλα βελανιδιού (Quercus liaotungensis) προστατεύουν τα βήτα κύτταρα του παγκρέατος και την ανασταλτική τους δράση έναντι -γλυκοσιδάση και πρωτεϊνική φωσφατάση τυροσίνης 1Β.Μόρια2018, 23, 2167. [CrossRef]