Κεφάλαιο 1: Ανοσολογικές αποκρίσεις στη λοίμωξη SARS-CoV-2 και εμβολιασμός σε ασθενείς που υποβάλλονται σε αιμοκάθαρση και λήπτες μοσχευμάτων νεφρού

Για περισσότερες πληροφορίες. επαφήtina.xiang@wecistanche.com

Αφηρημένος: Ασθενείς που υποβάλλονται σε αιμοκάθαρση καιμεταμόσχευση νεφρού(KTX)λήπτες πάσχουν από εξασθενημένο ανοσοποιητικό σύστημα και παρουσιάζουν μειωμένη ανταπόκριση στον εμβολιασμό τύπου 2 (SARS-CoV-2) του κορωνοϊού του σοβαρού οξέος αναπνευστικού συνδρόμου (SARS-CoV-2). Πραγματοποιήσαμε μια αναδρομική ανάλυση 1505 ορολογικών μετρήσεων SARS-CoV-2 που ελήφθησαν από 887 ασθενείς που υποβλήθηκαν σε αιμοκάθαρση και 86 λήπτες KTX. Τα αποτελέσματα διαχωρίστηκαν από υποομάδες ασθενών (αιμοκάθαρση/KTX) καθώς και από την κατάσταση SARS-CoV-2. Το τελευταίο κριτήριο περιλάμβανε ασθενείς με SARS-CoV-2-αφελείς ασθενείς με ή χωρίς εμβολιασμό covid-19 και αναρρώσαντες ασθενείς που έλαβαν αναμνηστική δόση. Οι ορογραφίες 27 εμβολιασμένων υγιών ατόμων χρησίμευσαν ως ομάδα αναφοράς. Η κυτταρική ανοσοαπόκριση που προκλήθηκε από εμβόλιο ποσοτικοποιήθηκε με μια δοκιμασία απελευθέρωσης ιντερφερόνης-γy σε 32 λήπτες KTX. Προσδιορίσαμε ποσοστά ορομετατροπής 92,6%, 93,4% και 71,4% σε ασθενείς που υποβάλλονται σε αιμοκάθαρση και έχουν εμβολιαστεί είτε με BNT162b2, mRNA-1273, είτε με AZD1222, αντίστοιχα. Οι τίτλοι αντισωμάτων που προκλήθηκαν από εμβολιασμό κατά του SARS-CoV-2 ήταν χαμηλότεροι σε ασθενείς που υποβάλλονταν σε αιμοκάθαρση σε σύγκριση με τα υγιή άτομα και ο εμβολιασμός με mRNA-1273 προκάλεσε υψηλότερους τίτλους από το BNT162b2. Το αρχικό ποσοστό ορομετατροπής ήταν 39,5% στους λήπτες KTX που εμβολιάστηκαν με BNT162b2. Ένα γραμμικό μοντέλο παλινδρόμησης προσδιόρισε τη φαρμακευτική αγωγή με μυκοφαινολάτη-μοφετίλ/μυκοφαινολικό οξύ ως ανεξάρτητο παράγοντα κινδύνου για ελλείπουσα ορομετατροπή. Μέσα σε μια κοόρτη 32 ληπτών KTX, η κυτταρική και χυμική ανοσοδραστικότητα στον SARS-CoV-2 ήταν ανιχνεύσιμη μόνο σε τρεις ασθενείς. Συμπερασματικά, τα ποσοστά ορομετατροπής που προκλήθηκαν από εμβόλια ήταν παρόμοια σε ασθενείς που υποβάλλονταν σε αιμοκάθαρση σε σύγκριση με υγιή άτομα, αλλά ήταν έντονα εξασθενημένα σε λήπτες KTX. Οι τίτλοι anti-SARS-CoV-2 lgG που προκλήθηκαν από τη διπλή ενεργή ανοσοποίηση ήταν σημαντικά χαμηλότεροι και στις δύο κοόρτεις σε σύγκριση με τα υγιή άτομα και οι ανοσολογικές αποκρίσεις στον εμβολιασμό εξαφανίστηκαν γρήγορα.

Λέξεις κλειδιά: COVID-19;ανοσοκαταστολή; προστασία · τίτλος; αντισώματα· νεφρική νόσο

Κάντε κλικ εδώ για να μάθετε για ποιο λόγο χρησιμοποιείται το cistanche

1. Εισαγωγή

Οι ασθενείς που υποβάλλονται σε αιμοκάθαρση (HD) και οι λήπτες μεταμόσχευσης νεφρού (KTX) διατρέχουν κίνδυνο σοβαρής νόσου κορωνοϊού-19 (COVID-19)[1,2]. Παραδόξως, αν και περιορισμένες σε αριθμό, μελέτες παρατήρησης δεν αποκάλυψαν καμία διαφορά στην ανοσολογική απόκριση στον κοροναϊό τύπου 2 του σοβαρού οξέος αναπνευστικού συνδρόμου (SARS-CoV-2) μετά από φυσική λοίμωξη σε χρόνια ανοσοκατασταλμένους ασθενείς και ανοσοεπαρκτικά άτομα [3]. Προφανώς, η ηλικία και η αδυναμία, καθώς και ο αριθμός και η σοβαρότητα των προϋπαρχουσών συννοσηροτήτων - περισσότερο από τη φαρμακολογική ανοσοκαταστολή - είναι προγνωστικοί παράγοντες για μια σοβαρήΝόσος COVID-19τόσο σε ανοσοκατεσταλμένους όσο και σε ανοσοεπαρκείς ασθενείς [4,5]. Παρά ταύτα, τα ευρωπαϊκά δεδομένα για τη δημόσια υγεία υποδεικνύουνχρόνια νεφρική νόσο(ΧΝΝ) και την αιμοκάθαρση ως κρίσιμες προγνωστικές συννοσηρότητες που σχετίζονται με αυξημένη θνησιμότητα μετά από λοίμωξη από τον SARS-CoV-2 [6]. Επιπλέον, μειωμένη ορομετατροπή και μακροζωία του SARS-CoV-2ανοσολογικές αποκρίσειςμετά τη μόλυνση απειλεί περαιτέρω τους ασθενείς με HD και KTX [4,7,8].

Η ενεργή ανοσοποίηση κατά του SARS-CoV-2, ιδίως με εμβόλια αγγελιοφόρων ριβονουκλεϊκών οξέων (mRNA), θεωρείται η πιο αποτελεσματική προληπτική στρατηγική για την προστασία των ευάλωτων ατόμων από λοιμώξεις και σοβαρά μαθήματα COVID-19 [9]. Ωστόσο, τόσο η ένταση όσο και η διάρκεια της ανοσολογικής απόκρισης μετά τον εμβολιασμό σε συγκεκριμένες ομάδες ασθενών δεν έχουν χαρακτηριστεί πλήρως. Σε σύγκριση με τον γενικό πληθυσμό, οι ασθενείς με HD θεωρείται ότι παρουσιάζουν μειωμένους τίτλους αντισωμάτων SARS-CoV-2 και έχουν καθυστερημένη ανοσοαπόκριση [10-12]. Μετά τη δεύτερη ένεση, το ποσοστό ορομετατροπής μπορεί να φτάσει το 90% και μια κυτταρική ανοσοαπόκριση μπορεί να ανιχνευθεί σε περίπου 80% των εμβολιασμένων ατόμων[13-15]. Τα αυξανόμενα διαθέσιμα δεδομένα από διάφορες μελέτες σχετικά με την αποτελεσματικότητα του εμβολιασμού κατά sars-CoV-2 σε λήπτες μοσχευμάτων συμπαγών οργάνων (SOT) αποκάλυψαν μια έντονα εξασθενημένη χυμική και κυτταρική ανοσοαπόκριση σε σύγκριση με τον γενικό πληθυσμό, με αναφερόμενη ορομετατροπή κάτω του 45% και επιπλέον μειωμένη κυτταρική απόκριση [16-19].

Μέχρι στιγμής, ο ορισμός του τίτλου αντισωμάτων που παρέχει προστασία εξακολουθεί να διερευνάται εντατικά και ο προσδιορισμός των επιπέδων αντισωμάτων δεν εκτελείται συστηματικά [20]. Αναλύσαμε συστηματικά το ποσοστό ορομετατροπής και τον τίτλο αντισωμάτων σε 681 ασθενείς με HD και 86 λήπτες KTX για να χαρακτηρίσουμε τη χυμική απόκριση τόσο στη μόλυνση από SARS-CoV-2 που επιβεβαιώθηκε με PCR όσο και στον εμβολιασμό (BNT162b2 (BioNTech / Pfizer, Mainz, Γερμανία / Νέα Υόρκη, Νέα Υόρκη, ΗΠΑ), mRNA-1273 (Moderna, CA, ΗΠΑ) και AZD1222 (AstraZeneca / Πανεπιστήμιο της Οξφόρδης, Cambridge / Οξφόρδη, Ηνωμένο Βασίλειο)) με αναδρομικό τρόπο. Οι ορογραφίες 27 υγιών ατόμων που εμβολιάστηκαν με mRNA χρησίμευσαν ως ομάδα αναφοράς. Επιπλέον, η κυτταρική ανοσοαπόκριση ποσοτικοποιήθηκε προοπτικά σε 32 λήπτες KTX για να χαρακτηρίσει πλήρως την προστασία που προκαλείται από το εμβόλιο mRNA.

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1. Σχεδιασμός μελέτης, ασθενείς και δεοντολογική δήλωση

Για να χαρακτηρίσουμε τη χυμική ανταπόκριση τόσο στη λοίμωξη όσο και στον εμβολιασμό, αναλύσαμε αναδρομικά τις ορολογίες SARS-CoV-2 από ασθενείς που υποβλήθηκαν σε αιμοκάθαρση και KTX που πραγματοποιήθηκαν στο Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο κολωνίας της Γερμανίας, ξεκινώντας από την αρχή της πανδημίας COVID-19 τον Απρίλιο του 2020 έως τον Ιούνιο του 2021. Αυτή η κοόρτη περιείχε 206 ασθενείς με αιμοκάθαρση sars-CoV-2-naïve στους οποίους τα αντισώματα κατά του SARS-CoV-2 ελέγχονταν κάθε τρεις μήνες για ένα έτος από τον Απρίλιο του 2020 έως τον Απρίλιο του 2021. Όσον αφορά τον εμβολιασμό, οι μετρήσεις αντισωμάτων ελήφθησαν μεταξύ Μαρτίου 2021 και Ιουνίου 2021 από 627 ασθενείς που δεν είχαν λάβει αιμοκάθαρση με SARS-CoV-2, ΗΠΑ), εκ των οποίων οι 475 έλαβαν BNT162b2(BNT162b2(BioNTech/Pfizer, Mainz, Ger-many/New York, NY, ΗΠΑ), 138 mRNA-1273 (Moderna, CA, USA) και 14 AZD1222 (AstraZeneca/Πανεπιστήμιο της Οξφόρδης, Cambridge/Oxford, UK), αντίστοιχα. Επιπλέον, οι ορίζες 54 ασθενών που έκαναν αιμοκάθαρση και είχαν αναρρώσει από τον SARS-CoV-2

ελήφθησαν, εκ των οποίων οι 38 έλαβαν αναμνηστική δόση (όλες BNT162b2). Όσον αφορά τους λήπτες KTX που δεν έχουν λάβει τον SARS-CoV-2, ελήφθησαν οροί από 86 ασθενείς για την παρακολούθηση του εμβολιασμού BNT162b2. Οι ορογραφίες 27 υγιών ατόμων που εμβολιάστηκαν με mRNA-1273 χρησίμευσαν ως ομάδα ελέγχου. Όλα τα εμβόλια χορηγήθηκαν σε κλινική ρουτίνα κατά την κρίση του θεράποντος ιατρού και σύμφωνα με τις συμβουλές των κατασκευαστών. Όλες οι μετρήσεις πραγματοποιήθηκαν σε κλινική ρουτίνα και αναλύθηκαν αναδρομικά μετά από έγκριση από το τοπικό θεσμικό συμβούλιο αναθεώρησης (Επιτροπή Δεοντολογίας της Ιατρικής Σχολής του Πανεπιστημίου της Κολωνίας, Γερμανία, EK21-1398). Επιπλέον, οι χυμικές και κυτταρικές ανοσολογικές αποκρίσεις εξετάστηκαν προοπτικά σε 32 λήπτες KTX του SARS-CoV-2 μεταξύ Ιουνίου και Σεπτεμβρίου 2021. Η μελέτη αυτή εγκρίθηκε επίσης από την Επιτροπή Δεοντολογίας της Ιατρικής Σχολής του Πανεπιστημίου της Κολωνίας στη Γερμανία (EK21-1112) και διεξήχθη σύμφωνα με τη Διακήρυξη του Ελσίνκι.

2.2.Ορολογικές δοκιμασίες για την ανίχνευση αντισωμάτων anti-SARS-CoV-2

Η αντι-SARS-CoV-2 IgG που στοχεύει την πρωτεΐνη ακίδα (S) ανιχνεύθηκε από το ημι-ποσοτικό Euroimmun anti-SARS-CoV-2 IgG ELISA χρησιμοποιώντας το Euroimmun Analvzer I (Eu-roimmun Diagnostik, Lübeck, Γερμανία) και από το ποσοτικό IDKeanti-SARS-CoV-2 IgG ELISA (Immundiagnostik AG, Bensheim, Γερμανία) χρησιμοποιώντας το DYNEX DSX (Dynex Technologies, Chantilly, VA, ΗΠΑ), και τα δύο χρησιμοποιώντας το ανασυνδυασμένο αντιγόνο S1 της πρωτεΐνης ακίδας, ή την ανοσοδοκιμασία μικροσωματιδίων χημειοφωταύγειας από την Abbott για την ποσοτική ανίχνευση αντι-ακίδας RBD (περιοχή δέσμευσης υποδοχέα)IgG (SARS-CoV-2 IgG II Quant)χρησιμοποιώντας το αυτοματοποιημένο σύστημα Alinity i (Abbott, Abbott Park, IL, ΗΠΑ). Τα αποτελέσματα των ποσοτικών δοκιμασιών IgG που στόχευαν S1 ή RBD εκφράστηκαν σε BAU/mL(δεσμευτική μονάδα αντισωμάτων) χρησιμοποιώντας τον συντελεστή μετατροπής που δημιουργήθηκε από ένα εσωτερικό πρότυπο του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας (ΠΟΥ) και παρασχέθηκε από κάθε κατασκευαστή. Επιπλέον, 29 ασθενείς από την ομάδα αιμοκάθαρσης εξετάστηκαν παράλληλα χρησιμοποιώντας αυτές τις δύο ποσοτικές δοκιμασίες SARS-CoV-2 IgG για να προσδιοριστεί εάν παρείχαν συγκρίσιμους τίτλους IgG. Τα αντισώματα στόχευσης πρωτεϊνών νουκλεοκαψιδίου (NC) ανιχνεύθηκαν από την ανοσοδοκιμασία παν-ανοσοσφαιρίνης Elecsys anti-SARS-CoV-2 ανοσοχημική ανάλυση (ECLIA) χρησιμοποιώντας το Cobas 8000 (Roche Diagnostics, Mannheim, Γερμανία). Όλες οι δοκιμασίες ερμηνεύτηκαν σύμφωνα με τις συστάσεις του κατασκευαστή.

2.3.Προσδιορισμός της απόκρισης των Τ-κυττάρων στον SARS-CoV-2

Η απόκριση του SARS-CoV-2 με τη μεσολάβηση CD4+ και CD8+ Τ-κυττάρων μετρήθηκε από την εμπορική δοκιμασία απελευθέρωσης ιντερφερόνης-γ (IFN-γ) (IGRA) Quantiferon(8) SARS-CoV-2 RUO(QIAGEN GmbH, Hilden, Γερμανία). Τα Τ-κύτταρα διεγείρονται με επίτοπους των υπομονάδων S1 και S2 της πρωτεΐνης ακίδας ακίδας SARS-CoV-2 (αντιγόνο 1 και 2). Η συγκέντρωση του IFN-y μετρήθηκε με μια ανοσοδοκιμασία χημειοφωταύγειας (CLIA), όπως περιγράφηκε προηγουμένως [21]. Ένα επίπεδο IFN-y > 0,15 IU/mL βαθμολογήθηκε ως αντιδραστικό [22].

2.4.Στατιστική

Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό GraphPad Prism έκδοση 5 (Graph-Pad Prism Software Inc. San Diego, CA, ΗΠΑ) και το SPSSversion 27.0 (SPSS Inc., Σικάγο, Ιλινόις, ΗΠΑ). Οι μη φυσιολογικές κατανομές των τίτλων αντισωμάτων εκφράστηκαν ως διάμεσοι ± ενδοτεταρτημοριακό εύρος και συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας τις δοκιμές Kruskal-Wallis/Mann-Whitney U και Spearman Correlation. Όσον αφορά τα χαρακτηριστικά των ασθενών, οι κατηγορικές μεταβλητές συνοψίστηκαν με απόλυτους αριθμούς και συχνότητες και αριθμητικές μεταβλητές κατά διάμεσο και ενδοτεταρτημοριακό εύρος, αντίστοιχα. Οι κατηγορικές μεταβλητές αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας μια δοκιμή chi-square και οι αριθμητικές μεταβλητές χρησιμοποιώντας μια δοκιμή Mann-Whitney U με περιγραφικό τρόπο. Οι συσχετίσεις —-προσαρμοσμένες για τη χρησιμοποιούμενη δοκιμασία, την ηλικία και το χρόνο μεταξύ συμβάντος και δείγματος αίματος—- υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας ένα γραμμικό μοντέλο παλινδρόμησης με ανάλυση Spearman. p<0.05 was="" considered="" statistically="" significant.="" to="" examine="" the="" comparability="" of="" the="" two="" immunoassays,="" a="" passing-bablok="" regression="" was="" carried="" out="" using="" the="" software="" analyze-it="" v5.50(analyse-it="" software,="" ltd.="" leeds,="">