Μια επισκόπηση της δομής της πρωτεΐνης D7 και των φυσιολογικών ρόλων στα νηματόκερα που τρέφονται με αίμα Μέρος 2
Jun 14, 2023
3.2. Biogenic Amine Binding D7s
Υπάρχουν περισσότερα από 460 είδη Anopheles, χωρισμένα σε 7 υπογένη [56]. Μέχρι στιγμής, το γονιδίωμα 18 ειδών Anopheles (στελέχη αναφοράς) έχει προσδιοριστεί ως προς την αλληλουχία και είναι διαθέσιμα στη Vector Base, αντιπροσωπεύοντας τα τρία κύρια ιατρικά σημαντικά υπογένη του Anopheles: Cellia, Anopheles και Nyssorhynchus που καταλαμβάνουν διαφορετικές περιοχές στον κόσμο και αποκλίνουν από μεταξύ τους έως και 100 εκατομμύρια χρόνια πριν (όπως συμβαίνει μεταξύ Cellia και Nyssorrhynchus) [57-59]. Τα κουνούπια Anopheles sp των οποίων το γονιδίωμα έχουν δημοσιευτεί μέχρι στιγμής (Εικόνα 2) έχουν 2–5 D7S (ανάλογα με τα υπογενή και τη σειρά), συν τουλάχιστον δύο μακριές μορφές (D7L2 και D7L3), ενώ μερικά έχουν μια τρίτη μακρά μορφή (D7L1, παρούσα σε ορισμένες σειρές Cellia και υπογένος Anopheles) [29,60].
Το γονιδίωμα σχετίζεται στενά με την ανοσία. Το ανθρώπινο γονιδίωμα περιέχει όλα τα γονίδια που χρειάζονται για το ανοσοποιητικό σύστημα, συμπεριλαμβανομένων γονιδίων για το ανοσοποιητικό σύστημα των θηλαστικών, γονιδίων για ιογενείς και βακτηριακές λοιμώξεις και πολλά άλλα. Αυτά τα γονίδια σχετίζονται στενά με τη φυσιολογική λειτουργία του ανοσοποιητικού συστήματος και επηρεάζουν την αντίσταση και το ανοσοποιητικό επίπεδο των ανθρώπων.
Επιπλέον, διαφορετικές παραλλαγές στο γονιδίωμα μπορούν επίσης να επηρεάσουν την απόδοση και την αντίσταση του ανοσοποιητικού συστήματος. Υπάρχουν πολλοί πολυμορφισμοί γονιδίων στο ανθρώπινο γονιδίωμα, οι οποίοι καθορίζουν τον βαθμό αντοχής στις ασθένειες σε διαφορετικούς πληθυσμούς. Για παράδειγμα, το ανθρώπινο αντιγόνο λευκοκυττάρων (HLA) είναι ένα σημαντικό γονίδιο στο ανοσοποιητικό σύστημα και ο πολυμορφισμός του επιτρέπει σε διαφορετικούς ανθρώπους να αναπτύξουν διαφορετικές ανοσοαποκρίσεις και αντίσταση.
Τα τελευταία χρόνια, με την εμβάθυνση της γονιδιωματικής έρευνας, όλο και περισσότερες μελέτες έχουν δείξει ότι η γονιδιωματική παραλλαγή σχετίζεται στενά με την εμφάνιση πολλών ασθενειών που σχετίζονται με το ανοσοποιητικό. Για παράδειγμα, οι αυτοάνοσες ασθένειες (όπως ο λύκος, η ρευματοειδής αρθρίτιδα, η σκλήρυνση κατά πλάκας κ.λπ.) και οι ασθένειες ανοσοανεπάρκειας (όπως το AIDS, ο περιοδικός πυρετός και το σύνδρομο στοματικού έλκους κ.λπ.) σχετίζονται όλα με γονιδιωματικές παραλλαγές.
Επομένως, η έρευνα του γονιδιώματος έχει μεγάλη σημασία για την κατανόηση της λειτουργίας του ανοσοποιητικού συστήματος, του μηχανισμού της νόσου και της εξατομικευμένης θεραπείας για διαφορετικούς πληθυσμούς. Από αυτή την άποψη, πρέπει να βελτιώσουμε την ανοσία. Το Cistanche μπορεί να βελτιώσει σημαντικά την ανοσία. Το Cistanche είναι πλούσιο σε μια ποικιλία αντιοξειδωτικών ουσιών, όπως βιταμίνη C, βιταμίνες, καροτενοειδή κ.λπ. Αυτά τα συστατικά μπορούν να καθαρίσουν τις ελεύθερες ρίζες, να μειώσουν το οξειδωτικό στρες και να βελτιώσουν την ανοσία. αντίσταση του ανοσοποιητικού συστήματος.
Κάντε κλικ στα οφέλη του σωληνίσκου cistanche
Λίγα χρόνια μετά τον χαρακτηρισμό του Hamadarin, χαρακτηρίστηκαν τα 5 D7rs (D7r1-D7r5) των οποίων οι μεταγραφές είχαν προηγουμένως παρατηρηθεί στους θηλυκούς σιελογόνους αδένες Anopheles gambiae (Cellia) [27,32] [34]. Όλα αυτά, εκτός από το D7r5, αναφέρθηκε ότι δεσμεύουν σεροτονίνη με πολύ υψηλές συγγένειες (σταθερές διάστασης, KD, κάτω από 3 nM) καθώς και ισταμίνη με KD που κυμαίνεται από 41 έως 111 nM. Περιέργως, αλλά όχι περίεργο, η ικανότητά τους να δεσμεύουν άλλες βιογενείς αμίνες και οι συγγένειές τους με αυτές ήταν επίσης διακριτές (συνοψίζονται στον Πίνακα 1), υποδηλώνοντας απόκλιση λειτουργίας μεταξύ διαφορετικών μελών της οικογένειας D7, ακόμη και εντός του ίδιου είδους. Σε όλες τις περιπτώσεις, η στοιχειομετρία δέσμευσης ήταν 1:1 και οι δοκιμασίες ανταγωνισμού πρότειναν ότι οι βιογενείς αμίνες μοιράζονται την ίδια θέση δέσμευσης [34], όπως επιβεβαιώθηκε αργότερα από την κρυσταλλική δομή του Anopheles gambiae D7r4 που συνδέεται με τη σεροτονίνη και άλλες βιογενείς αμίνες [28] .
Ορθολόγοι Αν. Οι gambiae D7rs βρίσκονται σε όλα τα είδη που αναλύθηκαν με Anophelines, των οποίων τα γονιδιώματα έχουν σημειωθεί στη Βάση του Διανύσματος μέχρι στιγμής (Εικόνα 2), αν και ορισμένα έχασαν ένα ή περισσότερα μέλη [29,60]. Ανεξάρτητα από τη διακύμανση των αλληλουχιών στα διάφορα είδη και ομάδες, τα κρίσιμα υπολείμματα που καλύπτουν τις βιογενείς αμίνες, που εντοπίστηκαν χάρη στα δομικά δεδομένα Anopheles gambiae D7r4 [28], διατηρούνται εξαιρετικά σε όλες σχεδόν τις μορφές D7r1-D7r4 μεταξύ των ειδών που ανήκουν στα υπογένη Cellia, Nissorhynchus και Anopheles, υποδηλώνοντας ότι όλα διατηρούσαν την ικανότητα να δεσμεύουν τη σεροτονίνη [29]. Από την άλλη πλευρά, όλα τα είδη D7r5 παρουσιάζουν αλλοιώσεις σε διάφορα κρίσιμα υπολείμματα [29] υποδηλώνοντας ότι όπως παρατηρήθηκε πειραματικά για το Anopheles gambiae D7r5 [34], έχασαν την ικανότητα να δεσμεύουν οποιαδήποτε βιογενή αμίνη.
Περιέργως, ενώ οι μορφές Anopheline D7S φαίνεται να έχουν γενικά διατηρήσει τη βιογενή τους ικανότητα δέσμευσης αμινών, αυτό δεν ισχύει για τις μακριές μορφές, όπου παρατηρούνται πολλές παραλλαγές, νεο-λειτουργικότητα και απώλεια λειτουργίας στα είδη που ανήκουν σε διαφορετικά είδη. υπογένη.
Το πρώτο Anopheles D7L που χαρακτηρίστηκε, αρχικά ονομαζόταν Anopheles stephensi D7L1 (AnSt-D7L1), τώρα θεωρείται D7L2 λόγω των ομοιοτήτων του με το An. Οι μορφές γάμπια αποδείχθηκε ότι δεν είναι σε θέση να δεσμεύσουν τη σεροτονίνη ή οποιεσδήποτε βιογενείς αμίνες που δοκιμάστηκαν αλλά δέσμευαν εικοσανοειδή στον Ν-τερματικό τους τομέα [30]. Όπως ο Anopheles gambiae, ο An. Stephensi ανήκει στο υπογένος Cellia. Ωστόσο, πρόσφατα μέλη D7L που ανήκουν σε άλλα υπογενή Anopheline An. atroparvus D7L1 (Anopheles) και An. Η αγαπημένη D7L2 (Nyssorhynchus) αποδείχθηκε ότι δεσμεύει τη σεροτονίνη με πολύ υψηλή συγγένεια (στο C-τερματικό της τομέα) [29], εμφανίζοντας KDs συγκρίσιμες με τις παρατηρούμενες για Anopheles gambiae βραχείες μορφές [34] και Aedes μακριές μορφές [34,37,38 ]. Ωστόσο, γενικά, η ικανότητά τους να δεσμεύουν άλλες βιογενείς αμίνες ήταν απούσα ή σημαντικά χαμηλότερη. Η απώλεια της ικανότητας δέσμευσης της σεροτονίνης που παρατηρείται στο An. Το stephensi μπορεί να γίνει καλύτερα κατανοητό χάρη στα δομικά δεδομένα [30].
Στα κουνούπια Anopheline, οι πρωτεΐνες D7S (ή D7r) ευθυγραμμίζονται με την C-τερματική περιοχή των Anopheles και Aedes D7L και οι μελέτες κρυσταλλογραφίας ακτίνων Χ επιβεβαίωσαν ότι οι πρωτεΐνες D7S και η C-τερματική περιοχή παρόμοια με OBP της βιογενούς αμίνης που δεσμεύει D7L είναι πολύ παρόμοια δομικά (28,29,36]. Ως γενικό χαρακτηριστικό, ο θύλακας σύνδεσης σεροτονίνης/βιογενούς αμίνης είναι μια υδρόφοβη κοιλότητα επενδεδυμένη με αρωματικές ομάδες, που περιβάλλεται από 8 α-έλικες που σταθεροποιούνται από 3 δισουλφιδικούς δεσμούς (Εικόνες 1Β και 3). Η παρουσία ορισμένων πολικών φορτισμένων υπολειμμάτων στην είσοδο του θύλακα (γλουταμικό και ασπαρτικό οξύ) επιτρέπει δεσμούς υδρογόνου με το αλειφατικό μέρος της σεροτονίνης (Εικόνες 3 και 4). τυροσίνη (lyr 94 στο An. gambiaeD7r4 Σχήμα 3). Τα υπολείμματα που είναι γνωστό ότι είναι σημαντικά για τη δέσμευση σεροτονίνης/βιογενούς αμίνης επισημαίνονται σε γκρίζα πλαίσια στο Σχήμα 4. Η ευθυγράμμιση δείχνει ότι τα περισσότερα από αυτά διατηρούνται, παρά τη διαφορά στα άλλα υπολείμματα, ακόμη και σε πρωτεΐνες που αποδεικνύεται ότι δεν δεσμεύουν βιογενείς αμίνες, όπως το An. stephensi D7L1, όπου η απώλεια δέσμευσης οφείλεται σε μερικές τροποποιήσεις υπολειμμάτων (Εικόνα 4).
Σε ορισμένες πρωτεΐνες, η ομάδα 5-υδροξυλίου σεροτονίνης σχηματίζει έναν δεσμό υδρογόνου με μια ιστιδίνη (Σχήματα 3 και 4 επισημαίνονται με ένα μπλε πλαίσιο) όπως παρατηρείται στο D7r4 και στο Aedes aegypti D7L1 (His 35 στο πρώτο και His 189 στο δεύτερος). Αυτό το His αντικαθίσταται από αλανίνη (Ala-190) στο An-StD7L1, αλλά αυτό δεν θα ήταν αρκετό για να εξηγήσει την απώλεια λειτουργίας που παρατηρήθηκε, αφού το An. darlingi D7L2 (υπογένος Nyssorhynchus) και An. Το ετερόπαρο D7L1 (υπογένος Anopheles) δεσμεύει τη σεροτονίνη παρόλο που αυτό το His υποκαθίσταται από μεθειονίνη ή αλανίνη, αντίστοιχα [29]. Επομένως, η κρίσιμη διαφορά που διακρίνει το Anopheles stephensi D7L1 από τα κουνούπια D7s που δεσμεύουν τη σεροτονίνη είναι η απώλεια της δεύτερης και της τελευταίας κυστεΐνης στην C-τερματική τους περιοχή (πράσινα και κόκκινα πλαίσια C-τερματική περιοχή, Εικόνα 4). Αυτά τα δύο υπολείμματα θα σχημάτιζαν τον δεύτερο δισουλφιδικό δεσμό του Ο-τερματικού, το τέταρτο της συνολικής πρωτεΐνης, επομένως σημασμένο ως DS4. Ελλείψει αυτών, υπάρχει μετατόπιση της έλικας H2 και ξετύλιγμα της έλικας Β2, ως αποτέλεσμα, η W173, η οποία παρεμπιπτόντως δεν υπάρχει στα D7s που δεσμεύουν βιογενή αμίνη, και το R177 (AnSt-D7L1) καταλαμβάνει μέρος του θύλακα σύνδεσης, εξηγώντας η ανικανότητά του να δεσμεύει βιογενείς αμίνες, όπως φαίνεται και συζητήθηκε λεπτομερώς προηγουμένως [30].
Η απουσία αυτών των δύο κυστεϊνών παρατηρείται επίσης σε όλα τα D7L1s και D7L2s που εκφράζονται σε όλα τα είδη που ανήκουν στο υπογένος Cellia, οδηγώντας στην πρόταση ότι μπορεί να έχουν χάσει επίσης τη λειτουργία δέσμευσης βιογενούς αμίνης [29]. Αυτή η υπόθεση υποστηρίζεται περαιτέρω από την παρατήρηση των μοντέλων τους, που κατασκευάστηκαν χρησιμοποιώντας το AlphaFold [61] (Εικόνα 5). Όπως το παρατηρούμενο πειραματικά για τον Αν. stephensi D7L1 [30], η απουσία DS4 στις πρωτεΐνες Cellia D7L1 και D7L2 συνοδεύεται από μετατόπιση της θέσης H2 της έλικας και άλλες δομικές αναδιατάξεις που οδηγούν σε πιο ογκώδη C-τερματικό θύλακα με υπολείμματα που καταλαμβάνουν μέρος της κοιλότητας που δεν αφήνουν αρκετό χώρο για φιλοξενούν τη σεροτονίνη ή άλλες βιογενείς αμίνες (Εικόνα 5). Από την άλλη πλευρά, ο βαθμός εκτύλιξης στην έλικα Β2 που παρατηρείται εξαρτάται από το είδος ή μπορεί να είναι αποτέλεσμα μιας πιο ασταθούς έλικας που μεταβαίνει από τη μια κατάσταση στην άλλη.
Μια άλλη ομάδα μακρών μορφών είναι το D7L3, που υπάρχει σε όλα τα είδη Anopheles με διαθέσιμα γονιδιώματα μέχρι στιγμής. Το Anopheles gambiae D7L3 δεσμεύει τη σεροτονίνη με υψηλή συγγένεια και εξειδίκευση [29] και η C-τερματική του περιοχή έχει όλα τα κρίσιμα αμινοξέα που φαίνεται ότι εμπλέκονται στη βιογενή αλληλεπίδραση αμίνης [28] διατηρημένα (Εικόνα 4) και με την ίδια χωρική διάθεση με το D7r4 [29]. Αυτή η διατήρηση παρατηρήθηκε επίσης σε όλα τα D7L3 που αναλύθηκαν από τα είδη Anopheles, ανεξάρτητα από τα υπογενή, υποδηλώνοντας ότι αυτή η μορφή, που βρίσκεται σε γειτονική θέση με βραχείες μορφές στα σμήνη D7, διατήρησε αυτή τη λειτουργία σε όλα αυτά τα είδη [29].
Στα κουνούπια Culicinae εντοπίζονται επίσης ορθόλογοι D7S και 2 D7L (D7L1 και D7L2). Ωστόσο, σε αντίθεση με τις παρατηρούμενες στις Anophelinae, οι σύντομες μορφές τους δεν δεσμεύουν τις βιογενείς αμίνες ανάλογα με τα αποτελέσματα που αναφέρθηκαν για το Aedes aegypti (AeD7S1) και το Culex quinquefasciatus (D7CQS1) [29], ενώ οι μακριές μορφές τους χαρακτηρίζονται μέχρι στιγμής, με εξαίρεση το Culex quinquefasciatus D7L1, έχουν πολύ υψηλή συγγένεια με αυτούς τους συνδέτες (ιδιαίτερα τη σεροτονίνη) όπως αναφέρεται για το Aedes aegypti D7L1 (προηγουμένως ονομαζόμενο AeD7L) και το D7L2 [34,37], Ae. albopictus (D7L1) [38] και Culex quinquefasciatus (CxD7L2) [39]. Δομικά δεδομένα υποδηλώνουν ότι η απώλεια λειτουργίας στις βραχείες μορφές τους, παρά το γεγονός ότι περιέχουν και τις 6 διατηρημένες κυστεΐνες και αποτελούνται από -έλικες, οφείλεται σε βράχυνση της περιοχής Η2 έλικας που στερείται C-τελικού και σε επακόλουθες διαφορές στις -έλικες. διευθετήσεις που οδηγούν σε απόφραξη της θήκης δεσίματος [29]. Πολύ σημαντικό, τα culicines στερούνται D7L3, τη μακρά μορφή που στο Anopheles sp. βρίσκεται αμέσως δίπλα στις κοντές μορφές στην κασέτα, και όπως το μεγαλύτερο μέρος του DS (D7r1–r4) στο Anopheles, δεσμεύει τη σεροτονίνη [29].
Οι βιογενείς αμίνες είναι μεσολαβητές διαφορετικών διεργασιών που εμπλέκονται στις αποκρίσεις των σπονδυλωτών στα δαγκώματα, πολλές φορές διασυνδέοντάς τις [6,62]. Η ισταμίνη, για παράδειγμα, είναι ένας ισχυρός μεσολαβητής φλεγμονωδών και αλλεργικών αποκρίσεων και απελευθερώνεται από την αποκοκκίωση των μαστοκυττάρων. Ενεργοποιεί το ενδοθήλιο, αυξάνει την αγγειακή διαπερατότητα και προάγει τον κνησμό και τον πόνο [63-67]. Είναι επίσης γνωστό ότι προάγει τη συστολή των λείων μυών. Η σεροτονίνη και η νορεπινεφρίνη που απελευθερώνονται αμέσως από τα ενεργοποιημένα αιμοπετάλια και τα ουδετερόφιλα είναι αγωνιστές της συσσώρευσης αιμοπεταλίων και της αγγειοσυστολής. Η σεροτονίνη εμπλέκεται επίσης στη φλεγμονώδη απόκριση ενεργοποιώντας το ενδοθήλιο και προάγοντας τον κνησμό και τον πόνο [6]. Η αποτελεσματικότητα και η σημασία αυτών των D7s για τη βιολογία του φορέα φάνηκε από την ικανότητά τους να αναστέλλουν τη σύσπαση των λείων μυών [34,37] που προκαλείται από διαφορετικές βιογενείς αμίνες και παρεμποδίζουν την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων που προκαλείται από τη σεροτονίνη [38].
3.3. Eicosanoid Binding D7s (ο Ν-τερματικός τομέας των D7L)
Το γεγονός ότι οι μορφές D7L έχουν δύο περιοχές που μοιάζουν με OBP αύξησε την πιθανότητα αυτές οι πρωτεΐνες να φιλοξενούν άλλους συνδέτες στη Ν-τερματική τους περιοχή. Πράγματι, η Αε. Το aegypti D7L1, γνωστό ότι δεσμεύει βιογενείς αμίνες [34], ήταν η πρώτη μακράς μορφής που αποδείχθηκε ότι δεσμεύει κυστεϊνυλολευκοτριένια (CysLTs) και λευκοτριένια Β4 (LTB4) μέσω του Ν-τερματικού του [36]. Αμέσως μετά, ο Αν. Το stephensi D7L1 (AnSt-D7L1), το οποίο δεν δεσμεύει βιογενείς αμίνες ή οποιοδήποτε άλλο ελεγμένο πρόσδεμα στην C-τερματική του περιοχή, αποδείχθηκε ότι δεσμεύει όχι μόνο CysLTs με εξαιρετικά υψηλή συγγένεια αλλά και ανάλογα θρομβοξάνης A2 (TXA2) (U46619 και καρβοκυκλική θρομβοξάνη ) [30]. Οι δοκιμασίες θερμιδομετρίας ισοθερμικής τιτλοδότησης (ITC) και τα δομικά δεδομένα έδειξαν ότι και οι δύο συνδέτες μοιράζονται τουλάχιστον μέρος της θέσης δέσμευσης που βρίσκεται στον Ν-τερματικό του τομέα [30].
Άλλες πρωτεΐνες D7L1 και L2 στα κουνούπια Culicinae και Anophelinae φάνηκε επίσης να δεσμεύουν εικοσανοειδή, αλλά με διαφορετικές συγγένειες και ειδικότητες, εκτός από την ικανότητά τους να δεσμεύουν τη σεροτονίνη. Στο Culicinae (Ae. aegypti D7L2 [37], Ae. albopictus D7L1 [38], και Cu. quinquefasciatus D7L2 [39]) φάνηκε ότι δεσμεύει τα CysLTs και LTB4 (το τελευταίο μόνο στο Aedes), αλλά με συγγένειες σημαντικά χαμηλότερες από τις αναφερόμενες για την Αε. αίγυπτος D7L1. Είναι ενδιαφέρον ότι απέκτησαν την ικανότητα δέσμευσης U46619. Στα κουνούπια Anophelinae. Ενα. Το ετερόπαρο D7L1 (Anopheles) δεσμεύει τα CysLTs, αλλά με χαμηλή συγγένεια, ενώ το An. Η αγαπημένη D7L2 (Nyssorhynchus) δεσμεύει τα CysLTs με πολύ υψηλή συγγένεια και ανάλογα TXA2 (U46619) [29]. Αυτές οι πρωτεΐνες D7s είναι διλειτουργικές αφού δεσμεύουν επίσης τη σεροτονίνη.
Σύγκριση υπολειμμάτων θέσης δέσμευσης από κρυστάλλους συμπλόκου συνδέτη από An. darlingi D7L2, An. stephensi D7L1 και Ae. Το aegypti D7L1 [29,30,36] επέτρεψε την αντιστοίχιση κρίσιμων υπολειμμάτων για δέσμευση εικοσανοειδών στον Ν-τελικό τομέα (επισημαίνεται στο Σχήμα 4). Ιδιαίτερη σημασία για τη σταθεροποίηση των προσδεμάτων είναι οι Trp-37, Trp{-40 και Tyr-52 (AnSt-D7L1 ως αναφορά) και όταν το τελευταίο αντικαθίσταται από ένα Phe (κίτρινο αιχμή βέλους Εικόνα 4), όπως παρατηρείται στο Ae. aegypti D7L1, χάνεται η ικανότητα δέσμευσης του TXA2 επιπλέον των CysLTs. Εξίσου σημαντική είναι η παρουσία Lys-152 που σχηματίζει δεσμό υδρογόνου ή γέφυρα άλατος με το καρβοξυλικό του εικοσανοειδούς. Πολλά από αυτά τα βασικά υπολείμματα διατηρούνται στα D7L1s και D7L2, ειδικά στο τελευταίο, που υπάρχουν σε άλλα είδη Anophelinae που αναλύθηκαν, γεγονός που υποδηλώνει ότι ανεξάρτητα από το υπογένος διατήρησαν τουλάχιστον ένα μακράς μορφής (D7L1 και/ή D7L2) ικανό να δεσμευτεί κυστεϊνυλολευκοτριένια [29], όπως φαίνεται πιο πρόσφατα στην περίπτωση των Anopheles gambiae D7L1 και D7L2 [68]. Αυτά τα δύο Αν. Τα gambiae D7L δεν μπόρεσαν να δεσμεύσουν βιογενείς αμίνες, αλλά διατήρησαν την ικανότητα να δεσμεύουν εικοσανοειδή [68], κάτι που δεν αποτελεί έκπληξη δεδομένης της ομοιότητάς τους (ειδικά της μορφής D7L2) με το Anopheles stephensi D7L1 (τώρα L2) [30] και ότι και τα δύο είδη ανήκουν στο υπογένος Τα Cellia και τα D7L1 και L2 τους δεν διαθέτουν το DS4 στον C-τερματικό τομέα.
Αξίζει να σημειωθεί ότι ενώ τα D7L3s υπάρχουν σε όλα τα είδη Anopheles και έχουν τα υπολείμματά τους συνδεδεμένα με τη δέσμευση της σεροτονίνης στο C-τερματικό άκρο εξαιρετικά διατηρημένα, το Ν-τελικό όλων των ειδών προβλέφθηκε ότι δεν μπορεί να δεσμεύσει εικοσανοειδή λόγω σημαντικών υποκαταστάσεων σε υπολείμματα που είναι γνωστά ότι είναι σημαντικό για αυτό το έργο. Αυτή η υπόθεση επιβεβαιώθηκε πειραματικά όταν η ITC είχε δείξει ότι ο An. Το gambiae D7L3 δεν δεσμεύει κανένα εικοσανοειδές που έχει δοκιμαστεί [29].
Είναι πολύ ενδιαφέρον ότι οι μορφές D7L βρίσκονται επίσης σε μύγες της άμμου (οικογένεια: Psychodidae) [17,69] παρά την εξελικτική απόσταση μεταξύ αυτών και των κουνουπιών (Culicidae). Οι μακριές μορφές που χαρακτηρίζονται από το σάλιο δύο διαφορετικών ειδών Phlebotomus (P. papatasi και P. duboscqi) διατήρησαν την ικανότητα να δεσμεύουν CysLT με εξαιρετικά υψηλές συγγένειες και ανάλογα TXA2 [40]. Δομικά δεδομένα που ελήφθησαν από το P. papatasi D7L1 έδειξαν ότι η δέσμευση εικοσανοειδών συνέβη επίσης στο Ν-τελικό άκρο, με παρόμοιο τρόπο όπως περιγράφεται για το D7L των κουνουπιών, ενώ το C-άκρο του ήταν πιο κοντό και κολοβωμένο, επομένως δεν ήταν σε θέση να δεσμεύσει βιογενείς αμίνες. 40].
Παρατηρήσεις απολιθωμάτων υποδηλώνουν ότι τα πρώτα Δίπτερα εμφανίστηκαν στο Τριασικό, περισσότερα από 240 εκατομμύρια χρόνια πριν (MYA). Μέχρι το τέλος του Triassic, Culicomorpha και Psychodomorpha infra εμφανίστηκαν, που σημαίνει ότι οι γενεαλογίες των κουνουπιών και των μυγών της αμμουδιάς απέκλιναν περισσότερο από 200 MYA, πολύ πιθανό από έναν φυτοφάγο πρόγονο, υποδηλώνοντας ότι ανέπτυξαν τη συνήθεια να τρέφονται με αίμα ανεξάρτητα [5,70 ]. Αυτό υποστηρίζεται από το γεγονός ότι οι περισσότερες οικογένειες πρωτεϊνών σιελογόνων αδένων που βρίσκονται αποκλειστικά στο Nematocera είναι διαφορετικές μεταξύ των οικογενειών Psychodidae και Culicidae, πράγμα που σημαίνει ότι είναι πολύ δύσκολο να εκχωρηθούν ορθολογίες μεταξύ τους [5]. Ως εκ τούτου, τα D7L κουνουπιών και αμμόμυγας, πιθανότατα προήλθαν ανεξάρτητα από ένα παρόμοιο ή κοινό προγονικό γονίδιο, που πιθανότατα κωδικοποιεί ένα OBP, το οποίο αργότερα στρατολογήθηκε ανεξάρτητα στο σιαλώμη τους και απέκτησε αυτή τη λειτουργία με συγκλίνουσα εξέλιξη. Αυτή η υπόθεση υποστηρίζεται περαιτέρω από την παρατήρηση ότι έχουν διαφορετικές δομές εσωνίων/εξονίων [40].
Η απουσία ορθολόγων D7S στις μύγες της άμμου και η αδυναμία των ορθολόγων D7L τους να δεσμεύουν βιογενείς αμίνες δεν σημαίνει ότι το σάλιο τους δεν έχει μόρια για να δεσμεύσει αυτούς τους στόχους. Πράγματι, στο σάλιο μύγας της άμμου μια άλλη οικογένεια πρωτεϊνών "Yellow" έχει αναλάβει τη λειτουργία να δεσμεύει βιογενείς αμίνες [71], ενώ η άλλη οικογένεια πρωτεΐνης τύπου OBP PdSP15 που βρίσκεται στο σάλιο τους δρα αναστέλλοντας την ενεργοποίηση της οδού επαφής [41]. Αυτό είναι ένα εξαιρετικό παράδειγμα του πώς η ανεξάρτητη εξέλιξη οδηγεί σε διαφορετικά ρεπερτόρια πρωτεϊνών που στοχεύουν τα ίδια μόρια.
Τα λευκοτριένια (CysLTs και LTB4) είναι ισχυροί μεσολαβητές φλεγμονής και αλλεργίας που εκκρίνονται από ενεργοποιημένα μαστοκύτταρα και άλλα ανοσοκύτταρα όπως ηωσινόφιλα και μακροφάγα, καθώς και από επιθηλιακά και ενδοθηλιακά κύτταρα [72]. Τα CysLTs απελευθερώνονται ως απόκριση στα τσιμπήματα κουνουπιών μαζί με την ισταμίνη [62], προκαλώντας αυξημένη αγγειακή διαπερατότητα στο δέρμα [63] και επακόλουθο σχηματισμό ερυθήματος και σιταριού [73,74], ενώ το LTB4 είναι γνωστό ως χημειοελκτικό υπεύθυνο για την προσέλκυση κυττάρων του ανοσοποιητικού στον ιστότοπο απόκρισης [72]. Η ικανότητα δέσμευσης αυτών των ισχυρών προφλεγμονωδών μεσολαβητών θα ήταν σημαντική για την αναστολή της ενεργοποίησης του ενδοθηλίου, του σχηματισμού οιδήματος, της διήθησης των ανοσοκυττάρων, του κνησμού και του πόνου που προκαλούνται από αυτά τα εικοσανοειδή, αποτρέποντας ή καθυστερώντας την επίγνωση του ξενιστή και επιτρέποντας σε αυτά τα έντομα να τρέφονται με αίμα. Αυτό το αντιφλεγμονώδες αποτέλεσμα φάνηκε σε μοντέλα ποντικών κατά την ένεση του Ae. albopictus D7L1 (που δεσμεύει LTB4, CysLTS και βιογενείς αμίνες, επιπλέον της χαμηλής συγγένειας για το U46619) 10 λεπτά πριν από την προφλεγμονώδη πρόκληση με -γλυκάνη από Saccharomyces cerevisiae μείωσε την εισροή των ανοσοκυττάρων στην περιτοναϊκή κοιλότητα [38].
Η θρομβοξάνη Α2 παράγεται και εκκρίνεται από ενεργοποιημένα αιμοπετάλια ως απόκριση στην έκθεση στο κολλαγόνο. Στη συνέχεια δεσμεύεται στους υποδοχείς του που υπάρχουν στην επιφάνεια των αιμοπεταλίων πολλαπλασιάζοντας την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων και ενισχύοντας τη συσσώρευση [75,76]. Πολύ σημαντικό, εκτός από το TXA2, τα αιμοπετάλια εκκρίνουν επίσης άλλα προ-αιμοστατικά και προφλεγμονώδη μόρια, όπως ADP, σεροτονίνη, πολυφωσφορικό και νορεπινεφρίνη [6]. Το TXA2 προάγει επίσης τη αγγειοσυστολή [77,78] και πιο πρόσφατα αποδείχθηκε ότι προκαλεί αποκρίσεις κνησμού και γρατσουνίσματος σε ποντίκια [79,80].
Αρκετά D7Ls φάνηκε να δεσμεύουν το U46619, ένα πιο σταθερό ανάλογο TXA2 από πειράματα ITC και φάνηκε ότι αναστέλλουν τη συσσώρευση αιμοπεταλίων in vitro που προκαλείται από το U46619. Είναι σημαντικό ότι αυτές οι πρωτεΐνες ανέστειλαν επίσης τη συσσώρευση αιμοπεταλίων που προκαλείται από το αραχιδονικό οξύ (πρόδρομος θρομβοξάνη Α2) και χαμηλότερες συγκεντρώσεις κολλαγόνου (στις οποίες η συσσωμάτωση των αιμοπεταλίων βασίζεται σε TXA2 και ADP για να ενισχύσουν το σήμα), αποδεικνύοντας ότι είναι πράγματι ικανές να δεσμεύουν TXA2 που συντίθεται από αιμοπετάλια, και όχι μόνο το σταθερό ανάλογό του που χρησιμοποιείται για πειράματα ITC και κρυσταλλογραφίας [29,30,37,38,40].
Τα CysLTs και το TXA2 είναι επίσης γνωστό ότι προάγουν τη σύσπαση των λείων μυών. Οι αναλύσεις έδειξαν ότι ο Αν. Το stephensi D7L1 (τώρα ταξινομημένο ως D7L2), για παράδειγμα, ήταν σε θέση να αναστείλει τη σύσπαση του ειλεού του ινδικού χοιριδίου που προάγει το LTC και τη σύσπαση της αορτής του αρουραίου που προάγει το U46619-in vivo [30].
Τα OBP των εντόμων περιγράφηκαν αρχικά σε οσφρητικά και γευστικά προσαρτήματα, όπου δέσμευαν, διαλυτοποιούσαν και μετέφεραν σημειοχημικά, καθώς και ρύθμιζαν τη διάρκεια της απόκρισης οσμής. Αργότερα αποδείχθηκε ότι υπάρχουν και σε μη αισθητήρια όργανα, όπως το μέσο έντερο, τους βοηθητικούς αδένες, τους όρχεις, το σπερματικό υποδοχέα, τα σωληνάρια Malpighian, ακόμη και στον αδένα δηλητηρίου της σφήκας, υποδεικνύοντας ότι μπορεί να έχουν ένα ευρύ φάσμα προσδεμάτων και οι λειτουργίες τους είναι δεν περιορίζεται στη χημειοθεραπεία (ανασκόπηση στο [20,21]). Ως εκ τούτου, οι περισσότερες από τις δοκιμές δέσμευσης και τα διαθέσιμα δεδομένα δομής πραγματοποιήθηκαν με συνδέτες όπως φερομόνες, μόρια οσμής, αλκοόλες και άλλες συνθετικές οργανικές ενώσεις [20,26,81-84]. Κανένα έντομο OBP δεν έχει δειχθεί ότι δεσμεύει βιογενείς αμίνες μέχρι στιγμής. Ωστόσο, ορισμένα OBPs φάνηκε να δεσμεύουν λιπαρές αλκοόλες μακράς αλυσίδας, όπως το bombykol, μια φερομόνη που παράγεται από το Bombyx mori [82], ή λιπαρά οξέα μακράς αλυσίδας και αραχιδονικό οξύ, τον πρόδρομο των εικοσανοειδών όπως αναφέρεται για το Aedes aegypti OBP22 [85, 86], για παράδειγμα. Ae. Το aegypti OBP22 υπάρχει στην κεραία, στη θηλυκή προβοσκίδα και στα αρσενικά αναπαραγωγικά όργανα και μεταφέρεται στα θηλυκά κατά τη διάρκεια του ζευγαρώματος [86], υποδηλώνοντας ότι η λειτουργία του δεν περιορίζεται στη χημειοδεκτικότητα. Οι δομικές μελέτες δείχνουν ότι σε κατάσταση χωρίς συνδέτη, αυτή η πρωτεΐνη αποτελείται από 6 -έλικες όπως τα κλασικά OBP των εντόμων. Ωστόσο, παρουσία ενός προσδέματος, το OBP22 υφίσταται μια διαμορφωτική αλλαγή στο C-άκρο του σχηματίζοντας μια έβδομη έλικα [85] που διευρύνει τον θύλακα σύνδεσης. Αξίζει να σημειωθεί ότι οι συγγραφείς παρατήρησαν ότι αυτή η OBP έχει την υψηλότερη ομοιότητα με τη Ν-τερματική περιοχή των πρωτεϊνών D7L και η έβδομη έλικα της που σχηματίζεται κατά τη σύνδεση με λιπαρά οξέα καταλαμβάνει μια πολύ παρόμοια θέση με την έβδομη έλικα που παρατηρείται σε αυτές τις περιοχές δέσμευσης λιπιδίων D7L [85. ].
3.4. ADP Binding D7s
Το Culex quinquefasciatus D7L1 (CxD7L1), διαφορετικό από οποιοδήποτε D7L που έχει χαρακτηριστεί μέχρι στιγμής, δεν μπορεί να δεσμεύσει εικοσανοειδή ή βιογενείς αμίνες, πιθανώς λόγω λίγων αλλά σημαντικών τροποποιήσεων σε ορισμένες κρίσιμες θέσεις στους θύλακές τους Ν και Γ, όπως η παρουσία γλυκίνης αντί του γλουταμινικού οξέος στη θέση 155, που είναι πολύ σημαντικό να σχηματιστεί ένας δεσμός υδρογόνου με την 5-υδροξυλομάδα του δακτυλίου ινδόλης σεροτονίνης στην πλειονότητα των βιογενών D7 που δεσμεύουν αμίνη, καθώς και μια ιστιδίνη στη θέση 172 αντί για τυροσίνη, όπως παρατηρείται στην πλειονότητα των βιογενών πρωτεϊνών D7 που δεσμεύουν την αμίνη (Εικόνα 4). Αντίθετα, φάνηκε ότι δεσμεύει τα φωσφορυλιωμένα παράγωγα της αδενοσίνης ATP, ADP και AMP (50 τρι-, διφωσφορική αδενοσίνη, και μονοδιφωσφορική, αντίστοιχα) με υψηλή συγγένεια, αδενοσίνη και αδενίνη με σημαντικά χαμηλότερες συγγένειες [39]. Μια άλλη ιδιαιτερότητα είναι το γεγονός ότι η αλληλεπίδραση με τους υποκαταστάτες του λαμβάνει χώρα μεταξύ των περιοχών που μοιάζουν με Ν- και C-τερματικού άκρου OBP, αντί των κοιλοτήτων μέσα σε οποιαδήποτε από αυτές [39].
Οι ενδοκυτταρικές συγκεντρώσεις ATP και ADP διατηρούνται αυστηρά και όταν υπάρχει τραυματισμός, το ADP και το ATP απελευθερώνονται στο εξωκυτταρικό περιβάλλον μετά την κυτταρική λύση και μπορούν να λειτουργήσουν ως προφλεγμονώδη και προ-αιμοστατικά μόρια [76,87]. Η ADP ενεργοποιεί τη συσσώρευση αιμοπεταλίων και εκκρίνεται από ενεργοποιημένα αιμοπετάλια ως απόκριση σε αγωνιστές, όπως το κολλαγόνο που εκτίθεται μετά από αγγειακό τραυματισμό, για περαιτέρω διάδοση της συσσώρευσης [76,88]. Λόγω της ικανότητάς του να δεσμεύει το ADP, το CxD7L1 [39] αποδείχθηκε ότι αναστέλλει την αλλαγή του σχήματος των αιμοπεταλίων που προκαλείται από χαμηλότερες συγκεντρώσεις κολλαγόνου, καθώς και από τη συσσώρευση που προκαλείται από υψηλότερες δόσεις (1 μΜ) ADP και χαμηλότερες δόσεις κολλαγόνου στις οποίες η συσσώρευση εξαρτάται από την έκκριση δεύτερων μεσολαβητών όπως ADP και TXA2.
4. Πρωτεΐνη νεανικής ορμόνης κουνουπιών (mJHBP): Τι κάνει ένα D7-όπως η πρωτεΐνη στην αιμολέμφο κουνουπιών;
Το 2017, ο Kim και οι συνεργάτες του [89], για να βρουν πρωτεΐνες που σχετίζονται με D{{2} και εκφράζονται έξω από τους σιελογόνους αδένες, βρήκαν και περιέγραψαν μια νέα πρωτεΐνη που υπάρχει κυρίως στην αιμολέμφο των κουνουπιών χρυσαλλίδων και ενηλίκων (αρσενικών και θηλυκών) Aedes aegypti. Ορθολόγους αυτής της πρωτεΐνης βρέθηκαν επίσης σε διαφορετικά είδη Anopheles και Culex, που μοιράζονται περισσότερες ομοιότητες από τις πρωτεΐνες D7 του σάλιου τους. Όπως οι μακριές μορφές D7 του σάλιου, αυτή η πρωτεΐνη έχει δύο τομείς που μοιάζουν με OBP. Το αμινοτελικό του διατήρησε πολλά από τα υπολείμματα που αποδεικνύεται ότι εμπλέκονται στη δέσμευση εικοσανοειδών στα D7 του σάλιου, υποδηλώνοντας ότι μπορεί να υπάρχει ένας θύλακας δέσμευσης λιπιδίων, ενώ η C-τερματική του σύνθεση ήταν πολύ διαφορετική από οποιαδήποτε άλλη D7/D{10}}όπως περιγραφεί μέχρι τώρα. Πειράματα ITC έδειξαν ότι αυτή η πρωτεΐνη, που ονομάζεται πρωτεΐνη νεανικής ορμόνης δέσμευσης κουνουπιών (mJHBP), δεν μπορεί να δεσμεύσει εικοσανοειδή αλλά έχει υψηλή συγγένεια και ειδικότητα για την νεανική ορμόνη (JH). Τα δομικά δεδομένα δείχνουν ότι πράγματι η αρχιτεκτονική του Ν-τερματικού τομέα είναι παρόμοια με την αντίστοιχη στις πρωτεΐνες D7L, που περιέχει δύο δισουλφιδικούς δεσμούς και αποτελείται από 7 -έλικες και περιέχει τα περισσότερα από τα υπολείμματα που εμπλέκονται στην αλληλεπίδρασή του με το JH III. Ωστόσο, διαφορετικά από αυτά που παρατηρήθηκαν για τις πρωτεΐνες D7L του σάλιου που περιγράφηκαν μέχρι τώρα, ορισμένα από τα C-τερματικά υπολείμματα συμμετέχουν επίσης στη δέσμευση, ειδικά η επέκταση της έλικας -13 που κλείνει την είσοδο του θύλακα σύνδεσης [89]. Πολύ σημαντικό, όπως αναφέρθηκε καλά από τους συγγραφείς, αυτή η πρωτεΐνη είναι δομικά εντελώς διαφορετική από την πρωτεΐνη δέσμευσης ορμόνης νεανικής αιμολέμφου που περιγράφηκε μέχρι τώρα στο Bombyx mori [90].
Η νεανική ορμόνη ρυθμίζει τις πιο διαφορετικές διεργασίες στα έντομα, συμπεριλαμβανομένης της ανάπτυξης [91], της τήξης και της μεταμόρφωσης [92], της αναπαραγωγής και της ωογένεσης [93-95] και της ανοσίας [96,97]. Όταν ο φυσιολογικός ρόλος του Aedes aegypti mJHBP μελετήθηκε με την εξάλειψη του γονιδίου του με το CRISPR-cas9, δεν παρατηρήθηκε καμία επίδραση στην ανάπτυξη, την ανάπτυξη ή την αναπαραγωγή [98]. Ωστόσο, τα κουνούπια που είχαν χτυπηθεί (KO) είχαν μειωμένη έμφυτη ανοσολογική απόκριση, ήταν πιο ευαίσθητα σε βακτηριακή μόλυνση όταν προσβλήθηκαν με υποθανατηφόρες δόσεις E. coli και παράγοντας σημαντικά χαμηλότερες ποσότητες αντιμικροβιακών πεπτιδίων μετά από μόλυνση σε σύγκριση με κουνούπια άγριου τύπου (WT). . Αυτές οι επιδράσεις ήταν σύμφωνες με τον μικρότερο αριθμό και τη διαφορετική σύνθεση αιμοκυττάρων στα κουνούπια ΚΟ που παρατηρήθηκαν από τους συγγραφείς [98].
5. Συμπεράσματα
Οι πρωτεΐνες που μοιάζουν με OBP του σάλιου, όπως τα μέλη της οικογένειας D7 και PdSP15, παίζουν κρίσιμο ρόλο στη διευκόλυνση της σίτισης με αίμα, στοχεύοντας διαφορετικά μόρια που εμπλέκονται στην αιμόσταση του ξενιστή και στη φλεγμονώδη απόκριση. Ο διπλασιασμός των γονιδίων του σάλιου, συμπεριλαμβανομένων των D7s, και η ταχεία μετάλλαξη οδηγούν σε κέρδος και απώλεια λειτουργιών σε διαφορετικά μέλη της οικογένειας. Αυτή η ποικιλομορφία δεν είναι αποκλειστική για τις πρωτεΐνες D7 και έχει περιγραφεί σε άλλες οικογένειες όπως οι λιποκαλίνες εντόμων [6,7].
Οι άμυνες του ξενιστή στο δάγκωμα δεν είναι αποκλειστικές για τα αιματοφάγα Δίπτερα, ούτε ο στόχος ή η παρουσία πρωτεϊνών για την αντιμετώπισή τους. Ωστόσο, ο τρόπος για να ξεπεραστούν αυτές οι προκλήσεις είναι ποικίλος μεταξύ των ομάδων αρθροπόδων λόγω της ανεξάρτητης εξέλιξης της αιματοφαγίας που οδηγεί σε ένα ευρύ ρεπερτόριο πρωτεϊνών για την εξουδετέρωση των αιμοστατικών, φλεγμονωδών και ανοσολογικών αποκρίσεων του ξενιστή [2,4,5,7,15,16] . Για παράδειγμα, οι πρωτεΐνες D7 μπορούν να δεσμεύσουν βιογενείς αμίνες και εικοσανοειδή. Στα τσιμπούρια και τα ζωύφια τριατομίνης, οι λιποκαλίνες (ανεξάρτητη εξέλιξη), μια εντελώς διαφορετική οικογένεια πρωτεϊνών με μια πολύ ξεχωριστή αρχιτεκτονική που αποτελείται από 8 αντιπαράλληλα φύλλα που περιβάλλουν έναν δεσμευτικό θύλακα, αναλαμβάνουν αυτές τις λειτουργίες [7,99-105]. Στις μύγες της άμμου, τα D7 βραχείας μορφής απουσιάζουν και η λειτουργία δέσμευσης βιογενών αμινών αναλαμβάνεται από την οικογένεια των «κίτρινων» πρωτεϊνών [71], ενώ έχουν D7L που δεσμεύουν τα εικοσανοειδή [40].
Το Culex quinquefasciatus D7L1, διαφορετικά από άλλα D7, δεσμεύει το ADP. Οι απυράσες, ένζυμα που καταλύουν την υδρόλυση του ATP και του ADP σε AMP και Pi (ανόργανο φωσφορικό), καθώς και πρωτεΐνες δέσμευσης ADP και 50 νουκλεοτιδάσες περιγράφηκαν στο σάλιο διαφορετικών ειδών αιματοφάγων αρθρόποδων, για να μην αναφέρουμε άλλες πρωτεΐνες που αναστέλλουν τη συσσώρευση αιμοπεταλίων που στοχεύουν άλλες μοριακές συσσωμάτωση όπως το κολλαγόνο και η θρομβίνη (ανασκόπηση από [76]).
Η κατανόηση της σύνθεσης του σάλιου είναι ζωτικής σημασίας για τη μελέτη της βιολογίας του φορέα και της αλληλεπίδρασής του με τον ξενιστή. Επιπλέον, παρέχει πολύτιμες πληροφορίες για την ανάπτυξη νέων προσεγγίσεων ελέγχου νόσων που μεταδίδονται από φορείς. Για παράδειγμα, στις περισσότερες ασθένειες που μεταδίδονται με φορείς το παθογόνο εγχέεται στον ξενιστή μαζί με το σάλιο φορέα κατά τη διάρκεια του δαγκώματος. Το γεγονός ότι ορισμένες πρωτεΐνες του σάλιου είναι ανοσογόνες, τις καθιστά εξαιρετικά επιδημιολογικά εργαλεία ως βιοδείκτες για την ανθρώπινη έκθεση σε δάγκωμα φορέα, όπως αναφέρεται για το εκχύλισμα πρωτεΐνης σιελογόνων αδένων Aedes [106] και An. gambiae D7s [107]. Η ικανότητά τους να προκαλούν ανοσολογικές αποκρίσεις τους καθιστά επίσης σπουδαίους υποψηφίους εμβολίου, όπως συμβαίνει στην περίπτωση του PdSP15, μιας πρωτεΐνης του σάλιου που μοιάζει με OBP που φαίνεται να είναι ένα πολλά υποσχόμενο εμβόλιο κατά της δερματικής λεϊσμανίασης [47].
Συνεισφορές συγγραφέα:
Οι PHA και JFA εξέτασαν τη βιβλιογραφία, έγραψαν το πρώτο προσχέδιο του χειρογράφου, αναθεώρησαν ουσιαστικά τα επόμενα προσχέδια και ενέκριναν την τελική έκδοση. Όλοι οι συγγραφείς έχουν διαβάσει και έχουν συμφωνήσει με τη δημοσιευμένη έκδοση του χειρογράφου.
Χρηματοδότηση:
Αυτή η εργασία χρηματοδοτήθηκε από το Ενδοσχολικό Ερευνητικό Πρόγραμμα του NIAID, Εθνικά Ινστιτούτα Υγείας.
Δήλωση του Συμβουλίου Θεσμικής Αναθεώρησης:
Δεν εφαρμόζεται.
Δήλωση ενημερωμένης συναίνεσης:
Δεν εφαρμόζεται.
Δήλωση διαθεσιμότητας δεδομένων:
Δεν εφαρμόζεται.
Ευχαριστίες:
Οι συγγραφείς ευχαριστούν τον José Marcos Chaves Ribeiro για την αναθεώρηση αυτού του χειρογράφου και την παροχή πολύτιμων προτάσεων και σχολίων.
Σύγκρουση συμφερόντων:
Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων.
βιβλιογραφικές αναφορές
1. Ribeiro, JM Ο ρόλος του σάλιου στην αιμοτροφία από τα αρθρόποδα. Annu. Rev. Entomol. 1987, 32, 463-478. [CrossRef] [PubMed]
2. Ribeiro, JM; Francischetti, IM Ο ρόλος του σάλιου των αρθροπόδων στη σίτιση αίματος: προοπτικές σιαλομέ και μετα-σιαλώμης. Annu. Rev. Entomol. 2003, 48, 73–88. [CrossRef] [PubMed]
3. Graca-Souza, AV; Maya-Monteiro, C.; Paiva-Silva, GO; Braz, GR; Paes, MC; Sorgine, MH; Oliveira, MF; Oliveira, PL Προσαρμογές κατά της τοξικότητας της αίμης σε αρθρόποδα που τρέφονται με αίμα. Insect Biochem. ΜοΙ. Biol. 2006, 36, 322-335. [CrossRef] [PubMed]
4. Ribeiro, JM Αρθρόποδα που τρέφονται με αίμα: Ζωντανές σύριγγες ή φαρμακολόγοι ασπόνδυλων; Μολύνω. Πράκτορες Dis. 1995, 4, 143-152. [PubMed]
5. Ribeiro, JM; Mans, BJ; Arca, B. Μια διορατικότητα στο σιαλώμα του αιμοφόρου Nematocera. Insect Biochem. ΜοΙ. Biol. 2010, 40, 767-784. [CrossRef]
6. Ribeiro, JMC; Arcà, B. Κεφάλαιο 2 από τις Σιαλόμες στο Σιαλόβερ. In Advances in Insect Physiology; Elsevier: Άμστερνταμ, Ολλανδία, 2009; σελ. 59–118.
7. Andersen, JF Δομή και μηχανισμός στις πρωτεΐνες του σάλιου από αρθρόποδα που τρέφονται με αίμα. Toxicon 2010, 56, 1120–1129. [CrossRef]
8. Arca, Β.; Ribeiro, JM Σάλιο αιματοφάγων εντόμων: Μια πολύπλευρη εργαλειοθήκη. Curr. Γνώμη. Insect Sci. 2018, 29, 102–109. [CrossRef]
9. Cornwall, J.; Patton, W. Μερικές παρατηρήσεις σχετικά με την σιελογόνο έκκριση των συνηθέστερων εντόμων και κροτώνων που ρουφούν το αίμα. Indian J. Med. Res. 1914, 2, 569–593.
10. Lester, Η.; Lloyd, L. Notes on the Process of Digestion in Tsetse-fries. Ταύρος. Entomol. Res. 1928, 19, 39–60. [CrossRef]
11. Ribeiro, J.; Garcia, E. Ο ρόλος των σιελογόνων αδένων στη διατροφή στον Rhodnius prolixus. J. Εχρ. Biol. 1981, 94, 219-230. [CrossRef]
12. Ribeiro, JM; Rossignol, PA; Spielman, A. Ο ρόλος του σάλιου των κουνουπιών στη θέση των αιμοφόρων αγγείων. J. Εχρ. Biol. 1984, 108, 1–7. [CrossRef]
13. Ribeiro, J.; Rossignol, Ρ.; Spielman, A. Η απυράση των σιελογόνων αδένων καθορίζει τον χρόνο ανίχνευσης στα κουνούπια ανοφελίνης. J. Insect Physiol. 1985, 31, 689-692. [CrossRef]
14. Valenzuela, JG Προσεγγίσεις υψηλής απόδοσης για τη μελέτη πρωτεϊνών και γονιδίων του σάλιου από φορείς ασθενειών. Insect Biochem. ΜοΙ. Biol. 2002, 32, 1199–1209. [CrossRef] 15. Mans, B.; Francischetti, I. Sialomic views on the evolution of blood-feeding behavior in Arthropods: Future therapeutics by natural design. Σε Τοξίνες και Αιμόσταση; Springer: Dordrecht, Ολλανδία, 2010; σελ. 21–44.
16. Άντρες, BJ Εξέλιξη αιμοστατικών και φλεγμονωδών μηχανισμών ελέγχου σπονδυλωτών σε αρθρόποδα που τρέφονται με αίμα. J. Innate Immun. 2011, 3, 41–51. [CrossRef] [PubMed] 17. Valenzuela, JG; Charlab, R.; Gonzalez, EC; de Miranda-Santos, IK; Marinotti, Ο.; Francischetti, ΙΜ; Ribeiro, JM Η οικογένεια D7 πρωτεϊνών του σάλιου σε δίπτερα που απορροφούν αίμα. Εντόμου ΜοΙ. Biol. 2002, 11, 149-155. [CrossRef] [PubMed]
18. Calvo, Ε.; de Bianchi, AG; James, AA; Marinotti, O. Οι κύριες οξοδιαλυτές πρωτεΐνες των ενήλικων θηλυκών σιελογόνων αδένων Anopheles darlingi περιλαμβάνουν ένα μέλος της οικογένειας πρωτεϊνών που σχετίζονται με το D7-. Insect Biochem. ΜοΙ. Biol. 2002, 32, 1419–1427. [CrossRef]
