Αντικαρκινικές και αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις των ολιγοσακχαριτών από το εκχύλισμα Cistanche Deserticola σε τραυματισμό του νωτιαίου μυελού

Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Hong Zhang, et al

Αφηρημένη

Στην παρούσα μελέτη, οι φαρμακολογικές επιδράσεις των ολιγοσακχαριτών απόCistanchedeserticolaεκχύλισμαεπίφλεγμονή, το οξειδωτικό στρες και η απόπτωση σε αρσενικούς αλμπίνους αρουραίους με κάκωση νωτιαίου μυελού διερευνήθηκαν. Η υπεροξείδωση των λιπιδίων, η GSH, η καταλάση, η δισμουτάση υπεροξειδίου, η εστεράση της ακετυλοχολίνης, η GPx, το ROS και το νιτρικό οξύ άλλαξαν σημαντικά στους αρουραίους με τραυματισμό του νωτιαίου μυελού. Τα επίπεδα έκφρασης mRNA των IL-6, TNF-, κυκλοοξυγενάσης-2, iNOS, p53, κασπάσης-3, Bax και pro-NGF μειώθηκαν κατά N20 τοις εκατό μετά από συμπλήρωση εκχυλίσματος. Τα επίπεδα έκφρασης πρωτεΐνης της κασπάσης-3 και του pro-NGF μειώθηκαν επίσης κατά N20 τοις εκατό. Ο αριθμός των θετικών κυττάρων p53 ήταν 1, 79, 54, 33 και 19 στις ομάδες GI-GV, αντίστοιχα, και ο αντίστοιχος αριθμός θετικών κυττάρων σε κασπάση-3 ήταν 2, 87, 51,23 και 14. Με βάση τα παρόντα αποτελέσματα, η χρήση ολιγοσακχαριτών απόCistanchedeserticolaτο εκχύλισμα ήταν αποτελεσματικό κατάφλεγμονή, οξειδωτικό στρες και απόπτωση σε αρσενικούς αλμπίνους αρουραίους με κάκωση νωτιαίου μυελού.

Λέξεις-κλειδιά:Cistanche deserticola, Φλεγμονή Οξειδωτικό στρες, Απόπτωση Αρουραίοι

1. Εισαγωγή

Ο τραυματισμός του νωτιαίου μυελού περιλαμβάνει βλάβη του νωτιαίου μυελού που οδηγεί σε λειτουργική αλλοίωση με απώλεια της αίσθησης, των μυών και της αυτόνομης λειτουργίας [1]. Επιπλέον, η απόπτωση μπορεί να προκληθεί σε ολιγοδενδροκύτταρα και νευρώνες, οδηγώντας σε δυσλειτουργία του νωτιαίου μυελού λόγω απομυελίνωσης και αξονικής εκφύλισης [2,3]. Ο τραυματισμός του νωτιαίου μυελού προκαλεί ουσιαστικό οξειδωτικό στρες καιφλεγμονήμετά την έναρξη της απόπτωσης σε ολιγοδενδροκύτταρα και νευρώνες [2,4]. Τα αντιδραστικά είδη οξυγόνου (ROS) και οι προφλεγμονώδεις κυτοκίνες απελευθερώνονται κατά τη διάρκεια του νευροεκφυλισμού και η μικρογλοία είναι ζωτικής σημασίας κατά τη διάρκεια των νευροεκφυλιστικών και φλεγμονωδών διεργασιών [5-7]. Οι ιντερλευκίνες (IL) είναι σημαντικές κυτοκίνες που εμπλέκονται σε διάφορες ανοσολογικές διεργασίες [8]. Οι Yune et al., [9] ανέφεραν ότι ο αυξητικός παράγοντας υπέρ νεύρων (pro-NGF) που απελευθερώνεται από μικρογλοία οδηγεί σε αποπτωτικό κυτταρικό θάνατο. Επομένως, νέοι και ισχυροί θεραπευτικοί παράγοντες κατά του οξειδωτικού στρες καιφλεγμονήχρειάζονται.

Το φυτόCistanchedeserticolaείναι κοινώς γνωστό ως σκουπόκαμπο της ερήμου και είναι ολοπαρασιτικό μέλος της οικογένειας Orobanchaceae [10].Cistanche deserticolaστερείται χλωροφύλλης και λαμβάνει νερό και θρεπτικά συστατικά με παρασιτικό τρόπο από το λευκό σαξάυλο (Haloxylon persicum) και το μαύρο σαξάυλο (Haloxylon ammodendron). οCistanchedeserticolaΤο πολυετές φυτό, γνωστό ως Rou Cong Rong, μπορεί να φτάσει τα 160 cm σε μέγεθος και έχει κίτρινα άνθη. Είναι ευρέως άφθονο στην Κίνα και τη Μογγολία [11] και, η παραδοσιακή κινεζική ιατρική, είναι μια εξαιρετική πηγή για τη θεραπεία πολλών ασθενειών. Χρησιμεύει επίσης ως πρωταρχική θεραπεία με βότανα για να τονώσει το Yang και να τονώσει τα νεφρά [11]. Οι Koo et al. [12] ανέφεραν ότι οι γλυκοσίδες τουCistanchedeserticolaδρουν ως αποτελεσματικές ουσίες στο κεντρικό νευρικό σύστημα (ΚΝΣ). Αρκετοί ερευνητές έχουν αναφέρει τις αντι-αποπτωτικές, αντιφλεγμονώδεις και αντιοξειδωτικές ιδιότητες τουCistanchedeserticola[13,14]. Τα αντιοξειδωτικά και τα αντιφλεγμονώδη μόρια που προέρχονται από τρόφιμα μπορούν να χρησιμεύσουν ως χημειοπροληπτικές ουσίες κατά των χρόνιων ασθενειών [15]. Δεδομένων των προαναφερθέντων θεραπευτικών πλεονεκτημάτων, η θεραπευτική αποτελεσματικότητα των ολιγοσακχαριτών απόCistanchedeserticolaεκχύλισμα κατάφλεγμονή, το οξειδωτικό στρες και η απόπτωση διερευνήθηκαν στην παρούσα μελέτη χρησιμοποιώντας ένα μοντέλο τραυματισμού νωτιαίου μυελού αρσενικού αλμπίνο αρουραίου.

2. Υλικά και μέθοδοι

2.1. Υλικά

Εκκινητές παράγοντα νέκρωσης όγκου-άλφα (TNF-), IL-6, κυκλοοξυγενάση, επαγώγιμη συνθάση νιτρικού οξειδίου (iNOS), p53, Bax, κασπάση-3, BCL-2, pro-NGF , και γλυκεραλδεΰδη 3-φωσφορική αφυδρογονάση (GAPDH) αγοράστηκαν από την Thermo Fisher Scientific (Πεκίνο, Κίνα). Πρωτογενή αντισώματα για κασπάση-3 (AV00021), p53 (P5813-100UL), μονοκλωνική IgG-υπεροξειδάση κατσίκας/προβάτων (A9452) και ισοθειοκυανική φλουορεσκεΐνη IgG ποντικού (FITC; F{15} }ML) αγοράστηκαν από τη Sigma-Aldrich China, Inc. (Σαγκάη, PR Κίνα).

2.2. Αρουραίοι

Αρσενικοί αλμπίνο αρουραίοι Wistar (180-220 g) αγοράστηκαν από το σπίτι των ζώων του Νοσοκομείου Δυτικής Κίνας, Πανεπιστήμιο Sichuan, Κίνα. Στους αρουραίους δόθηκε τροφή και νερό κατά βούληση. Ένας 12-h φως: 12-h κύκλος σκότους διατηρήθηκε σε κλωβούς αρουραίων από πολυπροπυλένιο υπό σχετική υγρασία. Όλα τα πειράματα σε αρουραίους εγκρίθηκαν από την επιτροπή δεοντολογίας του Νοσοκομείου WestChina, Πανεπιστήμιο Sichuan, Κίνα. Τηρήθηκαν όλες οι ισχύουσες διεθνείς, εθνικές και θεσμικές οδηγίες για τη φροντίδα και τη χρήση των ζώων.

2.3. Πρόκληση τραυματισμού του νωτιαίου μυελού

Ο τραυματισμός του νωτιαίου μυελού προκλήθηκε από διαμήκη χειρουργική τομή μετά από έκθεση σε αλοθάνη (1,5 τοις εκατό). Η όλη χειρουργική επέμβαση διεξήχθη σε θερμοκρασία δωματίου. Η τομή έγινε από τους κατώτερους έως τους μεσαίους θωρακικούς σπονδύλους στο πίσω μέρος του ζώου. Βάρος A20–25 g τοποθετήθηκε στην εκτεθειμένη επιφάνεια Th12 για 30 λεπτά για να προκληθεί τραυματισμός. Το δέρμα και οι μύες ράφτηκαν μετά την αφαίρεση του βάρους από την επιφάνεια Th12 και προκλήθηκε προσωρινή αναπαραγώγιμη παράλυση στα κάτω άκρα [16,17]. Οι αρουραίοι διατηρήθηκαν για 24 ώρες κατάλληλες συνθήκες και κτηνιατρικός έλεγχος.

2.4. Παρασκευή εκχυλίσματος Cistanche deserticola και ποσοτική ανάλυση

Το φυτόCistanchedeserticola(1 kg) συλλέχθηκε από την Gansuprovince, Κίνα, ξηράνθηκε στον αέρα και κονιοποιήθηκε χρησιμοποιώντας ηλεκτρικό μύλο. Η σκόνη εκχυλίστηκε σε αιθανόλη (70 τοις εκατό) για 60 λεπτά, διηθήθηκε και συμπυκνώθηκε σε μειωμένη πίεση. Το συμπύκνωμα ξηράνθηκε σε κενό σε σκόνη [18]. Ποσοτική ανάλυση τωνCistanchedeserticolaΤο εκχύλισμα εκτελέστηκε χρησιμοποιώντας υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC), όπως περιγράφηκε προηγουμένως [11].

2.5. Θεραπευτική αγωγή

Οι πειραματικές ομάδες ήταν οι εξής: ομάδα Ι (GI), φυσιολογικοί αρουραίοι ελέγχου. ομάδα II (GII), αρουραίοι τραυματισμού του νωτιαίου μυελού (ψευδείς έλεγχοι). και ομάδες III–V (GIII–V), αρουραίοι τραυματισμού του νωτιαίου μυελού που λαμβάνουν 100, 200 ή 400 mg/kg ολιγοσακχαριτών απόCistanchedeserticolaεκχύλισμα, αντίστοιχα. Κάθε ομάδα περιείχε έξι αρουραίους καιCistanchedeserticolaεκχύλισμα χορηγήθηκε από το στόμα σε αρουραίους για 6 διαδοχικές εβδομάδες.

2.6. Ληψη ΑΙΜΑΤΟΣ

Στο τέλος της θεραπείας, συλλέχθηκε αίμα (5–6 ml) με σύριγγα 5 ml με βελόνα 23G1 μέσω της καρδιακής παρακέντησης και οι αρουραίοι αναισθητοποιήθηκαν με υδροχλωρική κεταμίνη (100 mg/kg σωματικού βάρους) και ξυλαζίνη (10 mg/kg σώματος βάρος) και θυσιάστηκε με αποκεφαλισμό.

2.7. Παρασκευή ομογενοποιήματος ιστού

Στο τέλος της θεραπείας, οι αρουραίοι αναισθητοποιήθηκαν με υδροχλωρική κεταμίνη (100 mg/kg σωματικού βάρους) και ξυλαζίνη (10 mg/kg σωματικού βάρους) και θυσιάστηκαν με αποκεφαλισμό. Από την χειρουργική περιοχή συλλέχθηκαν δείγματα νωτιαίου μυελού (12 mm). Οι ιστοί του νωτιαίου μυελού κόπηκαν σε μικρά κομμάτια και ομογενοποιήθηκαν σε ρυθμιστικό διάλυμα Tris-HCl (ρΗ 7,4, 50 mM) στις 6000 rpm για 5 λεπτά. Το ομογενοποίημα φυγοκεντρήθηκε και το υπερκείμενο συλλέχθηκε για περαιτέρω πειράματα. Όλα τα παρασκευάσματα ομογενοποίησης και υπερκείμενου πραγματοποιήθηκαν στους 4 βαθμούς.

2.8. Βιοδείκτες οξειδωτικού στρες

Η υπεροξείδωση των λιπιδίων προσδιορίστηκε σύμφωνα με την περιεκτικότητα σε μηλονοδιαλδεΰδη (MDA) με μέτρηση του αντιδρώντος είδους θειοβαρβιτουρικού οξέος (TBARS). Το τελικό προϊόν μετρήθηκε στα 534 nm [19]. Τα ROS προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας τη δοκιμασία διχλωροφλουορεσκεΐνης [20]. Η μειωμένη περιεκτικότητα σε γλουταθειόνη (GSH) προσδιορίστηκε με μέτρηση του τελικού προϊόντος στα 405 nm [21]. Οι ενζυμικές δραστηριότητες της δισμουτάσης υπεροξειδίου (SOD), της υπεροξειδάσης της γλουταθειόνης (Gpx), της καταλάσης και της ακετυλοχολινεστεράσης (AChE) μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας φασματοφωτομετρία [19].

2.9. Φλεγμονώδεις δείκτες

Τα επίπεδα TNF- και IL{1}} ορού προσδιορίστηκαν για όλες τις ομάδες [22]. Η περιεκτικότητα σε νιτρικά άλατα μετρήθηκε ως δείκτης του επιπέδου του μονοξειδίου του αζώτου (NO) και εκφράστηκε σε mM [23,24]. Τα επίπεδα έκφρασης mRNA των TNF-, IL-6, iNOS, κυκλοοξυγενάσης-2 και GAPDH προσδιορίστηκαν σύμφωνα με τους Moon et al. [25]. Οι εκκινητές που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη φαίνονται στον Πίνακα 1.

2.10. Βιοδείκτες απόπτωσης

Τα επίπεδα έκφρασης mRNA της κασπάσης-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF και GAPDH προσδιορίστηκαν σύμφωνα με τους Moon et al. [25]. Τα επίπεδα έκφρασης πρωτεΐνης της κασπάσης-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF και GAPDH προσδιορίστηκαν σύμφωνα με τους Lobos et al. [26]. Η χρώση TUNEL της κασπάσης{10}} και της ρ53 πραγματοποιήθηκε σε νευρωνικές τομές [25]. Οι εκκινητές που χρησιμοποιούνται για RT-PCR δίνονται στον Πίνακα 1.

2.11. Στατιστικές αναλύσεις

Οι τιμές παρουσιάζονται ως μέσοι όροι με τυπικό σφάλμα του μέσου όρου (SEM). Ο έλεγχος καιCistanchedeserticolaΟι ομάδες που υποβλήθηκαν σε αγωγή με εκχύλισμα συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας το μη ζευγαρωμένο Student's t-test. Για τις πολλαπλές συγκρίσεις χρησιμοποιήθηκε μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης (ANOVA). Οι τιμές P ˂0.05 θεωρήθηκαν ότι υποδεικνύουν στατιστική σημασία.

3. Αποτελέσματα

Στην παρούσα μελέτη, η θεραπευτική αποτελεσματικότητα των ολιγοσακχαριτών απόCistanche deserticolaεκχύλισμα κατάφλεγμονή, οξειδωτικόστρεςκαι η απόπτωση σε αρσενικούς αλμπίνους αρουραίους με κάκωση νωτιαίου μυελού διερευνήθηκε. Παρατηρήθηκε η παρουσία ολιγοσακχαριτών (78,68 τοις εκατό), ακτεοσίδης (9,29 τοις εκατό), εχινακοσίδης (6,34 τοις εκατό) και 8-επιλογανικού οξέος (5,75 τοις εκατό)Cistanche deserticolaαπόσπασμα (Εικ. 1). Η περιεκτικότητα σε MDA, που μετρήθηκε ως το τελικό προϊόν της υπεροξείδωσης των λιπιδίων, ήταν 22,58 nmol/g σε κανονικούς αρουραίους ελέγχου (GI) και αυξήθηκε δραστικά κατά 179,5 τοις εκατό στους ψευδείς αρουραίους ελέγχου (GII). Θεραπεία αρουραίων με ολιγοσακχαρίτες απόCistanchedeserticolaΤο εκχύλισμα μείωσε σημαντικά το περιεχόμενο MDA κατά 50,1 τοις εκατό στην ομάδα GV (Πίνακας 2, P b 0,05). Η περιεκτικότητα σε GSH ήταν 85,31 mg/g στην ομάδα GI και μειώθηκε δραστικά κατά 61,1 τοις εκατό στην ομάδα GII. Θεραπεία μεCistanchedeserticolaΤο εκχύλισμα σε αρουραίους με τραυματισμό του νωτιαίου μυελού αύξησε σημαντικά την περιεκτικότητα σε GSH κατά 121,6 τοις εκατό στην ομάδα GV (Πίνακας 2, P b0.05).

Η δραστηριότητα SOD ήταν 6,2 U/mg στην ομάδα GI και μειώθηκε σημαντικά κατά 51,1 τοις εκατό στην ομάδα GII. Αρουραίοι τραυματισμού νωτιαίου μυελού συμπληρωμένοι με ολιγοσακχαρίτες απόCistanchedeserticolaΤο εκχύλισμα έδειξε σημαντικά αυξημένη δραστηριότητα SOD, κατά 91,4 τοις εκατό στην ομάδα GV (Πίνακας 2, P b0.05). Η δραστικότητα καταλάσης ήταν 12,8 U/g στην ομάδα GI και μειώθηκε σημαντικά κατά 59,3 τοις εκατό στην ομάδα GII. Αρουραίοι τραυματισμού νωτιαίου μυελού συμπληρωμένοι με ολιγοσακχαρίτες απόCistanche deserticolaΤα εκχυλίσματα παρουσίασαν σημαντικά αυξημένη δραστηριότητα καταλάσης, κατά 106,1 τοις εκατό στην ομάδα GV (Πίνακας 2, P b 0.05). Η δραστηριότητα GPx ήταν 0,87 (mg/πρωτεΐνη) στην ομάδα GI και μειώθηκε κατά 55,2 τοις εκατό στην ομάδα GII. Η δραστηριότητα GPx αυξήθηκε κατά 100 τοις εκατό στην ομάδα GV (Πίνακας 2, P b 0,05). Η δραστηριότητα της AChE ήταν 9,3 (μmol/min/mg πρωτεΐνης) στην ομάδα GI και μειώθηκε κατά 54,8 τοις εκατό στην ομάδα GII. Αρουραίοι τραυματισμού νωτιαίου μυελού συμπληρωμένοι με ολιγοσακχαρίτες απόCistanchedeserticolaΤο εκχύλισμα έδειξε σημαντικά αυξημένη δραστηριότητα AChE, κατά 26,2, 57,1 και 107,1 τοις εκατό στις ομάδες GIII, GIV και GV, αντίστοιχα (Πίνακας 2, Pb 0,05).

Οι ROS μετρήθηκαν και εκφράστηκαν σε σχετικές μονάδες φθορισμού (RFU): το ενδοκυτταρικό ROS ήταν 44,23 στην ομάδα GI, το οποίο αυξήθηκε κατά 349 τοις εκατό στην ομάδα GII. Συμπλήρωμα με ολιγοσακχαρίτες απόCistanchedeserticolaτα εκχυλίσματα μείωσαν σημαντικά τα ενδοκυτταρικά επίπεδα ROS κατά 61,9 τοις εκατό στην ομάδα GV (Εικ. 2A, P b 0.05). Η περιεκτικότητα σε νιτρικά άλατα μετρήθηκε ως δείκτης του επιπέδου ΝΟ και εκφράστηκε σε mM. Το επίπεδο ΝΟ ήταν 3,7 (mM) στην ομάδα GI, το οποίο αυξήθηκε κατά 349 τοις εκατό στην ομάδα GII. Συμπλήρωμα με ολιγοσακχαρίτες απόCistanchedeserticolaΤο εκχύλισμα μείωσε σημαντικά τα επίπεδα ΝΟ κατά 63,6 τοις εκατό στην ομάδα GV (Εικ. 2Β, P b 0.05).

Τα επίπεδα IL-6 και TNF- μετρήθηκαν και εκφράστηκαν ως pg/mg πρωτεΐνης. Τα επίπεδα IL-6 και TNF- αυξήθηκαν σημαντικά, κατά 912,7 και 695,4 τοις εκατό, αντίστοιχα, στην ομάδα GII. Ωστόσο, η συμπλήρωση με ολιγοσακχαρίτες απόCistanchedeserticolaΤο εκχύλισμα μείωσε σημαντικά τα επίπεδα IL{{0}} και TNF- κατά N60 τοις εκατό στην ομάδα GI σε σύγκριση με την ομάδα GII (Εικ. 3, P b 0).{16 }}5). Η έκφραση mRNA φλεγμονωδών δεικτών, όπως IL-6, TNF-, κυκλοοξυγενάση-2 και iNOS, ποσοτικοποιήθηκε και εκφράστηκε ως πολλαπλές αλλαγές. Τα επίπεδα έκφρασης mRNA της IL 6, του TNF-, της κυκλοοξυγενάσης-2 και του iNOS αυξήθηκαν κατά 0.72-, 0.81-,0.54- , και 0.67-πάσο στην ομάδα GII, αντίστοιχα. Συμπλήρωμα μεCistanchedeserticolaτο εκχύλισμα μείωσε τα επίπεδα έκφρασης mRNA των IL{{0}}, TNF-, κυκλοοξυγενάσης-2 και iNOS κατά N20 τοις εκατό στην ομάδα GV σε σύγκριση με την ομάδα GII (Εικ. 4, P b 0,05).

Προσδιορίστηκε επίσης η έκφραση mRNA των αποπτωτικών δεικτών κασπάση{{0}}, p53, bcl-2, bax και pro-NGF. Τα επίπεδα έκφρασης mRNA του p53, της κασπάσης-3, του bax και του pro-NGF αυξήθηκαν κατά 0.97-,1.{{10}}, 1.{ {12}}, και 0.76-πλάση στην ομάδα GII, αντίστοιχα, και το επίπεδο έκφρασης mRNA thebcl-2 μειώθηκε κατά 0.67-πλάση. . Η επεξεργασία με εκχύλισμα μείωσε σημαντικά τα επίπεδα έκφρασης mRNA της p53, κασπάσης-3, bax και pro-NGF κατά N30 τοις εκατό, ενώ το επίπεδο έκφρασης mRNA bcl-2 αυξήθηκε κατά 178 τοις εκατό (Εικ. 5, P b 0,05). Με βάση την western blotanalysis, τα επίπεδα της κασπάσης-3 και της πρωτεΐνης pro-NGF αυξήθηκαν σημαντικά, κατά 0,{30}}πλάσιο και 0,68-πλάσιο, στην ομάδα GII, αντίστοιχα. Συμπλήρωμα με ολιγοσακχαρίτες απόCistanchedeserticolaεκχυλίστε σημαντικά μειωμένα επίπεδα έκφρασης κασπάσης{{0}} και πρωτεΐνης pro-NGF κατά N20 τοις εκατό στην ομάδα GI σε σύγκριση με την ομάδα GII (Εικ. 6, P b 0,05). Η δοκιμασία χρώσης TUNEL χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση του αριθμού των θετικών κυττάρων p53- και κασπάσης-3-. Ο αριθμός των p53-θετικών κυττάρων ήταν 1, 79, 54, 33 και 19 στις ομάδες GI–GV, αντίστοιχα. Τότε ο αριθμός των{14}}θετικών κυττάρων για κασπάση ήταν 2, 87, 51, 23 και 14 στις ομάδες GI-GV, αντίστοιχα (Εικ. 7-8, P b 0,05).

4. Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη, η θεραπευτική αποτελεσματικότητα των ολιγοσακχαριτών απόCistanchedeserticolaεκχύλισμα κατάφλεγμονή, το οξειδωτικό στρες και η απόπτωση σε αρσενικούς αλμπίνους αρουραίους κάκωσης νωτιαίου μυελού διερευνήθηκαν. Liuet al. [27] ανέφερε ότι η συμπλήρωση με ένα αντιοξειδωτικό θα μπορούσε να είναι αποτελεσματική έναντι πολλών νευροεκφυλιστικών ασθενειών. Η παρουσία εχινακοσίδης (φαινυλαιθανοειδούς γλυκοσίδης) έχει αναφερθεί στοCistanchedeserticolaεκχύλισμα [10], και αρκετοί ερευνητές έχουν αποδείξει τις αντιφλεγμονώδεις και αντιλοχιστικές ιδιότητες τουCistanche deserticola[28,29]. Στην παρούσα μελέτη, ολιγοσακχαρίτες, ακτεοσίδης, εχινακοσίδης και 8-επιλογανικό οξύ παρατηρήθηκαν ότι είναι τα κύρια συστατικά του εκχυλίσματος Cistanche deserticola.

Βελτιωμένα με TNF ελαττώματα συμπεριφοράς και απόπτωση έχουν παρατηρηθεί σε νευρωνικά κύτταρα SH-SY5Y μετά από θεραπεία με εχινακοσίδη [30,31]. Nan et al. [32] ανέφεραν μείωση των επιπέδων TNF- , T-tau και IL-1 σε ασθενείς με νόσο Alzheimer και βελτιωμένη ανάκτηση της ατροφίας του ιππόκαμπου και των γνωστικών ικανοτήτων μετά τη λήψη συμπληρωμάτων με Cistanche herba. Τα θεραπευτικά αποτελέσματα τωνCistanchedeserticolaαπόσπασμα επάνωφλεγμονή, οξειδωτικό στρες και απόπτωση δεν έχουν αναφερθεί προηγουμένως. Αυτή είναι η πρώτη αναφορά για τις φαρμακολογικές επιδράσεις τουCistanchedeserticolaεκχύλισμα σε μοντέλο τραύματος νωτιαίου μυελού.

Αρκετοί ερευνητές ανέφεραν ότι η θεραπεία με ακτεοσίδη μείωσε σημαντικά το οξειδωτικό στρες και το εντερικόφλεγμονήποντίκια που προκαλούνται από φλεγμονώδη νόσο του εντέρου [33]. Nam et al. [34] ανέφεραν ότι η αντιφλεγμονώδης δράση του ισοακτεοσίδη από το Abeliophyllum distichum σε ανθρώπινα ιστιοκύτταρα. Αντιφλεγμονώδεις φαινυλοπροπανοειδείς γλυκοσίδες από το Clerodendron trichotomum έχουν αναφερθεί στο μοντέλο ποντικών [35]. Οι Zhou et al. [36] ανέφεραν ότι η αντιφλεγμονώδης δράση των ολιγοσακχαριτών σε κύτταρα μακροφάγου RAW 264.7. Έχουν αναφερθεί μονομερή ολιγοσακχαριτών για την αναστολή τουφλεγμονήσε μακροφάγα που διεγείρονται από LPS μέσω της καταστολής των μονοπατιών MAPK και NF-κB [37].

Fahnestock et al. [38] ανέφερε ότι το pro-NGF είναι η κυρίαρχη μορφή στον εγκέφαλο και είναι αυξημένο σε ασθενείς με νόσο Alzheimer. Πολλές διασπασμένες πρωτεΐνες, εκτός από το pro-NGF, ενεργοποιούν τις αντι-αποπτοκυτταρικές αποκρίσεις [39]. Η αναλογία μεταξύ ώριμου NGF- και pro-NGF παίζει κρίσιμο ρόλο στην εξισορρόπηση της κυτταρικής επιβίωσης και του ποσοστού θανάτου [40]. Οι Ke Zhang et al. [18] ανέφεραν μειωμένο σχηματισμό όγκων και μεγαλύτερη διάρκεια ζωής σε ποντίκια με συμπληρωματική χορήγησηCistanchedeserticolaεκχύλισμα. Νευροπροστατευτικές επιδράσεις τουCistanchedeserticolaεκχύλισμα για τραυματισμό που προκαλείται από νευροτοξίνες έχουν αναφερθεί στο παρελθόν [41]. Xuan και Liu et al. [42] ανέφεραν βελτιώσεις στη λειτουργία του ανοσοποιητικού, τη μνήμη, τη μάθηση και την αντιοξειδίωση σε ποντίκια που έλαβαν συμπλήρωμαCistanchedeserticolaεκχύλισμα. Η συμπλήρωση με εκχύλισμα Cistanche deserticola μείωσε το MDA και αύξησε τα επίπεδα GPxand SOD σε ένα μοντέλο αρουραίου ισχαιμίας-επαναιμάτωσης. Επιπλέον, παρατηρήθηκε μείωση της κασπάσης-3, με ταυτόχρονη αύξηση της αναλογίας bax/BCL-2 [43], η οποία είναι σύμφωνη με τα ευρήματά μας που δείχνουν μειωμένα επίπεδα οξειδωτικών, φλεγμονωδών και αποπτωτικών δεικτών στη σπονδυλική στήλη ποντίκια τραυματισμού λώρου συμπληρωμένα μεCistanchedeserticolaεκχύλισμα.

5. Συμπέρασμα

Συνοπτικά, η ποσοτική ανάλυση αποκάλυψε την παρουσία ολιγοσακχαριτών, ακτεοσιδίου, εχινακοσίδης και 8-επιλογανικού οξέος σεCistanchedeserticolaεκχύλισμα.Φλεγμονή, το οξειδωτικό στρες και οι δείκτες απόπτωσης μειώθηκαν σημαντικά σε αρουραίους τραυματισμού του νωτιαίου μυελού που είχαν συμπληρωθεί με ολιγοσακχαρίτες από εκχύλισμα Cistanche deserticola.

Περιορισμοί της μελέτης

Αυτή η μελέτη, αν και αποκαλύπτει τις αντικαρκινικές και αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις,Cistanchedeserticolaτο εκχύλισμα έχει κάποιους περιορισμούς. Σημειώσαμε την οξεία επίδραση τουCistanchedeserticolaεκχύλισμα σε όγκο καιφλεγμονήσε κάκωση νωτιαίου μυελού.

Χρηματοδότηση

Αυτή η μελέτη υποστηρίζεται από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (Grant No. 31370984, 81501879, 31870961, GZ1219), Department of Science & Technology of Sichuan Province (No. 2015HH004)Scientific Research Project by Health and Family Planning Commissionof Sichuan 100097).

Ανταγωνιστικά συμφέροντα

Όλοι οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν έχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα.

Συνεισφορές συγγραφέων

Οι Hong Zhang, Zhou Xiang, Xin Duan και Juan li Jiang διεξήγαγαν πειράματα και συνέταξαν το χειρόγραφο. Οι Yi Ming Xing, Cheng Zhu και Qiang Song συνέλεξαν βιβλιογραφικές ανασκοπήσεις, πραγματοποίησαν ανάλυση ακατέργαστων δεδομένων και ερμηνεία δεδομένων. Ο Qin Rong Yu αναθεώρησε το πνευματικό περιεχόμενο του χειρογράφου.

Από: ' Αντικαρκινικό καιαντι-φλεγμονώδηςεπιδράσεις των ολιγοσακχαριτών απόCistanchedeserticolaεκχύλισμα για κάκωση νωτιαίου μυελού» απόHong Zhang, et al

---Οι Η. Zhang et αϊ. / International Journal of Biological Macromolecules 124 (2019) 360–367

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] MO Krucoff, S. Rahimpour, MW Slutzky, VR Edgerton, DA Turner, Ενίσχυση της αποκατάστασης του νευρικού συστήματος μέσω νευροβιολογίας, εκπαίδευσης νευρικής διεπαφής και νευροαποκατάστασης, Εμπρός. Neurosci. 10 (2016) 584.
[2] TY Yune, JY Lee, MH Jiang, DW Kim, SY Choi, TH Oh, Η συστημική χορήγηση της πρωτεΐνης σύντηξης PEP-1-SOD1 βελτιώνει τη λειτουργική αποκατάσταση με την αναστολή του θανάτου νευρωνικών κυττάρων μετά από τραυματισμό του νωτιαίου μυελού, Ελεύθερη ρίζα. Biol. Med. 45 (2008) 1190–1200.

[3] SM Lee, TY Yune, SJ Kim, DW Park, YK Lee, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, η μινοκυκλίνη μειώνει τον κυτταρικό θάνατο και βελτιώνει τη λειτουργική αποκατάσταση μετά από τραυματικό τραυματισμό του νωτιαίου μυελού στον αρουραίο, J. Neurotrauma 20 (2003) 1017–1027.

[4] F. Bao, D. Liu, Το υπεροξυνιτρικό που δημιουργείται στον νωτιαίο μυελό του αρουραίου προκαλεί θάνατο νευρώνων και νευρολογικά ελλείμματα, Neuroscience 115 (2002) 839-849.

[5] L. Qin, Y. Liu, T. Wang, SJ Wei, ML Block, B. Wilson, B. Liu, JS Hong, η οξειδάση NADPH προκαλεί νευροτοξικότητα που προκαλείται από λιποπολυσακχαρίτες και έκφραση προφλεγμονώδους γονιδίου σε ενεργοποιημένη μικρογλοία, J. Biol . Chem. 279 (2004) 1415–1421.
[6] ML Block, JS Hong, Microglia καιφλεγμονή-διαμεσολαβούμενος νευροεκφυλισμός: πολλαπλοί ερεθισμοί με κοινό μηχανισμό, Prog. Neurobiol. 76 (2005) 77–98.
[7] KJ Min, HK Pyo, MS Yang, KA Ji, I. Jou, EH Joe, Οι γαγγλιοσίδες ενεργοποιούν μικρογλοία μέσω πρωτεϊνικής κινάσης C και οξειδάσης NADPH, Glia 48 (2004) 197–206.
[8] J. Hussein, M. El-Banna, TA Razik, ME El-Naggar, Biocompatible zinc oxide nanocrystals stabilized via hydroxyethyl cellulose for mitigation of diabetic complications, Int. J. Biol. Macromol. 107 (Pt A) (2018) 748–754.
[9] TY Yune, JY Lee, GY Jung, SJ Kim, MH Jiang, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, η μινοκυκλίνη ανακουφίζει τον θάνατο των ολιγοδενδροκυττάρων αναστέλλοντας την παραγωγή προ-νευρικού αυξητικού παράγοντα στη μικρογλοία μετά από τραυματισμό του νωτιαίου μυελού, J. Neurosci. 27 (2007) 7751–7761.
[10] GQ Sheng, JR Zhang, XP Pu, J. Ma, CL Li, Protective effect of verbascoside on 1-methyl-4-phenylpyridinium-ion-induced neurotoxicity in PC12 κύτταρα, Eur. J.Pharmacol. 451 (2002) 119–124.
[11] Y. Jiang, PF Tu, Ανάλυση χημικών συστατικών σε είδη Cistanche, J. Chromatogr. 1216 (2009) 1970–1979.
[12] KA Koo, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee, YC Kim, In vitro νευροπροστατευτικές δραστηριότητες φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδίων από Callicarpa dichotoma, Planta Med. 71 (2005) 778–780.
[13] Q. Dong, J. Yao, JN Fang, K. Ding, Δομικός χαρακτηρισμός και ανοσολογική δραστηριότητα δύο πολυσακχαριτών που εκχυλίζονται με κρύο νερό απόCistanchedeserticolaYC Ma, Carbohydr. Res. 342 (2007) 1343–1349.
[14] LW Lin, HT Lin, FH Tsai, WH Wang, CR Wu, Αντιλοχική και αντιφλεγμονώδη δράση που προκαλείται απόCistanchedeserticolaσε τρωκτικά, J. Ethnopharmacol. 83 (2002) 177–182.
[15] J. Hussein, M. El-Bana, E. Refaat, ME El-Naggar, Synthesis of carvacrol-based nanoemulsion for treating neurodegenerative disorders in πειραματικό διαβήτη, J. Funct. Foods 37 (2017) 441–448.
[16] M. Sakanaka, P. Zhu, B. Zhang, TC Wen, F. Cao, YJ Ma, K. Samukawa, N. Mitsuda, J. Tanaka, M. Kuramoto, H. Uno, R. Hata, Ενδοφλέβια Η έγχυση διυδρο-γινσενοζίτη Rb1 αποτρέπει τον συμπιεστικό τραυματισμό του νωτιαίου μυελού και την ισχαιμική εγκεφαλική βλάβη μέσω της ανοδικής ρύθμισης του VEGF και του Bcl-xL, J. Neurotrauma 24 (2007) 1037-1054.
[17] S. Naruo, K. Okajima, Y. Taoka, M. Uchiba, T. Nakamura, H. Okabe, K. Takagi, Prostaglandin E1 μειώνει τον τραυματισμό του νωτιαίου μυελού που προκαλείται από συμπίεση σε αρουραίους κυρίως αναστέλλοντας την ενεργοποίηση ουδετερόφιλων, J. Neurotrauma 20 (2) (2003) 221-228.
[18] K. Zhang, X. Ma, W. He, H. Li, S. Han, Y. Jiang, H. Wu, L. Han, T. Ohno, N. Uotsu, K. Yamaguchi, Z. Ma , P. Tu, Extracts ofCistanchedeserticolaμπορεί να ανταγωνίζεται την ανοσογήρανση και να παρατείνει τη διάρκεια ζωής σε ποντίκια με επιρρεπή στη γήρανση 8 (SAM-P8), Evid. Βασισμένο Συμπλήρωμα. Εναλλακτικό. Med. 2014 (2014), 601383.
[19] T. Kaddour, K. Omar, AT Oussama, H. Nouria, B. Iméne, A. Abdelkader, οξεία νευροτοξικότητα που προκαλείται από αλουμίνιο σε αρουραίους: θεραπεία με υδατικό εκχύλισμα Arthrophytum (Hammada scoparia), J. Acute Dis. 5 (6) (2016) 470–482.
[20] Οι TV Arutyunyan, AF Korystova, LN Kublik, MKh Levitman, VV Shaposhnikova, YN Korystov, Taxifolin και fucoidan καταργούν την αύξηση που προκαλείται από την ακτινοβολία στην παραγωγή αντιδραστικών ειδών οξυγόνου στην αορτή αρουραίου, Bull. Exp. Biol. Med. 160 (2016) 635–638.
[21] M. Erden Inal, A. Akgün, A. Kahraman, The effect of exogenous glutathione on μειωμένο επίπεδο γλουταθειόνης, υπεροξειδάση γλουταθειόνης και αναγωγάση γλουταθειόνης αρουραίων με διαφορετικές ηλικίες και φύλο μετά από ακτινοβόληση με ολόκληρο το σώμα, J. Am . Ηλικιωμένος Αναπλ. 26 (2003) 55–58.
[22] J. Tavakkol Afshari, N. Ghomian, A. Shameli, MT Shakeri, MA Fahmidehkar, E. Mahler, R. Khoshnavaz, M. Emadzadeh, Determination of Interleukin-6 and Tumor Necrosis Factor-alpha συγκεντρώσεις σε Ασθενείς από Ιράνο-Χορασάν με προεκλαμψία, BMC Pregnancy Childbirth 5 (2005) 14.
[23] D. Medhat, J. Hussein, ME El-Naggar, MF Attia, M. Anwar, YA Latif, HF Booles, S. Morsy, AR Farrag, WKB Khalil, Z. El-Khayat, Effect of Au-dextran Το NPS ως αντικαρκινικός παράγοντας κατά της EAC και του συμπαγούς όγκου σε ποντίκια με βιοχημικές αξιολογήσεις και ιστοπαθολογικές έρευνες, Biomed. Pharmacother. 91 (2017) 1006–1016.
[24] TI Shaheen, MI El-Naggar, JS Hussein, M. El-Bana, E. Emara, Z. El-Khayat, MMG Fouda, H. Ebaid, A. Hebeish, Αντιδιαβητική αξιολόγηση; in vivo μελέτη χρυσού και νανοσωματιδίων αργύρου-χρυσού με κέλυφος πυρήνα σε διαβητικούς αρουραίους που προκαλούνται από στρεπτοζοτοκίνη, Biomed. Pharmacother. 83 (2016) 865–875.
[25] YJ Moon, JY Lee, MS Oh, YK Pak, KS Park, TH Oh, TY Yune, Inhibition ofφλεγμονήκαι το οξειδωτικό στρες από το εκχύλισμα ρίζας Angelica dahuricae μειώνει τον αποπτωτικό κυτταρικό θάνατο και βελτιώνει τη λειτουργική αποκατάσταση μετά από τραυματισμό του νωτιαίου μυελού, J. Neurosci. Res. 90 (1) (2012) 243–256.
[26] E. Lobos, C. Gebhardt, A. Kluge, K. Spanel-Borowski, Έκφραση ισομορφών νευρικού αυξητικού παράγοντα (NGF) στη μήτρα αρουραίου κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης: συσσώρευση προδρόμου proNGF, Endocrinology 146 (4) (2005) 1922–1929.
[27] J. Liu, E. Head, AM Gharib, W. Yuan, RT Ingersoll, TM Hagen, CW Cotman, BN Ames, Η απώλεια μνήμης σε ηλικιωμένους αρουραίους σχετίζεται με τη μιτοχονδριακή αποσύνθεση του εγκεφάλου και την οξείδωση RNA/DNA: μερική αναστροφή από τροφοδοσία ακετυλο-L-καρνιτίνης και/ή R-_-λιποϊκού οξέος, Proc. Natl. Ακαδ. Sci. USA 99 (2002) 2356–2361.
[28] ZD Nan, KW Zeng, SP Shi, MB Zhao, Y. Jiang, PF Tu, Φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες με αντιφλεγμονώδεις δράσεις από τους μίσχουςCistanchedeserticolaκαλλιεργείται στην έρημο Tarim, Fitoterapia 89 (2013) 167–174.
[29] XM Wu, XM Gao, KWK Tsim, PF Tu, Μια αραβινογαλακτάνη που απομονώθηκε από τους μίσχουςCistanchedeserticolaεπάγει τον πολλαπλασιασμό καλλιεργημένων λεμφοκυττάρων, Int. J. Biol. Macromol. 37 (2005) 278–282.
[30] M. Deng, JY Zhao, PF Tu, Y. Jiang, ZB Li, YH Wang, Echinacoside σώζει τα νευρωνικά κύτταρα SHSY5Y από την επαγόμενη από TNF-άλφα απόπτωση, Eur. J. Pharmacol. 505 (2004) 11–18.
[31] X. Geng, X. Tian, ​​P. Tu, X. Pu, Neuroprotective effect of echinacoside in the mouse MPTP model of Parkinson's disease, Eur. J. Pharmacol. 564 (2007) 66–74.

[32] L. Nan, W. Jianping, M. Jun, G. Zhiqiang, J. Chao, Y. Lie, F. Xiaojie, Neuroprotective effect of cistanches herba therapy on ασθενείς με μέτρια νόσο Alzheimer, Evid. Βασισμένο Συμπλήρωμα. Εναλλακτικό. Med. (2015) 103985.

[33] M. Hausmann, F. Obermeier, DH Paper, K. Balan, N. Dunger, K. Menzel, K. Rogler, In vivo θεραπεία με το φυτικό φαινυλαιθανοειδές ακτεοσίδιο βελτιώνει το εντερικόφλεγμονήσε κολίτιδα που προκαλείται από θειική δεξτράνη, Clin. Exp. Immunol. 148 (2) (2007) 373–381.

[34] SY Nam, HY Kim, MS Yoou, AH Kim, BJ Park, HJ Jeong, HM Kim, Αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις ισοακτεοσίδης από Abeliophyllum distichum, Immunopharmacol. Ανοσοτοξικόλη. 37 (3) (2015) 258–264.
[35] KH Kim, S. Kim, MY Jung, IH Ham, WK Whang, Αντιφλεγμονώδεις φαινυλοπροπανοειδείς γλυκοσίδες από φύλλα Clerodendron trichotomum, Arch. Pharm. Res. 32 (1) (2009) 7–13.
[36] R. Zhou, X. Shi, Y. Gao, N. Cai, Z. Jiang, X. Xu, Αντιφλεγμονώδης δράση των γουλουρονικών ολιγοσακχαριτών που λαμβάνονται με οξειδωτική αποικοδόμηση από αλγινικό σε κύτταρα RAW 264.7 μακροφάγων ποντικού ενεργοποιημένα με λιποπολυσακχαρίδια, J. Agric. Food Chem. 14; 63 (1) (2015) 160-168.
[37] W. Wang, P. Liu, C. Hao, L. Wu, W. Wan, X. Mao, μονομερή νεοαγκαρο-ολιγοσακχαριτών αναστέλλουνφλεγμονήσε μακροφάγα που διεγείρονται από LPS μέσω καταστολής των μονοπατιών MAPK και NF-κB, Sci. Απ. 7 (7) (2017), 44252.
[38] M. Fahnestock, B. Michalski, B. Xu, MD Coughlin, The precursor pronerve growth factor είναι η κυρίαρχη μορφή νευρικού αυξητικού παράγοντα στον εγκέφαλο και είναι αυξημένος στη νόσο του Alzheimer, Mol. Κύτταρο. Neurosci. 18 (2001) 210–220.
[39] R. Lee, P. Kermani, KK Teng, BL Hempstead, ρύθμιση της κυτταρικής επιβίωσης από τις εκκρινόμενες προνευροτροφίνες, Science 294 (2001) 1945–1948.
[40] MV Chao, M. Bothwell, Neurotrophins: to cleave or not cleave, Neuron 33 (2002) 9–12.
[41] Q. Xiong, K. Hase, Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba, S. Kadota, Ηπατοπροστατευτική δραστηριότητα των φαινυλαιθανοειδών απόCistanchedeserticola, Planta Med. 64 (2) (1998) 120-125.
[42] GD Xuan, CQ Liu, Έρευνα για την επίδραση των φαινυλαιθανοειδών γλυκοσιδίων (PEG) τωνCistanchedeserticolaσχετικά με την αντιγήρανση σε ηλικιωμένους ποντικούς που προκαλούνται από D-γαλακτόζη, J. Chin. Med. Μητήρ. 31 (9) (2008) 1385–1388.
[43] Q. Yu, X. Li, X. Cao, Καρδιοπροστατευτικά αποτελέσματα εκχυλίσματος πλούσιου σε φαινυλαιθανοειδή γλυκοσίδη απόCistanchedeserticolaσε έμφραγμα μυοκαρδίου που προκαλείται από ισχαιμία-επαναιμάτωση σε αρουραίους, Αηη. Vasc. Surg. 34 (2016) 234–242.