Επικοινωνία: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Αντιλοχική δράση των στόλων σάλσας Cistanche, που αναπτύσσεται στη Δημοκρατία του Καζακστάν

Elmira B. Kartbaevaa, et al

ΑΦΗΡΗΜΕΝΗ

HerbaCistanche(Είδος Cistanche) στην Παραδοσιακή Κινεζική Ιατρική χρησιμοποιείται για τη θεραπεία πολλών ασθενειών και συμπτωμάτων, συμπεριλαμβανομένου του πόνου. Ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να αξιολογήσει την αντι-αλγική επίδραση του υδροαιθανολικούεκχύλισμα απόCistancheσάλσα(CAMey.) Beck, Orobanchaceae, στολώνες σε ζωικά μοντέλα πόνου. Η χημική σύνθεση τουHerbaCistancheαναλύθηκε με HPLC-UV. Ποντίκια Swiss Webster (25–30 g, n=6) υποβλήθηκαν σε προκαταρκτική θεραπεία από το στόμα μεHerbaCistanche(10, 30 ή 100 mg/kg) και αξιολογήθηκαν στη δοκιμή φορμαλίνης και στην απόκριση γλείψιμο που προκαλείται από την καψαϊκίνη ή το γλουταμικό. ΚαζακστάνHerba Cistancheαποτελείται κυρίως από φαινυλοπροπανοειδείς γλυκοσίτες, από τους οποίουςεχινακοσίδη, ακτεοσίδη, καιτουμπουλοσίδηΒ είναι τα κύρια συστατικά. ΠότεHerbaCistancheπου χορηγήθηκε σε ποντίκια είχε αποτέλεσμα και στις δύο φάσεις της δοκιμής φορμαλίνης (77 τοις εκατό δραστικότητα στα 30 mg/kg για τη φάση 1 και 62 τοις εκατό δραστικότητα στα 100 mg/kg για τη φάση 2) ​​υποδηλώνοντας αναλγητικές και αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες. ΚαζακστάνHerbaCistancheήταν σε θέση να μειώσει τον χρόνο γλείψιμο των ζώων μετά την ένεση γλουταμικού (81 τοις εκατό μείωση στα 30 mg/kg) και καψαϊκίνης (81 τοις εκατό μείωση στα 100 mg/kg). Συμπεραίνουμε ότι τα φαινολικά που υπάρχουν στο υδροαιθανολικό εκχύλισμα του C. salsa θα μπορούσαν να ευθύνονται για το φαρμακολογικό του προφίλ. Προκειμένου να προμηθευτείτε μια καλής ποιότητας πρώτη ύλη για την Παραδοσιακή Κινεζική Ιατρική, προτείναμε αυτό το είδος του Καζακστάν να τυποποιηθεί χρησιμοποιώνταςεχινακοσίδη και ακτεοσίδηως δείκτες.

Λέξεις-κλειδιά:Herba Cistanche,HPLC-UV,Εχινακοσίδη, Ακτεοσίδη, Tubuloside, Τυποποίηση

Εισαγωγή

Cistancheσάλσα(CA Mey) Το Beck, Orobanchaceae, είναι ένα παρασιτικό φυτό από τη Δημοκρατία του Καζακστάν όπου χρησιμοποιείται ως βιομηχανική πρώτη ύλη (Sarsenbayev et al., 2011; Grudzinskaya andGemedzhieva, 2012). Η επιστημονική αξία αυτού του βοτάνου στην Παραδοσιακή Κινεζική Ιατρική σχετίζεται με τη θεραπεία προβλημάτων των νεφρών (που ποικίλλουν από πόνο σε ανεπάρκεια), ανικανότητας, γυναικείας υπογονιμότητας, νοσηρής λευκόρροιας, άφθονης μετρορραγίας και γεροντικής δυσκοιλιότητας (Jiangsu New Medical College Dictionary of Traditional ChineseDrugs, 77; Chinese Medicinal Herbal, 1988). Η χημική σύνθεση των στόλων άλλων ειδώνCistancheέχει ήδη μελετηθεί λεπτομερώς από Κινέζους επιστήμονες. Ταυτοποιήθηκαν οι ακόλουθες φαινολικές ενώσεις:εχινακοσίδη, τουμπουλοσίδη, ακτεοσίδη, εκτός από τις λιγνάνες, τα ιριδοειδή και έναν σύνθετο πολυσακχαρίτη (Yong andTu, 2009; Zhang et al., 2003; Xie et al., 2005; Jiang et al., 2009; Suiet al., 2011; Liu et al., 20; Zhou et al., 2014).

Shimoda et al. (2009) έδειξε ότι αυτό το βότανο έχει υποχοληστερολαιμικό αποτέλεσμα ενώ οι Yang et al. (2013) προσδιόρισε την πατοπροστατευτική του δραστηριότητα. Nan et al. (2013) ανέφερε την αντιφλεγμονώδη δράση για τα εκχυλίσματά του. Ένας πολύπλοκος πολυσακχαρίτης που είχε απομονωθεί στο παρελθόν από αυτό το φυτό έδειξε ανοσοτροποποιητικά αποτελέσματα (Wang et al., 2009).

Αν και υπάρχει σημαντική ποσότηταCistancheστόλων στη Δημοκρατία του Καζακστάν, δεν υπάρχει δημοφιλής χρήση για αυτό το φυτό από τον πληθυσμό του Καζακστάν, αν και οι γείτονες στην Κίνα το χρησιμοποιούν εκτενώς. Λόγω του γεγονότος ότι υπάρχει σημαντικό πρόβλημα στις μέρες μας σε σχέση με την υποκατάσταση/νοθείωση των φαρμακευτικών φυτών και την αυξανόμενη ανάγκη τυποποίησης φαρμάκων για χρήση στην Παραδοσιακή Κινεζική Ιατρική, αυτή η μελέτη σχεδιάστηκε για να εξακριβώσει τη φαινολική χημική σύσταση αυτής της πρώτης φυτικής ύλης που αναπτύσσεται στο γειτονικό Καζακστάν καθώς και να αξιολογήσει τη χρήση του ως αντιερεθιστικό για πιθανή ανακούφιση του πόνου – που χαρακτηρίζει μια από τις κύριες χρήσεις του στην Παραδοσιακή Κινέζικη Ιατρική.

Υλικά και μέθοδοι

Φυτική ύλη

Cistanchesalsa (CAMey.) Beck, Orobanchaceae, στόλόνια συλλέχθηκαν στην έρημο Moinkum, χωριό Bakanas, τον Ιούλιο του 2014 στο Αλμάτι. Το φυτικό υλικό αναγνωρίστηκε από τον Δρ. G. Sitpayeva από το Ινστιτούτο Βοτανικής και Φυτοεισαγωγής, Υπουργείο Παιδείας και Επιστημών της Δημοκρατίας του Καζακστάν, όπου κατατέθηκε με τον αριθμό 01-04/306.

Χημική ανάλυση

Stolons του C. salsa (2 g) υποβλήθηκαν σε εκχύλιση μικροκυμάτων. Αρχικά, το υλικό αλέστηκε σε 0.001–2.000 mm και στη συνέχεια τοποθετήθηκε σε ένα ερμητικό δοχείο για εκχύλιση για 10 λεπτό. σε 100–1100 ◦C με αιθανόλη 80 τοις εκατό (αναλογία 1:10). Το υδροαιθανολικό εκχύλισμα (CSHE) αναλύθηκε με HPLC-MS. Το ακατέργαστο εκχύλισμα διαλύθηκε σε μεθανόλη (9,6 mg/ml) και διηθήθηκε μέσω μεμβράνης Teflon 0,45 mm πριν από την ανάλυση. Ένας υγρός χρωματογράφος HP 1100 Series μοντέλο (εταιρεία Agilent Technologies, Inc., CA, USA), εξοπλισμένος με έναν απαερωτή ροής κενού, μια αντλία βαθμίδωσης πίεσης τεσσάρων καναλιών και έναν αυτόματο εγχυτήρα. Οι φαινολικές ενώσεις διαχωρίστηκαν χρωματογραφικά με στήλη Zorbax Eclipse XDB-C18, 2,1 χ 50 mm, γεμάτη με πολυμερές πυριτικής πηκτής οκταδεκυλοσιλυλίου (1,8). Η χρωματογραφική ανάλυση διεξήχθη με ροή κινητής φάσης 0,2 ml/min, πίεση λειτουργίας υγρού έκλουσης 175–200 kPa, θερμοκρασία κλιβάνου στήλης 30 ◦C, όγκος δείγματος 2 ml, λειτουργία τροφοδοσίας διαλύτη έκλουσης: 0–36 min 10 τοις εκατό A - 90 τοις εκατό Β; 36 λεπτά – 100 τοις εκατό Β (διαλύτης έκλουσης Α: μεθανόλη, μέσο έκλουσης Β: 0,2 τοις εκατό διάλυμα μυρμηκικού οξέος). Η ανίχνευση πραγματοποιήθηκε με υπεριώδη ακτινοβολία στα μήκη κύματος των 254, 334, 350, 410, 450 και 550 nm. Για την ταυτοποίηση των χημικών ενώσεων στο εκχύλισμα χρησιμοποιήθηκε σύγκριση των λαμβανόμενων χρόνων κατακράτησης, UV και φασμάτων μάζας με εκείνα των ενώσεων αναφοράς. Πραγματοποιήθηκε ποσοτική ανάλυση με τη χρήση του standardβερμπασκοσίδηκαιεχινακοσίδηαναλύονται υπό τις ίδιες χρωματογραφικές συνθήκες. Οι καμπύλες βαθμονόμησής τους επέτρεψαν τον υπολογισμό της ποσότητας μεταξύ τους φαινυλοπροπανοειδούς γλυκοζίτη στο αιθανολικό εκχύλισμα αυτού του φυτού. Η μέθοδος δεν επικυρώθηκε.

Των ζώων

Σε αυτή τη μελέτη χρησιμοποιήθηκαν ποντίκια Swiss Webster (20–25 g, ηλικίας δύο μηνών) (δωρεά από το Instituto Vital Brazil, Niterói, RJ, Βραζιλία). Τα ζώα διατηρήθηκαν σε τυπικές συνθήκες (κύκλος φωτός-σκότους 12 ωρών, 22 ± 2 μοίρες και 70-80 τοις εκατό υγρασία. Τροφή και νερό κατά βούληση). Τα ζώα έλαβαν μόνο νερό για να αποφευχθεί η παρεμβολή της τροφής στην απορρόφηση της ουσίας 12 ώρες πριν από την έναρξη των πειραμάτων. Ο εγκλιματισμός στις εργαστηριακές συνθήκες γινόταν για τουλάχιστον 1 ώρα πριν από κάθε δοκιμή. Όλα τα πρωτόκολλα διεξήχθησαν σύμφωνα με τις κατευθυντήριες γραμμές για τα ηθικά πρότυπα για τη διερεύνηση του πειραματικού πόνου σε ζώα και ακολούθησαν τις αρχές και τις κατευθυντήριες γραμμές που υιοθετήθηκαν από το Εθνικό Συμβούλιο για τον Έλεγχο Πειραμάτων σε Ζώα (CONCEA), εγκεκριμένο από το Biomedical Science Institute/UFRJ, Ethical Επιτροπή για την Έρευνα των Ζώων και έλαβε τον αριθμό DFBCICB015-04/16. Όλα τα πειραματικά πρωτόκολλα πραγματοποιήθηκαν κατά τη διάρκεια της ελαφριάς φάσης. Ο αριθμός των ζώων ανά ομάδα διατηρήθηκε στο ελάχιστο και σύμφωνα με τους κανόνες της CONCEA. Στο τέλος κάθε πειράματος, τα ποντίκια θανατώθηκαν από υπερβολική δόση κεταμίνης/ξυλαζίνης.

Θεραπείες

Σε αυτή τη μελέτη, το CSHE αξιολογήθηκε στα 10, 30 και 100 mg/kg. Το εκχύλισμα διαλύθηκε σε διμεθυλοσουλφοξείδιο (DMSO, FisherBiotech) προκειμένου να παρασκευαστεί ένα αποθεματικό διάλυμα στα 100 mg/ml. Το PBS χρησιμοποιήθηκε ως αραιωτικό για την παρασκευή των διαφορετικών δόσεων. Διαλύματα που περιέχουν 10, 30 και 100 mg/kg υδροαιθανολικού εκχυλίσματοςCistancheσάλσαπροετοιμάστηκαν. Τα τυπικά φάρμακα που χρησιμοποιήθηκαν ήταν μορφίνη 2,5 mg/kg (Merck, αραιωμένο σε ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών (PBS)), ακετυλοσαλικυλικό οξύ 200 mg/kg (Sigma Aldrich, διαλυμένο με 5 M υδροξείδιο του νατρίου (NaOH) σε 0,9 τοις εκατό αλατούχο διάλυμα) και καψαζεπίνη 10 nMolper paw. Αλατούχο διάλυμα συν DMSO (στην ίδια συγκέντρωση όπως στην υψηλότερη επεξεργασία με εκχύλισμα) δόθηκε στην αρνητική ομάδα ελέγχου. Όλες οι θεραπείες (ελεγμένο εκχύλισμα και πρότυπα) χορηγήθηκαν από το στόμα. Η μόνη εξαίρεση ήταν η καψαζεπίνη η οποία χορηγήθηκε με ενδοπελματιαία ένεση.

Οξύς πόνος που προκαλείται από φορμαλίνη

Ένα διάλυμα φορμαλίνης 2,5 τοις εκατό (37 τοις εκατό φορμαλδεΰδη) εγχύθηκε (20 ul) στην πελματιαία περιοχή του δεξιού οπίσθιου ποδιού ποντικών 60 λεπτά μετά από θεραπεία (υδροαιθανολικό εκχύλισμαCistancheσάλσαή ακετυλοσαλικυλικό οξύ 200 mg/kg ή μορφίνη 2,5 mg/kg) (Matheus et al., 2005). Τα ζώα τοποθετήθηκαν μεμονωμένα σε ένα διαφανές γυάλινο θάλαμο και η διάρκεια σε δευτερόλεπτα που πέρασαν για να γλείφουν την ένεση φορμαλίνης στο pawafter τους καταγράφηκε και αναλύθηκε σε δύο ξεχωριστές περιόδους, πρώιμης φάσης-νευρογόνος πόνος (0-5 λεπτά μετά την ένεση) και όψιμης φάσης- φλεγμονώδης πόνος (15–30 λεπτά μετά την ένεση).

Αίσθηση πόνου που προκαλείται από την καψαϊκίνη

Αυτή η δοκιμή βασίστηκε στη μέθοδο που περιγράφεται από τους Sakurada et al. με ορισμένες τροποποιήσεις (Sakurada et al., 1992). Η καψαϊκίνη (20 ul)C18H27NO3 (Galena, Campinas, SP) εγχύθηκε στην πελματιαία περιοχή του δεξιού οπίσθιου ποδιού των ποντικών (1,6 μg/πόδι) μία ώρα μετά από θεραπεία (υδροαιθανολικό εκχύλισμαCistancheσάλσα ή καψαζεπίνη10 nMol/πόδι). Τα ζώα τοποθετήθηκαν μεμονωμένα σε γυάλινο θάλαμο και η διάρκεια γλείψιμο των ποδιών καταγράφηκε μεταξύ 0 και 5 λεπτών μετά την ένεση καψαϊκίνης και στη συνέχεια αναλύθηκε.

Αίσθηση πόνου που προκαλείται από γλουταμικό

Στη μέθοδο που περιγράφεται από τους Beirith et al. (2002), διάλυμα γλουταμικού σε PBS (20 ul) (l-γλουταμινικό οξύ, Sigma–Aldrich, 3,7 ng/πόδι) εγχύθηκε στην πελματιαία περιοχή του δεξιού οπίσθιου ποδιού των ποντικών μία ώρα μετά τη θεραπεία (υδροαιθανολικό εκχύλισμαCistancheσάλσα ή μορφίνη 2,5 mg/kg). Τα ζώα τοποθετήθηκαν μεμονωμένα σε γυάλινο θάλαμο και η διάρκεια γλείψιμο των ποδιών (δευτερόλεπτα) καταγράφηκε μεταξύ 0 και 15 λεπτών μετά την ένεση γλουταμικού και στη συνέχεια αναλύθηκε.

Στατιστική ανάλυση

Τα χημικά δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος ± SD πέντε πειραμάτων. Όλες οι φαρμακολογικές πειραματικές ομάδες αποτελούνταν από τουλάχιστον έξι ποντίκια. Η ανάλυση της μονόδρομης διακύμανσης (ANOVA) ακολουθούμενη από τη δοκιμή του Dunnett επέτρεψε την απεικόνιση της στατιστικής σημασίας μεταξύ των ομάδων χρησιμοποιώντας το λογισμικό GraphPad Prism 5.0. Οι τιμές p θεωρήθηκαν σημαντικές όταν ήταν μικρότερες από 0.05(p <>

Αποτελέσματα

CistancheΤο χρωματογράφημα εκχυλίσματος υδροαιθανόλης salsa (δύο διαφορετικές αραιώσεις) φαίνεται στο Σχ. 1. Ο Πίνακας 1 δείχνει τον προσδιορισμό των φαινολικών ενώσεων μαζί με τους αντίστοιχους χρόνους κατακράτησης τους στο χρωματογράφημα.

Επίδραση του CSHE στον οξύ πόνο που προκαλείται από φορμαλίνη

Στη δοκιμασία οξέος πόνου που προκαλείται από φορμαλίνη, το CSHE στα 10, 30 και 100 mg/kg μπόρεσε να μειώσει το γλείψιμο των ποδιών στην πρώτη φάση της δοκιμής που είναι γνωστή ως φάση νευρογενούς πόνου, αυτές οι μειώσεις ήταν 60, 77 και 58 τοις εκατό, αντίστοιχα. . Επιπλέον, ήταν επίσης αποτελεσματικά στη μείωση του φλεγμονώδους πόνου που προκλήθηκε κατά τη δεύτερη φάση της δοκιμής, η ποσοστιαία αναστολή του φλεγμονώδους πόνου ήταν 42, 46 και 62 τοις εκατό, αντίστοιχα (Εικ. 2). Η μορφίνη (2,5 mg/kg) και το ακετυλοσαλικυλικό οξύ (200 mg/kg) παρουσίασαν τα ακόλουθα αποτελέσματα: 55 τοις εκατό /33 τοις εκατό και 31 τοις εκατό /54 τοις εκατό για την πρώτη και τη δεύτερη φάση, αντίστοιχα.

Επίδραση του CSHE στην επαγόμενη από γλουταμικό πόνο

Το CSHE μείωσε το γλείψιμο που προκλήθηκε από το γλουταμικό στις τρεις δόσεις που δοκιμάστηκαν, 10, 30 και 100 mg/kg κατά 76, 81 και 53 τοις εκατό, αντίστοιχα (Εικ. 3). Η μορφίνη στο 2,5 τοις εκατό οδήγησε σε μείωση 76 τοις εκατό

Επίδραση του CSHE στην επαγόμενη από την καψαϊκίνη πόνο

Προκειμένου να επαληθευτεί εάν το CSHE θα επηρέαζε τον πόνο μέσω των υποδοχέων TRPV1, δοκιμάστηκε σε ένα μοντέλο πόνου που προκαλείται από την καψαϊκίνη. Η αντιλοχική επίδραση μέσω αυτού του μοντέλου παρατηρήθηκε για το CSHE στις τρεις δοκιμασμένες δόσεις, κατά 76, 79 και 81 τοις εκατό, αντίστοιχα (Εικ. 4). Η καψαζεπίνη 10 nMol/πόδι οδήγησε σε μείωση 60 τοις εκατό.

Συζήτηση

Συνολικά δέκα φαινυλοπροπανοειδείς γλυκοζίτες ταυτοποιήθηκαν στο υδροαιθανολικό εκχύλισμα C. salsa (που αναπτύσσεται στο Καζακστάν).Εχινακοσίδη(10,98 mg/g),ακτεοσίδη(9,44 mg/g) και τουμπουλοσίδη Β (7,94 mg/g) ήταν οι κύριες ενώσεις που ταυτοποιήθηκαν. Τα ληφθέντα δεδομένα συσχετίστηκαν με τη διαθέσιμη βιβλιογραφία για είδηCistancheαναπτύσσεται σε διαφορετικές περιοχές της Ασίας (Zhou et al., 2014; Xieet al., 2005; Jiang et al., 2009).Εχινακοσίδηκαιακτεοσίδηαποτελούν τα κύρια συστατικά που αποτελούν τη βάση για την τυποποίηση των επίσημων ειδώνCistanchedeserticola καιCistanchetubulosa, που καταγράφηκε στην Κινεζική Φαρμακοποιία το 2005. Προτείνουμε ότι αυτές οι ενώσεις θα μπορούσαν επίσης να χρησιμοποιηθούν για την τυποποίησηCistancheστολόνια salsa από το Καζακστάν, καθώς είναι τα κυριότερα στο μελετημένο υδροαιθανολεξικό.

Σύμφωνα με τα φαρμακολογικά αποτελέσματα αυτής της μελέτης, είναι δυνατό να υποδηλωθεί ότι το CSHE είναι ένας αποτελεσματικός παράγοντας κατά του νευρογενούς πόνου και της φλεγμονής, όπως παρατηρήθηκε στη δοκιμή φορμαλίνης. Από όσο γνωρίζουμε,CistancheΗ σάλσα δεν έχει ποτέ δοκιμαστεί σε σχέση με τις αντιλοχιστικές της δράσεις. Μια μελέτη από το 2002 μεCistancheΤο deserticola (Lin et al., 2002) έδειξε ότι αυτό το φυτό παρουσίαζε αντιλοχερικές και αντιφλεγμονώδεις δράσεις όταν αναλύθηκε σε μοντέλα όπως η ολική συστροφή, η φορμαλίνη και το οίδημα των ποδιών. Αν και δεν έγινε προσπάθεια να διερευνηθούν τα κύρια συστατικά στα εκχυλίσματα που ήταν ενεργά, θεώρησαν το εκχύλισμα βουτανόλης και την υδάτινη στιβάδα ως τα ενεργά. Δεν αποτελεί έκπληξη ότι αυτοί οι διαλύτες βρίσκονται στην κλίμακα πολικότητας που ταιριάζει με τα φαινυλοπροπανοειδή γλυκοσίδια που βρίσκονταιCistancheσάλσα. Επιπλέον, ο Lin και οι συνάδελφοί του διαπίστωσαν ότι η αντιλοχική δράση τουCistancheΤα εκχυλίσματα deserticola δεν οφείλονταν στη δράση της ένωσης στον υποδοχέα οπιούχων ή σε σχέση με το ανοσοποιητικό σύστημα. Στη μελέτη μας, το πλούσιο σε φαινυλοπροπανοειδή εκχυλίσματα έδειξε δράση και στις δύο φάσεις της δοκιμής φορμαλίνης. Η δραστηριότητα που παρατηρήθηκε οφειλόταν στην πραγματικότητα στον φαρμακολογικό στόχο που διερευνήθηκε και όχι σε οποιαδήποτε πιθανή κινητική αλλαγή, όπως αποδεικνύεται από τη δοκιμή therotarod. Τα αποτελέσματα της δοκιμής φορμαλίνης υποδεικνύουν τη δυνατότητα για νευρογενή πόνο καθώς και πόνο που προκαλείται από φλεγμονώδεις μεσολαβητές. Αρχικά, αποφασίσαμε να διερευνήσουμε την οδό του νευρογενούς πόνου. Επειδή παρόμοιες ενώσεις από άλλα είδη που είχαν μελετηθεί προηγουμένως δεν έδειξαν δραστηριότητα υποδοχέα οπιούχων, αποφασίσαμε να δοκιμάσουμε άλλα μοντέλα, όπως μοντέλα γλουταμινικού και καψαϊκίνης.

Το γλουταμινικό είναι ένας διεγερτικός νευροδιαβιβαστής που έχει σημαντικό ρόλο στη ρύθμιση του πόνου σε όλο το περιφερικό και κεντρικό νευρικό σύστημα. Αυτή η δράση διαμεσολαβείται από υποδοχείς ιονοτροπικού γλουταμινικού οξέος (iGluRs) και μεταβοτροπικούς υποδοχείς γλουταμινικού οξέος. Τα iGluR μπορούν να διαιρεθούν σε Ν-μεθυλ-d-ασπαρτικό (NMDA) και -αμινο-3-υδροξυ-5-μεθυλισοξαζόλη-4-προπιονικό οξύ (AMPA) (Kolber, 2015). Η έρευνα έχει δείξει ότι όταν ανταγωνίζονται οι υποδοχείς NMDA και AMPA με κεταμίνη και καϊνικό, αντίστοιχα, παρατηρούνται επιδράσεις κατά του πόνου. Ωστόσο, οι ανταγωνιστές που στοχεύουν αυτούς τους υποδοχείς μέχρι στιγμής έχουν προκαλέσει μια ουσιαστική δυσμενή επίδραση και για το λόγο αυτό, η νέα έρευνα επικεντρώνεται στο mGluRshoping ότι το φάρμακο που μεσολαβεί μέσω αυτού του υποδοχέα θα προκαλούσε λιγότερες παρενέργειες (Palazzo et al., 2014). Τα αποτελέσματα της δοκιμής του CSHE έδειξαν ότι αυτή η θεραπεία ήταν αποτελεσματική στη μείωση του πόνου που προκαλείται από το γλουταμικό. Ωστόσο, είναι ακόμη άγνωστο εάν αυτή η επίδραση προκαλείται μέσω ιοντοτρόπων και/ή μεταβοτροπικών υποδοχέων. Η μορφίνη είναι ένα από τα διαθέσιμα φάρμακα που έχουν επίδραση στη γλουταμινεργική μετάδοση (Deyama et al., 2007). Στη βιβλιογραφία αναφέρεται ότι η ενεργοποίηση του υποδοχέα γλουταμικού αυξάνει τις αποκρίσεις TRPV1 (Szteyn et al., 2015). Για το λόγο αυτό, είναι πιθανό η επίδραση που παρατηρείται για το CSHE να οφείλεται στη δραστηριότητα στο TRPV1 και όχι απαραίτητα μέσω μιας άμεσης απόκρισης στους υποδοχείς γλουταμικού.

Το επόμενο βήμα αυτής της έρευνας ήταν η διεξαγωγή μιας δοκιμής γλείψιμο των ποδιών χρησιμοποιώντας την καψαϊκίνη ως αλγητικό παράγοντα, η οποία είναι ένας αγωνιστής του υποδοχέα TRPV1. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι πράγματι το CSHE μείωσε τον πόνο μέσω του υποδοχέα TRPV1.

Στην περίπτωση του CSHE, σχεδόν σε όλες τις δοκιμασμένες μεθοδολογίες, θα μπορούσαμε να παρατηρήσουμε ότι η δόση των 30 mg/kg πέτυχε καλύτερα αποτελέσματα από τα 100 mg/kg. Αυτό μπορεί να οφείλεται στον κορεσμό του διαλύματος που οδηγεί σε καταβυθισμένες ενώσεις και στην αποτελεσματική μικρότερη ποσότητα φαρμάκων που είναι βιοδιαθέσιμα.

Η επιβεβαίωση της καθιερωμένης χημικής σύνθεσης για το εκχύλισμα Καζακίας CSHE ήταν ένα σημαντικό βήμα επειδή τα κύρια συστατικά που υπάρχουν σε αυτό έχουν ήδη επιβεβαιωθεί με κάποιο τρόπο οι αντινοληπτικές/αντιφλεγμονώδεις δράσεις τους. Για παράδειγμα,εχινακοσίδηκαθιερώθηκε ως μία από τις ενεργές αρχές που είναι υπεύθυνες για την αντιλοχερική δράση της Echinacea (Hostettmann, 2003). Επίσης, μια προηγούμενη μελέτη από τον Schapoval και τους συνεργάτες του (Schapoval et al., 1998) επεσήμανεακτεοσίδηως μία από τις κύριες δραστικές ουσίες σε ένα εκχύλισμα αιθανόλης που παρασκευάζεται με Stachytarpheta cayennensis όπως αξιολογείται από μοντέλα οιδήματος ποδιού και θερμών πλακών. Το Backhouse και οι συνάδελφοι (Backhouse et al., 2008) έκριναν επίσηςακτεοσίδηνα είναι η ενεργή αρχή της σφαιρικής Buddleja που χρησιμοποιεί πολλά μοντέλα αξιολόγησης του πόνου, συμπεριλαμβανομένης της δοκιμής φορμαλίνης. Τώρα αναπτύσσονται νέα σκευάσματα χρησιμοποιώντας την τελευταία λέξη της τεχνολογίας για την αύξηση της σταθερότητας και την παράταση της αντιλοχικής δράσης τουακτεοσίδη(Isacchi et al., 2016).

συμπέρασμα

Δέκα ουσίες φαινολικής φύσης εντοπίστηκαν στα στολόνια του ΚαζακστάνCistanchesalsa με ανάλυση HPLC/MS. Αυτές οι ενώσεις θα μπορούσαν να είναι υπεύθυνες για την αντιερεθιστική δράση που παρατηρείται στα πειραματικά μοντέλα που εκτελούνται εδώ. Λαμβάνοντας υπόψη ότι στο έδαφος του Καζακστάν το γένοςCistancheαντιπροσωπεύεται κυρίως από είδηCistanchesalsa, μπορούμε να προτείνουμε τη συγκομιδή και την τυποποίησή της χρησιμοποιώνταςεχινακοσίδηκαιακτεοσίδηως τυπικές ενώσεις, για την προμήθεια μιας καλής ποιότητας πρώτης ύλης για την Παραδοσιακή Κινεζική Ιατρική.

Δεοντολογικές αποκαλύψεις

Προστασία ανθρώπων και ζώων. Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι οι διαδικασίες που ακολουθήθηκαν ήταν σύμφωνα με τους κανονισμούς της σχετικής επιτροπής δεοντολογίας της κλινικής έρευνας και με αυτούς του Κώδικα Δεοντολογίας της Παγκόσμιας Ιατρικής Ένωσης (Διακήρυξη του Ελσίνκι).

Εμπιστευτικότητα δεδομένων.

Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν εμφανίζονται δεδομένα ασθενών σε αυτό το άρθρο.

Δικαίωμα στην ιδιωτικότητα και ενημερωμένη συγκατάθεση. Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν εμφανίζονται δεδομένα ασθενών σε αυτό το άρθρο.

Συνεισφορές συγγραφέων

Η ΕΒΚ πραγματοποίησε τη συλλογή του φυτού, την προετοιμασία του εκχυλίσματος και την ανάλυση των χημικών αποτελεσμάτων καθώς και τη συγγραφή του χαρτιού. GRD, εκτέλεσε όλες τις φαρμακολογικές εξετάσεις. Η ZBS, σχεδίασε τη μελέτη σε συνδυασμό με το FB. Οι LNI και ENB συμμετείχαν στον φαρμακοποιητικό σχεδιασμό της μελέτης για την ένταξη των ληφθέντων αποτελεσμάτων στη φαρμακοποιία του Καζακστάν. IIT, εκτέλεσε τις αναλύσεις HPLC. Το PDF, σχεδίασε τη φαρμακολογική μελέτη και το FB, οργάνωσε την ομάδα μαζί για να γράψουν αυτή την εργασία.

Συγκρούσεις συμφερόντων

Οι συγγραφείς δεν δηλώνουν σύγκρουση συμφερόντων.

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς από τη Βραζιλία ευχαριστούν τον κ. Alan Minho για την τεχνική βοήθεια και το Instituto Vital Brazil για τις δωρεές των ζώων που χρησιμοποιούνται. Θέλουν επίσης να αναγνωρίσουν τις επιχορηγήσεις από το CNPq και το Fundac¸ ão Carlos Chagas Filho de Apoio à Pesquisa do Estadodo Rio de Janeiro. Οι συγγραφείς από την Ιρλανδία επιθυμούν να αναγνωρίσουν το Πρόγραμμα της Αρχής Ανώτατης Εκπαίδευσης για Έρευνα σε Ιδρύματα Τρίτου Επιπέδου Κύκλου 5 για τη χρηματοδότηση του TBSI και να ενισχύσουν τη σημασία του προγράμματος SFI ISCA-Brazil (grantno. SFI/13/ISCA/2843) που συνέβαλε στη συνεργασία μεταξύ Βραζιλίας και Ιρλανδίας. Οι συγγραφείς από το Καζακστάν θέλουν να αναγνωρίσουν το KazNMU για την οικονομική υποστήριξη που επιτρεπόταν για την εκτέλεση αυτής της εργασίας.

Από: «Antinoceptive activity of Cistanche salsa stolons, growing in the Republic of Kazakhstan» από την Elmira B. Kartbaevaa, et al

---EB Kartbaeva et al. / Revista Brasileira de Farmacognosia 27 (2017) 587–591

βιβλιογραφικές αναφορές

Backhouse, N., Delporte, C., Apablaza, C., Farias, M., Goïty, L., Arrau, S., Negrete, R., Castro, C., Miranda, H., 2008. Antinociceptive activity of Buddleja globose (matico) σε διάφορα μοντέλα πόνου. J. Ethnopharmacol. 119, 160–165.

Beirith, A., Santos, ARS, Calixto, JB, 2002. Μηχανισμοί που υπόκεινται στον πόνο και το οίδημα του ποδιού που προκαλείται από την έγχυση γλουταμικού στο πόδι του ποντικού. Brain Res. 924, 219–228.

Κινεζική Ακαδημία Ιατρικών Επιστημών, 1988. Institute of Medicinal Plants, Chinese Medicinal Herbal, τομ. 4., 2η έκδ. People's Medical Publishing House, Πεκίνο.

Deyama, S., Yamamoto, J., Machida, T., Tanimoto, S., Nakagawa, AT, Kaneko, S., Satoh, M., Minami, M., 2007. Αναστολή της γλουταμινεργικής μετάδοσης από τη μορφίνη στο βασεοπλάγιο ο αμυγδαλοειδής πυρήνας μειώνει την αποστροφή που προκαλείται από τον πόνο. Neurosci. Res. 59, 199–204.

Grudzinskaya, LM, Gemedzhieva, NG, 2012. Κατάλογος φαρμακευτικών φυτών στο Καζακστάν. Εκδοτικός Οίκος του Ινστιτούτου Βοτανικής και Φυτοεισαγωγής του ΡΚ, Αλμάτι.
Hostettmann, K., 2003. History of a plant: the example of Echinacea. Forsch Komp. Klas. Nat. Suppl. 1, 9–12.
Isacchi, B., Bergonzi, MC, Iacopi, R., Ghelardini, C., Galeotti, N., Bilia, AR, 2016.
Λιποσωματική σύνθεση για την αύξηση της σταθερότητας και την παράταση της αντινευροπαθητικής δράσης της βερμπασκοσίδης. Planta Med. 83, 412–419.
Jiang, Y., Li, SP, Wang, YT, Chen, XJ, Tu, PF, 2009. Differentiation ofHerbaΚιστανάκιαμε δακτυλικό αποτύπωμα με υψηλής απόδοσης υγρή χρωματογραφία-ανίχνευση συστοιχίας διόδων-φασματομετρία μάζας. J. Chromatogr. 1216, 2156–2162.
Jiangsu New Medical College Dictionary of Traditional Chinese Drugs, 1977. 1st ed., Shanghai Scientific & Technologic Publisher, Shanghai.
Kolber, BJ, 2015. mGluRs από το κεφάλι μέχρι τα νύχια στον πόνο. Επαιτώ. ΜοΙ. Biol. Μετάφρ. 131, 281–324.
Lin, LW, Hsieh, MT, Tsai, FH, Wang, WH, Wu, CR, 2002. Αντι-ερεθιστική και αντιφλεγμονώδης δράση που προκαλείται από το Cistanche deserticola σε τρωκτικά. J. Ethnopharmacol. 83, 177–182.
Liu, XM, Li, J., Jiang, Y., Zhao, MB, Tu, PF, 2013. Chemical constituents from Cistanche Sinensis (Orobanchaceae). Biochem. Συστ. Ecol. 47, 21–24.
Matheus, ME, Berrondo, LF, Vieitas, EC, Menezes, FS, Fernandes, PD, 2005. Αξιολόγηση των ιδιοτήτων κατά του πόνου από εκχυλίσματα στελεχών Brillantaisia ​​palisotii Lindau. J. Ethnopharmacol. 102, 377–381.
Nan, ZD, Zeng, KW, Shi, SP, Zhao, MB, Jiang, Y., Tu, PF, 2013. Φαινυλαιθανοειδείς γλυκοσίδες με αντιφλεγμονώδεις δραστηριότητες από τους μίσχους του Cistanche deserticola που καλλιεργήθηκε στην έρημο Tarim. Fitoterapia 89, 167–174.
Palazzo, E., Marabese, I., de Novellis, V., Rossi, F., Maione, S., 2014. Υπερνωτιαίοι μεταβοτροπικοί υποδοχείς γλουταμικού: στόχος για ανακούφιση από τον πόνο και όχι μόνο. Ευρώ. J. Neurosci. 39, 444–454.
Sakurada, Τ., Katsumata, Κ., Tanno, Κ., Sakurada, S., Kisara, Κ., 1992. Η δοκιμή καψαϊκίνης σε ποντίκια για την αξιολόγηση ανταγωνιστών ταχυκινίνης στον νωτιαίο μυελό. Neuropharmacology 31, 1279-1285.
Sarsenbayev, KN, Isabaev, SO, Kolosov, NG, 2011. Πρακτικά του Διεθνούς Επιστημονικού Συνεδρίου «Modern Ecological State of the Aral Sea Region, the Prospects for Solving Problems», Kyzylorda, σελ. 195–200.
Schapoval, EES, Vargas, MRW, Chaves, CG, Bridi, R., Zuanazzi, JA, Henriques, AT, 1998. Αντιφλεγμονώδεις και αντιλοχιστικές δραστηριότητες εκχυλισμάτων και απομονωμένων ενώσεων από Stachytarpheta cayennensis. J. Ethnopharmacol. 60, 53–59.
Shimoda, H., Tanaka, J., Takahara, Y., Takemoto, K., Shan, SJ, Su, MH, 2009. Οι υποχοληστερολαιμικές επιδράσεις του εκχυλίσματος Cistanche tubulosa, ένα κινέζικο παραδοσιακό ακατέργαστο φάρμακο, σε ποντίκια. Είμαι. J. Chin. Med. 37, 1125–1138.
Sui, ZF, Gu, TM, Liu, B., Peng, SW, Zhao, ZL, Le, L., Shi, DF, Yang, RY, 2011. Υδατοδιαλυτή ένωση υδατανθράκων από τα σώματα τωνHerbaCistanche: απομόνωση και η σαρωτική του δράση στις ελεύθερες ρίζες στο δέρμα. Υδατάνθρακες. Πολυμ. 85, 75–79.
Szteyn, K., Rowen, MP, Gomez, R., Du, J., Carlton, SM, Jeske, NA, 2015. Η πρωτεΐνη αγκύρωσης της Α-κινάσης 79/150 συντονίζει την ευαισθητοποίηση του μεταβοτροπικού υποδοχέα γλουταμικού των περιφερειακών αισθητήριων νευρώνων. Pain 156, 2364–2372.
Wang, XY, Qi, Y., Cai, RL, Li, XH, Yang, MH, Shi, Y., 2009. The effect of Cistanche deserticola polysaccharides (CDPS) στην ενεργοποίηση των μακροφάγων. Πηγούνι. Pharmacol. Ταύρος. 25, 787–789.
Xie, JN, Zhao, MB, Wu, FW, Tu, PF, 2005. The chromatographic fingerprint of Cistanche deserticola by HPLC. Πηγούνι. Trad. Βότανο. Drugs 36, 268-271.
Yang, FR, Wen, DS, Fang, BW, Lou, JS, Meng, L., 2013. Πρόληψη του εκχυλίσματος Cistanche salsa στην ηπατική ίνωση που προκαλείται από τετραχλωράνθρακα σε αρουραίους. Πηγούνι. Βότανο. Med. 5, 199–204.
Yong, J., Tu, PF, 2009. Ανάλυση χημικών συστατικών σε είδη Cistanche. J. Chromatogr. 1216, 1970–1979.
Zhang, X., Li, X., Rena, K., Du, NS, 2003. RP-HPLC προσδιορισμός εχινακοσίδης καιακτεοσίδησεHerbaΚιστανάκιακαλλιεργείται σε διάφορα παρασιτικά είδη και ενδιαιτήματα. Πηγούνι. J. Pharm. Πρωκτικός. 23, 254–256.
Zhou, J., Zhang, Q., Bing Sun, J., Li Sun, X., Zeng, P., 2014. Μικροεξαγωγή υγρής φάσης κοίλων ινών δύο φάσεων με βάση μαγνητορευστό για ταυτόχρονο προσδιορισμόεχινακοσίδη, τουμπουλοσίδη B, ακτεοσίδηκαι ισοακτεοσίδη σε πλάσμα αρουραίου μετά από από του στόματος χορήγηση εκχυλίσματος salsa Cistanche με υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης. J. Pharm. Biomed. Πρωκτικός. 94, 30–35.