Ρυθμιστικές επιδράσεις του χαπιού Bixie Qianlie'an στην οδό TLR4/NF-κB/NLRP3 και στην πυρόπτωση σε ένα μοντέλο αρουραίου με χρόνια μη βακτηριακή προστατίτιδα

Αποτελέσματα

 

3.1 Ιστοπαθολογικές αλλαγές στον προστατικό ιστό αρουραίων CNP

Η αξιολόγηση του μοντέλου πραγματοποιήθηκε 1 εβδομάδα μετά τη μοντελοποίηση. Στην ομάδα μοντέλου, παρατηρήθηκε διήθηση λεμφοκυττάρων, πολυμορφοπύρηνων ουδετερόφιλων και πλασματοκυττάρων εντός του προστάτη, μαζί με αγγειακή διαστολή και συμφόρηση. Στις τυφλές και ψευδοχειρουργημένες ομάδες, δεν βρέθηκε εμφανής φλεγμονώδης κυτταρική διήθηση στο προστατικό στρώμα. Τα κύτταρα διατάσσονταν τακτικά με φυσιολογική μορφολογία, υποδεικνύοντας την επιτυχή καθιέρωση του μοντέλου αρουραίου CNP (βλ. Εικόνα 1).

Μετά από 30 διαδοχικές ημέρες καθετηριασμού, οι προστάτες της ψευδο-εγχειρημένης ομάδας και των τυφλών ομάδων ήταν κανονικού μεγέθους αδένα, με υγρή γκρι-κόκκινη επιφάνεια, διαφανή αδενώδη αυλό, μαλακή υφή, λεία επιφάνεια και χαλαρή προσκόλληση στα σπερματικά κυστίδια, επιτρέποντας τον εύκολο διαχωρισμό. Αντίθετα, η ομάδα μοντέλων εμφάνισε πρήξιμο του προστάτη, μια γκρι-κίτρινη επιφάνεια χωρίς ορατή διαφανή αυλή, μια πιο σταθερή υφή, μια τραχιά, ανώμαλη επιφάνεια και συμφύσεις στα σπερματικά κυστίδια που ήταν δύσκολο να διαχωριστούν. Σε σύγκριση με την ομάδα μοντέλων, όλες οι ομάδες δόσης Bixie Qianlie'an Pill (BQAP) παρουσίασαν βελτιώσεις στο πρήξιμο και στο χρώμα. η επιφάνεια είχε λιγότερες κοκκώδεις αλλαγές, η υφή ήταν πιο απαλή και ελαστική και ο διαχωρισμός από τα σπερματοδόχα κυστίδια ήταν ευκολότερος.

Η χρώση HE έδειξε ότι, σε σύγκριση με την ομάδα που χειρουργήθηκε ψευδώς, η ομάδα μοντέλου είχε λεμφοκύτταρα και μικρό αριθμό πλασματοκυττάρων διήθησης εντός του προστατικού στρώματος, κυτταρικό οίδημα, πολλαπλασιαστικό στρωματικό συνδετικό ιστό και αγγειακή συμφόρηση. Στις ομάδες χαμηλής, μέσης και υψηλής δόσης BQAP, παρατηρήθηκε μόνο ένας μικρός έως ελάχιστος βαθμός διήθησης λεμφοκυττάρων και η κυτταρική μορφολογία και διάταξη ήταν πιο κανονική (βλ. Εικόνα 2).

 

Συμπλήρωμα Tcm Herb Cistanche για τη χρόνια μη βακτηριακή προστατίτιδα

 

Πώς λειτουργεί το Tcm Herb Cistanche

Λεπτομέρειες καταχώρισης

 

 

 

3.2 Αλλαγές στον δείκτη προστάτη μετά από φαρμακευτική παρέμβαση σε αρουραίους CNP

Σε σύγκριση με την ομάδα που χειρουργήθηκε ψευδώς, ο δείκτης προστάτη της ομάδας μοντέλου ήταν αυξημένος (σελ<0.05). After intervention with different doses of BQAP, the prostate index was reduced versus the model group; the reduction was significant in the medium-dose BQAP group (p<0.05), while the effects in the low- and high-dose groups were not significant.

 

3.3 Επιδράσεις της φαρμακευτικής παρέμβασης στους προφλεγμονώδεις παράγοντες ορού IL-1 , IL-18 και TNF- σε αρουραίους CNP

Σε σύγκριση με την ψευδοχειρουργημένη ομάδα, τα επίπεδα ορού IL-1 , IL-18 και TNF- ήταν σημαντικά αυξημένα στην ομάδα μοντέλου (σ.<0.05). Relative to the model group, BQAP at all doses reduced IL-1β, IL-18, and TNF-α to varying degrees (p<0.05), with the high-dose group showing a more marked effect (see Table 2 and Figure 3).

3.4 Κατανομή και έκφραση του NLRP3 σε ιστό προστάτη αρουραίων CNP μετά από φαρμακευτική παρέμβαση

Σε σύγκριση με την εικονική ομάδα, η έκφραση NLRP3 αυξήθηκε στην ομάδα μοντέλου (σελ<0.05). NLRP3 expression in the BQAP low-, medium-, and high-dose groups was significantly lower than in the model group (p<0.05) (see Figures 4 and 5).

 

3.5 Αποτελέσματα ανοσοφθορισμού για GSDMD σε ιστό προστάτη αρουραίων CNP μετά από φαρμακευτική παρέμβαση

Σε σύγκριση με την ψευδοχειρουργημένη ομάδα, η ένταση φθορισμού GSDMD στον ιστό του προστάτη των μοντέλων αρουραίων αυξήθηκε. Οι ομάδες χαμηλής, μεσαίας και υψηλής δόσης BQAP έδειξαν σημαντικά χαμηλότερη ένταση φθορισμού GSDMD από την ομάδα μοντέλου (σ.<0.05) (see Figures 6 and 7).

 

3.6 Επιδράσεις της φαρμακευτικής παρέμβασης στην έκφραση των πρωτεϊνών TLR4, MyD88, NF-κB p65, p-NF-κB p65, NLRP3, Caspase-1 και GSDMD σε ιστό προστάτη αρουραίων CNP

Σε σύγκριση με την ψευδοχειρουργημένη ομάδα, η ομάδα μοντέλου έδειξε αυξημένη έκφραση των πρωτεϊνών TLR4, MyD88, NF-κB p65, p–NF-κB p65, NLRP3, Caspase-1 και GSDMD (p<0.05). Relative to the model group, BQAP at different doses downregulated these proteins in prostate tissue to varying degrees (p<0.05), with a more pronounced effect in the high-dose group (see Table 3 and Figure 8).

Συζήτηση

 

Το CNP είναι μια συχνή και συχνά εμφανιζόμενη νόσος του ουρογεννητικού συστήματος των ανδρών, ιδιαίτερα διαδεδομένη μεταξύ νεαρών και μεσήλικων ανδρών [9]. Αν και η ακριβής αιτιολογία της παραμένει ελλιπώς κατανοητή, οι φλεγμονώδεις αποκρίσεις διαδραματίζουν κεντρικό ρόλο στην εμφάνιση και την εξέλιξή της, περιλαμβάνοντας παράγοντες όπως οι ανοσολογικές αποκρίσεις, η νευρική πλαστικότητα και η ενδοκρινική δυσρρύθμιση [10].

Σε αυτή τη μελέτη, το BQAP μείωσε σημαντικά τις φλεγμονώδεις αποκρίσεις σε ένα μοντέλο αρουραίου χρόνιας μη βακτηριακής προστατίτιδας διαμορφώνοντας το μονοπάτι σηματοδότησης TLR4/NF-κB/NLRP3. Αυτή η οδός είναι ένας σημαντικός άξονας που μεσολαβεί στη φλεγμονή στη χρόνια προστατίτιδα, που συμμετέχει στη ρύθμιση της παραγωγής προφλεγμονώδους κυτοκίνης [11]. Μελέτες έχουν δείξει αυξημένη έκφραση και δραστηριότητα των TLR4, NF-κB και NLRP3 στο προστατικό υγρό από ασθενείς με CP [12]. Ο υποδοχέας TLR4 αναγνωρίζει ενδογενή και εξωγενή σήματα κινδύνου για την ενεργοποίηση του MyD88, ξεκινώντας έτσι τη σηματοδότηση NF-κB και προάγοντας την απελευθέρωση προφλεγμονωδών παραγόντων όπως IL-1, IL-18 και TNF-, οι οποίοι επιδεινώνουν περαιτέρω την τοπική φλεγμονή και τον τραυματισμό των ιστών [13]. Επιπλέον, το NF-κB και το φλεγμονώδες NLRP3 διαδραματίζουν βασικούς ρόλους στην ενεργοποίηση των κυττάρων του ανοσοποιητικού, την παραγωγή κυτοκίνης και τον κυτταρικό θάνατο [14-15]. Ο βελονισμός έχει αποδειχθεί ότι ρυθμίζει την έκφραση των πρωτεϊνών TLR4, NF-κB και NLRP3, ανακουφίζοντας έτσι τις φλεγμονώδεις αποκρίσεις στην CP [16].

Οι κυτοκίνες είναι ζωτικής σημασίας στην ανοσοπαθολογική διαδικασία του CNP [17]. Αποτελούν κύρια αιτία παρατεταμένης φλεγμονώδους διήθησης ανοσοκυττάρων στον προστατικό ιστό [18]. οι συγκεντρώσεις τους είναι σημαντικά αυξημένες σε μοντέλα ποντικών με αυτοάνοση προστατίτιδα και η μείωση των επιπέδων τους μπορεί να ανακουφίσει τη φλεγμονώδη διήθηση και τα συμπτώματα πόνου [19]. Τα ευρήματά μας δείχνουν ότι το BQAP μείωσε σημαντικά τον ορό IL-1 , IL-18 και TNF- , σύμφωνα με μειωμένη διήθηση φλεγμονωδών κυττάρων και βελτιωμένη παθολογία στον προστάτη. Οι IL-1 , IL-18 και TNF- είναι πρωτότυπες προφλεγμονώδεις κυτοκίνες με κρίσιμους ρόλους στην εμφάνιση και την ανάπτυξη της προστατίτιδας [20]. Τα ενεργοποιημένα φλεγμονώματα NLRP3 προάγουν την ωρίμανση των IL-1 και IL-18, ενισχύοντας περαιτέρω τις ανοσολογικές αποκρίσεις και επιδεινώνοντας τη βλάβη των ιστών [21]. Ο He Tao et al. [22] επιβεβαίωσε ότι η υψηλή έκφραση NLRP3 οδηγεί σε μαζική έκκριση των IL-1 και IL-18, προάγοντας έτσι την εξέλιξη της φλεγμονής και επιδεινώνοντας τα κλινικά συμπτώματα στην CP.

Τα θεραπευτικά αποτελέσματα του BQAP μπορεί να μεσολαβούν με την καταστολή της ενεργοποίησης της οδού TLR4/NF-κB/NLRP3, μειώνοντας τη ρύθμιση των TLR4, MyD88, NF-κB p65, p–NF-κB p65, NLRP3, Κασπάση-1 και GSDMD στον προστατικό ιστό και προστατεύοντας τη φλεγμονή του προστάτη. Η πυρόπτωση είναι μια φλεγμονώδης μορφή προγραμματισμένου κυτταρικού θανάτου που μεσολαβείται από την οικογένεια gasdermin, που χαρακτηρίζεται από σχηματισμό πόρων στην κυτταρική μεμβράνη και απελευθέρωση των IL-1 και IL-18, τα οποία εντείνουν τη φλεγμονή [23-24] και έχει μεγάλη σημασία στη φλεγμονώδη και ανοσολογική ρύθμιση [25]. Μελέτες έχουν δείξει ότι το ουρσολικό οξύ μπορεί να εξασθενήσει την CP ρυθμίζοντας την οδό Caspase-1/GSDMD που προκαλείται από φλεγμονές NLRP3, καταστέλλοντας τις πρωτεΐνες NLRP3, Κασπάση-1, ASC και GSDMD που σχετίζονται με την πυρόπτωση και μειώνοντας τα επίπεδα της IL-1 , της απολακτικής [2}} και της λακτάσης. Στη μελέτη μας, η έκφραση των πρωτεϊνών NLRP3, Caspase-1 και GSDMD στον ιστό του προστάτη μειώθηκε σημαντικά στις ομάδες BQAP, υποδηλώνοντας ότι το BQAP μπορεί να ανακουφίσει τη φλεγμονώδη βλάβη στην CP αναστέλλοντας την ενεργοποίηση του φλεγμονώδους και μειώνοντας την πυρόπτωση.

Η παραδοσιακή κινεζική ιατρική (TCM) έχει μοναδικά πλεονεκτήματα και αξιοσημείωτη αποτελεσματικότητα στη θεραπεία της CP [27]. Το BQAP έχει σχεδιαστεί για να τονώνει το qi των νεφρών, να καθαρίζει τη θερμότητα και την υγρασία, να επιλύει τη στάση του αίματος και να ξεμπλοκάρει τα παράπλευρα στοιχεία. Η μορφή χαπιού του ασκεί αποτελέσματα πιο σταδιακά, ευθυγραμμιζόμενη με τη χρόνια πορεία της νόσου. Σε αυτή τη φόρμουλα, το Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma (Bixie) προάγει τη διούρηση και διαχωρίζει το θολό από το διαυγές. Το Plantaginis Semen και το Abutili Το σπέρμα καθαρίζει τη θερμότητα και αποστραγγίζει την υγρασία και προωθεί την ούρηση - λειτουργώντας από κοινού ως κυρίαρχα φάρμακα για την εκκαθάριση της υγρασίας στο κατώτερο jiao και την αντιμετώπιση του κλάδου (συμπτώματα). Το Rehmanniae Radix Preparata θρέφει το γιν των νεφρών και αναπληρώνει την ουσία. Το Cuscutae Semen τονώνει το συκώτι και τα νεφρά και ασφαλίζει την ουσία και μειώνει την ούρηση - σε συνδυασμό με βότανα που καθαρίζουν τη θερμότητα, που αποστραγγίζουν την υγρασία για την αποβολή των παθογόνων μικροοργανισμών και την τόνωση του νεφρού, διασφαλίζοντας ότι μόλις αφαιρεθεί το παθογόνο, ο νεφρός σταθεροποιείται. Το Astragali Radix ωφελεί το qi, αυξάνει το yang και προάγει τη διούρηση. Το Hirudo ενεργοποιεί το αίμα και ξεμπλοκάρει τα κανάλια. Ο συνδυασμός του Astragalus και του Hirudo συμπληρώνει το qi χωρίς να συγκρατεί παθογόνα και διασπείρει τη στάση του αίματος χωρίς να βλάπτει το υγιές τσι, χρησιμεύοντας ως υπουργικά φάρμακα. Το Phellodendri Cortex είναι πικρό και κρύο, εισέρχεται στο κανάλι των νεφρών, καθαρίζει τη θερμότητα και στεγνώνει την υγρασία και μειώνει την πυρκαγιά του κατώτερου jiao, βοηθώντας τα κυρίαρχα βότανα. Το ηλεκτρικό επιλύει τη στάση, ξεμπλοκάρει τα παράπλευρα, καθαρίζει τη θερμότητα και προάγει τη διούρηση. Το Epimedii Herba και το Cnidii Fructus θερμαίνουν και τονώνουν το νεφρικό yang, διώχνουν τον άνεμο και την υγρασία και εμποδίζουν την υπερβολική κρύα πικρία να βλάψει το υγιές qi, χρησιμεύοντας ως βοηθητικά φάρμακα. Το Achyranthis Bidentatae Radix όχι μόνο τονώνει το αίμα, προάγει τη διούρηση και ανακουφίζει από τον στραγγαλισμό, αλλά επίσης καθοδηγεί τη φόρμουλα προς τα κάτω, ενεργώντας τόσο ως βοηθητικό όσο και ως απεσταλμένος, επιτυγχάνοντας έτσι σημαντική κλινική αποτελεσματικότητα. Αυτή η μελέτη διερεύνησε τον μηχανισμό του BQAP στην ανακούφιση του CNP μέσω διαμόρφωσης της οδού TLR4/NF-κB/NLRP3, παρέχοντας θεωρητική υποστήριξη για την κλινική εφαρμογή του. Μειώνοντας τις φλεγμονώδεις αποκρίσεις στον προστατικό ιστό και μειώνοντας τις προφλεγμονώδεις κυτοκίνες, το BQAP επιτυγχάνει θεραπευτικά αποτελέσματα στην CP.

Αν και αυτή η μελέτη αποκαλύπτει τον δυνητικό μηχανισμό του BQAP στη θεραπεία του CNP, λόγω της πολυπλοκότητας των τύπων TCM πολλαπλών συστατικών και των δράσεων πολλαπλών στόχων, πολλαπλών οδών, ιδιαίτερα στη ρύθμιση της ανοσολογικής ανοχής και των μηχανισμών που σχετίζονται με το αντιοξειδωτικό στρες, απαιτούνται περαιτέρω πειραματικές μελέτες και κλινική επικύρωση για βαθύτερη κατανόηση.

Συνοπτικά, το BQAP ανακουφίζει τις φλεγμονώδεις αποκρίσεις σε αρουραίους CNP διαμορφώνοντας το μονοπάτι σηματοδότησης TLR4/NF-κB/NLRP3 και μπορεί να ασκήσει θεραπευτικά αποτελέσματα αναστέλλοντας την πυρόπτωση. Αυτό το εύρημα παρέχει νέα θεωρητικά στοιχεία για την κλινική του εφαρμογή, αν και οι μηχανισμοί του απαιτούν περαιτέρω διερεύνηση σε βάθος.

 

Αναφορές

 

[1] Liang Chaochao, Xia Shujie, Deng Chunhua, et al. Συναίνεση Κινέζων Εμπειρογνωμόνων για το Σύνδρομο Προστατίτιδας-Πυέλου (έκδοση 2024). Journal of Modern Urology. 2024;29(09):756-761.

[2] Cyril AC, Jan RK, Radhakrishnan R. Πόνος στη χρόνια προστατίτιδα και ο ρόλος των διαύλων ιόντων: μια σύντομη επισκόπηση. British Journal of Pain. 2022;16:50-59.

[3] Παράρτημα Ανδρολογίας της Κινεζικής Ένωσης Ολοκληρωμένης Ιατρικής. Ολοκληρωμένες Οδηγίες Παραδοσιακής Κινεζικής και Δυτικής Ιατρικής για τη Διάγνωση και τη Θεραπεία της Χρόνιας Προστατίτιδας. Chinese Journal of Andrology. 2023;37(1):3-17.

[4] Huang Jianhua, Liu Rui, Zhou Yifei, et al. Μηχανιστική μελέτη αφεψήματος Mai Men Dong στην πνευμονική ίνωση αρουραίου μέσω ρύθμισης της οδού TLR4-NF-κB. Liaoning Journal of Traditional Chinese Medicine. 2024;51(11):188-193, 227-228.

[5] Bae WJ, Shin D, Piao JJ, et al. Η εξωσωματική θεραπεία κρουστικών κυμάτων ανακουφίζει τον φλεγμονώδη πόνο ρυθμίζοντας προς τα κάτω το φλεγμονώδες NLRP3 σε πειραματική χρόνια προστατίτιδα και σύνδρομο χρόνιου πυελικού πόνου. World Journal of Men's Health. 2024;42(1):157-167.

[6] Zhai Zhaoyong, Sun Zixue, Zhang Yizheng, et al. Κλινική αποτελεσματικότητα του χαπιού Bixie Qianlie'an σε συνδυασμό με συμβατική θεραπεία σε ασθενείς με προστατίτιδα τύπου ΙΙΙΒ του προτύπου "νεφρικής ανεπάρκειας με απόφραξη υγρασίας-θερμότητας των παράπλευρων παραγόντων". Περιοδικό Medical Forum. 2024;45(14):1544-1548, 1553.

[7] Επαγγελματική Επιτροπή Πειραματικής Φαρμακολογίας της Παραδοσιακής Κινεζικής Ιατρικής, China Association of Chinese Medicine. Σχέδιο προδιαγραφών για την παρασκευή ζωικών μοντέλων χρόνιας προστατίτιδας. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae. 2018;24(19):10-14.

[8] Zhu Peixuan, Fan Qiongyin, Zhang Jingxuan, et al. Παράγοντες που επηρεάζουν το μοντέλο χρόνιας προστατίτιδας αρουραίου που προκαλείται από κ-καρραγενάνη. World Journal of Traditional Chinese Medicine. 2021;16(14):2094-2100.

[9] Ou Yangfan, Liang Yuru, Xu Pan, et al. Κλινική παρατήρηση των καψουλών Huang'e στη θεραπεία της προστατίτιδας τύπου IIIA και η επίδρασή της στις φλεγμονώδεις κυτοκίνες στο υγρό μασάζ του προστάτη. Chinese Journal of Andrology. 2024;30(12):1135-1140.