Επίδραση κατά της κούρασης του ξυδιού Prunus Mume σε αρουραίους που ασκούνται υψηλής έντασης

1 Τμήμα Επιστήμης και Τεχνολογίας Τροφίμων, Εθνικό Πανεπιστήμιο Kyungpook, Daegu 41566, Κορέα; kimjeoho90@gmail.com (J.-HK); kdmoon@knu.ac.kr (K.-DM)

* Αλληλογραφία: kseo@dau.ac.kr; Τηλ.: συν 82-51-200-7565

Επικοινωνία:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Αφηρημένη

Σήμερα, νέοι τύποι ξυδιού έχουν αναπτυχθεί με τη χρήση διαφόρων πρώτων υλών και βιοτεχνολογικών διεργασιών. Ο καρπός του Prunus mume έχει διανεμηθεί εκτενώς στην Ανατολική Ασία και χρησιμοποιείται ως λαϊκό φάρμακο για την κούραση. Σε αυτή τη μελέτη, το ξύδι Prunus mume (PV) παρήχθη με ζύμωση δύο σταδίων και αξιολογήθηκε για τη δράση του κατά της κόπωσης από μυοβλάστες C2C12 και αρουραίους ασκούμενους υψηλής έντασης. Η χορήγηση PV βελτίωσε σημαντικά την αντοχή στο τρέξιμο και τη συσσώρευση γλυκογόνου στο ήπαρ και στους μυς αρουραίων που έλαβαν συμπλήρωμα PV σε σύγκριση με τις ομάδες ελέγχου που έκαναν καθιστική ζωή και ασκούνταν. Επιπλέον, η συμπλήρωση PV προκάλεσε χαμηλότερους βιοδείκτες ορού που σχετίζονται με την κόπωση, για παράδειγμα, αμμωνία, ανόργανο φωσφορικό και γαλακτικό. Οι αρουραίοι στους οποίους χορηγήθηκε PV εμφάνισαν υψηλότερη δραστικότητα γαλακτικής αφυδρογονάσης και δραστικότητα υπεροξειδάσης γλουταθειόνης και χαμηλότερη δραστηριότητα κινάσης κρεατίνης και επίπεδα μηλονδιαλδεΰδης. Επιπλέον, οι φαινολικές ενώσεις σε PV ταυτοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας ανάλυση HPLC. Τα φαινολικά οξέα που αναλύθηκαν στο PV ήταν πρωτοκατεχουικό οξύ, συριγικό οξύ, χλωρογενικό οξύ και τα παράγωγά του. Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι η χορήγηση Φ/Β με αντιοξειδωτικές ιδιότητες συμβάλλει στη βελτίωση της αποκατάστασης της κόπωσης σε εξαντλημένους αρουραίους. Τα ευρήματα αυτής της μελέτης υποδηλώνουν ότι το Φ/Β που περιέχει διάφορα βιοενεργά συστατικά μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως λειτουργικό υλικό κατά της κόπωσης που προκαλείται από άσκηση υψηλής έντασης.

Λέξεις-κλειδιά: Prunus mume; ξύδι; αποτέλεσμα κατά της κόπωσης? άσκηση υψηλής έντασης? φαινολικό οξύ

1. Εισαγωγή

Prunus mume Sieb. et Zucc., που είναι γνωστό ως maesil, ume και meizi, καλλιεργείται ευρέως στην Κορέα, την Ιαπωνία και την Κίνα και έχει χρησιμοποιηθεί για μεγάλο χρονικό διάστημα ως λαϊκή θεραπεία για την πέψη, τη δίψα, την αποτοξίνωση, τον εμετό και τον πυρετό [1. ]. Προηγούμενες μελέτες σχετικά με τις φαρμακολογικές και βιολογικές δραστηριότητες του maesil το έχουν διερευνήσει ως πιθανή πηγή δεσμευτών ελεύθερων ριζών, ως αναστολέα του ιού της γρίπης Α και της κινητικότητας του ελικοβακτηριδίου του πυλωρού, και ως προφλεγμονώδους μεσολαβητή, καθώς και την ικανότητά του για τη βελτίωση της ρευστότητας του αίματος [1-3]. Επιπλέον, το εκχύλισμα maesil έχει αποδειχθεί ότι ασκεί δράση κατά της κόπωσης σε εκπαιδευμένους αρουραίους [4]. Παρόλο που υπάρχει ένας αριθμός μελετών που χρησιμοποιούν εκχύλισμα maesil, οι μελέτες για τα επεξεργασμένα τρόφιμα που χρησιμοποιούν maesil δεν έχουν διερευνηθεί πλήρως. Ως εκ τούτου, αυτή η μελέτη στόχευε στην ανάπτυξη ενός ξιδιού με χρήση maesil και στη διερεύνηση της δράσης του κατά της κόπωσης. Το ξύδι είναι ένα αλκαλικό προϊόν που χρησιμοποιείται εδώ και πολύ καιρό ως απολαυστικό και παραδοσιακό φάρμακο [5]. Πρόσφατα, πολλά είδη ξυδιού έχουν αναπτυχθεί χρησιμοποιώντας θεμελιώδεις πηγές και τεχνολογίες για την ικανοποίηση των αναγκών των πελατών. Επειδή τα κύρια συστατικά του ξιδιού έχουν επιδείξει πολυάριθμα ευεργετικά αποτελέσματα, π.χ. αντιοξειδωτικά, αντιυπερτασικά, αντι-υπεργλυκαιμικά και αντιμικροβιακά αποτελέσματα, καταναλώνεται ευρέως παγκοσμίως [6-9]. Επιπλέον, προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι η χορήγηση οξικού οξέος αυξάνει την αναπλήρωση γλυκογόνου στο ήπαρ και τους σκελετικούς μύες των εξαντλημένων αρουραίων κατά τη διάρκεια της άσκησης και ότι το από του στόματος συμπληρωμένο οξικό διεγείρει τη σύνθεση μυϊκού γλυκογόνου μετά από εντατική άσκηση σε άλογα [10,11]. Αυτές οι μελέτες έχουν προτείνει ότι το ξύδι με συνεχή συμπλήρωση προκαλεί πολύτιμα αποτελέσματα στην ικανότητα άσκησης αντοχής και στην αποκατάσταση από τη σωματική κόπωση. Ωστόσο, οι φυσιολογικές αλλαγές που διέπουν τις επιδράσεις κατά της κόπωσης του ξυδιού maesil δεν είναι ακόμη πλήρως κατανοητές.

Η κόπωση, ένα κοινό σύμπτωμα στις περισσότερες κοινότητες που έχουν βιώσει πολλοί άνθρωποι, θεωρείται ως δυσκολία στην έναρξη ή τη διατήρηση αυθόρμητων δραστηριοτήτων και επιδείνωση της απόδοσης της άσκησης [12]. Πολλές μελέτες έχουν δείξει ότι διάφοροι παράγοντες είναι σημαντικοί όταν εξετάζουμε την κόπωση και την άσκηση. Για παράδειγμα, η υψηλής έντασης εξάντληση που προκαλείται από την άσκηση σχετίζεται με την κόπωση, η οποία υποδηλώνει ότι η ικανότητα του εργαζόμενου μυός έχει υποστεί σοβαρή βλάβη [13]. Επιπλέον, η άσκηση υψηλής έντασης προκαλεί τη μείωση των πηγών ενέργειας, π.χ., το γλυκογόνο του ήπατος και των μυών, καθώς και τη συσσώρευση μεταβολιτών, συμπεριλαμβανομένου του γαλακτικού οξέος, του ανόργανου φωσφόρου και της αμμωνίας που προκαλούν μυϊκή κόπωση από ενδοκυτταρική οξέωση στο σώμα [12. , 14]. Έτσι, η αποκατάσταση από την κόπωση που προκαλείται από την άσκηση απαιτεί την αποκατάσταση της σωματικής βλάβης και την εξάλειψη των μεταβολιτών που συσσωρεύονται κατά τη διάρκεια της άσκησης. Επιπλέον, το οξειδωτικό στρες έχει αναφερθεί ότι προκαλεί διάφορες χρόνιες ασθένειες, π.χ. χρόνια κόπωση, γήρανση του δέρματος, σακχαρώδη διαβήτη, καρκίνους και νόσο του Αλτσχάιμερ [15-18]. Για αυτούς τους λόγους, οι ερευνητές έχουν ερευνήσει φυσικά προϊόντα για την ικανότητά τους να βελτιώνουν τις σωματικές τους ικανότητες, όπως η μείωση της κόπωσης και η αυξημένη αντοχή στην άσκηση με λίγες παρενέργειες. Ως εκ τούτου, στην παρούσα μελέτη, ξύδι που περιέχει υψηλά επίπεδα οργανικών οξέων και αμινοξέων παρήχθη μέσω ζύμωσης δύο σταδίων με τη χρήση μελιού συμπληρωμένου με χυμό αχλαδιού ως υπόστρωμα. Οι δραστηριότητες κατά της κούρασης του ξυδιού Prunus mume (PV) υπολογίστηκαν στη συνέχεια με βάση τις επιδράσεις της κυτταρικής βιωσιμότητας και της συσσώρευσης γλυκογόνου in vitro και τις αλλαγές των βιοδεικτών που σχετίζονται με την κόπωση in vivo.

2. Υλικά και Μμεθόδων

2.1. Υλικά

Ο μουμεχυμός Prunus (PJ) παρήχθη με τη μέθοδο των Cho et al. [19]. Τα φρούτα P. mume (maesil) ελήφθησαν από τον οργανισμό Korea Maesil (Suncheon, Κορέα). Το Maesil ταξινομήθηκε, πλύθηκε σχολαστικά με νερό, συνθλίφθηκε και στη συνέχεια αντέδρασε με 0.1 τοις εκατό (w/v) πηκτινάση (Pectinex Ultra AFP, Novozyme, Ελβετία, 10,000 Pectu/ ζ) να διαταράξει το κυτταρικό τοίχωμα στους 40 ◦C για 2 ώρες. Ακολούθως, το αντιδρών μέιλ φυγοκεντρήθηκε στα 3500 × g για 15 λεπτά στους 4 ◦C. Το υπερκείμενο διηθήθηκε χρησιμοποιώντας διηθητικό χαρτί (Whatman Νο. 2, 8 μm) και συμπυκνώθηκε με περιστροφικό εξατμιστήρα στους 30 ◦C έως ότου επιτεύχθηκε 56-60 ◦Brix. Το εκχύλισμα αχλαδιού ελήφθη από την ESfood Co. (Gunpo, Κορέα), στη συνέχεια διατηρήθηκε στους 4 ◦C για να διατηρηθούν οι ιδιότητές του. Τα χαρακτηριστικά του ήταν τα εξής: 69◦Brix, pH 3,4–3,6 και 0,52–0,61 τοις εκατό οξύτητα. Τα Saccharomyces cerevisiae KCCM 11306 και Acetobacter aceti KCCM 12654 ελήφθησαν από το Korea Culture Center of Microorganisms (Σεούλ, Κορέα).

2.2. Παραγωγή Φ/Β

2.3. Φυσικοχημικές Ιδιότητες Φ/Β

2.3.1. Ολική οξύτητα, περιεκτικότητα σε αλκοόλ και περιεκτικότητα σε ζάχαρη σε ΦΒ

Η περιεκτικότητα σε αλκοόλ του PV μετρήθηκε με υδρόμετρο Gay-Lussac. Εν συντομία, λήφθηκε 100 mL PV από τη φιάλη και φυγοκεντρήθηκε για 10 λεπτά στα 1800 x g για να απαλλαγεί από το Saccharomyces cerevisiae KCCM 11306. Στη συνέχεια, το υπερκείμενο υγρό αποστάχθηκε και επαναρυθμίστηκε στα 100 mL με απεσταγμένο νερό. Στη συνέχεια, η θερμοκρασία του αποστάγματος ψύχθηκε έως ότου έφθασε τους 15 ◦C και στη συνέχεια προσδιορίστηκε η περιεκτικότητα σε αλκοόλη χρησιμοποιώντας υδρόμετρο αλκοόλης. Η περιεκτικότητα σε σάκχαρα του PV μετρήθηκε χρησιμοποιώντας ένα διαθλασίμετρο χειρός (Atago pocket PAL-3, Atago Co., Fukaya, Saitama, Ιαπωνία). Τέλος, η ολική οξύτητα του PV αναλύθηκε με τιτλοδότηση του αραιωμένου δείγματος με 0,1 Ν NaOH μέχρι ρΗ 8,3 και εκφράστηκε ως ποσότητα οξικού οξέος.

2.3.2. Περιεκτικότητα σε οργανικά οξέα και ελεύθερα αμινοξέα σε Φ/Β

Η σύνθεση οργανικού οξέος προσδιορίστηκε με υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (Shimadzu Co. Model Prominence, Kyoto, Ιαπωνία). Ο διαχωρισμός των οργανικών οξέων επιτεύχθηκε χρησιμοποιώντας στήλη PL Hi-Plex Η (7,7 × 300 mm, Agilent Co., Santa Clara, CA, USA) στους 65°C. Η κινητή φάση αποτελούνταν από 5 mM H2SO4 και ο ρυθμός ροής διατηρήθηκε σταθερός στα 0,6 mL/min. Η χρωματογραφική κορυφή που συμπίπτει με κάθε οργανικό οξύ αναγνωρίστηκε συγκρίνοντας τον χρόνο κατακράτησης με αυτόν κάθε προτύπου. Τα περιεχόμενα ελεύθερων αμινοξέων αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας έναν αυτοαναλυτή αμινοξέων (L-8900, Hitachi, Τόκιο, Ιαπωνία) με στήλη ανταλλαγής ιόντων γεμάτη με προσαρμοσμένη ρητίνη ανταλλαγής ιόντων Hitachi (2622 SC PF, 4,6×60 mm). Η στήλη διατηρήθηκε στους 50 ◦C σε κλίβανο στήλης και η θερμοκρασία του αντιδραστήρα ήταν 135 ◦C. Για την κινητή φάση, ένα σύνολο buffer (PF-1, PF{-2, PF-3, PF-4, PF-6, PF-RG, R{ {25}} και C1, Kanto Co., Tokyo, Japan) χρησιμοποιήθηκε με ρυθμό ροής 1 mL/min. Κάθε ελεύθερο αμινοξύ ταυτοποιήθηκε συγκρίνοντας τον χρόνο κατακράτησης με αυτόν του προτύπου διαλύματος τύπου AN-II και B μείγματος αμινοξέων

(FUJIFILM Wako Pure Chemical Co., Οσάκα, Ιαπωνία).

2.4. Κυτταροτοξικότητα και Συσσώρευση Γλυκογόνου in vitro

2.4.1. Κυτταρική καλλιέργεια και διαφοροποίηση

Τα κύτταρα C2C12 (μυοβλάστες ποντικού) αγοράστηκαν από την American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, ND, USA). Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) συμπληρωμένο με 10 τοις εκατό εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS), πενικιλλίνη (100 IU/mL) και στρεπτομυκίνη (100 μg/mL) (Gibco, Life Technologies, Grand Island, NY, ΗΠΑ). Τα κύτταρα C2C12 επωάστηκαν στους 37 ◦C υπό υγροποιημένη ατμόσφαιρα με 5 τοις εκατό συνθήκη CO2. Για να προκληθεί διαφοροποίηση, το 70 τοις εκατό των συρρέοντων κυττάρων στη συνέχεια καλλιεργήθηκαν σε DMEM συμπληρωμένο με 2 τοις εκατό ορό αλόγου (HS) και 10 μg/mL ινσουλίνης για 3 ημέρες με αλλαγές μέσου κάθε δύο ημέρες.

2.4.2. Προσδιορισμός σουλφοροδαμίνης Β (SRB).

Ο κυτταρικός πολλαπλασιασμός αξιολογήθηκε με δοκιμασία σουλφοροδαμίνης Β (SRB, Sigma, St. Louis, ΜΟ, ΗΠΑ). Τα κύτταρα C2C12 σπάρθηκαν σε 1 × 104 κύτταρα/φρεάτιο σε τρυβλία 48-φρεατίων και διαφοροποιήθηκαν με μέσο μεταγωγής. Τα κύτταρα στη συνέχεια επωάστηκαν με 0.1–0,4 μg/mL PV για 3 ημέρες στους 37 ◦C σε επωαστήρα με υγρασία 5 τοις εκατό CO2. Μετά την επεξεργασία, το μέσο απορρίφθηκε και τα κύτταρα χρωματίστηκαν με διάλυμα SRB σε θερμοκρασία δωματίου για 1 ώρα και πλύθηκαν πέντε φορές χρησιμοποιώντας οξικό οξύ 1 τοις εκατό. Κάθε φρεάτιο διαλυτοποιήθηκε με 10 mM Tris και μετρήθηκε στα 540 nm με συσκευή ανάγνωσης μικροπλακών (Molecular Devices, Inc., San Jose, CA, USA)

2.4.3. Περιεκτικότητα σε γλυκογόνο in vitro

2.5. Πειραματικός Σχεδιασμός Ζώων

2.5.1. Ζώα και δίαιτες

Αρσενικοί αρουραίοι Sprague-Dawley (SD) ηλικίας τεσσάρων εβδομάδων αγοράστηκαν από την Hyo-Chang Science Inc. (Busan, Κορέα). Οι αρουραίοι χωρίστηκαν χωριστά σε ακρυλικά κλουβιά και στεγάστηκαν στους 22 ± 2 ◦C σε έναν κύκλο φωτός-σκότους 12 ωρών. Όλοι οι αρουραίοι τράφηκαν με σφαιρίδια εμπορικής τροφής για την πειραματική περίοδο. Οι επίμυες στη συνέχεια χωρίστηκαν τυχαία σε πέντε ομάδες (n=6): καθιστικός έλεγχος (SC), ασκούμενος έλεγχος (EC) και ασκούμενοι αρουραίοι στους οποίους χορηγήθηκε 3 τοις εκατό συμπυκνωμένο χυμό Prunus mume (PJ), 5 τοις εκατό PV αραιωμένο με αποσταγμένο νερό (PV5) και 7,5 τοις εκατό PV αραιωμένο με απεσταγμένο νερό (PV7,5). Όλες οι ομάδες συμπληρώθηκαν με χορήγηση από το στόμα σε συγκέντρωση 7 mL/kg σωματικού βάρους για την πειραματική περίοδο, που θεωρείται ο ημερήσιος όγκος πρόσληψης στον άνθρωπο. Η συμπλήρωση υψηλής συγκέντρωσης οξικού οξέος μπορεί να προκαλέσει φλεγμονή του εντέρου σε αρουραίους. Το PV7.5 χρησιμοποιήθηκε ως υψηλή συγκέντρωση για το πείραμα [12]. Οι αρουραίοι SC και EC χορηγήθηκαν με ίσες ποσότητες απεσταγμένου νερού. Στη συνέχεια, όλοι οι αρουραίοι παρακινήθηκαν να τρέξουν σε διάδρομο. Κατά τη διάρκεια του πειράματος, οι αρουραίοι είχαν ελεύθερη πρόσβαση σε τροφή και νερό μέχρι τις τελευταίες 12 ώρες της πειραματικής περιόδου, οπότε δεν υπήρχε τροφή. Όλοι οι αρουραίοι αντιμετωπίστηκαν αυστηρά σύμφωνα με τις οδηγίες του Πανεπιστημίου Dong-A για τη φροντίδα και τη χρήση εργαστηριακών ζώων (DIACUC-17-1).

2.5.2. Πρόγραμμα σταδιακής φόρτισης άσκησης και τεστ αντοχής σε τρέξιμο

Όλοι οι αρουραίοι εκτός της ομάδας SC εκπαιδεύτηκαν μέσω του προγράμματος άσκησης σταδιακής φόρτισης από 09:00 έως 13:00, 6 ημέρες την εβδομάδα για 4 εβδομάδες χρησιμοποιώντας διάδρομο (Daejong Instrument Industry, Σεούλ, Κορέα) . Το πρόγραμμα περιλαμβάνει σταδιακά αυξημένη ένταση με τρέξιμο στα 20 m/min για 10 λεπτά, 25 m/min για 20 λεπτά, 30 m/min για 20 λεπτά και 35 m/min για 30 λεπτά από τις εβδομάδες 1 έως 4, αντίστοιχα. Όταν οι αρουραίοι είναι εξαντλημένοι και δεν μπορούν να τρέξουν, μια πλακέτα ηλεκτροσόκ στο τέλος του διαδρόμου τους ρύθμιζε να συνεχίσουν να τρέχουν.

Στο τέλος της πειραματικής περιόδου, οι αρουραίοι (n=6) αναγκάστηκαν να τρέξουν με 40 m/min μέχρι να εξαντληθούν και τα ρεκόρ τρεξίματός τους σημειώθηκαν για να προσδιοριστεί η αντοχή στο τρέξιμο. Όλοι οι αρουραίοι αξιολογήθηκαν ως εξαντλημένοι όταν παρέμειναν στον ηλεκτρικό πίνακα για πάνω από 10 δευτερόλεπτα. Τα άλλα (n=6) τοποθετήθηκαν στον διάδρομο με ταχύτητα 40 m/min για 60 λεπτά. Μετά το πείραμα, οι αρουραίοι θυσιάστηκαν με αιθυλαιθέρα και συλλέχθηκαν δείγματα αίματος από την κάτω κοίλη φλέβα και τοποθετήθηκαν σε θερμοκρασία δωματίου για 2 ώρες και στη συνέχεια φυγοκεντρήθηκαν στα 2500 x g για 20 λεπτά για να διαχωριστούν τα δείγματα ορού. Οι μύες του ήπατος και του γαστροκνήμιου συλλέχθηκαν και ξεπλύθηκαν με φυσιολογικό ορό. Όλα τα δείγματα αποθηκεύτηκαν στους -80 ◦C σε βαθιά κατάψυξη.

2.6. Βιοχημικές Παράμετροι

2.6.1. Βιοδείκτες που σχετίζονται με την κόπωση

Τα επίπεδα ανόργανου φωσφορικού ορού και αμμωνίας αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας Biovision Inc. (Milpitas, CA, USA). Τα επίπεδα γαλακτικού στον ορό προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας κιτ δοκιμασίας γαλακτικού οξέος (Bioassay Systems, Hayward, CA, USA).

2.6.2. Ανάλυση των επιπέδων γλυκογόνου σε ήπαρ και μύες

Η περιεκτικότητα σε γλυκογόνο αναλύθηκε σύμφωνα με τη μέθοδο που περιγράφεται από τους Cho et al. [5]. Εν συντομία, 0.2 g ιστών από το ήπαρ και τους μυς αντέδρασαν με 400 μL διαλύματος υδροξειδίου του καλίου 30 τοις εκατό, βράστηκαν για 30 λεπτά και στη συνέχεια ψύχθηκαν στους 25 ◦C. Στη συνέχεια, 1 mL αιθανόλης προστέθηκε στο μίγμα και φυγοκεντρήθηκε στα 6000 × g και στους 4 ◦C για 15 λεπτά. Το υπερκείμενο υγρό στη συνέχεια απομακρύνθηκε και το ίζημα αναμίχθηκε με 0,5 mL απεσταγμένου νερού, μετά το οποίο προστέθηκε 0,2 τοις εκατό διαλύματος ανθρόνης για να υδρολυθεί η γλυκόζη. Τέλος, η απορρόφηση μετρήθηκε στα 620 nm με φασματοφωτόμετρο

2.6.3. Δραστηριότητες της μυϊκής γαλακτικής αφυδρογονάσης (LDH) και της κινάσης της κρεατίνης ορού (CK)

2.6.4. Επίπεδα Δραστηριότητας Μαλονοδιαλδεΰδης (MDA) και Γλουταθειόνης Υπεροξειδάσης (GPx)

Το επίπεδο MDA και η δραστικότητα GPx αξιολογήθηκαν με ομογενοποίηση κλασμάτων 0,1 g του κατεψυγμένου ήπατος σε φυσιολογικό ορό ρυθμισμένο με φωσφορικά (PBS). Μετά την ομογενοποίηση, τα δείγματα φυγοκεντρήθηκαν στα 3500 × g στους 4 ◦C για 10 λεπτά και στη συνέχεια τα υπερκείμενα χρησιμοποιήθηκαν για ανάλυση. Το επίπεδο MDA και η δραστικότητα GPx μετρήθηκαν με χρωματομετρικά κιτ (Biovision Inc., Milpitas, CA, USA).

2.7. Προσδιορισμός της Ολικής Φαινολικής Περιεκτικότητας (TPC)

Η TPC των ΦΒ προσδιορίστηκε με τη χρωματομετρική μέθοδο Folin–Ciocalteu με ορισμένες τροποποιήσεις [19]. Εν συντομία, η PV αντέδρασε με αντιδραστήριο Folin-Ciocalteu και εξουδετερώθηκε με διάλυμα ανθρακικού νατρίου. Στη συνέχεια, η απορρόφηση του μπλε χρώματος μετρήθηκε στα 760 nm με φασματοφωτόμετρο. Ως πρότυπο, χρησιμοποιήθηκε γαλλικό οξύ (Sigma-Aldrich, καθαρότητα > 99 τοις εκατό) και η TPC εκφράστηκε ως mg ισοδύναμα γαλλικού οξέος/g (mg GAE/g) PV.

2.8. Ανάλυση HPLC

2.9. Στατιστική ανάλυση

3. Αποτελέσματα και συζήτηση

3.1. Περιεχόμενα οργανικών οξέων και ελεύθερων αμινοξέων σε Φ/Β

Οι κύριες γευστικές ενώσεις στο ζυμωμένο ξύδι αποτελούνται από οργανικά οξέα που παράγονται από τη ζύμωση, καθώς και από ελεύθερα αμινοξέα που παράγονται από την υδρόλυση της πρωτεΐνης κατά τη διάρκεια της ζύμωσης [20]. Το PV περιείχε οργανικά οξέα, οξικό οξύ, οξαλικό οξύ, κιτρικό οξύ, ηλεκτρικό οξύ, μηλικό οξύ και γαλακτικό οξύ, σε 4034,46, 72,76, 1530,65, 1075,51, 140,95 και 390,87 mg επί τοις εκατό, αντίστοιχα (T). Επιπλέον, το PV περιείχε έναν αριθμό ελεύθερων αμινοξέων, συγκεκριμένα, ασπαρτικό οξύ, τυροσίνη, φαινυλαλανίνη, ιστιδίνη, λυσίνη και αργινίνη. Οι περιεκτικότητες σε ασπαρτικό οξύ, τυροσίνη, φαινυλαλανίνη, ιστιδίνη, λυσίνη και αργινίνη ήταν 7,56, 5,46, 4,43, 32,93, 4,11 και 20,76 ppm, αντίστοιχα. Μετά από μια ζύμωση δύο σταδίων, το PV έδειξε υψηλότερα οργανικά οξέα, ειδικά οξικό οξύ, και περιεκτικότητα σε ελεύθερα αμινοξέα από το PJ. Σε σύγκριση με προηγούμενες μελέτες, η περιεκτικότητα σε οργανικά οξέα στο εμπορικό ξύδι με σόργο αποτελούνταν από οξικό οξύ (3600 mg τοις εκατό), οξαλικό οξύ (16,62 mg τοις εκατό), κιτρικό οξύ (49,7 mg τοις εκατό), ηλεκτρικό οξύ (92,5 mg τοις εκατό), μηλικό οξύ (27,83 mg τοις εκατό) και γαλακτικό οξύ (820 mg τοις εκατό) [21]. Το PV περιείχε χαμηλότερες ποσότητες ελεύθερων αμινοξέων από το ξύδι σκόρδου, το οποίο περιείχε υψηλές ποσότητες ελεύθερων αμινοξέων (23,4 ppm), τυροσίνης (δεν ανιχνεύθηκε), φαινυλαλανίνης (313,9 ppm), ιστιδίνης (4,6 ppm), λυσίνης (460,3 ppm) και αργινίνη (65,0 ppm). Na et al. (2013) ανέφερε ότι τα ποιοτικά χαρακτηριστικά στο ζυμωμένο ξύδι εξαρτώνται από διαφορετικά συστατικά και σχετίζονται με την υψηλότερη ποσότητα κιτρικού οξέος, ηλεκτρικού οξέος, μηλικού οξέος, τυροσίνης και ιστιδίνης και χαμηλότερη ποσότητα ασπαρτικού οξέος, φαινυλαλανίνης, λυσίνης και αργινίνης, τα οποία παρατηρήθηκαν σε PV σε σύγκριση με άλλα ζυμωμένα ξύδια [22]. Συνολικά, τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι το PV που έχει υποστεί ζύμωση με PJ ενισχυμένο με εκχύλισμα αχλαδιού περιέχει υψηλή ποσότητα οργανικών οξέων και διάφορες περιεκτικότητες ελεύθερων αμινοξέων.

Τραπέζι 1.Περιεκτικότητα σε οργανικά οξέα και ελεύθερα αμινοξέα στο ξύδι Prunus mume (PV).

3.2. Προσδιορισμός και ποσοτικοποίηση Φαινολικών Ενώσεων σε Φ/Β

Το TPC του PV ήταν 25,86 mg GAE/g (τα δεδομένα δεν εμφανίζονται). Για την περαιτέρω ταυτοποίηση των φαινολικών ενώσεων που υπάρχουν στο PV, πραγματοποιήθηκε ανάλυση HPLC-PDA. Πρωτοκατεχουικό οξύ, συριγικό οξύ, χλωρογενικό οξύ, νεοχλωρογενικό οξύ και κρυπτοχλωρογενικό οξύ με συγκεντρώσεις 0.08, 0.22, 0.37, 0.82 και 1.36. mg/g, αντίστοιχα, ταυτοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας ανάλυση HPLC σε σύγκριση με κάθε πρότυπο φαινολικό οξύ (Εικόνα 1). Αυτό το αποτέλεσμα έδειξε ότι το κρυπτοχλωρογενικό οξύ και το νεοχλωρογενικό οξύ ήταν τα κύρια φαινολικά οξέα στα PV. Πολλές μελέτες έχουν αναφέρει ότι οι φαινολικές ενώσεις επηρεάζουν λειτουργικές ιδιότητες, όπως αντιοξειδωτικές, αντικαρκινικές και αντιδιαβητικές [23-25]. Σε μια σχετική μελέτη που έγινε από τους Yuan et al. (2019), πλούσιο σε πολυφαινόλες εκχύλισμα Sonchus arvensis που περιέχει χλωρογενικό οξύ, λουτεολίνη και κικορικό οξύ βελτίωσε τις αντιοξειδωτικές ενζυμικές δραστηριότητες και τη σύνθεση γλυκογόνου σε ποντίκια που ασκήθηκαν στην άσκηση [26]. Το υδατικό εκχύλισμα σπόρων Abelmoschus esculentus Moench που περιέχει υψηλές ποσότητες πολυφαινολών και φλαβονοειδών έδειξε σημαντικές αντιοξειδωτικές και αντι-κουραστικές επιδράσεις σε ποντίκια μετά τη δοκιμασία κολύμβησης με βάρος [27]. Επίσης, φαινολικές ενώσεις που περιλαμβάνουν 5-HMF, νεοχλωρογενικό οξύ, πρωτοκατεχουϊκό οξύ και συριγγικό οξύ ταυτοποιήθηκαν στο συμπύκνωμα φρούτου Prunus mume που έχει υποστεί επεξεργασία με πηκτινάση, οι οποίες έχουν ανασταλτικές επιδράσεις στα καρκινικά κύτταρα του παχέος εντέρου [19]. Αν και απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για τη διερεύνηση των μοριακών μηχανισμών πίσω από τις δράσεις κατά της κούρασης των φαινολικών ενώσεων, αυτό το αποτέλεσμα δείχνει ότι οι αντι-κόπωση της PV σχετίζονταν με τις φαινολικές ενώσεις της, όπως το πρωτοκατεχουϊκό οξύ, το συριγικό οξύ, το χλωρογενικό οξύ και τα παράγωγά του.

Φιγούρα 1.Οι φαινολικές ενώσεις στο ξύδι Prunus mume (PV) αναλύθηκαν με HPLC. Πρωτοκατεχουϊκό οξύ (205 nm, 8.774 λεπτά); συριγγικό οξύ (216,8 nm, 23,857 λεπτά); χλωρογενικό οξύ (326,1 nm, 18,663 λεπτά); νεοχλωρογενικό οξύ (324,9 nm, 9,660 λεπτά); κρυπτοχλωρογενικό οξύ (326,1 nm, 20,395 λεπτά).

3.3. Επιδράσεις του PV στον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και τη συσσώρευση γλυκογόνου σε C2C12 μυοβλάστες

Ο σκελετικός μυς παίζει σημαντικό ρόλο στην υποστήριξη της παραγωγής ενέργειας στο σώμα [27]. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 2, αξιολογήσαμε την κυτταροτοξικότητα και τη συσσώρευση γλυκογόνου του PV στον μυοβλάστη C2C12. Για να αξιολογηθεί η κυτταροτοξικότητα της PV, διεξήχθησαν αναλύσεις SRB σε C2C12 μυοβλάστες και μετά τη διαφοροποίηση, τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με διάφορες συγκεντρώσεις PV (0.1, 0.2, {{1{{ 12}}}}.3 και 0.4 μg/mL) για 48 ώρες (Εικόνα 2Α). Η κυτταρική βιωσιμότητα των μυοβλαστών C2C12 που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με PV ήταν πάνω από 95 τοις εκατό, κάτι που δεν σημαίνει σημαντικές διαφορές σε σύγκριση με τον έλεγχο. Για την αξιολόγηση της περιεκτικότητας σε γλυκογόνο στους C2C12 μυοβλάστες, πραγματοποιήθηκε μια δοκιμασία γλυκογόνου χρησιμοποιώντας προϊόντα λύσης κυττάρων. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 2Β, τα περιεχόμενα γλυκογόνου στους C2C12 μυοβλάστες αυξήθηκαν σημαντικά από το PV με δοσοεξαρτώμενο τρόπο. Ωστόσο, η θεραπεία της PV σε δόση 0,4 μg/mL δεν έδειξε σημαντικές διαφορές σε σύγκριση με 0,3 μg/mL PV. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η θεραπεία με PV μπορεί να ενισχύσει τη συσσώρευση γλυκογόνου με μη κυτταροτοξικές συγκεντρώσεις στους σκελετικούς μύες.

Σχήμα 2.Επιδράσεις του PV στον (Α) πολλαπλασιασμό των κυττάρων και (Β) στη συσσώρευση γλυκογόνου σε C2C12 μυοβλάστες. Οι τιμές δεδομένων εκφράζονται ως μέσος όρος ± SE (n=3). Τα διαφορετικά γράμματα στη γραμμή είναι σημαντικά διαφορετικά (p <>

3.4. Επιδράσεις των Φ/Β στο χρόνο λειτουργίας του διαδρόμου

Ο χρόνος τρεξίματος μέχρι να εξαντληθεί είναι ένας δείκτης της ικανότητας άσκησης που αντιπροσωπεύει την αποκατάσταση της κόπωσης [5]. Σε αυτή τη μελέτη, ένα πρόγραμμα προπόνησης άσκησης με χρήση διαδρόμου διεξήχθη σε αρουραίους για 4 εβδομάδες. Μετά από άσκηση υψηλής έντασης μέχρι εξάντλησης, όλες οι ομάδες αποκάλυψαν σημαντικά αυξημένη αντοχή στο τρέξιμο σε σύγκριση με τους αρουραίους SC και το PV7.5 κατέγραψε τον μεγαλύτερο χρόνο τρεξίματος μεταξύ όλων των ομάδων (Εικόνα 3). Οι Reidy & Rasmussen (2016) ανέφεραν ότι η λήψη συμπληρωμάτων με αμινοξέα αύξησε την απόδοση της άσκησης μέσω της επαγωγής της πρωτεϊνικής σύνθεσης στους ανθρώπινους σκελετικούς μύες μετά από άσκηση με αντίσταση [28]. Αυτό το αποτέλεσμα έδειξε ότι το PV αύξησε αποτελεσματικά την ικανότητα αντοχής σε αρουραίους ασκούμενους υψηλής έντασης.

Εικόνα 3.Επίδραση Φ/Β στο χρόνο αντοχής στο τρέξιμο. Οι τιμές δεδομένων εκφράζονται ως μέσος όρος ± SE (n {{0}}). SC: καθιστικός έλεγχος, EC: ασκούμενος έλεγχος, PJ: Prunus mume juice, PV5: 5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι, PV7,5: 7,5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι. Τα διαφορετικά γράμματα στη γραμμή είναι σημαντικά διαφορετικά (p <>

3.5. Επιδράσεις του PV στους βιοδείκτες ορού που σχετίζονται με την κόπωση

Η εμφάνιση σωματικής κόπωσης συνδέεται με ενεργειακά ελλείμματα κατά την άσκηση. Επειδή μεγάλες ποσότητες ενέργειας, υγρών και αμινοξέων καταναλώνονται κατά τη διάρκεια άσκησης υψηλής έντασης, τα αθλητικά ποτά μπορούν να βοηθήσουν στη διατήρηση της ισορροπίας των υγρών και στην επανασύνθεση των πρωτεϊνών [29]. Για το λόγο αυτό, το PV θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ως αθλητικό ποτό για τη βελτίωση της κόπωσης που προκαλείται από την άσκηση. Επιπλέον, η ενδοκυτταρική οξέωση προκαλεί μυϊκή κόπωση που προκύπτει από τη συσσώρευση γαλακτικού και ανόργανου φωσφορικού [12]. Κατά τη διάρκεια έντονης άσκησης, βιοδείκτες ορού που σχετίζονται με την κόπωση, όπως η αμμωνία ορού, τα ανόργανα φωσφορικά και το γαλακτικό συσσωρεύονται προκαλούν μυϊκή κόπωση ως αποτέλεσμα ενδοκυτταρικής οξέωσης [30]. Έτσι, η μείωση της ευαισθησίας για κόπωση σχετίζεται με την αύξηση του χρόνου λειτουργίας και τη μείωση των βιοδεικτών κόπωσης. Το γλυκογόνο του ήπατος και των μυών, που είναι γνωστές πηγές υποστρώματος για γλυκόλυση και παραγωγή ενέργειας, λειτουργούν ως η πρώτη άμυνα ενάντια στην εξάντληση της ενέργειας [5]. Ως εκ τούτου, το γλυκογόνο είναι ένας από τους δείκτες κόπωσης. Τα επίπεδα αμμωνίας, ανόργανου φωσφορικού και γαλακτικού ορού της ομάδας PV7.5 ήταν 64,57 ug/mL, 2,98 mM και 1,21 mM (Εικόνα 4A–C). Αυτές οι τιμές μειώθηκαν σημαντικά κατά 28,22 τοις εκατό, 25,91 τοις εκατό και 18,24 τοις εκατό σε σχέση με τον όμιλο EC, αντίστοιχα. Σε σύγκριση με τους βιοδείκτες ορού σε αρουραίους EC, οι αρουραίοι SC και PJ δεν έδειξαν σημαντικές διαφορές. Fushimi et al. (2001) ανέφεραν ότι το συμπλήρωμα ξιδιού μείωσε σημαντικά το γαλακτικό και την αμμωνία ορού μετά από άσκηση μέχρι εξάντλησης σε αρουραίους και οι Stephens et al. (2008) ανέφερε ότι η από του στόματος χορήγηση οξικού άλατος βελτίωσε το επίπεδο του γαλακτικού στο αίμα στους χοίρους [31,32]. Με βάση αυτά τα αποτελέσματα, τα υψηλά επίπεδα οργανικών οξέων και διαφόρων ελεύθερων αμινοξέων στα PV μπορεί να έχουν επηρεάσει τη ρύθμιση της αμμωνίας, των ανόργανων φωσφορικών και του γαλακτικού ορού. Ως εκ τούτου, η χορήγηση PV άσκησε αποτελεσματικά αντι-κόπωση ρυθμίζοντας βιοδείκτες ορού που σχετίζονται με την κόπωση σε αρουραίους που ασκούνταν στην άσκηση.

Εικόνα 4.Επίδραση του PV στον ορό (Α) αμμωνία, (Β) ανόργανο φώσφορο και (C) γαλακτικό σε εξαντλημένους αρουραίους. Οι τιμές δεδομένων εκφράζονται ως μέσος όρος ± SE (n {{0}}). SC: καθιστικός έλεγχος, EC: ασκούμενος έλεγχος, PJ: Prunus mume juice, PV5: 5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι, PV7,5: 7,5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι. Τα διαφορετικά γράμματα στη γραμμή είναι σημαντικά διαφορετικά (p <>

3.6. Επιδράσεις ΦΒ στις Αλλαγές Συσσώρευσης Γλυκογόνου

Οι επιδράσεις του PV στο γλυκογόνο του ήπατος και των μυών φαίνονται στο Σχήμα 5. Η ομάδα EC έδειξε υψηλότερη περιεκτικότητα σε γλυκογόνο του γαστροκνήμιου μυός, αλλά δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων SC και EC (Εικόνα 5Α). Ωστόσο, παρατηρήθηκε σημαντική αύξηση της περιεκτικότητας σε γλυκογόνο (34,25 τοις εκατό) σε σχέση με τις ομάδες EC και PV7.5. Η περιεκτικότητα σε ηπατικό γλυκογόνο αυξήθηκε επίσης ως απόκριση στη συμπλήρωση με PV7.5 έως και 24,21 τοις εκατό σε σχέση με την ομάδα EC (Εικόνα 5Β). Προηγούμενες μελέτες ανέφεραν ότι η από του στόματος συμπλήρωση οξικού οξέος ενισχύει τη σύνθεση γλυκογόνου στο ήπαρ και στους μυς μετά από άσκηση σε αρουραίους και άλογα [10,11,31]. Επομένως, αυτό το αποτέλεσμα υποδηλώνει ότι η αύξηση των επιπέδων γλυκογόνου του ήπατος και των μυών μπορεί να σχετίζεται με τη δράση κατά της κόπωσης σε αρουραίους που ασκούνται υψηλής έντασης.

Εικόνα 5. Επίδραση του PV στη συσσώρευση γλυκογόνου του (Α) μυός και (Β) του ήπατος σε εξαντλημένους αρουραίους. Οι τιμές δεδομένων εκφράζονται ως μέσος όρος ± SE (n {{0}}). SC: καθιστικός έλεγχος, EC: ασκούμενος έλεγχος, PJ: Prunus mume juice, PV5: 5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι, PV7,5: 7,5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι. Τα διαφορετικά γράμματα στη γραμμή είναι σημαντικά διαφορετικά (p <>

3.7. Επιδράσεις ΦΒ στις Αλλαγές Δραστηριοτήτων LDH και CK

Η γαλακτική αφυδρογονάση (LDH) είναι μια οξειδοαναγωγάση στη γλυκόλυση που καταλύει την αναστρέψιμη μετατροπή του γαλακτικού οξέος σε πυροσταφυλικό [33]. Η κινάση της κρεατίνης ορού (CK) είναι ένα σημαντικό ένζυμο που υποδεικνύει μυϊκή βλάβη [34]. Έτσι, αξιολογήσαμε τα επίπεδα μυϊκής LDH και CK ορού για να αξιολογήσουμε το επίπεδο της μυϊκής βλάβης. Το επίπεδο LDH γαστροκνήμιου των αρουραίων EC δεν διέφερε σημαντικά σε σύγκριση με την ομάδα SC (Εικόνα 6Α). Η δραστηριότητα LDH των αρουραίων στους οποίους χορηγήθηκε PV7,5 αυξήθηκε σημαντικά κατά 27,75 τοις εκατό σε σύγκριση με την ομάδα EC. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 6Β, το επίπεδο CK ορού της ομάδας SC ήταν 60,35 U/L. Η τιμή CK της ομάδας EC ήταν 54,71 U/L, η οποία δεν διέφερε σημαντικά από τη σύγκριση της ομάδας SC. Ωστόσο, η συμπλήρωση PV7.5 μείωσε σημαντικά τα επίπεδα CK κατά 35,66 τοις εκατό σε σύγκριση με τους αρουραίους EC. Σε παρόμοιες μελέτες, το εκχύλισμα Prunus mume βελτίωσε την ανάκτηση της κόπωσης μέσω αύξησης της δραστηριότητας LDH και ρύθμισης των βιοδεικτών ορού σε εκπαιδευμένους αρουραίους και αύξησε την CK ορού ως απόκριση στη μυϊκή βλάβη που προκαλείται από μυϊκό σφίξιμο, προκαλώντας κόπωση [4,35]. Αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν ότι η χορήγηση PV απέτρεψε την κόπωση προάγοντας τον μεταβολισμό του γαλακτικού οξέος στα μυϊκά κύτταρα και μειώνοντας τη μυϊκή βλάβη μειώνοντας το επίπεδο των δεικτών κόπωσης στον ορό σε αρουραίους.

Εικόνα 6.Επιδράσεις της PV στις δραστηριότητες (Α) γαλακτικής αφυδρογονάσης και (Β) κινάσης κρεατίνης σε επίμυες που εξαντλήθηκαν από την άσκηση. Οι τιμές δεδομένων εκφράζονται ως μέσος όρος ± SE (n {{0}}). SC: καθιστικός έλεγχος, EC: ασκούμενος έλεγχος, PJ: Prunus mume juice, PV5: 5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι, PV7,5: 7,5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι. Τα διαφορετικά γράμματα στη γραμμή είναι σημαντικά διαφορετικά (p <>

3.8. Επιδράσεις του PV στις Αλλαγές στο Επίπεδο MDA και στη Δραστηριότητα GPx στο ήπαρ

Ο μυϊκός τραυματισμός προκαλεί αλλαγές στη δραστηριότητα των αντιοξειδωτικών ενζύμων και στα επίπεδα MDA [34]. Το MDA είναι ένα από τα υποπροϊόντα της υπεροξείδωσης των λιπιδίων που προκαλείται από το οξειδωτικό στρες. Για να παρατηρήσουμε αλλαγές στο αντιοξειδωτικό ένζυμο και στην υπεροξείδωση των λιπιδίων, μετρήσαμε τα επίπεδα MDA και GPx στον ηπατικό ιστό με τη χορήγηση PV σε εξαντλημένους επίμυες άσκησης. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν σημαντικές αλλαγές ως προς τη χορήγηση Φ/Β. Συγκεκριμένα, η περιεκτικότητα σε MDA της ομάδας EC μειώθηκε κατά 10 τοις εκατό σε σχέση με την ομάδα SC (Εικόνα 7Α). Η χορήγηση των PJ, PV5 και PV7.5 προκάλεσε μείωση στην περιεκτικότητα σε MDA κατά 18,35 τοις εκατό, 20,36 τοις εκατό και 25,05 τοις εκατό, αντίστοιχα, σε σχέση με την ομάδα EC. Χορήγηση PV υπό έντονη εξαντλητική άσκηση που προκαλείται από σημαντικές αυξήσεις στη δραστηριότητα GPx (Εικόνα 7Β). Στο ήπαρ, η θεραπεία με PV7.5 αύξησε σημαντικά τη δραστηριότητα GPx κατά 19,65 τοις εκατό και 41,14 τοις εκατό, αν και η PV5 δεν έδειξε διαφορά σε σύγκριση με τους αρουραίους EC. Σε προηγούμενες μελέτες, η εξωγενής συμπλήρωση αντιοξειδωτικών και μια αντιοξειδωτική δίαιτα μείωσαν τα επίπεδα οξειδωτικού στρες στους αθλητές μετά από εξαντλητική άσκηση [36]. Η χορήγηση αντιοξειδωτικών αποτρέπει τον μυϊκό πόνο στους ανθρώπους μετά από άσκηση [37]. Επιπλέον, το κινέζικο μαύρο ξύδι προκάλεσε αντιοξειδωτικές δραστηριότητες μέσω της αναστολής αντιδραστικών ειδών οξυγόνου, καθώς και αυξήσεις στις δραστηριότητες SOD και CAT [38]. Συνολικά, αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η συμπλήρωση ξιδιού με αντιοξειδωτική δράση ενισχύει την αποκατάσταση της κόπωσης. Ως εκ τούτου, οι δραστηριότητες κατά της κόπωσης των PV μπορεί να σχετίζονται με τη ρύθμιση των αντιοξειδωτικών ενζύμων σε εξαντλημένους αρουραίους.

Εικόνα 7.Επιδράσεις του PV στις δραστηριότητες (Α) μηλονοδιαλδεΰδης και (Β) υπεροξειδάσης γλουταθειόνης σε επίμυες που εξαντλήθηκαν από την άσκηση. Οι τιμές δεδομένων εκφράζονται ως μέσος όρος ± SE (n {{0}}). SC: καθιστικός έλεγχος, EC: ασκούμενος έλεγχος, PJ: Prunus mume juice, PV5: 5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι, PV7,5: 7,5 τοις εκατό Prunus mume ρόφημα ξύδι. Τα διαφορετικά γράμματα στη γραμμή είναι σημαντικά διαφορετικά (p <>

4. Συμπεράσματα

Σε αυτή τη μελέτη, PV που περιέχει διάφορα ελεύθερα αμινοξέα και οργανικά οξέα αναπτύχθηκε με μια διαδικασία ζύμωσης δύο σταδίων και αξιολογήθηκε με αναλύσεις κυτταροτοξικότητας και συσσώρευσης γλυκογόνου σε μυοβλάστες C2C12 καθώς και in vivo επιδράσεις κατά της κόπωσης σε εξαντλημένους αρουραίους μετά από υψηλή ένταση άσκηση. Παρατηρήθηκαν υψηλά επίπεδα συσσώρευσης γλυκογόνου in vitro και η χορήγηση PV συνέβαλε στην πρόληψη της κόπωσης μέσω της ρύθμισης των βιοδεικτών κόπωσης στον ορό και των δεικτών μυϊκής βλάβης σε εξαντλημένους αρουραίους. Επιπλέον, αναγνωρίστηκαν φαινολικές ενώσεις όπως το πρωτοκατεχουϊκό οξύ, το συριγγικό οξύ και τα παράγωγα του χλωρογενικού οξέος στο PV. Συλλογικά, η Φ/Β μπορεί να αναμένεται να χρησιμοποιηθεί ως λειτουργικό υλικό κατά της κόπωσης που προκαλείται από άσκηση υψηλής έντασης.

Αυτό είναι το προϊόν μας για την καταπολέμηση της κούρασης! Κάντε κλικ στην εικόνα για περισσότερες πληροφορίες!

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Hwang, JY; Ζαμπόν, JW; Nam, SH Η αντιοξειδωτική δράση του maesil (Prunus mume). Korean J. Food Sci. Τεχνολ. 2004, 36, 461-464.

2. Paik, IY; Chang, WR; Kwak, YS; Cho, SY; Jin, HE Η επίδραση της συμπλήρωσης Prunus mume στα επίπεδα ενεργειακού υποστρώματος και στους παράγοντες επαγωγής κόπωσης. J. Life Sci. 2010, 20, 49–54. [CrossRef]

3. Nakajima, S.; Fujita, Κ.; Inoue, Υ.; Nishio, Μ.; Seto, Y. Επίδραση της λαϊκής θεραπείας, Bainiku-ekisu, ένα συμπύκνωμα χυμού μούμιου Prunus, στη μόλυνση από το ελικοβακτηρίδιο του πυλωρού στον άνθρωπο. Helicobacter 2006, 11, 589-591. [CrossRef]

4. Kim, SY; Park, SH; Lee, HN; Το εκχύλισμα mume Park, TS Prunus βελτιώνει την κόπωση που προκαλείται από την άσκηση σε εκπαιδευμένους αρουραίους. J. Med. Φαγητό. 2008, 11, 460–468. [CrossRef] [PubMed]

5. Cho, HD; Lee, JH; Jeong, JH; Kim, JY; Ναι, ST; Park, SK; Lee, MK; Seo, KI Παραγωγή νέου ξυδιού με αντιοξειδωτικές και αντικαταθλιπτικές δράσεις από την Salicornia herbacea LJ Sci. Τροφίμων Αγρ. 2016, 96, 1085–1092. [CrossRef] [PubMed]

6. Xie, Χ.; Zheng, Υ.; Liu, Χ.; Cheng, C.; Zhang, Χ.; Xia, Τ.; Yu, S.; Wang, M. Αντιοξειδωτική δράση του κινέζικου ξιδιού παλαιωμένου shanxi και η συσχέτισή του με πολυφαινόλες και φλαβονοειδή κατά τη διαδικασία παρασκευής. J. Food Sci. 2017, 82, 2479–2486. [CrossRef]

7. Kondo, S.; Tayama, Κ.; Tsukamoto, Υ.; Ikeda, Κ.; Yamori, Y. Αντιυπερτασικές επιδράσεις οξικού οξέος και ξιδιού σε αυθόρμητα υπερτασικούς αρουραίους. Biosci. Biotechnol. Biochem. 2001, 65, 2690–2694. [CrossRef]

8. Sakakibara, S.; Yamauchi, Τ.; Oshima, Υ.; Tsukamoto, Υ.; Kadowaki, T. Το οξικό οξύ ενεργοποιεί την ηπατική AMPK και μειώνει την υπεργλυκαιμία σε διαβητικούς ποντικούς KK-A(y). Biochem. Bioph. Res. Co. 2006, 344, 597–604. [CrossRef]

9. Yagnik, D.; Serafin, V.; Shah, AJ Αντιμικροβιακή δράση του μηλόξυδου κατά των Escherichia coli, Staphylococcus aureus και Candida albicans. μειώνοντας την έκφραση της κυτοκίνης και της μικροβιακής πρωτεΐνης. Sci. Rep. 2018, 8, 1732–1744. [CrossRef]

10. Fushimi, Τ.; Tayama, Κ.; Fukaya, Μ.; Kitakoshi, Κ.; Nakai, Ν.; Tsukamoto, Υ.; Sato, Y. Η αποτελεσματικότητα του οξικού οξέος για την αναπλήρωση γλυκογόνου σε σκελετικούς μύες αρουραίου μετά την άσκηση. Int. J. Sports Med. 2002, 23, 218-222. [CrossRef]

11. Waller, AP; Geor, RJ; Spriet, LL; Heigenhauser, GJF; Lindinger, MI Συμπλήρωμα οξικού από το στόμα μετά από παρατεταμένη άσκηση μέτριας έντασης ενισχύει την πρώιμη επανασύνθεση του μυϊκού γλυκογόνου στα άλογα. Exp. Physiol. 2009, 94, 888-898. [CrossRef] [PubMed]

12. Cho, HD; Kim, JH; Lee, JH; Hong, SM; Ναι, ST; Seo, KI Επίδραση κατά της κούρασης ενός ροφήματος με ξύδι αγγουριού σε αρουραίους μετά από άσκηση υψηλής έντασης. Korean J. Food Sci. Τεχνολ. 2017, 49, 209–214. [CrossRef]

13. Blain, GM; Hureau, TJ Περιορισμός της κόπωσης και της απόδοσης κατά την άσκηση: Η αλληλεπίδραση εγκεφάλου-μυών. Exp. Physiol. 2017, 102, 3–4. [CrossRef] [PubMed]

14. Xu, C.; Lv, J.; Ιδ, ΥΜ; Cui, SW; Hu, Χ.; Fan, M. Επιδράσεις της βρώμης-γλυκάνης στην άσκηση αντοχής και οι ιδιότητες κατά της κόπωσης σε εκπαιδευμένους αρουραίους. Υδατάνθρακες. Πολυμ. 2013, 92, 1159–1165. [CrossRef]

15. Maes, Μ.; Twisk, FNM Σύνδρομο χρόνιας κόπωσης: Το (βιο) ψυχοκοινωνικό μοντέλο των Harvey και Wessely έναντι ενός βιο(ψυχοκοινωνικού) μοντέλου που βασίζεται σε μονοπάτια φλεγμονώδους και οξειδωτικού και νιτροδικού στρες. BMC Med. 2010, 8, 1–13. [CrossRef]

16. Rittie, L.; Fisher, GJ UV που προκαλείται από το φως καταρράκτες σήματος και γήρανση του δέρματος. Aging Res. Rev. 2002, 1, 705–720. [CrossRef]

17. Kaulmann, Α.; Bohn, T. Καροτενοειδή, φλεγμονή και οξειδωτικό στρες - επιπτώσεις των οδών κυτταρικής σηματοδότησης και σχέση με την πρόληψη χρόνιων ασθενειών. Nutr. Res. 2014, 34, 907–929. [CrossRef]

18. Shen, Υ.; Zhang, Η.; Cheng, L.; Wang, L.; Wian, Η.; Qi, X. In vitro και in vivo αντιοξειδωτική δράση πολυφαινολών που εξάγονται από μαύρο κριθάρι ορεινών περιοχών. Food Chem. 2016, 194, 1003–1012. [CrossRef]

19. Cho, HD; Kim, JH; Κέρδισε, YS; Σελήνη, KD; Seo, KI Ανασταλτικές επιδράσεις του συμπυκνωμένου φρούτου Prunus mume που έχει υποστεί επεξεργασία με πηκτινάση στον πολλαπλασιασμό του καρκίνου του παχέος εντέρου και στην αγγειογένεση των ενδοθηλιακών κυττάρων. J. Food Sci. 2019, 84, 3284–3295. [CrossRef]

20. Jung, KM; Lee, YS; Kim, JW; Seol, JM; Jung, YH; Kim, SR Αλκοολική ζύμωση χαμηλής θερμοκρασίας για την παραγωγή ξυδιού υψηλής ποιότητας με χρήση ροδάκινου. Κορεατική Soc. Biotechnol. Bioeng. J. 2018, 33, 95–103.

21. Kong, Υ.; Zhang, LL; Sun, Υ.; Zhang, YY; Sun, BG; Chen, HT Προσδιορισμός του ελεύθερου αμινοξέος, οργανικού οξέος και νουκλεοτιδίου στο εμπορικό ξύδι. J. Food Sci. 2017, 82, 1116–1123. [CrossRef] [PubMed]

22. Na, HS; Choi, GC; Yang, SI; Lee, JH; Cho, JY; Ma, SJ; Kim, JY Σύγκριση χαρακτηριστικών στο εμπορικό ζυμωμένο ξύδι που παρασκευάζεται με διαφορετικά συστατικά. Korean J. Food Preserv. 2013, 20, 482–487. [CrossRef]

23. Xu, DP; Li, Υ.; Meng, Χ.; Zhou, Τ.; Zhou, Υ.; Zheng, J.; Zhang, JJ; Li, HB Φυσικά αντιοξειδωτικά σε τρόφιμα και φαρμακευτικά φυτά: Εκχύλιση, αξιολόγηση και πόροι. Int. J. ΜοΙ. Sci. 2017, 18, 96. [CrossRef] [PubMed]

24. Zhou, Υ.; Zheng, J.; Li, Υ.; Xu, DP; Li, S.; Chen, YM; Li, HB Φυσικές πολυφαινόλες για την πρόληψη και τη θεραπεία του καρκίνου. Nutrients 2016, 8, 515. [CrossRef] [PubMed]

25. Guasch-Ferré, Μ.; Merino, J.; Sun, Q.; Fit6, Μ.; Sales-Salvad6, J. Διαιτητικές πολυφαινόλες, μεσογειακή διατροφή, προδιαβήτης και διαβήτης τύπου 2: Μια αφηγηματική ανασκόπηση των αποδεικτικών στοιχείων. Οξείδιο. Med. Κύτταρο. Λόνγκεφ. 2017, 2017,

6723931. [CrossRef] [PubMed]

26. Yuan, Τ.; Wu, D.; Sun, Κ.; Tan, Χ.; Wang, J.; Ren, Β.; Zhao, Β.; Liu, Ζ.; Liu, X. Δραστικότητα κατά της κόπωσης υδατικών εκχυλισμάτων Sonchus arvensis L. σε ασκούμενους εκπαιδευμένους ποντικούς. Molecules 2019, 24, 1168. [CrossRef]

27. Xia, F.; Zhong, Υ.; Li, Μ.; Chang, Q.; Liao, Υ.; Liu, Χ.; Pan, R. Αντιοξειδωτικά και κατά της κούρασης συστατικά της μπάμιας. Nutrients 2015, 7, 8846–8858. [CrossRef]

28. Reidy, PT; Rasmussen, BB Ο ρόλος των προσλαμβανόμενων αμινοξέων και πρωτεΐνης στην προώθηση του αναβολισμού των μυϊκών πρωτεϊνών που προκαλείται από την άσκηση αντίστασης. J. Nutr. 2016, 146, 155–183. [CrossRef]

29. Evans, GH; James, LJ; Shirrefs, SM; Maughan, RJ Βελτιστοποίηση της αποκατάστασης και διατήρησης της ισορροπίας των υγρών μετά από αφυδάτωση που προκαλείται από την άσκηση. J. Appl. Physiol. 2017, 122, 945–951. [CrossRef]

30. Robergs, RA; Ghiasvand, F.; Parker, D. Βιοχημεία της μεταβολικής οξέωσης που προκαλείται από την άσκηση. Είμαι. J. Physiol. Κανονικός. Ακέραιος αριθμός. Comp. Physiol. 2004, 287, R502–R516. [CrossRef]

31. Fushimi, Τ.; Tayama, Κ.; Fukaya, Μ.; Kitakoshi, Κ.; Nakai, Ν.; Tsukamoto, Υ.; Sato, Y. Η σίτιση με οξικό οξύ ενισχύει την αναπλήρωση γλυκογόνου στο ήπαρ και τους σκελετικούς μυς των αρουραίων. J. Nutr. 2001, 131, 1973–1977. [CrossRef] [PubMed]

32. Stephens, JW; Dikeman, ME; Unruh, JA; Haub, MD; Tokach, MD; Dritz, SS Επιδράσεις της από του στόματος χορήγησης κιτρικού ή οξικού νατρίου σε χοίρους στις παραμέτρους του αίματος, στη μεταθανάτια γλυκόλυση, στη μείωση του μυϊκού pH και στα ποιοτικά χαρακτηριστικά του χοιρινού κρέατος. J. Anim. Sci. 2008, 86, 1669–1677. [CrossRef] [PubMed]

33. Zheng, Υ.; Zhang, WC; Wu, ZY; Fu, CX; Hui, AL; Gao, Η.; Chen, PP; Du, Β.; Zhang, HW Δύο εκχυλίσματα μακαμιδίου ανακουφίζουν από τη σωματική κόπωση μειώνοντας τη μυϊκή βλάβη στα ποντίκια. J. Sci. Τροφίμων Αγρ. 2018, 99, 1405–1412. [CrossRef] [PubMed]

34. Filho, LFS; Μενέζες, ΡΡ; Santana, DVS; Lima, BS; Saravanan, S.; Almeida, GKM; Filho, JERM; Santos, MMB; Araujo, AAS; de Oliveira, ΕΔ Επίδραση παλμικού θεραπευτικού υπερήχου και διοσμίνης στην οξειδωτική παράμετρο των σκελετικών μυών. Ultrasound Med. Biol. 2018, 44, 359–367. [CrossRef]

35. Tojima, Μ.; Noma, Κ.; Torii, S. Αλλαγές στην κινάση της κρεατίνης ορού, σφίξιμο των μυών των ποδιών και καθυστερημένη έναρξη μυϊκού πόνου μετά από έναν πλήρη αγώνα μαραθωνίου. J. Sports Med. Phys Fitness. 2016, 56, 782–788.

36. Pingitore, Α.; Λίμα, GP; Mastorci, F.; Quinones, Α.; Lervasi, G.; Vassalle, C. Άσκηση και οξειδωτικό στρες: Πιθανές επιδράσεις των αντιοξειδωτικών διατροφικών στρατηγικών στον αθλητισμό. Nutrition 2015, 31, 916–922. [CrossRef]

37. Ranchordas, MK; Rogerson, D.; Soltani, Η.; Costello, JT Αντιοξειδωτικά για την πρόληψη και τη μείωση του μυϊκού πόνου μετά την άσκηση. Σύστημα βάσης δεδομένων Cochrane. Αναθ. 2017, 12, CD009789. [CrossRef]

38. Chen, J.; Tian, ​​J.; Ge, Η.; Liu, R.; Xiao, J. Επιδράσεις της τετραμεθυλπυραζίνης από κινέζικο μαύρο ξύδι σε αντιοξειδωτικές και υπολιπιδαιμικές δραστηριότητες σε κύτταρα HepG2. Food Chem. Toxicol. 2017, 109 Pt 2, 930–940. [CrossRef]