Επιδράσεις κατά της κόπωσης των διαιτητικών νουκλεοτιδίων σε ποντίκια

Meihong Xua,b, Rui Lianga,c, Yong Lia,b και Junbo Wanga,b

Meihong Xua,b,Rui Lianga,c, Γιονγκ Λιa,b και Junbo Wanga,b

Για περισσότερες πληροφορίες:ali.ma@wecistanche.com

ΑΦΗΡΗΜΕΝΗ

Ως δομικά στοιχεία των νουκλεϊκών οξέων, τα νουκλεοτίδια είναι απαραίτητα θρεπτικά συστατικά υπό όρους που παρουσιάζουν πολύπλευρες δραστηριότητες. Η παρούσα μελέτη είχε ως στόχο να αξιολογήσει τηνκατά της κούρασηςεπιδράσεις των διαιτητικών νουκλεοτιδίων (NTs) σε ποντίκια και να διερευνήσουν τον πιθανό υποκείμενο μηχανισμό. Τα ποντίκια χωρίστηκαν τυχαία σε τέσσερα πειραματικά σύνολα για την ανίχνευση διαφορετικών δεικτών. Κάθε σετ ποντικών χωρίστηκε στη συνέχεια σε τέσσερις ομάδες: (i) μία ομάδα ελέγχου και (ii) τρεις ομάδες NTs, οι οποίες έλαβαν δίαιτες συμπληρωμένες με NTs σε συγκεντρώσεις {0}} τοις εκατό, {{3} }.04 τοις εκατό , 0,16 τοις εκατό και 0,64 τοις εκατό (wt/wt). Το NTS θα μπορούσε να αυξήσει σημαντικά τον χρόνο αναγκαστικής κολύμβησης, να ενισχύσει τη δραστηριότητα της γαλακτικής αφυδρογονάσης και τα επίπεδα ηπατικού γλυκογόνου, καθώς και να καθυστερήσει τη συσσώρευση αζώτου ουρίας αίματος και γαλακτικού οξέος αίματος σε ποντίκια μετά από 30 ημέρες θεραπείας. NTS επίσης εμφανώςβελτιωμένη κόπωση-προκαλούμενες αλλαγές σε βιοδείκτες οξειδωτικού στρες και αντιοξειδωτικά ένζυμα. Συγκεκριμένα, τα NT αύξησαν τις δραστηριότητες μεταβολικών ενζύμων της μιτοχονδριακής ενέργειας στους σκελετικούς μύες των ποντικών. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι τα NT ασκούναποτελέσματα κατά της κούρασης, που μπορεί να αποδοθεί στην αναστολή του οξειδωτικού στρες και στη βελτίωση της μιτοχονδριακής λειτουργίας στους σκελετικούς μύες. Το NTS θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ως νέος φυσικός παράγοντας για την ανακούφιση της άσκησηςκούραση.

Εισαγωγή

Κούρασηείναι ένα αίσθημα υπερβολικής κόπωσης, το οποίο μπορεί να οδηγήσει σε ένα ευρύ φάσμα σωματικής και ψυχικής αδυναμίας, όπως απροσεξία, απόσπαση της προσοχής και υπνηλία [1,2]. Αυτή η κατάσταση προκύπτει κυρίως από την εξάντληση των πηγών ενέργειας, συμπεριλαμβανομένης της συσσώρευσης τελικών προϊόντωνκούραση, διαταραχή στο εσωτερικό περιβάλλον του σώματος και μείωση των γλυκαιμικών επιπέδων και της κατανάλωσης ηπατικού γλυκογόνου [3]. Η κόπωση είναι υποβέλτιστη κατάσταση υγείας και μπορεί να σχετίζεται με διάφορες ασθένειες. Με επιταχυνόμενους ρυθμούς ζωής και σκληρό κοινωνικό ανταγωνισμό,κούρασηέχει γίνει μια συνηθισμένη κατάσταση. Έτσι, προσπάθειες όπως οι διατροφικές παρεμβάσεις είναι απαραίτητες για τον καθορισμό μιας ασφαλούς και αποτελεσματικής μεθόδου για την πρόληψη της κόπωσης. Το οξειδωτικό στρες έχει αναγνωριστεί ως ένας από τους παράγοντες που οδηγεί σε κόπωση [4]. Τα υψηλά επίπεδα οξειδωτικού στρες οδηγούν σε υπερβολική παραγωγή ενεργών ειδών οξυγόνου (ROS). Αυτά τα είδη είναι εξαιρετικά αντιδραστικά μόρια που προκαλούν υπεροξείδωση λιπιδίων στη δομή της μεμβράνης και βλάπτουν την κυτταρική δομή. Η απελευθέρωση ROS θα μπορούσε να οδηγήσει σε υπεροξείδωση των λιπιδίων στη μιτοχονδριακή μεμβράνη. Τα κατεστραμμένα μιτοχόνδρια βρέθηκαν να μειώνουν την κυτταρική αναπνοή και την παραγωγή τριφωσφορικής αδενοσίνης (ATP). συγκαταλέγονται επίσης στις κύριες αιτίες κόπωσης [5]. Οι παρεμβάσεις που μειώνουν την οξειδωτική βλάβη μπορούν να ανακουφίσουν αποτελεσματικά την κόπωση, όπως προτείνεται από τα ευρήματα της μελέτης ότι τα αντιοξειδωτικά ασκούν ευεργετικά αποτελέσματα στην κόπωση [6,7].

Προηγούμενα ευρήματα δείχνουν ότι η ανάκαμψη από την άσκηση προκλήθηκεκούρασηαπαιτεί αποκατάσταση της βλάβης που έχει συμβεί στο σώμα ή/και προτρέπει την αποβολή των μεταβολικών προϊόντων που έχουν συσσωρευτεί κατά τη διάρκεια της άσκησης [8]. Τα διατροφικά νουκλεοτίδια (NTs) μπορούν να απορροφηθούν και να χρησιμοποιηθούν από όλα τα όργανα, τα οποία μπορεί να επωφεληθούν από μια εξωγενή παροχή για εξοικονόμηση ενέργειας και βελτιστοποίηση της λειτουργίας των οργάνων. Το NTS έχει πολλές ευεργετικές λειτουργίες, συμπεριλαμβανομένης της αντικαρκινικής δραστηριότητας, της ανοσοτροποποίησης, της προστατευτικής ικανότητας του ήπατος και της ομαλοποίησης του μεταβολισμού [9-12]. Επιπλέον, τα NTs παρουσιάζουν ανώτερες αντιοξειδωτικές και αντιγηραντικές ιδιότητες, όπως επιβεβαιώθηκε από την προηγούμενη μελέτη μας [13]. Ωστόσο, μελέτες σχετικά με τις επιδράσεις κατά της κόπωσης των NTs έχουν σπάνια αναφερθεί. Έτσι, η παρούσα μελέτη σχεδιάστηκε για να αξιολογήσει τηνκατά της κούρασηςδραστηριότητα των NTs και να διερευνήσει τον πιθανό υποκείμενο μηχανισμό σε ποντίκια.

Υλικά και μέθοδοι Υλικά και αντιδραστήρια

Η βασική δίαιτα (AIN{0}}Δίαιτα τρωκτικών G) και η δίαιτα συμπληρωμένη με NTs (βασική δίαιτα συμπληρωμένη με 0,4 g, 1,6 g και 6,4 g NTs*kg-1 αντίστοιχα) παρήχθησαν από HFK Bioscience Co. Ltd. (Πεκίνο, Κίνα). Τα NTS που παρέχονται από την Zhen-Ao Biotechnology Ltd. Co. (Dalian, Κίνα) προέρχονται από RNA ζύμης μπύρας. Η περιεκτικότητα σε NT ήταν περισσότερο από 99 τοις εκατό. Αυτό το προϊόν περιείχε 22,8 τοις εκατό 5'-μονοφωσφορική αδενοσίνη (5'-AMP), 26,6 τοις εκατό 5' μονοφωσφορική κυτιδίνη (5'-CMP), 20,4 τοις εκατό 5'-μονοφωσφορική γουανοσίνη (5'-GMP) Να2, και 30 τοις εκατό μονοφωσφορική 5'-γουανοσίνη (5'-GMP' μονοφωσφορική). -UMP) Na2. Τα διαιτητικά συστατικά αναμίχθηκαν επιμελώς σε ένα μείγμα, έγιναν σφαιρίδια και ξηράνθηκαν στον αέρα σε θερμοκρασία δωματίου. Τα κιτ δοκιμασίας που χρησιμοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό του αζώτου ουρίας αίματος (BUN) και της γαλακτικής αφυδρογονάσης (LDH) αγοράστηκαν από την Yingkexinchuang Science and Technology Ltd. (Μακάο, Κίνα). Τα κιτ ανίχνευσης γαλακτικού οξέος αίματος (BLA), ηπατικού γλυκογόνου, υπεροξειδάσης δισμουτάσης (SOD), υπεροξειδάσης γλουταθειόνης (GSH Px), ηλεκτρικής αφυδρογονάσης (SDH), Na συν -K συν -ATPase και Ca2 συν -Mg2 συν -ATPase δραστηριότητα, και μηλονοδιαλδεΰδη (MDA) αγοράστηκαν από το Nanjing Jiancheng Biotechnology Institute (Nanjing, Κίνα). Όλα τα άλλα αντιδραστήρια που χρησιμοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη ήταν αναλυτικής ποιότητας. Ζώα και θεραπεία Η παρούσα μελέτη, μετά από έγκριση από την Επιτροπή Ιδρυματικής Φροντίδας και Χρήσης Ζώων του Πανεπιστημίου του Πεκίνου (Κωδικός ηθικής έγκρισης: LA2015081, Φεβρουάριος 2015), χρησιμοποίησε συνολικά 160 αρσενικά ποντίκια ICR (ηλικίας 6–8 εβδομάδων, 18–22 g ), τα οποία προμηθεύτηκαν από το Animal Service of Health Science Center του Πανεπιστημίου του Πεκίνου.

Στεγάστηκαν σε θερμοκρασία 25 ± 1◦C, υγρασία 50–60 τοις εκατό και διατηρήθηκαν σε κύκλο φωτός-σκότους 12 ωρών:12 ωρών, με ελεύθερη πρόσβαση σε τυπική τροφή και νερό. Όλα τα ζώα αντιμετωπίστηκαν σύμφωνα με τις Αρχές Εργαστηριακής Φροντίδας Ζώων (δημοσίευση NIH Νο. 85–23, αναθεωρημένο 1985) και τις οδηγίες της Επιτροπής Ερευνών Ζώων του Πανεπιστημίου του Πεκίνου. Μετά από εγκλιματισμό για 1 εβδομάδα, τα ποντίκια χωρίστηκαν τυχαία σε τέσσερα πειραματικά σύνολα (n=40). Κάθε σετ ποντικών στη συνέχεια χωρίστηκε σε τέσσερις ομάδες (n {= 10): ομάδα ελέγχου και τρεις ομάδες παρέμβασης NTs που ορίστηκαν ως ομάδα χαμηλής δόσης (NTs-L), ομάδα μέσης δόσης (NTs-M ), και ομάδα υψηλής δόσης (NTs-H). Τα ποντίκια ελέγχου τράφηκαν με δίαιτα τρωκτικών (Vital River Ltd. Co., Beijing). Τα ποντίκια στις τρεις πειραματικές ομάδες τράφηκαν με 0,01 τοις εκατό , 0,16 τοις εκατό ή 0,64 τοις εκατό (wt/wt) NTs στη δίαιτα, αντίστοιχα. Οι δόσεις αναφέρονται στην προηγούμενη μελέτη στο εργαστήριό μας [11-13]. Τα πειραματικά ποντίκια χορηγήθηκαν με καθετήρα για 30 ημέρες και στη συνέχεια χρησιμοποιήθηκαν για περαιτέρω πειράματα. Δοκιμή αναγκαστικής κολύμβησης Ποντίκια από το Πειραματικό Σετ 1 χρησιμοποιήθηκαν για τη δοκιμασία αναγκαστικής κολύμβησης. Πραγματοποιήθηκε ένα τεστ αναγκαστικής κολύμβησης όπως περιγράφηκε προηγουμένως [3]. Εν συντομία, 30 λεπτά μετά τις τελικές θεραπείες, τα ποντίκια τοποθετήθηκαν μεμονωμένα σε μια πισίνα γεμάτη με νερό (25 ± 1◦ C) σε βάθος 30 cm με ένα περίβλημα μολύβδου (5 τοις εκατό του σωματικού βάρους του ποντικού) προσαρτημένο στο ουραία ρίζα κάθε ποντικιού.

Ο χρόνος κολύμβησης καταγράφηκε αμέσως όταν εξαντλήθηκε η φυσική δύναμη του ποντικιού και δεν μπορούσε να ανέβει στην επιφάνεια για περισσότερο από 10 δευτερόλεπτα. Βιοχημική δοκιμασία Ποντίκια από το Πειραματικό Σετ 2 χρησιμοποιήθηκαν για βιοχημική δοκιμασία. Τριάντα λεπτά μετά την τελική από του στόματος χορήγηση, τα ποντίκια αναγκάστηκαν να κολυμπήσουν σε νερό στους 30°C για 90 λεπτά χωρίς κανένα φορτίο. Μετά από ανάπαυση για μία ώρα, λήφθηκε δείγμα αίματος από τους οφθαλμικούς βολβούς και τους σκελετικούς μύες (τετρακέφαλος μηριαίος και των δύο πίσω ποδιών) των ποντικών. Ο ορός παρασκευάστηκε με φυγοκέντρηση στις 2000 rpm στους 4°C για 15 λεπτά. Η περιεκτικότητα BUN και η δραστικότητα LDH στον ορό μετρήθηκαν με έναν αυτόματο βιοχημικό αναλυτή (Olympus Corporation, Τόκιο, Ιαπωνία). Τα επίπεδα SOD, GSH Px, SDH, Na συν K συν -ATPase, Ca2 συν -Mg2 συν -ATPase και τα επίπεδα MDA στους σκελετικούς μύες προσδιορίστηκαν με κιτ ανίχνευσης σύμφωνα με τις οδηγίες.

Προσδιορισμός γαλακτικού οξέος αίματος

Οι συγκεντρώσεις του BLA προσδιορίστηκαν σε ποντίκια από το Πειραματικό Σετ 3. Τριάντα λεπτά μετά την τελική από του στόματος χορήγηση, τα ποντίκια αναγκάστηκαν να κολυμπήσουν σε νερό στους 30◦C για 10 λεπτό χωρίς φορτία. Το αίμα ελήφθη σε τρία σημεία: κατά την έναρξη, 0 λεπτά μετά την κολύμβηση και 20 λεπτά μετά την κολύμβηση. Μια ποσότητα 20 μL αίματος συλλέχθηκε με ακρίβεια από τη γωνιακή φλέβα των ποντικών με γυάλινο τριχοειδές κάθε φορά και στη συνέχεια μετακινήθηκε αμέσως στον πυθμένα ενός σωλήνα φυγοκέντρησης 5 mL, ο οποίος ενώθηκε με 0,48 ml διαλύματος φθοριούχου νατρίου 1 τοις εκατό εκ των προτέρων. Το τριχοειδές γυαλί ξεπλύθηκε με υπερκείμενο αρκετές φορές. Οι συγκεντρώσεις του BLA προσδιορίστηκαν σύμφωνα με τις διαδικασίες που παρέχονται από τα κιτ.

Εξέταση ηπατικού γλυκογόνου

Ποντικοί από το Πειραματικό Σετ 4 χρησιμοποιήθηκαν για να εξετάσουν το ηπατικό γλυκογόνο. Τριάντα λεπτά μετά την τελευταία χορήγηση NTs, τα ποντίκια θανατώθηκαν και τα συκώτιά τους απομονώθηκαν αμέσως και ομογενοποιήθηκαν σε διάλυμα 10 τοις εκατό με φυσιολογικό ορό στους 4°C. Τα επίπεδα ηπατικού γλυκογόνου προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας διαθέσιμα κιτ.

Στατιστική ανάλυση

Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέση ± τυπική απόκλιση (SD). Οι διαφορές μεταξύ των ομάδων αναλύθηκαν με μονόδρομη δοκιμασία ANOVA ακολουθούμενη από το post hoc τεστ ελάχιστης σημαντικής διαφοράς του Tukey εάν ​​οι διακυμάνσεις ήταν ίσες ή το τεστ Τ3 του Tamhane εάν οι διακυμάνσεις δεν ήταν ίσες. p < 0.05="" θεωρήθηκε="">

Αποτελέσματα Επιδράσεις των NT στο σωματικό βάρος ποντικών

Οι επιδράσεις των NT στο σωματικό βάρος των ποντικών κατά τη διάρκεια του πειράματος φαίνονται στον Πίνακα 1. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι δεν υπήρχαν στατιστικά σημαντικές διαφορές στο σωματικό βάρος μεταξύ των ομάδων ελέγχου και NTs στο Πειραματικό Σετ 1, 2, 3 και 4, αντίστοιχα

Επιδράσεις των NTs στο τεστ αναγκαστικής κολύμβησης

Οι επιδράσεις των NTs στον χρόνο αναγκαστικής κολύμβησης των ποντικών φαίνονται στο Σχήμα 1. Όπως αναμενόταν, σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, ο χρόνος αναγκαστικής κολύμβησης και στις τρεις ομάδες NTs ήταν μεγαλύτερος και η διαφορά ήταν στατιστικά σημαντική στους NTs-M και NTs-H (ρ < 0.05).="" γενικά,="" σε="" σύγκριση="" με="" την="" ομάδα="" ελέγχου,="" ο="" χρόνος="" αναγκαστικής="" κολύμβησης="" στα="" nts-l,="" nts-m="" και="" nts-h="" αυξήθηκε="" κατά="" 51,23="" τοις="" εκατό="" ,="" 86,57="" τοις="" εκατό="" και="" 71,23="" τοις="" εκατό,="">

Επιδράσεις των NTs στη γαλακτική αφυδρογονάση (LDH), στο άζωτο ουρίας του αίματος (BUN) και στην περιεκτικότητα σε ηπατικό γλυκογόνο σε ποντικούς

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 1, σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, η δραστηριότητα της LDH αυξήθηκε σημαντικά σε NTs-M (p < 0.05)="" και="" τα="" επίπεδα="" bun="" μειώθηκαν="" σημαντικά="" και="" στα="" τρία="" nts-="" ομάδες="" που="" αντιμετωπίζονται="" (p="">< 0.05).="" ωστόσο,="" τα="" επίπεδα="" ηπατικού="" γλυκογόνου="" των="" ποντικών="" βελτιώθηκαν="" στις="" ομάδες="" nts="" χωρίς="" αξιοσημείωτες="" διαφορές="" στη="" σύγκριση="" με="" την="" ομάδα="" ελέγχου="" (p=""> 0,05), γεγονός που δείχνει ότι τα NTs δεν είχαν καμία επίδραση στα επίπεδα γλυκογόνου.

Επιδράσεις των NTs στα επίπεδα γαλακτικού οξέος (BLA) στο αίμα σε ποντίκια

Τα αποτελέσματα σχετικά με τις επιδράσεις των NTs στο BLA σε ποντικούς σε διαφορετικά χρονικά σημεία φαίνονται στο Σχήμα 2. Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων κατά την έναρξη. Τα επίπεδα BLA των 0 λεπτών μετά την κολύμβηση ήταν αξιοσημείωτα αυξημένα σε σύγκριση με την αρχική τιμή σε όλες τις ομάδες (p < 0.05).="" ομοίως,="" σε="" σύγκριση="" με="" την="" αρχική="" γραμμή,="" υπήρχαν="" σημαντικές="" διαφορές="" μεταξύ="" της="" γραμμής="" βάσης="" και="" 2{{1{{{0}}="" λεπτών="" μετά="" την="" κολύμβηση,="" στην="" ομάδα="" ελέγχου="" και="" nts-l="" (p="">< 0.{{17}="" }5).="" σε="" σύγκριση="" με="" την="" ομάδα="" ελέγχου,="" οι="" συγκεντρώσεις="" του="" bla="" στα="" nts-m="" και="" nts-h="" μειώθηκαν="" σημαντικά="" στα="" 0="" λεπτά="" μετά="" την="" κολύμβηση="" (p="">< 0,05).="" στα="" 20="" λεπτά="" μετά="" την="" κολύμβηση,="" οι="" συγκεντρώσεις="" του="" bla="" στην="" ομάδα="" nts-h="" μειώθηκαν="" σημαντικά="" (p="">< 0,05).="" μετά="" τη="" θεραπεία="" με="" nts,="" η="" περιοχή="" κάτω="" από="" την="" καμπύλη="" bla="" (auc)="" μειώθηκε="" επίσης="" σε="" σύγκριση="" με="" την="" ομάδα="" ελέγχου="" (ρ="">< 0,05="" για="" nts-m="" και="">

Επιδράσεις των NTs στις παραμέτρους του οξειδωτικού στρες σε σκελετικούς μύες ποντικών

Τα επίπεδα SOD, GSH-Px και MDA παρουσιάζονται στον Πίνακα 2 για την αξιολόγηση του επιπέδου οξειδωτικού στρες στους σκελετικούς μύες των ποντικών. Μετά τη θεραπεία, οι δραστηριότητες των SOD και GSH-Px, στις ομάδες NTs-M και NTs-H, βελτιώθηκαν σημαντικά σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (p < 0.05)="" .="" επιπλέον,="" τα="" επίπεδα="" mda="" στους="" σκελετικούς="" μυς="" ήταν="" σημαντικά="" μειωμένα="" στις="" ομάδες="" nts="" (p="">< 0,05)="" σε="" σύγκριση="" με="" την="" ομάδα="">

Επίδραση των NTs στις δραστηριότητες του μεταβολικού ενζύμου μιτοχονδριακής ενέργειας σε σκελετικούς μύες ποντικών

Η δραστικότητα SDH, Na συν -Κ συν -ATPase και Ca2 συν -Mg2 συν -ATPase παρουσιάζονται στον Πίνακα 3 για την αξιολόγηση του επιπέδου του μεταβολικού ενζύμου Μιτοχονδριακής Ενέργειας σε σκελετικούς μύες ποντικών. Μετά τη θεραπεία, η δραστηριότητα των SDH και Ca2 συν -Mg2 συν -ATPase βελτιώθηκε σημαντικά σε NTs-M (ρ < 0.05).="" ομοίως,="" η="" δραστηριότητα="" της="" na="" συν="" -κ="" συν="" -atpase="" στους="" σκελετικούς="" μυς="" αυξήθηκε="" σημαντικά="" στις="" ομάδες="" nts-m="" και="" nts-h="" (p="">< 0.05)="" σε="" σύγκριση="" με="" την="" ομάδα="" ελέγχου.="" συζήτηση="" με="" τις="" πολύπλευρες="" δραστηριότητές="" τους,="" τα="" nt="" έχουν="" αποκτήσει="" αυξανόμενη="" δημοτικότητα="" ως="" συμπληρώματα="" διατροφής.="" ένας="" αριθμός="" αναφορών="" έχει="" δείξει="" ότι="" η="" προσθήκη="" nts="" σε="" διαιτητικές="" φόρμουλες="" αυξάνει="" την="" παραγωγή="" ανοσοσφαιρινών,="" βελτιώνει="" την="" ανταπόκριση="" στα="" εμβόλια,="" μειώνει="" τη="" νοσηρότητα="" και="" αυξάνει="" την="" ανοχή="" στα="" διατροφικά="" αντιγόνα="" [12,14].="" οι="" προηγούμενες="" μελέτες="" μας="" διαπίστωσαν="" ότι="" τα="" nt="" δεν="" είναι="" τοξικά="" ή="" καρκινογόνα="" σε="" επίμυες="" σε="" συγκέντρωση="" έως="" και="" 0,64="" τοις="" εκατό="" (του="" σωματικού="" βάρους)="" για="" ολόκληρη="" τη="" διάρκεια="" της="" ζωής="" τους="" και="" θα="" μπορούσαν="" να="" παρατείνουν="" τη="" διάρκεια="" ζωής="" σε="" αρουραίους="" sd="" με="" δοσοεξαρτώμενο="" τρόπο="" [13].="" από="" όσο="" γνωρίζουμε,="" η="" παρούσα="" μελέτη="" είναι="" η="" πρώτη="" που="" αναφέρει="" ότι="" η="" διατροφική="" συμπλήρωση="" nts="" βελτιώνει="" την="" κόπωση.="" βρήκαμε="" επίσης="" ότι="" τα="" nts="" θα="" μπορούσαν="" να="" αυξήσουν="" τον="" χρόνο="" αναγκαστικής="" κολύμβησης,="" τη="" δραστηριότητα="" ldh="" και="" τα="" επίπεδα="" ηπατικού="" γλυκογόνου,="" ταυτόχρονα,="" τα="" nts="" θα="" μπορούσαν="" να="" μειώσουν="" τα="" περιεχόμενα="" bun="" και="" bla="" σε="" ποντίκια.="" η="" δράση="" κατά="" της="" κόπωσης="" μπορεί="" να="" σχετίζεται="" με="" την="" αναστολή="" του="" οξειδωτικού="" στρες="" και="" τη="" βελτίωση="" της="" μιτοχονδριακής="" δραστηριότητας.="" η="" επαναλαμβανόμενη="" και="" παρατεταμένη="" σωματική="" εργασία="" οδηγεί="" σε="" κόπωση,="" προκαλώντας="" συστηματικές="" αλλοιώσεις,="" συμπεριλαμβανομένων="" ενδοκρινικών,="" ανοσολογικών="" και="" μεταβολικών="" δυσλειτουργιών="">

Η χρήση δοκιμών αναγκαστικής κολύμβησης παρέχει ένα ικανοποιητικό πειραματικό μοντέλο για την αξιολόγηση των δραστηριοτήτων κατά της κόπωσης σε ποντίκια [16]. Στην παρούσα μελέτη, η θεραπεία με NT παρέτεινε το χρόνο μέχρι την εξάντληση των ποντικών, ιδιαίτερα στις ομάδες που έλαβαν θεραπεία με NTs σε 0,16% και 0,64%, υποδεικνύοντας τα αποτελέσματα κατά της κόπωσης των NTs σε ποντίκια . Για την περαιτέρω μελέτη της ιδιότητας κατά της κόπωσης των NTs, μετρήθηκαν αρκετοί βιοχημικοί δείκτες για την κόπωση, συμπεριλαμβανομένων των BUN, LDH, BLA και ηπατικού γλυκογόνου. Το BUN σχηματίζεται στο ήπαρ ως μεταβολικό προϊόν πρωτεΐνης και αμινοξέος. είναι ένας από τους βιοχημικούς δείκτες του αίματος που σχετίζονται με την κόπωση. Με την αυξημένη άσκηση, η ενέργεια από τον καταβολισμό της ζάχαρης και του λίπους γίνεται ανεπαρκής για το σώμα. Οι πρωτεΐνες και τα αμινοξέα παρουσιάζουν ισχυρότερο καταβολισμό για να αντισταθμίσουν την κατανάλωση ενέργειας, γεγονός που προκαλεί αύξηση του BUN [17]. Παρατηρείται μια αξιοσημείωτη θετική συσχέτιση μεταξύ του επιπέδου BUN και του βαθμού κόπωσης [18]. Κατά τη διάρκεια παρατεταμένων ασκήσεων, δημιουργείται περίσσεια γαλακτικού οξέος και συσσωρεύεται στους σκελετικούς μύες, οδηγώντας σε μυϊκή κόπωση [19]. Επομένως, το BLA μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως δείκτης κόπωσης. Επιπλέον, το γλυκογόνο είναι ένα σημαντικό ενεργειακό υλικό που επιτρέπει την κίνηση και παρέχει επαρκή ενέργεια για τη σύσπαση των μυών. Η χρήση ενέργειας μειώνει το γλυκογόνο. Εν τω μεταξύ, μια αύξηση του ηπατικού γλυκογόνου μπορεί να βελτιώσει την αντοχή στην άσκηση [20].

Στην παρούσα μελέτη, τα NTs μπορούν να αυξήσουν τη δραστηριότητα της LDH και τα επίπεδα ηπατικού γλυκογόνου, καθώς και να μειώσουν τα περιεχόμενα BUN και BLA σε ποντίκια. Η υψηλή κατανάλωση ενέργειας κατά τη διάρκεια της έντονης άσκησης μπορεί να προκαλέσει ανισορροπία μεταξύ των συστημάτων οξείδωσης και αντιοξείδωσης, με αποτέλεσμα την αύξηση του ROS και τη μείωση των αντιοξειδωτικών δραστηριοτήτων. Αυτές οι συμπεριφορές οδηγούν σε βελτιωμένη παραγωγή ROS. Το οξειδωτικό στρες εμπλέκεται τόσο στη χρόνια κόπωση όσο και σε άλλες διαταραχές που σχετίζονται με την κόπωση [21]. Το ακραίο σωματικό στρες θα μπορούσε να οδηγήσει σε υπερβολική δημιουργία ROS στους σκελετικούς μυς που, με τη σειρά του, οδηγεί σε περιφερική κόπωση [22,23]. Τα επίπεδα SOD, GSH-Px και MDA, τα οποία γενικά υποδεικνύουν την ικανότητα του αντιοξειδωτικού αμυντικού συστήματος, μετρήθηκαν για να αξιολογηθεί η αντιοξειδωτική δράση των NTs. Το SOD και το GSH-Px είναι σημαντικά ενζυμικά αντιοξειδωτικά συστήματα για τον καθαρισμό των ελεύθερων ριζών και των μεταβολιτών τους [24]. Το MDA είναι ένα από τα προϊόντα αποδόμησης της υπεροξείδωσης των λιπιδίων, ένας σημαντικός δείκτης για την αξιολόγηση του κυτταρικού οξειδωτικού στρες [25]. Μελέτες έδειξαν ότι τα NTs παρουσιάζουν αξιοσημείωτες αντιοξειδωτικές δράσεις [11,13]. Τα αποτελέσματά μας πρότειναν ότι τα αποτελέσματα κατά της κόπωσης των NTs σχετίζονται στενά με την προστασία της σωματιδιακής μεμβράνης βελτιώνοντας τις δραστηριότητες πολλών ενζύμων και αποτρέποντας την οξείδωση των λιπιδίων. Στην παρούσα μελέτη, η μιτοχονδριακή λειτουργία βελτιώθηκε στους σκελετικούς μύες των ποντικών μετά από θεραπεία με NT.

Απαιτείται συνεχής παραγωγή ATP στα μυοκύτταρα για τη διατήρηση παρατεταμένης φυσικής δραστηριότητας. Το μιτοχόνδριο είναι ένα σημαντικό ενδοκυτταρικό οργανίδιο στα ευκαρυωτικά κύτταρα, το οποίο είναι ο κύριος τόπος οξειδωτικής φωσφορυλίωσης και παραγωγής ΑΤΡ στα κύτταρα των θηλαστικών. Επιπλέον, το μιτοχόνδριο παίζει σημαντικό μεσολαβητικό ρόλο στο οξειδωτικό στρες [26]. Κατά συνέπεια, η μιτοχονδριακή λειτουργία στους σκελετικούς μύες συμβάλλει στην κόπωση που προκαλείται από την άσκηση. Στην παρούσα μελέτη, οι δραστηριότητες της SDH, Na συν -Κ συν -ATPase, και Ca2 συν -Mg2 συν -ATPase μετρήθηκαν για την αξιολόγηση της μιτοχονδριακής λειτουργίας. Ο ενεργειακός μεταβολισμός περιλαμβάνει τον αναβολισμό και τον καταβολισμό, με τη συμμετοχή πολλών βιολογικών ενζύμων [27]. Το Na συν -K συν -ATPase και το Ca2 συν -Mg2 συν -ATPase είναι τα δύο κύρια ένζυμα αποικοδόμησης του ATP, τα οποία μπορούν να υδρολύσουν το ATP για να παρέχουν άμεση ελεύθερη ενέργεια [28]. Διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στη διατήρηση των φυσιολογικών λειτουργιών της μεταφοράς υλικών, της μετατροπής ενέργειας και της μετάδοσης πληροφοριών [29]. Το Na συν -K συν -ATPase και το Ca2 συν -Mg2 συν -ATPase είναι μεταξύ των κύριων παραγόντων που ευθύνονται για την κόπωση [30-32]. Επιπλέον, το SDH είναι ένα ένζυμο περιορισμού του ρυθμού που σχετίζεται με τη ρύθμιση της γλυκολυτικής οδού στον κύκλο του Krebs και την κατάλυση της σύνθεσης ATP [27]. Οι δραστηριότητες αυτών των ενζύμων μπορεί να είναι σημαντικές στον ενεργειακό μεταβολισμό

ο σκελετικός μυς υπό κόπωση. Υπό κανονικές συνθήκες, οι ενζυμικές δραστηριότητες ρυθμίζονται για τη διατήρηση της ισορροπίας μεταξύ αναβολισμού και καταβολισμού. Υπό συνθήκες κόπωσης, παρατηρήθηκαν χαμηλά επίπεδα SDH, Na συν -Κ συν -ATPase, και Ca2 συν Mg2 συν -ATPase δραστηριότητα στους σκελετικούς μυς. Αυτό το εύρημα έδειξε ότι έλαβε χώρα υδρόλυση ΑΤΡ, υποδηλώνοντας μιτοχονδριακή βλάβη, και ότι η ισορροπία χάθηκε, λόγω των μειωμένων επιπέδων Na συν -Κ συν - ΑΤΡάση και Ca2 συν -Mg2 συν -ΑΤΡάση. Ωστόσο, στην παρούσα μελέτη, διαπιστώσαμε ότι τα NTs θα μπορούσαν να βελτιώσουν τη μιτοχονδριακή λειτουργία στους σκελετικούς μύες των ποντικών ενισχύοντας τις δραστηριότητες ενεργειακών μεταβολικών ενζύμων, όπως SDH, Na συν -K συν -ATPase και Ca2 συν -Mg2 συν -ATPase , καταστέλλοντας έτσι το οξειδωτικό στρες και δημιουργώντας περισσότερο ATP για συμπλήρωμα ενέργειας [33,34].

συμπεράσματα

Τα συνδυασμένα μας αποτελέσματα έδειξαν για πρώτη φορά ότι τα NT ασκούν αντι-κόπωση. Τα NTs θα μπορούσαν να αυξήσουν τον χρόνο αναγκαστικής κολύμβησης των ποντικών ενισχύοντας τη δραστηριότητα LDH και τα επίπεδα ηπατικού γλυκογόνου και καθυστερώντας τη συσσώρευση BUN και BLA. Τα NTs θα μπορούσαν επίσης να βελτιώσουν τη μιτοχονδριακή λειτουργία και να αναστείλουν το οξειδωτικό στρες στους σκελετικούς μύες των ποντικών, το οποίο μπορεί να είναι μια οδός δράσης των επιδράσεων κατά της κόπωσης. Τα NTs θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν ως νέος φυσικός παράγοντας για την ανακούφιση της κόπωσης από την άσκηση. Απαιτείται περαιτέρω έρευνα in vitro για να διερευνηθεί ο ακριβής μοριακός μηχανισμός με τον οποίο τα NT παίζουν το ρόλο τους στα αποτελέσματα κατά της κόπωσης.

Οφέλη και παρενέργειες για την κούραση, κάντε κλικ στη φωτογραφία για να το cistanche tubulosa

βιβλιογραφικές αναφορές

[1] Moriura T, Matsuda H, Kubo M. Pharmacological study on Agkistrodon blomhofi OIE. V. επίδραση κατά της κόπωσης του εκχυλίσματος αιθανόλης 50 τοις εκατό σε αρουραίους που υποβλήθηκαν σε αγωγή με αναγκαστική κολύμβηση με οξεία φόρτιση βάρους. Biol Pharm Bull.1996;19(1):62–66. 

[2] Kim KM, Yu KW, Kang DH, et al. Επιδράσεις κατά του στρες και κατά της κούρασης του πίτουρου ρυζιού που έχει υποστεί ζύμωση. Biosci Biotechnol Biochem.2001;65(10):2294–2296. 

[3] Tan W1, Yu KQ, Liu YY, et al. Δραστηριότητα κατά της κόπωσης πολυσακχαριτών που εκχυλίζονται από Radix Rehmanniae Preparata. Int J Biol Macromol.2012;50(1):59–62. 

[4] Azizbeigi K, Stannard SR, Atashak S, et al. Αντιοξειδωτικά ένζυμα και προσαρμογή οξειδωτικού στρες στην προπόνηση άσκησης: σύγκριση αντοχής, αντίστασης και ταυτόχρονης προπόνησης σε μη προπονημένους άνδρες. J Exerc Sci Fitness.2014;12(1):1–6. 

[5] Ecstasy KS, Roussel D, St-Pierre J, et al. Το υπεροξείδιο ενεργοποιεί τις μιτοχονδριακές πρωτεΐνες αποσύνδεσης. Φύση.2002;415(6867):96–99. 

[6] Wang X, Xing R, Chen Z, et al. Επίδραση και μηχανισμός των πεπτιδίων σκουμπριού (Pneumatophorus japonicus) για την καταπολέμηση της κόπωσης. Λειτουργία Τροφίμων.2014;5(9):2113–2119. 

[7] Lee JS, Kim HG, Han JM, et al. Επίδραση κατά της κόπωσης του Myelophil σε μοντέλο ποντικιού χρόνιας εξαναγκαστικής άσκησης. Eur J Pharmacol.2015;764:100–108. 

[8] Chi A, Li H, Kang C, et al. Δραστηριότητα κατά της κόπωσης νέων συζυγών πολυσακχαριτών από το πράσινο τσάι Ziyang. Int J Biol Macromol.2015;80:566–572.

[9] Martinez-Puig D, Manzanilla EG, Morales J, et al. Η συμπλήρωση διατροφικών νουκλεοτιδίων μειώνει την εμφάνιση διάρροιας σε χοίρους που έχουν απογαλακτιστεί πρόωρα. Livest Sci.2007;108:276–279. 

[10] Cai X, Bao L, Wang N, et al. Συμπλήρωμα διαιτητικών νουκλεοτιδίων και ηπατική βλάβη σε αρουραίους που έλαβαν αλκοόλη: μια έρευνα μεταβολισμού. Μόρια.2016;21(4):435.

[11] Cai X, Bao L, Wang N, et al. Τα διατροφικά νουκλεοτίδια προστατεύουν από την αλκοολική ηπατική βλάβη εξασθενώντας τη φλεγμονή και ρυθμίζοντας τη μικροχλωρίδα του εντέρου σε αρουραίους. Λειτουργία Τροφίμων.2016;7(6):2898–2908. 

[12] Xu M, Zhao M, Yang R, et al. Επίδραση των διατροφικών νουκλεοτιδίων στην ανοσολογική λειτουργία σε ποντικούς Balb/C. Int Immunopharmacol.2013;17(1):50–56. 

[13] Xu M, Liang R, Guo Q, et al. Τα διατροφικά νουκλεοτίδια παρατείνουν τη διάρκεια ζωής σε αρουραίους Sprague-Dawley. J Nutr Υγεία Γήρανση.2013;17(3):223–229. 

[14] Che L, Hu L, Liu Y, et al. Η συμπλήρωση διαιτητικών νουκλεοτιδίων βελτιώνει την εντερική ανάπτυξη και την ανοσολογική λειτουργία των νεογνών με ενδομήτριο περιορισμό ανάπτυξης σε μοντέλο χοίρου. PLoS One.2016;11(6): e0157314. [15] Chaudhuri A, Behan PO. Κόπωση σε νευρολογικές διαταραχές. Νυστέρι.2004;363(9413):978–988. 

[16] You L, Ren J, Yang B, et al. Δραστηριότητες κατά της κόπωσης των υδρολυμάτων πρωτεΐνης Loach με διαφορετικές αντιοξειδωτικές δράσεις. J Agric Food Chem.2012;60(50):12324– 12331. 

[17] Li X, Zhang H, Xu H. Ανάλυση χημικών συστατικών των πολυσακχαριτών shiitake και η δράση κατά της κόπωσης υπό δόνηση. Int J Biol Macromol.2009;45 (4):377–380. 

[18] Huang WC, Chiu WC, Chuang HL, et al. Επίδραση του συμπληρώματος κουρκουμίνης στη φυσιολογική κόπωση και τη σωματική απόδοση σε ποντίκια. ΘΡΕΠΤΙΚΕΣ ουσιες.2015;7(2):905–921. 

[19] Gibson H, Edwards RH. Μυϊκή άσκηση και κόπωση. Sports Med.1985;2(2):120–132.

[20] Anand T, Phani Kumar G, Pandareesh MD, et al. Επίδραση του εκχυλίσματος βακοζίτη από Bacopa monniera στη σωματική κόπωση που προκαλείται από την αναγκαστική κολύμβηση. Phytother Res.2012;26(4):587–593.

[21] Barclay JK, Hansel M. Οι ελεύθερες ρίζες μπορεί να συμβάλλουν στην οξειδωτική κόπωση των σκελετικών μυών. Can J Physiol Pharmacol.1991;69(2):279–284. 

[22] Allen DG, Lamb GD, Westerblad H. Κόπωση σκελετικών μυών: κυτταρικοί μηχανισμοί. Physiol Rev.2008;88(1):287–332. 

[23] Westerblad H, Allen DG, Lännergren J. Μυϊκή κόπωση: γαλακτικό οξύ ή ανόργανο φωσφορικό άλας η κύρια αιτία; News Physiol Sci.2002;17:17–21. 

[24] Elias RJ, Kellerby SS, Decker EA. Αντιοξειδωτική δράση πρωτεϊνών και πεπτιδίων. Crit Rev Food Sci Nutr.2008;48 (5):430–441. 

[25] Bagis S, Tamer L, Sahin G, et al. Ελεύθερες ρίζες και αντιοξειδωτικά στην πρωτογενήινομυαλγία: διαταραχή οξειδωτικού στρες; Rheumatol Int.2005;25(3):188–190. 

[26] Sivitz WI, Yorek MA. Μιτοχονδριακή δυσλειτουργία στο διαβήτη: από τους μοριακούς μηχανισμούς στη λειτουργική σημασία και τις θεραπευτικές ευκαιρίες. Σήμα αντιοξειδωτικής οξειδοαναγωγής.2010;12(4):537–577. 

[27] Kolling J, Scherer EB, Siebert C, et al. Η ομοκυστεΐνη προκαλεί ενεργειακή ανισορροπία στους σκελετικούς μυς του αρουραίου: είναι η κρεατίνη προστάτης; Λειτουργία Cell Biochem.2013;31 (7):575–584. 

[28] Huang XP, Tan H, Chen BY, et al. Το εκχύλισμα αστράγαλου ανακουφίζει τον τραυματισμό των νεύρων μετά από εγκεφαλική ισχαιμία βελτιώνοντας τον ενεργειακό μεταβολισμό και αναστέλλοντας την απόπτωση. Biol Pharm Bull.2012;35(4):449–454. 

[29] Scheiner-Bobis G. Η αντλία νατρίου. Οι μοριακές του ιδιότητες και η μηχανική μεταφοράς ιόντων. Eur J Biochem.2002;269(10):2424–2433. 

[30] Leppik JA, Aughey RJ, Medved I, et al. Η παρατεταμένη άσκηση έως κόπωση στους ανθρώπους βλάπτει τη δραστηριότητα Na συν -K συν -ATPase των σκελετικών μυών, την απελευθέρωση Ca2 συν από το σαρκοπλασματικό δίκτυο και την πρόσληψη Ca2 συν. J Appl Physiol (1985).2004;97(4):1414–1423. 

[31] Chauhan VP, Tsiouris JA, Chauhan A, et al. Αυξημένο οξειδωτικό στρες και μειωμένες δραστηριότητες της Ca(2 συν )/Mg(2 συν)-ATPase και Na(συν)/Κ(συν)-ATPase στα ερυθρά αιμοσφαίρια της μαύρης αρκούδας σε χειμερία νάρκη. Life Sci.2002;71(2):153–161. 

[32] Fraser SF, Li JL, Carey MF, et al. Η κόπωση καταστέλλει τη μέγιστη in vitro δραστηριότητα των σκελετικών μυών Na(συν)-Κ(συν)-ATPase σε μη εκπαιδευμένα και εκπαιδευμένα άτομα. J Appl Physiol (1985).2002;93(5):1650–1659. 

[33] Juel C. Οξειδωτικό στρες (γλουταθειονυλίωση) και δραστηριότητα Na, K-ATPase σε σκελετικούς μύες αρουραίου. PLoS One.2014;9(10):e110514. 

[34] Srikanthan K, Shapiro JI, Sodhi K, Ο ρόλος της σηματοδότησης Na/K-ATPase στο οξειδωτικό στρες που σχετίζεται με την παχυσαρκία και την καρδιοαγγειακή νόσο. Μόρια.2016;21(9):1172. pii: E1172.