Μια νέα στρατηγική για τον έλεγχο ενεργών συστατικών στο Cistanche Tubulosa με βάση την ανάλυση σχέσεων φάσματος-αποτελέσματος και τη φαρμακολογία δικτύου Ⅱ

3. Αποτελέσματα και συζήτηση

3.1. Δακτυλικά αποτυπώματα HPLC

3.1.1. Επικύρωση μεθόδου

Η επικύρωση για τη μέθοδο HPLC έδειξε ότι η σχετική τυπική απόκλιση (RSD) για την ακρίβεια, την αναπαραγωγιμότητα και τη σταθερότητα της μεθόδου ήταν μικρότερη από 2,85 τοις εκατό για τη σχετική περιοχή κορυφής (n = 11) και 0,77 τοις εκατό για το σχετικό χρόνο διατήρησης (n = 11). Η ακρίβεια του ίδιου διαλύματος δείγματος εμφανίστηκε εντός του εύρους 0.05–{{{{0}}.77 τοις εκατό για σχετικό χρόνο και 0.28– 2,70 τοις εκατό για τη σχετική περιοχή των κοινών κορυφών. Η αναπαραγωγιμότητα του πειράματος ήταν εντός του εύρους 0.03–{{0,20 τοις εκατό για το σχετικό χρόνο και 0,23-2,59 τοις εκατό για τη σχετική περιοχή των κοινών κορυφών. Η σταθερότητα του δείγματος ήταν 0,09-0,24 τοις εκατό για το σχετικό χρόνο συγκράτησης και 0,75-2,85 τοις εκατό για τη σχετική περιοχή των κοινών κορυφών. Αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το καθιερωμένο δακτυλικό αποτύπωμα ικανοποιήθηκε. Οι γραμμικές σχέσεις για το γενιποσιδικό οξύ,εχινακοσίδη, ακτεοσίδη, τουμπουλοσίδη Α, καιισοακτεοσίτηςφαίνονται στον Πίνακα S4. Η τιμή του τετραγώνου R ήταν 1.0000, υποδεικνύοντας καλή γραμμικότητα. Τα αποτελέσματα της ανάκτησης δείγματος έδειξαν ότι οι μέσες ανακτήσεις γενιποσιδικού οξέος, εχινακοσίδης,ακτεοσίδη, τουμπουλοσίδη Α, καιισοακτεοσίτηςήταν 100,37 τοις εκατό , 103,59 τοις εκατό , 98,46 τοις εκατό , 100,81 τοις εκατό και 101,19 τοις εκατό και το RSD για τις ανακτήσεις δειγμάτων ήταν μικρότερο από 2,68 τοις εκατό .

Κάντε κλικ εδώ για να λάβετε περισσότερες λεπτομέρειες σχετικά με τα Cistanche Active Components

3.1.2. Περιοχή αιχμής (PA) και σχετικός χρόνος διατήρησης (RRT)

Τα δακτυλικά αποτυπώματα αναφοράς και τα δακτυλικά αποτυπώματα των HMs, WEs και HRs από 11 παρτίδες C. tubulosa παρουσιάζονται στο Σχήμα 2. Έντεκα κορυφές, οι οποίες εμφάνισαν καλό διαχωρισμό και ανάλυση, αναγνωρίστηκαν ως κοινές κορυφές μεταξύ των HM, WE και HR. Οι πέντε πρότυπες ενώσεις ταυτοποιήθηκαν ως γενιποσιδικό οξύ (Α2),εχινακοσίδη(A8),ακτεοσίδη (A9), τουμπουλοσίδηΑ (Α10), καιισοακτεοσίτης(Α11). Η τυπική ένωση,εχινακοσίδη, που υπήρχε σε όλα τα χρωματογραφήματα (μέσος χρόνος κατακράτησης 12,86 λεπτά) με κατάλληλη περιοχή κορυφής και καλή σταθερότητα, επιλέχθηκε ως κορυφή αναφοράς και χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό των σχετικών χρόνων κατακράτησης (RRTs) των άλλων δέκα κοινές κορυφές. Τα RRT αυτών των διαφορετικών μορφών βρίσκονται στην περιοχή 0.16–1,51. Το PA και ο συντελεστής διακύμανσης (ποσοστό CV ) αυτών των κοινών κορυφών παρατίθενται στους Πίνακες S5–S7. Από τα δεδομένα, οι τιμές ποσοστού CV για PA σε διάφορες μορφές είναι 25,78 τοις εκατό -142,02 τοις εκατό , 23,36 τοις εκατό -150,38 τοις εκατό και 28,91 τοις εκατό -112,78 τοις εκατό για HM, WE και HR, αντίστοιχα. Αυτά τα αποτελέσματα αποκαλύπτουν σημαντικές διαφορές στη συγκέντρωση του καθενόςCistanche tubulosaένωση μεταξύ των διαφορετικών μορφών. Τα δακτυλικά αποτυπώματα των HM, WE και HRs φαίνονται στο Σχήμα 3.

Σχήμα 2 Δακτυλικά αποτυπώματα HPLC τυπικών δειγμάτων

3.1.3. Περιεχόμενα HM, WE και HR

Πέντε τυπικά συστατικά τουC. tubulosaμετρήθηκαν. Τα περιεχόμενα των κύριων συστατικών παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Η σύγκριση μεταξύ των HMs, WEs και HRs φαίνεται στον Πίνακα 2 και στο Σχήμα 4. Τα PhG στο C. tubulosa είναι βιολογικά ενεργά αλλά θερμοευαίσθητα. Τα ευαίσθητα στη θερμότητα συστατικά που διαλύονται στο νερό μπορούν να εξαχθούν αποτελεσματικά χρησιμοποιώντας μια λογική μέθοδο. Γενικά, το Cistanche herba εκχυλίζεται με νερό και στη συνέχεια εξατμίζεται σε συμπυκνωμένο διάλυμα για την ακόλουθη χημική ανάλυση [26, 27, 30]. Μετά την εκχύλιση και συμπύκνωση, χρησιμοποιήθηκε η τεχνολογία ξήρανσης με ψεκασμό και η διαδικασία τροποποιήθηκε από το προηγούμενο άρθρο. Το νερό απομακρύνθηκε γρήγορα από τον υγρό ατμό και στη συνέχεια ελήφθησαν ξηρά εκχυλίσματα πρώτων υλών από φυτά. Σε αυτό το βήμα, η προσθήκη μαλτοδεξτρίνης θεωρείται ένας κοινός φορέας για την ενίσχυση της διασποράς και την παράταση του χρόνου αποθήκευσης. Μέσω μιας σειράς παραγωγικών διαδικασιών, τα φυτικά φυτά στη συνέχεια συμπιέστηκαν σε κόκκους φόρμουλας με πρόσθετα. Αυτό το βήμα της προσθήκης εκδόχων δεν συμπεριλήφθηκε στο πείραμα. Σε γενικές γραμμές, η διαδικασία παραγωγής μας περιλαμβάνει εκχύλιση, συμπύκνωση και ξήρανση με ψεκασμό, όπως περιγράφεται στην Ενότητα 2.2, παράλληλα με μια διαδικασία παραγωγής κόκκων φόρμουλας. Για να παραχθούν αυτά τα ημικατεργασμένα προϊόντα πρέπει να ακολουθηθούν τα τρία παραπάνω βήματα. Η διαδικασία σχηματισμού WE περιλαμβάνει συμπύκνωση και ξήρανση με ψεκασμό, τα οποία προκαλούν εύκολα την απώλεια θερμοευαίσθητων συστατικών, αλλά τα HR λαμβάνονται μετά την εκχύλιση και ξήρανση των HM. Αναρωτιόμαστε αν είναι δυνατό να παραμείνουν ενεργά συστατικά στα HR. Σύμφωνα με τα αποτελέσματά μας, η περιεκτικότητα σε βερμπασκοσίδη μειώθηκε σημαντικά από HM σε WE και HR (και , αντίστοιχα). Η θερμική σταθερότητα του βερμπασκοσίδη διερευνάται παρακολουθώντας τις αλλαγές στην περιοχή κορυφής μέσω HPLC κατά τη διάρκεια της διαδικασίας θέρμανσης. Μετά από θέρμανση για 4 ώρες, απομένει 41,6 τοις εκατό βερμπασκοσίδης. Υποδεικνύει ότι η βερμπασκοσίδη είναι θερμοευαίσθητη [31]. Η ισοακτεοσίδη, η τουμπουλοσίδη Α και η εχινακοσίδη στα WEs παρέμειναν σταθερά μετά από πολύπλοκες διαδικασίες επεξεργασίας. Κατά τη διάρκεια της μακροχρόνιας διαδικασίας ξήρανσης, η συσσώρευση των PhGs παρουσίασε σημαντική μείωση, η οποία μπορεί να αποδοθεί στη θερμική αποικοδόμηση αυτών των θερμοευαίσθητων συστατικών [32]. Όσον αφορά τα άλλα συστατικά στόχου, τα HRs και WE δεν διέφεραν σημαντικά εκτός από τη βερμπασκοσίδη. Η κατανόηση αυτής της διαφοράς θα μας επιτρέψει να αναπτύξουμε καλύτερα πρότυπα ποιότητας για τα υπολείμματα βοτάνων στο μέλλον και να τα προωθήσουμε σε προϊόντα.

Πίνακας 1 Περιεχόμενα 11 παρτίδων C. tubulosa

Πίνακας 2 Σύγκριση περιεχομένων των κύριων στοιχείων (n = 11).

,

Εικόνα 4 Προσδιορισμός περιεχομένου πέντε στοιχείων από διαφορετικές μορφές (n = 11). , ns: μη σημαντικό.

3.1.4. Ανάλυση ομοιότητας δακτυλικών αποτυπωμάτων

Αξιολογήθηκαν οι ομοιότητες μεταξύ των τριών ομάδων C. tubulosa. Οι τιμές ομοιότητας φυτικού υλικού-υδατικού εκχυλίσματος, φυτικού υλικού-υπόλειμμα βοτάνου και εκχυλίσματος νερού-υπόλειμμα βοτάνων ήταν στις περιοχές 0.943–0.994, 0.847–{ {9}}.995 και 0.938–1.000, αντίστοιχα (Πίνακας 3).

Πίνακας 3 Ομοιότητες των HM-WE, HM-HR και WE-HR για 11 παρτίδες C. tubulosa.

3.2. Αποτελέσματα τεστ Αντιοξειδωτικής Δραστηριότητας

Οι αντιοξειδωτικές δραστηριότητες των διαφόρων μορφών C. tubulosa προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας τις αναλύσεις DPPH, , και ικανότητας σάρωσης, και τα σχετικά αποτελέσματα παρουσιάζονται στο Σχήμα 5. Στον Πίνακα S8, τα εύρη για τα αποτελέσματα της ανάλυσης DPPH και ικανότητας σάρωσης ήταν { {2}}.04–37,80, 0,98–843,90 και 0,32–27,65 mg/mL για τις τρεις διαφορετικές μορφές μεταξύ των 11 παρτίδων C. tubulosa. Σε τρεις δοκιμές αντιοξειδωτικής δραστηριότητας, τα HMs και WE εμφάνισαν στενή ανασταλτική δράση, ενώ τα HR έδειξαν την πιο αδύναμη αναστολή.

Τα ξηρανθέντα με ψεκασμό WE βρέθηκαν να παρουσιάζουν σημαντικές δράσεις ακόμη και σε χαμηλές συγκεντρώσεις. Μια προηγούμενη αναφορά έδειξε ότι ένα ξηρανθέν με ψεκασμό Vernonia amygdalina WE πέτυχε 5{3}} τοις εκατό αναστολή καθαρισμού στα 0,17 mg/mL [33]. Η εφαρμογή μεγάλων χρόνων εκχύλισης και υψηλών θερμοκρασιών είναι δίκοπο μαχαίρι. Από τη μία πλευρά, η αύξηση του χρόνου εκχύλισης και της θερμοκρασίας εισόδου ξήρανσης με ψεκασμό βελτιώνει την απόδοση και την απόδοση. Επιπλέον, τα εκχυλίσματα επιτυγχάνουν ισχυρή αντιοξειδωτική δράση και υψηλότερες συγκεντρώσεις βιολογικών συστατικών από αυτά τα φυτά [34]. Από την άλλη πλευρά, ο υπερβολικά ζεστός αέρας εισόδου υποβαθμίζει τις βιοδραστικές ενώσεις. Τέτοιες υψηλές θερμοκρασίες εισόδου αέρα οδήγησαν σε απώλειες της αντιοξειδωτικής δραστηριότητας του εκχυλίσματος Bidens pilosa και αποδόθηκαν σε μειώσεις των φαινολικών ενώσεων [35]. Τα παρόντα αποτελέσματα είναι συνεπή με την προαναφερθείσα έκθεση. Για παράδειγμα, το WE στο S6 εμφάνισε ασθενέστερες ριζικές ανασταλτικές ικανότητες από το HM και το HR. Επιπλέον, το HR στο S5 εμφάνισε ισχυρότερες ικανότητες σάρωσης ανιόντων DPPH και υπεροξειδίου από το HM και το WE. Η δομή των PhG αποτελείται από γλυκοσιδικούς δεσμούς και ακετυλομάδες που υδρολύονται εύκολα υπό ενζυματική δράση ή αποσυντίθενται σε υψηλές θερμοκρασίες. Αυτές οι αντιδράσεις μπορεί να ευθύνονται για μειώσεις σε ορισμένα κύρια συστατικά κατά τη διάρκεια παραγωγής μεγάλης κλίμακας. Ωστόσο, η υδρόλυση ή ο ισομερισμός ορισμένων συστατικών μπορεί να επιταχύνει τη σύνθεση άλλων συστατικών. Τέτοιοι μετασχηματισμοί είναι συνηθισμένοι κατά την επεξεργασία βοτάνων Cistanches [36-38]. Το ότι τα PhG είναι υδατοδιαλυτά σημαίνει ότι τα περισσότερα βιολογικά συστατικά μπορούν να χρησιμοποιηθούν μέσω της εξαγωγής νερού. Ο ισχυρισμός ότι η πλειονότητα των ενεργών συστατικών παραμένει στα WE έχει επιμείνει για δεκαετίες, επομένως φαίνεται λογικό να υποθέσουμε ότι τα υγρά υπολειμματικά υλικά μπορούν να απορριφθούν μετά την εκχύλιση. Ωστόσο, δεν είναι σωστό να θεωρούνται τα HR του C. tubulosa ως απόβλητο. Οι ερευνητές επισημαίνουν ότι τα PhGs είναι ασταθή και είναι ευαίσθητα σε ενζυμική ή υδρολυτική αποικοδόμηση [39]. Οι αντιδράσεις υδρόλυσης ή ισομερισμού που συμβάλλουν σε μειώσεις των βιολογικών συστατικών στα φυτοφάρμακα κατά τη διάρκεια της επεξεργασίας ενδέχεται να παρουσιάσουν ταυτόχρονα νέες ευκαιρίες για την εκμετάλλευση των HR. Με τη μετατροπή των παραδοσιακών μεθόδων εκχύλισης, τα φαρμακευτικά υπολείμματα μπορούν να αναπτυχθούν και να χρησιμοποιηθούν πιο αποτελεσματικά. Πραγματοποιήθηκε ενζυματική υδρόλυση για τη μετατροπή του υπολείμματος Panax ginseng σε μονοζάχαρα. Οι αποδόσεις σε πολυσακχαρίτες και τζινσενοσίδες αυξήθηκαν, όπως η ζάχαρη, το ηλεκτρικό οξύ, οι πολυσακχαρίτες ginseng και οι ginsenosides [40]. Τα υπολείμματα Sophora flavescens επανεκχυλίζονται με υπερηχητικά κύματα με οξικό αιθυλεστέρα [41]. Οι ενημερωμένες τεχνολογίες για τη χρήση υπολειμμάτων βοτάνων συνοψίζονται από τους Huang et al. [42].

Με βάση τα αποτελέσματα PLSR και BCA, οι πέντε κορυφαίες κορυφές διαφορετικών μορφών υποβλήθηκαν σε διαλογή χρησιμοποιώντας τις αναλύσεις DPPH, ανιόντος υπεροξειδίου και σάρωσης ριζών υδροξυλίου για τον προσδιορισμό των πιο σημαντικών κορυφών. Τα αποτελέσματα απεικονίζονται στο διάγραμμα Venn (Εικόνα 7). Τα Α2, Α6, Α8 και Α10 είναι οι κοινές κορυφές που μοιράζονται τα HM, WE και HR (Εικόνες 7(α) και 7(γ)) στις αναλύσεις σάρωσης ανιόντων υπεροξειδίου και ριζών υδροξυλίου, ενώ τα HM, WE και Μερίδιο HR χωρίς κορυφές ανάλυσης DPPH. Εν τω μεταξύ, τα μοντέλα BCA δείχνουν ότι τα A1, A2, A3 και A6 είναι οι κοινές κορυφές που μοιράζονται οι HM, WE και HR (Εικόνες 7(d)–7(f)). Συγκεκριμένα, οι επικαλύψεις στο διάγραμμα Venn υποδεικνύουν ότι το μοντέλο BCA φαίνεται πιο κατάλληλο από το μοντέλο PLSR, με το πρώτο να παρουσιάζει περισσότερη επανάληψη. Οι συντελεστές του μοντέλου BCA και οι τιμές IC50 αντιοξειδωτικής ικανότητας αναλύθηκαν μέσω RDA. Όπως το RDA που φαίνεται στο Σχήμα 8, τα Α1, Α3 και Α6 από τα HM και HR σχετίζονται θετικά με τους αντιοξειδωτικούς δείκτες, εκτός από το ότι το Α3 σχετίζεται αρνητικά με την ικανότητα σάρωσης ριζών υδροξυλίου. Τα Α1 και Α6 από το WE έχουν ισχυρούς συσχετισμούς με το DPPH και το ανιόν υπεροξειδίου. Οι κορυφές Α6 που σημειώνονται από τις διάφορες μορφές παρουσιάζουν την ισχυρότερη σύνδεση με τις ρίζες DPPH, ανιόν υπεροξειδίου και υδροξυλίου. Τα Α1 και Α3 παρουσιάζουν επίσης παρόμοια σύνδεση.

Εικόνα 7

Διαγράμματα Venn του μοντέλου PLSR και BCA: (α) Δοκιμασία DPPH. (β) προσδιορισμός καθαρισμού. (γ) η δοκιμασία σάρωσης αναλύθηκε με το μοντέλο PLSR. (δ) Δοκιμασία DPPH. (ε) προσδιορισμός καθαρισμού. (στ) ο προσδιορισμός σάρωσης αναλύθηκε με το μοντέλο BCA. Το επικαλυπτόμενο τμήμα ήταν το κοινό κομμάτι κορυφών από τα HM, WE και HR.

3.4. Ανάλυση με βάση τη φαρμακολογία δικτύου

3.4.1. Κατασκευή Δικτύου CT

Συνολικά 4359 στόχοι που σχετίζονται με την αντιοξειδωτική δράση ελήφθησαν από τη βάση δεδομένων GeneCards και τη βάση δεδομένων OMIM. Ταυτόχρονα, τα ενεργά στοιχεία ελέγχθηκαν από τη βάση δεδομένων TCMSP και τη βάση δεδομένων SwissTargetPrediction. Στη συνέχεια, συλλέχθηκαν 198 στόχοι και τυποποιήθηκαν μέσω της βάσης δεδομένων UniPort. Υπήρχαν 159 γονίδια στόχοι που μοιράζονταν ενεργά συστατικά και ασθένειες που σχετίζονται με αντιοξειδωτικά (βλ. Εικόνα S1). Το δίκτυο CT κατασκευάστηκε για να απεικονίσει τη συσχέτιση μεταξύ των ενώσεων και των βασικών γονιδιακών στόχων (Εικόνα 9).

Εικόνα 9 Δίκτυο CT. Το δίκτυο έδειξε τη συσχέτιση μεταξύ των ενεργών συστατικών και των βασικών γονιδιακών στόχων.

3.4.2. Κατασκευή Δικτύου PPI και Έλεγχος Βασικών Στόχων

Ο PPI οπτικοποιήθηκε χρησιμοποιώντας τη βάση δεδομένων STRING (Εικόνα 10). Το δίκτυο περιελάμβανε 159 κόμβους και 2528 άκρες. Σε ολόκληρο το δίκτυο αλληλεπίδρασης, τα συνδετικά στοιχεία ή οι κόμβοι με περισσότερα σημεία στόχου μπορεί να είναι το βασικό συστατικό ή το γονίδιο στόχος που παίζει αντιοξειδωτικό ρόλο στο C. tubulosa. Τα αποτελέσματα κατεβάστηκαν και εισήχθησαν στο Cytoscape για οπτικοποίηση. Όσο υψηλότερη είναι η τιμή DC, τόσο πιο σκούρο είναι το χρώμα και όσο μεγαλύτερη είναι η συνδυασμένη τιμή βαθμολογίας, τόσο πιο παχιά είναι η άκρη. Βρήκαμε ότι η RAC-άλφα σερίνη/θρεονινο-πρωτεϊνική κινάση (AKT1), η ιντερλουκίνη-6 (IL6), ο παράγοντας νέκρωσης όγκου (TNF) και ο αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας Α (VEGFA) βρίσκονταν κεντρικά (Εικόνα 11). υποδεικνύοντας ότι ήταν βασικοί στόχοι όταν τα ενεργά συστατικά ασκούσαν αντιοξειδωτική δράση. Αναφέρεται ότι η εχινακοσίδη μειώνει τη μιτοχονδριακή δυσλειτουργία μέσω της ρύθμισης των ενεργοποιημένων από μιτογόνο πρωτεϊνικών κινασών (MAPK) και της AKT και των φωσφορυλιωμένων μορφών τους [43]. Οι ερευνητές υπέθεσαν ότι η αντιδιαβητική δράση των γλυκοσιδών του C. tubulosa μπορεί να οφείλεται στην αντιοξειδωτική δράση των PhG με τη μείωση των προφλεγμονωδών κυτοκινών, όπως η IL{11}} και ο TNF- [44]. Επιπλέον, η εχινακοσίδη θα μπορούσε να βλάψει την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών μειώνοντας την έκφραση του VEGFA για την αναστολή της αγγειογένεσης [45], η οποία σχετίζεται στενά με το σύστημα ROS για το ROS που επάγει την έκφραση της σηματοδότησης VEGF [46].

Εικόνα 10 Δίκτυο PPI.

3.4.3. Ανάλυση εμπλουτισμού και δημιουργία δικτύου CTP

Οι πιθανές αντιοξειδωτικές ενώσεις δρούσαν σε πολυάριθμες βιολογικές λειτουργίες, συμπεριλαμβανομένων των BP, CC και MF. Στο Σχήμα 12(α), φαίνονται οι 10 κορυφαίες διαδρομές. Οι προβλεπόμενοι στόχοι από το δίκτυο PPI ανταποκρίθηκαν κυρίως σε πολλές βιολογικές διεργασίες, όπως οργανικές κυκλικές ενώσεις, ξενοβιοτικά ερεθίσματα, ανόργανες ουσίες, επίπεδα οξυγόνου και θετική ρύθμιση της κίνησης των κυτταρικών συστατικών. Η ανάλυση κυτταρικών συστατικών έδειξε ότι τα γονίδια σχετίζονταν κυρίως με τη μεμβρανική σχεδία, την εξωκυτταρική μήτρα, τον εκκριτικό αυλό κόκκων, το σύμπλεγμα ρυθμιστή μεταγραφής και το κορυφαίο τμήμα του κυττάρου. Αυτοί οι στόχοι εμπλέκονται επίσης σε πολλές μοριακές λειτουργίες, συμπεριλαμβανομένης της δέσμευσης μεταγραφικού παράγοντα δέσμευσης DNA, της δραστηριότητας ομοδιμερισμού πρωτεΐνης, της ειδικής δέσμευσης πρωτεϊνικής περιοχής και της δέσμευσης υποδοχέα κυτοκίνης.

Σχήμα 12 Ανάλυση εμπλουτισμού: (α) Ανάλυση εμπλουτισμού GO. (β) Ανάλυση εμπλουτισμού KEGG.

Για να διερευνηθούν οι βιολογικές λειτουργίες αυτών των μεγάλων κόμβων, διεξήχθη μια ανάλυση εμπλουτισμού μονοπατιού. Από τα αποτελέσματα εμπλουτισμού KEGG, σχεδιάστηκε ένα διάγραμμα φυσαλίδων για να δείξει τα κορυφαία 20 μονοπάτια. Όσο μεγαλύτερο ήταν το σημείο, τόσο περισσότερα γονίδια περιλαμβάνονταν στο μονοπάτι. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 12(β), τα βασικά μονοπάτια του C. tubulosa σχετίζονταν με μονοπάτια σε καρκίνο, λιπίδια και αθηροσκλήρωση, οδό σηματοδότησης AGE-RAGE σε διαβητικές επιπλοκές, χημική καρκινογένεση-ενεργοποίηση υποδοχέα και σηματοδοτική οδό MAPK. Διερευνήθηκαν οι επιδράσεις του C. tubulosa στην απόπτωση και την ομοιόσταση της κυτταρικής οξειδοαναγωγής. Τα δεδομένα υποδηλώνουν ότι το C. tubulosa μπορεί να είναι ένας πολλά υποσχόμενος υποψήφιος για θεραπεία κατά του καρκίνου του παχέος εντέρου [47]. Το εκχύλισμα C. deserticola βρίσκεται σε ηλικιωμένους [48].

Το Σχήμα 13 απεικονίζει τη συσχέτιση μεταξύ των μονοπατιών και των σχετικών στόχων τους και τη σχέση μεταξύ των επικαλυπτόμενων γονιδίων-στόχων και των βιολογικά ενεργών συστατικών του C. tubulosa. Δημιουργήθηκε μια συνολική άποψη του δικτύου CTP, η οποία αποτελούνταν από 12 συστατικά, 159 στόχους και 20 μονοπάτια. Οι περισσότεροι από τους στόχους κοινοποιήθηκαν από τις υποψήφιες δραστικές ενώσεις. Αυτά τα υποψήφια ενεργά συστατικά με υψηλούς βαθμούς διασύνδεσης ήταν υπεύθυνα για την υψηλή διασύνδεση του δικτύου CTP, ιδιαίτερα την κερσετίνη (βαθμός = 131). Η πλειοψηφία των στόχων, όπως τα AKT1, IL6, TNF και VEGFA, χαρτογραφήθηκαν σε μονοπάτια KEGG που σχετίζονται με μονοπάτια στον καρκίνο.

Εικόνα 13 Δίκτυο CTP.

4. Συμπεράσματα

Σε αυτή τη μελέτη, διερευνήσαμε κατά κύριο λόγο περίπλοκες καταστάσεις κατά την εξέταση των σχέσεων φάσματος-επίδρασης μεταξύ HM, WE και HR τουC. tubulosa. Τα δαχτυλικά αποτυπώματα HPLC καιαντιοξειδωτικές αναλύσειςχρησιμοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό των διαφορών μεταξύ Hs, WE και HR τουC. tubulosa. Σύμφωνα με τα δακτυλικά αποτυπώματα HPLC, 11 κορυφές ήταν κοινές μεταξύ των 11 παρτίδων Hs, WE και HR. Γενιποσιδικό οξύ,εχινακοσίδη, βερμπασκοσίδη, τουμπουλοσίδη Α, καιισοακτεοσίτηςεντοπίστηκαν μεταξύ αυτών των κορυφών. Τα περιεχόμενα αυτών των πέντε συστατικών προσδιορίστηκαν. Επιπλέον, οι αντιοξειδωτικές επιδράσεις τουC. tubulosaΤα Hs, WE και HR ποικίλλουν λόγω των αλλαγών στις χημικές συνθέσεις που προκαλούνται από πολύπλοκες συνθήκες κατασκευής. Βάσει διαφοροποιημένων στατιστικών μοντέλων, η μελέτη σχέσης φάσματος-επίδρασης έδειξε ότι η κορυφή Α6 μπορεί να είναι το πιο αποφασιστικό στοιχείο μεταξύ των τριών μορφώνC. tubulosa. Η μελέτη βασίστηκε στη φαρμακολογία δικτύου για να διερευνήσει πιθανούς μηχανισμούς τουC. tubulosaεπίαντιοξείδωσημέσω διαλογής ενώσεων, πρόβλεψης βασικών στόχων, κατασκευής δικτύων και διεξαγωγής ανάλυσης εμπλουτισμού. Τα αποτελέσματά μας παρέχουν μια θεωρητική βάση για την ανακύκλωση των υπολειμμάτων βοτάνων και τις δυνατότητες τουC. tubulosaστη θεραπεία τουασθένειες που σχετίζονται με αντιοξειδωτικά.